Cóireáil Nephropathy Diaibéiteach: Aonocsaíd Charbóin

le haghaidh tuilleadh eolais:ali.ma@wecistanche.com

Cuid Ⅱ: ​​Maolaíonn aonocsaíd charbóin seanchas i nephropathy diaibéitis trí autophagy a fheabhsú

Guibin Meil; Chunjie Jiang; Xueer Cheng; & ag al.

Teibí

Cuspóirí: Tá ról tábhachtach ag Senescence, arb é is sainairíonna é gabháil le timthriall buan,nephropathy diaibéitis(DN). Mar sin féin, níl meicníocht na seanaoise duánach soiléir fós, agus tá an chóireáil atá dírithe uirthi fós le hiniúchadh a thuilleadh.

Ábhair agus Modhanna: An DN (nephropathy diaibéitis) spreag HFD agus STZ lucha, agus déileáladh le 3 chineál cealla duánach le glúcóis ard (HG) chun múnla in vitro a bhunú. Braitheadh ​​marcóirí a bhaineann le seanchas agus uathphagy le qRT-PCR agus blot an Iarthair. Ina theannta sin, baineadh úsáid as coscairí autophagy agus comh-imdhíon-fhuascailt chun meicníocht anAonocsaíd charbóin (CO). Ina theannta sin, rinneadh iniúchadh ar an ngaol sainiúil idir uathphagaíocht agus seanchas trí chomhlonnú trí-fhluaraiseacht imdhíon-fhluaraiseachta agus ELISA.

Torthaí: Fuaireamar amach gur tharla seangacht in vivo agus in vitro, rud a d’fhéadfadh CO a aisiompú (Aonocsaíd charbóin). Go meicniúil, léirigh muid go bhfuil CO (Aonocsaíd charbóin) bac ar mhífheidhm na n-uathphagy i DN (nephropathy diaibéitis) lucha go páirteach trí choimpléasc Beclin-1-Bcl-2 a dhícheangal. Léirigh torthaí breise gur chuir coscairí uathphagaí bac ar fheabhsú CO (Aonocsaíd charbóin) ar sheans. Ina theannta sin, léirigh na sonraí gur rialaigh uathphagaíocht díghrádú feinitíopa rúnaíochta a bhaineann le seanaoise (SASP) lena n-áirítear-1 , Il-6, Tgf- agus Vegf. Conclúidí: Thug na torthaí seo le tuiscint gur cheart CO (Aonocsaíd charbóin) a chosnaíonn DN (nephropathy diaibéitisy) lucha ó sheanaoise duánach agus caillteanas feidhm trí uathphagaíocht a fheabhsú trí idirghabháil pháirteach trí choimpléasc Beclin-1-Bcl-2 a dhícheangal, a chuirtear i leith díghrádú SASP b’fhéidir. Tugann na torthaí seo smaointe nua maidir le cosc ​​agus cóireáil DN (nephropathy diaibéitis) agus rialáil na seanaoise.

