Cuid 1: Méadaíonn Echinacoside Cainníocht Sperm i bhFrancaigh Trí Dhíriú ar an nGlacadóir Androgen Hypothalamic

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Zhihui Jiang1,2, Bo Zhou2, Xinping Li2, Gordon M. Kirby3 & Xiaoying Zhang1,2

Pls cliceáil anseo chun Cuid 2

Saincheist mhór sláinte is ea neamhthorthúlacht fireann le leitheadúlacht mheasta de 4.2 faoin gcéad de neamhthorthúlacht fireann ar fud an domhain. Léirigh ár luathobair é sinSleachta Cistanchechosaint i gcoinne damáiste sperm i lucha agus goechinacoside(ECH) ar cheann de na príomh-chomhpháirteanna gníomhacha. Anseo tuairiscímid ról riachtanach do ECH, táirge nádúrtha a aisiompaíonn nó a chosnaíonn i gcoinne oligoasthenospermia i bhfrancaigh. Rinne HPLC measúnú ar ECH, rinneadh meastóireacht ar chainníocht agus ar cháilíocht na speirme agus socraíodh leibhéil hormóin trí mheasúnacht radai-imdhíon-imdhíonachta. Laghdaigh ECH leibhéil receptor androgen (AR) agus príomhghéinte a bhaineann le stéaróideach mar a chinntear ag anailís blot an Iarthair agus qPCR. Rinneadh meastóireacht ar an idirghníomhú idir ECH agus AR trí ELISA indíreach agus dugáil mhóilíneach. Léiríonn na torthaí go bhfuil ECH in éineacht le AR hypothalamic i phóca Met-894 agus Val{-713 chun cosc ​​a chur ar aistriú AR ón gcíteaplasma go núicléis san hypothalamus. Cé go raibh cosc ​​​​ar aiseolas diúltach ar rialáil hormóin gnéis, spreag aiseolas dearfach chun an secretion hormone luteinizing agus testosterone a mhéadú ina dhiaidh sin feabhas a chur ar chainníocht sperm. Nuair a chuirtear le chéile iad, léiríonn na sonraí seo go gcuireann ECH bac ar ghníomhaíocht AR sa hypothalamus chun cainníocht sperm a mhéadú agus cosaint a dhéanamh i gcoinne oligoasthenospermia i bhfrancaigh.

Cistanche

Tá táirgeadh testosterone i gcealla testicular rialaithe go láidir ag an ais hypothalamic-pituitary-gonadal (HPG) trí lúb aiseolais homeostatach1 a fhoirmiú. Is féidir le hormón a scaoileann gonadotrophin (GnRH), arna scaoileadh ag an hypothalamus, secretion hormone luteinizing (LH) a spreagadh ón gland pituitary, rud a spreagann táirgeadh testosterone i gcealla testicular Leydig. Déantar testosterone a bhithshintéisiú ag sraith einsímí stéaróideach. Mar cheann de na príomhbhealaí, is féidir le próitéin ghéarrialaithe stéaróideach stéaróideach (StAR) colaistéaról a iompar ó fhoinsí infhéitheacha isteach sna mitochondria2 áit a bhfuil sé nochta d’einsím scoilteachta taobhshlabhra colaistéaról (CYP11A1), 3 -hydroxysteroid dehydrogenase (HSD3 ), 3 -hydroxysteroid dehydrogenase (HSD3 ), { {10}}hidrocsaile (CYP17A1), agus 17 -hiodrocsaitéaróideach dí-hidrigine (HSD 17 ) a chatalaíonn tiontú colaistéaról go testosterone3,4. Cothaíonn testosterone ansin go diúltach ar ais chuig an eilimint HPG chun tuilleadh secretion LH a íos-rialáil ar bhealach dáileog-spleách.

