Faigheann vacsaíní Imdhíonacht Cheallach Fíor-Thras-imoibríoch don Leagan SARS-CoV-2 Omicron

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Jinyan Liu1*, Abishek Chandrashekar1*, Daniel Sellers1*, Julia Barrett1, Michelle Lifton1, Katherine McMahan1, Michaela Sciacca1,

Haley VanWyk1, Cindy Wu1, Jingyou Yu1, Ai-ris Y. Collier1, Dan H. Barouch1,2*

1 Ionad Leighis Beth Israel Deaconess, Boston, MA, SAM;

2 Institiúid Ragon MGH, MIT, agus Harvard, Cambridge, MA, SAM

Léiríodh go seachnaíonn an malairt SARS-CoV -2 Omicron (B.1.1.529) atá an-mhothúchánach codán suntasach de neodrú freagraí antashubstainte a eascraíonn as vacsaíní reatha a ionchódaíonn imdhíon-ghin WA1/2020 Spike1, rud a fhágann go bhfuil méadú ar ionfhabhtuithe cinn. agus éifeachtúlacht laghdaithe vacsaíne. Is dócha go mbeidh freagairtí imdhíonachta ceallacha, go háirithe freagairtí cille CD8 móide T, ríthábhachtach le haghaidh cosanta ar ghalair SARS-CoV-2 dian2-6. Léirímid anseo go bhfuil imdhíonacht cheallacha a tharlódh de bharr vacsaíní SARS-CoV-2 reatha an-tras-imoibríoch i gcoinne an athraitheach SARS-CoV-2 Omicron. Léirigh daoine aonair a fuair vacsaíní Ad26.COV2.S nó BNT162b2 freagraí marthanacha CD8 móide agus CD4 móide T cille a léirigh tras-imoibríocht fhairsing i gcoinne na leaganacha Delta agus Omicron araon, lena n-áirítear i bhfodhaonraí cealla cuimhne lárnacha agus éifeachtóra. Ba iad na freagraí meánach CD8 móide T cille Omicron-shonracha 82-84 faoin gcéad de WA1/2020-fhreagraí sonracha CD8 móide T cille. Tugann na sonraí seo le fios go bhféadfadh vacsaíní atá ann faoi láthair cosaint shuntasach a sholáthar i gcoinne galar tromchúiseach leis an leagan Omicron SARS-CoV-2 in ainneoin an laghdú suntasach ar fhreagairtí antashubstainte a neodrú.

sochair sláinte cistanche: díolúine a fheabhsú

Tá sé léirithe ag staidéir le déanaí go laghdaítear antasubstaintí neodraithe a fhaightear trí vacsaín (NAbs) go substaintiúil go dtí an t-athraitheach Omicron SARS-CoV-2 atá an-mhathánach, rud a fhágann go bhfuil an scaipeadh domhanda tapa, lena n-áirítear ionfhabhtuithe ceannródaíocha i ndaoine aonair atá go hiomlán vacsaínithe1. Chun tras-imoibríocht freagairtí imdhíonachta ceallacha a fuarthas ón vacsaín a mheas i gcoinne an athraitheach SARS-CoV-2 Omicron, rinneamar measúnú ar fhreagraí cille CD8 móide agus CD4 móide T i 51 duine aonair a fuair vacsaíniú leis an Ad26 atá bunaithe ar veicteoir adenovirus. Vacsaín COV2.S7 (Johnson & Johnson; N=20) nó an vacsaín mRNA-bhunaithe BNT162b28 (Pfizer; N=31).

