Éifeachtaí Frithocsaídeacha de Phenylthanoids Ó Cistanche Deserticola

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Quanbo Xiong/ Shigetoshi Kadota," Tadato Tani,6 agus Tsuneo Namba"

Léirigh an sliocht aicéatón-H2O (9:1) ó ghas Cistanche deserticola gníomhaíocht láidir scavening radacach saor in aisce. Rinneadh naoi gcomhdhúil mhóra feinileatánóideach a leithlisiú ón sliocht seo. D'aithin NMR iad mar acteoside, isoacteoside, l^acetylacteoside, tubuloside B, echinacoside, tubuloside A, syringalide A 3z-a-rhamno-pyranoside, cistanoside A agus cistanoside F. Léirigh na comhdhúile seo go léir gníomhaíochtaí scavening radacach saor in aisce níos láidre ná a -tócaifearól ar 1,1 -défheinéi{-2-picricrihiodrazy 1 (DPPH) radacach agus xanthine/xanthine oxidase (XOD) radacach anian sárocsaíd (Oj). I measc na naoi gcomhdhúil, léirigh isoacteoside agus tubuloside B, a bhfuil a taise caffeoyl ag suíomh an ghlúcóis, tionchar coisctheach ar XOD. Rinneamar staidéar breise ar éifeachtaí na bhfeinileatánóid seo ar an sárocsaídiú lipid i miocróim ae francach a tharlódh ó mhodhanna einsímeacha agus neamh-einsímeacha. Mar a bheifí ag súil leis, léirigh gach ceann acu coisc shuntasach ar aigéad ascorbic/Fe2 móide agus ADP/NADPH/Fe3 móide sárocsaídiú lipid spreagtha i miocróim ae francach, a bhí níos cumhachtaí ná a-tócaifearóil nó aigéad caiféin. Fuarthas amach go raibh an éifeacht frithocsaídeach potentiated ag méadú ar líon na ngrúpaí hiodrocsaile feanólacha sa mhóilín.

Eochairfhocail: Cistanche deserticola; feinileatánóid;frithocsaídeach; radacach DPPH (1 ,1 -défheinile-2-phicricrihidrazile); superoxide anion radacach; sárocsaídiú lipid

gas Cistanche deserticola

Tá gas Cistanche spp. (Cistanche Herba, teaghlach Orobanchaceae) is tonic i leigheas traidisiúnta Síneach a úsáidtear le haghaidh easnamh na duáin arb iad is sainairíonna impotence, ceint fuar sna loins agus glúine, sterility baineann, agus constipation mar gheall ar dryness an bputóg sa seanta.Tá roinnt comhábhar, lena n-áirítear feinil-eitamóidigh (ar a dtugtar uaireanta feinilpropanoids),2) idoids3* agus polaisiúicrídí4) scoite amach ó na plandaí seo. Thuairiscigh Sato et al5} gur léirigh roinnt feinileatánóid ón amhdhruga seo éifeacht chosanta i gcoinne laghduithe ar iompraíochtaí gnéis agus foghlama araon i lucha faoi strus a chrochadh. Is iad feinileatánóidí príomh-chomhábhair na bplandaí seo agus meastar go gcuireann siad le gníomhartha éagsúla an druga seo.6).

Déantar feinileatánóidigh a dháileadh go forleathan i ríocht na bplandaí agus fuarthas amach go bhfuil gníomhaíocht fhrith-anocsa ag cuid acu,7) frith-neoplasma,8) cosc ​​​​einsímí,9* frith-athlasadh,10) aininifritis,1 n frith-mhiocróbach, agus inmunomodulation.12) Tuairiscíodh freisin staidéir ar ghníomhaíocht frithocsaídeach roinnt feinileatánóid ó Pedicularis,13 -15) ach níor aimsíodh aon tuarascáil a dhéileálann le gníomhaíocht frithocsaídeach feinileatánóid ó speicis Cistanche.

Aithnítear go maith go bhfuil baint ríthábhachtach ag fréamhacha saor in aisce le pataiginí éagsúla cosúil le hailse, neamhord cardashoithíoch, airtríteas, athlasadh, chomh maith leis na próisis meathlúcháin a bhaineann le haosú.16™18) Inár scagadh le haghaidh oibreáin frith-aosaithe ó acmhainní nádúrtha , fuaireamar amach gur léirigh gach sliocht CHC13 (C), EtOac (E), aicéatón (A), aicéatón-H2O (9:1) (AH), agus uisce (H) de ghas Cistanche deserticola DPPH cumhachtach. gníomhaíocht scavenging radacach (Fíor 1), ina measc, bhí an ceann is láidre ar taispeáint ag aicéatón-H?.(9:1) sliocht (AH). Bhí cóimheas ard feinileatánóid sa sliocht aicéatón-H2O (9:1), ar dócha go raibh siad ina gcomhábhair ghníomhacha d’éifeachtaí scavening radacach saor in aisce. D'aonraíomar na feinileatánóidí móra ón sliocht seo agus rinneamar staidéar ar na héifeachtaí frithocsaídeacha trína scavening ar radacach DPPH agus radacach anion superoxide ginte xanthine / XOD, agus a gcosc ar aigéad ascorbic / Fe2 plus agus ADP / NADPH / Fe3 móide sárocsaídiú lipid spreagtha in ae francach. micreasóim.

