Micrimhilseogra i nGalar Duán Leptospirosis Ⅱ

4. Freagraí Díolúine Óstach ar Leptospira spp.

Is é príomhbhealach Leptospira ná dul i bhfód díreach ar na seicní múcasacha nó ar an gcraiceann oscailte trí fhuil, fíocháin, fual, nó uisce éillithe, a leathnaíonn ar fud an scaipeadh sistéamach agus a scaipeann i roinnt orgáin, mar shamplaae, scamhóg, agus tubule proximal annephron sna duáin, nuair is féidir é a iolrú agus maireachtáil ar feadh míosa [51]. Sa chéim tosaigh den ionfhabhtú, anfreagra imdhíonachta dúchasachTá ról bunúsach mar an chéad líne cosanta i leptospirosis, a dhéanann difear do fhreagragabhdóirí aitheantais patrún, fagaicíotóis macrophage, ionduchtú extracellularcarnadh neutrophil, agusidirghabháil an chórais chomhlánaithe [52].

Tá anfreagra imdhíonachtai ndaoine imríonn ról riachtanach saforbairt comharthaí cliniciúla, mar a dhéanann fachtóirí virulence roinnt tréithchineálacha pataigineacha. Tá an chuid is mó de leptospirosis daonna asymptomatic nó éadrom, agus ní fhorbraíonn ach 10% de na cásanna foirmeacha tromchúiseacha le teip multiorgan agus rátaí mortlaíochta méadaithe a bhaineann lestoirm cítocínagus stádas imdhíon-pairilis. Speiceas pataigineach spreagadh freagra humoral sa chéim bacteremia, cé go bhfuil an iompar ina dhiaidh sin anfreagra imdhíonachtadoiléir. I staidéir ar othair a bhfuil léirithe cliniciúla iolracha de leptospirosis acu, tá baint ag déine an phictiúr chliniciúil le leibhéil éagsúla cítocíní serum, mar shampla TNF-, IL-10, agus IL-6 [53], ach tá an chonclúid seo fós conspóideach [54]. Mar thoradh ar na coinníollacha seo tá suim mhéadaithe i dtuiscint ar an bhfreagairt imdhíonachta i gcoitinne agus ar na himeachtaí bitheolaíocha a tharlaíonn le linn ionfhabhtaithe.

CÉ FAD A THÓGAÍONN SÍ CHUN CISTANCHE OIBRE?

4.1. Leptospira agus an Córas Comhlánaithe

Ceadaíonn gníomhaíocht próitéalaíoch proteases Leptospiral i gcoinne an mhaitrís extracellular don ionfhabhtú dul isteach sa sruth imshruthaithe. Tá an córas comhlántach sa chóras imshruthaithe ar cheann de na príomh-mheicníochtaí den fhreagra imdhíonachta dúchasach ar Leptospira pataigineach. Mar sin féin, d'fhorbair Leptospira straitéisí chun ionsaí an chórais chomhlánaithe a éalú trí phróitéiní a cheangal chun móilíní a chomhlánú agus próitéisí a tháirgeadh, mar shampla thermolysin, einsím metalloproteinase neodrach thermostable a théann i bhfeidhm ar an slabhra próitéin C3. Ceanglaíonn tréithchineálacha pataigineacha fachtóir H (FH), comhlánaíonn próitéin fachtóir H a bhaineann le 1 (FHR-1), próitéin cosúil le fachtóir H 1 (FHL-1), agus próitéin ceangailteach C4b (C4BP), gach atá freagrach as an gcóras comhlántach a chosc [55]. Tá trí phríomhstraitéis ann maidir le himghabháil comhlántach ar Leptospira pataigineach [55,56] trí chur isteach ar rialtóirí comhlántacha óstaigh, protease óstach, agus protease baictéarach. Le haghaidh rialtóirí comhlántacha, úsáideann Leptospira Fachtóir H (FH; rialtóir ar chonair chomhlánaithe mhalartach) agus próitéin ceangailteach C4 (C4BP; rialtóir ar chonairí comhlántacha clasaiceacha agus lectin) chun meath na dtiontuithe C3 a luathú agus gníomhú freisin mar chomhfhachtóirí le haghaidh Fachtóir I. do scoilteacht C3b agus C4b [57,58]. Ceanglaíonn próitéin Leptospiral (LcpA), in éineacht le vitronectin (Vn; rialtóir cosán críochfoirt) C9 agus cuireann sé bac ar a pholaiméiriú [59], rud a d'fhéadfadh bac a chur ar fhoirmiú casta membrane-activating (MAC) [60]. Ina theannta sin, ceanglaíonn Leptospira pataigineach roinnt próitéisí óstaigh, mar shampla gníomhachtaithe plasminogen de chineál Urokinase (uPA), a chothaíonn plasmin gníomhach [61] (protease serine) le haghaidh díleá C3b, C4b, agus C5 ar dhromchla Leptospira [62]. Ina theannta sin, is féidir le metalloproteases agus thermolysin, an protease Leptospira ingenous, roinnt próitéiní comhlántacha a scoilt agus a dhíghníomhú (C2, C3, C4, agus Fachtóir B) [60]. Éascaíonn an meascán de rialtóirí comhlántacha, ón Leptospira óstach agus pataigineach, coilíniú baictéarach i spriocorgáin an óstaigh [63].

