Beag Ach Mighty - Eisceasóim, Teachtairí Úrúla Idircheallacha i nGiniúint Néar-mhíghlúin Cuid 1

Achoimre Shimplí:

Is nanacháithníní bitheolaíocha iad eiseasóim a aithníodh le déanaí mar theachtairí idircheallacha. Tá lasta lipidí, próitéiní agus RNA iontu. Is féidir leo a n-ábhar a aistriú ní hamháin chuig cealla sa chomharsanacht ach go cealla i bhfad uait freisin.

Uirlis chumarsáide idircheallacha nua-aimsithe is ea eiseasóim a fhéadann vesicles beaga íogair a scaoileadh chuig na cealla máguaird, ag seachadadh roinnt próitéiní, substaintí comharthaíochta agus substaintí eile chuig na cealla máguaird. Is féidir leis na substaintí seo cabhrú le cealla a staid a athrú agus fiú tionchar a imirt ar fhás, ar fhorbairt, ar mheitibileacht, agus ar ghnéithe eile de chealla eile. Le blianta beaga anuas, léirigh staidéir go bhfuil ról tábhachtach ag exosomes i bhfeidhm inchinn an duine, go háirithe i gcothabháil agus feabhsú cuimhne.

Ar an gcéad dul síos, féadann eiseasóim tarchur comhartha a chur chun cinn idir néaróin. Tá tarchur faisnéise idir néaróin ar cheann de na coinníollacha is gá maidir le gnáthoibriú an néarchórais, agus imríonn eiseasóim ról na dteachtairí, a fhéadfaidh tarchur faisnéise idir néaróin a dhéanamh níos réidhe, rud a fheabhsaíonn cognaíocht inchinn agus cuimhne.

Ar an dara dul síos, is féidir le heiseasóim meitibileacht néaróin a rialáil freisin. Sa phróiseas néaróin a tháirgeadh agus a scaoileadh exosomes, tá líon mór próisis meitibileach i gceist, rud a chuireann cothromaíocht agus rialáil meitibileacht cille chun cinn. Ní hamháin gur féidir leis na próisis seo cumas na néaróin a fheabhsú ach cuidíonn siad freisin le dramhaíl meitibileach agus móilíní díobhálacha a bhaint agus cealla inchinn a choinneáil sláintiúil.

Ar deireadh, is féidir le heiseasóim cabhrú le néaróin damáiste a dheisiú. Tá go leor próitéiní agus aigéid núicléacha a iompraítear ag eiseasóim tairbheach d'fhás cille, deisiú agus athghiniúint, agus féadann siad deisiú agus athghiniúint néaróin a chur chun cinn, rud a fheabhsóidh cumas marthanais na gcealla inchinn agus neartaíonn sé lárionaid chuimhne agus cumas cognaíocha.

Go hachomair, tá gaol dlúth idir eiseasóim agus cuimhne. Is féidir linn cuimhne leanaí a athrú trí thosú le haiste bia. Trí struchtúr cothaithe leanaí a threorú go gníomhach agus ag ithe níos mó bianna saibhir i gcomhábhair thairbheacha ar nós aigéid shailleacha, próitéiní agus vitimíní is féidir táirgeadh agus scaoileadh eiseasóim a chur chun cinn, rud a chabhraíonn le leanaí a gcumas foghlama agus cuimhne a fheabhsú. Is féidir roinnt cluichí agus cleachtaí traenála inchinne a chur ar fáil do leanaí freisin chun a gcuid smaointeoireachta a dhúshlánú agus a fheidhmiú, cumas eiseasóim a spreagadh, agus ról níos fearr a imirt. Is féidir a fheiceáil go gcaithfimid cuimhne a fheabhsú, agus is féidir le Cistanche cuimhne a fheabhsú go suntasach toisc gur ábhar íocshláinte traidisiúnta Síneach é Cistanche le go leor éifeachtaí uathúla, agus is é ceann acu cuimhne a fheabhsú. Tagann éifeachtúlacht Cistanche ó na comhábhair ghníomhacha éagsúla atá ann, lena n-áirítear aigéad tannic, polaisiúicrídí, gliocóisídí flavonoid, etc. Is féidir leis na comhábhair seo sláinte inchinn a chur chun cinn ar go leor bealaí.

Cliceáil Know chun cuimhne gearrthéarmach a fheabhsú

Cuireann an cumas uathúil seo ar a gcumas fiseolaíocht na gceall faighteora a mhodhnú. San inchinn, tá ról ag eiseasóim i ngalar néarmheathlúcháin cosúil le galar Alzheimer, galar Parkinson, agus scléaróis cliathánach amyotrófach.

Coimriú:

Is éard atá i eiseasóim de bhunús endosomal ná aicme amháin d’fheithiclí eischeallacha atá tábhachtach i gcumarsáid idircheallacha. Scaoileann gach ceall inár gcorp eiseasóim agus tá lorg ag a gcuid lastais de lipidí, próitéiní agus aigéid núicléacha a léiríonn bunús a dtuismitheoirí.

