Coimpléisc Próitéin-Mucilage Nano Bainne: Tréithriú agus Éifeacht Frith-ailse Cuid 2

Le haghaidh tuilleadh eolais, déan teagmháil letina.xiang@wecistanche.com

Cliceáil ar an nasc chun cuid 1 a fhoghlaim:https://www.xjcistanche.com/news/nano-milk-protein-mucilage-complexes-characte-55049142.html

3. Ábhair agus Modhanna

3.1. Ábhair

Ceannaíodh cromán Plantago ovata (fo-sprioc) agus torthaí aibithe Ziziphus Spina-Christi(Nabeq) ó Giza san Éigipt; ceannaíodh tiúchan próitéine bainne (MP,81.3 faoin gcéad próitéin) ó chuideachta Fonterra (Auckland, an Nua-Shéalainn). Tá na próitéiní cáiséin agus meadhg i MPC den chuid is mó ina bhfoirm dhúchasach agus cosúil, micellar, leo siúd a fhaightear i mbainne. Bhain íonacht anailíseach le gach ceimiceán a úsáideadh.

3.2.Isabgol Husk Mucilage (IHM) agus Nabeg Mucilage (NabM) a ullmhú

Ullmhaíodh mucilage husk Isabgol (IHM) agus mucilage Nabeq (NabM) de réir an mhodha a ndearna El-Maksoud et al cur síos air. [5]. Go hachomair, ullmhaíodh fionraí isabgol cromáin trí 1.2 g a thuaslagadh in uisce driogtha 100 ml agus é a íonú le tuaslagán aicéatón. Stóráladh an glóthach mar thoradh air sa chuisneoir (4-5 céim ) go dtí gur úsáideadh é.

Maidir le NabM, nigh na torthaí Nabeq aibí go críochnúil le huisce sconna chun salachar a bhaint. Scaradh na torthaí úra ó na síolta agus meascadh iad le huisce driogtha ag cóimheas 1:10 (w/v) tar éis iad a ghearradh i bpíosaí beaga. Rinneadh an meascán a chumasc le cumascóir saotharlainne (Toshiba Mixie, an tSeapáin) agus ligeadh dó seasamh ar feadh 12 uair sa chuisneoir.

Ansin lártheifníodh an sliocht mucilaginous ag 2000 rpm ar feadh 30 nóiméad agus scagadh trí éadach muslin. Bhí an mucilage intuaslagtha slaodach mar thoradh air sin deasctha le haicéatón. Stóráladh an mucilage amh a fuarthas sa chuisneoir go dtí go n-úsáidfí é.

Chun críocha anailíse, triomaíodh an mucilage in oigheann aeir ag 40 céim agus meilte ag baint úsáide as muileann liathróid MM400(Retsch, an Ghearmáin). Tá comhdhéanamh ceimiceach púdar mucilage psyllium husk (PHMP) agus púdar mucilage Nabeq (NabMP) tomhaiste. Ba é an taise, próitéin, saill, fuinseog, amhshnáithín, agus ábhar iomlán carbaihiodráit ná 8.49, 0.34,0.21,2.13,1.53, agus 87.44 faoin gcéad do PHMP agus 9.18,4.72,2.05,2.69,1.70, agus 78.26 faoin gcéad do NabMP , faoi seach. Stóráladh an púdar dá bharr ag teocht fhionnuar (4-5 céim ) go dtí go ndéanfaí anailís bhreise air.

Cliceáil chun tuilleadh eolais a fhoghlaim

3.3. Ullmhú Coimpléasc Próitéin-Mucilage Bainne (MPMC)

Ullmhaíodh coimpléisc próitéine bainne (MP) le IHM agus NabM de réir Morr et al.with roinnt modhnuithe [44]. Athdhéantar tiúchan próitéine bainne in uisce driogtha(10 faoin gcéad ). Meascadh an collóideach próitéine bainne dá bharr le IHM agus NabM ag cóimheas 1:3 (o/o). Coigeartaíodh pH an mheascáin go 10 agus fágadh é chun seasamh ar feadh 10 nóiméad. Tar éis sin, íslíodh an pH go 3.5 ag baint úsáide as 0.1 N HCl agus d'fhág sé ar feadh 10 nóiméad eile. Coigeartaíodh an pH ansin go pH 4.6 ag baint úsáide as 0.5 M NaOH chun scagachán MPMCby a bhailiú ar pháipéar scagaire: triomaíodh MP, chomh maith leis an MPMC dá bharr, trí lyophilization ag -45 céim C ar feadh 24h ag baint úsáide as an Novalyphe-NL500 lyophilizer , Savant Instruments, Holbrook, NY, USA.