Cistanche deserticola

ABHAIR AGUS MODHANNA

Imoibrithe Polaimíd C-200 (75一150/zm) agus glóthach shilice (Wakogel C-200, 75-150^m) púdar le haghaidh crómatagrafaíocht colún, DPPH (1,1 -défheinile{{ 8}}picrylhydrazil), xanthine, XOD (xanthine oxidase), NBT (tetrazolium nitroblue), ADP, g-NADPH, aigéad caffeic agus a-tócaifearóil ó Wako Pure Chemicals, Osaka, an tSeapáin. Ba as Tóiceo Kasei, Tóiceo, an tSeapáin é malonaldehyde bis (démheitilacetal). Tháinig BSA (albaimin serum buaibheach) agus allopurinol ó sigma, St. Louis, SAM Bhí ceimiceáin eile de ghrád anailíseach.

Ionstraimí Rinneadh ionsúchán UV a thomhas ar aIompraíodh speictreafótaiméadar taifeadta Shimadzu UV-2200, speictream NMR ar chóras JEOL GX-400 nó JEOL JNM-LA 400WB FT NMR.

Ábhair Plandaí Amhdhruga tráchtála (a tháirgtear i Nei Monggol, a ceannaíodh i Margadh Amhdhrugaí Bozhou, Anhui Cúige, An tSín, 1995; na fir shonraigh dearbhán, TMPW Uimh. 15479 i dtaisce i Músaem Materia Medica, Ionad Taighde Anailíseach um Eitnimíochaine, Taighde Aithníodh Institiúid Wakan-Yaku, Ollscoil Leighis agus Cógaisíochta Toyama) mar Eascraíonn Cistanche deserticola YC Ma trí chomparáid a dhéanamh idir a charachtair moirfeolaíocha agus anatamaíocha le sampla barántúil a chuir an tOllamh Dawen Shi, Roinn Pharmacognosy, Shanghai Medical Uni versity, an tSín ar fáil.

Eastóscadh agus Leithlisiú Baineadh an amhdhruga púdraithe (5.87 kg) i ndiaidh a chéile le CHC13 (12, 9 1x2) agus EtOAc (9 1 x 3) ag teocht an tseomra agus aife le haicéatón (9 1 x 3), aicéatón-玦0 (9:1,91x3) agus H2O (7.5 1x4) chun sleachta CHC13 (C) (28.7g), EtOac (E) ( 13.4g), aicéatón (A) (95g), aicéatón- H2O (9:1) (AH) (175 g) agus H2O (H) (2.51kg), faoi seach. Cuireadh cuid de lOOg den sliocht aicéatón-H2O (9:1) faoi réir colún polaimíde C-200 (4{{50}}0 g) agus eluaite le H2O ({{41) }}) agus ansin MeOH (5 1). Luchtaíodh an eluent MeOH (20 g) do cholún glóthach shilice (600 g) agus eluent le CHCl3-MeOH-H2O (8: 3:0.3) (5 1) chun 10 codáin a thabhairt. Cuireadh gach codán faoi réir colún Sephadex LH{-20 agus iad eluted le cóimheasa éagsúla MeOH-H2O (0一50 faoin gcéad ); naoi feinileatánóid mhóra 1 (607 mg), 2 (286 mg), 3 (43 mg), 4 (187 mg), 5 (1.1 g), 6 (100 mg), 7 (208 mg), 8 (168 mg) , fuarthas 9 (75 mg).

Ainmhithe Fireann Std: Baineadh úsáid as francaigh Wistar (8 seachtaine d'aois, 230一 250 g). Ceannaíodh na hainmhithe ó Ionad Ainmhithe Saotharlainne Shizuoka agus tugadh cow millíní saotharlainne (Clea Japan) dóibh agus tugadh uisce ad libitum dóibh.

Ullmhú ae Rat Microsomal Fionraí Ullmhaíodh codán microsomal ae francach ag an modh Kiso et al.l9) ach gan pretreatment de phenobarbital. Tar éis d'ainmhithe troscadh ar feadh 24 u, bhí na haenna cumhraithe le tuaslagán oighir-fhuar 0.9 faoin gcéad NaCl in situ, ansin gearrtha i bpíosaí tanaí agus homogenized i dtuaslagán fuar KC1 1.15 faoin gcéad (1.{{9}). } ml/g de mheáchan ae fliuch). Caolaíodh an homogenate ceithre huaire le tuaslagán 1.15 faoin gcéad KC1 agus lártheifneoiríodh ag 8000 g ar feadh 20 nóiméad ag 4 chéim. Bailíodh an codán comhshóite ansin agus rinneadh é a ultralártheifneoiriú ag 105000 g ar feadh 60 nóiméad. Athchóiríodh an millíní a fuarthas sa toirt chéanna de thuaslagán 1.15 faoin gcéad KC1. Socraíodh ábhar próitéine trí mhodh Lowry et albaimin a úsáid mar chaighdeán.