Tá sé de chumhacht ag an lasta eiseasómach fiseolaíocht na gceall faighteoirí a mhodhnú i gcóngar na gceall a scaoileann nó na cealla i bhfad i gcéin. Braitheann leas a bhaint as acmhainneacht eiseasóim ar íonacht ullmhúcháin eiseasóim.

Mar sin, forbraíodh go leor modhanna leithlisithe agus soláthraímid achoimre gonta ar roinnt modhanna. In ainneoin an leithlisiú a chuireann an bacainn fola-inchinn i bhfeidhm, níl cealla sa CNS díolmhaithe ó thionchair ionsáite eiseasómacha. Eisceasóim néaróin agus glarelease araon, go minic ar bhealach a bhraitheann ar ghníomhaíocht.

Soláthraítear cur síos gairid ar eiseasóim a scaoiltear ag cealla éagsúla san inchinn agus ar a ról maidir le hoiméastáis CNS a chothabháil. Is é sainmharc roinnt galar néar-mheathlúcháin ná carnadh comhiomláin próitéine. Tugann staidéir a rinneadh le déanaí le tuiscint go bhfuil ról cumarsáide idircheallach eiseasóim i leathadh na bpróitéiní mífhillte a chuireann iomadú na paiteolaíochta i bhfeidhm.

San athbhreithniú seo, pléifimid na rannchuidithe féideartha a dhéanann eiseasóim maidir le dul chun cinn galar Alzheimer, galar Parkinson, agus scléaróis cliathánach amyotrófach.

Nuair a thuigtear na rannchuidithe a dhéanann eiseasóim i bpataiginéis néar-mhíghlúine, osclaíonn sé an réimse chun eiseasóim a úsáid mar oibreáin theiripeacha chun drugaí a sheachadadh don inchinn, ós rud é go dtrasnaíonn eiseasóim an bhacainn fola-inchinn.

Eochairfhocail: eiseasóim; néaróin; cealla glial; lárchóras na néaróg (CNS); galair néarmheathlúcháin; galar Alzheimer; galar Parkinson; scléaróis cliathánach amyotrophic.

1. Réamhrá agus Peirspictíocht Stairiúil

Is díol spéise an chumarsáid idircheallacha maidir le forbairt suthach, athghiniúint/athsholáthar epithelia, gametogenesis, agus cothabháil hoiméastáis.

Aithníodh roinnt meicníochtaí cumarsáide cille-chealla ar nós endocytosis / exocytosis agus bleibeanna cíteaplasmacha ionghabhála trí úsáid a bhaint as staidéir ultrastruchtúracha agus bithcheimiceacha [1-3]. Aithníodh imreoir eile, vesicles extracellular, ach níor tugadh aird ar a ról sa chumarsáid idircheallach láithreach [4].

Thángthas ar fheithiclí eischeallacha go serendipteach le linn imscrúdaithe ar scaoileadh einsímí plasma-ghaolmhara, ecto-ATPase, agus ecto-50-nucleotidase isteach i meán saothraithe cille. Sa bhliain 1981, shaothraíodh comhoibrithe Tramsand línte cille gnáth agus neoplaisteach de bhunadh na luchóige agus daonna i meán saor ó shéiream toisc go raibh a fhios go raibh gníomhaíocht catalaíoch ATPase agus nucleotidase ag serum.

Tar éis deireadh a chur le cealla snámh agus smionagar, díláraíodh an meán coinníollaithe ag luas 310,000 × g ar feadh 90 nóiméad i rótar Spinco Ti-70 agus scrúdaíodh na millíní faoin micreascóp leictreon. Thángthas ar dhá dhaonra d’fheithiclí eischeallacha a raibh clúdach membrane orthu, ceann acu le meántrastomhas idir 500 agus 1000 nm agus an dara daonra níos lú le trastomhas de ~40 nm.

Bhí 50-50-ghníomhaíocht einsímeach nucleotidase agus ATPase sna veicíní seo, ar cuireadh síos orthu ar dtús mar "vesicles exfoliated" ag na húdair. Ina theannta sin, bhí RNA agus fosfailipidí sna vesicles exfoliated a bhí difriúil ó na cealla tuismitheora agus membrane plasma tuismitheora, faoi seach.

Spreag gor na vesicles exfoliated ó chealla C6 glioma le neuroblastomacells 32P-réamh-lipéadaithe dí-fhosfarú próitéiní neuroblastoma le scaoileadh comhchéimneach fosfar radailipéadaithe saor in aisce (32P).

