Freagra T Cell Tar éis Vacsaínithe Frith-COVID-19 BNT162b2 a Chothabháil i gCoinne an SARS-CoV-2 Athrú Imní Omicron B.1.1.529
Mar 30, 2022
Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Teibí
Tá dul chun cinn anGalar paindéimeach-19 COVIDtháinig malairtí imní chun cinn (VOC), a d'fhéadfadh éifeachtúlacht na vacsaíní a thugtar faoi láthair a chur i mbaol. Is féidir le sruth antaigineach imdhíonacht laghdaithe cille T cosanta a chruthú agus, dá réir sin, léiriú galair níos déine. Chun an fhéidearthacht seo a mheasúnú, freagraíonn na cealla T ar an gcineál fiáin Wuhan- 1 SARS-CoV-2 próitéin spíc sinsear agus anOmicron B.1.1.529rinneadh comparáid idir próitéin spike. Dá réir sin, bailíodh cealla mononuclear fola forimeallacha (PBMC) ó ochtar oibrithe deonacha sláintiúla 4-5 mhí tar éis an tríú vacsaíniú le BNT162b2 agus spreag iad le leabharlanna peiptíde forluiteacha a léiríonn spíc an tsinsir nó an tsinsir.OmicronSARS-CoV-2víreasathraithigh. Rinneadh cainníochtú na gcealla T ar leith trí mheasúnacht fluaraiseacha ELISPOT, monatóireacht a dhéanamh ar chealla a scaoileann interferon-gáma (IFNg), interleukin-10 (IL-10), agus interleukin-4 (IL{). {4}}). I gcás na ndaoine aonair go léir a scrúdaíodh, socraíodh leibhéil inchomparáide imoibríochta don dá chineál próitéine spíce. Chomh maith leis sin, breathnaíodh freagra T1 ceannasach, a léiríodh go príomha ag cealla rúndachta IFNg agus gan ach líon teoranta de chealla rúnda IL-10- agus IL-4-. Léiríonn na sonraí gníomhaíocht chobhsaí T chealla mar fhreagra ar an malairt Omicron atá ag teacht chun cinn sna daoine aonair a ndearnadh tástáil orthu; mar sin, ní dhéantar difear suntasach don imdhíonacht chosanta don mhalairt tar éis an vacsaínithe BNT162b2.
Eochairfhocail: SARS-CoV-2; COVID-19;Omicron; Freagraí cealla T;ELISPOT; FluoroSpot; leaganacha imní
1An Roinn Bithcheimic agus Géineolaíocht Mhóilíneach, Institiúid Iosrael um Thaighde Bitheolaíochta, Ness-Ziona 74100, Iosrael; hilac@iibr.gov.il (HC); shaharr@iibr.gov.il (SR); urie@iibr.gov.il (UE);galb@iibr.gov.il (GB)
2 Ionad Leighis Sheba, Aonad Galair Thógálacha, Ramat Gan 5262112, Iosrael; Itsik.Levy@sheba.health.gov.il
3 Scoil Leighis Sackler, Ollscoil Tel Aviv, Teil Aviv 6997801, Iosrael
1 Réamhrá
Omicron B.1.1.529faoi láthair is é an t-athrú imní is coitianta (VOC) i measc na ndaoine atá ag teacht chun cinnSARS-CoV-2athraithigh[1]. Rinneadh cur síos ar an malairt Omicron den chéad uair i mí na Samhna 2021 agus, ó shin i leith, tá sé ag scaipeadh go tapa ar fud an domhain [1,2]. Tá idir 26–32 sóchán aige sa phróitéin spíc i gcomparáid leis an seicheamh Wuhan-1 SARS-CoV-2 [1], agus tá go leor de na sócháin seo suite san fhearann ceangailteach le gabhdóirí (RBD). Mar a léiríodh do VOCanna eile [3], lagaíonn sócháin i suíomhanna neodraithe an phróitéin spike acmhainneacht neodraithe na n-antasubstaintí agus, dá bhrí sin, d'fhéadfadh éalú imdhíoneolaíoch feabhsaithe a bheith mar thoradh orthu. Tá impleachtaí ollmhóra ag an ngné seo don tsláinte phoiblí, ag cur san áireamh na feachtais vacsaínithe ollmhóra atá ar siúl ar fud an domhain bunaithe ar shainiúlacht antaigineach an phéine tosaigh SARS-CoV-2.
