Éifeacht líocha frith-chraicinn sineirgisteach de ghlicíní phenylethanoid cistanche agus glabridin
Jan 14, 2025
Teibí chun an sineirgíoch a imscrúdúÉifeacht CistancheTaobh eatánóil feinile (PHGS) agus glabridin (GLA) i gcoinne líocha craicinn, rinneadh an cóimheas maise de PHGanna agus GLA a scagadh trí thurgnamh toirmisc in vitro tyrosinase, 1, 1- DIPHENYL -2- Trinitrophenylhylhydhydrazine (DPPPPPPPH) agus {}}} trinitrophenylhylhylhylhylyine (DPPPPPPPH) agus {} 2, {2- diazo-bis ({3- eitile-benzothiazole -6- Aigéad sulfonic diammonium cation (ABTS+) Turgnaimh scanraithe radacacha saor in aisce. mar innéacsanna.
AnathlastachaBunaíodh samhail de chealla HACAT a spreag lipopolysaccharide (LPS), agus rinneadh measúnú ar éifeacht frith-athlastach an druga trí chosc a chur ar scaoileadh interleukin -6 (IL -6) agus fachtóir necróis meall- (TNF-). Bunaíodh an tsamhail struis ocsaídiúcháin de chealla HACAT a spreagann hidreaclóiríd azodiisobuamidine (AAPH), agus baineadh úsáid as gníomhaíocht fheabhsaithe dismutase superoxide (SOD) agus catalase (CAT) mar innéacsanna chun éifeacht antioxidant an druga a mheas. Socraíodh an cóimheas maise is fearr de PHGanna agus GLA ag na trí mhúnla cille thuas. Léirigh na torthaí go n -ullmhaíonn tuaslagáin uiscí PHGS/GLA (1∶1), PHGS/GLA (5∶1), agus PHGS/GLA (10∶1) le M (PHGS) ∶m (GLA) =1 ∶1, 5∶1, 10∶1 ar thaispeántar dea -choisctheach agus synergistic ar ghníomhaíocht tyrosinase agus ar fhrith -ocsaíd. Rátaí toirmisc PHGS/GLA (1∶1),
PHGS/GLA (5∶1) agus PHGS/GLA (1 {0} ∶1) Ba iad na réitigh uiscí le tiúchan maise de 0.4 g/L 94.37%, 92.93%agus 88.06%, faoi seach. Ba iad na rátaí scanraithe de fhréamhacha saor in aisce DPPH ná 89.44%, 88.72,%agus 88.10%, faoi seach.
Ba iad na rátaí scanraithe de fhréamhacha ABTanna+ saor in aisce ná 1 {0 0.13%, 100.0,1%, agus 99.87%, faoi seach. Nuair a bhí an tiúchan maise de PHGS/GLA 25 ug/ml, PHGS/GLA (1∶1), PHGS/GLA (5∶1), agus PHGS/GLA (10∶1) Léirigh tuaslagáin uiscí aon chíteatocsaineacht do chealla B16F10 agus HACAT. Bhí an toirmeasc ar ghníomhaíocht tyrosinase i dtuaslagán uiscí PHGS/GLA (1 ∶1) níos láidre (gníomhaíocht tyrosinase 23.80%), agus laghdaíodh an t -ábhar melanin (30.90%) go suntasach. Léirigh tuaslagán uiscí PHGS/GLA (1∶1) an éifeacht toirmisc is fearr ar IL -6 agus scaoileadh TNF, agus an cumas chun gníomhaíocht SOD agus CAT a fheabhsú. Léirigh an teaglaim de PHGanna agus GLA feidhmíocht mhaith sineirgíoch, níos fearr go druga aonair agus níos airde ná PHGS/ GLA (5∶1) agus Réiteach Uiscí PHGS/ GLA (10∶1). Bhí ról sineirgíoch ag an meascán de PHGanna agus GLA maidir le líniú craicinn a fheabhsú trí tháirgeadh melanin a chosc, agus éifeachtaí frith-athlastacha agus frithocsaídeoirí.
