Rialaíonn an RNA M6 A Reader YTHDF2 Antitumor Cill NK agus Díolúine Frithvíreasach Cuid 4

Is eol go maith go bhfeidhmíonn YTHDF2 mar léitheoir m6A, a aithníonn agus a cheanglaíonn RNAnna ina bhfuil m6A agus a rialaíonn díghrádú tras-scríbhinní m6A.
Rinneamar ansin imdhíon-fhuascadh RNA (RIP)-seq ag baint úsáide as antashubstaint YTHDF2 chun na tras-scríbhinní sprice atá faoi cheangal ag YTHDF2 i gcealla NK a mhapáil. Saibhríodh suíomhanna ceangailteacha YTHDF2-sa réigiún seicheamh códaithe próitéine agus 39UTR (Fíor S5, E, agus F).

Tá an ceangal idir léitheoirí agus cuimhne an-dlúth. Tá an léitheoireacht ar cheann de na bealaí is fearr chun ár scileanna cuimhne a fheabhsú.

Nuair a léimid, téann ár n-inchinn trí phróiseas casta. De réir mar a dhéanaimid focail a scanadh agus iad a aistriú go brí, bíonn naisc néarónacha nua á gcruthú ag ár n-inchinn i gcónaí. Comhdhéanann na naisc néaróin seo ár gcóras cuimhne agus cabhraíonn siad linn faisnéis a stóráil sa chuimhne fhadtéarmach.

Ina theannta sin, spreagann an léitheoireacht ár samhlaíocht agus ár gcruthaitheacht, rud a chabhraíonn freisin lenár gcuimhne a fheabhsú. Nuair a thógaimid íomhánna agus radhairc inár n-intinn, bíonn ár n-inchinn ag gabháil go gníomhach, agus mar sin cruthaítear naisc néaróineacha níos mó, rud a neartaíonn ár gcumas cuimhne.

Ar deireadh, feabhsaíonn an léitheoireacht ár bhfócas agus ár gcomhchruinniú freisin. Nuair a dhírímid ar an léitheoireacht, bíonn ár n-inchinn i gcónaí ag feidhmiú arís agus arís eile, rud a fhágann go bhfuil ár gcuimhne níos láidre.

Tríd is tríd, is féidir le léitheoireacht tionchar an-dearfach a bheith aici ar ár gcuimhne. Trí nós na léitheoireachta a chothú agus ár n-inchinn a spreagadh tríd an léitheoireacht, is féidir linn ár scileanna cuimhne a fheabhsú agus taitneamh a bhaint as saol níos saibhre agus níos suimiúla. Is féidir a fheiceáil go gcaithfimid cuimhne a fheabhsú, agus is féidir le Cistanche deserticola feabhas mór a chur ar chuimhne toisc gur ábhar íocshláinte traidisiúnta Síneach é Cistanche deserticola a bhfuil go leor éifeachtaí uathúla aige, agus is é ceann acu cuimhne a fheabhsú. Tagann éifeachtúlacht Cistanche deserticola as na comhábhair ghníomhacha iolracha atá ann, lena n-áirítear aigéad tannic, polaisiúicrídí, gliocóisídí flavonoid, etc. Is féidir leis na comhábhair seo sláinte inchinne a chur chun cinn trí bhealaí éagsúla.

Cliceáil a fhios 10 bealaí chun cuimhne a fheabhsú

D’aithníomar 3,951 buaic cheangailteach féidearthaYTHDF2 ó 1,290 tras-scríbhinn, ar aimsíodh 426 (33%) díobh le saibhriú suntasach m6A. Léirigh anailís saibhrithe GO go raibh na tras-scríbhinní sprice 1,290 YTHDF2 saibhrithe in aistriúchán próitéin, ceangailteach RNA, andRNA splicing (Fíor S5 G).

D’aithníomar ansin na sprioc-scríbhinní ionchasacha ó thras-scríbhinní forluiteacha trí RNA-seq, m6A-seq, agus RIP-seqand fuarthas amach go raibh sraith de 29 tras-scríbhinn faoi cheangal ag YTHDF2 agus marcáilte le m6A (i gcealla Ythdf2WT agus Ythdf2ΔNK NK araon) curtha in iúl go difreálach idir cealla NK. ó lucha Ythdf2WTand Ythdf2ΔNK (Fíor 7 G). Ina measc, rinneadh 12 athscríbhinn a uasrialáil agus íosrialáil 17 athscríbhinn i gcealla NK ó lucha Ythdf2ΔNK i gcomparáid leo siúd ó Ythdf2WT NKcells (Fíor 7 G).

