Tionchair Chosanta Decoction Shengjing Wenshen Nua Ar Lagú de bharr Cyclosporine De bharr Sintéis Testosterone agus Apoptosis Spermatogenic
Mar 03, 2022
Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com
PAN XIAOYAN , XIYAN WAN , XUENAN WAN , WANSHENG ZHANG4 , ZHANXUAN SUN1 , XUAN XUAN LIANG , XUE ZHANG , WENJUN LI agus ZHIXIN LI
Teibí
Bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo imscrúdú a dhéanamh ar na héifeachtaí cosanta a d’fhéadfadh a bheith ag Wenshen Shengjing Decoction nua (WSSJD nua; lena n-áirítear Cornu Cervi Nippon Parvum, Panax ginseng, Cynomorium solarium,Cistanche deserticola, Radix Astragali, Epimedium brevicornum, agus Angelica Sinensis) ar lagú cyclosporine-spreagtha ar shintéis testosterone agus apoptosis spermatogenic i lucha. Roinneadh 90 lucha fireann fásta Kunming sna 6 ghrúpa seo a leanas: Rialú (gan idirghabháil), démheitiolsulfoxide (DMSO; ní bhfuarthas ach DMSO), cyclosporine A (CSA), citrate clomifene (CC; CsA móide CC, 15 mg/kg /lá), WSSJD (CsA móide WSSJD, amhdhruga 12 g/kg/lá) agus WSSJD nua (CSA móide WSSJD nua, amhdhruga 12 g/kg/lá). Cuireadh cóir leighis ar gach lucha ar feadh 30 lá trí thomhas béil. Socraíodh na magairlí ina dhiaidh sin agus dathaíodh iad le hematoxylin & eosin chun forbairt an epithelia leathmhéanach a mheas. Baineadh úsáid as teicnící imdhíon-cheimiceacha chun léiriú receptor hormone luteinizing (LHR) agus scoilteacht taobh-shlabhra P450 (P450scc) a bhrath i gcealla Leydig testicular. Ina theannta sin, braitheadh apoptosis na gcealla spermatogenic sna testes ag baint úsáide as measúnacht lipéadaithe leas-deireadh dUTP deoxynucleotidyl transferase-mediated teirminéil, agus baineadh úsáid as cíteiméadracht sreafa chun anailís a dhéanamh ar an ráta marthanais agus apoptosis luath sperm san epididymis. I gcomparáid leis na grúpaí CsA agus CC, mhéadaigh riarachán nua WSSJD go suntasach leibhéil serum testosterone agus na habairtí LHR agus P450scc i gcealla Leydig testicular (P<0.05), while="" the="" apoptosis="" of="" spermatogenic="" cells="" in="" the="" seminiferous="" tubules="" and="" early="" apoptosis="" of="" mature="" sperm="" were="" significantly="" decreased=""><0.05). these="" results="" suggest="" that="" new="" wssjd="" may="" ameliorate="" csa-induced="" spermatogenic="" damage="" in="" male="" mice="" by="" enhancing="" testosterone="" synthesis="" and="" the="" secretion="" of="" testicular="" leydig="" cells,="" and="" by="" reducing="" the="" apoptosis="" of="" spermatogenic="">
Réamhrá
Is oibreán imdhíonta a úsáidtear go coitianta é Cyclosporine A (CSA) a dhíríonn go sonrach ar chealla T agus a choisceann an secretion interleukin-2, agus a mhéadaíonn ráta rathúlachta trasphlandúcháin ae, duán agus coirne, chomh maith leis an ráta marthanais de. faighteoirí (1-3). Mar sin féin, méadaítear go suntasach an baol a bhaineann le galair cardashoithíoch, ionfhabhtú, agus siadaí urchóideacha a bhaineann le cosc imdhíonachta arna spreagadh ag úsáidí fadtéarmacha CSA (4). Thuairiscigh Eid et al (5) go raibh comhghaol diúltach idir tiúchan agus motility sperm agus an tiúchan de serum CsA i bhfaighteoirí fireann trasphlandú duán, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh CSA mífheidhmiú an chórais atáirgthe a spreagadh i bhfaighteoirí fireanna. Ina theannta sin, tá sé doiciméadaithe go bhféadfadh CsA a bheith freagrach as spermatogenesis lagaithe agus damáiste don chóras atáirgthe fireann (6).
Tá sé léirithe ag staidéir roimhe seo gur laghdaigh CsA na leibhéil serum testosterone trí thionchar a bheith acu ar biosintéis testosterone agus ar secretion sna testes. Thug sé et al (7) faoi deara go raibh leibhéil i bhfad níos airde de hormón luteinizing (LH) agus leibhéil i bhfad níos ísle de tástosterón sa séiream le feiceáil i bhfrancaigh ar cuireadh cóireáil orthu le 40 mg/kg/lá CsA, rud a d’fhág go raibh lagú ar fhorbairt maistir. Thuairiscigh Ali et al (8) gur laghdaigh cóireáil le CsA léiriú receptor LH (LHR) ar membrane cealla Leydig, rud a laghdaigh sintéis testosterone LH-idirghabhála agus secretion ó chealla Leydig ina dhiaidh sin. Thuairiscigh staidéar eile le Seethalakshmi et al (9) gur laghdaigh CsA leibhéil testosterone trí ghníomhaíocht 17 alfa-hydroxylase a chosc go neamh-chomhoibritheach agus 17 -ghníomhaíocht dehydrogenase hidroxysteroid go hiomaíoch le linn bithsintéise testosterone, agus cuireadh isteach ar an suíomh príomhúil le haghaidh cosc CsA adenosine timthriallach. spreagadh monophosphate. Ina theannta sin, léirigh an tuarascáil seo go raibh tionchar díreach ag an secretion testosterone laghdaithe a tharlódh CsA i gcealla Leydig ar fhorbairt an chórais atáirgthe fireann agus ar chothabháil cumas atáirgthe. Instealladh Seethalakshmi et al (10) testosterone exogenous isteach i francaigh cóireáilte CsA chun leibhéil testosterone endogenous a mhéadú. Tugadh faoi deara go ndearna na dáileoga ardaithe de testosterone exogenous athchóiriú suntasach ar mheáchan orgán atáirgthe, leibhéil serum hormóin spreagtha follicle (FSH), agus mhéadaigh siad an comhaireamh gaiméite, rud a léiríonn go bhféadfadh lagú spermatogenesis de bharr CsA a chosc go páirteach ag an exogenous. riarachán testosterone (10). Mar sin féin, fuarthas amach nach raibh testosterone exogenous leordhóthanach maidir le fíochán testicular damáiste a dheisiú, toisc go raibh tionchar ag secretion testosterone agus spermatogenesis fós ag CsA, agus breathnaíodh rátaí arda apoptosis i sperm agus cealla spermatogenic (10).
