Anailís Comhpháirte agus Gníomhaíocht Frithocsaídeach Polaisiúicrídí Ó Cistanche Deserticola

Coimriú: sa pháipéar seo, baintear polaisiúicrídí asCistanche deserticola, Cistanche deserticolaamhpolaisiúicrídDéantar CLP a íonú ag crómatagrafaíocht colún ceallalóis DEAE, agus faightear siúcra neodrach CLP agus siúcra aigéadach CLP2 de Cistanche deserticola, Ábhar an tsiúcra iomlán, aigéad urónach agus próitéin iCistanche deserticola polaisiúicríd amhCLP, Cistanche deserticola siúcra neodrach CLPl agusSiúcra aigéadach Cistanche deserticolaDéantar CLP2 a chinneadh trí scanadh speictreach UV, agus déantar meáchan móilíneach agus comhdhéanamh monosaccharide polaisiúicrídí a chinneadh. Ag an am céanna, déantar anailís ar chumas scavenging radacach DPPH agus cumas frithocsaídeach iomlán CLP polaisiúicríd amh Cistanche deserticola, siúcra neodrach Cistanche deserticola CLP1 agus siúcra aigéadach Cistanche deserticola Cl.P2. Léiríonn na sonraí tomhaiste go bhfuil na comhpháirteanna de Cistanche deserticola amh polaisiúicríde CLP, Cistanche deserticola siúcra neodrach CLP1 agus Cistanche deserticola acidic sugarCLP2 cosúil, ach tá difríochtaí móra ina n-ábhar, Is féidir beanna elution iolrach a fháil nuair Cistanche deserticola siúcra neodrach CLP1 agus Cistanche Déantar siúcra aigéadach deserticola CLP2 a dheighilt agus a íonú ag colún crómatagrafach ceallalóis DEAE, agus is é an dáileadh meáchain mhóilíneach ná 0~10 000 Da, rud a léiríonn gur siúcraí móilíneacha beaga iad príomhchodanna polaisiúicrídí Cistanche deserticola. Léiríonn torthaí cinnteoireachta monaisiúicríde siúcra neodrach Cistanche deserticola CLPl go bhfuil na monaisiúicrídí i siúcra neodrach Cistanche deserticola CLP1 den chuid is mó mannose, aigéad galacturonic, glúcós, galactose, agus arabinose. tá siúcra aigéadach ClP2 den chuid is mó rhamnose, aigéad galacturonic, glúcós agus galactós, Léiríonn torthaí an turgnaimh scavenging radacach DPPH agus turgnamh iomlán cumas frithocsaídeach polaisiúicrídí ó Cistanche deserticola go bhfuil an cumas frithocsaídeach de Cistanche deserticola siúcra neodrachCLPl níos airde ná sin de Cistanche deserticola polaisiúicríd amh Siúcra aigéadach CLP agus Cistanche deserticola CLP2.

Eochairfhocail:Cistanche deserticola; polaisiúicrídí; anailís ar chomhpháirt;gníomhaíocht frithocsaídeach; ionsúiteacht.

Faigh Sliocht Cistanche Tubulosa Chun Éifeacht Spriocdhírithe

Cistancheis planda seadánacha luibheach é ina bhfuil líon mór deglycosíde feanólachas, bithsintéis,gliocóisídí feinileatánóideach, siúcraí, agus alcóil. Is iad na glycans go príomha i bhfoirm polaisiúicrídí. Tá gníomhaíocht imdhíonachta láidir ag polaisiúicríd cistanche a rialaíonn feidhm [1-2].

Mar mheitibilítí idirmheánacha i ngníomhaíochtaí saoil an duine, tá fréamhacha saor in aisce i stát éagobhsaí cobhsaí agus tá gníomhaíocht ocsaídiúcháin ard acu, rud a d'fhéadfadh a bheith ina chúis le macromóilíní bitheolaíocha, dá bhrí sin, úsáid frithocsaídeach nádúrtha, dá bhrí sin, úsáid substaintí frithocsaídeacha nádúrtha chun fréamhacha saor in aisce a scavenge. bheith mar phríomhthreoir an taighde bia reatha. Comhdhéanamh polaisiúicríde naCistanchetá cumas láidir frithocsaídeach aige, a fhéadfaidh scavening fréamhacha saor in aisce a chur chun cinn i gcorp an duine. Tá cumas láidir frithocsaídeach ag comhdhéanamh polaisiúicríde Cistanches agus féadann sé scavening fréamhacha saor in aisce a chur chun cinn i gcorp an duine [3].

