Tionchar Pholaisiúicríd Cistanche Deserticola ar Iomadú Lymficítí

Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Runlan, Li Xiaohong, Yang Meihua, Shi Yue

(Institiúid Plandaí Íocshláinte, Coláiste Leighis Peking Union, Acadamh Eolaíochtaí Leighis na Síne, Beijing 100193)

CuspóirTo staidéar a dhéanamh ar éifeachtCistanche deserticola polaisiúicríd(CDPS) ar iomadú limficítí i lucha. 

ModhannaBaineadh úsáid as measúnacht MTT chun iomadú limficítí splenic i lucha a bhrath. Baineadh úsáid as ciclophosphamide (Cy) chun samhlacha ainmhithe d’ainmhithe imdhíonachta a mhacasamhlú, agus rinneadh innéacsanna spleen agus thymus ainmhithe gnáth agus imdhíon-chomhbhrú a thomhas. Rinneadh gníomhaíocht idirleacáin-2 (IL-2) a thomhas trí mheasúnacht ar iomadú thymocyte. TorthaíCistanche deserticola polaisiúicrídchuir sé chun cinn go mór iomadú limficítí gníomhachtaithe mitogen (ConA agus LPS) agus gnáthchealla neamhghníomhaithe, agus chuir sé chun cinn an secretion IL-2 i limficítí. Léirigh riarachán intraperitoneal goCistanche deserticola polaisiúicrídméadú suntasach ar an innéacs spleen de lucha gnáth agus imdhíon-chomhbhrú, agus bhí éifeacht fhrithsheasmhach suntasach aige freisin ar laghdú innéacs thymus de bharr Cy. ConclúidCistanche deserticola polaisiúicrídis féidir leis an iomadú limficítí splenic i lucha a chur chun cinn go suntasach, a d'fhéadfadh a bheith bainteach le cur chun cinn secretion IL-2.

Ciste maireachtála an fhásaigh

[Eochairfhocail]Cistanche deserticola polaisiúicríd; Innéacs spleen; Innéacs thymus; iomadú lymphocyte; Interleukin-2

Tá aird fhorleathan tarraingthe ag polaisiúicrídí plandaí mar gheall ar a n-éifeachtaí inmunomodulatory forleathan agus tocsaineacht réasúnta íseal [1].Is é Cistanche deserticola ma, ar a dtugtar "Desert Ginseng", gas scagach, tirim, méithe de Cistanche deserticola, planda den Orobaceae, a bhfuil éifeachtaí cógaseolaíochta fairsinge aige.Is féidir leis an decoction uisce a mhéadú go suntasach an céatadán phagocytic agus innéacs phagocytic de macrophages.Tá sé léirithe ag staidéir bhreise gurb é a bhonn ábhartha ná polaisiúicríd iomlán Cistanche deserticola[3]. Tá Zeng Qunli et al. [4] fuarthas amach go bhfuil comhpháirt amháin deCistanche deserticola polaisiúicrídTá éifeacht iomadú suntasach aige ar limficítí thymic luiche in vitro. Éifeacht naCistanche deserticola polaisiúicrídar iomadú limficítí breathnaíodh in vivo agus in vitro.

Foirmle mhóilíneach Cistanche deserticola

1. Ábhar agus Modhanna

1.1 Drugaí agus imoibrithe

Soláthraíonn an Roinn Plandaí agus Ceimiceach den Institiúid Leighis agus Plandála, Coláiste Leighis an polaisiúicríd ó Cistanche deserticola. Baintear as anPúdar sliocht Cistanche, agus is é an t-ábhar polaisiúicríde 87 faoin gcéad.

Púdar sliocht Cistanche

Sula n-úsáidtear turgnaimh in vivo, tuaslagtha agus caolaigh le saline fiseolaíocha go dtí an tiúchan is gá, agus boil le haghaidh steiriliú. Sular úsáideadh turgnaimh in vitro, rinneadh an meán cultúir RPMI-1640 a thuaslagadh agus a chaolú, agus rinneadh steiriliú ardbhrú. Is táirgí de chuid Sigma Corporation iad Lipopolysaccharide (LPS), concanavalin (ConA), dexamethasone (DEX), agus MTT. Is táirgí Gibco iad Cyclophosphamide, comhfhiontar Sino-Mheiriceánach de Shanxi Taisheng Pharmaceutical Co., Ltd. Serum bó féatais, meán cultúir RPMI1640, agus trypsin. Is imoibrithe anailíseacha baile iad imoibrithe eile.