Tar éis vacsaínithe BNT162b2, thugamar faoi deara freagairtí arda WA1/2020-NAb ar leith ag mí 1, agus tháinig laghdú géar ina dhiaidh sin faoi mhí 8, mar a rabhthas ag súil leis9,10 (Fíor 1a). Tar éis an vacsaínithe Ad26.COV2.S, bhí freagraí sonracha WA1/2020-shonracha WA1/{2níos ísle den chuid is mó ag mí 1, ach bhí na freagraí seo níos marthanaí agus lean siad ag míonna 89,11 (Fíor 1a). Mar sin féin, breathnaíodh NAbs tras-imoibríocha sonracha Omicron-sonracha don dá vacsaín (Fíor 1a), comhsheasmhach le sonraí le déanaí in éagmais treisithe breise1. Rinne ELISA measúnú ar fhreagraí ceangailteacha antashubstainte a bhain go sonrach le gabhdóirí (RBD) agus léirigh siad treochtaí comhchosúla, le híosmhéid antasubstaintí ceangailteach tras-imoibríocha a bhain go sonrach le hOmicron (Fíor 1b). peptide comhthiomsaithe IFN-g thástálacha ELISPOT léirigh tras-imoibríocht shubstaintiúil a Omicron (Sonraí Breisithe Fig. 1). An chéad uair eile rinneamar measúnú ar fhreagraí cille T CD8 móide agus CD4 móide Spike trí thástálacha staining cítocine intracellular. Ad26.COV2.S airmheán ionduchtaithe Spike-shonrach IFN-g CD8 móide freagraí cealla T de 0.061 faoin gcéad , 0.062 faoin gcéad , agus {{ 72}}.051 faoin gcéad i gcoinne WA1/2020, Delta, agus Omicron, faoi seach, ag mí 8 tar éis an vacsaínithe (Fíor 2a). BNT162b2 airmheán spreagtha Spike-shonrach IFN-g CD8 móide freagraí cealla T de 0.028 faoin gcéad agus 0.023 faoin gcéad i gcoinne WA1/2020 agus Omicron, faoi seach, ag mí 8 tar éis vacsaínithe (Fíor 2a). Tugann na sonraí seo le fios go raibh freagairtí cille CD8 móide T a bhain go sonrach le Omicron 82-84 faoin gcéad tras-imoibríoch le freagraí sonracha WA1/{65}}CD8 móide T cille. Ba mheánmhéid de 0.026 faoin gcéad, 0.030 faoin gcéad, agus 0.029 faoin gcéad i gcoinne WA1/2020, Delta, agus Omicron, faoi seach, agus BNT162b2 faoi seach a bhí sna freagairtí cille IFN-g CD4 móide T spike-shonracha a fuair Ad26.COV2.S agus BNT162b2. 0.033 faoin gcéad agus 0.027 faoin gcéad i gcoinne WA1/2020 agus Omicron, faoi seach, rud a léiríonn tras-imoibríocht shubstaintiúil CD4 móide freagraí cille T chomh maith (Fíor 2b). Breathnaíodh tras-imoibríocht shubstaintiúil Omicron freisin le haghaidh TNF-a agus IL-2 Spike-shonrach a réitigh CD8 móide agus CD4 móide freagraí cille T (Sonraí Breisithe Fíor. 2).

Léirigh anailís aischéimniúcháin líneach go raibh comhghaol idir freagairtí cille CD8 móide T a bhain go sonrach le Omicron agus WA1/2020-fhreagraí sonracha CD8 móide T cille don vacsaín Ad26.COV2.S don dá phointe ama (R=0.78, P<0.0001, slope="" 0.75)="" and="" the="" bnt162b2="" vaccine="" (r="0.56,"><0.0001, slope="" 0.81),="" although="" two="" individuals="" had="" undetectable="" omicron-specific="" cd8+="" t="" cell="" responses="" following="" bnt162b2="" vaccination="" (fig.="" 3a).="" similarly,="" omicron-specific="" cd4+="" t="" cell="" responses="" correlated="" with="" wa1/2020-specific="" cd4+="" t="" cell="" responses="" for="" both="" the="" ad26.cov2.s="" vaccine="" (r="0.79,"><0.0001, slope="" 0.83)="" and="" the="" bnt162b2="" vaccine="" (r="0.90,"><0.0001, slope="" 0.88)="" (fig.3b).="" spike-specific="" ifn-g="" cd8+="" and="" cd4+="" t="" cell="" central="" memory="" and="" effector="" memory="" subpopulations="" elicited="" by="" ad26.cov2.s="" also="" showed="" extensive="" cross-reactivity="" to="" delta="" and="" omicron.="" at="" month="" 8,="" cd8+="" central="" memory="" responses="" were="" 0.076%,="" 0.054%,="" and="" 0.075%,="" cd8+="" effector="" memory="" responses="" were="" 0.168%,="" 0.143%,="" and="" 0.146%,="" cd4+="" central="" memory="" responses="" were="" 0.030%,="" 0.035%,="" and="" 0.038%,="" and="" cd4+="" effector="" memory="" responses="" were="" 0.102%,="" 0.094%,="" and="" 0.083%,="" against="" wa1/202,="" delta,="" and="" omicron,="" respectively="" (fig.="">

