Poitéinseal Néarchosanta Iseatiocianáití i Samhail in Vitro de Néar-ghlaine

Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Tiziana Latronico1 · Marilena Larocca2 · Serafna Milella1 · Anna Fasano1 · Rocco Rossano2 · Grazia Maria Liuzzi1

Faighte: 10 Iúil 2020 / Glactha: 25 Deireadh Fómhair 2020 / Arna fhoilsiú ar líne: 16 Samhain 2020

© An tÚdar(í) 2020

Feidhm púdar luibhe Cistanche: Tá an-mhaithéifeacht neuroprotective

Teibí

Tá sé léirithe ag iseatiocianáití (ITCanna), atá i láthair mar réamhtheachtaithe glucosinolate i glasraí cruciferousfrith-athlastach, frithocsaídeach, agus gníomhaíochtaí frithcharcanaigineach. Anseo, rinneamar comparáid idir éifeachtaí trí ITCanna éagsúla ar tháirgeadh ROS agus ar léiriú maitrís metalloproteinase (MMP)-2 agus -9, a léiríonn fachtóirí pataigineacha tábhachtacha de ghalair néareolaíocha éagsúla. Chuir LPS cultúir phríomha astrocytes francach i ngníomh agus déileáladh leo ag an am céanna le dáileoga éagsúla de Allyl isothiocyanate (AITC), 2-Phenethyl isothiocyanate (PEITC), agus 2-Sulforaphane (SFN). Léirigh na torthaí go raibh SFN agus PEITC in ann gníomhú in aghaidh táirgeadh ROS arna spreagadh ag H2O2. Ba léir ón anailís shíomagrafach ar shárshaothraithe cille gurbh iad PEITC agus SFN na coscairí is éifeachtaí ar MMP-9, ach níor chuir ach SFN bac suntasach ar ghníomhaíocht MMP-2. Léirigh anailís PCR gur chuir na ITCanna go léir a úsáideadh bac suntasach ar shloinneadh MMP-2 agus MMP-9 araon. Léirigh an t-imscrúdú ar an gcosán comharthaíochta kinase próitéine mitogen-gníomhachtaithe (MAPK) go modhnaíonn ITCanna trascríobh MMP trí ghníomhaíocht kinase próitéine eischeallach-rialaithe (ERK) a chosc. Tugann torthaí an staidéir seo le fios go bhféadfadh ITCanna a bheith ina n-oibreáin nútraiceodacha geallta chun galair néareolaíocha a bhaineann le rannpháirtíocht MMP a chosc agus a chóireáil chomhlántach.

EochairfhocailFrithocsaídeach · Frith-athlastach · Iseatiocyanáit · Miotailpróitéinasaí maitrís · Galair néar-athghiniúna

Réamhrá

Is freagairt chasta é an néar-athlasadh ar ghortú inchinne a bhaineann le heaspa imeachtaí bithcheimiceacha as a dtagann gníomhachtú cealla cónaithe an lárchórais néaróg (CNS). Cuireann gníomhachtú astrocytes astrocytes isteach ar a ról neuroprotective as a dtiocfaidh scaoileadh idirghabhálaithe athlastacha, mar speiceas ocsaigine imoibríoch (ROS), ocsaíd nítreach (NO), cytokines, chemokines, agus metalloproteinases maitrís.

(MMPanna).

Is teaghlach mór de endopeptidases neodrach, Zn2 móide -spleách iad MMPanna a bhfuil mar phríomhspriocanna acu comhpháirteanna na maitrís eischeallach (ECM) mar fibronectin, collagen, elastin, agus laminin (Latronico agus Liuzzi 2017).

Tiziana Latronico

tiziana.latronico@uniba.it

Roinn na Bitheolaíochtaí, na Biteicneolaíochtaí, agus na Bithchógaisíochta, Ollscoil Bari "Aldo Moro",

Bari, an Iodáil

Roinn na nEolaíochtaí, Ollscoil Basilicata, Potenza,

an Iodáil

Sa CNS, tá baint ag MMPanna le freagraí fiseolaíocha éagsúla, mar shampla morphogenesis, láimhdeachas, agus athmhúnlú ECM, embryogenesis, agus deisiú créachta; áfach, nuair a éalaíonn MMPanna ó mheicníochtaí rialála déantar dochar dóibh (Rosenberg 2009; Agrawal et al. 2008).

Maidir leis seo, is eol go bhfuil athruithe i léiriú agus gníomhaíocht MMP ina bpríomhimeachtaí pataigineacha i roinnt neamhoird néareolaíocha (Latronico and Liuzzi 2017; Mastroianni and Liuzzi 2007; Brkic et al. 2015). Tá sé tugtha le tuiscint ó fhianaise thurgnamhach go bhfuil baint ar leith ag geilitíní A (MMP-2) agus B (MMP-9) le néar-athlasadh i measc MMPanna, mar go bhféadfadh a n-uasrialáil sláine an bhacainn fola-inchinn (BBB) ​​a chur i mbaol. Is é an toradh a bhíonn air seo ná earcaíocht mhéadaithe agus insíothlú cealla fola imeallacha imdhíonacha isteach sa pharenchyma inchinne ag buanú an phróisis athlastach is cúis le caillteanas néarónach forásach agus feidhm néaránach lagaithe (Rivest 2009). Léirigh roinnt staidéir in vitro agus in vivo go bhfuil táirgeadh ROS ar cheann de na fachtóirí a bhaineann le huas-rialáil slonn MMP-9 i gcealla inchinn trí mheicníochtaí comharthaíochta kinase próitéine gníomhachtaithe mitogen (MAPK) (Hsieh agus). Yang 2013).

Bunaithe ar an bhfianaise seo, is léir go bhféadfadh íosrialáil fachtóirí néarthocsaineacha, as a dtagann laghdú ar fhreagraí néar-athlastacha, straitéis éifeachtach theiripeach a léiriú chun cosc ​​a chur ar theacht ar ghalair inchinne nó chun dul chun cinn galair inchinne a mhaolú.

Le blianta beaga anuas, tá an spéis bithleighis sa réimse néareolaíoch dírithe níos mó ar thaighde ar chomhdhúile nádúrtha atá in ann na próisis a bhaineann le freagraí néar-athlastacha a mhodhnú. Maidir leis seo, léirigh roinnt staidéir go bhfuil acmhainneacht neuroprotective ag comhdhúile fíteiceimiceacha, mar shampla polyphenols, isothiocyanates (ITCs), agus cinn eile, a eascraíonn as a gcumas bac a chur ar léiriú MMPanna agus chun gníomhú in aghaidh táirgeadh ROS (Dinkova-Kostova agus Kostov). 2012; Liuzzi et al. 2007, 2011).