Tarlaíonn éifeacht testosterone ar lúb aiseolais ais HPG trí cheangal leis an receptor androgen (AR), a fhaightear sa hypothalamus agus sa fhaireog pituitary5 araon. Sna lucha, cuireann ablation an AR agus táirgeadh íosta testosterone go dtiocfaidh méadú ar leibhéil LH agus hormón spreagtha follicle (FSH)6, rud a thugann le tuiscint go bhfuil AR rannpháirteach i rialáil an lúb beathaithe diúltach. Tarlaíonn an mheicníocht ghéanómach clasaiceach de chomharthaíocht testosterone nuair a idirleata testosterone isteach sa chill agus nascann leis an AR. Ansin aistríonn an coimpléasc gabhdóra ligand seo chuig an núicléas áit a nascann sé le heilimintí freagartha androgen (AREanna) i réigiúin rialála na ngéinte a fhreagraíonn do testosterone chun a dtraslonnú a mhodhnú. Spreagann testosterone freisin an chonair neamhchlasaiceach de ghníomhaíocht hormóin stéaróideach, arb iad is sainairíonna é teagmhais thapa as a dtagann gníomhachtú cascáidí comharthaíochta citosólacha a spreagtar de ghnáth ag fachtóirí fáis7,8. Cuireann bealaí clasaiceacha agus neamhchlasaiceacha testosterone araon le spermatogenesis agus torthúlacht a chothabháil. Mar sin féin, tá feidhm an AR níos tábhachtaí sa chosán clasaiceach mar go ngníomhaíonn testosterone chun cáilíocht sperm a mhéadú.

Echinacoside(ECH) ar cheann de na comhpháirteanna bithghníomhacha a dhíorthaítear ó speicis phlandaí íocshláinte Echinacea9 agusCistanche10. Le speictream leathan gníomhaíochtaí cógaseolaíochta, tá sleachta Echinacea 1 Ionad Taighde na Biteicneolaíochta Nua-Aimseartha, Scoil na Biteicneolaíochta agus Innealtóireachta Bia, Anyang Institiúid Teicneolaíochta, Anyang, Henan, 455000, an tSín. 2College of Tréidliachta, Iarthuaisceart A & F Ollscoil, Yangling, Shaanxi, 712100, an tSín. 3An Roinn Eolaíochtaí Bithleighis, Coláiste Tréidliachta Ontario, Ollscoil Guelph, Guelph, Ontario, N1G 2W1, Ceanada. Ba cheart comhfhreagras agus iarratais ar ábhair a sheoladh chuig XZ

ar cheann de na forlíonta luibhe is coitianta san Eoraip agus sna Stáit Aontaithe go príomha mar gheall ar a n-airíonna frithocsaídeacha11 agus a gcumas an fuar coitianta a chosc12. Suimiúil,Sleachta Cistanche agus tá ECH in úsáid go traidisiúnta mar oibreán tonach chun mífheidhm atáirgthe a leigheas agus chun gníomhaíocht ghnéasach fireann a threisiú i míochaine thraidisiúnta na Síne10. Roinnt táirgí thar an gcuntar deCistanche Forbraíodh eastóscadh mar fhorlíonta cothaitheacha agus tá an-tóir orthu i margaí bia sláinte na Síne agus i roinnt tíortha eile san Áise (Riarachán Bia agus Drugaí na Síne)13. Mar sin féin, tá meicníochtaí bunúsacha ghníomhaíocht ECH doiléir fós.

Saincheist mhór sláinte is ea neamhthorthúlacht fireann le leitheadúlacht mheasta de 4.2 faoin gcéad de neamhthorthúlacht fireann ar fud an domhain14. Tá diagnóis neamhthorthúlachta fireann bunaithe faoi láthair ar staidéar ar cháilíocht speirme lena n-áirítear anailís ar pharaiméadair bhunúsacha amhail tiúchan speirm, motility, agus moirfeolaíocht15. Is ábhar salaithe comhshaoil ​​forleathan é an Bisphenol A (BPA) atá aithris ar estrogen, a bhfuil staidéar déanta air maidir lena thionchar ar thorthúlacht fireann i roinnt speiceas ainmhithe agus daoine16. Cuireann BPA isteach ar an ais hypothalamic-pituitary-gonadal, cuireann sé bac ar léirithe na n-einsímí stéaróideacha testicular agus sintéis testosterone sna laonna fireanna17, rud a fhágann go bhfuil staid hipogonadotrópach hipogonadotrópach18 ann. Sa staidéar seo, déanaimid imscrúdú ar éifeachtaí ECH ar cháilíocht sperm agus leibhéil hormóin. Ina theannta sin, roghnaíodh BPA mar ghníomhaire múnla díobhála sperm chun staidéar breise a dhéanamh ar éifeacht chosanta ECH i gcoinne droch-chaighdeán sperm.

