Coimpléisc Próitéin-Mucilage Nana Bainne: Tréithriú agus Éifeacht Frith-ailse Cuid 1

Mar 19, 2022

Le haghaidh tuilleadh sonraí, déan teagmháil letina.xiang@wecistanche.com


Teibí: Anfrithailsemheall gníomhaíocht na gcomhdhúile nádúrtha le déanaí taighde ildisciplíneach. Sa staidéar seo, rinneadh imscrúdú ar choimpliú próitéiní bainne (MP) le mucilage husk Isabgol (IHM) agus mucilage Ziziphus Spina Christi (NabM). Sa chomhthéacs seo, tomhaiseadh airíonna fisiciceimiceacha coimpléisc mucilage próitéine bainne (MPMC) lena n-áirítear pH, innéacs Carr, tuaslagthacht uisce, agus innéacsanna ionsú uisce, agus rinneadh staidéar ar an iompar sreafa. Ina theannta sin, an phróifíl aimínaigéad, digestibility próitéin, agus feanólacha agusflavonoidsRinneadh iniúchadh ar ábhar MPMC, agus léiríodh micreastruchtúr na gcoimpléasc ag baint úsáide as micreascópacht leictreoin tarchurtha. Tá anfrithocsaídeachagus féidearthachtaí frith-ailse MPMC in aghaidh dhá líne chill ailse, ailse ae daonna HEPG-2 agus ailse chíche MCF-7, i gcomparáid le dhá ghnáthlíne cille, eadhon, Bj-1 agus MCF{{{-2). 3}}F, a thástáil trí úsáid a bhaint as measúnacht neodrach um ghlacadh dearg. Léirigh na torthaí go raibh gníomhaíocht scavenging MPMC i gcoinne fréamhacha DPPH, ABTS, agus HS. Ina theannta sin, tá an cumas ag MPMC damáiste DNA a tharlódh de bharr strus ocsaídiúcháin in imoibriú Type-Fenton a chosc. Léirigh torthaí an mheasúnaithe dhearg neodrach go raibh cosc ​​suntasach ar fhás ar HEPG-2, MCF-7, ach níor aimsíodh aon éifeacht cíteatocsaineach suntasach i gcoinne Bj-1 agus MCF-12F. Léirigh torthaí RT-qPCR apoptosis spreagtha MPMC mar a léirigh an upregulation na marcóirí géine pro-apoptosis Caspase-3, p53, Bax. Idir an dá linn, rinneadh an ghéin frith-apoptóis Bcl-2 a íosrialáil. Mar sin féin, níor breathnaíodh aon difríocht shuntasach i ngnáthlínte cille cóireáilte le MPMC.Mar chonclúid, is féidir MPMC a mheas mar aonán anticancer tuar dóchais inti is féidir a úsáid i bhforbairt teiripeacha ailse núíosacha le gníomhaíocht inchomparáide agus fo-iarsmaí íosta i gcomparáid le cemotherapies ailse traidisiúnta. .

Eochairfhocail: próitéiní bainne; mucilage husk Isabgol; mucilage Nabeq; próitéiní bainne coimpléisc mucilage; gníomhaíocht frith-ailse

flavonoids anti cancer

Cliceáil chun tuilleadh a fhoghlaim faoi na táirgí

1. Réamhrá

Ailsean phríomhchúis le básmhaireacht ar fud an domhain le thart ar 10 milliún bás in 2020 [1]. Is é an t-aon dóchas a bhaineann le hailse a shárú ná diagnóis luath agus forbairt teiripe núíosach. Tá cóireálacha ailse traidisiúnta ar nós ceimiteiripe agus radaíocht sách costasach agus tá fo-iarmhairtí suntasacha ag gabháil leo.

Mar sin, tá spéis san eolaíocht agus sa taighde ag claonadh in úsáid na gcomhdhúile nádúrtha (.i. próitéiní, polaisiúicrídí, agus polaphenóil) óna bhfoinsí a bhfuil acmhainneacht frithcharcanaigineach acu mar go meastar go bhfuil fo-iarmhairtí níos lú tocsaineacha acu i gcomparáid le gnáthchóireálacha.

Polaisiúicrídífuair foinsí plandaí aird mhéadaithe le déanaí mar gheall ar a n-airíonna bithghníomhacha [2,3]. Bhí suim ag go leor staidéir i polaisiúicrídí bithghníomhacha agus polyphenols a leithlisiú ó fhoinsí plandaí nádúrtha cosúil le torthaí, glasraí, gránaigh agus luibheanna mar gheall ar a n-éifeachtaí cógaseolaíochta tairbhiúla [4].