Sa pháipéar seo, tá anpolaisiúicrídíi Cistanche stannic a bhaintear agus a rangú de réir tréscaoilteacht glóthach ard-éifeachtúlachta. Socraíodh meáchan móilíneach polaisiúicrídí i gCistanche ag crómatagrafaíocht tréscaoilteachta glóthach ardfheidhmíochta. Socraíodh meáchan móilíneach polaisiúicrídí Cistanche ag crómatagrafaíocht tréscaoilteachta glóthach ardfheidhmíochta, agus bhí comhdhéanamh na polaisiúicrídí freisin Cinntíodh meáchan móilíneach polaisiúicrídí Cistanche ag crómatagrafaíocht tréscaoilteachta glóthach ardfheidhmíochta, agus bhí comhdhéanamh na polaisiúicrídí anailís.

Rinneadh anailís ar ghníomhaíocht frithocsaídeach Cistanche trí chumhacht scavening radacach saor in aisce agus cumas frithocsaídeach iomlán na gcomhpháirteanna polaisiúicríde a chinneadh. Chinneamar freisin cumas scavenging radacach saor in aisce agus cumas frithocsaídeach iomlán na gcomhpháirteanna polaisiúicríde de Cistanch, agus chuireamar bonn teoiriciúil ar fáil d'fhorbairt agus d'úsáid Cistanche agus a luach breise.

1 Substaintí polaisiúicríde a ullmhú agus a eastóscadh as Cistanche

Meáigh 2.5kg de Cistanche, slice é, cuir 12.5L d'uisce driogtha agus boil ar feadh 3h. Tar éis fiuchphointe ar feadh 3h, bailíodh an scagachán trí scagachán agus cuireadh é le 75 faoin gcéad eatánól, agus d'fhág sé chun seasamh ar feadh 24h. Tar éis fiuchphointe, bailíodh an scagachán trí scagachán, cuireadh le 75 faoin gcéad eatánól agus fágadh é chun seasamh ar feadh 24h, lártheifneoirithe ag 4000r/min ar feadh 30 nóiméad, agus bailíodh an deascán. Bailíodh an deascán, reoitear agus triomaíodh é chun CLP polaisiúicríde amh Cistanche a fháil [4]. Reo-triomaíodh an deascán chun an CLP polaisiúicríde amh de Cistanche a fháil [4]. Tógadh ceallalóis DEAE, sáithithe agus ata, degassed Rinneadh é a luchtú ar cholún malartaithe anion ceallalóis DEAE agus a chothromú le huisce driogtha agus tuaslagán NaCl. Baineadh úsáid as uisce agus tuaslagán NaCl le haghaidh cothromaíochta. Rinneadh meá 100 mg de pholaisiúicríd amh de Cistanche tubulosa CLP a thuaslagadh i 10 ml d'uisce driogtha, agus bailíodh an eluate tar éis elution le huisce driogtha.

Bailíodh an eluate tar éis elution le huisce driogtha agus reo-triomaithe de réir tiúchana a fháil ar an siúcra neodrach CLP1 de Cistanche; Bailíodh an eluate tar éis elution le tuaslagán NaCl, agus ansin comhchruinnithe agus reoite-triomaithe tar éis scagdhealaithe chun siúcra aigéadach Cistanche CLP1 a fháil. Tar éis elution le tuaslagán NaCl, bailíodh agus comhchruinníodh an eluate trí scagdhealú agus reoite-triomaithe chun siúcra aigéadach Cistanche CLP2 [5] a fháil.

Ullmhaíodh an siúcra neodrach CLP1 agus an siúcra aigéadach CLP2 de Cistanche tubulosa ag tiúchan 1 mg/kg, faoi seach. Ullmhaíodh na tuaslagáin pholaisiúicríde ag tiúchan 1 mg/mL, agus rinneadh anailís ar na polaisiúicrídí trí speictreascópacht UV ag baint úsáide as speictreafótaiméadar ag 210-600 nm. Scanadh an speictream UV ag baint úsáide as speictreafótaiméadar ag 210-600 nm, agus nuair a bhí an buaic ag 260-280 nm Nuair a bhí an buaic ag 260-280 nm, cruthaíodh go raibh próitéin agus aigéad núicléach sa tuaslagán [6].