Bhunaigh na sonraí seo nach iompróirí dramhaíola ceallacha (einsímí) amháin a bhí sna vesicles exfoliated ach go raibh feidhm fiseolaíoch acu. Bhunaigh Tram agus comhghleacaithe an téarma exosomes chun cur síos a dhéanamh ar na "vesicles exfoliated" [5] (alt seereview le [6] le haghaidh stair feithicle eischeallach. roimh 1981). Roinnt blianta ina dhiaidh sin, rinne dhá ghrúpa taighde staidéar neamhspleách ar chinniúint an ghabhdóra transferrin i micreascópacht leictreoin reticulocytes [7-9].

Ní éilíonn reticulocytes aibithe transferrin mar sin gabhdóirí tras-aistrithe tylose. Thug an dá ghrúpa faoi deara gur scaoil reticulocytes saothraithe feadáin bheaga de ~50 nm ar trastomhas isteach sa spás eischeallach.

Bhí gabhdóirí aistrithe neamh-dhíghrádaithe sna vesicles beaga seo. I 1987, d'úsáid Johnston agus comh-oibrithe an téarma exosomes chun cur síos a dhéanamh ar vesicles beaga ina raibh gabhdóirí transferrin [10]. Tar éis na mblianta féiniúla, baineadh amach poitéinseal na n-easosóim mar theachtairí idircheallacha núíosacha ar féidir leo fiseolaíocht na spriocchealla a mhodhnú.

Suimiúil go leor, tá an genesis na exosomes thionscnamh le endocytosis (próiseas a aithníodh i 1883; athbhreithniú ag [3]) i gcealla agus scaoileadh exosome go spás intracellular úsáideann an próiseas exocytosis.Since a n-aimsiú tosaigh, tá a fhios againn anois go bhfuil exosomes fochineál de extracellularvesicles de bhunús endocytic le raon méide 40–160 nm ar trastomhas [11].

Léirigh staidéir Tracer go bhfuil macramóilíní endocytosed in ionghabhálacha brístí (.i. brataithe le clathrin) nó i bpoill ar dhromchla na cille. Scarann ​​na hionghabhálacha seo ón scannán plasma agus aimsítear iad sa chíteaplasma.

Tar éis guairí a chailliúint (ie, clathrin), éiríonn na feisicíní brataithe endocytosed mín agus comhleádaíonn siad le hiosóim luatha le haghaidh ceachtar athchúrsála go tapa ar ais go dtí an dromchla cille (endosomes athchúrsáil i bhFíor 1) [12] nó undergomaturation chun foirm endosomes déanach.

Feidhmíonn endosóim luatha agus dhéanacha mar “mhoil sórtála” chun a n-inneachar a dhíriú go hiomchuí: (i) le haghaidh iompair chúlchéimnithe chuig an ngréasán tras-Golgi (ie, aisghabháil endosome-go-TGN) [13,14]; (ii) le líseasóim chun táirgí simplí macramóilíní a dhíghrádú lena n-athúsáid laistigh den chill [15,16]; agus/nó (iii) le hathchúrsáil go dtí an dromchla cealla trí chabhlacha ilshoithíocha [17].

Le linn aibithe na endosomes go luath isteach endosomes, an membrane endosome inmheánach faoi ionradh, a eascraíonn i bhfoirmiú vesicles intraluminal (ainmnithe anois mar exosomes). Déantar macromóilíní sonracha, mar phróitéiní cítosólacha, aigéid núicléacha, agus lipidí a shórtáil in eiseasóim atá ag forbairt.

Aithnítear endosomes déanacha pacáilte le heiseasóim mar chomhlachtaí ilshoithíocha a aistríonn i dtreo an scannáin plasma. Nuair a dhéantar comhleá leis an scannán plasma, scaoileann comhlachtaí ilcheallacha eiseasóim isteach sa spás eischeallach tríd an bpróiseas eisicíotóis (Fíor 1) [18,19]. Imríonn fo-thacar mór próitéiní a earcaítear go seicheamhach ról cinntitheach sa phróiseas endocytosis go dtí endosomes luath, aibiú endosome go lateendosomes, agus a gcinniúint intracellular ina dhiaidh sin (athbhreithnithe ag [17,18,20]).

Léirítear tábhacht na bpróitéiní seo trína gcaillteanas agus/nó sóchán(í) is cúis le galair éagsúla. Mar shampla, is cuid den choimpléasc WASH iad próitéiní Strumpellin agus SWIP a ghlacann páirt i bpolaiméiriú actin, chomh maith le heamhnú agus sórtáil endosome. Tá sócháin sa ghéine Strumpellin ina chúis le paraplegia spastic hereditary, arb iad is sainairíonna é díghiniúint néaróin mótair [21].

Déanann sóchán aonphointe (Pro1019Arg) sa phróitéin SWIP an coimpléasc WASH a dhíchobhsú. Cuireann an coimpléasc WASH díchobhsaithe bac ar gháinneáil endolysosomal, rud a chuireann isteach ar ion-asóim. Bíonn tionchar ag trácht endosomal lochtach ar chognaíocht agus ar fheidhm mhótarnéaróin, agus cuirtear síos ar na hairíonna mar mhoilliú meabhrach neamhshiondromach [22,23].

