Cothaíonn Dendrimer–tesaglitazar Comhchuingeach Athrú Feinitíopa Micriglia agus Feabhsaíonn sé - Fagaicíotóis Amyloid† Cuid 1

Is straitéis ghealtach é microglia a aistriú ó stát ‘pro-inflammatory’ a mhéadaíonn galair go feinitíopa néarchosanta, ‘frith-athlastach’ chun dul i ngleic le galair néar-athlúcháin iolracha.

Is cineál cille iad microglia sa lárchóras néaróg atá freagrach go príomha as sláinte agus feidhm néaróin a chothabháil. Is féidir leo éagsúlacht fachtóirí fáis agus fachtóirí néaratrófacha a cheilt agus is féidir leo gnáthghníomhaíocht meitibileach na néaróin a chothabháil trí ábhair dramhaíola a ghlanadh timpeall néaróin. Léirigh staidéir le blianta beaga anuas go bhfuil dlúthbhaint ag microglia le cuimhne. A ligean ar ghlacadh le breathnú ar sé le chéile.

Ar an gcéad dul síos, féadann microglia néaróin a spreagadh agus gníomhachtú néaróin a chur chun cinn, rud a chuireann feabhas ar chuimhne. Trí shraith neurotransmitters a scaoileadh, mar shampla glutamate agus alanine, is féidir le microglia tarchur comhartha a chur chun cinn idir néaróin agus féadann sé athshondas comhartha glial-néaróin a fheabhsú idir na seicní presynaptic, ag cur chun cinn breise excitability neuronal agus foirmiú cuimhne.

Ar an dara dul síos, is féidir le microglia dramhaíl timpeall néaróin a ghlanadh freisin, gnáthghníomhaíocht meitibileach na néaróin a chothabháil, agus mortlaíocht néarónach a laghdú, rud a chuireann feabhas ar chuimhne. Nuair a carnann an iomarca truflais timpeall néaróin, beidh tionchar aige ar ghnáthghníomhaíocht meitibileach na néaróin, rud a fhágann bás néaróin agus feidhm lagaithe, rud a laghdóidh feidhmíocht chuimhne. Is féidir le microglia gnáth-thimpeallacht meitibileach na néaróin a chothabháil agus básmhaireacht néarónach a laghdú trí dhramhaíl máguaird a shlogadh agus a dhianscaoileadh, rud a chuireann feabhas ar an gcuimhne.

Go hachomair, tá dlúthbhaint ag microglia le cuimhne. Trí excitation néaróin a chur chun cinn agus an dramhaíl máguaird a ghlanadh, is féidir le microglia cuimhne a fheabhsú tuilleadh agus ár n-inchinn a choinneáil sláintiúil agus gníomhach. Ba cheart dúinn aird a thabhairt ar shláinte microglia a chosaint chun cuimhne níos fearr a bhaint amach. Is féidir a fheiceáil go gcaithfimid cuimhne a fheabhsú, agus is féidir le Cistanche cuimhne a fheabhsú go suntasach toisc gur ábhar íocshláinte traidisiúnta Síneach é Cistanche le go leor éifeachtaí uathúla, agus is é ceann acu cuimhne a fheabhsú. Tagann éifeachtúlacht Cistanche ó na comhábhair ghníomhacha éagsúla atá ann, lena n-áirítear aigéad tannic, polaisiúicrídí, gliocóisídí flavonoid, etc. Is féidir leis na comhábhair seo sláinte inchinn a chur chun cinn ar bhealaí éagsúla.

Cliceáil a fhios 10 bealaí chun cuimhne a fheabhsú

Cuireann microglia proinflammatory le dul chun cinn galair trí shubstaintí néarthocsaineacha a scaoileadh agus carnadh próitéin phataigineach a luathú. Taispeánadh go n-aistríonn agónaithe PPAR agus PPAR araon microglia ó fheinitíopa pro-athlastach (‘M1-like’) go feinitíopa a ghníomhaítear go malartach (‘M2-like’). Scrúdaíodh straitéisí den sórt sin i dtrialacha cliniciúla le haghaidh galair néareolaíocha, cosúil le galar Alzheimer agus Parkinson, ach is dócha gur theip orthu mar gheall ar a dhroch-treá a raibh bacainn fola-inchinn (BBB).