Is meitibilítí iad isothiocianáití a tháirgtear ag roinnt plandaí a bhaineann leis na teaghlaigh Brassicaceae mar chóras cosanta in aghaidh ionsaí paitigin (Bones agus Rossiter 2006). Eascraíonn siad as díghrádú einsímeach glúcosinolates (GSL) ag an einsím myrosinase. Tá ITCanna i láthair i nglasraí cruciferous a chaitear go coitianta ar nós brocailí, sprouts na Bruiséile, cabáiste, tornapa, raidis capaill, kohlrabi, mustaird, raidis, biotáille uisce, agus cál. Tá a méideanna i mbia an-athraitheach agus ag brath ar phróiseáil agus ullmhú bia.

Le déanaí tá sé ag léiriú go bhfuil éagsúlacht d’éifeachtaí teiripeacha ag ITCanna, lena n-áirítear gníomh frithocsaídeach, antibacterial, anti-inflammatory, agus chemopreventive (Dufour et al. 2015; Marzocco et al. 2015).

Déantar gníomhaíocht chosanta ITCanna trí mhodhnú bealaí comharthaíochta éagsúla a bhaineann le díthocsainiú, athlasadh, apoptosis, agus rialáil timthriall cille. Tugann roinnt píosaí fianaise le fios go bhféadfaí airíonna frith-charcanaigineacha agus frith-athlastacha ITCanna a chur síos go príomha ar a gcumas chun cosán fachtóir núicléach erythroid 2-fachtóir 2 (Nrf2) a ghníomhachtú. Is fachtóir tras-íogair redox-íogair é Nrf2 a aistríonn i láthair oibreáin leictreafaileacha agus coinníollacha struis ocsaídiúcháin isteach sa núicléas áit a nascann sé na heilimintí freagartha frithocsaídeacha (ARE), rud a spreagann léiriú géinte cytoprotective a bhfuil baint acu le díthocsainiú agus le modhnú coinníollacha ocsaídiúcháin agus próisis athlastacha (Heiss et al 2001). Maidir leis seo, tuairiscíodh go bhfuil ITCanna in ann cumas frithocsaídeach na gceall daonna a mhéadú trí léiriú einsímí díthocsainiúcháin chéim II a spreagadh agus trí tháirgeadh GSH a uasghrádú (Wagner et al 2010). Ina theannta sin, tuairiscíodh go bhfuil traschaint idir Nrf2 agus an cosán fachtóir núicléach (NF)-κB as a dtagann modhnú athlasadh (Sturm agus Wagner 2017; Lee agus Johnson 2004). Maidir leis seo, léirigh samhlacha turgnamhacha éagsúla in vitro agus in vivo de neuroinflammation go bhfuil ITCs in ann trasghluaiseacht NF-κB a laghdú go suntasach agus an cosc ​​​​ar cítocíní pro-athlastacha agus MMPanna dá bharr (Lee et al. 2015; Subedi et al. 2017).

Sa pháipéar seo, rinneamar imscrúdú ar éifeacht trí ITC .i. Allyl isothiocyanate (AITC), 2-Phenethyl isothiocyanate (PEITC), agus 2-Sulforaphane (SFN) ar scaoileadh MMP{2}} agus -9 chomh maith le táirgeadh ROS ag astrocytes atá gníomhachtaithe LPS. Léirigh ár dtorthaí go bhfuil PEITC, SFN, agus AITC in ann cosc ​​a chur in vitro ar shloinneadh MMP-9 agus MMP-2 in astrocytes atá gníomhachtaithe LPS agus chun gníomhú in aghaidh táirgeadh ROS arna spreagadh ag H2O2. Ina theannta sin, léirigh muid go ndéanann ITCanna modhnú ar ró-eisiúint MMPanna le meicníochtaí a bhaineann le cosc ​​ar ghníomhaíocht kinase próitéine eischeallach-rialaithe (ERK). Tugann na torthaí seo le tuiscint go bhféadfadh tairbhí féideartha a bheith ag aiste bia saibhir i glasraí Cruciferous chun galair néareolaíocha a chosc agus a chóireáil go comhlántach.

abhair agus modhanna

Ceimiceáin agus imoibrithe

Chuir GIBCO (Paisley, Albain) meán modhnaithe Dulbecco (DMEM), séiream bó féatais (FBS), peinicillin, agus streiptimícin ar fáil. Geilitín, DNase 1, polai-L-lísín

(PLL), trypsin, lipopolysaccharide (LPS), Trypan Blue agus 3-(4,5-démheitilthiazol-2-il)-2.{5}}bróimíd défheiniltetrasóiliam (MTT) ), Allyl isothiocyanate (AITC) [trosc. 377,430, íonacht 95 faoin gcéad (HPLC)], 2-Iseatiocianáit Phenethyl (PEITC) [trosc. 253,731, íonacht 99 faoin gcéad )], 2-Sulforaphane (SFN) [trosc. S6317, íonacht Soláthraíodh níos mó ná nó cothrom le 95 faoin gcéad (HPLC)] ó Sigma (St. Louis, MO, SAM). Ceannaíodh diacetate 2′,7′-déchlorofluorescein (DCFH-DA) ó Calbiochem. Tháinig próitéiní caighdeánacha agus R-250 Coomassie Brilliant Blue ó Bio-Rad (Hercules, CA, USA). Ceannaíodh antasubstaintí próitéin aigéadach snáithíneach frith-glial (GFAP) (RRID: AB_2294571) ó Serotec (Oxford, UK). Ba ó Bhiteicneolaíocht Santa Cruz (Santa Cruz, CA) a tháinig antasubstaintí i gcoinne kinases próitéine eischeallacha-rialaithe (ERK) 1/2, agus ERK 1/2 fosfarylated (p-ERK 1/2). Tháinig seicní PVDF Hybond-P, Córas Anailíse Blotting an Iarthair chemiluminescence feabhsaithe (ECL), agus antashubstaint tánaisteach frith-luch-HRP ó GE

Eolaíochtaí Beatha Cúraim Sláinte (Little Chalfont, Buckinghamshire,

An Ríocht Aontaithe). Ba ó Sigma Genosys (Cambs, an Ríocht Aontaithe) iad péirí primer a bhaineann go sonrach le MMP-2, MMP-9, agus rRNA 18S. Ceannaíodh trealamh mion RNeasy agus trealamh QuantiTect Reverse Trascription ó Qiagen (Valencia, CA, SAM). Ceannaíodh imoibrithe Master Mix Econo- Taq PLUS GREEN 2X do PCR ó Lucigen Corporation (Middleton, WI, SAM).

Ráiteas eitice

Rinneadh na turgnaimh a bhain le hainmhithe de réir na moltaí i dTreoir NIH um Chúram agus Úsáid Ainmhithe Saotharlainne agus le faomhadh an Choiste Institiúideach um Chúram agus Úsáid Ainmhithe in Ollscoil Bari, an Iodáil (Uimhir Ceada: 23-98- A).