Keywords Cistanche Phenylethanoid Glycosides. glabridin; éifeachtaí sineirgisteacha; líniú frith-chraicinn; frith-ocsaídiú; Frithflamatach; ábhair drugaí
Taobh eatánóil Cistanche Phenyl le haghaidh Whitening
Seirbhís thacúil de Wecistanche-an onnmhaireoir Cistanche is mó sa tSín:
Ríomhphost: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Teil: +86 15292862950
Le haghaidh tuilleadh eolais ar lascainí féideartha, ná bíodh drogall ort teagmháil a dhéanamh lenár bhfoireann seirbhíse do chustaiméirí. Beidh siad sásta cabhrú leat!
Is galar craicinn é líniú craicinn de bharr tosca mar dhíobháil, athlasadh craicinn, agus radaíocht ultraivialait [1-2]. D'fhéadfadh méadú neamhghnácha a bheith mar thoradh ar na fachtóirí seo i melanin, rud a chruthaíonn fadhbanna ar nós Chloasma, freckles, agus hipearplárú iar-athlastach (PIH) [3-4], a théann i bhfeidhm ar staid mheabhrach agus ar cháilíocht na beatha daoine. Faoi láthair, díríonn an chóireáil ar líocha craicinn go príomha ar tyrosinase a chosc, príomh -einsím i bhfoirmiú melanin [{5-6].
Taispeánann an taighde is déanaí [7-8] go mbraitheann líocha craicinn ar an dlúthnasc idir keratinocytes agus melanocytes sa eipideirm. Chomh luath agus a thagann na fréamhacha saor in aisce agus na tosca athlastacha a scaoileann keratinocytes i dteagmháil le melanocytes, spreagfaidh siad méadú ar ghníomhaíocht tyrosinase, as a dtiocfaidh méadú ar ábhar melanin. Cuirfidh siad dlús freisin le hiompar melanin agus cuirfidh siad ar melanin taisceadh ar dhromchla an chraicinn. Dá bhrí sin, éilíonn cóireáil líocha craicinn go bhfuil bearta éagsúla ann, mar shampla táirgeadh melanin, frith-athlastach, agus frith-ocsaídiú a chosc.
Faoi láthair, cé go bhfuil éifeachtaí áirithe ag ullmhúcháin thraidisiúnta drugaí, amhail hidreacóinín agus hidreacóinín, i gcóireáil líocha craicinn, tá a modhanna gníomhaíochta sách singil agus d'fhéadfadh siad frithghníomhartha díobhálacha a tháirgeadh [9-10]. I gcomparáid leis sin, tá cógais nádúrtha nádúrtha agus éadrom i bhfeidhm agus tá tomhaltóirí ag aithint agus ag moladh níos mó agus níos mó. Go háirithe, ní hamháin gur féidir leis an teaglaim de shleachta ilphlandaí [{13-14] cosc a chur ar tháirgeadh melanin ach tá iléifeachtaí ann freisin, mar shampla éifeachtaí frith-athlastacha agus frithocsaídeoirí, ag soláthar smaointe agus modhanna nua chun cóireáil líocha craicinn a chóireáil.
Tá luach íocshláinte uathúil ag Cistanche Deserticola MA agus tugtar "Desert Ginseng" air. Tá sé aimsithe ag staidéir go bhfuil gníomhaíocht antioxidant maith [15] agus éifeachtaí frith-athlastacha [16] ag an ngliocóisíd phenylethanoid comhábhar sainiúil atá i Cistanche [16], agus go bhfuil éifeacht coisctheach tyrosinase áirithe aige [17]. Is comhpháirt flavonoid é Glycyrrhizin i Glycyrrhiza glabra L., a bhfuil éifeacht chumhachtach whitening aige agus a dtugtar "ór whitening" air [18]. Is iondúil go dtosaíonn cóireáil thraidisiúnta na Síne ar líocha craicinn ag cur an spleen agus na duáin ar aghaidh, ag glanadh teas agus díthocsainiú, agus ag athlíonadh Qi agus fola [19].