Sleachta Cistanche

Torthaí

Feabhsaíonn ECH an chainníocht sperm. Tá na huimhreacha sperm i cauda epididymis, inmharthanacht sperm, agus motility sperm curtha i láthair i dTábla 1. Mhéadaigh cóireáil le 80 mg/kg de ECH agus 15 mg/kg de propionate testosterone (TP) go suntasach na háirimh sperm epididymal. Mar sin féin, ní raibh aon difríocht shuntasach ann maidir le hinmharthanacht sperm agus motility sperm.

Méadaíonn ECH leibhéil testosterone agus LH i serum, einceifileón móide pituitary, agus maistir. Mhéadaigh cóireáil ECH go háirithe leibhéil LH sa serum, einceifileón móide pituitary agus magairlí (Fíor 1A). Sa ghrúpa ECH(H), tháinig méadú suntasach ar leibhéil LH faoi 1.1-huaire i séiream, 1.4-huaire in einceifileón móide pituitary, agus 1.2-huaire i maistir. Méadaíodh testosterone go suntasach faoi 1.5 agus 1.3-huaire in einceifileón móide pituitary agus magairlí, faoi seach, ach ní i séiream tar éis cóireála ECH(H). Tar éis cóireáil TP, méadaíodh na leibhéil tástosterón go suntasach faoi 1.6, 1.8 agus 1.4-huaire i séiream, einceifileón móide pituitary agus maistín.

Mhéadaigh ECH léiriú géine einsím stéaróideach. Mhéadaigh ECH go suntasach na habairtí na n-einsímí stéaróideacha tábhachtacha sa testis (Fíor 1 B). Méadaíodh na leibhéil mRNA de CYP11A1, CYP17A1, HSD3 1/2 agus HSD17 sa ghrúpa ECH(H) níos mó ná 3-huaire, agus níor léirigh leibhéil Star mRNA aon difríochtaí suntasacha le gach cóireáil ECH (p > 0.05). Níor athraigh TP go mór slonn CYP11A1, CYP17A1, HSD3 1/2 agus HSD17 . Léirítear é seo in anailís chuimsitheach ar léarscáil teasa ar éifeacht ECH ar léiriú einsím stéaróideach a thugann le fios gur mhéadaigh ECH go suntasach leibhéil mRNA CYP11A1, CYP17A1, HSD3 1/2, agus HSD17 , agus go háirithe HSD3 1/ 2 (Fíor 1C).

Is féidir le ECH an bac fola-inchinn a thrasnú agus go pointe níos lú an bacainn fola-tástálacha. Chun lúb aiseolais androgen a mheas ag an ais HPG, rinneadh measúnú ar chumas ECH dul isteach sa hypothalamus i sraith staidéir PK. Braitheadh ​​comhchruinnithe ECH sa hypothalamus tar éis 12 h riarachán ó bhéal amháin de 3 0 mg / kg de ECH, agus léirigh ECH treá hypothalamus marcáilte leis an gcóimheas meán hypothalamus / plasma de 33.92 faoin gcéad ( Fíor. 2 A). Ba iad na luachanna T1/2 ná 2.61 ± 0.42 h agus 1.88 ± 0.22 h i bplasma agus an hypothalamus, faoi seach (Fíor 2 B). Mar sin féin, braitheadh ​​rochtain an-teoranta ar ECH isteach sna maistí ag baint úsáide as HPLC. Ba iad na tiúchana ECH i testis ná 0.083 ug/mL, 0.043 ug/mL agus 0.028 ug/mL ag 0.5 h, 1 h agus 1.5 h faoi seach, i ndiaidh cóireáil.