3.4. Tréithe Fisiceimiceacha agus Feidhmiúla

3.4.1.pH Tomhas

Rinneadh pH na dtáirgí mar thoradh air ag réiteach 10 faoin gcéad a thomhas ag baint úsáide as méadar pH calabraithe (HANNA, HI 902 m, an Ghearmáin).

3.4.2.Dlús Bulc (BD), Dlús Tapáilte (TD) agus Innéacs Carr a Chinneadh

Doirteadh púdar MPMC isteach i sorcóir tomhais 50 mL suas le 25 mL, a fhreagraíonn don toirt neamhchoite, agus ansin sconna 5-10 uair go dtí nár tugadh faoi deara aon athrú breise ar thoirt an phúdair a fhreagraíonn don toirt tapáilte.

Cinneadh an dlús toirte, an dlús tapáilte, agus innéacs Carr agus na cothromóidí seo a leanas á gcur i bhfeidhm [45]:

(1)BD=mais/ toirt gan úsáid

(2)TD=mais/toirt tapáilte

(3)Innéacs Carr ( faoin gcéad )= (TD-BD)/TD×100

3.4.3. Innéacs Ionsúite Uisce (WAI) agus Innéacs Intuaslagthachta Uisce (WSD)

Scrúdaíodh tuaslagthacht uisce agus innéacsanna ionsú uisce MP agus MPMC de réir an mhodha a thuairiscíonn Yagc agus Gogus le roinnt modhnuithe [46]. Scaipeadh na samplaí (0.5 g) in uisce driogtha 10 ml ag 25 céim i bhfeadán lártheifneora. Tar éis seasamh ar feadh 30 nóiméad, le inbhéartú feadán gach 5 nóiméad, lártheifneoiríodh na samplaí ag 3500 rpm ar feadh 15 nóiméad. Aistríodh an scagáit go pláta alúmanaim agus triomaíodh é ar feadh 3 uair ag 105 céim. Taifeadadh meáchan an fhoirmiú a bhí fágtha agus cinneadh WSI agus WAI mar seo a leanas:

(4)WAI(g/g)= Glóthach meáchan a fháil/Meáchan tirim an tsampla

(5)WSI faoin gcéad=Meáchan solad tirim i bhfoshuiteach ×100/Meáchan tirim an tsampla

3.4.4. Digestibility Próitéin Bainne

Socraíodh díleáiteacht próitéine de réir Abd El-Ghany et al. [47]. Go hachomair, scaipeadh samplaí MP agus MPMC in uisce driogtha ag tiúchan 6.38 mg/mL, agus coigeartaíodh an pH go 8.0. Millilítear amháin de thuaslagán stoc einsíme úrullmhaithe (1.6 mg/mL trypsin, 3.1 mg/mL chymotrypsin, agus 1.3 mg/mL ER aimín peptidase1

(ERAP1)mheascadh le fionraí próitéine ag 37 céim . Taifeadadh an pH tar éis 10 min, agus socraíodh gníomhaíocht einsím ag baint úsáide as cáiséin mar thagairt. Úsáideadh an chothromóid seo a leanas chun díleáite próitéine a ríomh [47]:

(6) faoin gcéad díleáite=210.46-18.10 (pH)