Taispeánadh go dtrasnaíonn dendrimers polaiamidoamine arna bhfoirceannadh hiodrocsaile (gan aon ligand spriocdhírithe) BBB lagaithe ag suíomh néar-athlasadh agus carnann siad i micriglia gníomhachtaithe.

Dá bhrí sin, d’fhéadfadh comhchuingeach dendrimer de PPAR/dé agónaí a chumasú aistriú feinitíopa spriocdhírithe ar mhicriglia gníomhachtaithe. Anseo cuirimid i láthair sintéis agus tréithriú comhchuingeach comhchuingeach dendrimer-PPAR/dé agonist (D-tesaglitazar).

In vitro, spreagann D-tesaglitazar aistriú feinitíopa ‘M1 go M2’, laghdaítear an secretion de speicis ocsaigine imoibríocha, méadaítear léiriú géinte le haghaidh fagaicíotóis agus díghrádú einsímeach próitéiní pataigineacha (m.sh. -amyloid, -synuclein), agus méaduithe -amyloid fagaicíotóis.

Tacaíonn na torthaí seo le tuilleadh forbartha a dhéanamh ar D-tesaglitazar i dtreo aistriúchán do ghalair néar-mheathlúcháin iolracha, go háirithe Galar Alzheimer agus Parkinson.

Réamhrá

Sna Stáit Aontaithe amháin, faoi láthair tá os cionn 5.3 milliún duine a bhfuil galar Alzheimer (AD) agus 1 milliún duine le galar Parkinson (PD). ag méadú de réir mar a leanann an daonra ag dul in aois.

Ina theannta sin, léirigh an easpa rathúlachta le déanaí maidir le drugaí nua a fhorbairt chun na galair seo a chóireáil an gá atá le teiripí nuálaíocha a fhorbairt.2,3 Léiríonn na teipeanna cliniciúla seo na deacrachtaí a bhaineann le druga a fhorbairt, lena n-áirítear tiúchan ard go leor den druga a sheachadadh don inchinn ar mhaithe le héifeachtúlacht gan é. is cúis le fo-iarsmaí díobhálacha.

Roinneann galair neurodegenerative mar AD agus PD trí mhórchomhpháirt néarpatholaíoch: néar-athlasadh, carnadh próitéine pataigineach, agus bás néarónach.4–7 Daoine míshláintiúla, cill imdhíonachta dúchasach na hinchinne (themicroglia) de shíor ag fagaicíotóis na próitéiní mífhillte (m.sh. -amyloid, -synuclein). (b) a chuireann bás néarónach faoi deara agus iad á dtáirgeadh, rud a chuireann cosc ​​ar na comhiomláin sainmharcála a fhoirmiú.

Mar sin féin, i ndaoine a fhorbraíonn galair néarmheathlúcháin sa deireadh, ní bhaineann an microglia na próitéiní seo go héifeachtach a thuilleadh agus aistríonn siad isteach i bhfeinitíopa pro-athlastach a dhéanann galar (a shainítear go hiondúil mar M1).

Cé gur ró-shimpliú ar speictream an pholarú macrophage é an t-aicmiú pro-athlastach/frith-athlastach (M1/M2) ar ghníomhachtú microglial, úsáidtear é fós mar ainmníocht leathan chun cur síos a dhéanamh ar fheinitíopa ceannasach microglia i néar-athlasadh agus teiripe freagartha.

M1-cosúil le microglia scaoileann speicis ocsaigine imoibríocha agus idirghabhálaithe athlastacha eile a chothaíonn neuronaldeath agus a mhéadaíonn paiteolaíocht galair trí tháirgeadh próitéiní pataigineacha a mhéadú (m.sh. -amyloid, -synuclein).