Ullmhú cultúir astrocyte

Ullmhaíodh astrocytes ó fhíocháin neocortical {{{0}}fhrancaigh Wistar lá d'aois (RRID: RGD_737960, Harlan Laboratories srl, Udine, an Iodáil). Chun astrocytes a ullmhú 6 lítear de 12 laonna, baineadh úsáid as gach ceann den dá ghnéas. Eotanaíodh na hainmhithe trí nochtadh do dhé-ocsaíd charbóin (CO2) agus maraíodh iad trí chaipitliú tapa. Rinneadh na fíocháin neocortical a dháileadh agus a úsáid chun cultúir phríomhchealla glial a íonú de réir an mhodha a thuairiscigh Latronico et al. (2018). Go hachomair, tar éis an deighilte, ídíodh brains francach na meninges agus na soithigh fola, mionfheoil meicniúil agus díleáite le 0.25 faoin gcéad trypsin i láthair 0.01 faoin gcéad DNase. Tar éis lártheifneoiriú agus measúnú ar inmharthanacht cille, plátáladh cealla i bhfleascáin PLL-brataithe (75 cm2) ag dlús 1.5 × 107 cealla / fleascán i DMEM, 10 faoin gcéad FBS, 100 IU mL −1 peinicillin, 100 µg mL −1 streiptimícin , agus a chothabháil ag 37 céim i 5 faoin gcéad CO2. Tar éis 7 lá, croith na heascáin chun oligodendrocytes agus microglia a bhaint. Rinneadh measúnú ar íonacht na n-astróicítí, a fhaightear trí trypsinization (0.25 faoin gcéad trypsin / 0.02 faoin gcéad EDTA), trí imdhíonadh do GFAP.

Cóireáil astrocytes atá gníomhachtaithe LPS le iseatiocianáit Allyl, iseatiocianáit Phenethyl nó 2-Sulforaphane

Spreagadh astrocytes comhlíonta, a síolaíodh i 96 pláta tobair, le 10 µg mL −1 de LPS agus déileáladh leo ag an am céanna le tiúchain éagsúla iseatiocianáit Allyl (AITC), 2-Iseatiocianáit Feineitile (PEITC) nó 2-Sulfórapán (SFN) i DMEM saor ó serum. B'ionann astrocytes in astrocytes DMEM saor ó serum agus LPS-gníomhachtaithe agus rialuithe diúltacha agus dearfacha, faoi seach. Ina theannta sin, ós rud é go ndearnadh réitigh stoic AITC (100 µM), PEITC (67 µM), agus SFN (56.4 µM) i DMSO, cuar dáileog-fhreagartha go DMSO, caolaithe i meán cultúir ag an tiúchan tuaslagóra céanna i láthair na huaire. na samplaí anailísithe, chun tocsaineacht cumaisc a mheas. Tar éis 20 h de gor ag 37 céim , 5 faoin gcéad CO2 bailíodh agus stóráladh na súiteoirí ag -20 céim go dtí go n-úsáidfí iad ach cuireadh na cealla faoi réir measúnacht MTT chun inmharthanacht na gceall a mheas.

Measúnacht inmharthanachta cille MTT

Braitheadh ​​cítotocsaineacht AITC, PEITC, agus SFN ar astrocytes trí úsáid a bhaint as an MTT [{{{0}}(4,5-démheitilthiazol-2-il)- 2,{{5 }}bróimíd tetrazolium défheinile] measúnacht. Tá an measúnú seo bunaithe ar laghdú MTT ag an díhidrogenase succinate mitochondrial i gcealla inmharthana, go dtí táirge formazan gorm dothuaslagtha ar féidir a thomhas go speictreafótaiméadrach. Go hachomair, tar éis cóireála ar feadh 20 h le AITC, PEITC nó SFN, baineadh an meán cultúir agus luchtaíodh cealla le 0.5 mg mL -1 de MTT. Tar éis gor ar feadh 2 h ag 37 céim, baineadh 5 faoin gcéad de mheán CO2 agus solubilíodh na criostail formazan i gcealla le 90 faoin gcéad eatánól. Tar éis plátaí a chroitheadh ​​ar feadh 15 nóiméad chun tuaslagthacht iomlán criostail a fháil, socraíodh cainníocht an táirge formazan trí ionsú optúil ag 560 nm le tonnfhad tagartha 690 nm. Léiríodh inmharthanacht cille mar chéatadán rialaithe (CTRL), arna léiriú ag cealla neamhchóireáilte, a socraíodh ag 100 faoin gcéad . I gcás gach cumaisc, fuarthas cuar dáileog-fhreagartha d'inmharthanacht na gceall.

Brath speiceas ocsaigin imoibríoch

Rinneadh speiceas ocsaigin imoibríoch (ROS) a bhrath trí astrocytes a luchtú le 10 μM de 2 ′, 7 ′-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) i DMEM saor ó fheanól dearg ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad. Ansin baineadh DCFH-DA as toibreacha agus déileáladh le cealla ar feadh 1 h le AITC (400 μM), PEITC (10 μM) nó SFN (25 μM) i DMEM saor ó fheanól dearg i láthair H2O2 ag an tiúchan deiridh de 100 μM . B'ionann cealla a cóireáladh le DCFH-DA nó le H2O2 agus na rialuithe diúltacha (CTRL) agus dearfacha (H2O2), faoi seach. Tar éis goir na cealla a riníodh le PBS agus lysed le

Tris–HCl 10 mM/NaCl 150 mM/Triton X-100 0.5 faoin gcéad , pH 7.5,

lártheifneoiriú ansin ag 10,000 × g, 4 céim ar feadh 10 nóiméad. Bailíodh súithrí agus rinneadh a n-anailís speictrifluairiméadach ag 525 nm faoi excitation ag 485 nm. Rinneadh na torthaí a normalú go dtí an t-ábhar próitéine iomlán agus léiríodh táirgeadh ROS mar chéatadán coibhneasta de dhéine photoluminescence (PL) i gcomparáid le rialú dearfach.