Is foinsí aitheanta de pholaisiúicrídí bithghníomhacha iad Plantago ovata (Psyllium nó Isabgol) agus Ziziphus Spina-Christi (Nabeg nó Sidr). Roghnaíodh an IHM agus NabM mar ábhair bhithghníomhacha a bhfuil gealladh fúthu. Léirigh staidéir roimhe seo gur fheabhsaigh coimpléisc IHM agus NabM le próitéiní bainne feidhm ae agus gur laghdaigh siad an baol galar cardashoithíoch[5]. Tá sé cruthaithe go bhfuil husk Isabgol éifeachtach le haghaidh cóireáil buinneach, constipation, colitis ulcerative, siondróm bputóg irritable, hypercholesterolemia, agus diaibéiteas. Ina theannta sin, cuireadh éifeacht frith-ailse husk isabgol i gcoinne ailse cholaireicteach i leith a n-ábhar snáithíneach, rud a ghníomhaíonn chun a éifeachtaí a laghdú trí am idirthurais a laghdú. Mar thoradh air seo laghdófar meitibileacht bile ag an microflora gut, caolú na n-aigéid bhile trí stól toirtithe, athrú ar mheitibileacht miocróbach aigéid bhile mar gheall ar choipeadh snáithíní, laghdú ar an pH agus táirgeadh aigéid shailleacha slabhraí gearra, nó trí cheangal díreach leis an. aigéid bhile agus dá bhrí sin cosc ​​​​a chur ar a meitibileacht [6]. Is iad na príomhchodanna atá gníomhach go bitheolaíoch de Ziziphus Spina-Christi vitimín C, feanólacht, flavonoids, agus aigéid triterpenic. I measc a chuid bithghníomhaíochtaí tá gníomhaíochtaí frith-ailse, antibacterial, antidiabetic, antiproliferative, agus frithocsaídeacha [7. Úsáidtear torthaí husk Isabgol agus Nabeq chun mucilage husk Isabgol (IHM) agus mucilage Nabeq (NabM) a tháirgeadh, faoi seach [5].

Ar an láimh eile, tá teiripí próitéin-bhunaithe le haghaidh ailse tar éis spéis mhéadaithe a fháil mar gheall ar phríomhghnéithe cosúil le cíteatocsaineacht íseal, sainiúlacht láidir, agus éascaíocht modhnuithe [8]. Chomh maith le riachtanais chothaitheacha aimínaigéid riachtanacha a sholáthar, tá próitéiní bainne i measc na macramóilíní bitheolaíocha a bhfuil go leor airíonna feidhmiúla acu mar airíonna frithocsaídeacha, inmunomodulatory, antidiabetic, antimicrobial, agus frith-ailse [9,10]. Mar shampla, an ghníomhaíocht frithailse de pheptídí díorthaithe déiríochta (.i., -casomorphins scoite ó -casein agus 1-blúirí cáiséin 90-95 agus 90-96[Arg90-Tyr-Leu Tacaíonn -Gly-Tyr-Leu95-(Glu96)]) a aithníodh i mbainne bó leis an toimhde go bhfuil luach cothaitheach ag baint le próitéiní bainne ní hamháin ach go bhfuil an poitéinseal acu ailse a chosc agus a chóireáil freisin [11,12]

Táirgeadh coimpléasc idir próitéiní bainne agus polaisiúicrídí, cosúil le próitéiní bainne-chitosan casta, roimhe seo mar iarracht feabhas a chur ar airíonna feidhmiúla a gcomhpháirteanna nádúrtha [13]. Mar gheall ar infhaighteacht agus éascaíocht ullmhúcháin, d’fhéadfaí leas a bhaint as coimpléisc den sórt sin chun teiripí frith-ailse níos saoire a fhorbairt. Ní bheidh teiripí den sórt sin chomh costasach agus léireoidh siad gníomhaíocht inchomparáide leis na ceimiteiripe a úsáidtear faoi láthair.

Is iad ceangailteach neamhchomhfhiúsach trí idirghníomhaíochtaí hidreafóbach agus leictreastatacha na príomhfhachtóirí a bhaineann le próitéiní bainne a chomhcheangal lepolaisiúicrídí[14]. Thairis sin, léiríonn próitéiní athléimneacht iontas i dtreo idirghníomhú le comhpháirteanna eile ag an raon pH ó 2 go 11. Ag pH ar leith, méadaíonn imoibríocht dromchla próitéine trí struchtúr próitéine a dhífhilleadh [15].

Sa chomhthéacs seo, dhírigh ár ngrúpa le déanaí ar ról feidhmiúil coimpléisc próitéine bainne ar shláinte an duine. Mar sin féin, tá coimpléisc próitéine bainne le IHM nó NabM, tar éis airíonna frithhyperlipidemic agus cosanta ae a thaispeáint [9]. Mar sin, bunaithe ar staidéir roimhe seo, measadh go bhféadfadh gníomhaíocht fhrithailse suimiúil a bheith ag coimpléisc phróitéin-pholaisiúicríde bainne. Ina theannta sin, ní dhearna aon fhoilseachán staidéar ar ghníomhaíocht frith-ailse i gcoimpléisc próitéiní bainne le IHM agus NabM. Dá bhrí sin, ba iad príomhchuspóirí an staidéir seo tréithe fisiciceimiceacha na gcoimpléisc mucilage próitéine bainne nua-tháirgthe a shainiú lena n-áirítear, próifíl aimínaigéad agus airíonna feidhmiúla na gcoimpléisc sin. Ina theannta sin, rinneadh imscrúdú ar ghníomhaíocht frith-ailse i gcoimpléisc próitéine bainne le mucilage IHM agus NabM i gcoinne dhá chill ailse daonna (MCF7 agus HEPG2) i gcomparáid le línte cille neamhailse (Bi-1 agus MCF-12F). ). Chuireamar solas freisin ar mhodh gníomhaíochta na gcoimpléisc mucilage de phróitéiní bainne a tháirgtear.