Laghdaíonn ECH traslonnú AR hypothalamic go dtí an núicléas. Chun éifeacht ECH ar thraslonnú AR a thástáil, rinneadh léiriú AR sa chíteaplasma agus i núicléas na testis agus an hypothalamus ag baint úsáide as anailís blot an iarthair. Mar a thaispeántar i bhFíor 3A, próitéin AR síos-rialaithe ECH i núicléis hypothalamic trí huaire i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe. Laghdaigh cóireáil le enzalutamide, coscaire AR, leibhéil phróitéin AR i núicléis hipitealaíoch faoi 4.8-huaire. Go háirithe, bhí AR cytoplasmic níos airde le cóireáil ECH agus cóireáil enzalutamide ná rialuithe, rud a thugann le tuiscint go gcuireann ECH bac ar iompar AR ón gcíteaplasma go dtí an núicléas sa hypothalamus. Mar a bheifí ag súil leis, ní chuireann ECH bac ar iompar AR ón gcíteaplasma go dtí an núicléas sa testis (Fíor 3 B).

Mhéadaigh ECH na habairtí de ghéinte a bhaineann le hais HPG. Mhéadaigh ECH go suntasach na habairtí LH , LHR, GnRH 1, agus Gnrhr sna linnte meascáin de einceifileón móide pituitary, áfach, ní raibh aon difríocht shuntasach i leibhéil GnRH 1 tar éis cóireála TP. Léiríonn an anailís ar an léarscáil teasa go raibh na slonn GnRH 1 agus LH is airde i measc na ngéinte HPG-ais.

Fíor 1. Éifeacht ECH ar leibhéil LH, testosterone agus einsímí stéaróideacha móra. Nóta: (A) leibhéil LH i serum, einceifileón móide pituitary agus magairlí (mIU/mL, meán ± SD);

leibhéil T i séiream, einceifileón móide pituitary agus magairlí (ng/mL, meán ± SD); (B) léiriú einsímí stéaróideacha móra;

(C) cnuasú ordlathach de léiriú mRNA na n-einsímí stéaróideacha éagsúla i testis. Léiríonn dathanna glasa, glas-dearg agus dearg íseal-,

meán- agus ard- flúirse, faoi seach, n=7. a,b,c Léiríonn litreacha difriúla grúpaí a bhfuil difríochtaí staitistiúla acu (p <>

Fíor 2. Dáileadh agus paraiméadair chógaschinéiteach ECH sa hypothalamus. Nótaí: (A) ríomhadh cóimheasa hypothalamus/plasma ( faoin gcéad ) bunaithe ar nochtadh plasma agus hypothalamus de ECH (tiúchan) ag 0.5 h, 1.0 h, 1.5 h, 2.{ {8}} h, 2.5 h, 3.0 h, 6.0 h, 9.0 h agus 12.0 h tar éis riarachán béil. (B) Paraiméadair chógaschinéiteach (PK) ECH i bplasma agus hipitealamus. T1/2, leathré; Cmax, tiúchan buaic; Vz/F, toirt dealraitheach an dáilte; MRT, meán-am coinneála; AUC, limistéar faoin gcuar ama comhchruinnithe.

Is sprioc de chuid ECH é AR. Chun na caidrimh idir ECH agus AR a dhearbhú, rinneadh ECH-Ovalbumin (ECH-OVA) a shintéisiú go rathúil (Fíor 5A,B). Tá meáchan móilíneach ECH-OVA níos mó ná OVA, agus mar sin tá rátaí éagsúla soghluaisteachta acu (Fíor 5A), agus tá buaic ionsúcháin ECH-OVA idir ECH agus OVA (Fig. 5B),

Sleachta Cistanche

Fíor 3. Éifeacht ECH ar iompar AR i magairlí agus hypothalamus. Nótaí: (A) Éifeacht ECH ar iompar AR sa hypothalamus. Socraíodh leibhéil phróitéin AR le hanailís blot an iarthair agus is ionann barraí agus cainníochtú densitometric ar AR núicléach normalaithe go Lamin B agus AR cíteaplasmach normalaithe go GAPDH. Seasann gach luach don mheán ± SD de shé thurgnamh neamhspleácha. a, b,c Léiríonn litreacha difriúla os cionn na mbarraí grúpaí difriúla staitistiúla (p < 0.05);="">B) Éifeacht ECH ar iompar AR sna magairlí.

ag moladh gur éirigh le ECH a chomhchuingeach le OVA. Léiríonn torthaí indíreacha ELISA (Fíor 5C), go bhfuil antashubstaint frith-AR in ann próitéin AR a bhrath atá i láthair i toibreacha ina bhfuil ECH-OVA (arna léiriú ag antasubstaint frith-OVA) le tuiscint gur féidir le ECH ceangal le próitéin AR.