Gelatinases a bhrath

Braitheadh ​​​​anailís zymographic mar a thuairiscigh Latronico et al go raibh gníomhaíocht gelatinase i bhfosaitheoirí cille (SNanna). (2013). Go hachomair, rinneadh méid SN, a chomhfhreagraíonn do thart ar 10 µg de phróitéiní iomlána, a thuaslagadh le 30 µl de mhaolán sampla Laemmli gan -mercaptoethanol. Reáchtáladh samplaí i glóthach polyacrylamide 7.5 faoin gcéad copolymerized le 0.1 faoin gcéad (wt / v) geilitín. Tar éis an rith leictreafóiriteach, rinsíodh glóthacha faoi dhó le 2.5 faoin gcéad Triton X-100/10 mM CaCl2 i 50 mM Tris–HCl, pH 7.4 agus gor ar feadh 24 h ag 37 céim in 1 faoin gcéad Triton X-100 /50 mM Tris–HCl/10 mM CaCl2, pH 7.4. Dathaíodh na glóthacha le R{-250 iontach gorm Coomassie agus coinníodh iad i meatánól/aigéad aicéiteach/H2O (4:1:5 v/v). Rinneadh gníomhaíocht Gelatinase a léirshamhlú mar bhanda soiléir díleá ar chúlra gorm den fhoirmiú agus rinneadh é a chainníochtú trí anailís ríomhairithe ar íomhá densitometric ag baint úsáide as Bogearraí Image LabTM (Saotharlanna Bith-Rad). Geilitín

Cuireadh an ghníomhaíocht in iúl mar dhlús optúil (OD) × mm2, a léiríonn an limistéar scanadh faoi na cuair a chuireann gile agus leithead chrios lysis an tsubstráit san áireamh. Léiríodh sonraí ag baint úsáide as an gcothromóid seo a leanas: cosc ​​faoin gcéad=[100 - (sampla OD/rialú dearfach OD) × 100].

Imoibriú slabhrach trascríobh-polaiméiráis droim ar ais (RT-PCR)

Gníomhachtaíodh astrocytes, curtha i 6 phláta tobair, le LPS (10 µg mL−1) agus déileáladh leo ag an am céanna le ITCanna ag an tiúchan uasta neamh-tocsaineach. Tar éis 20 h de goir, baineadh RNA iomlán as astrocytes ag baint úsáide as trealamh mion Qiagen RNeasy de réir threoracha an mhonaróra. Rinneadh DNA comhlántach (cDNA) a shintéisiú ó 500 ng de RNA trí úsáid a bhaint as an trealamh QuantiTect Reverse Trascription de réir threoracha an déantóra. Baineadh úsáid as 25 ng de tháirgí tras-scríofa droim ar ais chun blúire 591 bp a aimpliú ag baint úsáide as primers sonracha (ciall 5′-GTC ACT CCG CTG CGC TTT TCT CG-3′; antisense 5′-GAC ACA TGG GGC ACC TTC TGA-3′) don seicheamh francach MMP-2 agus blúire 541 bp ag baint úsáide as priméirí sonracha (tuiscint 5′-CGG AGC ACG GGG ACG GGT ATC 3′; frithchiall 5′-AAG ACG AAG GGG AAG ACG CAC ATC 3′) don seicheamh francach MMP-9. Ag an am céanna, rinneadh aimpliú ar bhlúire 308 bp de francach 18S rRNA (ciall 5′-GCCTAGATA CCGCAGCTAGGA-3′; antisense 5′-TCATGGCCTCAG TTCCGAA-3′), géin thagartha inmheánach sách athróg. . Ní aithníonn na tacair primer, atá bailíochtaithe cheana féin i staidéir eile (Latronico et al. 2013; Liuzzi et al. 2004; Gramegna et al. 2011) go sonrach ach na géinte spéise mar a léirítear trí bhanda aonair de mhéid ionchais an PCR a aimpliú. táirgí. Rinneadh an t-aimpliú PCR ar feadh 25 thimthriall gach ceann acu comhdhéanta de dhínádúrú ag 94 céim, anáil ag 59 céim, agus síneadh ag 72 céim. Tar éis aimplithe, rinneadh anailís ar na táirgí i glóthacha agarose 1.5 faoin gcéad. Tar éis anailís densitometric glóthacha, normalaíodh aimpliú na ngéinte sprice go dtí abairt rRNA 18S, agus léiríodh torthaí mar chéatadán den chosc i gcomparáid le rialú dearfach mar a tuairiscíodh le haghaidh cainníochtú gelatinase.

Fosfarylation ERK 1/2 a bhrath trí anailís blotála thiar

Braitheadh ​​ERK 1/2 trí anailís imdhíon-blot mar a tuairiscíodh in Latronico et al. (2018). Go hachomair, confluent bunscoile

rinneadh réamhchóireáil ar astrocytes i {{0}}plátaí tobair, a rinneadh go ciúin i meán neamhshéiream ar feadh 24 h, ar feadh 1 uair le AITC (400 μM), PEITC (10 μM), nó SFN (25 μM) i DMEM gan dearg feanól. Tar éis spreagadh le haghaidh 2 h le 10 ug mL−1 de LPS, cuireadh cealla le 20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 2.5 mM Na-pirophosphate, 1 mM -glycerophosphate 1 faoin gcéad Triton X-100, 1 mM fuairíd feinilmethylsulfonyl, 20 ug/mL aprotinin, 1 mM EGTA, 1 mM Na-fuairíd, 1 mM Na3VO4, pH 7.5. Réitíodh seasca ug de phróitéiní iomlána gach sampla le 10 faoin gcéad SDS-leictreafóiréis glóthach polyacrylamide agus próitéiní a imdhíonblotted ansin ar seicní difluairíde polaivinileideine. Tar éis blocáil thar oíche ag 4 céim le 0.05 faoin gcéad Tween 20, bainne 1 faoin gcéad, albaimin serum bó 1 faoin gcéad i 150 mM NaCl, 20 mM Tris–HCl (pH 7.5), rinneadh seicní a iniúchadh thar oíche ag 4 chéim le frith-p monachlónach antashubstaint ERK 1/2 (1:500). Ansin nite na seicní trí huaire le 0.05 faoin gcéad Tween 20 i saline maolánach Tris, a ndearnadh iniúchadh orthu le hantasubstaint thánaisteach frith-luiche-horseradish peroxidase (1:20,000) ar feadh 2-h ag 24 céim agus braitheadh le cemiluminescence feabhsaithe. Chun méid iomlán ERK a mheas, baineadh na seicní amach agus goradh iad le hantasubstaint sonrach le haghaidh ERK 1/2 neamhfhosfarylated (1:500). Rinneadh déine an bhanna a chainníochtú trí scanadh densitometric blotaí agus normalaíodh leibhéil fosfarylation de ERK 1/2 go ERK 1/2 neamh-fosfarylated agus arna léiriú mar chéatadán i gcomparáid leis an rialú dearfach (astrocytes cóireáilte le LPS), de réir an an chothromóid seo a leanas:

faoin gcéad perK 1/2=(OSsample/rialú ODdearfach) × 100.

Anailís staitistiúil

Rinneadh anailís ar shonraí trí úsáid a bhaint as GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, SAM). Cuireadh na sonraí in iúl mar mheánluachanna ± SD. Rinneadh anailís staitistiúil trí úsáid a bhaint as anailís aontreo ar athraithis (ANOVA) agus triail post hoc Comparáid iolrach Dunnett ina dhiaidh sin.