Sa chíteaplasma, eascraíonn eiseasóim ó endosomes ag baint úsáide as na coimpléisc sórtála endosomal is gá le haghaidh iompair (ESCRT), ar a dtugtar freisin meicníocht ESCRT-spleách bithgenesis exosome (athbhreithnithe ag [18,20]).

Thuairiscigh dhá ghrúpa go neamhspleách bithghineas eiseasóim trí mheán lipid-idirghabhála, meicníocht ESCRT-neamhspleách. Dhá lipid a aithníodh sna staidéir seo ná bis(monoacylglycero)fosfáit/aigéad lysobisphos phatidic (BMP/LBPA) agus ceramide [29,30].

Meicníocht eile atá neamhspleách ar ESCRT is ea Rab31 le haghaidh bithghineas eisíomach sa chiteaplasma. Spreagann gníomhachtú Rab31 foirmiú vesicles intraluminal [31]. Tá meicníocht eile ann nach ndéantar dóthain plé uirthi faoi láthair agus nach ndéantar dóthain taighde uirthi.

Tá an mheicníocht seo bunaithe ar bhreathnuithe ultrastruchtúracha a rinneadh sna 1950í déanacha go dtí na 1970idí a thaispeáin gur féidir le núicléis cille a bheith ina láithreán tionscnaimh de chomhlachtaí ilshoithíoch atá pacáilte le feisicíní beaga. B'fhéidir gur eiseasóim a bhí sna feisicíní beaga a ndearnadh cur síos orthu sna staidéir seo ach níor ceapadh an téarma eiseasóim ag an am sin. D'fhéach Kilarski agus Jasinski próiseas ar a dtugtar blebbing núicléach nó easbhrúiteáin núicléacha i gcealla an lamhnán snámha an éisc péirse, Perca fluviatilis L. (Fíor 2a) [24] le hábhar cosúil le nucleolarkaryoplasm [32].

Thug na húdair seo faoi deara gur féidir blebbing núicléach a spreagadh trí ghás a bhaint as lamhnán snámha na n-iasc péirse [24]. Is cosúil go bhfuil fiúntas ag baint le próiseas an tséideadh núicléach mar shuíomh tionscnaimh eiseasóim atá saibhrithe le haigéid núicléasacha agus/oribonucleopróitéin.

Líonadh bleibeanna núicléacha le veisteanna beaga a d'eascair as fillteáin singil de scannán inmheánach na bleibíní núicléacha (Fíor 2b), próiseas cosúil le foirmiú feithidicí intraluminalacha i n-ionasóim. Blebs núicléacha líonta le 'veicilíní beaga'deighilte faoi dheireadh ó núicléis le bheith ina gcuid den chíteaplasma (Fíor 2c).

Thagair Kilarski agus Jasinski do bleibeanna núicléacha mar chomhlachtaí ilshoithíoch ina lámhscríbhinn mar gheall ar easpa téarmaíochta níos fearr. Go neamhaireach, d'fhéadfadh go raibh na húdair seo ceart mar a thuairiscigh staidéir ina dhiaidh sin láithreacht comhlachtaí multivesicular i núicléis cealla [33]. Tá moirfeolaíocht ag na bleibíní núicléacha atá líonta le veicíní beaga cosúil le comhlachtaí ilshoithíocha a eascraíonn as ion-asóim sa chíteaplasma (Figiúirí 1 agus 2).

Mar gheall ar chosúlacht na gcomhlachtaí núicléacha multivesicular le nucleocapsid víreasach, dhírigh na taighdeoirí a aird ar víreolaíocht agus an feiniméan na blebbing núicléach agus a fheidhm cheallacha fhan underexplored [34].

Beag beann ar an modh bithgenesis, tá exosomes comhdhéanta de dhéshraith alipid agus tá ábhar macromóilíní comhdhéanta de lipidí, próitéiní, agus núicléicídí.

Tá cuid de na macramóilíní coitianta d’eisínteachtaí a thagann ó gach cill agus aicmítear iad mar mharcóirí eiseacha agus úsáidtear iad mar uirlis dheimhniúcháin chun idirdhealú a dhéanamh idir eiseasóim ó fheithiclí eischeallacha eile. Léiríonn na macramóilíní uathúla atá i láthair in eiseasóim a mbunús tuismitheora agus mar sin is dócha go n-ainmneofar iad mar bhithmharcóir(í).

Scaoileann na cealla go léir eiseasóim isteach sa spás eischeallach. Ón spás eischeallach, aimsíonn eiseasóim a mbealach isteach i sreabháin bhitheolaíocha éagsúla agus sroicheann siad cealla go háitiúil agus i bhfad uait. Scaoileann cealla saothraithe in vitro a gcuid eiseasóim isteach sna meáin chultúir. Nuair a scaoiltear eiseasóim go leanúnach sa spás eischeallach, is foinse shaibhir sreabhán meánach agus bitheolaíoch é cultúir chun eiseasóim a leithlisiú.