3.5.Codáin Feanólacha de PHM agus NabM

Rinneadh comhdhúile feanólacha de shamplaí mucilage ag baint úsáide as anailís HPLC ag an bprótacal ar a ndearna Elsayed et al. [48]. Go hachomair, rinneadh anailís ar an sliocht mucilage ag baint úsáide as córas HPLC sraith Agilent 126{0 (Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, USA). Ritheadh ​​an deighilt ag baint úsáide as an gcolún C18 (100 mm × 4.6 mm id,5 um). Sa chéim shoghluaiste bhí (A) uisce 0.2 faoin gcéad H3PO4, (B) meatánól, agus (C) aicéataitrile ag ráta sreafa de 0.6 mL/min. Bhí mionlach grádáin de réir na chéad scéime eile: 0-11 nóim (96 faoin gcéad A., 2 faoin gcéad B);11-13 nóim (50 faoin gcéad A,25 faoin gcéad B);13-17nóiméad (40 faoin gcéad A,30 faoin gcéad B);17-20.5 nóim (50 faoin gcéad B,50 faoin gcéad C);agus 20.5-30 nóim (96 faoin gcéad A,2 faoin gcéad B).An tonnfhad braite (UV brathadóir, 284 nm) socraithe ag 284 nm. Ba é méid an insteallta ná 20 μL agus coinníodh teocht an cholúin ag 30 céim. Cuireadh comhdhúile ar eolas trína gcuid ama coinneála a chur i gcomparáid leo siúd ó chaighdeáin bharántúla. Baineadh úsáid as cuair chalabrúcháin chun na méideanna cumaisc a mheas.

3.6.Inneachar Iomlán Feanólach agus Flavonoid de MP agus MPMC

Socraíodh ábhar polyphenolic ag an modh Folin-Ciocalteu le roinnt modhnuithe [5]. Go hachomair, rinneadh 2.8 ml milli-Qwater ina raibh 10 mg de MP nó MPMC a mheascadh le 2 ml de charbónáit sóidiam 2 faoin gcéad, agus 0.1 ml d'imoibrí Folin-Ciocalteau 50 faoin gcéad. Tar éis 30 nóiméad goir ag teocht an tseomra, tomhaiseadh ionsúiteacht an mheascáin imoibriúcháin ag 750 nm in aghaidh uisce dí-ianaithe mar bhán ag baint úsáide as speictreafótaiméadar (Hitachi, Model 100-20). Úsáideadh aigéad galach(GA) mar chomhdhúil chaighdeánach feanólach, agus tógadh cuar caighdeánach seacht bpointe (0-200 mg/L). Léiríodh na torthaí mar choibhéisí milleagraim d'aigéad gailleach in aghaidh gach graim den phróitéin (GAE/g).

Flavonoidscinneadh ábhar ag baint úsáide as an modh clóiríd alúmanaim mar a thuairiscigh Abedelmaksoud et al roimhe seo. le roinnt modhnuithe [5]. Go hachomair, meascadh 2.8 ml uisce milli-Q ina raibh 10 mg MP nó MPMC le 0.1 mL de 10 faoin gcéad de heicseahiodráit clóiríd alúmanaim agus 0.1 mL de aicéatáit photaisiam 1 M. Tar éis gor ag teocht an tseomra ar feadh 40 nóiméad, tomhaiseadh ionsúiteacht an mheascáin imoibriúcháin ag 415 nm i gcoinne uisce dí-ianaithe mar bhán. Baineadh úsáid as quercetin mar chaighdeán ag baint úsáide as cuar caighdeánach seacht bpointe (0-50 mg/L). Léiríodh an t-ábhar flavonoid iomlán mar choibhéisí milleagraim quercetin (QE/g).

3.7. Gníomhaíocht Frithocsaídeach MP agus MPMC

Rinneadh measúnú ar acmhainn iomlán scavening radacach saor in aisce MP agus MPMC trí úsáid a bhaint as trí mheasúnú frithocsaídeach dhifriúla: Cobhsaí 2, 2-défheinile-1-picrylhydrazil(DPPH), Azino-bis({3-ethylbenzothiazoline{{5) }}Fréamhacha aigéad sulfónach (ABTS), agus radacach Hiodrocsaile (HS) mar a thuairiscigh El-Maksoud et al roimhe seo [5].