Léiríonn ár sonraí go bhfaigheann Ad26.COV2.S agus BNT162b2 imdhíonacht cheallach tras-imoibríoch den chuid is mó i gcoinne leaganacha SARS-CoV-2 lena n-áirítear Omicron. Tugann comhsheasmhacht na mbreathnuithe seo thar dhá theicneolaíocht ardán vacsaíne dhifriúla (veicteoir víreasach agus mRNA) le fios go bhfuil na torthaí seo i gcoitinne. Tá codarsnacht ghéar idir tras-imoibríocht fhairsing na bhfreagraí cille CD8 móide agus CD4 móide Omicron-shonracha agus na freagraí antashubstainte a bhaineann le neodrú agus ceangailteach a bhaineann go sonrach le Omicron atá laghdaithe go suntasach. Tá na sonraí seo comhsheasmhach le réamh-staidéir a thaispeánann tras-imoibríocht níos mó ar fhreagraí imdhíonachta ceallacha a fuarthas ón vacsaín i gcomparáid le freagraí imdhíonachta greannacha i gcoinne na leaganacha SARS-CoV-2 Alpha, Beta, agus Gáma12. Tá an 82-84 faoin gcéad tras-imoibríocht de CD8 móide freagraí cille T ar Omicron comhsheasmhach le tuar teoiriciúil bunaithe ar na sócháin Omicron6.

Tá sé léirithe ag staidéir réamhchliniciúla go gcuireann cealla CD8 móide T le cosaint i gcoinne SARS-CoV-2 i macaques rhesus, go háirithe nuair a bhíonn freagraí antasubstainte suboptimal5. Tuairiscíodh freisin freagairtí cille CD8 móide agus CD4 móide T marthanach tar éis ionfhabhtaithe agus vacsaínithe2- 4,6,9,11,13,14. I bhfianaise ról na gcealla CD8 móide T in imréiteach ionfhabhtuithe víreasacha, is dócha go gcuireann imdhíonacht cheallacha go mór le cosaint vacsaíne i gcoinne galar tromchúiseach SARS-CoV-2. D’fhéadfadh sé seo a bheith ábhartha go háirithe do Omicron, a seachnaíonn cuid mhór de na freagraí antasubstainte. Tugann ár sonraí le fios go bhféadfadh vacsaíní reatha cosaint shubstaintiúil a sholáthar ar ghalair thromchúiseacha de bharr an athraitheach SARS-CoV{-2 Omicron in ainneoin freagraí neodraithe laghdaithe antasubstainte agus ionfhabhtuithe cinn méadaithe.

púdar cisteanche

Modhanna

Déan staidéar ar an daonra

Fuarthas samplaí ó dhaoine aonair a fuair an vacsaín BNT162b2 ó bhiththaisce eiseamail Ionad Leighis Beth Israel Deaconess (BIDMC). Fuarthas samplaí ó dhaoine aonair a fuair Ad26.COV2.S ón staidéar COV1001 (NCT04436276). D’fhaomh bord athbhreithnithe institiúideach BIDMC an dá staidéar. Thug na rannpháirtithe go léir toiliú feasach. Eisíodh daoine aonair ón staidéar seo má bhí stair ionfhabhtuithe SARS-CoV- 2 acu, má fuair siad vacsaíní eile de chuid COVID nó má fuair siad cógais imdhíon-shochtadh.Pseudovirus a neodaíonn measúnacht antashubstaint