Tá méid suntasach de RNA códaithe agus neamhchódaithe i eiseasóim, blúirí géanómaíochta dúbailte-shnáithe, agus DNA miteachondrial. Ba iad tramanna agus comhghleacaithe na chéad daoine a rinne cur síos ar láithreacht RNA i "vesicles exfoliated", meascán d'eisiméamaí agus micreabhillí.

Chinn siad go raibh 5% RNA [5] i "vesicles exfoliated nó exfoliated". Ba iad Valadi agus comhghleacaithe na chéad daoine a rinne anailís chórasach ar inexosomes pacáistithe RNAanna. I measc na RNAanna exosomal bhí mRNAs in-aistrithe agus microRNAs (miRs) [35].

Is aicme de RNAnna neamhchódaithe (ncRNAs) iad microRNAs. Is ~22 núicléatídí ar fad iad agus rialaíonn siad slonn géine ag an leibhéal iar-thscríbhinne trí cheangal a dhéanamh ar 30-dreigiúin neamh-aistrithe dá sprioc-RNAnna teachtaire [36]. Is díol spéise é nach n-aimsítear roinnt miRNAs saibhrithe in eiseasóim sna máthairchealla, rud a thugann le tuiscint go bhfuil córas sórtála/pacáistithe RNA roghnach i bhfeidhm le linn bithghineas eiseasóim [35,37].

Murab ionann agus cealla, níl mórán RNA ribosómach nó gan aon RNA in eiseasóim ach bíonn blúirí tRNA iontu [38]. Braitheann sórtáil RNA ina eiseasóim ar (1) próitéin a bhaineann le coimpléasc tosta RNA-spreagtha (RISC), (2) seicheamhmhótaí RNA agus próitéiní treorach, (3) breisithe núicléitíde ag deireadh na miRNAs, (4) infhaighteacht cheallacha miRNAs, agus (5) ceramide [39,40].

Creidimid gur próiseas ceallach eile é bleabaireacht núicléach a cheadaíonn sórtáil difreálach RNA, coimpléisc RNA-próitéine, agus DNA géanómaíochta ina eiseasóim. Tá roinnt cúiseanna leis an dearcadh seo: (1) bhí an t-ábhar na 'vesicles intraluminal' cosúil le karyoplasm nucleolar [32]. 'vesicles' i gcomhlachtaí núicléacha ilmheánacha (MVB II) saibhrithe le RNA, aigéadach agus próitéiní bunúsacha, agus údair mheas ' vesicles intraluminal 'mar shuíomh na sintéise RNA i dteannta tonucleolus [41].

Proteins present in the vesicles may have been RNA-binding proteins and Dicer1 that were detected in exosomes [42] (unpublished data, Kumari Lab, Kansas State University, Manhattan, KS, USA). (2) Considering the nucleus as a site of exosome biogenesis can explain the presence of RNAs including precursor miRNAs (unpublished data, Kumari Lab) and double-stranded genomic DNA fragments ranging from 100 bp to >eiseasóim 10 kbin [43–47].

Teagmhasach, níor aimsíodh DNA genomic ach amháin i exosomes a dhíorthaítear ó línte cille ailse agus ní cealla gnáth [47]. Tá crómatin neamhghnácha ag cealla ailse mar gheall ar athshocrú/traslonnú crómatin agus b'fhéidir ploidy [48] a d'fhéadfadh ilroinnt genomicDNA i núicléis cille ailse a chur faoi deara. Is furasta na blúirí DNA seo a ionchorprú i MVB cineál II (agus eiseasóim) a fhorbraíonn sna núicléis. (3) Tá an modh 'bith-ghéineasa 'vesicle beag' i bleibeanna núicléacha a ndearna Kilarski agus Jasinski cur síos air [24] cosúil leis an bhfoirmiú feithicle intraluminal i n-endosomes déanach sa cíteaplasma.

Creidimid go láidir go bhfuil láithreacht DNA géanómach in eiseasóim paiteolaíochta agus dá bhrí sin is féidir a láithreacht in eiseasóim a úsáid mar uirlis dhiagnóiseach chun cealla neamhghnácha (nó ailse) a fhorbairt sa chorp. (4) Tá an méadú atá ag brath ar ghníomhaíocht ar líon na n-eiseosóim arna scaoileadh ag cealla [49] inchomparáide le cealla gáis a léirigh méadú ar shéideadh núicléach nuair a baineadh gás ó lamhnán snámha na n-iasc péirse [24].

Níos déanaí, braitheadh ​​próitéiní miteachondrial agus DNA in eiseasóim plasma roinnt othar ailse, agus tá baint ag a láithreacht le ionsaitheacht ailse [50,51].