Tá Wenshen Shengjing Decoction (WSSJD) comhdhéanta de 15 leigheas luibhe, go príomha lena n-áirítear Cornu Cervi Nippon Parvum, Panax ginseng, Cynomorium solarium,Cistanche deserticola, Radix Astragali, Epimedium brevicoreum, agus Angelica Sinensis (11). Tá sé léirithe ag WSSJD go laghdaítear apoptosis spermatogenic de bharr cyclophosphamide (11). Chun éifeacht theiripeach WSSJD a fheabhsú tuilleadh, d'fhorbair an staidéar reatha WSSJD nua bunaithe ar mheicníocht damáiste fíocháin testicular de bharr CsA trí dáileog na gcomhpháirteanna WSSJD a choigeartú. Tá sé léirithe ag staidéir chógaseolaíochta nua-aimseartha go bhféadfadh veilbhit beanna i WSSJD feidhmiú mar hormón gnéis (12); Féadfaidh Radix Astragali feabhas a chur ar iomadú agus soláthar cothaitheach cealla testicular Sertoli (13), agus féadfaidh Panax ginseng leibhéil hyperocsaíde testicular a laghdú agus bac a chur ar apoptosis spermatogenic (14). Féadfaidh na cógais thuasluaite feidhm na duáin a mhéadú agus forbairt cealla spermatogenic (12-14) a threisiú. Léiríodh i staidéir chliniciúla roimhe seo go bhfuil éifeacht theiripeach ag clomifene citrate (CC) ar neamhthorthúlacht fireann (15,16). Ina theannta sin, tá baint ag CC le paraiméadair feabhsaithe testosterone agus seamhan, agus d'fhéadfadh meicníochtaí cosanta CC a bheith cosúil le meicníochtaí cosanta WSSJD (15,16). Ina theannta sin, i staidéar ag Wang et al (17), baineadh úsáid as CC mar rialú cóireála chun imscrúdú a dhéanamh ar éifeacht an leigheas Síneach Shengjing ar shuaitheadh spermatogenesis i lucha. Bunaithe ar seo, baineadh úsáid as CC mar rialú dearfach sa staidéar seo.
Sa staidéar seo, rinneadh imscrúdú ar an meicníocht atá mar bhunús le héifeacht chosanta an WSSJD nua ar fhíocháin tháillí chun éifeachtúlacht theiripeach an leighis mhodhnaithe a chinneadh. D’fhéadfadh sé go soláthrófaí bunús le húsáid an WSSJD nua chun an damáiste speirmataigineach de bharr CsA a fheabhsú trí an meicníocht chosanta a shoiléiriú.
Éifeachtaí Cistanche deserticola: Coscdamáiste spermatogenic
abhair agus modhanna
Ainmhithe. Chuir an Changchun Institute of Biological Products Co., Ltd. (Changchun, an tSín) 90 lucha fireann Kunming (8-seachtainí d'aois; 35-40 g) ar fáil. Rinneadh an staidéar seo le faomhadh ó Choiste Eitice Ollscoil Leighis Jilin (Changchun, an tSín). Coinníodh lucha ag 21±3˚C agus taiseachas coibhneasta 55-65 faoin gcéad faoi thimthriall 12 h solas dorcha. Tugadh rochtain saor in aisce do lucha ar aiste bia caighdeánach luch saotharlainne agus ar uisce steiriúil.
Ullmhú WSSJD. Na 15 chomhpháirt leighis Síneach de WSSJD, lena n-áirítear Cornu Cervi Nippon Parvum, Panax ginseng, Cynomorium solarium,Cistanche deserticola, ceannaíodh Radix Astragali, Epimedium brevicornum, agus Angelica Sinensis (11), ó Tongrentang (Beijing, an tSín). Decoction decoction de réir an modh traidisiúnta Síneach decoction íocshláinte (18) a bhí na hábhair seo. Go hachomair, rinneadh na comhábhair a mheá de réir an oidis, agus cuireadh 250 ml d'uisce driogtha san iomlán leis na luibheanna a chur faoi uisce. Bhí luibheanna sáithithe ar feadh 30 nóiméad agus téite ina dhiaidh sin. Ar dtús bruite na luibheanna ar feadh 10 min agus ansin laghdaíodh an teas chun suanbhruith ar feadh 20 min. Tar éis 30 nóiméad téimh, scaradh an decoction leachtach ó na luibheanna, a dícocaíodh tuilleadh le 200 ml uisce driogtha ag 80˚C ar feadh 30 nóiméad eile. Rinneadh an próiseas seo arís agus rinneadh an toirt deiridh den leacht dícoction a scagadh trí 4-5 sraitheanna uige. Cuireadh an leacht brú freisin ó na luibheanna isteach sa decoction scagtha. Téadh an decoction ina dhiaidh sin ag 80˚C i ndabhach uisce ar feadh 6-7 h go dtí gur shroich an tiúchan 2 g amhdhruga/ml, agus stóráladh an decoction ag 4˚C roimh úsáid. ullmhaíodh WSSJD nua bunaithe ar fhoirmiú WSSJD le mionchoigeartuithe ar na dáileoga Panax ginseng, Cynomorium solarium, Radix Astragali, agus Epimedium brevicornum. Bhí an modh dícoctála mar an gcéanna leis an WSSJD. nua WSSJD comhdhéanta díobh seo a leanas: Panax ginseng, 6 g; Cynomorium solarium, 9 g; Radix Astragali, 12 g; Epimedium brevicornum, 6 g; Cornu Cervi Nippon Parvum, 1 g;Cistanche deserticola, 9 g; Angelica Sinensis, 6 g; Síl Flatstem Milkvetch, 9 g; Rhizoma Dioscoreae, 15 g; Ceann mór Atractylodes Rhizome, 6 g; Ligusticum wallichii, 3 g; Radix Paeoniae Alba, 6 g; Cinnamomum cassia, 1 g; Costustoot, 1,5 g, agus Fructus Foeniculi, 3 g.