Úsáideadh na pseudoviruses SARS-CoV a léirigh géine tuairisceora luciferase chun antasubstaintí a neodaíonn pseudovirus a thomhas. Go hachomair, tógann an pacáistiú psPAX2 (Clár Acmhainne agus Imoibrí SEIF), tuairisceoir luciferase plasmid pLentiCMV Puro-Luc (Addgene), agus spike próitéin-léiriú pcDNA3.1-SARS-CoV{8}} Bhí SΔCT comh- aistrithe go cealla HEK293T (ATCC CRL_3216) le lipofectamine 2000 (ThermoFisher Scientific). Gineadh leagan pseudoviruses de SARS-CoV-2 trí úsáid a bhaint as brú WA1/2020 (Wuhan/WIV04/2019, ID aontachais GISAID: EPI_ISL_402124), leagan B.1.1.7 (Alfa, Aitheantas aontachais GISAID: EPI_ISL_601443), leagan B.1.351 (Beta, ID aontachais GISAID: EPI_ISL_712096), B.1.617. 2 (Delta, ID aontachais GISAID: EPI_ISL_2020950), nó B.1.1.529 (Omicron, ID GISAID: EPI_ISL_7358094.2). Bailíodh na súiteáin ina bhfuil na víris pseudotype 48h tar éis aistrithe; íonghlanadh víris pseudotype trí scagachán le scagaire 0.{{{45-μm. Chun gníomhaíocht neodraithe serum daonna a chinneadh, síolaíodh cealla HEK293T-hACE2 i 96-phlátaí saothraithe fíocháin tobair ag dlús 1.75 × 104 cill in aghaidh an tobair thar oíche. Ullmhaíodh caoluithe sraitheacha faoi thrí de shamplaí séiream neamhghníomhaithe teasa agus meascadh iad le 50 ul den pseudovirus. Goradh an meascán ag 37 céim ar feadh 1 h sula gcuirtear le cealla HEK293T-hACE2 é. Tar éis 48 h, cuireadh cealla i Measúnacht Steady-Glo Luciferase (Promega) de réir threoracha an mhonaróra. Sainmhíníodh leibhéil neodraithe SARS-CoV-2 mar an caolú samplach ag ar breathnaíodh laghdú 50 faoin gcéad (NT50) in aonaid choibhneasta solais i gcoibhneas le meán na dtoibreacha rialaithe víreas.

Measúnacht imdhíonta-nasctha le heinsím (ELISA)

Rinne ELISA measúnú ar antasubstaintí ceangailteacha a bhaineann go sonrach le gabhdóirí (RBD) SARS-CoV-2 i serum. 96-tá plátaí tobair brataithe le 2 ug/mL de SARS-CoV-2 WA1/2020, B.1.617.2 (Delta), B.1.351 (Beta), nó B.1.1.529 (Omicron) próitéin RBD i saline maolánach fosfáite 1 × Dulbecco (DPBS) agus gortha ag 4 céim thar oíche. Tar éis goir, nite plátaí uair amháin le maolán níocháin (0.05 faoin gcéad Tween 20 in 1 × DPBS) agus bac le 350 μL de thuaslagán bloc cáiséin in aghaidh an tobair ar feadh 2 go 3 uair an chloig ag teocht an tseomra. Tar éis goir, caitheadh ​​amach bloc-réiteach agus scriosadh na plátaí go tirim. Cuireadh caoluithe sraithe de shéiream teas-dhíghníomhaithe caolaithe i mbloc Cháiséin leis na toibreacha, agus goraíodh plátaí ar feadh 1 uair an chloig ag teocht an tseomra, roimh 3 níochán eile agus gor 1-uair an chloig le caolú 1:4000 de fhrith-. daonna IgG horseradish peroxidase (HRP) (Invitrogen, ThermoFisher Scientific) ag teocht an tseomra sa dorchadas. Nitear plátaí 3 huaire, agus cuireadh 100 μL de réiteach SeraCare KPL TMB SureBlue Start le gach tobar; cuireadh stop le forbairt pláta trí 100 μL de réiteach SeraCare KPL TMB Stop a chur leis in aghaidh an tobair. Taifeadadh an absorbance ag 450 nm, le tagairt ag 650 nm, le léitheoir microplate VersaMax (Feistí Móilíneacha). I gcás gach sampla, ríomhadh titer críochphointe ELISA trí úsáid a bhaint as 4-cuar lóistíochta pharaiméadar oiriúnach chun caolú cómhalartach an tséiream a ríomh a thugann luach ionsúcháin ceartaithe (450 nm{{-650 nm) de 0.2. Tuairiscíodh críochphointí idirshuite.

sliocht cistanche deserticola: díolúine a fheabhsú

Measúnacht imdhíon-láthair nasctha le heinsím (ELISPOT).