Is minic a breathnaítear miondealú mitochondrial i gcealla degenerating [52,53]. D’fhéadfadh comhlachtaí ilshoithíocha a inmheánú ag cristae mitochondrial a scaoiltear ó na mitochondria meathlaithe agus déantar inexosomes a phacáistiú sa deireadh.

Tacaíonn íomhánna ultrastruchtúir de lymphoblastoidcells daonna leis an nóisean seo agus lumen acini an phróstataigh babúin a raibh 'microfheithiclí' (nó eiseasóim) acu a dhíorthaítear ó bhriseadh cristae na mitochondria [54].

Bunaithe ar an bplé thuas agus ar an bhfianaise thacúil thurgnamhach, molaimid go n-eascraíonn nádúr ilchineálach na n-eiseosóim ó bhithghineas na gcomhlachtaí ilshoithíocha agus na heiseasóim a bhaineann leo i suíomhanna fo-cheallacha éagsúla agus ní sa cíteaplasma go hiomlán de réir ár gcreidimh reatha. chomh maith le neamhréir idir ríomhaireachtaí teoiriciúla agus sonraí turgnamhacha ar líon na RNAs beag nó móilíní próitéin atá laistigh de exosome amháin íonaithe ó serum [55].

Bunaithe ar ríomhanna teoiriciúla ag baint úsáide as meánmhéid eisíomach, thuar Li agus a chomhghleacaithe go n-úsáidfeadh gach duine eiseasóim thart ar 70–25,000 RNA beag nó móilíní próitéine.

Mar sin féin, léirigh a gcuid sonraí turgnamhacha láithreacht móilín RNA amháin in aghaidh an tseirim íonaithe exosome [55]. Éilíonn ár hipitéis iniúchadh breise a dhéanamh ar shéideadh núicléach, ar chomhlachtaí ilghnéitheacha núicléacha, agus ar bhithghineasa eiseasóim ina bhfuil RNA/ribonucleoprotein ina bhfuil innúicléach. Tá difríocht idir comhdhéanamh lipid idir an tuismitheoir membrane cille agus an membrane exosome.

Go ginearálta, is éard atá i lipidí saibhrithe i membranes eisosóim ná micrifhearainn rafta lipid sphingomyelin, ceramide, colaistéaról agus saibhir i colaistéaról, ganglioside GM3, lipidí neamhsháithithe, agus fosfatidylserine [56-58]. Tá próitéiní eacsómacha comhdhéanta díobh siúd is coitianta don chuid is mó d'eosóim chomh maith le sainphróitéiní. chuig tuismitheoir cill áirithe.

Saibhrítear cion próitéine na n-eisínteachtaí go léir chun díriú ar phróitéiní agus próitéiní comhleá mar tetraspanins, integrins, chaperoneproteins, m.sh., próitéiní turraingthe teasa (Hsp60, Hsp70, agus Hsp90), na próitéiní beaga seicní-thráchta HSP, próitéiní Rab, GTPases ARF, iarscríbhinní, agus próitéiní a bhfuil baint acu le foirmiú comhlachtaí multivesicular amhail ALIX agus TSG101 [59].

Molann staidéir níos déanaí láithreacht próitéiní RNA-cheangailteacha a fhoirmíonn coimpléisc RNA-próitéin in eiseasóim [38]. Is iad (1) meicníochtaí ESCRT do phróitéiní a bhfuil modhnuithe iar-aistrithe áirithe acu amhail ubiquitination, meitiliú arginine spreagtha ag Wnt, ocsaídiú, fosfarylation, glycosylation, agus citrullination, roinnt próisis cheallacha a áirithíonn uaslódáil próitéiní in eisóimóim; (2) autophagy trí chaperone-idirghabhála (CMA) a bhraitheann ar an idirghníomhaíocht idir turraing teasa próitéin 71 kDa ghaolmhara (HSC70) agus próitéiní a bhfuil KFERQmotif.

Tar éis HSC70 a cheangal le próitéiní a bhfuil móitíf KFERQ acu, dírítear próitéiní ar chomhlachtaí ilshoithíoch. Is iondúil go n-oibríonn uathphagaíocht chaperone-idirghabhála do dhíghrádú próitéiní i líseasóim. Tugann sonraí níos déanaí le fios go bhfuil ról ag CMA i scaoileadh exosome agus scaipeadh exosome-idirghabhálaithe comhiomláin próitéine i roinnt galair néar-mheathlúcháin [60-63].

Tá méadú easpónantúil ar thaighde eiseasómach ó na 1990idí agus tá go leor sonraí ar lasta eiseasómach ginte. Cruthaíodh bunachair shonraí chun achoimre lasta eiseasómach a sholáthar sula mbíonn sé ródheacair tacair shonraí mhóra a bhainistiú.