Ina theannta sin, cuirtear na mórfhachtóirí riosca géiniteacha chun AD(TREM2 agus APOE) a fhorbairt in iúl ag leibhéil arda i microglia, agus léiríodh go bhfuil an cosán TREM2/APOE ina chúis le hathrú feinitíopa amicroglaigh in AD, scléaróis cliathánach amyotrófach (ALS), agus scléaróis iolrach. múnlaí ainmhithe.8

Léiríonn na torthaí seo freisin ról na microglia i bpaiteolaíocht na n-ilghalar néar-mheathlúcháin daonna. Chuirfeadh cur chuige chun feinitíopa microglia a láimhseáil ar chumas taighdeoirí a ról i ngalar néar-mheathlúcháin a thuiscint, de bhreis ar a bheith ina theiripeach éifeachtach.

Moladh microglia a aistriú ó M1 go feinitíopa frith-athlastach agus néara-chosanta (M2) mar straitéis theiripeach chun cóireáil a dhéanamh ar il-ghalar néar-athlúcháin. Aistriú feinitíopa M1 go M2 i macraphages agus microglia in vitro agus in vivo.

Taispeánadh 9,10 agónaithe PPAR chun an secretion LPS-spreagtha de speicis ocsaigine imoibríocha a laghdú trí ghníomhaíocht NF-κB a laghdú trí dhíghrádú NF-κB agus easpórtáil ón núicléas a spreagadh, chomh maith le trasbhrú ligand-spleách.11

Thairis sin, léirigh staidéir eipidéimeolaíochta go bhfuil riosca laghdaithe ag othair diaibéiteas a thógann rosiglitazone nó pioglitazone chun AD agus PD.12 a fhorbairt.

Míniú dóchúil amháin ar theip na dtrialacha cliniciúla thuasluaite is ea drochiompar na ndrugaí seo trasna na bacainn fola-inchinn (BBB), rud a chuir srian ar líon na ndrugaí a shroich inchinn na n-othar atá cláraithe sna trialacha cliniciúla seo.14

Go deimhin, meastar go gcuireann an BBB cosc ​​ar thart ar 98% de na drugaí móilíní beaga ar fad ón inchinn a bhaint amach, agus ní shroicheann ach codán den druga a théann isteach san inchinn themicroglia.15

Ina theannta sin, is gabhdóir núicléach eile é PPAR i dteaghlach PPAR.16 Taispeánann sé ról i hoiméastáis lipid agus ag rialú athlasadh, agus tá sé léirithe freisin go bhfuil éifeachtaí frith-athlastacha i microglia á léiriú ag agónaithe PPAR.

Tá fianaise curtha ar fáil ag staidéir chliniciúla a úsáideann néaríomháú, anailís fíocháin iarbháis, agus bithmharcóirí CSF go bhfuil lagú ar theBBB in AD agus PD, chomh maith le galair néara-mheathlúcháin eile.

17 Tá sé léirithe go seachnaíonn dendrimers giniúna-4 polaiamidoamine (G4-PAMAM-OH) an BBB lagaithe go bunúsach agus go gcruinníonn siad i microglia gníomhachtaithe gan gá le díriú ar ligands, tar éis riarachán sistéamach i samhlacha éagsúla galair néar-athlasadh. , lena n-áirítear creimirí, coiníní, madraí, agus príomhaigh neamhdhaonna.18–28 Go suntasach, is féidir G4-PAMAM-OH a riaradh go córasach agus an BBB a thrasnú i múnlaí galair a bhfuil cur isteach éadrom BBB orthu amhail Siondróm Rett.29

Ina theannta sin, tá an méid glactha G4-PAMAM-OH isteach san inchinn i gcomhréir go díreach le déine an ghalair i múnla coinín de pairilis cheirbreach. an cloigeann a theastaíonn i staidéir roimhe seo le nanacháithníní eile cosúil le pola-εcaprolactone agus PEG, dendrimers PAMAM luchtaithe go diúltach, poncanna chandamach, agus nanafhoirmlithe comhdhéanta de pholaitiléinimín (PEI) agus sulfáit dextran.31–35

Ina theannta sin, tá na dendrimers hiodrocsaile PAMAM seo suite go hidéalach le haghaidh aistriúcháin mar gheall ar a n-inscálaithe agus a nglacann go maith leo próifíl sábháilteachta in vivo. tá comhchuingeach aicéitil-cistéin á luacháil faoi láthair i dtrialacha cliniciúla luatha le haghaidh adrenoleukodystrophy cheirbreach óige (NCT03500627) agus géar-ghalar coronavirus2019 (COVID-19) athlasadh a bhaineann leo (NCT04458298).