flavonoids antioxidant

2. Torthaí agus Plé

2.1. Speictreascópacht Infridhearg Fourier-Transform (FTIR).

Léirítear speictream infridhearg IHM, MP, agus MP/IHM i bhFíor 1A. Thaispeáin an speictream IHM banda saintréith na n-arabinocsailín ag 100-1200 cm-1 agus na bandaí do na grúpaí aimíde I agus aimíd II ag 1550 agus 1650 cm-1, faoi seach. Taispeánann an speictream MP bannaí ag 1700-1600 agus 1200-900 cm-I a fhreagraíonn do amide I (go príomha C=O síneadh próitéiní) agus carbaihiodráití bainne, faoi seach [16]. Áiríodh na buaiceanna thuasluaite de IHM agus MP i speictream an choimpléasc IHM/MP. Mar an gcéanna, coinníodh na bandaí saintréithe d'aigéad galacturonic i NabM i speictream an choimpléasc NabM/MP (Fíor 1B). Thabharfadh sé seo le fios nach bhfuil idirghníomhú ceimiceach idir mucilage polaisiúicríde agus MP agus mar sin deimhníonn sé an mheicníocht atá beartaithe maidir le tarraingt leictreastatach idir MP agus polaisiúicrídí (IHM agus NabM). Tá tuairimí den sórt sin ag teacht le tuairimí Vukic et al, a thuairiscigh an foirmiú casta idir próitéiní bainne meadhg agus peictin trí idirghníomhaíochtaí leictreastatacha agus hidreafóbach, rud a d'eascair comhsheasmhacht mhaith sa choimpléasc [17].

 (A) Fourier-transform infrared spectra of MP, IHM, and MP/PHM. (B) Fourier-transform infrared spectra of MP, IHM, and MP/NabM. NabM: Nabeq mucilage, IHM; Isabgol husk mucilage, MP: milk proteins concentrate, MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex, MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex

2.2. Airíonna Fisiceimiceacha agus Feidhmiúla MP agus MPMC

Tá luachanna an dlúis bulc (BD), dlús tapáilte (TD), Innéacs Carr, agus tomhais pH liostaithe i dTábla 1. Bhí BD agus TD MP níos airde ná IHM, agus bhí an dlús toirte agus tapáilte is ísle de na samplaí tástálaithe ag IHM. . Ar an dul céanna, bhí coimpléasc MP/IHM suntasach (lch<0.05) lower="" bulk="" and="" tapped="" density="" compared="" to="" mp/nabm.="" the="" obtained="" results="" indicated="" that="" the="" distribution="" and="" solubility="" of="" mp="" have="" been="" improved="" by="" complexation="" with="" the="" ihm.="" carr's="" index="" is="" frequently="" used="" as="" an="" indication="" of="" the="" flowability="" of="" powders.="" the="" results="" in="" table="" 1="" show="" that="" carr's="" index="" of="" mpmc="" was="" significantly="" lower="" than="" ihm="" which="" indicated="" that="" nabm="" improved="" the="" flowability="" of="" mp.="" this="" was="" probably="" due="" to="" the="" lower="" carr's="" index="" value="" of="" mp(30.6±="" 0.10%)="" compared="" to="" ihm="" and="" nabm="" (57.58±0.14="" and="" 53.97±0.11%,="" respectively)which="" are="" vicious.ihm="" is="" alkaline="" (7.79="" ph)="" while="" mp="" and="" the="" complexes="" with="" polysaccharide="" mucilage="" were="" slightly="" acidic="" which="" came="" in="" accordance="" with="" previously="" reported="" results="">

Is gnéithe tábhachtacha feidhmiúla iad MSU agus WAI i dteicneolaíocht an bhia. Léiríonn Tábla 1 gur tháinig méadú suntasach ar WSI agus WAI MP tar éis casta le IHM agus NabM. Is dóichí go raibh sé seo toisc go bhfuil ábhair atá bunaithe ar Isabgol intuaslagtha go mór in uisce le héifeacht ramhraithe tar éis méideanna leordhóthanacha uisce a chur leis [19]. Ina theannta sin, Qaisrani et al. thuairiscigh siad go bhfuil cumas coinneála uisce suas le deich n-uaire níos mó ná a meáchan tirim ag arabinoxylans de husk Isabgol [20]. Ina theannta sin, tá MSU agus WAI níos airde ag MP/IHM ná ag MP/NabM ós rud é go bhfuil MSU agus WAI níos airde ag IHM ná ag NabM. Ina theannta sin, mar thoradh ar an méadú ar WSI faoin gcéad do MPMC i gcomparáid le MP tháinig méadú ar scaiptheacht na gcomhpháirteanna gníomhacha sprice agus iad á n-úsáid i saincheisteanna teiripeacha [21]. Bhí sé seo soiléir sna torthaí frith-ailse a léirigh go bhfuil éifeacht cíteatocsaineach ag na coimpléisc seo ná MP.