Bunaithe ar ár dtréithriú feidhmiúil deYTHDF2 agus an anailís GO ó na sonraí RNA-seq, bíonn tionchar ag easnamh Ythdf2 ar roinnt cille NK agus ar iomadú cille, b'fhéidir trí dhíghrádú mRNA ar sheicphointí timthriall cille nó rialtóirí diúltacha a éascú le linn rannán cille.

I measc na n-athscríbhinní upregulated 12, tuairiscíodh trí cinn acu chun rialáil dhiúltach a dhéanamh ar roinnt cealla nó iomadú, lena n-áirítear Mdm2 (murine dúbailte nóiméad 2 [MDM2]; Frum et al., 2009; Giono agus Manfredi, 2007; Giono et al., 2017), Tardbp ( Próitéin ceangailteach DNA TAR 43 [TDP43]; Ayala et al., 2008; Sanna et al., 2020), agus Crebzf (fachtóir trascríobh CREB/ATFBZIP; Hu et al., 2020; López-Mateo et al., 2012) , ag tabhairt le tuiscint gurb iad na spriocanna féideartha atá ag cealla YTHDF2in NK.

Is fiú a thabhairt faoi deara, go n-oireann na beanna m6A go maith le suíomhanna ceangailteacha YTHDF ag an 39UTR de Mdm2 agus Tardbp agus leis na 59UTR de ghéinte Crebzf, mar atá léirithe ag Amharcóir Géanómaíochta Comhtháthaithe (Fíor 7 H).

Dhearbhaigh RIP ag baint úsáide as antashubstaint m6A nó YTHDF2 followingqPCR go raibh Mdm2, Tardbp, agus Crebzf go deimhin m6Amethylated agus saibhrithe go príomha ag YTHDF2 i gcealla NK (Fíor 7, I agus J), ag tacú le sonraí m6A-seq agus RIP-seq, a léiríonn go bhfuil siad seo is spriocanna féideartha iad trí ghéinte de chealla inNK YTHDF2.

Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil YTHDF2 ag rialú abairt Mdm2, Tardbp, agus Crebzf trí chobhsaíocht mRNA a mhodhnú, thomhaiseamar díghrádú mRNA na dtrí sprioc trí chosc ar thrascríobh le actinomycin D i NKcells ó lucha Ythdf2ΔNK agus Ythdf2WT.

Léirigh na torthaí go raibh leathshaol níos faide ag Mdm2 agus Tardbp, ach ní Crebzf, cealla inNK ó lucha Ythdf2ΔNK i gcomparáid leo siúd ó lucha Ythdf2WT (Fíor 7, K-M), ag tabhairt le tuiscint go bhfuil Mdm2 agus Tardbpare rialaithe go díreach ag YTHDF2 i gcealla NK.

Ag baint úsáide as imdhíonoblotting, dheimhnigh muid go raibh leibhéil próitéin MDM2 agus TDP43 uasrialaithe i gcealla NK ó lucha Ythdf2ΔNK (Fíor S5 H). Chun a dheimhniú tuilleadh gur spriocanna feidhmiúla YTHDF2 iad an dá ghéinte seo, d'úsáideamar Mdm2- nó Tardbp -siRNA sonrach chun slonn an dá ghéin in vitro a bhualadh (Fíor S5, I, agus J).

Ansin chuireamar i gcomparáid le iomadú cille agus marthanacht cealla Ythdf2ΔNKNK le Mdm2 nó Tardbp i gcomparáid le Mdm2 nó Tardbp i láthair IL-15. Léirigh na torthaí go bhféadfadh an knockdown ofTardbp ar a laghad cuid de tarrthála an locht i iomadú cille agus marthanais cille i cealla NK ó lucha Ythdf2ΔNK (Fíor 7, N, agus O).

Mar sin féin, ní raibh aon éifeachtaí tarrthála ag baint le Mdm2 (Fíor S5, K, agus L). Léiríonn na torthaí seo go rialaíonn YTHDF2 iomadú agus roinnt cille NK ar a laghad go páirteach trí chosc a chur ar chobhsaíocht mRNA Tardbp.