3.8. Próifíl Aimínaigéid MP agus MPMC

Rinneadh samplaí próitéine a hidrealú ag baint úsáide as 6 N HCl de réir Peksa et al. [49. Úsáideadh anailísí aimínaigéad uathoibrithe (AAA 400, INGOs Ltd.) chun aimínaigéid a chinneadh.

3.9. Airíonna Rheological

Ullmhaíodh samplaí mar a thuairiscigh Barnes [50] le roinnt modhnuithe. Socraíodh slaodacht an tuaslagáin 2.5 faoin gcéad (w/w) ag pH7 ag céim 25±1 ag baint úsáide as viscometer Brookfield (DV-II móide Pro, Rheocalc Software, an Ghearmáin). Breacadh strus (σ) agus slaodacht (n) mar fheidhm den ráta lomadh. Ríomhadh an t-innéacs comhsheasmhachta (K) agus an t-innéacs iompraíochta sreafa (n) den tsamhail dlí cumhachta:

Is ionann luach n agus 1 i gcás sreabhán Newtonian agus athraíonn sé ó 0 go dtí 1 i gcás sreabhán atá lomadh agus níos mó ná 1 i gcás sreabhán lomadh-riú [51].

3.10.Calraiméadracht Scanadh Difreálach (DSC)

Rinneadh airíonna teirmeacha MP agus MPMC a thomhas ag baint úsáide as calraiméadar scanadh difreálach (PerkinElmer, SAM). Cuireadh samplaí (4-6 mg) i pláta alúmanaim agus séalaithe. Rinneadh gach uile phanna a théamh ansin go 350 céim le sreabhadh de ghás nítrigine tirim ag 20 ml min-I ag ráta téimh 10 gcéim nóim-1. Ó bhuaic inteirmeach an teirmeagraim DSC, measadh go raibh an teocht dínádúraithe, an teocht aistrithe uasta, agus an pointe díghrádaithe [52]. Cinneadh an luach eantalpachta trasdula (AH) ón limistéar faoin mbuaic inteirmeach sa chuar DSC, agus baineadh úsáid as an bpanna alúmanaim folamh mar thagairt.

3.11. Speictreascópacht Infridhearg Fourier-Trasfhoirmeach (FTIR)

Tomhaiseadh speictrim infridhearg idir 600 agus 3500 cm-I ag 25 céim ag baint úsáide as speictreafótaiméadar FTIR (QFA Flex, SAM) tríd an modh machnaimh iomlán caolaithe ag baint úsáide as taifeach 4 cm-I agus ag fáil 10 scan in aghaidh an tsoicind.

3.12. Micreascópacht Leictreon Tarchurtha

Rinneadh micreastruchtúr MP agus MPMC a léirshamhlú ag baint úsáide as micreascóp leictreoin tarchurtha (JEOL, JEM 1400 Flash, an tSeapáin) ag 80 kV. Cuireadh an cryo-chéim sa mhodh staining diúltach i bhfeidhm [53].