Is féidir le gliocóisídí phenylethanolic de Cistanche Deserticola an duán a athlíonadh agus a bhunú go bunúsach, agus is féidir le glycyrrhiza glabra spleen agus Qi a athlíonadh, teas a ghlanadh, agus díthocsainiú. Is féidir leis an dá cheann oibriú le chéile chun cur in aghaidh líocha. Is féidir leis an teaglaim de ghliceacóisídí a bhaineann le Cistanche Deserticola agus glabridin cur in aghaidh líocha craicinn ó il -thoisí agus spriocanna, a chosnaíonn i gcoinne gathanna ultraivialait sa bhanda iomlán, go gcuireann sé cosc ar ghníomhaíocht tyrosinase agus go laghdaíonn sé táirgeadh melanin, agus go laghdaíonn sé an t -iompar saor in aisce agus go laghdaíonn sé an t -iompar, agus gur féidir le hiompar a laghdú. Mar sin féin, is beag tuairiscí atá ann sa litríocht maidir leis an toirmeasc sineirgíoch ar líniú craicinn trí ghlicíní phenylethanoid de Cistanche Deserticola agus glabridin.
Tá sé i gceist ag an bpáipéar seo iniúchadh a dhéanamh ar cé acu an bhfuil éifeacht sineirgíoch idir pphenylethanoidglycosides de Cistanche Deserticola (PHGS) agus glabridin (GLA) trí thurgnaimh bhithcheimiceacha in vitro agus trí 3 mhúnla cille a bhunú, faigh an t -oll -chóimheas comhdhúile is fearr le haghaidh éifeacht synergistic. Táthar ag súil go soláthróidh sé tacaíocht theoiriciúil agus treoir phraiticiúil chun táirgí cúram craicinn plandaí nádúrtha a fhorbairt agus chun cuidiú le tionscal an chúraim craicinn a chur chun cinn i dtreo níos nádúrtha, níos sláintiúla agus níos éifeachtúla.
Cá háit: is é imoibriú an tuaslagán samplach, tuaslagán L-tyrosine, PBS, agus tuaslagán tyrosinase; Is éard atá i gceist le rialú imoibriúcháin ná ionsúiteacht an tuaslagáin shamplaí, tuaslagán L-tyrosine, tuaslagán N agus PBS; Is é atá i mbán ná ionsúiteacht tuaslagáin L-tyrosine, tuaslagán PBS agus tuaslagán tyrosinase; Is éard atá i gceist le rialú bán ná ionsúiteacht réitigh L-tyrosine agus PBS.
'
1.3.2 Cumas scavenging radacach DPPH a chinneadh
Ar an gcéad dul síos, meáigh go cruinn {{{0}}. 0 197 g (0. mmol/l. Ansin, ullmhaíodh PHGanna agus GLA i dtuaslagán eatánóil PHGS agus i dtuaslagán eatánóil GLA le mais -chomhchruinnithe {{{}}. Ansin, meascadh tuaslagán eatánóil PHGS agus tuaslagán eatánóil GLA go cothrom ag M (tuaslagán PHGS) ∶ m (tuaslagán GLA)=40 ∶1, 20∶1, 10∶1, 5∶1, 1∶1, 1∶5, 1∶10, 1∶20, 1∶20, a taifeadadh 9 gcineáil pHGS/GLA ETHANOL Solutions le maiseanna éagsúla, a bhí ina n -aigne pHGS/GLA ETHANOL Solutions Mass/a bhí ina n -aigne PHGS a bhí ina n -úsáidí pHGs/Solds Solds Solds a bhí ann,, go raibh siad i gceist (40∶1) ~ PHGS/GLA (1∶40) Réitigh eatánóil. Mar fhocal scoir, cuir 100 μl de réitigh samplacha éagsúla agus 100 μL de thuaslagán oibre DPPH leis an bpláta tobair {96-, meascadh go maith, agus coinnigh ar shiúl ó sholas ag teocht an tseomra ar feadh 30 nóiméad. Tomhais an t -ionsúiteacht ag 517 nm le marcóir einsím. Baineadh úsáid as VC mar an rialú dearfach, agus rinneadh gach turgnamh arís agus arís eile 3 huaire. Ríomh an ráta scanraithe radacach DPPH (%) de réir fhoirmle (2).