Physicochemical and functional characteristics of MP, NabM, IHM, and MPMC

2.3. Comhpháirteanna Bithghníomhacha

2.3.1. Comhdhúile Feanólacha PHM agus NabM

Tá comhdhúile bithghníomhacha an-tábhachtacha i mbia (.i. feanólacha agus flavonoids) a fheidhmíonn mar chumas frithocsaídeach agus frith-ailse. Dheimhnigh agus chainníochtaigh anailís HPLC láithreacht go leor comhdhúil feanólacha i Nab agus IHM mar a léirítear i bhFíor 2. Léiríonn na torthaí an t-ábhar ard i gcomhdhúile éagsúla atá gníomhach go bitheolaíoch ar nós aigéad galach (177.96 mg/Kg), catechol(13.87 mg/Kg). p-Hidrocsa aigéad beansóch (24.02 mg/Kg), Catechin (5.93 mg/Kg) agus rutin (123.70mg/Kg) i sliocht PHM agus Catechol (410.72mg/Kg) p-Hidroxy aigéad beansóch (426.71mg/Kg) Chloigineach (72.05 mg/Kg)Rutin (1750.57 mg/Kg), agus rosemarinic (1771.72 mg/Kg) i NabM (Fíor 2A,B). Tá ábhar na gcomhdhúile seo an-tábhachtach le haghaidh sochair sláinte. Tuairiscíodh éifeacht frith-ailse na gcomhdhúile feanólacha roimhe seo. Cuireadh an éifeacht seo i leith go príomha le héifeacht frithocsaídeach na gcomhdhúile seo.

2.3.2. Gníomhaíocht Iomlán Feanólach, Flavonoid, agus Frithocsaídeach de MP agus MPMC

Tá sé tugtha le fios i roinnt tuarascálacha go léiríonn comhdhúile a thaispeánann airíonna frithocsaídeacha gníomhaíocht frith-ailse den chuid is mó[22]. Socraíodh ábhar iomlán feanólach (TP) agus iomlán flavonoid (TF) i NabM, IHM, MP, agus a gcoimpléisc (Fíor 3A, B). Léirigh na torthaí go raibh TP agus TF níos airde i NabM agus MP/NabM i gcomparáid le IHM agus MP/IHM. Mar sin féin, bhí inneachar TP agus TF i bhfad níos ísle i MP i gcomparáid le MPC. Tháinig na torthaí seo ar chomhaontú leis na sonraí a thuairiscigh Singh et al.[23] a fuair amach go raibh TP agus TF de NabM 1.6 GAE mg/100 g meáchan tirim agus 47 mg CE/100g meáchan tirim, faoi seach. Léirigh coimpléisc MP/NabM agus MP/IHM méadú suntasach de 309 faoin gcéad agus 59 faoin gcéad i TP agus 476 faoin gcéad agus 123 faoin gcéad i TF i gcomparáid le MP, faoi seach. Mar thoradh ar chomhchuingeach MP le IHM agus NabM cailleadh 23 faoin gcéad agus 36 faoin gcéad de IHM comhfhreagrach TPC agus NabM, faoi seach. Laghdaíodh TF faoi 44 faoin gcéad in IHM agus 46 faoin gcéad i NabM nuair a choimpléascaíodh é le MP. Is dócha gur tharla sé seo mar gheall ar an íseal TP agus TF de MP.

HPLC analysis of polyphenolic profiles of (A) IHM and (B) NabM

Total phenolic and total flavonoid content (A,B) and antioxidant activity (C–E) of MP, IHM, NabM, and MPMC. MP: milk proteins concentrate; IHM: Isabgol husk mucilage; NabM: Nabeq mucilage; TPC: total phenolic content; GAE: gallic acid equivalent; TF: total flavonoid; CE: catechin equivalent; DW: dry wight; DPPH: 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl; ABTS: 2,20 -azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid; HS: hydroxyl scavenging; Values are means ± SD (n = 3). Measurements with different letters (a, b, c, d, and e) are significantly different (p < 0.05)

Léirítear i bhFíor 3C-E an ghníomhaíocht scavening radacach ionchasach de MP/IHM agus MP/NabM i gcomparáid le MP a úsáideann DPPH, ABTS, agus HS. Bhí treocht chomhchosúil ag na sonraí a fuarthas ó na trí ghníomhaíocht frithocsaídeoirí a léirigh gur léirigh NabM gníomhaíocht frithocsaídeach níos airde ná IHM agus tá sé seo i gcomhthéacs thorthaí feanólachta agus