4.2. Leptospira agus Neutrophils

Le linn ionfhabhtú, spreagann speicis phataigineacha Leptospira gníomhachtú láidir neutrophils agus freagra pro-athlastach. Tá neutrophils tábhachtach do rialú miocrorgánach, ach cuireann siad freisin le damáiste fíocháin san óstach. Tá sé léirithe go bhfuil leibhéil ísle carnadh neutrophil extracellular mar gheall ar ghníomhaíocht neutrophil íseal sa scaipeadh méadú leptospiremia, rud a léiríonn go bhféadfadh foirmiú infhéitheach earcaíochtaí neutrophil a bheith ríthábhachtach chun cosc ​​a chur ar scaipeadh luath Leptospira pataigineach [64].

4.3. Leptospira agus Macrophages

I gcéim tosaigh ionfhabhtú Leptospira, tá ról tábhachtach ag macrophages maidir le deireadh a chur leis an spirochete. Tá baint ag an meicníocht éifeachtóra seo mar aon le freagairt éifeachtach cytokine le rialú phagocytic agus le scaipeadh ionfhabhtaithe, cé go bhfuil Leptospira spp. Léiríodh go gcothaíonn sé apoptosis i macrophages tríd an gcosán Fas/FasL-caspase-8/-3 agus go n-éascaíonn sé a marthanas agus a iomadú san óstaigh mar gheall ar scaoileadh apoptosis agus endonucleóis a chothaíonn fachtóir miteachondrial i gcás ionfhabhtaithe. macrophages [65]. Rinneadh taighde le déanaí ar mhicrea-trascriptome macrophages atá ionfhabhtaithe le Leptospira chun na meicníochtaí epigenetic a chinneadh, mar rialáil iar-thscríbhinne ag RNA. Tá sé léirithe ag Macrophages atá ionfhabhtaithe le Leptospira go ndéantar microRNAs (miRNAs) a rialáil trí ionfhabhtú leis an spirochete, rud a léiríonn go bhfuil an rialachán seo ríthábhachtach maidir le freagairt na gcealla córais imdhíonachta seo in ionfhabhtú Leptospira [66]. I macrophages daonna, tá leibhéil shuntasacha NLRP3 agus IL-18 ag gníomhachtú an athlasadh arna idirghabháil ag speicis ocsaigin imoibríocha agus catepsin lysosomal B ginte ag ionfhabhtú Leptospira, rud atá i bhfabhar táirgeadh IL-1 agus as a dtagann ard. fhéidearthacht fagaicíotóis agus samhaltú tapa roinnt cytokines a chomhghaolú le frithsheasmhacht in aghaidh leptospirosis [67].