Ráta scavenging radacach saor in aisce/%=(1 𝐴1−𝐴3𝐴2) × 100 (2) áit a bhfuil: A1 an tuaslagán samplach + tuaslagán oibre DPPH; Is é A2 ionsúiteacht 50% eatánól de réir tuaslagáin oibre toirt + DPPH; Is é A3 ionsúiteacht an tuaslagáin shamplaí + 50% eatánól de réir toirte.
1.3.3 Cinneadh ABTS+ cumas scavenging radacach saor in aisce
Ar an gcéad dul síos, meáigh 1 g (1.82 mmol) de ABTanna agus tuaslagann sé é in uisce dí -ianaithe chun tuaslagán oibre ABTS a ullmhú le tiúchan deiridh de 7.4 mmol/L; meáigh 0. 5 g de photaisiam persulfate agus é a dhíscaoileadh in uisce dí -ianaithe chun tuaslagán oibre potaisiam a ullmhú le tiúchan deiridh de 2.6 mmol/L; Measc an tuaslagán oibre ABTS agus an tuaslagán oibre persulfate potaisiam i méideanna comhionanna, agus freagair ar feadh 12 h sa dorchadas chun an tuaslagán oibre ABTS+ a ullmhú. Ansin, de réir an mhodha i Roinn 1.3.2, ullmhaigh tuaslagán eatánóil PHGS, tuaslagán eatánóil GLA, tuaslagán eatánóil N agus VC, chomh maith le tuaslagán eatánóil PHGS/GLA (40∶1) ~ PHGS/GLA (1∶40).
Mar fhocal scoir, cuir 40 μl de réitigh shamplaí éagsúla agus 160 μl de ABTS+ tuaslagán oibre leis an bpláta tobair {96-, meascadh go maith, freagairt ag teocht an tseomra sa dorchadas ar feadh 6 nóiméad, agus tomhais an tuaslagán ag 734 nm ag baint úsáide as léitheoir ELISA. Ríomh an ráta scavenging radacach ABTS+ saor in aisce (%) de réir fhoirmle (3).
Cá bhfuil: A1 an tuaslagán ar réiteach samplach + ABTS + Tuaslagán Oibre; Is é A2 ionsúiteacht an uisce dí -ianaithe + ABTS + tuaslagán oibre; Is é A3 ionsúiteacht an tuaslagáin shamplaí + uisce dí -ianaithe.
1.4 turgnamh cille
1.4.1 Cultúr na gCillíní
Tar éis athbheochan a dhéanamh ar chealla B16F10 agus HACAT, déantar iad a ionaclú isteach i meán ard-ghlúcóis DMEM (ina bhfuil meascán de 10% serum bólachta féatais agus 1% peinicillin-streptomycin ag mais-chodán) agus saothraithe i ngolaire ag 37 céim, 5% codán toirt CO2, agus 70% do 24 h. Breathnaítear ar stádas fáis na gceall faoi mhicreascóp, agus cuirtear an meán in ionad nó cuirtear an meán in ionad nó déantar é a fho -shaothraítear de réir stádas fáis na gceall.
1.4.2 Grúpáil Thurgnamhach
Tá cealla B16F10 agus HACAT sa chéim fáis logartamach ionaclaithe i bplátaí tobair 96- le huimhreacha cille cuí agus saothraithe ar feadh 24 h chun ligean do na cealla cloí leis an mballa. Ullmhaítear réitigh shamplaí de chomhchruinnithe éagsúla ag baint úsáide as meán cultúir DMEM. An gnáthghrúpa, an grúpa samhla, grúpa PHGanna ísealdháileoige (125 ug/mL), grúpa PHGS meánmhéide (250 UG/ML), grúpa ard-dáileoige (grúpa 500 ug/mL), grúpa glasa íseal-dáileoige (6.25 ug/ml), grúpa GLA/ML 3 UG/ML), GLA/ML), GLA/ML) grúpa GLA (1 UG/ML), GLA), GLA) grúpa GLA/ML), GLAS), GLAS), GLAS) GLA, GLA), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS), GLAS (GLAS), grúpa GLAS (GLAS), grúpa GLAS (GLAS), grúpa GLA/ML) Bunaíodh grúpa meánach PHGS/GLA (5∶1), agus PHGS/GLA (10∶1).