sistéanle haghaidhdíolúine cumhachtach
Ón lá atá inniu ann, níl comhghaolú beachta cosanta i gcoinne SARS-CoV-2 sainmhínithe go hiomlán. Tá sé soiléir go bhfuil an freagra neodraithe antasubstainte riachtanach chun gabháil víreasach agus iontráil chuig cealla óstach a bhacadh, agus go bhfuil ról lárnach ag cealla T maidir le scaipeadh víreasach a laghdú san óstach, rud a mhaolú ar dhéine léiriú galair [4]. Dá réir sin, i gcás roinnt VOCanna atá ag teacht chun cinn, léiríodh go raibh comhghaol idir freagairt antasubstainte neodraithe níos ísle le héifeachtúlacht níos ísle na vacsaíne agus leibhéil níos airde d’ionfhabhtuithe cinn imdhíonachta [4,5]. Ag cur san áireamh cinéitic titer antashubstaintí tar éis an vacsaínithe agus a n-acmhainneacht ag dul i laghad faoi na leibhéil neodraithe, tá sé riachtanach freagraí cosanta cuimhne T cille T a choinneáil, a bhfuiltear ag súil go léireoidh siad fad saoil suntasach [6-8]. Tá éalú imdhíonachta ón bhfreagra humoral den chuid is mó mar thoradh ar shócháin ar leith ar antaigin ar leith, a tharlaíonn i bpróiseas microevolutionary cóineasaithe agus dá bhrí sin a dhéanann difear do dhaoine aonair chomh difriúil. Os a choinne sin, tá carachtar éagsúil ag an bhfreagra cille T, a dhéanann difear do dhaoine aonair éagsúla mar gheall ar polymorphism HLA; mar sin, is lú an seans go mbeidh tionchar ag sócháin uathúla sna epitopes imdhíon-cheannasach ar fhreagairtí cille T ar fud an domhain. D’fhéadfadh lagú díolúine cille T i gcoinne VOC tarlú mar thoradh ar shreabhadh antaigineach as a dtagann sócháin carntha is bun le díolúine [9].
D’fhéadfadh freagraí cealla T cosaint a sholáthar ó SARS-CoV-2 fiú in éagmais freagra antashubstainte [10]. Go sonrach, bhí leibhéil arda de chealla rúndachta IFNg a fhreagraíonn do spreagadh antaigineach leis an spícphróitéin SARS-CoV-2 comhghaolú le léirithe galair COVID{6}} nach bhfuil chomh dian céanna [10]. Tá sé níos dúshlánaí go turgnamhach monatóireacht a dhéanamh ar fhreagra cille T ná cainníochtú na bhfreagraí greannacha, rud a éilíonn infhaighteacht cealla inmharthana a fhreagraíonn do spreagadh antaigin. Ba shaintréith den chuid is mó de na staidéir freagraí cille T ag ingearchló marcóra spreagtha gníomhachtaithe (AIM) agus staining intracellular cytokine, arna monatóireacht ag cíteiméadracht sreafa agus ag measúnachtaí ELISPOT [11]. Sa staidéar reatha, chinneamar leibhéal imoibríochta cille T mar fhreagra ar spíc shinsear Wuhan-1 SARS-CoV{-2 agus an spíc athraitheach Omicron B.1.1.1.529 i ndaoine sláintiúla a imdhíonadh leis an BNT162b2. vacsaín. Nocht an staidéar freagra Th1 den chineál céanna, ceannasach, ar an dá leagan den phróitéin spíc, rud a thugann le tuiscint go gcoimeádtar imdhíonacht chobhsaí T cille i gcoinne an leagain Omicron atá forleithne faoi láthair.