3.13.Staidéir Bhitheolaíochta ar MP agus MPMC

3.13.1.Gníomhaíocht Frithailse In Vitro

Fuarthas na línte cille go léir a úsáideadh sa turgnamh seo ón mBailiúchán Cultúir Cineál Meiriceánach (ATCC, Manassas, VA, USA). Baineadh úsáid as dhá líne chill ailse daonna sa mheasúnacht seo: adenocarcinoma mhamach (MCF{{{0}}, ATCCHTB-22TM)agus carcanóma hepatocellular (HepG2, ATCC4 HB-8065TM). Rinneadh tástáil freisin ar línte cille fibroblast neamh-ailse BJ-1(ATCC⑧ CRL-2522TM) agus MCF chíche epithelial F(ATCC CRL-10782TM) chun comparáid a dhéanamh. Fásadh línte cille i meán modhnaithe Eagle Dulbecco (DMEM/glúcós ard, HyCloneTM, SAM) arna fhorlíonadh le séiream bó féatais 10 faoin gcéad (FBS, Gibco, an Bhrasaíl), peinicillin 100 U/mL, streiptimícin 100 ug/mL, agus 25 ng/ ml amphotericin B (Sigma, Oakville, ON, Ceanada) agus saothraithe ag 37 céim le 5 faoin gcéad CO, i gorlann humidified. Cuireadh meán úr in ionad an mheán cultúir gach lá eile. Nuair a shroich na cealla comhlí 70 faoin gcéad, scoiteadh iad ag baint úsáide as 0.25 faoin gcéad Trypsin-EDTA(1X) Gibco, Ceanada, agus aistríodh chuig fleascán cultúir nua iad. Tar éis an dara sliocht, tréipsiníodh na cealla agus plátáladh iad i 96-phláta tobair ag tiúchan 2×10* cealla/tobar. Tar éis 24 h goir, scinceáladh an meán, agus nite na cealla faoi dhó le PBS ansin cóireáilte le 200 μL de mheán cultúir ina raibh tiúchain éagsúla de shamplaí próitéine (1, 5,10, agus 20ug/mL). Baineadh úsáid as Doxorubicin HCl(4 ug/mL) mar rialú dearfach, agus glacadh cealla a ndearnadh cóireáil orthu le meán neamhfhorlíonta mar rialú diúltach. Goradh na plátaí ag 37 céim C ar feadh 24 h agus anfrith-ailsecinntíodh gníomhaíocht na samplaí trí úsáid a bhaint as measúnacht neodrach um ghlacadh dearg de réir Repetto et al. [54]. Go hachomair, tar éis na tréimhse goir, cuireadh 150 ul de ruaim dearg neodrach (100 mg / mL) tuaslagtha i meán saor ó serum in ionad an mheán, agus goraíodh na cealla ag 37 céim C ar feadh 3 h. Ansin, rinsíodh na cealla le PBS, agus cuireadh 150 μL de mheán elution （EtOH/AcCOOH, 50∶1） leis ina dhiaidh sin chroitheadh ​​go bog ar feadh 10 nóiméad chun lánscor a chinntiú. Tomhaiseadh ionsú ag 540nm ag baint úsáide as léitheoir pláta microtiter (BioTek, 96 Well Plates, ELX808, USA).

áit arb é Ac ionsúchán an rialaithe agus As is ionsúiteacht an tsampla. Rinneadh céatadán bás cille a cuireadh i láthair mar chiteatocsaineacht ( faoin gcéad ) agus an tiúchan a mharaíonn 50 faoin gcéad de na cealla (IC50) a ríomh do gach sampla.

3.13.2.Cinneadh p53, Bax, Caspase-3, agus Bcl-2 Leibhéal Próitéiní

Socraíodh leibhéil cheallacha na bpríomhmharcóirí próitéin apoptosis tar éis 24 h iarchóireála le ICso MP agus MPMC. Go hachomair, síolaíodh cealla Hep G-2, MCF-7, Bj-1, agus MCF-12F ag cealla 5×10*/go maith in 6-go maith plátaí. Tar éis 24 h goir leis na samplaí ag 37 céim , bailíodh cealla agus lísíodh iad agus ansin lártheifneoiríodh iad ag 10,000rpm ar feadh 20 nóiméad ag 4 céim . Rinneadh tiúchan próitéine a chainníochtú san olltán trí mheasúnú Bradford [55]. Rinneadh anailís ar ghníomhaíocht Caspase-3 agus úsáid á baint as trealamh measúnaithe dathmhéadrach (Abcam, ab39401) de réir threoracha an déantóra [56]. Go hachomair, cuireadh 10 mg próitéin le 50 uL de shubstráit Caspase agus coigeartaíodh an toirt deiridh go 200 μL ag baint úsáide as an maolán imoibriúcháin ag 37 céim , agus gor an meascán ar feadh 1 h sa dorchadas agus ansin Caspase a thomhas{{24} } tiúchan ag 405 nm.

Cinneadh an leibhéal marcóra pro-apoptotic p53, X(Bax) gaolmhar, agus marcóir frith-apoptotic B-chealla linfoma-2(Bcl-2) i lysate cille ag baint úsáide as Measúnacht Imdhíon-Iomdhíonachta Nasctha le Einsím Céim Shimplí ELISA de réir threoracha an mhonaróra (ab207225, ab119506, agus ab199080; Abcam, USA), faoi seach [57,58].