Socraíodh na tiúchain d'eastóscáin amhdhrugaí mar seo a leanas: Meáchan an amhábhair/toirte deiridh. Úsáidtear an modh ríofa seo go forleathan i staidéar ar leigheas traidisiúnta Síneach (19-21).Riarachán drugaí. Roinneadh lucha go randamach i 6 ghrúpa (15 lucha in aghaidh an ghrúpa) agus riaradh iad le leigheas go hingastrach. Ba iad seo a leanas na grúpaí: Rialú (gnáth-seile); démheitiolsulfocsaíd (DMSO); CsA; CC; WSSJD; agus WSSJD nua. Cuireadh lucha sa CsA, CC, WSSJD, agus grúpaí nua WSSJD instealladh intraperitoneally (ip) le 15 mg / kg / lá CsA (Shanxi Powerdone Pharmaceutics Co., Ltd., Datong, an tSín) ar feadh 30 lá, mar a thuairiscítear roimhe seo (8 ). Chuaigh lucha sna grúpaí rialaithe agus DMSO faoi instealladh ip laethúil le toirt comhionann de ghnáth-salanda nó tuaslagóir DMSO, faoi seach, le linn na tréimhse turgnamhach 30-lá. Ba é 3.25 faoin gcéad (v/v) an tiúchan DMSO caolaithe i ngnáth-shalainn. Riaradh an grúpa CC le 21.6 mg/kg/lá CC (GKH Pharmaceutical, Ltd., Guangzhou, an tSín) mar a thuairiscítear roimhe seo (13), a caolaíodh freisin i 3.25 faoin gcéad (v/v) DMSO (pH{{14}). }.2). Tugadh 12 g amhdhruga/kg/lá de WSSJD agus WSSJD nua do lucha sa WSSJD agus do ghrúpaí nua WSSJD, faoi seach.Staining hematoxylin agus eosin (S&E). Baineadh testes lucha agus socraíodh láithreach iad i paraformaildéad 4 faoin gcéad (pH=7.2) ag teocht an tseomra ar feadh 24 h, agus ina dhiaidh sin díhiodráitíodh eatánól, cóireáil xiléin chun an eatánól a bhaint, leabú céir, agus gearradh. Fuarthas codanna histeolaíocha (5 µm) ag baint úsáide as micreatóim rothlach. Greamaíodh iad seo de shleamhnáin ghloine le haghaidh staining H&E. Breathnaíodh rannóga magairlí ag baint úsáide as micreascópacht histeapaiteolaíoch aibhsithe chun forbairt feadáin leath-mhéanacha a mheas agus sonraí histiméadracha a fháil. Rinneadh measúnú ar fhorbairt feadáin seminiferous ag baint úsáide as an gcóras scórála Johnsen (22).
ELISA. Ar an 3ú lá 0 den chóireáil, rinneadh ainéistéiseach ar na lucha le hiodráit chlórach 10 faoin gcéad (Shanghai Guoyao Chemical Imoibrí Co, Teo) ag 0.004 ml/g de mheáchan coirp ip roimh eotanáis le CO2. Baineadh bunfhola agus scaradh an serum agus é a stóráil ag -20˚C. Go hachomair, bailíodh fuil i bhfeadáin 1.5-ml agus stóráiltear í ag 4˚C thar oíche. Ansin lártheifníodh an feadán ag 1,300 xg ag 4˚C ar feadh 6 nóiméad agus bailíodh an serum. Baineadh úsáid as feisteáin ELISA (Shanghai Elisa Biotech Co., Ltd., Shanghai, An tSín) chun inneachar serum testosterone (cat. uimh. EIA-2380) agus LH (cat. uimh. EIA-2385 a chinneadh ) de réir phrótacal an mhonaróra. Socraíodh an dlús optúil (OD) ag baint úsáide as léitheoir microplate Samhail 680 (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA), agus socraíodh na leibhéil testosterone agus LH bunaithe ar an gcuar caighdeánach.
Imdhíon-cheimic. Socraíodh fíocháin testicular i 4 faoin gcéad formaildéad ag teocht an tseomra ar feadh 24 h agus leabaithe i pairifín. Gearradh codanna paraifín ina gcodanna 5 µm agus díchéiríodh iad ina dhiaidh sin. Baineadh aisghabháil antaigin amach trí chodanna a chothú i 0.0Maolán citrate 1 M (pH=6.{31}}) ag 95-98˚C ar feadh 5 nóiméad. Cuireadh bac ar na hailt ina dhiaidh sin le 5 faoin gcéad albaimin serum buaibheach (Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Darmstadt, an Ghearmáin; A3675) ag teocht an tseomra ar feadh 1 h. Tar éis an bhlocála, goraíodh na hailt le antasubstaintí ilchlónacha coinín i gcoinne LHR (cat. uimh. L6792; Sigma-Aldrich; Merck KGaA; 1:200) nó scoilteacht taobhshlabhra P450 (P450scc; cat. uimh. ab75497; Abcam, Cambridge, RA ; 1:200) ag 4˚C thar oíche sa dorchadas. Baineadh úsáid as an modh casta streptavidin-biotin (SABC) chun léiriú LHR agus P450scc a bhrath ag baint úsáide as trealamh SABC (SA2010; Boster Biological Technology, Pleasanton, CA, USA), de réir phrótacal an mhonaróra. Maidir leis na fíocháin atá scoite ó lucha rialaithe diúltacha, cuireadh PBS in ionad an antashubstaint phríomhúil. Measadh go raibh cealla Leydig le staining buí nó donn ar an membrane nó plasma ina gcealla LHR-dearfach. Fuarthas cúig shleamhnán ó gach sampla agus roghnaíodh cúig réimse i réimsí fíocháin Leydig go randamach agus rinneadh measúnú orthu faoi mhicreascóp fluaraiseachta (méadú, x400). Fuarthas an meán OD de chealla dearfacha i réimsí fíocháin Leydig ag baint úsáide as bogearraí Image-Pro Plus 6.0 (Media Cybernetics, Inc., Rockville, MD, USA). Bhí na habairtí LHR agus P450scc comhréireach leis na luachanna OD, le luachanna OD níos airde a léiríonn léirithe próitéine níos airde.