Cliceáil go Cistanche DHT le haghaidh feidhm duáin

Cliceáil ANSEO LE CUID Ⅰ

4|PLÉ

Meastar níos mó agus níos mó ná riamh gur cealla zombie urchóideacha iad cealla seanaoise carntha atá frithsheasmhach in aghaidh an bháis, agus an cumas acu mífheidhm fíocháin a spreagadh agus galair a bhaineann le haois a spreagadh. Thuairiscigh taighdeoirí gur tharla laghdú dáileog-spleách ar fheidhm an choirp mar gheall ar thrasphlandú na gceall saille réamhtheachtaithe seanaoise i lucha de mhí d'aois.2 Os a choinne sin, d'fheabhsaigh baint na gceall senescent raon galar a bhaineann le haois mar T2D,30osteoarthritis31, agus galar Alzheimer.32Léirigh ár dtorthaí tarlúint na seanaoise in DN (nephropathy diaibéitis) lucha agus 3 chineál cealla duánach nochta do HG. Mhol na torthaí seo agus taighde a rinneadh roimhe seo go seasta go raibh seanaoise i DN (nephropathy diaibéitis). Is díol suntais é, i measc na 9 gcineál fíocháin de 27-mhí d'aois francaigh SD, bhí seanaoise duánach ar an gceann is luaithe agus is tromchúisí, rud a thugann le fios go raibh an duán so-ghabhálach i leith seanaoise.33 Bunaithe ar na torthaí seo, rinneamar tuairimíocht go raibh na teiripí ag díriú ar sheansacht. féadfaidh cealla cosaint in aghaidh DN (nephropathy diaibéitis). Léirigh fianaise teoranta le déanaí go raibh CO (Aonocsaíd charbóin(e) lagú seanaoise de chealla endothelial de bharr drugaí. Mar an gcéanna, chuireamar torthaí ar fáil a thug CO (Aonocsaíd charbóin(b) cuid mhór feinitíopa séanchineálach a laghdaíodh go suntasach agus feidhm duánach a ghnóthú dá réir in DN (nephropathy diaibéitis) lucha. Cé go bhfuil CO (Aonocsaíd charbóin) go bhfuil sé cruthaithe go ndéanann sé athchosaint i gcoinne ischemia-reperfusion agus lucha trasphlandúcháin duáin trí fhrith-athlastach, frith-apoptosis, agus bealaí clasaiceacha eile,4 mhol ár staidéar meicníocht nua a mhol CO (Aonocsaíd charbóin( ) a thugann feabhsú ó sheanaoise duánach DN (nephropathy diaibéitis) lucha.

Seachas na conairí p53/p21 agus p16 a aithnítear go forleathan, tá sé curtha síos go bhfuil seaneagrán rialaithe go dearfach ag uathphagy. Mhol na torthaí seo agus taighde a rinneadh roimhe seo go seasta go raibh seanaoise i DN (nephropathy diaibéitis) Ag teacht leis seo, fuarthas laghdú ar autophagy sna duáin le dul in aois.5 Thairis sin, bhí comhghaol diúltach idir Atg5 agus dul in aois duánach DN (nephropathy diaibéitis) lucha, rud a thugann le tuiscint féidearthacht fhrithsheanúlacht na n-uathphagy in DN (nephropathy diaibéitis). Léirigh ár dtorthaí go raibh baint dhearfach ag mífheidhmiú sreafa autophagy agus autophagy in vivo agus vitro le cealla seanaoise carntha. Suimiúil, CO (Aonocsaíd charbóin) a mheastar a bheith ina ghníomhaí autophagy éifeachtach. Inár staidéar, CO (Aonocsaíd charbóin) autophagy gníomhachtaithe ach laghdaigh uathphagosomes. Léirigh na sonraí breise go bhfuil CO (Aonocsaíd charbóin) feidhm líseasómach feabhsaithe agus sreabhadh uathphagaíochta trí RFP-GFP-LC3 a aistriú. Ina theannta sin, chuir coscairí autophagy agus siAtg7 srian le feabhsú na seanaoise trí CO (Aonocsaíd charbóin) in vitro, ag tacú leis an CO (Aonocsaíd charbóin) seangacht mhoillithe trí autophagy.

Ní hamháin sin, díthiomsú Coimpléasc Beclin-1-Bcl-2 de réir CO (Aonocsaíd charbóin) a chonacthas in DN (nephropathy diaibéitis) lucha. Go bhfios dúinn, feidhmíonn Beclin mar thionscnóir uathphagaíochta agus é dícheangailte ó Bcl-2. D’fhéadfadh cur isteach ar an gcoimpléasc a bheith ina sprioc féideartha d’uathphagy a ghníomhaíonn CO (Aonocsaíd charbóin). Chomh maith leis sin, ní hamháin gur ghníomhaigh leagan amach na suíomhanna ceangailteacha Beclin-1 agus Bcl-2 uathphagy ach chuir sé feabhas ar aosú agus saolré lucha,21 rud a thugann le tuiscint go bhfuil uathphagaireacht agus seantúlacht rialaithe chomhordaithe casta. Léirigh ár dturgnaimh gur chuir an gníomhaire díthiomsaithe casta seo ABT737 tuilleadh feabhais ar ghníomhachtú uathphagy agus feabhas ar sheansacht ag CO (Aonocsaíd charbóin) in vitro. Ag teacht lenár dtorthaí, cuireann cur isteach ar idirghníomhú choimpléasc Beclin-1-Bcl-2 tionchar dearfach ar ghalair iolracha, lena n-áirítear cosaint i gcoinne gortuithe cairdiacha de bharr céime na lucha3 cardaimiopaití diaibéitis agus athchosaint ar lucha a dtugann ischemia-reperfusion dúshlán dóibh.37 Léirigh na tuairimí seo go raibh CO (Aonocsaíd charbóin) féadfaidh sé uathphagaíocht a ghníomhachtú trí choimpléasc Beclin-1-Bcl{-2 a dhícheangal chun seanaoise agus gortuithe duánacha a mhaolú.