1.2 Ainmhithe

Soláthraítear lucha óga BALB c (leibhéal SPF) ag Viton Lihua Experimental Animal Technology Co., Ltd [SCXK (Beijing) 2002-2003]. Tógtar ainmhithe de ghrád SPF i seomra agus cothaítear agus ólann siad go saor.

1.3 Gaireas

Marcóir einsím Multikan Ascent, táirge de chuid Thermo Electron Company, SAM. Leici PHS-3B Méadar beachtais pH, Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd. Gorlann dé-ocsaíd charbóin Napco 5410, NAPCO, SAM. BCN-1360 Binse Oibre Ultra Glan, Beijing Donglianhar Instrument Manufacturing Co., Ltd. XDS-1B Mhicreascóip Inbhéartaithe, Chongqing Optoelectronic Instrument Co., Ltd.

1.4 Modh

1.4.1 Éifeacht ar iomadú limficítí [5]:

Ullmhúchán gnáthamh limficítí spleen ó lucha BALL c, ag baint úsáide as RPMI-1640 chun an tiúchan cille a choigeartú go 1 × 107 mL, ionaclaithe ar phláta saothraithe 96 tobar, le 100 fionraí cille curtha le gach tobar μ 50. Bhí sé comh - saothraithe le tiúchain éagsúla deCistanche deserticola polaisiúicríd(an tiúchan deiridh deCistanche deserticola polaisiúicrídle haghaidh iomadú limficítí neamhghníomhaithe bhí 6.25, 12.5, 25, 50, agus 100 mg/L in ord; an tiúchan deiridh deCistanche deserticola polaisiúicrídba é 3.9, 7.8, 15.6, 31.2, agus 62.5 mg/L in ord an iomadú limficítí T gníomhachtaithe ConA; agus an tiúchan deiridh deCistanche deserticola polaisiúicrídle haghaidh iomadú limficítí B gníomhachtaithe LPS ná 1.56, 3.13, 6.25, 12.5, agus 25 mg/L in ord) agus úsáideadh meán ConA nó LPS, RPMI-1640 mar rialú. Is é 200 μ L toirt iomlán gach poll, nuair a chuirtear mitogen ConA agus LPS (is é an rialú RPMI -1640 ina bhfuil tiúchain comhfhreagracha ConA nó LPS), is iad na tiúchain deiridh den dá cheann ná 2.5 mg L agus 10 mg L, faoi ​​seach. Rinneadh trí pholl comhthreomhar le haghaidh cóireálacha éagsúla. Cuir an pláta cultúir i gorlann taise sáithithe 37 céim, 5 faoin gcéad CO2 ar feadh 68 uair an chloig, cuir MTT leis, agus lean ar aghaidh ag saothrú ar feadh 4 uair an chloig. Déan an luach A540 nm a thomhas le marcóir einsím ag baint úsáide as an modh MTT chun iomadú a bhrath. Nuair a dhéantar comparáid idir gach grúpa, déan an luach A540nm a thiontú ina ráta iomadaithe limficítí de réir na foirmle seo a leanas:ráta iomadú limficítí=Sampla A rialú × 100 faoin gcéad .

Éifeachtaí Cistanche—Feabhas a chur ar dhíolúine

1.4.2 Éifeacht ar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha gnáth [6,7]:

Rinneadh lucha óga BALB c (fireann, 4-seachtain d’aois, le meáchan coirp de 10-15 g) a roinnt go randamach i ngrúpa rialaithe bán (salanda) agus i ngrúpaí dáileoga éagsúla (125 mg (kg · bw) agus 250 mg (kg · bw)), le 11 francach i ngach grúpa. Riaradh an druga intraperitoneally uair amháin sa lá ar feadh 7 lá as a chéile. Maraíodh na lucha tar éis dislocation ceirbheacs. Tógadh an spleen agus an thymus, baineadh saill agus fíochán fascia, agus triomaíodh an leacht dromchla le páipéar scagaire. Tar éis an mheá, an t-innéacs spleen=100 × Meáchan spleen (mg) Meáchan coirp (mg); Innéacs thymus=100 × Meáchan Thymus (mg) Meáchan Coirp (mg) Ríomh an t-innéacs spleen agus an t-innéacs thymus do gach 100 mg de mheáchan coirp, faoi seach.