2. Ábhair agus Modhanna
2.1.PBMC Leithlisiú
Bailíodh fuil ó 8 nduine shláintiúla laistigh de 4-5 mhí ón tríú vacsaín BNT162b2. Bailíodh an fhuil isteach i bhfeadáin sóidiam-heparin (vacutainer, BD, Lochanna Franklin, NJ, SAM) agus próiseáladh í laistigh de 2 h ón mbailiúchán. Rinneadh cealla aonnúicléacha fola forimeallacha (PBMC) a leithlisiú ag dríodrú grádán dlúis ag baint úsáide as Ficoll-Paque (Sigma-Aldrich, Rehovot, Iosrael) de réir phrótacal an mhonaróra. Ansin nite cealla uair amháin i PBS agus próiseáladh láithreach iad le haghaidh measúnachta ELISPOT.
costanche
2.2. ELISPOT Measúnacht
Rinneadh an measúnú fluaraiseach trí-dath ELISPOT (FluoroSpot) le cloí go docht le prótacal an mhonaróra (Human IFN-y/IL-4/IL-10 Trí-Dath Fluo-root, ImmunoSpot, Cleveland, OH , SAM), cuireadh PBMC ar fionraí arís i meáin CTL-Tástáil saor ó FCS (ImmunoSpot) agus plátáilte i bplátaí membrane 96 tobair PVDF ag 3×105cells/tobar. Fágadh cealla gan spreagadh, spreagtha le SARS-CoV-2 próitéin spike forluí ar an leabharlann peptide nó spreagtha le 5ug/mL de phytohemagglutinin (PHA)(Sigma-Aldrich, Rehovot, Iosrael) mar rialú dearfach. Linnte peiptíde atá ar fáil go tráchtála (15-seicheamh níos mó le forluí de 11 aimínaigéad) a chlúdaíonn fad iomlán an Wuhan-1 SARS-CoV{{20}}(cineál fiáin) nó Úsáideadh spike athraitheach Omicron B.1.1.529 (peptides & elephants GmbH, Hennigsdorf, an Ghearmáin) le haghaidh spreagadh PBMC. Rinneadh linnte peptide a thuaslagadh i DMSO agus úsáideadh iad i dtiúchan deiridh de 200 ug/mL (06 ug/ml in aghaidh an pheptíde); Bhí tiúchan deiridh DMSO faoi bhun 0.1 faoin gcéad . Tá leagan amach an phláta curtha i láthair i bhFíor Forlíontach S1. Spreagadh PBMC ar feadh 48 h, agus rinneadh minicíocht na gceall rúndaithe cytokine a chainníochtú leis an léitheoir ImmunoSpot S6 Ultimate leis na scagairí 520,600 agus 690nm chun áireamh na gceall a léiríonn IFNg, IL-10, agus IL{{37} }, faoi seach. Rinneadh anailís ar na sonraí le leagan bogearraí ImmunoSpot 7.0.30.2 (ImmunoSpot). Measadh go raibh spotaí dearfacha forluiteacha ag na scagairí 520nm agus 600 nó 690 nm mar artifacts féideartha agus eisiata. Rinneadh anailís shuntasach staitistiúil ar na sonraí i dtástáil an Mhic Léinn.