Torthaí

Éifeacht comhdhúile iseatiocianáit ar inmharthanacht astrocyte

Rinneadh réamh-turgnaimh chun cíteatocsaineacht AITC, PEITC, nó SFN a mheas. Chuige seo, déileáladh le astrocytes íonaithe ar feadh 20 h leis na comhdhúile ITC ag tiúchan idir 5 agus 400 µM nó le DMSO caolaithe i meán saothraithe mar a thuairiscítear i Roinn an Mhodha. Mar a léirítear i bhFíor 1, ní raibh an DMSO tocsaineach ar chor ar bith do thiúchan úsáidte a mheaitseálann na réitigh ITC a tástáladh. I measc na ITCanna a ndearnadh imscrúdú orthu, tá AITC

Fíor 1 Inmharthanacht cille astrocytes cóireáilte le comhdhúile iseatiocianáit. Cóireáladh astrocytes príomhúla comhlua ar feadh 20 h le Allyl isothiocyanate (AITC), 2-Phenethyl isothiocyanate (PEITC), nó 2-Sulforaphane (SFN) ag na tiúchain shonraithe a bhí faoi réir an mheasúnaithe MTT ag an am sin. Ina theannta sin, ós rud é go bhfuil sé sa stoc tuaslagtha i réitigh i sulfoxide dimethyl (DMSO), cuar dáileog-fhreagairt a DMSO, caolaithe i cultúr mheán ag an tiúchan tuaslagóir céanna ( faoin gcéad ) i láthair sna samplaí ITC ritheadh ​​i ngach turgnamh a fháil. meastachán iontaofa ar thocsaineacht TFC. Bhí an rialú (CTRL) ionadaíoch

boladh ó astrocytes neamhchóireáilte i DMEM saor ó serum. Léiríonn na graif na cuair dáileog-fhreagartha d’inmharthanacht na gceall, arna shloinneadh mar chéatadán de mharthanas cille i gcomparáid le rialú. Roghnaíodh dáileoga na gcomhdhúile a chinn inmharthanacht cille os cionn 60 faoin gcéad mar na tiúchain uasta neamh-tocsaineacha. Is ionann luachanna agus meán ± SD de n=3 turgnaimh a dhéantar ar dhaonraí éagsúla cille. Taispeánann micreagraif torthaí ionadaíocha de mhoirfeolaíocht na gceall a breathnaíodh faoi mhicreascóp codarsnachta pas (méadú 50X) tar éis cóireála leis na comhdhúile éagsúla

bhí an níos lú tocsaineach do astrocytes. Go háirithe, ní raibh AITC tocsaineach do chealla suas le 400 µM agus bhí PEITC agus SFN tocsaineach ag tiúchan os cionn 10 agus 25 µM, faoi seach. Dhearbhaigh an breathnóireacht micreascópach torthaí an mheasúnaithe MTT a léirigh gur laghdaíodh líon na n-astróicítí ag na tiúchana tocsaineacha de PEITC agus SFN agus gur léirigh na cinn a d'fhan athruithe citotocsaineacha ina gcíteaplasma.

Éifeacht chosanta comhdhúile ITC ar tháirgeadh ROS i astrocytes cóireáilte le sárocsaíd hidrigine

Chun éifeacht chosanta ITCanna i dtreo strus ocsaídiúcháin a mheas, rinneadh réamhchóireáil ar astrocytes le PEITC, AITC, agus SFN ag an tiúchan uasta neamh-tocsaineach a spreag ansin le H2O2. Rinne DCFH-DA measúnú ar tháirgeadh ROS incheallach, arna spreagadh ag H2O2. Mar a thaispeántar i bhFíor 2, an nochtadh do H2O2 feabhsaithe comhartha fluaraiseacha i

Fíor 2 Táirgeadh speiceas ocsaigin imoibríoch (ROS) in astrocytes cóireáilte le TFC. Rinneadh láithreacht ROS a mheas trí athruithe ar an gcomhartha fluaraiseachta de 2′,7′-dichlorofluorescein (DCFA) a thomhas mar a tuairiscíodh sa rannán Ábhair agus Modhanna. Rinneadh réamhchóireáil ar astrocytes, a síolaíodh i 6 phláta tobair, ar feadh 30 nóiméad le DCFA ansin cóireáilte ar feadh 1 h le 10 μM PEITC, 400 μM AITC, nó 25 μM SFN i láthair H2O2 ag tiúchan deiridh 100 μM . Léirigh astrocytes cóireáilte le DCFA amháin (CTRL) nó le 100 μM H2O2 rialú diúltach agus dearfach, faoi seach. Rinneadh an comhartha fluaraiseacha a braitheadh ​​i lysates cille a thomhas le fluaraiméadar ag 525 nm faoi excitation ag 485 nm. Léiríodh táirgeadh ROS mar chéatadán ( faoin gcéad ) de dhéine fótaluminescence (PL) i gcomparáid le rialú dearfach. Is éard atá i meánluachanna ± SD de n=3 turgnamh a dhéantar ar dhaonraí éagsúla cealla. Léirítear laghdú suntasach go staitistiúil i gcomparáid le H2O2 le réiltíní (ANOVA aontreo agus tástáil post hoc Dunnet ina dhiaidh; *p <>

astrocytes i gcomparáid le rialú (CTRL). Mar is léir ón laghdú ar dhéine fluaraiseachta DCF, chuir réamhchóireáil astrocytes le comhdhúile ITC frithghníomhú ar ghiniúint ROS arna spreagadh ag H2O2. I measc na ITCanna a ndearnadh tástáil orthu, ní raibh ach PEITC agus SFN in ann táirgeadh ROS a laghdú go suntasach thart ar 20 agus 24 faoin gcéad , faoi seach, i gcomparáid le rialú dearfach (H2O2).

Cuireann na comhdhúile isothiocyanate bac ar leibhéil MMP-2 agus MMP-9 in astrocytes atá gníomhachtaithe LPS

Rinneadh éifeacht chomhdhúile ITC ar leibhéil MMP-2 agus MMP-9 a mheas ar astrocytes a ghníomhaítear le LPS, arb eol go gcothaíonn siad slonn geilitínéas (Gottschall agus Deb 1996), agus a chóireáiltear go comhuaineach le AITC, PEITC, nó SFN sa raon tiúchana nach raibh tocsaineach do chealla. Mar a léirítear i bhFíor 3a, bhí dhá bhanda soiléire díleá de 72 agus 92 kDa i láthair ar an nglóthach a fhreagraíonn, faoi seach, do MMP-2 agus MMP-9. Mhéadaigh gníomhachtú astrocytes le LPS leibhéil MMP-2 agus d'eascair sintéis MMP-9. Chinn cóireáil le AITC (Fíor 3b), PEITC (Fíor 3c), nó SFN (Fíor 3d) dáileog-spleách

laghdú ar leibhéil MMP-9, a bhí éagsúil ag brath ar an gcomhdhúil a úsáideadh. Go háirithe, i measc an ITC a úsáideadh, ba é SFN an ceann ab éifeachtaí maidir le cosc ​​a chur ar MMP-9 ós rud é gur chinn sé coiscthe 70 faoin gcéad ag an dáileog de 10 μM agus cosc ​​​​100 faoin gcéad ag an dáileog de 25 μM. Ina theannta sin, ní raibh ach SFN ag an tiúchan uasta neamhthocsaineach in ann MMP-2 a chosc go suntasach (Fíor 2d).