4.4. Freagra Humoral ar Leptospira

Is sainairíonna é an freagra greannach sonrach i gcoinne Leptospira ná táirgeadh antasubstaintí IgM agus IgG ar an tríú lá ó thosaigh na hairíonna. Ina theannta sin, tuairiscíodh táirgeadh IgA ón gcéad lá go dtí an naoú mí iar-ionfhabhtaithe; go deimhin, baineadh úsáid as an méadú ar IgM mar bheart eile i ndiagnóis luath leptospirosis [68]. Ceadaíonn éifeacht an fhreagra humoral i ndaoine le leptospirosis an diagnóis séireolaíoch a dhéanamh tar éis ionfhabhtú nádúrtha [69]. B’fhéidir gurb é an ghné is tábhachtaí den fhreagra humoral in ionfhabhtú Leptospira ná antasubstaintí cosanta a fhoirmiú. Tá na vacsaíní atá ar fáil faoi láthair le haghaidh leptospirosis comhdhéanta d'ullmhóidí cille iomlána agus tá teorainneacha acu, mar éifeachtúlacht íseal, fo-iarsmaí iolracha, giniúint cuimhne imdhíonachta íseal, agus easpa traschosaint ar dhifríochtaí serovar. Mar sin, tá gá le vacsaíní nua a fhorbairt chun galair a rialú, agus tá taighde á dhéanamh faoi láthair chun vacsaíní a tháirgeadh ó imdhíonadh géiniteach [70]. Breathnaíodh ar OMPanna Leptospira mar antaigin, le himdhíon-ghineacht níos fearr do limficítí B, lena n-áirítear na heipitíopaí struchtúracha OmpL187- 98, OmpL1173-191, OmpL1297-320, LipL4130-48, LipL{ {9}}, agus LipL41263-282 [71]. Tá na epitopes seo geallta d'iarrthóirí maidir le forbairt vacsaín uilíoch.

4.5. Freagra Imdhíonta Oiriúnaitheach ar Leptospira: T-Cealla agus Cítocíní

Spreagann speicis phataigineacha de Leptospira freagairt imdhíonachta arna idirghabháil ag limficítí T agus B, in éineacht le léiriú cítocíní a d’fhéadfadh a bheith bainteach le cairteacha domhantarraingthe. Cuireann gníomhachtú cealla T le linn ionfhabhtú le Leptospira tús leis an bhfreagra athlastach, go príomha trí tháirgeadh cítocine. Tá sé seo ríthábhachtach maidir le hionfhabhtú a dhíchur go luath, ach is féidir rótháirgeadh cítocín a bheith mar thoradh ar tháirgeadh neamhrialaithe cítocíní pro-athlastach agus staid pairilis imdhíonachta ina dhiaidh sin, rud a d'fhéadfadh a bheith ina chúis le sepsis agus teip ilorgánach. Táirgeann T limficítí IL-1, IL-6, IL-12, interferon (IFN)- , agus TNF- , a fheidhmíonn mar cheimi- mhealltóirí chun leoicicítí a earcú ag suíomh an ionfhabhtaithe. Díol spéise é, in ex vivo, mhéadaigh na cealla naive δ T i gcultúir na gcealla mononuclear fola imeallacha (PBMCanna) spreagtha le antaiginí Leptospira mar aon le táirgeadh IL-17 agus IFN [72]. Ina theannta sin, cé gur léirigh lucha de chineál fiáin ionfhabhtaithe leptospirosis leibhéil níos airde de cítocíní, lena n-áirítear IL-4, IL-10, agus IL-13 i gcomparáid le lucha neamh-ionfhabhtaithe, Leptospira-spreagtha murine ainsealach. léirigh neifritis (Daf1-/- lucha) slonn níos airde ar actin matán mín, IL-10, IL-13, ach ní raibh aon difríocht idir IL-12 agus IL{{21} } leibhéal [73]. Mar sin, féadfaidh Daf1 agus IL-17 ról cosantach ríthábhachtach a imirt i ndul chun cinn CKD mar an nasc idir CKD murine arna spreagadh le Leptospira agus fiobróis duánach [72,73]. Mar sin féin, tá an hipitéis maidir le freagra cítocine roghnaithe i ndul chun cinn galair fós neamhchinntitheach i leptospirosis daonna go dtí seo. In othair le leptospirosis tromchúiseach agus rannpháirtíocht scamhógach, fuarthas leibhéil ardaithe IL-6, CXCL8, agus IL-10 i gcomparáid le hothair le leptospirosis éadrom [53]. Leagann na tiúchain arda cítocíní seo in othair le leptospirosis béim ar a bpríomhról i bhforbairt leptospirosis trom.