3. Torthaí agus Plé
Tá imdhíonacht chilleach ríthábhachtach chun dian-COVID{0}} a chosc. Sa staidéar reatha, a chuimsigh ochtar duine sláintiúil (dá dtagraítear mar dheontóirí), a vacsaíníodh in Iosrael trí huaire leis an vacsaín mRNA BNT162b2, d’fhéachamar le leibhéal agus cineál na freagartha cille T do cheachtar den Wuhan{{3} a chinneadh agus a chur i gcomparáid. } spíc SARS-CoV-2 nó an leagan Omicron B.1.1.529. Bhí na deontóirí 20-52 bliain d'aois (meán 27.1,) agus bhí triúr fear agus cúigear baineannach. Níor doiciméadaíodh aon stair COVID-19 le haghaidh aon cheann de na deontóirí; ina theannta sin, ag smaoineamh ar an gclárú eipidéimeolaíoch cruinn is gnách in Iosrael, ní féidir a shamhlú go raibh siad ionfhabhtaithe roimhe seo. Spreagadh PBMC a bailíodh ó na deontóirí le meascán de 315 peptides, gach 15 aimínaigéad ar fad, a chuimsíonn an próitéin spike ar fad. Rinne an staidéar iniúchadh ar an gcineál agus ar an leibhéal freagartha araon, arna chinneadh ag líon na gceall rúndachta cítocine i measúnacht fluaraiseachta ELISPOT.
Tar éis spreagadh antaigineach leis na peiptídí spike-díorthaithe, chonacthas príomhfhreagairt IFNg sna daoine aonair go léir a scrúdaíodh, idir 50 agus 400 ceall rúnaithe in aghaidh an 106 PBMC, agus freagra IL{-10 níos ísle, idir 15 agus 82 ceall. in aghaidh 106 PBMC (Fíor 1 agus Fíor S1). Áiríodh leis an socrú turgnamhach céim spreagtha antaigin 48 h chun léiriú ar imoibríocht IL-4-a chur in iúl clón cille T a d'fhéadfadh a bheith i láthair sna samplaí; áfach, socraíodh leibhéil imoibríochta IL-4 nach mór do-aimsithe, de réir sonraí roimhe seo a bhaineann leis na freagraí a fuarthas ó na vacsaíní BNT162b2 agus m1273 [2,4,8–13]. Léirigh comparáid idir an meánfhreagairt don spíc fhiáin agus Omicron (Fíor 2) ach laghdú beag neamhshuntasach ó 201 ceall rúnda IFNg tar éis gníomhachtú leis an spíc de chineál fiáin, go 188 cill ag freagairt do spíc Omicron. Ina theannta sin, níor tugadh faoi deara aon difríochtaí suntasacha idir na freagraí a tomhaiseadh ar bhonn IL-10- agus IL{-4-chealla rúndachta.
cisteán tcm
Maidir le hionduchtú IFNg gach duine aonair a tástáladh (Fíor 1), i gcás amháin (Deontóir 2), breathnaíodh gníomhachtú tosaíochta a bhí suntasach go staitistiúil ag peiptídí spike sinsear, ach i gcás eile (Deontóir 5), taispeánadh gníomhachtú tosaíochta mar fhreagra ar an spíc Omicron. Is fiú a thabhairt faoi deara, níor taifeadadh aon difríochtaí suntasacha maidir le cainníochtú cille rúnda IL-10- agus IL{{-4-. Bhí an freagra IFNg níos airde ná freagra IL-10, agus ba é an meánchóimheas d’fhreagairt IFNg/IL{{{-10 ná 4.9, rud a thugann le fios freagra Th1 ceannasach gan aon fhreagra Th2 suntasach. Tá fíor-riachtanach na gcealla T le haghaidh cosanta ar COVID-19 doiciméadaithe go maith [2,4,10]; dá bhrí sin, tá deimhniú imoibríocht chealla T i dtreo VOCanna atá ag teacht chun cinn ríthábhachtach. De réir mar a shainaithnítear VOCanna nua atá ag teacht chun cinn, is ábhar imní ardtosaíochta do shláinte an phobail é cothabháil a dhéanamh ar dhíolúine cosanta fadtéarmach daoine aonair atá vacsaínithe. Moladh, i gcás roinnt VOCanna, gur léirigh daoine aonair téarnaimh agus vacsaínithe roinnt éalú ó dhíolúine humoral agus iad ag nochtadh gnáth-imoibríocht cille T neamhchomhréiteach [5,14].