Plé

Sa staidéar seo, tuairiscímid na róil ilghnéitheacha atá ag meitileachán m6A idirghabhála YTHDF in imdhíonacht cille NK. Fuaireamar amach go bhfuil YTHDF2, ceann de na léitheoirí is tábhachtaí maidir le modhnuithe m6A, ríthábhachtach chun hoiméastáis cille NK, aibithe, marthanacht IL-15-idirghabhála, agus frith-tumor agus frithvíreasacht a chothabháil.

D’aithníomar freisin lúb aiseolais dhearfach úrnua idir STAT5 agus YTHDF2, le sruth ó IL-15, a chuireann le feidhmeanna éifeachtóra agus marthanacht i gcealla luiche NK. Léiríonn Ourstudy na róil bhitheolaíocha atá ag meitiliú YTHDF2 nó m6A go ginearálta i ndíolús dúchasach cille NK. Líonann sé an bearna eolais maidir le conas a rialaíonn YTHDF2 an freagra imdhíonachta dúchasach do chlaochlú urchóideach agus ionfhabhtú víreasach.

Soláthraíonn ár dtorthaí treo nua chun leas a bhaint as frith-imdhíonacht chill NK agus ag an am céanna ár dtuiscint ar mhodhnuithe m6A a chur chun cinn maidir le díolúine dúchasach a mhúnlú. Rialaíonn próitéin léitheora m6A YTHDF2 cobhsaíocht na sprioc-mRNAs (Du et al., 2016; Wang et al., 2014). Thacaigh go leor staidéar le tionchar leathan YTHDF2 ar phróisis bhitheolaíocha éagsúla.

Cuireann YTHDF2 bac ar ghnáth-leathnú cille hematopoieticstem agus féin-athnuachan ach tá sé ag teastáil freisin le haghaidh cothabháil gascheall hematopoietic fadtéarmach (Li et al., 2018; Mapperley et al., 2021 Paris et al., 2019; Wang et al., 2018a). Le déanaí, tá baint ag an géine seo le hathlasadh a shrianadh le linn ionfhabhtú baictéarach (Wu et al., 2020a). Tá staidéar maith déanta ar theoiric agus ar mheicníocht YTHDF2 i bhforbairt siadaí.

Cuireann YTHDF2 forbairt gascheall leoicéime agus tionscnamh géarmhíochaine leoicéime myeloid chun cinn (Paris et al., 2019). Chomh maith le leoicéime, tá sé léirithe go gcuireann YTHDF2 forbairt tumaí soladacha chun cinn, lena n-áirítear ailse próstatach (Liet al., 2020), glioblastoma (Dixit et al., 2021), agus carcinoma hepatocellular (Chen et al., 2018; Hou et al., 2019; Zhang et al., 2020), trí dhíriú ar thras-scríbhinní ilchineálacha modhnaithe m6A, ar nós coscairí astumor LHPP agus NKX3-1 (Li et al., 2020), IGFBP3(Dixit et al., 2021), OCT4 ( Zhang et al., 2020), agus SOCS2 (Chenet al., 2018).

Cé go bhfuil ról spreagtha ag YTHDF2 maidir le dul chun cinn tumaí, léiríonn ár staidéar go bhfuil ról tairbheach ag YTHDF2 i bhfreagairt imdhíonachta cealla siadaí, go háirithe i gcealla NK, atá ina phríomhchuid den díolúine dúchasach i gcoinne ionfhabhtuithe víreasacha agus claochlú urchóideach.

Dá bhrí sin, ba cheart forbairt a dhéanamh sa todhchaí ar choscóirí YTHDF2 chun díriú ar chealla meall le haghaidh teiripe ailse a bheith cúramach toisc go bhféadfadh cosc ​​ar YTHDF2 dochar a dhéanamh ar fhreagairt antitumor óstaigh ó chealla NK. Ar an láimh eile, ba cheart go mbreithneodh leas a bhaint as gníomhaíocht antitumor YTHDF2 i gcealla NK nó i gcealla imdhíonachta eile a éifeacht a d'fhéadfadh a bheith ag gníomhú cealla ontumóra go díreach. Ba cheart go n-uasmhéadódh spriocdhíriú difreálach ar YTHDF2 i gcealla tumaí agus i gcealla imdhíonachta an ghníomhaíocht antitumor.

For more information:1950477648nn@gmail.com