2 Comhdhéanamh substainte polaisiúicríde Cistanche a chinneadh

Baineadh úsáid as an modh aigéad feanól-sulfair chun an cion siúcra iomlán i samplaí Cistanche a chinneadh. Tomhaiseadh tuaslagáin ghlúcóis de 0.1 mg/mL, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 agus 1 mL i bhfeadáin tástála gloine, agus cuireadh uisce driogtha leis chun an toirt a shocrú go 1 mL. Ansin cuireadh 0.5 ml d'imoibrí feanóil agus 2.5 ml d'aigéad sulfarach tiubhaithe le tiúchan 6 faoin gcéad leis na feadáin tástála, croitheadh ​​go maith agus fuaraithe go teocht an tseomra. Rinneadh an ionsúiteacht a thomhas ag 490 nm ag baint úsáide as speictreafótaiméadar, agus rinneadh an cuar caighdeánach a bhreacadh leis an ábhar siúcra mar chomhordú cothrománach agus ionsúiteacht mar chomhordanáid ingearach, agus ríomhadh an chothromóid aischéimnithí [7-8].

Cinneadh cion próitéine na samplaí Cistanche ag baint úsáide as modh Komas Brilliant Blue. Rinneadh cion próitéine na samplaí a thomhas ag an speictreafótaiméadar ag 495 nm agus ríomhadh an cion próitéine de réir na cothromóide cuar caighdeánach [9].

Cinneadh ábhar glyoxalate i samplaí Cistanche ag baint úsáide as an modh m-hydroxyphenyl. Cuireadh tiúchain éagsúla den chaighdeánach agus 0.4 mL den tuaslagán samplach le tiúchan de 0.1 mg/mL leis an bpromhadán le 2.5 mL d'aigéad sulfarach tiubhaithe, croitheadh

Cuireadh an tiúchan de m-hiodrocsaifheinile agus 0.5 faoin gcéad de thuaslagán hiodrocsaíde sóidiam leis an bpromhadán, croitheadh ​​go maith agus fágtar iad ar feadh 30 nóiméad. Rinneadh an ionsúiteacht ag 525 nm a thomhas de réir speictreafótaiméadar, agus ríomhadh an méid glyoxalate sa sampla de réir na cothromóide cuar caighdeánach [10-11]. Socraíodh meáchan móilíneach coibhneasta polaisiúicrídí Cistanche ag crómatagrafaíocht glóthach ardfheidhmíochta, agus socraíodh comhdhéanamh monaisiúicrídí Cistanche ag crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta. Socraíodh comhdhéanamh monosaccharide Cistanche ag crómatagrafaíocht leachtach ardfheidhmíochta [12].

3 Torthaí agus anailís ar chomhdhéanamh polaisiúicríde Cistanche Tubulosa

Ó Fíor 1, is féidir a fheiceáil gur léirigh an siúcra neodrach CLP1 de Cistanche Tubulosa buaic ionsúcháin soiléir ag 280nm, cé nach raibh buaic ionsúcháin soiléir ag 260-280nm ag an siúcra aigéadach CLP2 de Cistanche Tubulosa, ach an Bhí speictream ionsú UV níos airde. Ós rud é go raibh luachanna ionsúcháin UV níos mó ag an tryptophan agus an tyrosine atá sna próitéiní ag 280 nm, d'fhéadfaí a mheas go raibh glycoproteiní i siúcra neodrach Cistanche CLP1, ach ní fhéadfaí a mheas an raibh aigéid núicléacha agus próitéiní i siúcra aigéadach Cistanche CLP2.

Ní féidir a chinneadh an bhfuil aigéid núicléacha agus próitéiní sa siúcra aigéadach CLP2 de Cistanche.

Is féidir le hanailís colún crómatagrafaíochta malairte ian diúltach ceallalóis DEAE substaintí ianacha agus neamhíonachtaí a asú ar an gcolún chun scaradh substaintí polaisiúicríde a bhaint amach, agus tar éis an eluate uisce driogtha a dhíriú agus a thriomú, fuarthas iomlán de 34.68 mg de Cistanche siúcra neodrach CLP1, agus tar éis. ag baint úsáide as tuaslagán NaCl chun elute agus díriú agus triomú, fuarthas iomlán de 16.52 mg de Cistanche siúcra aigéadach CLP2. An chothromóid chuar chaighdeánach den ábhar iomlán siúcra, an cion próitéine agus an chothromóid chuar chaighdeánaigh glyoxylate. Fuarthas na tomhais ar shiúcra iomlán, próitéin agus glyoxylate de Cistanche. Rinneadh inneachar iomlán an tsiúcra, na próitéine agus na n-aigéad glucuronic i gCistanche a thomhas agus a thaispeáint i dTábla 1.