In othair a bhfuil ionfhabhtú trom orthu, faightear limficítí CD4+ T le próifíl pro-athlastach agus táirgeoirí IL-2 agus IFN- agus táirgeoirí CD4+ CD25high IL-10 beagnach as láthair. Ní cosúil go gcuireann rialáil freagairt imdhíonachta T lymphocyte-mediated cosc ​​​​ar damáiste fíocháin a ghintear leis an bhfreagra athlastach ar Leptospira. I limficítí CD4+ T i ndaoine a bhfuil leptospirosis tromchúiseach orthu, tá táirgeadh TNF- agus cítocíní pro-athlastacha eile níos airde ná iad siúd a bhfuil foirm éadrom an ghalair orthu, rud a thugann le fios gur féidir na cítocíní seo a úsáid mar mharcóirí de déine sa chéim imdhíoneolaíoch den ionfhabhtú [74]. Tá baint ag táirgeadh IL-10 le riosca báis i ndaoine le leptospirosis; áfach, bhain staidéar a rinneadh ar dhaoine nochta agus asymptomatic le táirgeadh an chitocín seo le rialú an fhreagra athlastach agus marthanais [74]. Le linn ionfhabhtú Leptospira, déantar idirghabhálaithe athlastacha agus gníomh roinnt cealla leukocyte, mar shampla limficítí T, a rialáil go tapa i ndaoine aonair frithsheasmhacha, i gcodarsnacht leis an méid a tharlaíonn i ndaoine aonair le foirmeacha tromchúiseacha leptospirosis [75].

Go hachomair, ní thuigtear go hiomlán an freagra imdhíonachta ar ionfhabhtú Leptospira mar gheall ar iompraíocht chliniciúil othar le leptospirosis, a idirghníomhaíonn le fachtóirí éagsúla géine an ghéanóim baictéarach, rud a thugann cumas soladach pataigineach do Leptospira.

5. Léirithe Cliniciúla

Tá léirithe cliniciúla leptospirosis éagsúil, ó chomharthaí éadroma neamhshonracha, cosúil le hairíonna cosúil le fliú (fiabhras, myalgia, agus tinneas cinn), go hairíonna tromchúiseacha mar aon le gortuithe orgán deiridh (m.sh., AKI, teip géarmhíochaine hepatic. , agus diathesis fuilithe, ar a dtugtar siondróm Weil freisin), hemoptysis géarmhíochaine ó hemorrhage scamhógach, mearbhall géarmhíochaine ó mheiningoencephalitis aiseiptigh, agus cliseadh croí géarmhíochaine ó myocarditis géarmhíochaine nó subacute [7]. Dá réir sin, is éard atá sna trí tháscaire ar ionfhabhtú leptospirosis amhrasta ná (i)tinneas febrile géarmhíochaine, (ii) buíochán, agus (iii)gortú duáin géarmhíochaine[12]. Is iad na réamh-mheastacháin a bhaineann le foirm ghéar leptospirosis ná mialgia dian ag tús, claonadh fuilithe trom, agus buíochán marcáilte. Suimiúil go leor, láithreacht ceachtar atá ann cheana féingalar duáin ainsealach(méid duáin beag) nó duáin méadaithe, plódaithe le anuria a bhaineann leis an toradh is measa [12]. Mar sin, ba chóir go gcaithfí go pras le hothair a bhfuil galar duánach a bhaineann le leptospirosis orthu.