Brataíodh plátaí ELISPOT le antashubstaint IFN-monaclónach frithdhaonna luch ó MabTech ag 1 µg/tobar agus goraíodh iad thar oíche ag 4 céim . Nite plátaí le DPBS agus bac le meáin R10 (RPMI le FBS teas-dhíghníomhaithe 10 faoin gcéad le 1 faoin gcéad de 100x peinicillin-streptomycin, 1M HEPES, 100mM Sóidiam pyruvate, 200mM L-glutamine, agus 0.1 faoin gcéad de 0.1 faoin gcéad de 55mM). 2-Mercaptoethanol) ar feadh 2-4 h ag 37 céim . Ullmhaíodh peptídí S comhthiomsaithe SARS-CoV-2 ó SARS-CoV-2 WA1/2020, B.1.617.2 (Delta), nó B.1.1.529 (Omicron) (Bithcheimicíní an 21ú hAois) agus plátáilte ag tiúchan 2 µg/tobar, agus cuireadh 100,000 cill/tobar leis an pláta. Goradh na peiptídí agus na cealla ar feadh 15-20 h ag 37 céim . Rinneadh gach céim tar éis an gorlainne seo ag teocht an tseomra. Níodh na plátaí le maolán níocháin ELISPOT agus goradh iad ar feadh 2-4 h le antashubstaint monachlónach frith-dhaonna IFN-luch Biotinylated ó MabTech (1 µg/mL). Níodh na plátaí an dara huair agus goraíodh iad ar feadh 2-3 h le AP frith-bhiotán gabhair comhchuingeach ó Rockland, Inc. (1.33 µg/mL). Tar éis an nigh deiridh cuireadh tuaslagán tsubstráit de shalann p-toluidín fosfáite indolile (NBT/BCIP) ar feadh 7 nóiméad leis an Nitor-gorm Tetrazolium Chloride/5-Bromo{-4-chloro 3'). Caitheadh ​​​​an chromagen i leataobh agus nitear na plátaí le huisce agus triomaíodh iad in áit gann ar feadh 24 h. Rinneadh plátaí a scanadh agus a chomhaireamh ar Anailíseoir Imdhíonachta Cellular Technologies Limited.

Measúnacht staining cítocín intracellular (ICS).

Rinneadh freagraí cille CD4 móide agus CD8 móide T a chainníochtú trí thástálacha comhthiomsaithe um staining cítocine intracellular spreagtha ag peiptíd (ICS). I linnte peptide bhí 15 peiptíd aimínaigéad forluiteacha ag 11 aimínaigéad thar an SARS-CoV-2 WA1/2020, B.1.617.2 (Delta), nó B.1.1 .529 (Omicron) Próitéiní spike (Bithcheimiceach an 21ú hAois). 10Athchuireadh 6 chill aonnúicléacha fola forimeallacha i 100 µL de mheáin R10 arna fhorlíonadh le antashubstaint mhonaclónach CD49d (1 µg/mL) agus antasubstaint mhonaclónach CD28 (1 µg/mL). Rinneadh measúnú ar gach sampla le bréige (100 µL de R10 móide 0.5 faoin gcéad DMSO; rialú cúlra), peiptídí (2 µg/mL), agus/nó 10 pg/mL aicéatáit mhiristáit phorbol (PMA) agus ionomycin 1 µg/ml (Sigma-). Aldrich) (100 µL; rialú dearfach) agus gor ag 37 céim ar feadh 1 h. Tar éis gor, cuireadh 0.25 µL de GolgiStop agus 0.25 µL de GolgiPlug i 50 µL de R10 le gach tobar agus gor iad ag 37 céim ar feadh 8 h agus ansin coinníodh iad ag 4 chéim thar oíche. An lá dár gcionn, nite na cealla faoi dhó le DPBS, dhaite le dath uisce beo/marbh ar feadh 10 nóiméad agus ansin dhaite le titers réamhchinnte antasubstaintí monachlónacha i gcoinne CD279 (clón EH12.1, BB700), CD4 (clón L200, BV711), CD27 (clón M-T271, BUV563), CD8 (clón SK1, BUV805), CD45RA (clón 5H9, APC H7) ar feadh 30 min. Ansin nite cealla faoi dhó le maolán 2 faoin gcéad FBS/DPBS agus goraíodh iad ar feadh 15 nóiméad le 200 µL de BD CytoFix/CytoPerm Fixation/Permebilization réiteach. Nitear cealla faoi dhó le maolán 1X Perm Wash (BD Perm/WashTM Buffer 10X sa trealamh CytoFix/CytoPerm Fixation/ Permebilization caolaithe le huisce MilliQ agus a rith trí scagaire 0.22µm) agus dhaite le intracellularly le antasubstaintí monaclónach i gcoinne IFN- (clóin B27; BUV395), agus CD3 (clón SP34.2, Alexa 700), ar feadh 30 min. Nitear cealla faoi dhó le maolán 1X Perm Wash agus socraíodh iad le 250 µL de formaildéad 1.5 faoin gcéad a ullmhaíodh go húr. Aistríodh cealla seasta go dtí 96-pláta bun tobair agus rinne an córas BD FACSymphony™ anailís orthu. Rinneadh anailís ar na sonraí agus úsáid á baint as FlowJo v9.9.