Cuireann na comhdhúile isothiocyanate bac ar léiriú géine MMP-2 agus MMP-9 in astrocytes gníomhachtaithe LPS

Chun a chinneadh an raibh na comhdhúile ITC a ndearnadh staidéar orthu in ann slonn MMP-2 agus MMP-9 a chosc, rinneadh RT-PCR ar astrocytes gníomhachtaithe LPS cóireáilte leis an tiúchan uasta neamh-tocsaineach de ITCanna. Mar a léirítear sna glóthacha ionadaíocha i bhFíor 4a bhí cóireáil astrocytes atá gníomhachtaithe LPS leis na ITCanna aonair in ann gníomhú in aghaidh slonn méadaithe mRNA MMP-2 agus MMP-9. Mar a léirítear i bhFíor 4b, léirigh anailís chainníochtúil na dtorthaí, go ndearna na comhdhúile ITC, ag an uastiúchan neamhthocsaineach, cosc ​​a bhí suntasach go staitistiúil ar slonn MMP-2 agus MMP{-9 i gcomparáid. le rialú dearfach (LPS). Go háirithe, cuireann PEITC agus SFN an céatadán céanna cosc ​​ar MMP-2 (85 faoin gcéad ) agus MMP-9 (100 faoin gcéad ) ach ní raibh AITC chomh héifeachtach ná PEITC agus SFN maidir le MMP a chosc{{17} slonn } (65 faoin gcéad ) agus MMP -9 (90 faoin gcéad ).

Tá baint ag ERK 1/2 le cosc ​​TFC ar léiriú MMP

Toisc gurb é ERK 1/2 an príomh-chonair aistrithe comharthaíochta a bhaineann le rialáil slonn MMP-2 agus MMP-9 in astrocytes atá gníomhachtaithe LPS (Lee et al. 2003), is é an éifeacht atá ag comhdhúile ITC ar an Rinneadh tástáil ar ghníomhachtú kinases próitéine extracellular-rialaithe (ERK) 1/2.

Mar a léirítear i bhFíor 5 chothaigh LPS méadú suntasach go staitistiúil ar leibhéil ERK 1/2 (p-ERK) fosfarlaithe a cuireadh i gcoinne na réamhchóireála le comhdhúile ITC.

Plé

Creidtear go forleathan gurb éard atá sna príomhstraitéisí cosanta i gcoinne go leor galair go príomha fachtóirí riosca a sheachaint agus stíl mhaireachtála ceart a ghlacadh. Tá go leor fianaise eolaíoch ann a thacaíonn leis an hipitéis go bhfuil roinnt meitibilítí nádúrtha, a tháirgtear go hiondúil ag cineálacha éagsúla torthaí agus glasraí in ann feiniméin phaiteolaíocha amhail ailse, galair néareolaíocha agus galair ilfhachtóiriúla eile a mhodhnú. Sa chás seo, chuir na hiseagianáití (ITCanna) an-suim i bhfianaise a gcuid antifungal, antibacterial,

Fíor 3 Éifeacht chomhdhúile iseatiocianáit ar leibhéil MMP-2 agus MMP-9 in astrocytes atá gníomhachtaithe LPS. I a tuairiscítear glóthach zymographic ionadaíoch den anailís ar shaothráin chultúir ó astrocytes a ghníomhaítear le LPS (10 ug mL-1) agus a chóireáiltear ag an am céanna ar feadh 20 h le AITC, PEITC, nó SFN ag na tiúchana a luaitear (μM). Fuarthas rialuithe diúltacha agus dearfacha ó astrocytes neamhspreagtha agus neamhchóireáilte i meán saor ó serum (CTRL) agus LPS-

cealla gníomhachtaithe (LPS), faoi seach. Léiríonn histeagraim b–d torthaí (meán ± SD) de n {{0}} turgnaimh a rinneadh ar dhaonraí éagsúla cille, arna shloinneadh mar chéatadán den chosc MMP i gcomparáid le LPS, arna ríomh tar éis scanadh dlúsiméadrachta agus anailís ríomhairithe glóthacha . Léirítear laghdú suntasach go staitistiúil i gcomparáid le LPS le réiltíní (ANOVA aontreo agus tástáil post hoc Dunnet ina dhiaidh; *p < 0.05,="" **p=""><>

airíonna bitheolaíocha anticarcinogenic, antimutagenic, antioxidant, agus frith-athlastach (Dufour et al. 2015; Marzocco et al. 2015; Vig et al., 2009; Talalay agus Fahey 2001). Is ó dhíghrádú einsímeach glúcosinolates (GSL) ar meitibilítí tánaisteacha iad atá i láthair i 15 theaghlach luibheolaíochta den ord Capparales agus atá an-fhlúirseach sa teaghlach Brassicaceae (Fahey et al. 2001). Déantar GSL a hidrolyzed ag myrosinase (-thioglucoside glucohydrolase e; EC 3.2.3.147) i réimse comhpháirteanna mar ITCanna, nítrítí, tiogianáití, epithionitrililí, SFGate, glúcós, agus oxazolidine (Li agus Kushad 2005). Cé go ndearnadh staidéar forleathan ar ITCanna sa réimse ceimiteiripeach (Grundemann agus Huber 2018), is beag imscrúduithe a rinneadh ar a n-acmhainneacht theiripeach i galair néareolaíocha in ainneoin gur léiríodh cumas SFN agus AITC an BBB a thrasnú agus carnadh isteach sa parenchyma inchinn. (Clarke et al. 2011; Jazwa et al. 2011; Zhang 2010). Sa pháipéar seo, rinneamar comparáid idir éifeachtaí trí ITC,