6. Diagnóis

6.1. Diagnóis Chliniciúil

Tá diagnóis leptospirosis bunaithe ar stair an nochta, fachtóirí riosca, agus léirithe cliniciúla. Is féidir le hinnéacs ard amhrais dul timpeall ar dhamáiste orgán níos déanaí. Mar sin féin, is minic a dhéantar comharthaí leptospirosis a dhearmad ar chúiseanna eile de shiondróm géarmhíochaine febrile, mar ionfhabhtú dengue, maláire, heipitíteas, agus galar gníomhach autoimmune. Ciallaíonn easpa comharthaí pathognomonic de leptospirosis go bhfuil an diagnóis bunaithe go trialach ar mheastóireacht ar fhiabhras agus myalgia in othair ó limistéar endemic. Ar an ábhar seo, tá diagnóis saotharlainne de leptospirosis riachtanach.

6.2. Diagnóis Saotharlainne

Tá sé deacair leptospirosis a dhiagnóiseadh sa tsaotharlann, go háirithe le linn na céime géarmhíochaine. Is féidir é a dhéanamh trí spirochetes nó a gcomhpháirteanna a aithint go díreach i sreabhán coirp nó i bhfíocháin choirp, trí leptospires a aonrú sa chultúr, nó trí antasubstaintí ar leith a bhrath ar feadh céimeanna cliniciúla éagsúla. Is deacair idirdhealú a dhéanamh idir leptospirosis agus tinnis, mar shampla maláire, fiabhras dengue, rickettsia, fliú, heipitíteas, agus fiabhras buí mar gheall ar a chuma cliniciúil doiléir. Mar thoradh air sin, tá gá le tástálacha saotharlainne chun an diagnóis a dhearbhú. Tá braite antasubstaintí i gcoinne leptospires, leptospires féin, nó a n-aigéad deocsairbonúicléach mar bhunús leis na tástálacha seo (DNA). Áirítear le diagnóis saotharlainne reatha sainaithint dhíreach (brath spirochetes Leptospira nó DNA sna samplaí nó aonrú an orgánaigh ó eiseamail) agus a bhrath indíreach (diagnóis shéareolaíoch nó séireolaíocht chun ionfhabhtú Leptospiral a aithint, atá bunaithe ar bhrath antasubstaintí sonracha i gcoinne éagsúla. Antaiginí leptospiral) (Tábla 1).

6.2.1. Scrúdú Micreascópach Díreach, Cultúir, agus Brath Antigen

Is bíseanna tanaí, geala, gníomhacha gluaisteacha iad na leiptospir le sníomh tapa go tipiciúil (gluasán claonta) faoin ngnáthmhicreascóp páirce dorcha (DFM) agus tá thart ar 10 leiptospior/ml riachtanach chun cill amháin in aghaidh an réimse a bhrath. Le seachtain amháin níos faide le linn an ionfhabhtaithe, tá thart ar 10% éagtha i toradh DFM (ó 100 go 90%). Chun an íogaireacht a fheabhsú, roinnt modhanna staining speisialta; Warthin – smálú airgid réaltach [76] agus imdhíon-cheimic (imdhíon-cheimic, imdhíonfhluaraiseacht, gabháil antaigin imdhíonmhaighnéadach, agus staining inmunoperoxidase [77]) a éilíonn antasubstaintí príomhúla sonracha serovar (ina aonar nó i gcomhcheangal).

Tábla 1. Tástálacha saotharlainne le haghaidh diagnóis leptospirosis.