sochair cistanche desert
Sa staidéar reatha, trí anailís a dhéanamh ar an bhfreagra i ndaoine aonair tar éis trí vacsaíniú BNT162b2, léirigh muid freagra Th1 ceannasach ar an bpróitéin spike athraitheach Omicron, a bhfuil comhghaol ann le díolúine cosanta [6]. Bhí na freagraí cille T ar na malairtí sinsear agus Omicron araon ar leibhéil ar cóimhéid (Fíor 2), ag teacht le roinnt tuarascálacha le déanaí [2,12,13]. Ós rud é go léiríonn ár gcuid sonraí leibhéil inchomparáide freagartha ar spící sinsear agus Omicron araon, tá sé réasúnta a mheas go bhfuil comhdhéanamh CD4 agus CD8 na h-urrann cille T fós seasta don fhreagra ar an dá leagan. Léiríodh roimhe seo luach breise tríú vacsaínithe chun neodrú antasubstainte Omicron a bhaint amach [15], agus tabharfaidh staidéir sa todhchaí aghaidh ar ábharthacht riarachán tríú vacsaín maidir le freagraí na gcealla T a chothabháil freisin. Ina theannta sin, táthar ag súil go ndéanfaidh staidéir bhreise faireachán ar chodáin daonra eile, go háirithe daoine scothaosta a bhfuil riosca ard ag baint leo maidir le foirmeacha tromchúiseacha de COVID a fhorbairt-19.
Tagairtí
1 Pulliam, JRC; van Schalkwyk, C.; Gobharnóir, N. ; von Gottberg, A.; Cohen, C.; Groom, MJ; Dushoff, J. ; Mlisana, K. ; Moultrie, H. Riosca méadaithe ath-ionfhabhtaithe SARS-CoV-2 a bhaineann le teacht chun cinn an athraitheach Omicron san Afraic Theas. medRxiv 2021. [CrossRef]
2. Keeton, R. ; Tincho, MB; Ngomti, A. ; Baguma, R. ; Bend, N. ; Suzuki, A .; Khan, K.; Ceile, S.; Bernstein, M.; Karim, F.; et al. Tá freagairtí spike T cille SARS-CoV a tharlódh tar éis vacsaíniú nó ionfhabhtú láidir in aghaidh Omicron. medRxiv 2021. [CrossRef]
3. Liu, C. ; Ginn, HM; Dejnirattisai, W.; Supasa, P.; Wang, B. ; Tuekprakhon, A.; Nutella, R. ; Zhou, D.; Mentzer, AJ; Zhao, Y.; et al. Neodrú laghdaithe SARS-CoV-2 B.1.617 trí vacsaín agus séiream téarnaimh. Cill 2021, 184, 4220–4236.e13. [CrossRef] [PubMed]
4. Cevik, M. ; Grubaugh, ND; Iwasaki, A.; Vacsaíní Openshaw, P. COVID-19: Ag coinneáil suas le leaganacha SARS-CoV-2. Cill 2021, 184, 5077–5081. [CrossRef] [PubMed]
5. Kustin, T. ; Harel, N.; Finkel, U.; Perchik, S.; Harari, S.; Tahor, M.; Caspi, I. ; Tobhach, R. ; Leshchinsky, M.; Dror, SK; et al. Fianaise ar rátaí méadaithe cinn de leagan SARS-CoV-2 atá ina n-údar imní i ndaoine aonair BNT162b a fuair vacsaíniú ag mRNA. Nat. Med. 2021, 27, 1379–1384. [CrossRef] [PubMed]