Rinneamar staidéar ar chomhchuingeach dendrimer-drugaí de tesaglitazar(Tesa) atá ceangailte le giniúint-4 PAMAMdendrimer dar críoch hiodrocsaile. Tá Tesaglitazar ina agonist cumasach PPAR / dé a chomhcheanglaíonn éifeachtaí tairbhiúla agónaithe PPAR agus PPAR. Tá feidhmghrúpa aigéid charbocsaileacha ann le haghaidh comhchuingeach comhfhiúsach chuig an dendrimer agus lena scaoileadh ina dhiaidh sin.

Forbraíodh agus tástáladh giotáraí breise go cliniciúil, ach roghnaíodh Tesa mar gheall ar a chóimheas gníomhaíochta PPAR go PPAR níos mó, a struchtúr ceimiceach sách simplí, agus a phróifíl sábháilteachta.39-43

Tá trialacha cliniciúla céim III bainte amach ag Tesa roimhe seo do dhiaibéiteas cineál 2 sna Stáit Aontaithe Mheiriceá ach theip uirthi mar gheall ar thocsaineacht dáileog-spleách, a d'fhéadfadh cosc ​​a chur ar an dáileog riaracháin riachtanach a laghdú trí sheachadadh rialaithe dendrimer.39,40,44 Ós rud é go bhfuil Tesa a. PPAR / dé agonist, d'fhéadfadh a sheachadadh spriocdhírithe chuig microglia gníomhachtaithe ag suíomh néar-athlasadh an-tairbheach.

Anseo, léirímid sintéis agus tréithriú comhchuingeach dendrimer-tesaglitazar (D-Tesa) agus léirímid cumas an chomhdhúil seo chun aistriú feinitíopa 'M1 toM2' a spreagadh i microglia agus feabhas a chur ar fagaicíotóis atá lipéadaithe -amyloid fluaraiseacha.

Ábhair agus modhanna

Ábhair

1-[3-(Démheitiolaimín)próipil]-3-meitiaidíd carbodiimide eitile(EDC), 4(démheitiolaimín)piridín (DMAP), CuSO4·5H2O,ascorbáit sóidiam,aigéad heicsinoic agus albaimín séirimin bhólachta (BSA) ó Sigma Aldrich SAM agus baineadh úsáid as mar a fuarthas (St Louis, MO).

Fuarthas Tesaglitazar ó AstaTech Inc. (Bristol, PA). Fuarthas dendrimer PAMAM Ethylenediamine-lárnach (glúin 4 le 64 grúpa deiridh hiodrocsaile) ó Dendritech Inc. (Lár na Tíre, MI) mar réiteach in meatánól.

Stóráladh an dendrimer i meatánól ag 4 chéim agus galú meatánól roimh úsáid. Ceannaíodh scannán scagdhealaithe le scoite 1 kDa de mheáchan móilíneach (MWCO) ó Spectrum Laboratories Inc. (New Brunswick, NJ).

Baineadh úsáid as tuaslagóirí eile mar a fuarthas ina bhfoirmeacha ainhidriúla.Rinneadh na himoibrithe go léir, seachas na frithghníomhartha clic-chliceála ar chiodailiúchán ailcíne-azíde catalaíoch (CuAAC) faoi choinníollacha ainhidriúla i meán orgánach le hearraí gloine oigheann-triomaithe faoi nítrigin támh. atmaisféar.

Maidir le saothrú na gceall: Fuarthas Iolar Modhnaithe Dulbecco (DMEM), bó-seirim féatais (FBS), peinicillin-streiptimícin (P/S), 0.05% trypsin-EDTA, agus imoibrí MTT ó Invitrogen(Carlsbad, CA). , SAM).

Fuarthas imoibrí Griess ó Promega (Madison, WI) agus fuarthas TNF-ELISA ó R&D Systems (Minneapolis, MN). Ceannaíodh meatánól grád anailíseach ó Sigma-Aldrich. Fuarthas Trypan gorm ó Corning (Manassas, VA, SAM).