Teirminéal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-idirghabhála measúnacht lipéadaithe leas-deireadh duTP (TUNEL). Rinneadh testes lucha a scaradh, leabaithe i céir, agus altrú. Rinneadh na hailt (5-µm tiubh) a dhathú ansin agus úsáid á baint as trealamh measúnaithe TUNEL (MK1024; Boster Biological Technology), de réir phrótacal an déantóra. Go hachomair, rinneadh fíocháin testicular ó smacht (gnáth-saile), DMSO, CsA, CC, WSSJD, agus grúpaí nua WSSJD a dhathú ag baint úsáide as caolú 1:100 d'antasubstaint digocsaine lipéadaithe biotin ar feadh 30 nóiméad ag 37˚C. Baineadh úsáid as fíochán epithelial interstitial francach dhaite (arna sholáthar sa trealamh) mar rialú dearfach, agus úsáideadh samplaí gortha le PBS in ionad antashubstaint digoxin lipéadaithe biotin mar rialú diúltach. Rinneadh measúnú ar mhinicíocht na gcealla TUNEL-dearfach a thaispeánann smálú glas núicléach trí úsáid a bhaint as micreascóp comhfhócasach scanadh léasair. Rinneadh measúnú ar 10 réimse randamacha faoi mhórmhéadú (x400) agus áiríodh cealla dearfacha. Ríomhadh meánlíon na gceall dearfach in aghaidh an réimse.
Anailís ar staining agus cíteiméadracht sreafa iaidíd própidiam (PI) nó Iarscríbhinnín V-fluorescein iseatiocianáit (FITC). Baineadh an cauda epididymis an íobairt seo a leanas agus gearradh an eipideirm le lann chun an sperm a scaoileadh ón epididymis i 2 ml PBS ag 37˚C chun fionraí epididymis a fháil. Goradh na fionraí ina dhiaidh sin ag 37˚C ar feadh 10 nóiméad chun ligean don sperm dul ag snámh amach. Caitheadh amach comhbhailiúcháin speirm agus leithlisíodh na samplaí speirm a bhí fágtha agus cuireadh ar fionraí arís iad i PBS chun tiúchan 106 cill/ml a thabhairt. Rinneadh anailís ar apoptosis sperm ag baint úsáide as trealamh Braite Apoptosis Annexin V-FITC (Nanjing KeyGen Biotech Co., Ltd., Nanjing, an tSín), de réir phrótacal an mhonaróra. Go hachomair, dathaíodh 1 ml d'fhionraí sperm le 10 µl PI nó le maolán ceangailteach 500 µl agus 5 µl Annexin V-FITC sa dorchadas ar feadh 10 nóiméad ag teocht an tseomra. Rinne cítoiméadracht sreabhadh Epics XL anailís láithreach ar chealla (Beckman Coulter, Inc.) agus úsáid á baint as Córas TetraONE™ (6915050; Beckman Coulter, Inc.). Aithníodh cealla sna céimeanna tosaigh den apoptosis le staining V-dearfach Annexin agus aithníodh cealla necrotic le staining PI-dearfach.
Anailís staitistiúil. Rinneadh anailís ar shonraí trí úsáid a bhaint as bogearraí SPSS 13.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA) agus cuireadh in iúl é mar mheán móide nó ± diall caighdeánach mar a léirítear. Rinneadh measúnú ar dhifríochtaí idir grúpaí maidir le tábhacht ag baint úsáide as anailís aontreo ar an éagsúlacht agus tástáil iar hoc Tukey ina dhiaidh sin. p<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">
Cistanche deserticola
Torthaí
Éifeachtaí WSSJD nua ar fhorbairt feadáin sheiminéaracha testicular. Chun imscrúdú a dhéanamh ar an éifeacht chosanta a d’fhéadfadh a bheith ag WSSJD nua ar fhorbairt feadáin leathmhéanacha testicular luiche, rinneadh comparáid idir mhoirfeolaíocht na dtástálacha luiche daite H&E faoi mhicreascópacht éadrom. Thaispeáin feadáin leathmhéanacha lucha ó na grúpaí CSA agus CC crapadh ar imeall an fheadáin, laghdaigh trastomhais feadáin agus laghdaigh sraitheanna de epithelium seiminéarach testicular i gcomparáid leis an rialú. Ina theannta sin, léirigh cealla spermatogenic socrú neamhord, laghdaíodh líon na gcealla spermatogenic agus ní raibh mórán sperm aibí le feiceáil sa lumen (Fíor 1). I lucha ón DMSO, WSSJD, agus grúpaí nua WSSJD, bhí sraitheanna níos mó de epithelia seminiferous testicular le feiceáil agus bhí an imeall tubule seminiferous comhtháite gan crapadh nó titim (Fig. 1). Ní raibh difríocht mhór idir scóir Johnsen idir an grúpa DMSO agus na grúpaí rialaithe, nó idir na grúpaí CC agus DMSO. Mar sin féin, tháinig laghdú suntasach ar scór Johnsen sa ghrúpa CsA agus sa ghrúpa WSSJD i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, agus méadaíodh scóir an WSSJD agus na ngrúpaí nua WSSJD go suntasach i gcomparáid leis an ngrúpa CC nó CsA (P.<0.05; table="" i).="" these="" results="" indicated="" that="" new="" wssjd="" and="" wssjd="" promoted="" the="" development="" of="" seminiferous="" epithelium="" following="" csa="">
Éifeachtaí WSSJD nua ar serum testosterone agus LH. Rinneadh na leibhéil testosterone agus LH sa serum a thomhas ina dhiaidh sin. Ní raibh aon tionchar ar leibhéil serum testosterone agus LH tar éis riarachán DMSO. I gcodarsnacht leis sin, rinneadh serum testosterone a íosrialáil go suntasach, agus rinneadh LH a rialáil go suntasach i lucha cóireáilte le CsA, i gcoibhneas le rialuithe (P<0.05; fig.="" 2),="" and="" new="" wssjd="" administration="" significantly="" restored="" testosterone="" to="" near="" control="" levels=""><0.05; fig.="" 2).="" for="" serum="" lh,="" the="" protective="" effects="" of="" wssjd="" were="" similar="" to="" that="" of="" cc;="" however,="" new="" wssjd="" decreased="" serum="" testosterone="" to="" a="" significantly="" lower="" level="" than="" that="" observed="" with="" cc="" and="" wssjd=""><0.05; fig.="" 2),="" suggesting="" a="" superior="" protective="" effect="" of="" new="" wssjd="" over="" cc="" or="">