FIGIÚR 5 D'fhéadfadh uathphagáil ghníomhachtaithe SASP a dhíghrádú in DN (nephropathy diaibéitis) lucha.

A, íomhánna Immunohistochemical agus cainníochtú slonn p65 agus traslonnú núicléach (n=3). Barra scála: 50 μm. B, anailís blot an Iarthair ar GATA4 (n=3).

C, Íomhánna inmunofluorescence ionadaíocha de chomhlonnú mTOR, LC3 puncta agus LAMP2 sa duán. Barra scála: 25 μm.

DG, Léirigh íomhánna ionadaíocha imdhíonfhluaraiseachta an comhlonnú triarach IL-1 , IL-6, TGF- , agus VEGF le LC3 agus LAMP2 (na saigheada dearga) agus léirigh na saigheada bána an suíomh le LC3. Barra scála: 25 μm.

H, An leibhéal próitéine VEGF iomlán (lísáit cille agus forshnáthán) i HPC cóireáilte le foirmlithe éagsúla (HG, ABT737: 1 mmol/L, rapamycin: 10 nmol/L, agus CORM-2).

I, slonn próitéine VEGF i supernatant HPC cóireáilte difriúil. J, cóimheas scaoileadh próitéine VEGF de HPC (supernatant/ lysate iomlán) (n=6). *P < .05,="" **p="">< .01,="" ***p=""><>

Ina theannta sin, tá gá le soiléiriú breise ar an ngaol sonrach idir uathphagy agus seantúlacht. Is próiseas glantacháin é autophagy chun comhábhair faoi iamh a sheachadadh chuig an lysosome le haghaidh díghrádaithe. Ba léir ó thaighdeoirí gur laghdaigh uathphagaíocht an secretion Il-1 , príomh-chomhpháirt SASP, tríd an gcosán díghrádaithe. Is ionadh é, breathnaíodh comhlonnú IL-1 , LC3 puncta, agus LAMP2 sna duáin, rud a thugann le tuiscint go raibh díghrádú IL-1 ag CO (Aonocsaíd charbóin) cóireáil in DN (nephropathy diaibéitis) lucha. Thairis sin, chomhlonnaigh I{{{0}}, TGF- , agus VEGF, faoi seach, le LC3 puncta agus LAMP2, rud a thugann le fios go bhfuil an trasnú idir autophagy agus díghrádú SASP. Go comhsheasmhach, bhí sé cruthaithe go laghdaigh an t-útphagy drugaí-ghníomhachtaithe an secretion IL-6 i gcondrocytes,3" agus ba chúis le heaspórtáil mhéadaithe IL-16.IL-6 mar gheall ar shochtadh uathphagaíochta trí Atg7 a scriosadh. agus IL-8 in adipocytes agus cealla ailse chíche.0 Mar sin féin, tuairiscíodh nach raibh IL-1 ina shubstráit dhíreach le haghaidh díothú uathphagach i macrophages1, ag moladh go raibh an SASP díghrádaithe i bpáirt ag uathphagaíocht.