Ullmhúchán Samplach Tuaslagadh na samplaí tástáladh in uisce nó eatánól agus caolaíodh iad le huisce go tiúchan éagsúla. Bhí na tiúchain deiridh eatánóil faoi bhun 1 faoin gcéad i ngach córas measúnaithe ach amháin measúnacht scavening radacach DPPH. Níor léirigh eatánól ag tiúchan deiridh faoi bhun 1 faoin gcéad aon éifeacht ar na córais mheasúnachta seo.

Éifeacht Scavening Radacach DPPH Bhí an éifeacht scabhála ag freagairt do dhéine an mhúchadh radacach DPPH, mar a thuairiscigh Hatano et al.21) Cuireadh cúig chéad /A de 60 卩m DPPH in EtOH le 500 /zl de thuaslagán samplach agus ceadaíodh freagairt dó. 30 min ag teocht an tseomra, ansin tomhaiseadh an dlús optúil ag 520 nm. Le haghaidh bán, úsáideadh EtOH in ionad tuaslagán DPPH, agus le haghaidh rialaithe, úsáideadh H2O in ionad réiteach samplach. Ríomhadh na luachanna IC50 ó línte cúlchéimnithe áit ar léirigh an abscissa an tiúchan den chomhdhúil tástáladh agus an meánlaghdú faoin gcéad de radacach DPPH ó cheithre thástáil ar leith.

Éifeachtaí ar Ghiniúint Radacach Ainiúin Superocsaíd Rinneadh táirgeadh na n-ainian sárocsaíde sa chóras xanthine/XOD trí úsáid a bhaint as leathmhéid an mhodha Imanari et al.22) Meascán comhdhéanta de 900/zl de 0.05m Na2CO3 (pH 10.2), 50 /il an ceann de 3mM xanthine, 3mM EDTA, 1.5mg/ml BSA, 0.75 mM NBT agus cuireadh sampla tástálaithe le 50 de 0.1 mg/ml XOD chun tús a chur leis an imoibriú. Tar éis goir ar feadh 30 nóiméad, cuireadh stop leis an imoibriú le 50 /il de 6 mM CuCl2 agus tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 560 nm. Ullmhaíodh an réiteach rialaithe ar an mbealach céanna, ach baineadh úsáid as 50 /il de H2O in ionad an tuaslagáin samplach. I dtuaslagán bán, úsáideadh 50 /il de H2O in ionad tuaslagán XOD. Ríomhadh luachanna IC50 ó línte cúlchéimnithe áit ar léirigh an abscissa an tiúchan loga den chomhdhúil tástáladh agus an meánchoisc faoin gcéad ar laghdú NBT de cheithre cinn i dtástálacha cleithiúnacha.

Éifeachtaí Coiscthe ar Ghníomhaíocht XOD Rinneadh éifeachtaí coiscthe ar ghníomhaíocht XOD a mheas trí mhodh Hatano et al.* le roinnt modhnuithe. Meascán ar a bhfuil 600/11 de mhaolán (0.1 m tuaslagán fosfáite, pH 7.5), 50 以 de thuaslagán XOD (0.068 U/ml i maolán) agus Réamh-ghlais 50 卩 1 de thuaslagán samplach ar feadh 10 nóiméad ag 25 céim . Ansin, cuireadh 300 pl de thuaslagán xanthine (0.1 mM i maolán) leis an meascán, agus gor an réiteach mar thoradh air ar feadh 30 nóiméad ag 25 céim. Cuireadh deireadh leis an imoibriú einsímeach trí 1 n HC1 (100 /zl) a chur leis, agus tomhaiseadh ionsúcht an mheascáin imoibriúcháin ag 295 nm. Ríomhadh an tiúchan d’aigéad úrach a foirmíodh sa mheascán ón ionsúchán, tar éis ionsúchán an tuaslagáin bháin a ullmhaíodh mar a thuairiscítear thuas a dhealú, ach amháin gur cuireadh 50 /zl den mhaolán in ionad tuaslagán XOD. Léiríodh na héifeachtaí coisctheacha ar XOD ag an gcosc faoin gcéad ( faoin gcéad ) ar fhoirmiú aigéad uric vs an ceann atá i gceannas, inar úsáideadh uisce in ionad tuaslagán samplach. Baineadh úsáid as an inhibitor XOD-aitheanta go maith, allopurinol, mar rialú dearfach.

Éifeachtaí Coiscthe ar Sárocsaídiú Lipide i Micreasóim ae Ratach Rinneadh sárocsaídiú lipid i miocróim ae francach a tharlódh go neamh-einsímeach ag ascorbic/Fe2 plus agus einsím a tharlódh go matamaiticiúil ag ADP/NADPH/Fe3 móide trí mhodh Kiso et al.l9) le roinnt modhnuithe. .