Léirítear cuar scanadh speictream UV an fhótaiméadar ó 210 go 600 nm i bhFíor 1.

Ó Fíor 1, is féidir a fheiceáil gur léirigh siúcra neutrophilic Cistanche CLP1 buaic ionsú soiléir ag 280 nm, agus léirigh siúcra aigéadach Cistanche CLP2 buaic ionsú ag 260-280 nm. agus léirigh an siúcra aigéadach CLP2 de Cistanche Tubulosa buaic ionsú soiléir ag 260-280 nm. Cé nach raibh aon bhuaic ionsú soiléir ag 260-280 nm, bhí an speictream ionsú UV níos airde. Ós rud é go raibh luach ionsúcháin níos mó ag tryptophan agus tyrosine atá sna próitéiní ag 280 nm do luach ionsú UV, is féidir a mheas go raibh glycoproteiní i siúcra neodrófail Cistanche CLP1, ach níorbh fhéidir a chinneadh an raibh aigéid núicléacha agus próitéiní i siúcra aigéadach Cistanche CLP2. . Níorbh fhéidir láithreacht aigéid núicléacha agus próitéiní i Cistanche CLP2 a chinneadh.

Is féidir le hanailís colún crómatagrafaíochta malairte ian diúltach ceallalóis DEAE substaintí agus neamhíonachtaí ianacha a asú isteach sa cholún. Baineadh amach scaradh substaintí polaisiúicríde trí na substaintí agus na neamhíonachtaí ianach ar an gcolún a adsorrú. Díríodh an eluate uisce driogtha agus triomaíodh é chun siúcra neodrach Cistanche a fháil Tar éis an eluate uisce driogtha a dhíriú agus a thriomú, fuarthas 34.68 mg de CLP1 san iomlán, agus tar éis é a dhíriú agus a thriomú le tuaslagán NaCl, fuarthas an siúcra aigéadach CLP1. Fuarthas an siúcra aigéadach CLP2 de Cistanche mar 16.52 mg. Fuarthas an chothromóid cuar caighdeánach den ábhar iomlán siúcra, cion próitéine agus ábhar glyoxylate Cistanche. agus cothromóid chuar chaighdeánach glyoxylate. Fuarthas na tomhais ar shiúcra iomlán, próitéin agus glyoxylate de Cistanche. Rinneadh inneachar iomlán an tsiúcra, na próitéine agus na n-aigéad glucuronic i gCistanche a thomhas agus a thaispeáint i dTábla 1.

Tábla 1 Inneachar iomlán an tsiúcra , na próitéine agus na n-aigéad úrónach i Cistanche deserticola

Is féidir meáchan móilíneach agus buaic-achar an tsampla chaighdeánaigh a chinneadh, agus is féidir an chothromóid aischéimniúcháin aischéimnithí a fháil trí chomhartha astaithe solais an tsampla atá le tástáil a chur isteach sa chothromóid aischéimnithí. Is féidir meáchan móilíneach an tsampla atá le tástáil a fháil. Is féidir meáchan móilíneach na samplaí atá le tástáil a fháil trí luachanna comhartha astaithe solais na samplaí atá le tástáil a chur isteach sa chothromóid aischéimnithí. Fuarthas an meánmheáchan móilíneach, meánmheáchan móilíneach trom agus comhéifeacht scaipthe Cistanche Tubulosa CLP1 agus Cistanche Tubulosa CLP2. Socraíodh siúcra neodrach Cistanche CLP1 agus Cistanche acidulous CLP2 ag crómatagrafaíocht tréscaoilteachta glóthach ardfheidhmíochta. Taispeántar torthaí an ama coinneála agus ríomh an mheáchain mhóilíneach i dTábla 2. Baineadh úsáid as an gcóimheas idir an meánmheáchan móilíneach trom agus an meánmheáchan móilíneach uimhreacha chun leithead an dáilte mhóilíneach a léiriú. Úsáidtear an cóimheas idir meánmheáchan móilíneach trom agus meánmheáchan móilíneach uimhreacha chun leithead an dáilte mhóilíneach a léiriú.

Iarr tuilleadh:

Ríomhphost:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Teil: móide 86 15292862950