Is fiú a thabhairt faoi deara, thugamar faoi deara go raibh SASP comhlonnaithe le huathphagosomes i duáin DN (nephropathy diaibéitis) lucha (Fíor 5D-G, an tsaighead bhán), rud a léiríonn SASP go bhféadfadh uathphagosomes a bheith gafa ach líseasóim a éalú. D’fhéadfaí é seo a chur i leith uathphagaireacht rúnda sa mhéid is nach seachadtar uathphagosomes chuig líosóim ach ina ionad sin comhleádaíonn siad go díreach leis an scannán plasma, rud a fhágann go scaoiltear comhpháirteanna cítosólacha (SASP) chuig an spás eischeallach. Mar sin féin, tháinig méadú mór ar chomhlonnú SASP agus autolysosomes i ngnáth agus CO (Aonocsaíd charbóin)-lucha idirghabhála (Fíor 5D-G, an tsaighead dhearg). Is é an míniú a d'fhéadfadh a bheith ar an bhfeiniméan seo ná go bhfuil an dá secretion autophagy-mediated agus díghrádú rannpháirteach in iompar SASP.3 Cé go bhfuil an rialáil ar an éagsúlacht idir eisfhearadh i gcomparáid le díghrádú na n-ábhar intracellular le tuiscint go hiomlán, fuaireamar an dá CO. (Aonocsaíd charbóin)agus chuir agónaithe autophagy bac ar onnmhairiú VEGF i HPC cóireáilte le HG, ag tabhairt le tuiscint gur chuir uathphagaíocht ghníomhach le díghrádú SASP. Ina theannta sin, tuairiscíodh go raibh an fheidhm liosómach lagaithe ina chúis le scaoileadh ábhar autolysosome sa chill mhicriglial.4 Dá bhrí sin, CO (Aonocsaíd charbóin)-d'fhéadfadh go mbeadh níos mó díghrádaithe SASP ná secretion mar thoradh ar ghníomhachtú spreagtha ar autophagy agus athchóiriú ar fheidhm lysosomal.

Léirigh go leor fianaise go raibh ról diúltach ag SASP rúnda i roinnt galair. Mar shampla, tuairiscíodh go n-éascódh an SASP damáiste soithíoch reitineacha trí sheansacht a tharchur i lucha reitineapaite,4 go gcothaítear seandacht agus gortú cealla dhúlacha neamhshéineasacha.46 Mar sin féin, ní fios cé acu SASPanna atá freagrach as DN (DN).nephropathy diaibéitis) dul chun cinn. Léirigh torthaí Omics go ndearnadh cítocíní athlastacha a uasghrádú go luath agus go háirithe go déanach i DN (nephropathy diaibéitis).7 Go comhsheasmhach, fuaireamar amach gur forbraíodh go leor SASP in DN (nephropathy diaibéitis) lucha, inar méadaíodh IL-1 is suntasaí i gcomparáid le gnáth-lucha agus comhlonnaíodh VEGF le huathlaiseasóim is soiléire sa ghnáthchaint agus CO (Aonocsaíd charbóin)-idir lucha. Agus cóireáil ar ghortuithe duánach maolaithe frith-ILGG lena n-áirítear fiobróis i lucha db/db.48 Scriosadh VEGF-B atá cosanta i gcoinne DN (nephropathy diaibéitis) trí charnadh lipid duánach a laghdú, agus mhéadaigh ró-eisiúint VEGF-A i lucha aosach mífheidhmiú duánach agus athrú struchtúir.50 Mhol na sonraí thuas ar rialáil SASP tuilleadh ról lárnach SASPin an DN (nephropathy diaibéitis). Léirigh ár staidéar freisin go bhfuil riarachán CO (Aonocsaíd charbóin) bac ar léiriú agus secrete SASP, ag feabhsú ina dhiaidh sin fiobróis duánach agus athruithe struchtúracha. Mar sin, tátal againn go bhféadfadh bloc-aois na seanaoise trí mheán an SASP trí chonair díghrádaithe na n-uathphagy a bheith ar cheann de na meicníochtaí trína bhféadfaí CO (Aonocsaíd charbóin) cosaint HFD móide STZ-spreagtha DN (nephropathy diaibéitis).