a) Aigéad Ascorbach/Fe2 móide Sárocsaídiú Liachta Ionduchtaithe i Micreosóim ae Rata: Bhí an meascán imoibriúcháin comhdhéanta de 390/11 de 100mM KC1/45 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50pl den chodán micreasómach i 1.15 faoin gcéad KC1 (20mg próitéin/ml) agus 50 以 de thuaslagán samplach. Tar éis 10/11 d'aigéad ascorbic 10 mM/0.5mM FeSO4 a chur leis agus ansin é a ghoradh ag 37 céim ar feadh 20 nóiméad, fuaraíodh an meascán imoibrithe san oighear chun an t-imoibriú a stopadh. Rinneadh an sárocsaídiú lipid a thomhas leis an modh aigéad thiobarbituric24) agus cuireadh in iúl é mar tháirgeadh MDA (malondialdehyde). Sin

b) ADP/NADPH/Fe3 móide Sárocsaídiú Lipide Ionduchtaithe i Micreosóim ae Rata: Bhí 290贝 de 100mM KC1/45him Tris-HCl (pH 8.0), 50/il de fhionraí micreasómach i 1.15 faoin gcéad KC1 sa mheascán imoibriúcháin (20mg próitéin/ml) agus 50 以 sampla in uisce. Cuireadh caoga de ADP 20 mM úrullmhaithe, 50//I de 1 mM NADPH agus 10 de 2mM FeCl3 leis agus ansin goraíodh iad ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad. Rinneadh sárocsaídiú lipid a thomhas agus ríomhadh IC50 tríd an modh thuas.

sochair cistanche: chosaint ar an ae

TORTHAÍ

Cinneadh Struchtúir Trí chomparáid dhíreach a dhéanamh idir a gcuid sonraí ^H-NMR agus 13C-NMR leis an litríocht,2* aithníodh na naoi bhfeinileatánóid mar 2,-aicéitilacteoside (1), cistanoside A (2), tubuloside A (3), echinacoside ( 4), acteoside (5), syringalide A 3'-a-rhamnopyranoside (6), tubuloside B (7), isoacteoside (8) agus cistanoside F (9), faoi seach (Fíor 2). Mar sin féin, le haghaidh acteoside, comhdhúil ionadaíoch feinilatánóidí, sanntar na comharthaí 13C-NMR de C-3 agus C-4 i modh aglycone, C-3, C-4 Bhí mearbhall ar , C-5 agus C-6 i dtuarascálacha roimhe seo25). Trí mhodh 2D-NMR ar nós HMBC agus HMQC, sannadh againn gan athbhrí na sonraí 13C-NMR de acteoside mar aglycone moiety Cl: 131.49, C-2: 117.14, C-3: 146.07, C{ {41}}: 144.62, C-5: 116.34, C-6: 121.29, Ca: 72.33, C # 36.54; caffeoyl moiety Cl: 127.63, C-2: 115.26, C-3: 146.79, C-4: 149.78, C-5: 116.55, C-6: 123.24 , Ca: 168.33, Cg: 114.68, Cy: 148.04; moiety glúcóis C-l': 104.16, C-2': 75.97, C-3': 81.66, C4: 70.39, C-5': 76.16, C{-6' : 62.35; agus rhamnose moiety: Cl: 102.99, C-2: 72.22, C-3: 72.05, C-4: 73.79, C-5: 70.58, C-6 : 18.46.

Rinneadh staidéar ar na caidrimh struchtúr-gníomhaíochta do na naoi bhfeinileatánóid ag a ngníomhaíochtaí radacacha DPPH radacach agus xanthine / XOD a ghintear le superoxide anion radacach, aigéad ascorbic / Fe2 plus agus ADP / NADPH / Fe3 móide sárocsaídiú lipid spreagtha i miocróim ae francach. Baineadh úsáid as aigéad caiféin agus a-tócaifearóil, ar scavengers radacach saor in aisce iad agus frithocsaídeoirí mar shubstaintí rialaithe dearfacha.

DPPH Radical Scavenging Activity All of the nine phenylethanoids showed stronger DPPH radical scav-enging activity than either a-tocopherol or caffeic acid, except that cistanoside A (2), syringalide A 3'-a-rhamno- pyranoside (6) and cistanoside F (9) showed weaker activity than caffeic acid (Fig. 3). The activity order was tubuloside B ⑺(IC50 = 2.99 ^m) > echinacoside ⑷ (IC50 = 3.29 fiM)M 2z-acetylacteoside ⑴(IC50 = 3.30 /im) M tubuloside A (3) (IC50 = 3.34/im) acteoside (5) (IC50 = 3.36 〃m)> isoacteoside (8) (IC50 = 3.49 ^m) >caffeic acid (IC50 = 4.79 /2M)> cistanoside A (2) (IC5O = 4.87 /im)>syringalide A S'-a-rhamnopyranoside (6) (IC5O=5.52 /zm) > cistanoside F (9) (IC50=6.29 /im) > a-tócaifearól (IC{{10 }}.2//m). Tubuloside B ⑺,echinacoside (4), 2/-acetylacetoside (1), tubuloside A (3), acteoside (5) agus isoacteoside (8) (IC5O=2.99一3.49 /im), gach ceann acu a bhfuil ceithre ghrúpa hiodrocsaile feanólacha sa mhóilín léirigh an ghníomhaíocht níos láidre mar an gcéanna ná cistanoside A (2) a 3-OH de aglycone taise a bhí meitilated. Syringalide Léirigh gníomhaíocht réasúnta lag 3z-a-rhamnopyranoside (6) nach bhfuil ach grúpa OH amháin san aglycone moiety. Léirigh Cistanoside F (9), nach bhfuil ach dhá ghrúpa hiodrocsaile lonnaithe ag moiety caffeoyl ach nach bhfuil aon aglycone feinileatánól, an ghníomhaíocht is laige.