i láthair i roinnt glasraí cruciferous a chaitear go coitianta, ar tháirgeadh speiceas ocsaigin imoibríoch (ROS) agus léiriú maitrís metalloproteinase (MMP) i múnla in vitro de néar-athlasadh arna léiriú ag astrocytes gníomhachtaithe le lipopolysaccharide (LPS) nó cóireáilte le H2O2. Tá ról ríthábhachtach ag astrocytes, an cineál cille glial is flúirseach den CNS, i gcothabháil hoiméastáis na hinchinne agus is sainmharcanna iad de ghalair néareolaíocha éagsúla (Cekanaviciute and Buckwalter 2016; Colombo and Farina 2016). Meastar gur rialtóirí ríthábhachtacha iad ar an bhfreagairt imdhíonachta dúchasach agus d'fhéadfadh a bhfreagairt ar insiltí díobhálacha, mar strus ocsaídiúcháin, frithghníomhartha athlastacha agus damáiste fíocháin a dhéanamh níos measa nó deisiú fíocháin a chur chun cinn. Tá sé ar eolas go maith go dtáirgeann astrocytes gníomhachtaithe fachtóirí néarthocsaineacha cosúil le MMPanna a bhfuil ról lárnach acu maidir le néar-athlasadh agus caillteanas néareolaíoch forásach i ngalar néareolaíoch a chur chun cinn (Hsieh and Yang 2013). Dá bhrí sin, modhnú an

Fíor 4 Éifeacht chomhdhúile ITC ar slonn MMP-2 agus MMP-9 in astrocytes atá gníomhachtaithe LPS. Gníomhachtaíodh astrocytes, curtha i 6 phláta tobair, le LPS (10 µg mL-1) agus ag an am céanna cóireáilte ar feadh 20 h le AITC (400 μM), PEITC (10 μM) nó SFN (25 μM), ansin faoi réir. RT-PCR. Tuairiscítear glóthacha agaróis ionadaíocha de shlonn MMP-2 agus MMP{-9 in (a). Léiríonn histeagraim i (b) torthaí (meán ± SD) de n=3 turgnamh a rinneadh ar chill dhifriúla

d'fhéadfadh imeachtaí a tharlaíonn tar éis gníomhachtú astrocytes an freagra athlastach agus damáiste néarónach a mhaolú.

Léirigh torthaí an staidéir seo go raibh AITC níos lú tocsaineach i measc na ITCanna a ndearnadh staidéar orthu toisc nach raibh aon laghdú ar inmharthanacht na gceall ag gach tiúchan a úsáideadh mar thoradh air. I gcodarsnacht leis sin, cosúil leis an méid atá tugtha faoi deara ag údair eile ar línte cille glial éagsúla, léirigh PEITC agus SFN tocsaineacht cheallacha ag tiúchana níos mó ná 10 agus 25 µM, faoi seach (Lee et al. 2015; Eren et al. 2018; Su et al. .2015).

Sa litríocht eolaíoch atá ann faoi láthair, tá go leor sonraí conspóideacha ar na meicníochtaí móilíneacha is bun le héifeachtaí ITCanna ar inmharthanacht cille. Maidir leis seo, mhol an chuid is mó de na staidéir go gcuirfeadh ITCanna bac ar apoptosis a chothaíonn fás ceallacha, gabháil le timthriall cille, giniúint ROS i gcealla ailse ach nach bhfuil i ngnáthchealla (Ffaria et al. 2{015; Qin et al. al. 2018; Sestili agus Fimognari 2015). Fuaireamar amach go bhfuil ról cosantach ag SFN agus PEITC, ach ní AITC, i gcoinne strus ocsaídiúcháin in astrocytes, go deimhin ag na tiúchana neamhthocsaineacha uasta a bhí siad in ann gníomhú in aghaidh táirgeadh ROS de bharr nochtadh do H2O2. Tá an CNS go háirithe i mbaol strus ocsaídiúcháin mar gheall ar a thomhaltas ard ocsaigine, córais frithocsaídeacha laga, agus ard-ábhar bithmhóilíní a d'fhéadfadh a bheith ocsaídiúcháin. Creidtear go bhfuil baint ag giniúint ROS agus damáiste ocsaídiúcháin le pataigineas neamhoird néareolaíocha cosúil le galar Alzheimer (AD), galar Parkinson (PD), Scléaróis Taobhánach Amyotrophic (ALS), agus Scléaróis Iolrach (MS) (Lee et al. 2015). Mar sin, cé gur chuir SFN agus PEITC i ngleic le táirgeadh ROS go pointe measartha inár dturgnaimh in vitro, d’fhéadfaimis a cheapadh go bhféadfadh laghdú níos suntasaí a bheith mar thoradh ar riarachán fadtréimhseach de ITCanna in vivo, rud a d’fhéadfadh, le himeacht ama, teacht ar bhrí. do dhaonraí arna shloinneadh mar chéatadán de chosc MMP i gcomparáid leis an rialú dearfach (LPS), arna ríomh tar éis scanadh densitometry agus anailís ríomhairithe glóthacha. Léirítear laghdú suntasach go staitistiúil ar shlonn MMP-2 agus MMP-9 i gcomparáid le LPS le réiltíní (ANOVA aontreo agus tástáil post hoc Dunnet ina dhiaidh; *p <>

galair inchinne a chosc agus a mhodhnú. Feidhmíonn ROS mar mhóilín comharthaíochta ríthábhachtach chun easghluaiseachta na freagartha athlastacha isteach sa CNS a spreagadh. Maidir leis seo, tá sé ar eolas go maith go rialaíonn ROS léiriú go leor géinte a bhfuil baint acu le neuroinflammation trí ghníomhachtú fachtóirí trascríobh pro-athlastach cosúil le fachtóir núicléach-κB (NF-κB) (Lee et al. 2015; Chiurchiù et al. 2016; Martorana et al. 2019). Sa chás seo, tá ról tábhachtach ag MMPanna a n-uasrialaíonn ROS a gcuid cainte trí ghníomhachtú NF-κB (Yan agus Boyd 2007).

Ós rud é go gcuireann dírialáil MMP le pataigineas go leor galair néar-athlastacha agus néara-mheathlúcháin, is straitéis thábhachtach theiripeach é a gcosc. Ar an gcúis seo, tá suim mhéadaitheach dírithe le deich mbliana anuas ar chumas drugaí agus comhdhúile nádúrtha bac a chur ar MMPanna. Tá fianaise ag go leor staidéir in vitro go bhfuil baint ag gníomh frith-athlastach agus frithocsaídeach roinnt drugaí agus comhdhúile bithghníomhacha atá i glasraí agus in orgánaigh mhuirí lena gcumas bac a chur ar léiriú MMPanna (Latronico et al. 2016, 2018; Di Bari et al. .2015). Sa staidéar seo, léirigh muid go raibh SFN agus PEITC i measc na ITCanna a tástáladh, na cinn is éifeachtaí chun leibhéil agus slonn MMP-2 agus MMP-9 a chosc in astrocytes atá gníomhachtaithe LPS. Tuairiscíodh i staidéir in vivo agus in vitro eile go bhfuil cosc ​​ar MMPanna ag ITCanna. Go háirithe, tá Li et al. (2013) go bhfuil SFN in ann damáiste BBB a mhaolú trí shloinneadh MMP a chosc i múnla in vivo d’einceifilíteas uath-imdhíonachta turgnamhach. Thuairiscigh údair eile go raibh SFN in ann slonn MMP-9 a mhaolú tar éis gortú chorda an dromlaigh i lucha (Mao et al. 2010a). Ina theannta sin, léirigh staidéir in vitro go gcuireann ITCanna faoi chois imirce cille agus