I dteannta a chéile, léirigh na torthaí reatha go raibh CO (Aonocsaíd charbóin( ) lagaithe duánacha dN (nephropathy diaibéitis) trí fheabhas a chur ar uathphagy-idirghabhála trí choimpléasc Beclin-1-Bcl-2 a dhícheangal, rud a cuireadh i leith díghrádaithe SASP i bpáirt. Tugann ár staidéar solas nua ar chosc agus ar chóireáil DN (nephropathy diaibéitis(c) agus rialáil na seanaoise duánach. Is dócha go mbeidh éifeachtaí sonracha na seanaoise ar DN (nephropathy diaibéitis) gur fiú a thuilleadh imscrúdaithe. Ar an láimh eile, d’fhéadfadh go n-éireoidh drugaí frithsheanasacha chun cinn i gcóireáil DN (nephropathy diaibéitis) agus galair eile a bhaineann le haois.

Rinne FIGIÚR 6 CO autophagy gníomhachtaithe go páirteach trí choimpléasc Beclin-1-Bcl-2 a dhícheangal.

A, Co (Aonocsaíd charbóin)-imdhíon-réamhshamhlú Beclin-1 agus Bcl-2 agus cainníochtú an chóimheas Beclin-1 le Bcl-2 sa duán (n=3).

B, anailís blot an Iarthair ar shraith de phróitéiní uathphagy (LAPM2, p62 agus LC3) i HBZY-1 cóireáilte go héagsúil (HG, CRM-2 agus Beclin-1-Gníomhaire díthiomsaithe casta Bcl2 ABT737) ( n=5).

C, Cainníochtú slonn p53, p21 agus p16 (n=5 nó 6).

D, Déileáiltear go héagsúil leis na híomhánna staining SA- -gal de 3 chineál cealla duánacha agus torthaí staitistiúla (n=3). Barra scála: 50 μm. *P < .05,="" **p="">< .01,="" ***p=""><>

TAGAIRTÍ

1. Alicia RZ, Rooney MT, Tuttle KR.Galar duáin diaibéitis: dúshláin, dul chun cinn, agus féidearthachtaí. Clin J Am Soc Nephrol. 2017; 12(12):2032-2045.

2. Cuibhreannas CKDP, Matsushita K, Vandervelde, et al.Cumann an ráta scagacháin glomerular measta agus albaminuria le mortlaíocht uile-chúis agus cardashoithíoch i cohóirt daonra i gcoitinne: meiteanailís comhoibríoch.Lancet.2010;375(9731):{{ 6}}. 3. Baker DJ, Wijshake T, Tchkonia T, et al. Cuireann imréiteach cealla senescent p16Ink4a-dearfach moill ar neamhoird a bhaineann le dul in aois.Nádúr. 2011; 479(7372):232-236.

4. Cruthaíonn Kitada K, Nakano D, Ohsaki H, et al.Hyperglycemia seanaoise ceallacha trí chosán cleithiúnach SGLT2- agus p{21-i dtiúbáin chóngaracha i gcéim luath na nephropathy diaibéitis. J Diaibéiteas Casta.2014;28(5):604-611.

5. Tsai YC, Kuo PL, Kuo MC, et al. Rialaíonn Idirghníomhaíocht miR-378i-Skp2 seanaoise cille i nephropathy diaibéitis.J Clin Med. 2018; 7(12):468.

6. Baker DJ, Childs BG, Durik M, et al. Giorraíonn cealla deimhneacha p16(Ink4a) a fhaightear go nádúrtha saolré sláintiúil. Dúlra. 2016; 530(7589):184-189.

7. Al-Douahji M, Brugarolas J, Brown PA, Stehman-Breen CO (Aonocsaíd charbóin), Alpers CE, Shankland SJ. Tá an t-inhibitor cyclin kinase p21WAF1/CIP1 ag teastáil le haghaidh hipertróf glomerular i nephropathy diaibéitis turgnamhach. Duán Int. 1999; 56(5):1691-1699.

8. Wolf G, Schanze A, Stahl RAK, Shankland SJ, Amann K. p27(Kip1)Tá lucha cnocacha cosanta ó nephropathy diaibéitis: fianaise ar neamhdhóthanacht haplotype p27(Kip1). Duán Int. 2005; 68(4):1583-1589.