1.4.3 Éifeacht ar mheáchan orgán imdhíonachta i lucha imdhíon-chomhbhrú [7,8]:

Roinneadh francaigh óga BALB c (fireann, 6 seachtaine d'aois, meáchan coirp 15-20 g) go randamach i 12 ghrúpa de réir mheáchan coirp. Ach amháin i gcás an ghrúpa rialaithe gnáth (instealladh intraperitoneal de thoirt comhionann de saline fiseolaíocha), cuireadh na grúpaí eile le Cy 50 mg (kg · bw) intraperitoneally laethúil, agus riaradh an réiteach drugaí tástála intraperitoneally [125 agus 250Mg (kg · bw)], tugadh an méid céanna saline fiseolaíocha don ghnáthghrúpa rialaithe agus don ghrúpa múnla ar feadh 13 lá as a chéile, uair amháin sa lá. Breathnaíodh na hathruithe ar mheáchan ainmhithe le linn an turgnaimh. 24 uair an chloig tar éis an riartha deiridh, rinneadh na hinnéacsanna spleen agus thymus a thomhas agus a ríomh ag baint úsáide as an modh céanna atá in 1.4.2.

1.4.4 Tionchar ar ghníomhaíocht IL-2:

① Ionduchtú IL-2 [9]: Cuir 50 le gach tobar i 96-pláta cille tobair μ L Tiúcháin éagsúla deCistanche deserticola polaisiúicríd(tiúchan deiridh in ord: 3.91, 7.82, 15.63, 31.25, 62.5, 125 mg/L, cuir 50 mg/L isteach sa mheán cultúir rialaithe μ L) agus 50 μ L ConA (tiúchan deiridh 5 mg/L), cuir 1 níos mó in aghaidh an tobair × 106 cealla spleen. Gor i gorlann taise sháithithe 37 céim , 5 faoin gcéad CO2 ar feadh 24 uair an chloig, lártheifneoir ar feadh 20 nóiméad ag 2500 r nóim, agus tóg an forshnáthán cille agus stóráil ag - 20 céim le haghaidh fuireachais. ② IL-2 braite gníomhaíochta [9,10]: Tá an modh bunúsach bunaithe ar an litríocht [9], agus déantar coigeartuithe cuí de réir na litríochta [10]. Ullmhúchán traidisiúnta ar fhionraí thymocytes luiche BALB c, 96 pláta saothraithe cille tobair, 1 ionaclú in aghaidh an tobair × 106 thymocytes, agus ag an am céanna ag cur 50 cill in aghaidh an tobair μ L ConA (tiúchan deiridh 2.5 mg/L), agus ansin cuir an IL ullmhaithe leis{{34 }} supernatant 50 μ L (cuir 50 leis an bpoll bán rialaithe μ L réiteach cultúir), gor le chéile ar feadh 54 uair an chloig, cuir MTT, leanúint ar aghaidh ag gor ar feadh 4 uair an chloig, lártheifneoir ar feadh 10 go 15 nóiméad ag 1000 r nóim, scrios amach an ollnóva, agus cuir DMSO 100 in aghaidh an tobair μ L, croith le micrea-oscillator ar feadh 8 min, agus tomhas an luach A540 nm le marcóir einsím.

1.5 Anailís Staitistiúil

Cuireadh na sonraí in iúl mar mheán agus diall caighdeánach (x ± s). Baineadh úsáid as bogearraí Microsoft Excel chun na sonraí a chomhordú, agus rinneadh tástáil t. p<0.05 and P<0.01 were significant differences, both of which were statistically significant.

2.Results

2.1 Éifeacht ar iomadú limficítí

Mar is léir ó Tábla 1, ag curCistanche deserticola polaisiúicríddo mheán cultúir na limficítí spleen luiche saothraithe in vitro ag tiúchan os cionn 25 mg/L is féidir iomadú limficítí a spreagadh go suntasach, rud a léiríonn goCistanche deserticola polaisiúicrídtá éifeacht miotóiseach ann féin. Ag an am céanna,is féidir a fheiceáil ó Thábla 2 agus Tábla 3 go bhfuil éifeacht shuntasach spreagtha ag CDPS ar iomadú limficítí T de bharr ConA nó limficítí B de bharr LPS.

Táb.1 Tionchar naCistanche deserticola polaisiúicrídar iomadú limficítí neamhghníomhaithe (x ±s, n =3)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe,＊P <0.05. 

Táb.2 TioncharCistanche deserticola polaisiúicrídar iomadú tlymphocytes arna tharlú ag ConA (x ±s, n =3)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa ConA ,＊P <0.05, ＊＊P <0.01.

Táb.3 Tionchar naCistanche deserticola polaisiúicrídar iomadú Blymphocytes arna tharlú ag LPS (x ±s, n =3)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa LPS,＊P <0.05 , ＊＊P <0.01. 