3.13.3.DNA Damáiste de bharr Cosaint ar Strus Ocsaídeach

Rinneadh measúnú damáiste DNA mar a thuairiscigh Leba et al roimhe seo. [59] le modhnú beag. Go hachomair, meascadh 3 μL d'inhibitor Ribonuclease plasmid RNH1 (NM_203387) Daonna Tagged ORF Clone 10 ug/μL le himoibrí Fenton (5 mM de H2O2 agus 0.3 mM de FeSO4 agus 0.6 mM de EDTA）, agus coigeartaíodh an toirt deiridh go 25 μL ag baint úsáide as maolán fosfáit (H2POA, 8.3 mM, pH 7.4). Ansin , bhí gor an réiteach ar feadh 20 nóiméad ag 37 céim . Chun cumas cosanta frithocsaídeach MP agus MPMC a mheasúnú i gcoinne damáiste DNA a tharlódh ó imoibrí Fenton, cuireadh 5 ug/mL MP/NabM, MP/IHM, agus MP leis roimh gor. Baineadh úsáid as DNA plasmid RNH1 (3 μL, 10 ug/μL) mar rialú cosanta DNA.

3.13.4.PCR-Bunaithe Measúnacht Damáiste DNA Géanómach

Méadaíodh géine Homo sapiens methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) ag baint úsáide as PCR ó ghéanóm fola a bhaintear as samplaí fola sláintiúla roimhe seo ag baint úsáide as trealamh eastósctha DNA caighdeánach [60]. Goradh DNA ar feadh 10 nóiméad le nó gan imoibrí Fenton arna fhorlíonadh le MP nó MPMC. Aimplíodh blúire 198-bp trí úsáid a bhaint as primers forward5'-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3' agus droim ar ais 5'-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3'. Ag baint úsáide as 50ng de DNA cóireáilte, rinneadh aimpliú PCR tar éis an chéad teirm-rothar eile (94 céim ar feadh 5 nóiméad, agus 25 timthriall dínádúraithe ina dhiaidh sin, na 30idí ag 94 céim; anáil, 30idí ag 60 céim; agus síneadh, 30 s ag 72 céim ) le haghaidh 25 timthriall agus 1 timthriall síneadh deiridh ag 72 céim ar feadh 5 nóiméad. Cuireadh na samplaí imoibrithe PCR i bhfeidhm le haghaidh leictreafóiréis glóthach agarose (2 faoin gcéad ).

3.13.5. Próifíliú Léirithe Géine de réir RT-qPCR

Rinneadh anailís ar léiriú géine ar ghéinte marcála pro-agus frith-apoptotic le cealla HepG-2, MCF-7, Bj-1 agus MCF-12F nochta do IC50 a fuarthas sonraí (Tábla 3) le haghaidh 72 h. Go hachomair, baineadh úsáid as an RNA Iomlán Íonúcháin Kit (QIAGEN., Thorold, ON, Ceanada) de réir treoracha an mhonaróra. cDNA

rinneadh sintéis mar a thuairiscigh Aboul-Sound et al roimhe seo. [61]. Rinneadh agus rinneadh measúnú ar chláir aimpliúcháin agus ar shainiúlacht aimplicon PCR trí úsáid a bhaint as timthriallach teirmeach Rotor-Gene O 5-Plex HRM (Qiagen, an Ghearmáin) le Quanti-Tect SYBR-Green PCR Kit (Qiagen, an Ghearmáin) mar a dhoiciméadaíodh roimhe seo. de réir prótacail chaighdeánacha [61]. Baineadh úsáid as na primers seo a leanas: Hs_P53_1 SG QuantiTect Primer Assay (QT00060235); Hs_CASP3_1_SG Quan-tiTect Primer Measúnacht (QT00023947); Liomfóma B-chealla 2 Hs_BCL2_1_SG QuantiTect Primer Assay (QT00025011); Bcl-2-cosúil le Hs próitéine_BAX_1_SG QuantiTect Primer Assay ( QT00031192); agus géine coimeád tí 18S rDNA (HK) Hs_RRN18S_1_SGQuantiTect Primer Assay(QT00199367). Rinneadh clár rothaíochta teirmeach PCR agus anailís léiriú géine chun an t-athrú fillte a chinneadh i gcomparáid leis an géine 18S go bunúsach mar a tuairiscíodh roimhe seo [61].