Sa mhúnla líocha B16F10 UVB-spreagtha, cuireadh na cealla grúpa samhail le 30 μL de PBS (pH =7. 4) agus cuireadh 3 cm díreach faoi bhun ionradaitheoir UVB do 110 s; Rinneadh réamhchóireáil ar an ngrúpa turgnamhach le 100 μL de thuaslagáin shamplaí de chomhchruinnithe maise éagsúla do 1 h, agus ansin cuireadh le 30 μL de PBS é agus cuireadh 3 cm díreach faoi bhun an ionradaitheora UVB do 110 s; D'úsáid an gnáthghrúpa i gcónaí meán cultúir ard-ghlúcóis DMEM; Ní raibh an grúpa bán ionaclaithe le cealla, ach le méid cothrom an chultúir ina ionad.
Sa mhúnla athlasadh cille HACAT a spreagann an LPS, saothraíodh an grúpa samhla le tuaslagán PBS de LPS ag tiúchan de 20 ug/ml ar feadh 24 h; Rinneadh réamhchóireáil ar an ngrúpa turgnamhach le 100 tuaslagán sampla μl de chomhchruinnithe maise éagsúla do 24 h agus ansin cuireadh é le tuaslagán 20 ug/ml LPS ar feadh 24 h; D'úsáid an gnáthghrúpa meán ard-ghlúcóis DMEM i gcónaí; Ní raibh an grúpa bán ionaclaithe le cealla, ach le méid cothrom an chultúir.
Sa mhúnla struis ocsaídiúcháin cille HACAT AAPH-spreagtha, saothraíodh an grúpa samhla le tuaslagán 100 ml AAPH (2.5 mmol) ag tiúchan de 25 mmol/L ar feadh 24 h; Rinneadh réamhchóireáil ar an ngrúpa turgnamhach le tuaslagáin samplacha 100 μL de chomhchruinnithe maise difriúla do 24 h agus ansin cuireadh le tuaslagán AAPH é ag tiúchan de 25mmol/L ar feadh 24 h; D'úsáid an gnáthghrúpa meán ard-ghlúcóis DMEM i gcónaí; Ní raibh an grúpa bán ionaclaithe le cealla, ach le méid cothrom an chultúir.
Bunaíodh gach grúpa le 3 thobar macasamhlaithe agus saothraithe i gorlann ag 37 céim, codán toirt 5% CO2, agus taise 70%.
1.4.3 Measúnú Cíteatocsaineachta
Baineadh úsáid as an modh CCK8 chun cíteatocsaineacht a chinneadh. B16F1 0 agus rinneadh cealla HACAT sa chéim fáis logartamach a dhíleá le 0.25% trypsin ar feadh 3 nóiméad. Tar éis deireadh a chur leis an díleá, rinneadh an meán cultúir a shéidte arís agus arís eile chun fionraí cille a dhéanamh le dlús 1 × 104 ceall/ml. Rinneadh na cealla a ionaclú go cothrom i bpláta tobair 96-, 100 μl in aghaidh an tobair, agus cuireadh PBS leis na toibreacha timpeall na gceall. Tar éis do na cealla cloí leis an mballa, cuireadh comhchruinnithe éagsúla de thuaslagán samplach leis, 3 thoibreacha macasamhla in aghaidh an ghrúpa, agus saothraíodh iad i ngoradán ag 37 céim, codán 5% CO2, agus 70% taise do 24, 48, agus 72 h, agus ansin cuireadh an tuaslagán i leataobh. Cuireadh gach grúpa leis le 100 μL de mheán cultúir iomlán ina raibh codán toirt 10% CCK8 agus a ghoradh ar feadh 60 nóiméad. Tomhaiseadh ionsúiteacht an tuaslagáin ag 450 nm ag úsáid léitheoir ELISA. Ríomhadh inmharthanacht cealla (%) de réir foirmle (4).