9. BharathLP, Agrawal M, McCambridge G, et al. Feabhsaíonn Metformin uathphagaíocht agus normalaíonn sé feidhm miteachondrial chun athlasadh a bhaineann le haosú a mhaolú.Cell Metab.2020;32(1):44-55.e6. 10. Ma Y, Qi M, An Y, et al. Rialaíonn autophagy airíonna gascheall mesenchymal agus seangacht le linn aosú cnámh. Cill Aosaithe. 2018; 17(1): 12709.

11. Garcia-Prat L, Martinez-Vicente M, Perdiguero E, et al. Coinníonn autophagy gastacht trí sheansacht a chosc. Dúlra. 2016; 529(7584):37-42.

12. Bíonn tionchar ag Hartleben B, Gödel M, Meyer-Schwesinger C, et al.Autophagy ar shochtacht galar glomerular agus coinníonn sé homeostasis podocyte i lucha ag dul in aois. J Clin Invest.2010;120(4):1084-1096.

13. Tagawa A, Yasuda M, Kume S, et al. Méadaíonn autophagy podocyte lagaithe próitéine i nephropathy diaibéitis. Diaibéiteas. 2016; 65(3):755-767.

14. Motterlini R, Otterbein LE. Poitéinseal teiripeach aonocsaíde carbóin. Diosca Drugaí Nat Rev.2010;9(9):728-743.

15. Abe T, Yazawa K, Fujino M, et al. Caomhnaíonn aonocsaíd charbóin ardbhrú graftaí duán francach ó apoptosis agus athlasadh.Lab Invest.2017;97(4):468-477.

16. Kim DS, Amhrán L, Wang J, et al. Coscann aonocsaíd charbóin apoptosis islet trí ionduchtú uathphagaíochta. Comhartha Redox Frithocsaíd. 2018; 28(14):1309-1322.

17. Lee S, Lee SJ, Coronata AA, et al. Tugann aonocsaíd charbóin cosaint i sepsis trí fheabhas a chur ar beclin 1-uathphagy spleách agus fagaicíotóis.Antioxide Redox Signal.2014;20(3):432-442.

18. Ról WS J, Li Y, Yang P, Huang Y, Lu S, Xu F.Novel deaonocsaíd charbóinchun toradh néareolaíoch a fheabhsú tar éis gabháil chairdiach i bhfrancaigh aosta: baint le húathphagy mitochondrial a aslú.JAm Heart AssoC.2019;8(9):e011851.

19. Zheng M, Chen Y, ParkJ, et al. CO (Aonocsaíd charbóin) feabhsaítear séanacht inotelial arna spreagadh ag 5-fluorouracil trí ghníomhachtú SIRT1. Bithcheimic Arch.2019;677:108185.

20. Déanann Jiang C, Zhang S, Li D, et al.Impaired flux ofphagy ferritin a tharlódh de bharr aiste bia ard-saill a idirghabháil friotaíocht hepatic inslin trí strus reticulum endoplasmic. Tocsain Ceimiceach Bia.2020;140:111329.

21. Fernandez AF, Sebti S, Wei Y, et al. Cuireann cur isteach ar choimpléasc rialála autophagy beclin 1-BCL2 fad saoil chun cinn i lucha. Dúlra. 2018; 558(7708):136-140.

22. Liu M, Liang K, Zhen J, et al. Méadaíonn easnamh Sirt6 gortú podocyte agus proteinuria trí dhíriú ar chomharthaíocht Notch. Cumann Nat.2017;8(1):413.

23. Sturmlechner I, Durik M, Sieben CJ, Baker DJ, van Deursen JM. Senescence cheallacha in aosú duánach agus galair. Nat Rev Nephrol. 2017; 13(2):77-89.

24. Bird TG, Müller M, Boulter L, et al. Déanann cosc ​​TGF freagairt athghiniúnach a athbhunú i ngéarghortú ae trí sheansacht paracrine a shochtadh. Sci Transl Med.2018;10(454):eaan1230.

25. Stolz A, Ernst A,DikicI. Aitheantas lasta agus gáinneáil in uathphagaíocht roghnaíoch. Nat Cell Biol.2014;16(6):495-501.

Nóta:ní liosta tagartha iomlán é an méid thuas