LAMP, aimpliú isiteirmeach lúb-idirghabhála; PCR, imoibriú slabhra polaiméire; NGS, seicheamh den chéad ghlúin eile; IHA, hemagglutination indíreach; ELISA, measúnacht imdhíonta-nasctha einsímí; IgM, immunoglobulin M; MAT, tástáil agglutination macrascópach; MCAT, tástáil agglutination microcapsule; DNA, aigéad déocsairbonúicléach; DFM, micreascópacht réimse dorcha

Ag an am céanna, is féidir cultúr Leptospira ó fhuil, fual, sreabhán cerebrospinal, agus fíochán bithóipse le linn na chéad chúpla lá go 10 lá tar éis comharthaí an tinnis (céim leptospirosis). Toisc go bhfuil siad ag fás go mall (6-8 h am dúbailt), fastidious, agus seans maith éillithe, ní mór na samplaí cultúir a choinneáil ar a laghad 3-4 mhí roimh a chaitheamh amach mar diúltach) gan ach 23% íogaireacht ach tá sé riachtanach. don tástáil íogaireachta drugaí [6]. Mar sin, is éard atá i meáin EMJH (Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris) (coimpléasc albaimin oleic) albaimin serum bó-ainmhithe (codán V), Tween 80, thiamine clóiríd amóiniam, fosfáit monopotassium, fosfáit dé-óidiam, agus cothaithigh éagsúla [78]. a úsáidtear go coitianta, cé go bhfuil gá le meáin T80/40/LH níos speisialaithe (polysorbate 40, hidrolysate lactalbumin, superoxide dismutase, agus serum coinín), le haghaidh roinnt serovars [79]. Maidir le haonrú bunscoile an raon mór agus éagsúil de leptospires pataigineacha fastidious, is cosúil Hornsby-Alt-Nally (HAN), a bheith ina mheán maith [80].

Forbraíodh braite antaiginí Leptospiral trí immunoperoxidase, inmunofluorescence, nó córas gabhála antaigin imdhíonachta d'eiseamail le hualaí íseal baictéarach nó micreascópacht réimse dorcha a úsáid ach ní dhéantar é go rialta mar gheall ar an teorannú ar antashubstaint phríomhúil [77]. I gcodarsnacht leis sin, aithint aigéid núicléacha le aimpliú DNA núíosach; Tá imoibriú slabhra polaiméaráise (PCR) (ie, PCR neadaithe, PCR cainníochtúil [qPCR]), aimpliú isiteirmeach lúb-idirghabhála (LAMP), agus seicheamhú den chéad ghlúin eile (NGS) luachmhar le haghaidh diagnóis saotharlainne luath agus cruinn, go háirithe leis an Leithlisiú leptospira ag baint úsáide as ionaclú meáin bhitheolaíocha agus hibridiú DNA (probe DNA) [81,82]. Is féidir éagsúlacht spriocanna Leptospiral (cosúil le RNA ribosomal 16S) nó DNA a aimpliú le haghaidh diagnóis [83] agus tá PCR fíor-ama (RT-PCR) níos íogaire agus níos sainiúla ná PCR caighdeánach [84]. Toisc go bhféadfadh roinnt primers RT-PCR ceangal le láithreán neamhshonrach, rud a fhágann go bhfuil torthaí dearfacha bréagacha, forbraíodh na measúnachtaí PCR ilphléacs fíor-ama is déanaí ag baint úsáide as dhá shraith de primers [85]. Cuidíonn PCR neadaithe freisin le suíomhanna DNA níos sainiúla agus níos íogaire a aimsiú le tacair bhreise de phriméirí [86,87]. Mar sin féin, is iad na treochtaí reatha maidir le diagnóis leptospirosis ná úsáid a bhaint as teicnící séireolaíocha agus móilíneacha araon, mar PCR agus ELISA (níos éasca ná an caighdeán óir MAT séireolaíoch), do thíortha atá teoranta ó thaobh acmhainní [88,89]. Ina theannta sin, is é an teicníc LAMP [90] chun géine rRNA 16S (rrs) a bhrath, atá éifeachtach ó thaobh costais, tapa agus ard-toraidh chun na leptospires pataigineacha sa fual a bhrath. Faoi láthair, is é NGS an modh cultúir-neamhspleách is cruinne ar anailís ghéanóm lárnach i sreabhán coirp (fuil agus fual) [91] agus is é treo na dtástálacha leptospirosis amach anseo ná bogadh i dtreo aicmiú móilíneach leptospires, rud a sháraíonn an teorannú ar leithlisiú cultúir leptospires ó shamplaí cliniciúla. Mar sin, tá luach PCR i ndiagnóis chliniciúil leptospirosis thar a bheith maith agus tá roinnt teicnící nua-aimseartha ag teacht chun cinn