Cá bhfuil: Is é grúpa turgnamhach ionsúiteacht na dtoibreacha ina bhfuil cealla agus tuaslagán samplach faoi ionradaíocht UVB; Is éard atá i ngnáthghrúpa ná ionsúiteacht na dtoibreacha ina bhfuil cealla agus tuaslagán samplach gan ionradaíocht UVB; Is éard atá i ngrúpa bán ná ionsúiteacht na dtoibreacha ina bhfuil meán cultúir ach gan aon chealla.
1.4.5 Ábhar melanin a chinneadh
Socraíodh an t -ábhar melanin de réir modh lysis NaOH. Tar éis dó na cealla a chóireáil le haghaidh 72 h de réir an mhodha i Roinn 1.4.2, cuireadh an supernatant i leataobh, agus nite faoi dhó le PBS, agus cuireadh 100 μL de thuaslagán uiscí NaOH ina raibh 10% DMSO de réir toirte (tiúchan 1 mol/L) leis. Tar éis é a chur in oigheann 90 céim ar feadh 1 h, socraíodh an tuaslagán ar an tuaslagán ag 490 nm ag marcóir einsíme. Rinneadh an turgnamh arís agus arís eile 3 huaire. Ríomhadh an t -ábhar melanin (%) de réir Foirmle (5).
1.5 Ábhar fachtóra athlastacha agus innéacs struis ocsaídiúcháin a chinneadh
Tar éis dóibh na cealla a chóireáil ar feadh 48 h de réir an mhodha i Roinn 1.4.2, bailíodh na cealla HACAT i ngach grúpa le scraper cille, lártheifneofar, agus bailíodh an supernatant. Socraíodh ábhar IL {-6 agus TNF- de réir threoracha an trealaimh ELISA.
Tar éis dóibh na cealla a chóireáil ar feadh 48 h de réir an mhodha i Roinn 1.4.2, bailíodh na cealla HACAT i ngach grúpa le scraper cille, agus briseadh na cealla trí reo agus leá arís agus arís eile. Rinneadh na cealla a lártheifneáil ag 12000 r/min ag céim 4 ar feadh 10 nóiméad, agus bailíodh an supernatant. Socraíodh an ghníomhaíocht SOD agus an t -ábhar CAT de réir threoracha threalamh ELISA.
1.6 an t -innéacs comhcheangailte a chinneadh
Baineadh úsáid as an modh innéacs comhcheangailte (CI) [20] chun a fháil amach an raibh éifeacht sineirgíoch ag PHGanna agus GLA i gcóimheasa maise éagsúla maidir le gníomhaíocht tyrosinase agus frith-ocsaídiú a chosc. Ríomhadh an t -innéacs comhcheangailte de réir Foirmle (6):
Wherein: D1 and D2 are the mass concentrations (mg/mL) of the two drugs when the activity reaches x% in the combined treatment; DX is the mass concentration (mg/mL) required for the activity to reach x% when the two substances are used alone. Compusyn software was used for calculation. CI>1 Léiríonn sé éifeacht fhrithghiniúnach, léiríonn CI =1 éifeacht bhreiseáin, agus CI<1 indicates a synergistic effect.
1.7 Anailís Sonraí
Cuirtear na sonraí go léir in iúl mar "mheán uimhríochtúil ± diall caighdeánach (𝑥̅ ± 𝑠)". Graf Prism 9.5. {0 Baineadh úsáid as bogearraí le haghaidh anailíse staitistiúla. Baineadh úsáid as anailís aontreo ar athraitheas chun comparáid a dhéanamh idir ilghrúpaí. P<0.05 was considered statistically significant.