2.2 Éifeacht ar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha gnáth

Mar is léir ó Tábla 4,Cistanche deserticola polaisiúicrídIs féidir leis an innéacs spleen de ghnáth-Francaigh BALB c óga a mhéadú go suntasach ach níl aon éifeacht aige ar an gland thymus.

2.3 Éifeacht ar mheáchan orgán imdhíonachta i lucha imdhíon-chomhbhrú

Ó Tábla 5,is féidir a fheiceáil go bhfuil na hinnéacsanna orgán spleen agus thymus de lucha sa ghrúpa imdhíon-suppressive Cy níos ísle ná iad siúd sa ghrúpa rialaithe, agusCistanche deserticola polaisiúicríd(125, 250 mg/kg) feabhas suntasach ar na hinnéacsanna spleen agus thymus.

2.4 Éifeacht ar ghníomhaíocht IL-2

Mar is léir ó Tábla 6,nuair a bheidh an dáileog deCistanche deserticola polaisiúicrídsroicheann sé 7.82 mg/L, féadann sé scaoileadh IL-2 ó chealla spleen luiche a mhéadú go suntasach.

Táb.4 ÉifeachtCistanche deserticola polaisiúicrídar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha gnáth (x ±s, n =11)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe,＊＊P <0.01.

Táb.5 ÉifeachtCistanche deserticola polaisiúicrídar mheáchan na n-orgán imdhíonachta i lucha imdhíonbhrúite ( x ±s, n =12)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe,## P <0.01;compared with the model group , ＊＊P <0.01.

Táb.6 Tionchar naCistanche deserticola polaisiúicrídar tháirgeadh IL-2 ag limficítí splenacha i lucha( x ±s, n =3)

Nóta: i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe,＊＊P <0.01. 

3. Plé

Is turgnamh in vitro é iomadú limficítí splenic-spreagtha ConA agus LPS i lucha chun feidhm na limficítí T agus B a bhrath agus is táscaire tábhachtach é ar chumas imdhíonachta ar leith. Staidéar a thaispeáint nach nuair a bheidh an tiúchan deiridh deCistanche deserticola polaisiúicrídos cionn 25 mg / L, féadann sé iomadú limficítí a chur chun cinn go suntasach, rud a léiríonn go bhfuil éifeacht áirithe miotóiseach aige. I láthair mitogen (ConA nó LPS), dáileog níos lú deCistanche deserticola polaisiúicrídis féidir leis díolúine an choirp a fheabhsú, gníomhaíocht iomadú suntasach a thaispeáint. Tá a fhios againn go gcothaíonn ConA agus LPS go príomha iomadú limficítí T nó limficítí B, faoi seach. Staidéar a thaispeáintsochair sláinte púdar cistanche: Cistanche deserticola polaisiúicrídIs féidir le iomadú limficítí T agus iomadú limficítí B a chur chun cinn, ach tá a éifeacht iomadaithe ar limficítí B i bhfad níos láidre ná mar atá ar limficítí T.

Sochair sláinte púdar cistanche - Immprove díolúine

Cliceáil anseo chun táirgí Cistanche Improve Immunity a fheiceáil

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Is iad an thymus agus an spleen na príomh-orgánaigh imdhíonachta in ainmhithe. Is iad na cealla imdhíonachta sa spleen den chuid is mó limficítí B aibí, agus is é an thymus den chuid is mó limficítí T neamhaibí. Is féidir le hinnéacsanna thymus agus spleen forbairt orgáin imdhíonachta agus stádas feidhmiúil cealla imdhíonachta a léiriú. Is féidir le hinstealladh intraperitoneal de Cistanche deserticola polaisiúicríd méadú suntasach ar an innéacs spleen de lucha gnáth agus imdhíonachta agus tá éifeacht fhrithbheartaíochta suntasach ar atrophy thymic tharlódh de Cy i lucha.Cistanche deserticola polaisiúicrídnach bhfuil aon éifeacht shuntasach aige ar an innéacs thymic i ngnáth-ainmhithe, atá comhsheasmhach le torthaí na dturgnaimh in vitro ina bhfuilCistanche deserticola polaisiúicrídcuireann sé iomadú limficítí B chun cinn seachas limficítí T.

Cforlíonadh istanche in aice liom - Feabhsaighdíolúine

Is cítocín é IL-2 a tháirgtear trí limficítí T ón gcéim G1 de thimthriall na cille go dtí an chéim S. Is fachtóir fáis cille T mór é a fheidhmíonn mar fhachtóir fáis autocrine. Ina theannta sin, is féidir le IL-2 iomadú cille B agus sintéis antasubstainte a chur chun cinn [11,12].Cistanche deserticola polaisiúicrídcuireann sé scaoileadh IL-2 ó limficítí chun cinn, rud a bhaineann leCistanche deserticola polaisiúicrídiomadú limficítí splenic a chur chun cinn.