Éifeachtaí WSSJD nua ar na slonn LHR agus P450scc. Rinneadh measúnú ar na habairtí P450scc agus LHR i gcealla Leydig testicular ag immunohistochemistry (Figs. 3 agus 4). Sa ghrúpa rialaithe, léiríodh LHR ar na seicní seachtracha de chealla Leydig idir na feadáin seminiferous (Fíor 3 A), agus cuireadh in iúl P450cc i cíteaplasma cealla Leydig testicular ( Fíor. 4 A ). Ní raibh aon tionchar suntasach ag cóireáil DMSO ar na léirithe LHR agus P450scc. I gcodarsnacht leis sin, laghdaigh cóireáil CsA go suntasach na habairtí LHR agus P450scc i gcomparáid le lucha rialaithe (P<0.05; figs.="" 3b="" and="" 4b).="" in="" turn,="" the="" expressions="" of="" lhr="" and="" p450scc="" were="" significantly="" increased="" by="" treatment="" with="" cc,="" wssjd,="" or="" new="" wssjd="" compared="" with="" the="" csa="" group=""><0.05; figs.="" 3b="" and="" 4b).="" in="" addition,="" levels="" of="" lhr="" and="" p450scc="" in="" testicular="" leydig="" cells="" were="" significantly="" higher="" in="" wssjd="" and="" new="" wssjd="" mice="" compared="" with="" cc="" mice=""><0.05; figs.="" 3b="" and="" 4b),="" and="" new="" wssjd="" induced="" a="" significantly="" greater="" upregulation="" than="" wssjd=""><0.05; figs.="" 3b="" and="">
Éifeacht WSSJD nua ar apoptosis cille spermatogenic. Rinne measúnacht TUNEL anailís ar apoptosis na gceall spermatogenic sna testes luiche. Breathnaíodh núicléis na gcealla apoptotic go príomha sa spermatogonia agus spermatocytes bunscoile (Fíor 5 A). Tá spermatogonia níos mó ná spermatocytes agus tá siad suite níos gaire don membrane íoslach (23). Ní raibh aon éifeacht shuntasach ag cóireáil DMSO ar líon na gcealla spermatogenic apoptotic sna testes. I gcodarsnacht leis sin, mhéadaigh cóireáil le CsA go suntasach líon na gceall spermatogenic apoptotic i gcomparáid leis na grúpaí rialaithe agus DMSO (P<0.05; fig.="" 5b).="" in="" turn,="" administration="" of="" cc,="" wssjd,="" or="" new="" wssjd="" significantly="" reduced="" csa-induced="" apoptosis=""><0.05; fig.="" 5b).="" furthermore,="" the="" number="" of="" apoptotic="" testicular="" spermatogenic="" cells="" in="" the="" wssjd="" and="" new="" wssjd="" groups="" was="" significantly="" reduced="" compared="" with="" the="" cc="" group=""><0.05), and="" new="" wssjd="" was="" significantly="" more="" effective="" than="" wssjd=""><0.05; fig.="">
Éifeachtaí WSSJD nua ar mharthanas agus apoptosis luath sperm. Chun éifeachtaí cosanta WSSJD nua a fhíorú i gcoinne apoptosis sperm spreagtha CsA, socraíodh maireachtáil agus apoptosis luath sperm san epididymis. Rinneadh an sperm epididymal a dhaite le PI nó Iarscríbhinn V agus rinneadh anailís orthu de réir cítoiméadracht sreafa (Fíor 6 agus 7). Tar éis na dtorthaí thuasluaite, laghdaigh cóireáil CsA go suntasach an céatadán de sperm beo agus mhéadaigh sé go suntasach an céatadán de sperm apoptotic luath (P<0.05; figs.="" 6b="" and="" 7b),="" while="" dmso="" treatment="" had="" no="" effect.="" wssjd="" and="" new="" wssjd="" significantly="" increased="" the="" percentage="" of="" live="" sperm=""><0.05; fig.="" 6b)="" and="" reduced="" the="" percentage="" of="" early="" apoptosis="" sperm=""><0.05; fig.="" 7b)="" compared="" with="" csa="" treatment.="" the="" percentages="" of="" live="" and="" early="" apoptotic="" sperm="" in="" wssjd="" and="" cc="" mice="" did="" not="" differ="" significantly,="" while="" new="" wssjd="" induced="" a="" significantly="" greater="" increase="" in="" live="" sperm="" percentage="" compared="" with="" the="" cc="" group=""><0.05; fig.="" 6b)="" and="" significantly="" decreased="" the="" percentage="" of="" early="" apoptotic="" sperm="" compared="" with="" the="" cc="" and="" wssjd="" groups=""><0.05; fig.="">
Plé
Tá sé doiciméadaithe roimhe seo go gcuireann úsáid fadtéarmach CsA mar ghníomhaire imdhíonachta isteach ar chumas atáirgthe (6). Thuairiscigh Xu (24) go raibh moirfeolaíocht agus beogacht sperm in othair a ndearnadh cóireáil orthu le CsA i bhfad níos ísle ná sin i ngrúpa neamhchóireáilte, mar a breathnaíodh i samplaí seamhan 26 faighteoir trasphlandúcháin duánach ar cuireadh cóireáil orthu le dáileoga éagsúla CsA agus 12 oibrí deonach sláintiúil. Tugadh faoi deara freisin go raibh rátaí deformity cloigeann sperm i bhfad níos airde i faighteoirí cóireáilte le CsA(24). Thug na torthaí seo le fios go raibh éifeacht dáileog-spleách ag CsA ar pharaiméadair seamhan. Dá bhrí sin, tá gá le staidéir chun oibreáin chógaseolaíochta núíosacha a shainaithint atá in ann damáiste táirsí de bharr CsA a mhaolú agus feabhas a chur ar chumas atáirgthe fireann tar éis trasphlandú orgáin.