Nósanna imeachta sintéise do chomhchuingeacha D-Tesa
Sintéisíodh mona-azide tetraethylene glycol (2) ag baint úsáide as prótacal a foilsíodh roimhe seo.45

Sintéis agus íonú Tesa-TEG-azide (3).
Díscaoileadh Tesa (950 mg, 2.32 mmol) i 10 ml démheitiolformaimíd (DMF). Leis an tuaslagán corraithe seo, cuireadh monai-azíd tetramethylene glycol (2, 662.1 mg, 3.02 mmol) i DMF (1 ml) leis an drogall. Cuireadh DMAP (255.4 mg, 2.09 mmol) agus EDC (577.5 mg, 3.02 mmol) leis an meascán imoibriúcháin ansin, agus tosaíodh an t-ghníomhú sin faoi purge nítrigine ag teocht an tseomra ar feadh 24 uair an chloig.

Rinneadh monatóireacht ar an imoibriú trí úsáid a bhaint as crómatagrafaíocht tanaí-sraitheanna agus crómatagrafaíocht leachta ardfheidhmíochta (HPLC). Caolaíodh an meascán imoibriúcháin le 100 ml déchlóraimeatán (DCM) agus aistríodh an meascán imoibrithe amh isteach i dtonnadóir deighilte, agus ina dhiaidh sin nite an ciseal orgánach faoi dhó le tuaslagán décharbónáite sóidiam sáithithe, agus tuaslagán clóiríd amóiniam sáithithe ina dhiaidh sin agus ar deireadh le sáile.

Triomaíodh an ciseal orgánach ansin le sulfáit ainhidriúilsóidiam. Baineadh an tuaslagóir sa chiseal orgánach ansin le galú rothlach, agus rinneadh an tuaslagán a aththuaslagadh i 3 ml DCM agus é a ionsú ar ghlóthach shilice chun é a íonghlanadh le córas crómatagrafaíochta CombiFlash® ag baint úsáide as modh grádán le aicéatáit/heacsán eitile mar thuaslagóirí chun 3 chomh soiléir a tháirgeadh -ola buí.

Tá an táirge íon, inmhianaithe, eluted ag thart ar 30–40% aicéatáit eitile. (Toradh: 70%) 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.27 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.15(d, J=1.9 Hz, 2H), 7.08 (d, J=8.6 Hz, 2H), 6.73 (d, J=8.6 Hz,2H), 4.25–4.14 (m, 2H), 4.07 (t, J {{ 33}}.8 Hz, 2H), 3.94 (dd, J =7.8, 5.2 Hz, 1H), 3.67–3.47 (m, 14H), 3.30 (dd, J=8.7 , 3.8 Hz,2H), 3.06 (s, 3H), 3.02 (t, J=6.7 Hz, 2H), 2.91–2.84 (m, 2H),1.08 (t, J=7 .0 Hz, 3H).ESI-MS: teoiriciúil C28H39N3O10S: 609.24, faighte (M + 1):610.13.

Sintéis agus íonú D-YNE (5).

(480 mg, 4.22 mmol) le tuaslagán corraithe G4-PAMAM-OH (2.5 g, 0.176 mmol) i DMF ainhidriúil 20 ml. Cuireadh meascán Tothis, DMAP (430 mg, 3.52 mmol) agus EDC (1 g,5.28 mmol).

Rinneadh an meascán imoibriúcháin a stirredunder purge nítrigine ar feadh 24 uair an chloig ag teocht an tseomra. Ar chríochnú an imoibrithe, aistríodh an meascán imoibriúcháin chuig feadán scagdhealaithe 1000 MWCO Rinneadh scagdhealú DMF ar feadh 24 uair an chloig, agus athraíodh an DMF thart ar gach sé huaire.