ábhar flavonoids. Méadaíodh cumas frithocsaídeach MP tar éis casta le NabM agus IHM. Cé is moite de mheasúnacht ABTS, tháinig méadú ar ghníomhaíocht frithocsaídeach NabM trí chomhchuingeachadh le MP. Léirigh an ghníomhaíocht frithocsaídeach go raibh gníomhaíocht frithocsaídeach níos airde ag MPMC i gcomparáid le MP. Léiríonn ár hipitéis idirghníomhú féideartha idir MP agus polaisiúicrídí as a dtagann an ghníomhaíocht fhéideartha frithocsaídeach a fháil mar a thuairiscítear ag Li et al. [24]. Tuairiscíodh roimhe seo go bhfuil comhghaol dearfach idir an toilleadh scavening agus an cion feanólach/flavonoids 5]. Mar sin féin, ní féidir linn a eisiamh go dtáirgtear peiptídí bithghníomhacha nua saibhrithe le aimínaigéid ina bhfuil sulfair, rud a mhíníonn ardghníomhaíocht frithocsaídeach MPMC i gcomparáid leis na comhpháirteanna neamhchasta. Thairis sin, scaoiltear na peptídí beaga i gcodáin meadhg a mbíonn tionchar acu ar na hairíonna frithocsaídeacha ard [4]. Ar deireadh, bíonn tionchar ag ábhar feanólach agus flavonoid ar chealla ailse éagsúla. Ina theannta sin, le linn measúnachtaí cultúir cille in vitro, breathnaíodh na gníomhaíochtaí agus na meicníochtaí seo. Cuirtear gníomhaíochtaí frithocsaídeacha agus frith-ailse feanólacha i leith bannaí dúbailte agus ionaid hiodrocsaile ar na fáinní aramatacha [25].

flavonoids clear free radicals

2.4.Amino Aigéad Próifíl MP agus MPMC

Próifílí aimínaigéad de MP, NabM, MP/IHM, agus MP/NabMare léirithe i bhFíor 4. Ní raibh aon difríochtaí suntasacha i bpróifílí aimínaigéad MP agus a choimpléisc le IHM agus NabM. Léirigh sé seo nár athraigh idirghníomhaíocht neamhchomhfhiúsach MP le mucilage polaisiúicríde comhdhéanamh próitéiní bainne. Léiríonn na torthaí an t-ábhar ard aigéad glútamach i MP agus MPMC (Fíor 4) [26].

Amino acid profile of MP, MP/IHM, and MP/NabM. MP: milk proteins concentrate, MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex and MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex.* essential amino acids

2.5. Airíonna Rheological MP agus MPMCs

2.5.1.Slaodachas dealraitheach

Léiríonn Fíor S1 slaodacht na samplaí próitéine ag luachanna rpm éagsúla. Bhí slaodacht ard ag IHM agus NabM ag rothlú mall, ach tháinig laghdú suntasach ar an slaodacht mar a mhéadaigh an luas rothlaithe. Bhí na torthaí seo i gcomhaontú le Chen agus Che a thaifead gur laghdaigh slaodacht dealraitheach mucilage intuaslagtha in uisce de laver glas (Monostroma iridium) trí mhéadú ar an ráta lomadh [27].

Léiríonn na torthaí i bhFíor S1 freisin gur tháinig méadú suntasach (p Níos lú ná nó cothrom le 0.05)ar shlaodacht dealraitheach MP mar thoradh ar choimpliú MP le IHM agus NabM. D'fhéadfaí é seo a chur i leith airíonna uathúla IHM (ábhar hidreacollóideach) a bhfuil éifeacht feabhsaithe slaodachta aige [28].

2.5.2.Iompar Sreafa

Léirítear iompar sreafa (strus lomtha/cuair ráta lomadh) próitéiní bainne agus a gcoimpléisc i bhFíor S2. Leis an méadú ar ráta lomadh, mhéadaigh strus lomadh. Agus na sonraí maidir le strus lomadh agus ráta lomadh a athrú go dtí an chothromóid dlí cumhachta, léirítear luachanna an innéacs comhsheasmhachta sreafa (K) agus an t-innéacs iompraíochta sreafa (n) i dTábla S1.IHM agus bhí an t-innéacs comhsheasmhachta sreafa is airde ag MP/IHM. D'fhéadfadh sé seo a bheith mar gheall ar shlaodacht ard mucilage intuaslagtha in uisce de IHM mar gheall ar a chumas ard chun uisce a choinneáil agus glóthaithe i meán uiscí. Léirigh na torthaí freisin go raibh iompraíocht lomadh lomadh (sreabháin neamh-Newtonian) ag IHIM, NabM, agus MP/IHM le luach n íseal ó 0.25 go 0.64. Tháinig na torthaí seo i gcomhréir le Thanatcha agus Pranee a rinne staidéar ar airíonna fisiciceimiceacha Ziziphus mauritiana[29]. Ar an láimh eile, bhí luach n MP thart ar 1(0.99) ag léiriú sreabhadh Newtonian. Mar an gcéanna, ba é an luach n don choimpléasc MP/NabM ná 0.95 mar a thaispeántar i dTábla S1.

2.6.Calraiméadracht Scanadh Difreálach MP agus MPMC

Baineadh úsáid as calraiméadracht scanadh difreálach chun cobhsaíocht theirmeach MP agus a choimpléisc a imscrúdú le IHIM agus NabM. Léirítear teirmeagraim MP agus MPMC i bhFíor S3, agus soláthraítear na paraiméadair DSC i dTábla 2. Tugadh faoi deara nach raibh aon bhuaic inteirmeach soiléir ar an teirmeagram MP, ach bhí buaic inteirmeach feiceálach do MP/IHM agus a buaic inteirmeach leathan do MP/NabM. Is dócha go bhfuil sé seo mar gheall ar dhíchur uisce saor in aisce de réir a chéile, leáphointe NabM, geiliú mall, agus dínádúrú próitéine [30].