Cothaíonn micrea-thimpeallacht shonrach na testis spermatogenesis, agus mar sin d'fhéadfadh gabháil spermatogenic a bheith mar thoradh ar lagú struchtúr agus feidhm testicular (25). Chóireáil Monteiro et al(26) le francaigh Wistar le CsA ag dáileog de 15 mg/kg in aghaidh an lae ar feadh 56 lá, agus chonaic sé cion toirtmhéadrach méadaithe d’fhíochán nascach agus laghdaigh comhréir toirtmhéadrach de chealla Leydig i bhfrancaigh a raibh cóireáil orthu le CsA. Tugadh faoi deara freisin go raibh CsA ina chúis le díghiniúint epithelium seminiferous, rud a d'eascair folúntas cille Sertoli, babhta neamhghnácha agus spermatids fadaithe, agus carnadh cíteaplasma iarmharach ag teorainn an epithelium in aice leis an lumen (26). Sa staidéar reatha, déileáladh le lucha Kunming le 15 mg / kg CsA gach lá ar feadh 30 lá, rud a d'eascair crapadh agus laghdaigh trastomhais na feadáin seminiferous, laghdú ar na sraitheanna epithelium seminiferous, socrú mí-ordúil na gcealla seminiferous, laghdú ar aibithe. sperm sa lumen agus laghdú suntasach scór Johnsen.
Ina theannta sin, rinne cóireáil le cóireáil CsA damáiste mór don struchtúr testicular. Rinne an staidéar seo measúnú freisin ar éifeachtaí cosanta WSSJD nua, mar leigheas Sínis núíosach, ar magairlí lucha CsA-chóireáilte. Tugadh faoi deara gur athchóiríodh na sraitheanna epithelial seminiferous testicular agus socrú na gceall leath-niferous tar éis cóireála le WSSJD nua. Ina theannta sin, thaispeáin lucha sa ghrúpa nua WSSJD feadáin leathmhéanacha comhtháite gan crapadh nó titim agus bhí scór Johnsen i bhfad níos airde acu i gcomparáid le lucha a raibh cóireáil orthu le CsA. Thug na torthaí seo le tuiscint go ndearna WSSJD deisiú suntasach ar dhamáiste maistir de bharr CsA, rud a thugann le fios go bhféadfadh an cumaisc leigheasra luibhe seo a bheith ina chóireáil éifeachtach chun damáiste magairlí de bharr CsA a chosc. Is ceist thábhachtach freisin an bhfuil an deisiú cille seo ag brath ar an nideoige laistigh den epithelium, ba cheart a imscrúdú i staidéir amach anseo.
Feidhmíonn an ais hypothalamic-pituitary-testicular ról tábhachtach i rialáil ghníomhaíocht giniúna (27). Tá forbairt agus feidhmiúlacht na n-orgán giniúna fireann á rialú ag hormóin ón hypothalamus agus faireoga pituitary (28). Chóireáil Krueger et al (29) le francaigh Sprague Dawley le 25 mg/kg/lá CsA nó 40 mg/kg/lá CsA ar feadh 6 lá agus thug sé faoi deara gur mhéadaigh leibhéil serum LH agus FSH faoi 2-4 huaire, agus léiriú P450scc laghdú go 30 faoin gcéad de sin sa ghrúpa rialaithe. Ina theannta sin, tháinig laghdú suntasach ar leibhéil serum testosterone i lucha cóireáilte CsA, rud a d'eascair spermatogenesis lagaithe (29). Sa staidéar reatha, léiríodh gur laghdaigh cóireáil CsA go mór léiriú LHR i gcealla Leydig. Cé gur méadaíodh serum LH, d’fhéadfadh go mbeadh lagú ar léiriú LHR laghdaithe ar aisghabháil bithsintéise testosterone trí mheán LH agus laghdaigh sé léiriú P450scc, mar einsím a theorannú ráta de biosintéis testosterone (30), rud a chuir isteach ar bhithshintéis testosterone ag cealla Leydig. Taispeánann na comhábhair núíosacha i WSSJD nua, mar shampla pilose antler, éifeachtaí cosúil le hormóin gnéis (12), a d'fhéadfadh feabhas a chur ar leibhéil serum testosterone agus leibhéil LH serum a laghdú, rud a mhéadaíonn léiriú LHR agus p450scc i gcealla Leydig. Go háirithe, léirigh na torthaí reatha gur spreag WSSJD nua biosintéis testosterone agus secretion i gcealla Leydig chun spermatogenesis a chur chun cinn.