Fáth eile is ea in-atrialltacht na sonraí foilsithe ar eiseasóim toisc go mbaineann formhór na saotharlann úsáid as éagsúlachtaí de mhodhanna éagsúla a forbraíodh chun eiseasóim a leithlisiú. Mar shampla, Vesiclepediais compendium de láimh coimeádta de lasta móilíneach (lipid, RNA, agus próitéin) a aithníodh in aicmí éagsúla de veicíní extracellular [64]. Soláthraíonn Vesiclepedia acmhainn luachmhar do thaighdeoirí.

Tá an bunachar sonraí Vesiclepedia ar fáil go poiblí agus ligeann sé d'úsáideoirí sonraí lasta eisosóim a fhiosrú agus a íoslódáil bunaithe ar chritéir chuardaigh a cuireadh isteach ag an úsáideoir. Is bunachair shonraí breise iad EV pedia, Exocarta, ExoRbase, agus EV miRNA a chatalógaíonn próitéiní exosomal agus RNA [64].

Tá na bunachair shonraí á dtiomáint ag nótaí pobail. Faightear na sonraí a choimeádtar sna bunachair sonraí seo trí eiseasóim a aonrú trí úsáid a bhaint as teicnící éagsúla deighilte nach bhfuil san áireamh sa bhunachar sonraí.

Mar sin d’fhéadfadh go mbeadh difríocht idir an t-ábhar lasta eiseasómach bunaithe ar an modh leithlisithe a úsáidtear, rud a fhágann go bhfuil roinnt débhrí ann sna torthaí tuairiscithe. Chun in-atáirgtheacht thurgnamhach agus trédhearcacht a fheabhsú, forbraíodh tacar uirlisí foinse oscailte EV-TRACK. Cuimsíonn EV-TRACK ullmhúchán eaxosome dataon agus tréithriú eisíomach [65].

Príomhghné de EV-TRACKis EV-METRIC a chuireann tuairisciú na bparaiméadar turgnamhach i láthair mar chéatadán de chomhpháirteanna comhlíonta de liosta naoi [66]. Chinn an cuibhreannas EVTRACK na comhpháirteanna seo agus measadh go raibh siad riachtanach chun sonraí turgnamhacha a léirmhíniú agus a atáirgeadh gan athbhrí. Mar sin, ceapadh EV-METRIC chun cabhrú le taighdeoirí agus le hathbhreithneoirí forbhreathnú cuimsitheach a sholáthar ar na sonraí.

2. Modhanna Reatha le haghaidh Leithlisiú Eisceasóim

Is acmhainn shaibhir iad eiseasóim le haghaidh fionnachtain bithmharcála agus le haghaidh straitéisí teiripeacha núíosacha lena n-áirítear leigheas athghiniúnach. Tá sé ríthábhachtach do rathúlacht na spriocanna seo eiseasóim íona a leithlisiú trí mhodh in-atáirgthe.

Tá sé ríthábhachtach eiseasóim atá inniúil go feidhmiúil a leithlisiú le haghaidh feidhmeanna teiripeacha féideartha. Tá eiseasóim íonaithe ó shreabháin bhitheolaíocha éagsúla mar fhuil, plasma, sreabhán cerebrospinal, seile, fual agus bainne. Tá tréithe fisiceacha agus ceimiceacha éagsúla ag gach sreabhán bitheolaíoch ar gá iad a mheas roimh leithlisiú exosome.

I gcásanna áirithe, d’fhéadfadh go mbeadh gá le réamhchúraimí sonracha chun aonrú eisíomach a dhéanamh. Is cinntitheach eile é cur i bhfeidhm deiridh eiseasóim íonaithe a mbíonn tionchar aige ar an modh leithlisithe eiseasóim.

Go dtí seo, forbraíodh modhanna leithlisithe severalexosome agus tá cuid acu bunaithe ar shaintréithe eisómacha mar a méid, a ndlús, a luchtú dromchla, agus na próitéiní a bhaineann leis an dromchla exosome (Fíor 3) [67].

Tá cuid de na modhanna leithlisithe eiseamláireacha atá in úsáid faoi láthair liostaithe i dTábla 1. Ní modhanna neamhspleácha an chuid is mó díobh agus éilíonn siad céimeanna próiseála iarshampla roimh ré. Déantar modhanna suntasacha a phlé go hachomair thíos.

Fíor 3. Modhanna a úsáidtear go coitianta le haghaidh aonrú eiseasóim agus a bhfeidhmeanna iartheachtacha. Tá roinnt modhanna a forbraíodh go dtí seo le haghaidh aonrú eiseasóim bunaithe ar a ndlús buacach,Scéim 1, 13, agus 1.19 g/mL, rinneadh tuilleadh scagtha ar an modh ultralártheifneoirithe (UC) go dtí seo. ullmhóidí íon eiseasóim a leithlisiú bunaithe ar a ndlús buacach trí róshiúcrós ultralártheifneoirithe isipícnic nó grádán dlúis iaidínóil (DG).