Tugadh faoi deara freisin go raibh MPMC níos cobhsaí ó thaobh teasa ná próitéin neamhchasta mar a breathnaíodh ag an teocht dínádúraithe íseal MP (101.44 céim ) i gcomparáid le MP/IHM agus MP/NabM (148.24 agus 121.4 céim, faoi seach) mar a léirítear i dTábla 2. Ina theannta sin, taifeadadh teocht díghrádaithe BP mar 302.3 céim, ach níor tugadh faoi deara aon díghrádú MPMC le méadú teochta suas le 350C. Bhí na torthaí seo ag teacht le roinnt staidéar, a d'aimsigh gur mhéadaigh cobhsaíocht theirmeach próitéiní bainne mar gheall ar an idirghníomhú le comhdhúile feanólacha a chuir cosc ​​​​ar chomhiomlánú próitéine [2,31].

Is é an eantalpacht (AH) an teas a théann isteach sa chóras nó amach as le linn imoibriúcháin. D’fhéadfadh an eantalpacht níos airde MP/IHM agus MP/NabM i gcomparáid leis an MP neamhchoimpléascach a bheith mar gheall ar an imoibriú ceimiceach féideartha idir próitéiní bainne (meadhg agus cáiséin) agus idir próitéiní bainne agus polaisiúicrídí ag teocht ard (imoibriú Maillard)[ 31.

Differential scanning calorimetry (DSC) parameters of MP and MPMC *

2.7.Micreascópacht Leictreon Tarchurtha (TEM) de MP agus MPMC

Taispeánann Figiúr 5 micreastruchtúr IHM, NabM, MP, agus MPMC. Fuarthas amach go raibh méid na gcáithníní MPMC sa raon nana (114-250 nm), agus go raibh sé níos lú ná méid na gcáithníní de MP(191-300 nm). Ina theannta sin, léirigh TEM MPMC (Fíor 5D, E) patrún brainseach na gcoimpléisc foirmithe. D’fhéadfaí é seo a chur i leith an mhealladh leictreastatach idir próitéiní bainne agus polaisiúicrídí Goh, et al. [32]. Ina theannta sin, d'fhéadfadh struchtúr brainseach níos mó MP/IHM i gcomparáid le MP/NabM a bheith freagrach as a shlaodacht níos airde mar a léirítear i bhFíor S1.

Transmission electron microscopy of (A) MP; (B) IHM; (C) NabM; (D) MP/IHM; and (E) MP/NabM. MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex.

Transmission electron microscopy of (A) MP; (B) IHM; (C) NabM; (D) MP/IHM; and (E) MP/NabM. MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex.

flavonoids anti-inflammatory

2.8. Staidéar Bitheolaíochta ar MP agus MPMC

2.8.1. Gníomhaíocht frith-ailse MP agus MPMC

Éifeacht cítotocsaineach na dtiúchan éagsúla (1, 5, 10, agus 20 ug/mL) de MP agus MPMC ar chealla HepG-2 agus MCF{-7 i gcomparáid le MCF-12F agus Bij{ Tá {7}} gnáthchealla léirithe i bhFíoracha 6 agus 7. Taispeántar éifeacht frith-ailse MPMC ar chealla HepG-2 agus MCF-7 Fíor 6A, B, faoi seach. Léirigh an cuar dáileog-fhreagrach laghdú ar inmharthanacht cille mar fhreagra ar thiúchan níos airde. Ar an láimh eile, níor breathnaíodh aon éifeacht cíteatocsaineach suntasach MP agus MPMC ar ghnáthchealla Bj-1 agus MCF{{-12F (Fíor 6C, D). Léirigh ár dtorthaí freisin go raibh gníomhaíocht frith-ailse níos airde ag MP/NabM i gcoinne línte cille ailse HepG-2 agus MCF{{{{{{5}), le luachanna IC50 5.13 agus 10.07 ug/mL, faoi seach. Ina theannta sin, léirigh MP/IHM éifeacht measartha cíteatocsaineach i gcoinne línte cille ailse i gcomparáid le rialuithe faoi seach. San iomlán, tugann ár sonraí cíteatocsaineacha le fios go gcuireann casta MP le IHM agus NabM go mór leis an ngníomhaíocht frith-ailse i gcomparáid le próitéiní bainne neamhchasta, mar a léirítear i dTábla 3. Ba léir freisin go raibh cealla Hep G-2 níos íogaire do MP agus MPMC. i gcomparáid le cealla MCF{-7 mar atá léirithe ag luachanna níos ísle IC50.

. The anticancer activity of MP, MP/NabM, and MP/IHM on HepG-2 (A), MCF-7 (B), Bj-1 (C), and MCF-12F (D) cell lines at different concentrations (1, 5, 10, and 20). The cytotoxicity was evaluated calorimetrically by neutral red uptake assay. MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex. Three replicates of each treatment were analyzed. Measurements with different letters (a, b, c and d) are significantly different (p < 0.05)

Morphology of human cancer cell lines and normal cell lines; HepG-2 (A), MCF-7 (B), MCF12F (C), and BJ-1 (D) before and after treatment with MP and MPMC. MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex.