Effects on Superoxide Anion Radical Generation All the tested compounds exhibited a stronger inhibitory activity than a-tocopherol but weaker than caffeic acid on the generation of superoxide anion radical (Fig. 4). The activity order was caffeic acid (IC5()= 1.82jUM)>2'- acetylacteoside (1) (IC50 = 2.25 /im) tubuloside B ⑺ (IC50 = 2.34jUM) >echinacoside (4) (IC50 = 2.74juM)^ isoacteoside (8) (IC50 = 2.88 /zm) acteoside (5) (IC50 = 2.89 f/M) >cistanoside F (9) (IC5o = 3.13 rm) tubuloside A (3) (IC50 = 3.17 jUM)syringalide A 3'-a-rhamnopyrano- side (6) (IC50 = 3.20^m)>cistanoside A (2) (IC5O=3.69 jUm) > a-tócaifearóil (IC50 > 10 〃m).

Éifeachtaí Coisctheacha ar Ghníomhaíocht XOD Ní raibh ach isoacteoside (8) agus tubuloside B (7), a bhfuil a bogacht caffeoyl ag 6z-suíomh an ghlúcóis, éifeachtaí coisctheacha ar ghníomhaíocht XOD, agus feinileatánóidí eile, a bhfuil moiety caffeoyl ag an ^- suíomh an ghlúcóis, níor léirigh aon éifeachtaí ag na tiúchana tástáladh (25一200 m) (Tábla 1). scoite amach naoi gcomhdhúil mhóra feinileatánóideach ón sliocht seo agus shocraigh NMR a struchtúir. córas mar tubuloside B (7)M2'-aicéitilacteoside (1) iso-aicéiteoside (8) echinacoside (4) tubuloside A (3) M taobh acteo (5) > steallairíd A 3'-a-rhamnopyranoside (6) > cistanoside A (2) > cistanoside F (9); i gcóras ADP/NADPH/Fe3 móide mar tubuloside B (7)2,-aicéitilacteoside (^^iso acteoside (8) acteoside (5) > tubuloside A (3) > taobh echinaco (4)) > syringalide A 3z-a-rhamnopyranoside (6) > cistanoside A (2) > cistanoside F (9) Bhí an dá ordú seo cosúil leis na cinn sna tástálacha scavening radacach saor in aisce thuas, go háirithe i dtástáil scavenging radacach DPPH. Mar sin féin, tá líon na ngrúpaí hiodrocsaile feanólacha sa mhóilín Bhí an ról is tábhachtaí sa chosc ar sárocsaídiú lipid i miocróim ae francach.

éifeachtaí cistanche

PLÉ

Rinneamar tástáil ar ghníomhaíochtaí scavening radacach saor in aisce na n-sleachta tuaslagóirí éagsúla de ghas Cistanche deserticola ar radacach DPPH agus fuaireamar amach gur léirigh an sliocht aicéatón-H2O (9:1) an ghníomhaíocht is láidre. Chun comhábhair ghníomhacha na gníomhaíochta scavening radacach saor in aisce a fháil, d'aonraíomar naoi gcomhdhúil mhóra feinileatánóideach ón sliocht seo agus chinneamar a struchtúir le NMR.

Rinneadh éifeachtaí frithocsaídeacha na bhfeinileatánóid seo a mheas ag a ngníomhaíocht scavenging radacach saor in aisce agus gníomhaíocht sárocsaídiúcháin frith-lipid. Baineadh úsáid as an a-tócaifearóil ar a dtugtar go forleathan mar shubstaint rialaithe dearfach. Mar and’fhéadfadh tionchar a bheith ag lipophilicity a-tócaifearóil ar a ghníomhaíochtaí sna córais measúnaithe atá ann faoi láthair ach amháin i measúnú scavenging radacach DPPH, ghlacamar aigéad caiféin mar shubstaint rialaithe dearfach eile.

Ar dtús, rinneamar tástálacha ar ghníomhaíochtaí scavening radacach saor in aisce. Gan dabht, léirigh na 9 feinileatánóid a ndearnadh tástáil orthu gníomhaíochtaí scavenging radacach anion radacach DPPH níos láidre ná a-tócaifearóil, ach bhí cuid acu níos láidre agus bhí cuid eile níos laige ná aigéad caiféin. Mhéadaigh an ghníomhaíocht scavenging radacach le méadú ar líon na ngrúpaí hiodrocsaile feanólacha. Creideadh go raibh comhthreomharacht neamhiomlán gníomhaíochtaí scavening anion radacach DPPH agus superoxide mar gheall ar na carachtair éagsúla idir na speicis radacacha agus roinnt fachtóirí eile a bhaineann leis an dá chóras imoibrithe seo,21,26) don radacach DPPH radacach ceimiceach a imoibríonn. le scavengers radacach i bhfear ceimiceach simplí, cé go bhfuil an radacach anion superoxide ginte ag xanthin/XOD, imoibriú einsímeach.