3.14.Anailís Staidrimh

Cuireadh na torthaí a fuarthas in iúl mar mheán ± diall caighdeánach. Baineadh staitisticí amach ag baint úsáide as SPSSsoftware 11.5 (SPSS, Inc.Chicago, IL, SAM). Baineadh úsáid as tástáil raon iolrach Duncan chun na difríochtaí suntasacha i measc na samplaí go léir a chinneadh, agus measadh difríochtaí suntasacha ag lch<>

4. Conclúidí

Mar fhocal scoir, léirigh an staidéar seo go meascadh próitéin bainne lepolaisiúicrídítrí dhifreáil an tuaslagáin is teicníocht oiriúnach é pH don choimpliú. Tá na coimpléisc mucilage próitéine bainne (MPMC) i bhfad níos airde feanólacha agusflavonoidsinneachar ná an próitéin bhainne (MP).Léirigh torthaí DSC gur mhéadaigh coimpléasc MP le polaisiúicrídí go suntasach cobhsaíocht theirmeach le hathrú i dteocht dínádúraithe. Rinneadh anailísí FTIR chun na grúpaí feidhme a shainaithint, agus rinneadh imscrúdú ar iompar sreafa na gcoimpléasc ullmhaithe. Méadaíodh an WSI agus WAI próitéine bainne trí choimpliú le NabM nó IHM. Baineadh úsáid as TEM chun micreastruchtúr na gcoimpléasc ullmhaithe a léirshamhlú. Ar an láimh eile, meastar go n-éireoidh níos fearr leis na coimpléisc próitéine bainne mar thoradh air sin le mucilage husk isabgol (HM) nó Nabeq mucilage (NabM) na próitéiní bainne dúchais san éifeacht frithocsaídeach agus frith-ailse. Go hachomair, chuir an MPMC in iúl airíonna uathúla frith-ailse i gcoinne eiseamláireach ailse chíche agus línte cille carcanóma hepatic (MCF7 agus HEPG2, faoi seach) mar atá cruthaithe ag measúnacht neodrach um ghlacadh dearg.

Chuir MPMC feabhas ar an dá cheannfrithocsaídeachagus gníomhaíocht frith-iomadaithe. Is príomhphróitéiní rialtóra iad caspases atá bainteach le hionduchtú apoptosis. rialaíonn upregulation próitéin caspase 3 agus athscríbhinní mRNA (Fíor 9A, B) próitéiní eile sa chonair apoptosis, arb iad is sainairíonna titim an membrane mitochondrial le scaoileadh cytochrome c Bax-spreagtha agus gníomhachtú caspase 9 as a dtiocfaidh rannpháirtíocht ina dhiaidh sin de. caspase 3. Léirigh uasghrádú Casp3, p53, agus Bax, chomh maith le laghdú Bcl-2 go bhfuil ionduchtú apoptosis spreagtha ag MPMC, áit a spreagfaidh upregulation of p53 léiriú Bax, rud a chothóidh cytochrome c. scaoileadh, agus caspase-9 agus-3 gníomhachtú ina dhiaidh sin. Ina theannta sin, is eol go gcuireann Bcl-2 bac ar scaoileadh cíteochrome c. Inár staidéar, léiríodh go n-éascódh íosrialáil Bcl-2 a tharchuirtear le MPMC chun scaoileadh cíteochróim c neamh-spreagtha Bax agus apoptosis ina dhiaidh sin a éascú.

Soláthraíonn éifeacht frith-ailse na gcoimpléisc phróitéin-pholaisiúicríde breis eolais ar infheidhmeacht na gcoimpléisc seo le húsáid i bhforbairt teiripí ailse inacmhainne agus éifeachtacha le fo-iarmhairtí íosta.