Cancer cytotoxic IC50 of MP and MPMC on HEPG-2, MCF-7, MCF7-12F, and Bj-1 cells

Tuairiscíodh roimhe seo an éifeacht frith-ailse a bhaineann le peiptídí antitumor próitéine bainne. Sa chomhthéacs seo, thug Jeong agus Hong [33] faoi deara go raibh éifeacht cíteatocsaineach ag hidrealáití trypsin de -lactalbumin ar ailse cnámh daonna SJSA-1, ailse cholaireicteach daonna HCT 116, agus línte cille ailse gastric daonna NCI-N87. Fuarthas amach go n-idirghníomhaíonn o-lactalbumin, le modhnóirí dromchla cille agus athraíonn sé ráta fáis cille, cailciam intracellular, agus an ráta iompair cailciam [34]. Is fiú a thabhairt faoi deara gur spreagtha lactoferrin bó apoptosis i gcealla MCF7 ar bhealach dáileog-spleách [35]. Thairis sin, léirigh na codáin cáiséin agus próitéin meadhg bainne éifeachtaí antitumor i múnla ainmhíoch chomh maith le gníomhaíocht antiproliferative in vitro [36]. Ina theannta sin, Elzoghby et al.[37] Thuairiscigh gur féidir nanacháithníní cáiséin a úsáid chun an druga frith-ailse hidreafóbach, flutamide a chuimsiú, chun scaoileadh an druga a rialú, a ghníomhaíocht frith-meall a fheabhsú, agus a heipittocsaineacht a laghdú.

Tuairiscíodh éifeacht frith-ailse IHIM agus NabM roimhe seo [6,38]. D'fhéadfaí éifeacht cíteatocsaineach MP agus MPMC a chur i leith láithreacht aimínaigéid cosúil le glutamine, arginine, agus cistéin a thuairiscítear go léiríonn gníomhaíocht frith-ailse i gcoinne ailse cholaireicteach [39]. Tá na torthaí seo ag teacht le hábhar ard aigéad glútamach MPMC (Fíor 5).

2.8.2. Cinneadh leibhéal P53, Bax, Caspase-3, agus Bd-2 Próitéiní

Chun meicníocht cíteatocsaineachta MPMC a imscrúdú, socraíodh leibhéal na bpróitéin marcála apoptosis p53, Bax, Caspase-3, agus Bcl-2 in HepG-2, MCF-7 , Bj-1, agus MCF-12Línte cille F cóireáilte le ICanna0 de MPMC (Fíor 8). Tá baint ag leibhéal na marcóirí pro-agus frith-apoptotic le hionduchtú apoptóis i línte cille ailse[40,41]. Thug na torthaí le fios go bhfuil apoptosis feabhsaithe MP/NabM agus MP/IHM i HepG-2 agus MCF{-7, ach nach bhfuil sé i gcilllínte MCF{-12F agus Bj{-1). Mhéadaigh leibhéal na caspase-3, p53, Bax go suntasach i gcomparáid leis na rialuithe faoi seach (Fíor 8), ach laghdaíodh próitéin Bcl-2 i ngach cóireáil. Suimiúil go leor, léirigh MP freisin athrú suntasach i marcóirí próitéin apoptosis. Bhí sé seo comhsheasmhach le torthaí an staidéir frith-ailse agus d'fhéadfaí tagairt a dhéanamh dó mar éifeacht cíteatocsaineach roinnt peiptídí díorthaithe próitéine bainne mar a pléadh thuas (Mír 2.8.1).

Protein levels of apoptosis biomarker. The level of Caspase-3 (A), p53 (B), Bax (C), and Bcl-2 (D) in HepG-2, MCF-7, Bj-1, and MCF-12F treated with or without the IC50 of MP, MP/NabM, and MP/IHM. MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex. Data are average of triplicates. Measurements with different letters (a, b, c and d) are significantly different (p < 0.05)

2.8.3.DNA Cosaint Damáiste ag MPMC ar Scoilteacht Ocsaídeach ar RNH1 Plasmid

Tá trí fhoirm ag an DNA plasmid RNH1 ar leictreafóiréis glóthach agarose a ordaítear ó bhun go barr mar DNA ciorclach oscailte, líneach agus supercoiled. Mar gheall ar strus ocsaídiúcháin imoibrí Fenton rinneadh damáiste DNA. Ina dhiaidh sin, athraítear leibhéal na bhfoirmeacha DNA. Mar sin féin, léiríonn foirmeacha ciorclach agus líneacha oscailte damáiste DNA agus léiríonn DNA ciorclach supercoiled cumas cosanta níos mó. Sa mheasúnacht seo, rinneamar tástáil ar cibé an féidir le MP agus MPMC ag a n-IC50 cosaint a thabhairt i gcoinne díghrádú foirm chiorclach supercoiled mar fhreagra ar strus ocsaídiúcháin. Mar thoradh air sin, léirigh MP/NabM agus MP/IHM araon cumas cosanta ard cosúil le rialú DNA (lánaí 3 agus 4, Fíor 9A). Ar an láimh eile, níor breathnaíodh aon difríocht shuntasach i DNA cóireáilte le MP i gcomparáid le rialú DNA agus DNA cóireáilte le himoibrí Fenton amháin (lána 5).