Ansin rinneadh scagdhealú le huisce dí-ianaithe (DI) ar feadh 24 uair an chloig, agus an t-uisce á athrú timpeall sé huaire an chloig. Ar deireadh, rinneadh an t-ábhar feadán scagdhealaithe a bhí mar thoradh air a lyophilized ar feadh 48 uair an chloig, ag táirgeadh púdar bán, clúmhach.(Torradh: 61%). dromchla dendrimer OH), 4.01 (t, eistear –CH2), 3.32 (m, dendrimer –CH2), 3.06 (m, nascóir dendrimerand –CH2), 2.85–2.58 (m, dendrimer –CH2), 2.56–1.89(m, dendrimer agus nascóir –CH2), 1.78–1.61 (m, nascóir –CH2).Sintéis agus íonú D-Tesa (6).

Cuireadh Tesa-TEG-azide (3,177.8 mg, 0.3{{10}} 3 mmol) le meascán stirthe de D-YNE(5, 35{{2{{27}) }}} mg, 0.023 mmol) i 5 ml de mheascán 1: 1 de tetrahydrofuran (THF) agus uisce le 0.5 ml de DMF i vial sábháilte 20 ml micrea-imoibreora. Le haghaidh imoibriú cliceáil CuAAC, cuireadh pentahydrate coppersulfate (11.6 mg, 0.0467 mmol) agus (+) -sóidiam-Lascorbate (9.3 mg, 0.0467 mmol) leis an meascán imoibriúcháin.

Séalaíodh an vial, agus ansin cuireadh an soitheach imoibrithe in imoibreoir micreathonnach Biotage® Initiator agus d'imoibrigh sé faoi radaíocht micreathonnach 20 W le corraigh ar feadh 8 n-uaire ag 50 céim . Aistríodh an meascán imoibrithe go feadán scagdhealaithe 1000 MWCO, agus rinneadh scagdhealú DMF ar feadh 24 uair an chloig, agus cuireadh tuaslagóir úr in ionad DMF timpeall gach 4 huaire.

Ansin, aistríodh ábhar an fheadáin scagdhealaithe go feadán afalcon, agus cuireadh méid coibhéiseach uisce DI leis. Chomh maith leis sin, cuireadh 200 µl de thuaslagán salainn dé-óidiam aigéad ethylenediaminetetraacetic le hábhar an fheadáin seabhac.

Ansin cuireadh an meascán seo i scagdhealú nua 1000 MWCO, agus rinneadh scagdhealú ar feadh 12 uair an chloig i 1000 ml DIwater le tuaslagán EDTA curtha leis agus an scagdhealú uisce ina dhiaidh sin ar feadh 12 uair an chloig.

Ansin lyophilized an meascán ar feadh 48 uair an chloig agus mar thoradh ar bán, púdar clúmhach. (Toradh: 64%) 1H NMR (5{{{00 MHz, DMSO) δ 8.2-7.6 (m, dendrimer internalamide H), 7.36 (d, Tesa ArH), 7.21 (d, Tesa ArH), 7.03 (d, TesaArH), 6.76 (d, Tesa ArH), 4.37 (s, Tesa H), 4.18–4.04 (m, nascóirH), 3.96 (dd, Tesa agus nascóir H), 3.70 (m, Tesa agus nascóir H) ,3.58–3.14 (m, dendrimer –CH2), 3.14–2.86 (m, dendrimer–CH2), 2.87–2.49 (m, dendrimer agus nascóir –CH2), 2.25 (m, dendrimer –CH2) , 1.82–1.67 (m, nascóir –CH2), 0.97 (t, Tesa –CH3).

Teicnící tréithrithe

Athshondas maighnéadach núicléach (NMR). Taifeadadh speictream NMR ar speictriméadar Bruker 500 MHz ag teocht an tseomra. Tuairiscítear aistrithe ceimiceacha prótóin (δ) i ppm.

Baineadh úsáid as 1H NMR chun líon na móilíní Tesa atá ceangailte le gach móilín de D-Tesa a chinneadh trí mhodh comhtháthaithe prótóin, trí bhuaiceanna prótóin aimíde inmheánacha dendrimer ag δ 7.6–8.2 ppm a chur i gcomparáid le prótóin aramatacha Tesa ag δ 7.36–6.76 ppm agus prótóin meitile Tesa sa réigiún alafatacha.Crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta (HPLC).