Má chuireann na feinileatánóidí bac ar an radacach anion superoxide xanthine/XOD gen eated, d’fhéadfaí breathnú ar an gcosc mar thoradh ar a ngníomhaíocht scavening radacach anion superoxide nó (agus) a gcosc ar an einsím XOD,23) agus mar sin rinneamar tástáil ar a gcuid éifeachtaí coisctheacha de xanthine oxidase. Tá sé suimiúil, go roghnaíoch, nár léirigh ach isoacteoside (8) agus tubuloside B (7), a bhfuil a taise caffeoyl ag 6/- suíomh an ghlúcóis, cosc. Léirigh siad éifeacht ag an tiúchan de 25-200jtiM ar 3.4xlO^3U/ml (10jug/ml) de XOD, cé go raibh an ghníomhaíocht níos laige ná allopurinol; comhdhúile eile, a bhfuil a moiety caffeoyl ag《-suíomh an glúcóis, léirigh aon éifeacht coisctheach. Thug an toradh seo an chéad tuarascáil ar éifeacht coisctheach feinileatánóid ar einsím XOD. Thuairiscigh Chan et al21) go raibh éifeachtaí coisctheacha ag aigéad caiféin agus cuid dá analógacha ar ghníomhaíocht XOD, áfach, ní bhfuaireamar aon éifeacht dá leithéid d’aigéad caiféin faoi na coinníollacha imoibrithe reatha. Sa tástáil seo, bhí an tiúchan XOD cosúil leis an gceann sa tástáil éifeacht ar ghiniúint radacach anion superoxide (4.3 / zg/ml), ach bhí tiúchan na gcomhdhúile i bhfad níos airde ná sa dara ceann. Mar sin, tá cosc ​​ar an nginiúint Oj ag na feinileatánóidigh seo mar gheall ar a ngníomhaíocht scavening radacach, ach ní mar gheall ar a ngníomhaíocht choisctheach ar an einsím XOD.

Is eol go maith an t-imoibriú slabhra radacach saor in aisce sin go sárocsaídiú lipid ar deireadh.28,29) Mar sin rinneamar staidéar ar na comhdhúile feinileatánóideach seo le haghaidh a n-éifeachtaí ar shárocsaídiú lipid i miocróim ae francaigh a tharlódh ón gcóras einsímeach ADP/NADPH/Fe3 móide agus a tharlódh de bharr an córas neamh-einsímeach aigéad ascorbic/Fe2 móide . Léirigh na comhdhúile seo go léir éifeachtaí sárocsaídiúcháin frith-lipid níos láidre ná aigéad caiféin agus a-tócaifearóil sa dá chóras. Glactar leis go ginearálta go bhfuil an dá chóras á gcatalú ag hiain iarainn, ceachtar Fe2 móide nó Fe3 móide , a bhfuil baint acu le fréamhacha sárocsaile lipid,30,31) agus go bhfuil an ról is tábhachtaí ag radacach hiodrocsaile OH i sárocsaídiú lipid,32 _34) cé gur ceistíodh tionscnamh OH i roinnt tuarascálacha.35祁6) Ar an láimh eile, tá an t-anion radacach superoxide IO, arb é príomhtháirge an ionsaithe e_ ar O2 sa slabhra radacach, sách lag. radacach imoibríoch agus ní bhíonn sárocsaídiú lipid féin mar thoradh air. Cé gur léirigh na feinileatánóidigh seo gníomhaíocht scavenging níos laige ar radacach anion superoxide ná aigéad caffeic, léirigh siad gníomh sárocsaídiúcháin frith-lipid i bhfad níos láidre ná an dara ceann. Mar sin, creidimid go bhféadfadh siad, cosúil le roinnt polyphenols aramatacha, slabhra-bhriseadh eile, bac a chur ar an sárocsaídiú lipid thuas i miocróim ae francach trí chelat ing Fe2 plus nó Fe3 plus iain, agus freisin trí superoxide radacach Oj a scavening chun imoibriú slabhra radacach a bhriseadh síos. .37,38) Ina theannta sin, féadfaidh siad speicis radacacha níos tocsaineacha cosúil le radacach hiodrocsaile agus radacach sárocsaile lipid a scamhadh chun sárocsaídiú lipid a bhriseadh go díreach ag cumas níos airde ná aigéad caiféin.38,39)