6. Altmann, DM; Reynolds, CJ; Leaganacha Boyton, RJ SARS-CoV-2: Frithsheasamh ar fhreagra antashubstainte agus tionchar tuartha ar aithint T ceall. Cill Rep. Med. 2021, 2, 100286. [CrossRef] [PubMed]
7. Baraniuk, C. Cén fhad a mhaireann díolúine covid? BMJ 2021, 373, n1605. [CrossRef] [PubMed]
8. Reynolds, CJ; Mac Giobúin, JM; Pade, C. ; Lín, K.-M.; Sandoval, DM; Piobaire, F. ; Buitléir, DK; Liu, S.; Dobharchú, AD; Aoibhneas, G. ; et al. Cruthaíonn ionfhabhtú heitreolaíoch agus vacsaíniú díolúine i gcoinne leaganacha SARS-CoV-2. Sci. 2022, 375, 183–192. [CrossRef] [PubMed]
9. Altmann, DM; Boyton, RJ; Beale, R. Díolúine i leith leagan SARS-CoV-2 is ábhar imní. Eolaíocht 2021, 371, 1103–1104. [CrossRef] [PubMed]
10. Níl, JY; Jeong, HW; Kim, JH; Shin, E.-C. Straitéisí T chealla-dhírithe chun an paindéim COVID-19 a rialú. Nat. Ath. Immunol. 2021, 21, 687–688. [CrossRef] [PubMed]
11. Ogbe, A. ; Kronsteiner, B. ; Skelly, DT; Luas, M.; Donn, A. ; Adland, E.; Adair, K. ; Akhter, HD; Ali, M.; Ali, S.-E.; et al. Déanann measúnachtaí T chealla ionfhabhtuithe cliniciúla agus fochliniciúla SARS-CoV-2 a dhifreáil ó fhreagraí tras-imoibríocha frithvíreasacha. Nat. Cumann. 2021, 12, 1–14. [CrossRef] [PubMed]
12. GeurtsvanKessel, CH; Geers, D.; Schmitz, KS; Mykytyn, AZ; Lamers, MM; Bogers, S.; Gommers, L. ; Sablerolles, RSG; Nieuwkoop, NN; Rijsbergen, LC; et al. Freagraí Éagsúla SARS CoV-2 Freagraí cealla T agus B a bhaineann go sonrach le hómicron i bhfaighteoirí vacsaíní COVID{5}}. medRxiv 2021. [CrossRef]
13. Naranbhai, V. ; Nathan, A.; Kaseke, C. ; Beirios, C. ; Khatri, A.; Choi, S.; Getz, MA; Tano-Menka, R.; Forman, O.; Gayton, A.; et al. Tá imoibríocht T cille leis an leagan SARS-CoV-2 Omicron caomhnaithe i bhformhór na ndaoine atá ionfhabhtaithe agus vacsaínithe roimhe seo, ach níl siad ar fad. medRxiv 2022. [CrossRef]
14. Geers, D. ; Shamier, MC; Bogers, S.; den Hartog, GD; Gommers, L. ; Nieuwkoop, NN; Schmitz, KS; Rijsbergen, LC; van Osch, JAT; Dijkhuizen, E.; et al. Éalaíonn leagan SARS-CoV-2 atá ina n-imní go páirteach ó fhreagraí greannacha ach ní freagraí cealla T i ndeontóirí téarnaimh agus faighteoirí vacsaíní de chuid COVID. Sci. Imdhíonól. 2021, 6, eabj1750. [CrossRef] [PubMed]
15. Nemet, I. ; Klinker, L. ; Lustig, Y. ; Zuckerman, N.; Erster, O.; Cohen, C.; Kreiss, Y. ; Alroy-Preis, S.; Regev-Yochay, G.; Mendelson, E.; et al. An Tríú Vacsaíniú BNT162b2 Neodrú ar Ionfhabhtú Omicron SARS-CoV-2. N. Béarla. J. Med. 2021. [CrossRef] [PubMed]