DNA damage protection by MP/NabM and MP/IHM. (A) The protective capacity MP/NabM, MP/IHM, and MP against RNH1 plasmid DNA damage induced by Fenton's reagent. (B) The protective capacity MP/NabM, MP/IHM, and MP against genomic DNA damage. Lane 1: DNA control, lane 2: DNA treated with Fenton's reagent, lane 3: DNA treated with Fenton's reagent plus MP/NabM, lane 4: DNA treated with Fenton's reagent plus MP/IHM, and lane 5: DNA treated with Fenton's reagent plus MP. MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex

2.8.4.DNA Cosaint Damáiste ag MPMC ar Scoilteacht Ocsaídeach DNA Géanómach

Ag baint úsáide as an teicníc PCR, scrúdaíodh airíonna cosanta MPMC ar dhamáiste DNA géanómaíoch de bharr imoibriú Fenton. Go ginearálta, laghdaíonn damáiste DNA an líon cóip de ghéinte áirithe, rud a tháirgeann déine banna níos ísle i leictreafóiréis glóthach. Tástáladh géine MTHFR banda-dlúis de DNA géanóm fola arna ghoradh le himoibrí Fenton le agus gan na IC5s0 de MP, MP/NabM, agus MP/IHM. Fuarthas amach gur chuir MP/NabM agus MP/IHM (lánaí 3 agus 4, Fíor 9B) cosc ​​ar dhamáiste DNA, agus gur chosain siad suíomh gearrtha teimpléid MTHFR ina dhiaidh sin. Dá bhrí sin, táirgeadh déine banna táirge PCR níos airde sa fhoirmiú leictreafóiréis i gcomparáid le rialuithe faoi seach (Fíor 9B). Léirigh na torthaí seo gur chuir gníomhaíocht frithocsaídeach MPMC bac ar tháirgeadh fréamhacha saor in aisce a rinne idirghabháil ar dhamáiste DNA.

2.8.5. Léiriú Géine

I gcomhaontú le marcóir próitéin apoptosis a fuarthas sonraí, léirigh torthaí RT-qPCR gur spreag gor na gcealla HepG-2, MCF-7 le MP, MP/NabM, agus MP/IHM upregulation suntasach de pro- marcóirí mRNA apoptotic, is iad sin, Casp3, p53, agus Bax, ach bhí leibhéal slonn an marcóir frith-apoptotic Bcl-2 síos go suntasach (Fíor 10A-D). Is próitéiní gníomhaithe iad caspases a bhfuil ról ríthábhachtach acu i dtionscnamh agus i gcothú apoptóis. Mar sin féin, tá upregulation próitéin caspase 3 ina tháscaire ar fhorghníomhú an phríomhchonair intreach de apoptosis (Fíor 10A, B) arb iad is sainairíonna titim an membrane mitochondrial le scaoileadh cytochrome c Bax-spreagtha, agus gníomhachtú caspase 9 as a dtiocfaidh an. gabháil caspase 3 ina dhiaidh sin [42]. Léirigh uas-rialáil Casp3, p53, agus Bax, chomh maith le laghdú slonn Bcl-2 gur spreag MP, MP/NabM, agus MP/IHM apoptosis. Maidir leis seo, le hathrialú léiriú spreagtha p53 de Bax, rud a spreagfaidh scaoileadh cytochrome c, ina dhiaidh sin gníomhachtú caspase-9 agus -3. Mar sin féin, is eol go gcuireann Bcl-2 mar fhrithapoptosis bac ar scaoileadh cytochrome c [43], mar thoradh ar an gcóireáil tháinig laghduithe suntasacha ar leibhéil tras-scríbhinne mRNA na géine marcóra frith-apoptotic Bcl-2 mar gheall ar Cóireáil MP/NabM agus MP/IHM, a éascaíonn scaoileadh cíteochróim Bax-spreagtha c agus apoptosis ina dhiaidh sin. Sa staidéar seo, rinne MP/NabM idirghabháil mhór ar apoptosis i gcomparáid le MP/IHM agus MP mar a breathnaíodh i (Fíor 10). Éifeachtaí frith-ailse breathnaithe MP/NabMor Téann MP/IHM ar aghaidh trí mhodhnú cosán apoptosis cleithiúnach ap53-ó rinneadh a leibhéil tras-scríbhinní próitéine agus mRNA araon a uasghrádú go suntasach.

Analysis of apoptosis genes transcript in HepG-2, MCF-7, Bj-1, and MCF-12F cells treated with MP, MP/IHM, and MP/NabM. Profiling of mRNA transcript levels of key pro- (Casp3 (A), p53 (B), Bax (C) and anti-apoptotic Bcl-2 (D)). Gene expression levels were quantified after 72 h by RT-qPCR employing 18S as a housekeeping gene for normalization as detailed in the methods. Significant differences between the means of individual treatments and control were analyzed by one-side Student's t-test. Histograms represent mean expression level as fold change SD for 3 technical and 2 biological replicas with different letters (a, b and c) are significantly different (p-value ≤ 0.05). MP: milk proteins concentrate; MP/NabM: milk proteins/Nabeq mucilage complex; MP/IHM: milk proteins/Isabgol husk mucilage complex


Cliceáil ar an nasc chun tuilleadh eolais a fháil:https://www.xjcistanche.com/news/nano-milk-protein-mucilage-complexes-characte-55049190.html



B’fhéidir gur mhaith leat freisin