Léiríonn taighde leighis go bhfuil polaisiúicrídí sa Cistanche,Echinacosides agus Acteoside, is féidir a ghníomhachtú limficítí agus immprove díolúine de body; tá éifeacht shuntasach ag comhpháirteanna feidhmiúla Glicóisídí cistanche Phenylethanoid ar aisghabháil cille tar éis damáiste gáma-gha 60 Co, agus is féidir leis an bhfeidhm imdhíonachta a fheabhsú in aghaidh damáiste radaíochta.Trí fhorlíonadh Cistanche deserticola a ghlacadh go laethúil is féidir leis an éifeacht díolúine a fheabhsú.

Cforlíonadh istanche in aice liom—Feabhsaigh díolúine

tagairt

[1] Schepetkin IA,Quinn MT .Polaisiúicrídí luibheolaíocha:Macrophages imdhíonmodulation agus acmhainneacht theiripeach [ J ] . Int Immunopharmacol, 2006 ,6(3):317-333.

[2] Sé Wei, Shu Xiaofen, Zong Guizhen, et al. Staidéar ar éifeachtaí Cistanche deserticola ar tonifying an duáin agus yang a chur chun cinn roimh agus tar éis a phróiseáil [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 1996, 21 (9): 534-537

[3] Wang Xiangyan, Qi Yun, Cai Runlan, et al. Gníomhachtú macrophage de pholaisiúicrídí Cistanche deserticola[J]. Feasachán Cógaseolaíochta na Síne, 2009, 25 (6): 421-424

[4] Zeng Qunli, Zheng Yifan, Lv Zhiliang. Gníomhaíocht imdhíoneolaíoch agus meicníocht polaisiúicríd Cistanche deserticola [J]. Journal of Zhejiang University (Eagrán Leighis), 2002, 31 (4): 284-287

[5] Xu Shuyun, Bian Rulian, Chen Xiu. Modheolaíocht Turgnamhach Chógaseolaíochta [M]. 3ú Eagrán, Béising: Teach Foilsitheoireachta Sláinte an Phobail, 2002, 1427-1428

[6] Zhang Xu, Zhang Guorong, Che Wei, et al. Éifeacht cróimiam polaipeiptíde collagen (Ⅲ) chelate ar dhíolúine i lucha diaibéiteas [J]. Chinese Journal of Experimental Animals, 2008, 16 (1): 10-14

[7] Chen Qi. Modheolaíocht Taighde Cógaseolaíochta an Leighis Sínis Traidisiúnta [M]. An Chéad Eagrán. Béising: Teach Foilsitheoireachta Sláinte an Phobail, 1993:779

[8] Guo Jing, Xu Jianning, Wang Quankai, et al. Éifeacht sliocht pónaire soighe (CKBN) ar fheidhm imdhíonachta i lucha imdhíon-chomhbhrú [J]. Chinese Journal of Comparative Medicine, 2008, 18 (12): 45-49

[9] Xu Shuyun, Bian Rulian, Chen Xiu. Modheolaíocht Turgnamhach Chógaseolaíochta [M]. 3ú Eagrán, Béising: Teach Foilsitheoireachta Sláinte an Phobail, 2002: 1440-1441

[10] Zhou Daohong, Shen Yuanshan, Zhao Manrui. Modh nua chun claochlú lymphocyte agus gníomhaíocht luch interleukin 2 a chinneadh - anailís dathmhéadrach MTT [J]. Irisleabhar Imdhíoneolaíochta na Síne, 1986, 2 (1): 39-43

[11] Feabhsaíonn Wang MQ , Guilbert LJ, Li J, et al.A sliocht dílseánaigh ó ginseng Mheiriceá Thuaidh (Panax quiquefolium) IL-2 agus IFN- léirithe i gcealla spleen murine arna tharlú ag Con-A [J] . Int Imdhíonpharmacol ,2002 , 4(2):311-315.

[12] Tingjun H , Rongliang Z . Polaisiúicríd subprosrate sophora a chur chun cinn ar ocsaíd nítreach agus táirgeadh idirleacáin-2 i limficítí murine T: intuigthe Ca 2 móide agus próitéin kinase C [J] .Int Immunopharmacol ,2004 , 4(1):109-118.