6.2.2. Brath Antashubstaint Frith-Leptospira

Úsáidtear roinnt diagnóisí séireolaíocha; mar shampla, tástálacha antashubstainte ghéineas-shonracha (hemagglutination indíreach [IHA], measúnacht imdhíon-asorbent einsím-nasctha [ELISA], Lepto Dri Dot [agglutination laitéis], agglutination micreacapsule [MCAT]), agus tástálacha serovar-sonrach antashubstaintí (tástáil agglutination micreascópacha [. MAT]) [92,93]. Mar sin, is iad na critéir MAT chun diagnóis a dhéanamh ná (i) méadú faoi cheathair ar líon na séireataí péireáilte (séirea-thiontú an ionfhabhtaithe reatha) nó (ii) ard-tír amháin (Níos mó ná nó cothrom le 1:400 nó 1:800, níos airde san eipidéim. limistéir) (seirpositivity) (d'fhéadfadh antasubstaintí leanúint ar aghaidh ar feadh tamaill tar éis ionfhabhtú nó tras-imoibriú le galair eile). Ina theannta sin, éilíonn MAT painéal beo de na serovars Leptospira go léir sa réigiún, le painéal de serovars caighdeánaithe go háitiúil [93,94] tar éis na hEagraíochta Domhanda um Shláinte Ainmhithe (19 antaigin ionadaíoch ar 15 séirghrúpa) [95]. Toisc go bhfuil antasubstaintí inbhraite 5-7 lá tar éis an ionfhabhtaithe, is féidir leis an tástáil MAT a bheith diúltach (titer < 1:50) le linn an chéad chúpla lá den ionfhabhtú. Is féidir diagnóis leptospirosis a dhéanamh trí shamplaí fuail [96] ag baint úsáide as séireolaíocht agus braiteadh móilíneach (16S rRNA), go háirithe in othair a bhfuil ionfhabhtú le déanaí orthu (MAT Níos mó ná nó cothrom le 1:800 nó ELISA IgM-dearfach nó an dá cheann) [97] .

Le hacmhainní teoranta, tá scór réamhaisnéis chliniciúil [98] bunaithe ar an stair chliniciúil ábhartha agus tástálacha saotharlainne gaolmhara le scóráil i seacht ngné mar seo a leanas: hypotension (3), jaundice (2), pian muscle (2), AKI (1.5). , haemaglóibin íseal (3), hypokalemia le hyponatremia (3), agus neutrophilia (1) (tá scór gearr gearr de 4 ag an limistéar faoi chuar tréith oibriúcháin an ghlacadóra {{10}}.78 ( 95% CI 0.68–0.89) le haghaidh diagnóis leptospirosis [77]). D’fhéadfadh an scór dóchúlachta Téalainnis-Lepto-ar-iontráil seo a bheith ina uirlis dhiagnóiseach le haghaidh diagnóis toimhdeach luath ar leptospirosis in othair a bhfuil drochamhras cliniciúil acu ar an ngalar.