Fíor 5 Tá baint ag kinase 1/2 seach-cheallacha arna rialáil le comhartha (ERK 1/2) le cosc ​​a chur ar shloinneadh MMP ag comhdhúile ITC. Réamhchóireáil scannáin uathragrafacha ionadaíocha d’anailís blotting an iarthair ar lysates ó astrocytes ar feadh 1 h le AITC (400 μM), PEITC (10 μM) nó SFN (25 μM), agus ansin gníomhachtaithe ar feadh 2 h le LPS (10 ug mL{{ 13}}). Is ionann cealla neamhchóireáilte agus neamhspreagtha agus rialú diúltach (CTRL). Léiríonn an histeagram i (b) leibhéil pERK1/2 bhí baint ag ionradh i gcealla glioma C6 le cosc ​​ar slonn MMP-9 arna idirghabháil ag NF-κB (Lee et al. 2015).

Níl na meicníochtaí móilíneacha trína gcuireann ITCanna bac ar MMPanna soiléir, agus níl aon staidéir ann a dhéanann imscrúdú ar airíonna frithocsaídeacha agus frith-athlastacha ITCanna ar chultúir astrocyte príomhúla. Tacaíonn roinnt staidéir leis an hipitéis go bhfuil éifeacht coisctheach ITCanna mar thoradh ar a gcumas bac a chur ar NF-κB trí chonair chomharthaíochta Nrf2. Maidir leis seo, léirigh staidéar in vivo go raibh lucha cnagála Nrf2 níos so-ghabhálaí do fhreagra athlastach NF-κB-idirghabhála de chorda an dromlaigh agus do léiriú méadaithe géinte NFκB-spleách lena n-áirítear MMP-9 (Mao et al. 2010b). ). Cé go bhféadfadh bealaí NF-κB agus Nrf2 idirghníomhú léirigh muid go dtarlaíonn rialáil NF-κB freisin trí mhodhnú meicníochtaí móilíneacha atá neamhspleách ag Nrf2. Go deimhin, fuaireamar amach gur chuir AITC, PEITC, agus SFN bac ar ghníomhachtú ERK1/2 a bhfuil ról lárnach aige i easghluaiseachta imeachtaí aistrithe comhartha a rialaíonn trascríobh géine MMP ar deireadh thiar.

Mar sin féin, chuir an fhianaise thurgnamhach gur chuir SFN ag an uastiúchan neamhthocsaineach bac iomlán ar slonn agus ar leibhéil MMP-9 ach chuir AITC agus PEITC bac ar slonn MMP{-9 uasta ach níor thit sé ach MMP{{3} } leibhéil go dtí thart ar 50 faoin gcéad , d'fhéadfadh sé a thabharfadh le tuiscint go modhnódh na comhdhúile seo trascríobh MMP-9 le meicníochtaí éagsúla gníomhaíochta. Maidir leis seo, tá sé tuairiscithe go gcuireann SFN, chomh maith leis an gcosc ar ghníomhachtú LPS-spreagtha NF-κB, isteach ar cheangal LPS le gabhdóir TLR4 (Koo et al 2013). D'fhéadfadh éifeacht coisctheach SFN ar TLR4 cosc ​​a chur ar ghníomhachtú astrocytes trí LPS agus d'fhéadfadh sé seo a bheith mar thoradh ar chosc in aghaidh an tsrutha ar slonn MMP agus easpa táirgeachta MMP-9 dá bharr.

a fhaightear tar éis scanadh dlúthmhéadrach ar scannáin uathragrafacha agus normalú go ERK 1/2 neamhfhosfarylated. Léiríonn sonraí ciallaíonn ± SD de n=3 turgnaimh a dhéantar ar dhaonraí éagsúla cille. Is ionann réiltíní agus luachanna atá difriúil go staitistiúil ó rialú dearfach (astrocytes gníomhachtaithe LPS), a socraíodh ag 100 faoin gcéad (ANOVA aontreo agus tástáil post hoc Comparáid iolrach Dunnett ina dhiaidh; *p <>

Conclúidí

Go hachomair, tugann ár sonraí le fios go laghdaíonn cóireáil astrocytes le ITCanna foirmiú ROS agus cuireann sé cosc ​​ar scaoileadh MMP-2 agus MMP-9 ag soláthar léargais nua ar airíonna frith-ocsaídeacha agus frith-athlastacha ITCanna ar glial. cealla. Tugann na torthaí seo le tuiscint go bhféadfadh ITCanna a bheith ina ngníomhairí nutraceutical geallta le haghaidh idirghabhálacha néar-chothaithe a fhorbairt, bunaithe ar úsáid bianna sláintiúla, chun galair néareolaíocha a chosc agus a chóireáil go comhlántach.

Maoiniú Maoiniú rochtana oscailte curtha ar fáil ag Università Degli Studi di Bari Aldo Moro laistigh den Chomhaontú CRUI-CARE.

Comhlíonadh caighdeáin eiticiúla

Coinbhleacht leasa Ní dhearbhaíonn na húdair aon choinbhleacht leasa.

Rochtain Oscailte Tá an t-alt seo ceadúnaithe faoi Creative Commons Attribution 4.0 Cheadúnas Idirnáisiúnta, a cheadaíonn úsáid, comhroinnt, oiriúnú, dáileadh agus atáirgeadh in aon mheán nó formáid, chomh fada agus a thugann tú creidmheas cuí don bhunúdar (s) agus an fhoinse, nasc chuig ceadúnas Creative Commons a sholáthar, agus cuir in iúl an ndearnadh athruithe. Tá na híomhánna nó ábhar tríú páirtí eile san alt seo san áireamh i gceadúnas Creative Commons an ailt mura gcuirtear a mhalairt in iúl i líne chreidmheasa don ábhar. Mura bhfuil ábhar san áireamh i gceadúnas Creative Commons an ailt agus mura bhfuil d’úsáid bheartaithe ceadaithe ag rialachán reachtúil nó má sháraíonn tú an úsáid cheadaithe, beidh ort cead a fháil go díreach ó shealbhóir an chóipchirt. Chun féachaint ar chóip den cheadúnas seo, tabhair cuairt ar http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.