Li et al. rinne sé staidéar ar roinnt gliocóisídí feinileatánóideach lena n-áirítear acteoside (verbascoside) (5), isoacteoside (iso-verbascoside) (1), agus echinacoside (4) ó Pedicularis as a gcoisc ar uathocsaídiú aigéad linóleic i micelles, córas neamhbhitheolaíoch,13) as a gcosaint i gcoinne haemalú ocsaídiúcháin in vitro,14''1 agus freisin as a n-éifeachtaí scavening ar superoxide ginte NBT/PMS/NADH agus cosc ​​ar shárocsaídiú lipid a tharlódh ag aigéad ascorbach/Fe2 móide i miocróim ae luiche.15) Gníomhaíocht dá samhail - chonacthas caidreamh struchtúr i dtuarascálacha Li et al. agus ár dtorthaí. Is é sin, braitheann gníomhaíochtaí feinileatánóid chun sárocsaídiú lipid a chosc go príomha ar líon agus suíomh steiriúil na ngrúpaí hiodrocsaile feanólacha.15) Ar bhonn a gceimice steirió, is iad na grúpaí hiodrocsaile feanólacha de moiety caffeoyl ar acteoside (5), tubuloside A ( 3), agus bheadh ​​​​echinacoside (4), a bhfuil an caffeoyl ag 4z-suíomh an ghlúcóis, níos éasca chun banna hidrigine a fhoirmiú leis na grúpaí hiodrocsaile rhamnosyl ná iad siúd ar isoacteoside (8) agus tubuloside B (7), a bíodh an caffeoyl ag suíomh 6'- den ghlúcós. Mar sin, d'fhorchoimeád an dara grúpa níos mó grúpaí hiodrocsaile feanólacha saor in aisce ná an chéad ghrúpa agus léirigh sé sin go raibh gníomhaíocht sárocsaídiúcháin frith-lipid níos láidre. Thugamar faoi deara freisin gur chuir 2z-aicéitiliú na bhfeinileatánóid seo, cé go raibh siad beagán, feabhas ar a n-éifeachtaí frithocsaídeacha. Mar shampla, léirigh acteoside (5) agus isoacteoside (8), nuair a aicéitilítithe 2'- isteach i 2/-aicéitilacteoside (1) agus tubuloside B (7), faoi seach, gníomhaíochtaí níos láidre i ngach ceann de na ceithre chóras measúnaithe. Mar gheall ar fheabhas na ceimice steiréó agus 2'-acetylation, léirigh tubuloside B (7) an ghníomhaíocht frithocsaídeach is láidre i measc na samplaí a tástáladh. B'fhéidir mar gheall ar an tríú cuid siúcra a chur in ionad 6'~suíomh, níor oiriúnaigh an comhghaol seo go maith i gcás tubuloside A (3) nó echinacoside (4); áfach, sa chóras ADP/NADPH/Fe3 móide, léirigh tubuloside A ⑶ gníomhaíocht sárocsaídiúcháin frith-lipid níos láidre ná echinacoside (4).

Ina theannta sin, léirigh ord na gníomhaíochta scavening radacach DPPH comhthreomhaireacht níos fearr le sárocsaídiú frith-lipid ná mar a rinne ord na gníomhaíochta scavening radacach anion superoxide. Chruthaigh sé seo arís gur modh áisiúil iontaofa é measúnacht scavenging radacach DPPH le haghaidh measúnacht frithocsaídeach,26) cé gur radacach spreagtha ceimiceach é radacach DPPH agus d'fhéadfadh radacach anion superoxide a bheith ina radacach inghineach bitheolaíoch.

Mar fhocal scoir, léirigh gach ceann de na naoi bhfeinileatánóid gníomhaíochtaí suntasacha scavening radacach saor in aisce agus éifeachtaí sárocsaídiúcháin frith-lipid sa staidéar seo. Cuireadh an éifeacht frithocsaídeach ar fáil de bharr méadú ar líon na ngrúpaí hiodrocsaile feanólacha sa mhóilín. Mar is féidir a shamhlú, d’fhéadfadh go mbeadh ról tábhachtach ag éifeachtaí frithocsaídeacha na nóid feinileata seo a chruthaítear anseo i ngníomhartha an druga Cistanchis Herba agus féadfaidh siad go pointe míniú a thabhairt ar mheicníochtaí ghníomhaíochtaí roinnt eatánóid feinile i gcoinne neoplasma,8* athlasadh10) agus neifritis, 1 n ina bhfuil baint mhór ag fréamhacha saor in aisce.

Cistsanche Echinacoside: Frith-ocsaídiúcháin

TAGAIRTÍ

1) Namba T., "The Encyclopedia of Wakan-Yaku (Cógas Sino-Seapánach Traidisiúnta) le Pictiúir Datha, 5, Iml. II, Hoikusha, Tóiceo, 1994, lgh. 16-17.

2) a) Kobayashi H, , Karasawa H., Miyase T., Fukushima S., Ceimic. Pham. Bull, 32, 3009—3014 (1984); b) Idem, ibid., 32, 3880-3885 (1984); c) Idem, ibid., 33, 1452—1457 (1985); d) Karasawa H., Kobayashi H., Takizawa N., Miyase T., Fukushima S., Yakugaku Zasshi, 106, 562—566 (1986); e) Idem, ibid., 106, 721—724 (1986); /) Kobayashi H., Oguchi H., Takizawa N., Miyase T., Ueno A., Usmanghani K., Ahmad M., Ceimic. Pharm. Tarbh., 35, 3309一3314 (1987); g) Yoshizawa F., Deyama T., Takizawa N., Usmanghani K., Ahmad M., ibid., 38, 1927-1930 (1990).

3) a) Kobayashi H, Komatsu J., Yakugaku Zasshi, 103, 508一511 (1983); b): Kobayashi H., Karasawa H., Miyase T., Fukushima S., Ceimic. Pharm. Tarbh., 32, 1729—1734 (1984); c) Idem, ibid., 33, 3645—3650 (1985).

4) Naran R., Ebringerova A., Hromadkova Z., Patoprsty V., Phytochemistry, 40, 709-715 (1995).

5) Sato T., Kozima S., Kobayashi K., Kobayashi H., Yakugaku Zasshi. 105, 1131—1144 (1985).

6) Jin XL, Zhang QR, an tSín J. Chinese Materia Medica, 19, 695-697 (1994).

7) Yamahara J., Kitani T., Kobayashi H., Kawahara Y., Yakugaku Zasshi, 110, 932-935 (1990).