Spreagann strus ocsaídiúcháin de bharr CSA agus damáiste magairlí an dysplasia de sperm agus cealla spermatogenic (31). Tuairiscíodh go ndéanann cóireáil CsA fadtéarmach damáiste don chóras frithocsaídeach i bhfíocháin testicular ainmhithe, rud a fhágann go laghdaítear leibhéil glutathione, glutathione peroxidase, agus sárocsaíd hidrigine agus leibhéil mhéadaithe diaildéad malonic sna testes (31). Mar sin, ní féidir deireadh a chur le leibhéil iomarcacha speiceas ocsaigin imoibríoch sna fíocháin testicular, rud a fhágann sárocsaídiú lipidí membrane sperm, damáiste DNA, agus laghdaigh beogacht sperm. Sa staidéar reatha, tugadh faoi deara gur mhéadaigh cóireáil CsA go mór an briseadh DNA agus an ráta apoptotic de chealla spermatogenic i dtiúbáin leathiniféracha. Tháinig laghdú freisin ar an ráta marthanais sperm san epididymis, agus méadaíodh an céatadán de sperm apoptotic luath, rud a léiríonn go ndearnadh damáiste suntasach do ghníomhaíocht spermatogenic na testes. Rinne Türk et al (32) doiciméadú go raibh baint ag éifeacht chosanta aigéid ellagic ar dhamáiste testicular de bharr CsA le strus ocsaídiúcháin i bhfrancaigh fireanna. Tá comhpháirteanna frithocsaídeacha éagsúla sa WSSJD nua a úsáideadh sa staidéar seo, lena n-áirítear an leigheas luibhe Ginseng, a léiríodh roimhe seo go laghdaigh sé go suntasach leibhéil hipearocsaíde sna magairlí (14).
Sa staidéar reatha, rinneadh imscrúdú ar éifeachtaí WSSJD nua ar lagú spreagtha CsA ar shintéis testosterone agus apoptosis spermatogenic, agus tugadh faoi deara gur laghdaigh WSSJD nua go suntasach rátaí apoptotic cealla spermatogenic agus sperm, agus mar sin deisíodh damáiste don testicular seminiferous. epithelium. Rinneadh imscrúdú ar mhoirfeolaíocht na feadáin sheimineáracha testicular agus apoptosis na gceall spermatogenic agus sperm ag baint úsáide as histochemistry agus cíteiméadracht sreafa. Cé nach ndearnadh imscrúdú ar dháileadh timthriall cille agus ar tháirgeadh sperm laethúil, beidh siad mar fhócas staidéir sa todhchaí ag ár ngrúpa.
Mhéadaigh WSSJD leibhéil testosterone go suntasach sna testes agus laghdaigh sé apoptosis cealla spermatogenic agus sperm, rud a rinne deisiú éifeachtach damáiste testicular CsA-spreagtha. Tugann na torthaí seo le fios go bhféadfadh an WSSJD nua a bheith ina oibreán úsáideach cógaseolaíochta i gcóireáil agus i gcosc damáiste magairlí de bharr CsA.
Cistanche deserticola fréamhacha iomlána
Tagairtí
1. Pedersen M agus Seetharam A: Ionfhabhtuithe tar éis trasphlandú ae orthotopic. J Clin Cait Hepatol 4: 347-360, 2014.
2. Vora GK agus Ciolino JB: Imoibriú allograft corneal a bhaineann le athlasadh neamhshúileach. Digit J Ophthalmol 20: 29-31, 2014.
3. De Pasquale C, Veroux M, Indelicato L, Sinagra N, Giaquinta A, Fornaro M, Veroux P, agus Pistorio ML: Gnéithe síceapaiteolaíocha de thrasphlandú duáin: Éifeachtúlacht fhoireann ildisciplíneach. Trasphlandú Domhanda J 4: 267-275, 2014.
4. El-Gowelli HM agus El-Mas MM: Modhnú lárnach ar Hipirtheannas de bharr cyclosporine. Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 388: 351-361, 2015.
5. EidMM, Abdel-Hamid IA, SobhMA agus el-SaiedMA: Measúnú ar shaintréithe tairiscint sperm i bhfaighteoirí trasphlandúcháin duánach neamhthorthúla ag baint úsáide as anailís ríomhairithe. Int J Androl 19: 338-344, 1996.
6. Zahra A, Gholamreza N, Farokhi F, agus Shalizar Jalali A: Laghdú ar lagú sperm de bharr cyclosporine-spreagtha agus tocsaineacht embryo ag sliocht uiscí torthaí crataegus monogyna. Cill J 15: 198-205, 2013.
7. He Z, Qiu J, LiJ, Zhao D, Chen G, agus Chen L: Éifeachtaí fadtéarmacha an chomhshó ó cyclosporine go rapamycin ar fheidhm testicular agus ar mhoirfeolaíocht i múnla trasphlandúcháin francaigh. Trasphlandú Proc 45: 763-769, 2013.
8. AliRB, KlouzA, Boubaker S, LakhalM agus BelkahiaC: Samhail ainmhíoch de thocsaineacht testicular ag cyclosporine: Meastóireacht agus cosaint. Fundam Clin Pharmacol 23: 241-246, 2009.
9. Seethalakshmi L, Flores C, Malhotra RK, Pallas JD, Tharakan D, Khauli RB agus Menon M: Meicníocht ghníomhaíocht cyclosporine maidir le cosc a chur ar bithsintéis testosterone ag cealla francach Leydig in vitro. Trasphlandú 53: 190-195, 1992.
10. SeethalakshmiL, FloresC, CarboniAA agus Menon M: Cothabháil cainníochtúil spermatogenesis i bhfrancaigh atá cóireáilte le cyclosporine trí riaradh exogenous de propionate testosterone. J Androl 11: 491-497, 1990.
11. Pan XY, Wang XY, Wang XN, Sun ZX, Wang D, Wang X, Yang YY agus Li ZX: Éifeachtaí 'Wenshen Shengjing Decoction' ar apoptosis cille spermatogenic de bharr cyclophosphamide agus histone H3K9 dimethylation. Shanghai Zhong Yi Yao Za Zhi 48: 82-86, 2014 (I Sínis).