Baineadh úsáid as HPLC (Waters Corporation, Baile na nGallóglach, Massachusetts) atá feistithe le caidéal dénártha a1525, degasser In-Line AF, autosampler 717 móide, brathadóir eagair fótaidhé-óid 2998, agus brathadóir ilfhluaraiseachta 2475 atá comhéadain le bogearraí Waters Empower.

Baineadh úsáid as colún cúlchéimnithe Siméadracht C18 (Tosoh, an tSeapáin) a raibh 5 μm de mhéid na gcáithníní aige, fad 25 cm, agus trastomhas inmheánach 4.6 mm. Rinneadh monatóireacht ar chomhdhúile ag 210 nm agus 254 nm ag baint úsáide as brathadóirí PDA.

Ba é tuaslagóir A uisce de ghrádHPLC le 0.1% aigéad trífhluara-aicéiteach (TFA), agus tuaslagóir B aicéataitrile (ACN) le 5% uisce agus 0.1% TFA. Thosaigh an modh a úsáideadh ag 1{ {7}}0 : 0 (ACN: uisce), laghdaigh sé go 10: 90 (uisce: ACN) i 5 nóiméad, d'fhan sé ag an bpolaracht sin ar feadh 15 nóiméad, agus d'fhill sé ar 100 : 0 (ACN: uisce) i 5 nóiméad nóiméad.Coimeádadh an ráta sreafa ag 1 ml min−1.Massspectroscopy.

Rinneadh ESI-MS ar mhais-speictriméadar BrukermicroTOF-II ag baint úsáide as aicéataitrile/uisce (9: 1) mar chóras tuaslagóra. Baineadh úsáid as na hiain mhóilíneacha mar bhuaiceanna prótónaithe[M + nH]n+ nó adducts [M + nX]n+ (X=Na, K, nó NH4) chun an fhoirmle eimpíreach a dhearbhú.

Scaipeadh solais dinimiciúil agus ζ-acmhainneacht. Baineadh úsáid as Zetasizer NanoZS (Malvern Instrument Ltd, Worchester, RA) atá feistithe le léasair a50 mW He–Ne (633 nm) chun méid na gcáithníní agus dáileadh féideartha ζ a chinneadh. Díscaoileadh D-Tesa uisce inDI go tiúchan de 0.2 mg ml−1 do DLS agus in 10 mM clóiríd sóidiam go dtí tiúchan de 0.1 mg ml−1 forζ-acmhainneacht.

Rinneadh na tomhais ag 25 céim , ag baint úsáide as uillinn scaipthe de 173 céim mar a thuairiscítear roimhe seo.27,46 Staidéar ar scaoileadh drugaí. Rinneadh D-Tesa a thuaslagadh ag tiúchan 1 mg ml−1 i dtuaslagán maolánach fosfáite (pH 7.4) i gcoinníollacha toimimic plasma nó i dtuaslagán citrate sóidiam (pH 5.5) chun aithris a dhéanamh ar choinníollacha líseasómacha.

Cuireadh eistir ó ae muiceola (ó Sigma Aldrich) leis an tuaslagán citrate sóidiam ag tús an staidéir ar scaoileadh agus rinneadh iad a athlánú thart ar gach 3 lá le linn an staidéir.

Bhí sampla 15 ml i ngach vial agus croitheadh ​​go leanúnach iad ag 37 céim ar feadh ré an turgnaimh. Ag pointí éagsúla ama, bailíodh 200 µl sampla dúblach ó gach pH agus cuireadh an ghníomhaíocht eistiráis ar ceal ina dhiaidh sin trí 200 µl meatánóil a chur leis. Samplaí pointe ama náid uaireanta a bhí mar an rialú.

Stóráladh na samplaí ag −80 céim chun aon hidrealú a sheachaint. Rinne HPLC anailís bhreise ar na samplaí agus ríomhadh an t-achar faoin gcuar (ag 210 nm) le haghaidh buaic na ndrugaí in aisce. Rinneadh an limistéar faoin gcuar a chomhghaolú le méid an druga a scaoileadh trí úsáid a bhaint as cuar calabraithe ina raibh comhchruinnithe aitheanta de Tesa saor in aisce á rith ar an HPLC ag 210 nm.

For more information:1950477648nn@gmail.com