Nasctar ECH le AR pocket Met-894 agus Val-713. Cuireadh Compound ECH go dtí an suíomh AF2 ar dhromchla an AR daonna, agus taispeánadh modh ceangailteach teoiriciúil ECH agus AR i bhFíor 5D. Ghlac Compound ECH comhréir dlúth ceangailteach ag póca an AR daonna. Nascann an dá ghrúpa feinile de ECH ag fearann ​​hidreafóbach an phóca AR agus choinnigh siad dlúth-theagmhálacha hidreafóbacha leis na hiarmhair Leu-712, Val-716, Met-734, Ile-737 , Met-894, agus Ile-898, ach bhí an dá thaobh eile den ECH suite ag bealach isteach an phóca agus gan ach cúpla teagmháil déanta acu. Léirigh anailís mhionsonraithe gur chruthaigh Met-894 (fad bannaí: 2.4 Å) agus Val-713 (fad bannaí: 2.7 Å) naisc hidrigine le grúpaí hiodrocsa1 an ECH, arbh é an príomh-idirghníomhaíocht idir ECH é. agus AR daonna.

Maolaíonn ECH damáiste atáirgthe de bharr BPA. Chun imscrúdú a dhéanamh ar éifeacht ECH ar dhamáiste atáirgthe, scrúdaíodh cáilíocht sperm agus leibhéil hormóin ghnéis agus einsímí stéaróideacha i lucha a tharchuirtear le BPA. Mar a léirítear i bhFíor 6, laghdaigh cóireáil BPA go suntasach an líon sperm agus motility sperm de 26.5 faoin gcéad agus 39.2 faoin gcéad, faoi seach. Chuir riarachán ECH cosc ​​ar an laghdú 35.5 faoin gcéad agus 30.1 faoin gcéad ar líon na sperm agus ar motility sperm faoi seach. Mar thoradh ar riarachán BPA tháinig laghdú suntasach ar secretion LH agus T, agus mhéadaigh ECH go mór na leibhéil LH agus T faoi 24.1 faoin gcéad agus 18.3 faoin gcéad, faoi seach i gcomparáid le cóireáil BPA amháin ( Fíor. 6 A, B). Méadaíodh na leibhéil mRNA de Star, CYP17A1, 3 -HSD, agus 17 -HSD i gcóireáil BPA-ECH go suntasach i gcomparáid le cóireáil BPA (Fíor 6C, D).

Fíor 4. Athruithe ar léiriú géine a bhaineann le HPA tar éis cóireála ECH. Nótaí: Seasann barraí (A–D) do na leibhéil mRNA de LH , LHr, Gnrh 1 agus Gnrhr in einceifileón móide pituitary. a,b,c Léiríonn litreacha difriúla os cionn na mbarraí grúpaí a bhfuil difríochtaí staitistiúla acu (p < 0.05).="" (e)="" cnuasú="" ordlathach="" de="" léiriú="" mrna="" ar="" einsímí="" stéaróideacha="" éagsúla.="" léiríonn="" dathanna="" glasa,="" glas-dearg="" agus="" dearg="" flúirse="" íseal,="" meánach="" agus="" ard,="" faoi="" seach,="" n="7." rialú="" (cóireáilte="" le="" gnáth-seile="" 10="" ml/kg),="" ech(l)="" (cóireáilte="" le="" ech="" 5="" mg/kg),="" grúpa="" ech(m)="" (cóireáilte="" le="" ech="" 20="" mg/kg),="" ech(h)="" (cóireáilte="" le="" ech="" 80="" mg/kg),="" tp="" (cóireáilte="" le="" tp="" 15="">