12. Xu ZH, Li SF, Wang JY, Zhou R agus Tian SJ: Baint hormone gnéas ó veilbhit beanna le CO2 supercritical. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi 32: 2000-2003, 2007 (I Sínis).
13. Zhao LP, Xu Z, Zhang M, Sun HC agus Tang F: Éifeachtaí Fructus Lycii agus Radix astragali ar fheidhm cealla Sertoli i magairlí francacha. Zhonghua Nan Ke Xue 13: 82-86, 2007 (I Sínis).
14. Xu L, Liu XH, agus Zhang L: Éifeachtaí ginsenosides iomlán ar an NÍL, NOS agus toilleadh iomlán antai-ocsaigin i testis an luch. Acta Academiae Medicinae CPAPF 5: 507-508, 2006 (I Sínis).
15. Patel DP, Brant WO, Myers JB, Presson AP, Johnstone EB, Dorais JA, Aston KI, Carrell DT agus Hotaling JM: Sábháilteacht agus éifeachtúlacht clomiphene chiotráite i bhfear hipirandrogenic agus subfertile. Int J Impot Res 27: 221-224, 2015.
16. ElSheikh MG, Hosny MB, Elshenoufy A, Elghamrawi H, Fayad A agus Abdelrahman S: Teaglaim de vitimín E agus citrate clomiphene i gcóireáil othair le oligo idiopathic mar an azoospermia: Triail randamach ionchasach. Andrology 3: 864-867, 2015.
17. Wang R, Xu L, Zhang WX, Wu YF, Shi JH agus Zhang YX: Shengjing Granule: Leigheas Síneach Éifeachtach le haghaidh Suaitheadh Spermatogenic i Lucha. Zhonghua Nan Ke Xue 14: 1046-1049, 2008 (I Sínis).
18. Fan BT: Cógaisíocht Leigheas na Síne, Shanghai Science and Technology Press 12: 62-68, 1997 (I Sínis).
19. Zhang J, Li H, Lu L, Yan L, Yang X, Shi Z agus LiD: Maolaíonn Foirmle Yiqi agus Yangyin díobháil don chóras hematopoietic de bharr ionradaíochta coirp iomlán. J Radiat Res 58: 1-7, 2017.
20. Minami M, Konishi T, Jiang Z, Arai T agus Makino T: Éifeacht Shin'iseihaito ar imoibriú ailléirgeach murine de bharr íogrú sróine. J Tradit Comhlánú Med 6: 252-256, 2015.
21. Rong R, Li RR, Hou YB, Li J, Ding JX, Zhang CB, agus Yang Y: Laghdaíonn decoction Mahuang-xixin-fuzi ionfhabhtú víreas fliú i lucha siondróm easnamh duáin-yang. J Ethnopharmacol 192: 217-224, 2016.
22. Johnsen SG: Comhaireamh scór bithóipse testicular-modh chun spermatogenesis a chlárú i testes daonna: gnáthluachanna agus torthaí i 335 fireannaigh hypogonadal. Hormóin 1: 2-25, 1970.
23. Mays-Hoopes LL, Bolen J, Riggs AD, agus Amhránaí-Sam J: Spermatogonia, speirmatocytes, agus speirmitídí cruinne a ullmhú chun anailís a dhéanamh ar léiriú géine ag baint úsáide as sórtáil cille fluaraiseachta-gníomhachtaithe. Biol Atáirgeadh 53: 1003-1011, 1995.
24. Xu LG: Tionchar cyclosporin A ar pharaiméadair seamhan na n-othar tar éis trasphlandú duánach. J Clin Urol 20: 603-605, 2005.
25. Pintus E, Ros-Santaella JL, agus Garde JJ: Taobh amuigh de mhéid na testis: Naisc idir spermatogenesis agus tréithe sperm i mamach póraithe séasúrach. PLoS a hAon 10: e0139240, 2015.
26. Monteiro JC, Predes FS, Matta SL, agus Dolder H: Laghdaíonn insileadh aphrodisiaca heteropterys éifeachtaí comhthaobhachta cyclosporine A ar an testis. Anat Rec (Hoboken) 291: 809-817, 2008.
27. Oseko F, Nóta S, Morikawa K, Endo J, Taniguchi A, agus Imura H: Tionchar hyperprolactinemia ainsealach a tharlódh de bharr sulfairde ar an ais hypothalamo-pituitary-testicular i bhfear gnáth. Fertil Steiril 44: 106-111, 1985.
28. Wisniewski P, Romano RM, Kizys MM, Oliveira KC, Kasamatsu T, Giannocco G, Chiamolera MI, Dias-da-Silva MR, agus Romano MA: Laghdaíonn nochtadh do dhaoine fásta ar bisphenol A (BPA) i bhfrancaigh Wistar cáilíocht sperm le cur isteach. den ais hypothalamic-pituitary-testicular. Tocsaineolaíocht 329: 1-9, 2015.
29. Krueger BA, Trakshel GM, Sluss PM, agus Maines MD: Dúlagar cyclosporin-idirghabhála de ghabhdóirí hormóin luteinizing agus bithsintéis heme i testes francach: Meicníocht féideartha chun an laghdú ar serum testosterone. Inchríneolaíocht 129: 2647-2654, 1991.
30. Nolan CJ agus Payne AH: Cinneann géinitíopa ag an lócas P450scc difríochtaí i méid próitéine P450scc agus táirgeadh testosterone uasta i gcealla luch Leydig. Mol Endocrinol 4: 1459-1464, 1990.
31. Türk G, Ateşşahin A, Sönmez M, Yüce A, agus Ceribaşi AO: Cosnaíonn lycopene in aghaidh tocsaineachta táirgigh cyclosporine A-spreagtha i bhfrancaigh. Theriogenology 67: 778-785, 2007. 32. Türk G, Sönmez M, Ceribaşi AO, Yüce A, agus Ateşşahin A: Laghdú damáistí testicular cyclosporine A-spreagtha agus spermatozoal a bhaineann le strus ocsaídiúcháin ag aigéad ellagic. Int Immunopharmacol 10: 177-182, 2010.