forlíonadh cistanche:díolúine a fheabhsú

Tagairtí

1. Cele S, Jackson L, Khan K, et al. SARS-CoV-2 Tá éalú fairsing ach neamhiomlán ag Omicron ó Pfizer BNT162b2 a d’eascair neodrú agus éilíonn sé ACE2 le haghaidh ionfhabhtú. meánRxiv 2021.

2. Dan JM, Mateus J, Kato Y, et al. Cuimhne imdhíoneolaíoch ar SARS-CoV-2 measúnaithe ar feadh suas le 8 mí tar éis an ionfhabhtaithe. Eolaíocht 2021; 371.

3. Sette A, Crotty S. Díolúine oiriúnaitheach do SARS-CoV-2 agus COVID-19. Cill 2021; 184:861-80.

4. Goel RR, Péintéir MM, Apostolidis SA, et al. Cothaíonn vacsaíní mRNA cuimhne imdhíonachta marthanach do SARS-CoV-2 agus leaganacha atá ina n-údar imní. Eolaíocht 2021; 374:abm0829.

5. McMahan K, Yu J, Mercado NB, et al. Comhghaolú cosanta i gcoinne SARS-CoV-2 i macaques rhesus. Dúlra 2021; 590:630-4.

6. Grifoni A, Weiskopf D, Ramirez SI, et al. Spriocanna Freagraí T Cell ar SARS-CoV-2 Coronavirus i nDaoine le Galar COVID-19 agus Daoine Aonair Gan Nochtadh. Cill 2020; 181:1489-501 e15.

7. Sadoff J, Gray G, Vandebosch A, et al. Sábháilteacht agus Éifeachtúlacht an Vacsaín Aondáileog Ad26.COV2.S in aghaidh Covid-19. N Béarla J Meán 2021; 384:2187-201.

8. Polack FP, Thomas SJ, Kitchin N, et al. Sábháilteacht agus Éifeachtúlacht an Vacsaín BNT162b2 mRNA Covid-19. N Eng J Med 2020.

9. Collier AY, Yu J, McMahan K, et al. Cinéitic Difreálach Freagraí Imdhíonachta a Spreagann Vacsaíní Covid-19. N Béarla J Meán 2021; 385:2010-2.

10. Falsey AR, Frenck RW, Jr., Walsh EE, et al. SARS-CoV-2 Neodrú le Dáileog Vacsaín BNT162b2 3. N Engl J Med 2021.

11. Barouch DH, Stephenson KE, Sadoff J, et al. Freagraí Imdhíonachta Humoral agus Ceallacha CRUA 8 Mí tar éis Vacsaínithe Ad26.COV2.S. N Béarla J Meán 2021; 385:951-3.

12. Alter G, Yu J, Liu J, et al. Imdhíonacht na vacsaíne Ad26.COV2.S i gcoinne leagan SARS-CoV-2 i ndaoine. Dúlra 2021; 596:268-72.

13. Poon MML, Rybkina K, Kato Y, et al. Gineann ionfhabhtú SARS-CoV-2 cuimhne imdhíoneolaíoch logánaithe fíocháin i ndaoine. Imdhíoneolaíocht eolaíochta 2021; 6:eabl9105.

14. Vidal SJ, Collier AY, Yu J, et al. Comhghaolú Neodraithe le SARS-CoV-2 Athróga Imní de réir Sera Paindéimeach Luath. J Víreas 2021; 95: 0040421.

leas a bhaint as forlíonadh cistanche:díolúine a fheabhsú