8) a) Pettit G. R・, Numata A., Takemura T., Óid RH, Narula A, S., Schmidt JM, Cragg GM, Pase CP, J. Nat. Táirg., 53, 456— 58 (1990); b) Saracoglu I., Inoue M., Calis I., Ogihara Y., Biol. Pharm, Bull., 18, 1396-1400 (1995).

9) Andary C., '4Eistir Glicóisíde Aigéad Caiféic agus Cógaseolaíocht/ eag. le Scalbert A., Feiniméin Polyphenolic, INRA Editions, Páras, 1993, lgh. 237-245.

10) Murai M., Tamayama Y., Nishibe S., Planta Med.. 61, 479― 80 (1995).

11) Hayashi K., Nagamatsu T., Ito M., Hattori T., Suzuki Y., Jpn. J. Pharmacol., 66, 47一52 (1994).

12) a) Molnar J., Gunics G., Mucsi I., Koltai M., Petri L, Shoyama Y., Matsumoto M., Nishioka L, Acta Microbiol. ar crochadh.. 36, 425― 32 (1989); b) Sasaki H., Nishimura T., Morota T., Chin M., Mitsuhashi H" Komatsu Y., Maruyama H., Tu GR, He W., Xiong YL, Planta Med., 55, 4582462 (1989).

13) Li J., Wang PF, Zheng RL, Liu ZM, Jia 乙 J., Planta Med., 59, 315—317 (1993).

14) Zheng RL, Wang PF, Li J., Liu Z. M,, Jia ZJ, Chem. Fis. lipidí. 65, 151—154 (1993).

15) Li J., Zheng RL, Liu乙 M., Jia乙 J., Acta Pharmacol. Sinica, 13, 427T30 (1992).

16) Bearbóir DA, Harris SR, Cógaisíocht Mheiriceá. 34, 26一35 (1993).

17) Elstner EF, Klin Wochenschr, 69, 949-956 (1991).

18) Martin GR, Danner DB, Holbrook NJ, Ann. Rev. Med., 44, 419-29 (1993).

19) Kiso Y., Tohkino H., Hattori M., Sakamoto T., Namba T., Planta Med.. 50, 298-302 (1984).

20) Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ, J. Biol. Ceimic.. 193, 265-275 (1951).

21) Hatano T., Edamatsu R., Hiramatsu M., Mori A., Fujita Y., Yasuhara T" Okuda T., Chem. Pharm. Bull., 37, 2016一2021 (1989).

22) Imanari T., Hirota M., Miyazaki M., Igaku No Ayumi, 101, 496-497 (1977).

23) Hatano T., Yasuhara T, Yoshihara R., Agata L, Noro T., Okuda T., Ceimic. Pharm. Tarbh., 38, 1224-1229 (1990).

24) Ohkawa H., Ohishi N., Yagi K., Anal. Bithcheimic., 95, 351一358 (1979).

25) a) Lahloub M, F., Zaghloul AM, El-Khayat SA, Afifi MS, Sticher O., Planta Med.. 57, 481-85 (1991); b) Nishimura H., Sasaki H., Inagaki N., Chin M. (Zhen 乙 X.), Mitsuhashi H., Phytochemistry. 30, 965—969 (1991); c) Budzianowski J., Skrzypczak L., ibid,, 38, 997-1001 (1995),

26) Marsden SB, Dúlra (Londain), 181, 1199-1200 (1958).

27) Chan WS, Wen PC, Chiang HC, Anticancer Res., 15, 703一 708, (1995).

28) Janero DR, Burghardt B., Biochem, Pharmacol.. 37, 3335一3342 (1988).

29) Buettner GR, Arch. Bithcheimic. Bithfhis., 300, 535一543 (1993).

30) Herbert V., Shaw S., Jayatilleke E., Stopler-Kasdan T., Gaschealla, 12, 289-303 (1994).

31) Aust SD, Miller DM, Samokyszyn VM, Modhanna Enzymol., 186, 457-463 (1990).

32) Kubota S., Ikegami Y., Kurokawa T., Sasaki R., Sugioka K., Nakano M., Biochem. Bithfhis. Res, Comh., 108, 1025一1031 (1982).

33) Yagi K., Ishida N., Komura S., Ohishi N., Kusai M., Kohno M., Biochem. Bithfhis. Res. Commun., 183, 945一951 (1992).

34) Hocumbery DM, Oltvai ZN, Ceann XM, Milliman CL, Korsmeyer SJ, Cill. 75, 241—251 (1993).

35) Bucher JR, Tien M., Aust AD, Biochem. Bithfhis. Res, Comm., tinn, 777-784 (1983).

36) Yoshida T., Otake H., Aramaki Y., Hara T., Tsuchiya S., Hamada A., Utsumi H., Biol. Pharm. Tarbh.. 19, 779-782 (1996).

37) Afanas5 EVIB, Dorozhko A. L, Brodskii AV, Kostyuk VA, Potapovitch L A., Biochem. Cógaslann., 38, 1763-1769 (1989).

38) Robak J., Gryglewski RJ, Biochem. Cógaslann.. 37, 837-841 (1988).

39) Chimi H., Morel I., Lescoat G., Pasdeloup N・, Cillard P., Cillard J., Tocsaineolaíocht in Vitro, 9, 695,702 (1995)