Chun cion ard próitéine i bpróitéiniúir a bhaint, cuireadh an modh ultracentrifugation le chéile le crómatagrafaíocht méid-eisiata (SEC). Mar thoradh ar shrianta ama a bhaineann leis an modh ultracentrifugation, forbraíodh an modh scagacháin (UF).

Trí shamplaí caola amhail meán cultúir agus fual a chur ar aghaidh trí chomhdhlúthadán nana- nó micrea-scileáin, cheadaigh sé íonú eisíomach. D'fhág clogáil membrane agus droch-aisghabháil próitéin eiseasómach nach bhfuil an-tóir ar an modh seo d'fheidhmchláir iartheachtacha ar nós aonrú RNA agus feidhmchláir ard-thréchur.

Modh eile a forbraíodh chun eiseasóim a leithlisiú ó scagdhealú scagacháin hidreastatach sreabhán bitheolaíoch an-chaolaithe (HFD*) in éineacht le lártheifneoiriú. Sa mhodh HFD, déantar an sampla a scagdhealú trí membrane scagdhealaithe a bhfuil meáchan móilíneach 1000 kDa gearrtha aige faoi bhrú hidreastatach, rud a fhágann gur féidir macramóilíní nach dteastaíonn a bhaint as an sampla agus aisghabhtar eiseasóim trí lártheifneoiriú.

Forbraíodh an modh deascadh eisíomach bunaithe ar thuaslagthacht nó scaiptheacht agus comhiomlánú chun roinnt samplaí a phróiseáil ag an am céanna. Tá feisteáin tráchtála le haghaidh íonú eisíomach bunaithe ar an straitéis seo.

Ar an modh seo, measctar orascítí fuail le glycol poileitiléin (PEG) 6000 nó i gcomhcheangal le prótaimín (móide PEG35,000) agus gortar iad thar oíche nó 1 h ar oighear.

T an meascán turbid mar thoradh air sin lártheifneoirithe chun eiseasóim a aisghabháil a úsáidtear le haghaidh anailísí RNA agus próitéine iartheachtacha. Is iad na himoibrithe eile a úsáidtear le haghaidh deascadh eiseasóim ná (1) 0.1M aicéatáit sóidiam pH 4.75 (modh sailleadh) (NaAc), (2) a4-toirt aicéatón fuar fillte (−20 ◦C) ( Próitéin Frasaíocht Tuaslagóir Orgánach agus giorraithe asPROSPR), (3) agus meascán de thuaslagán PEG agus dextran (suas go dtí 1.5%) (modh dhá chéim a cheadaíonn scaradh próitéiní ó eiseasóim).

Mar thoradh ar shainaithint na bpróitéiní dromchla eiseasómacha forbraíodh modhanna gabhála imdhíonachta-bhunaithe ag baint úsáide as antasubstaintí chun próitéiní dromchla a dhíbirt mar Tim4, iarscríbhinn, EpCAM, próitéin dromchla eisosóim choiteann, CD63, agus próitéiní turraing teasa (idirghníomhaíocht cleamhnais). Baineadh leas as cleamhnas le lectin (a cheanglaíonn le glycoproteiní ar dhromchla eiseasóim) andheparin (a cheanglaíonn le próiteagáin sulfáit heparan ar dhromchla eiseasóim) chun modhanna leithlisithe eacsosome a fhorbairt.

Baineadh úsáid as roinnt ardán cosúil le coirníní maighnéadacha, micrea-leideanna shilice monolithic an-porous, dromchla plátaí plaisteacha, scagairí ceallalóis, scagairí cleamhnais membrane, agarosesorbent, agus gléasanna micreashreabhach le haghaidh modhanna íonú exosome atá bunaithe ar chleamhnas agus tá tuillteanais éagsúla acu maidir lena n-úsáid i. diagnóiseacha, prognóiseacha, mar chórais seachadta drugaí, agus braite agus anailísí lasta forexosomal.

Arna chur in oiriúint le cead ó Konoshenko MY, Lekchnov EA, Vlassov AV, Laktionov PP. Leithlisiú vesicles eischeallach: Modheolaíochtaí ginearálta agus treochtaí is déanaí. Biomed Res Int. 2018 30 Eanáir; 2018: 8545347. doi:10.1155/2018/8545347. PMID: 29662902; PMCID: PMC5831698; Cóipcheart © 2022 Maria Yu. Konoshenko et al.

Is alt rochtana oscailte é seo a dháiltear faoin gCeadúnas Attribution Creative Commons, a cheadaíonn úsáid neamhshrianta, dáileadh, agus atáirgeadh in aon mheán, ar choinníoll go luaitear an saothar bunaidh i gceart [67].

For more information:1950477648nn@gmail.com