Éifeacht Glutamine Infhéitheach ar Shloinn Caspase in Apoptosis na gCealla Epithelial Glomerular de Fhrancaigh Fireann Nochtadh do Cisplatin

Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Tamara Aulia Fakhrinnisal, Imam Susilo, Arifa Mustika, Miyayu Soneta Sofyan

Réamhrá

Léiríonn leitheadúlacht galair meitibileach san Indinéis, go háirithe galar duáin, treocht ard. Bunaithe ar shonraí 2017 ón nGníomhaireacht um Riaradh Árachais Sláinte (BPJS), chlúdaigh an stát na 3,657,691 cás taifeadta de nósanna imeachta scagdhealaithe galar duáin ainsealach le costas iomlán do chlúdach an IDR 3.1 trilliún. Is é ceann de na etiologies i teip duánacha an damáiste buan do na nephrons ag tocsainí.

Is druga ceimiteiripe cumhachtach é Cisplatin a úsáidtear go forleathan le haghaidh teiripe leathan-speictrim le haghaidh urchóideacha, lena n-áirítear ailse ceann agus muineál, esophageal, lamhnán, testicular, ubhagán, chíche, agus scamhóg neamh-bheag (Fillipski et al., 2008; Reck , et al., 2010). Mar sin féin, tá teorainn le cur i bhfeidhm cliniciúil cisplatin mar gheall ar na héifeachtaí ar thocsaineacht orgán ard, amhail éifeachtaí nephrotocsaineacha, néarthocsaineacha, ototocsaineacha agus hepatotocsaineacha (Karasawa, agus Steyger, 2015; Guo et al., 2018). Is cúis le cisplatin apoptosis ag dáileoga níos ísle (10-100uM) agus bás cille necrotic ag dáileoga níos airde （200-800 μM） (Hanigan agus Devarajan, 2003) Níos mó ná 70 faoin gcéad de na hothair péidiatraiceacha a fuair taithí cisplatin mífheidhm duáin ( Skinner et al.1998). Ina theannta sin, tarlaíonn gortú duáin ghéarmhíochaine i 20-30 faoin gcéad de na hothair a riartar (Miller et al., 2010). Tosaíonn an mhífheidhm duánach de ghnáth cúpla lá tar éis dáileog chaighdeánach cisplatin (50-120 mg/m²) riaracháin agus cuirtear in iúl é trí leibhéil mhéadaithe creatinine serum agus nítrigine úiré fola (Akcay et al.2010), a spreagann cóireáil Cisplatin. dilation feadánacha ollmhór agus foirmiú teilgthe i roinnt lumens feadáin. Breathnaítear ó am go chéile freisin ar neacróis feadánacha fócasach, ramhrú bonnscní na feadáin duánach agus capsúl Bowman, agus insíothlú cille mononuclear fócasach freisin. Tarlaíonn damáiste tubular duánach freisin, mar aon le folúntas agus díghlúthú cealla epithelial. Is minic a léiríonn roinnt necróis taithí glomeruli agus glomeruli iarmharach gnáth spásanna periglomerular méadaithe.

acteoside i cistanche éifeachtaí maith ar na duáin

Is é ceann de mheicníochtaí nephrotoxicacha cisplatin ná apoptosis, arb é bealach bás cille cláraithe é a ghníomhaíonn cisplatin trí mheicníochtaí áirithe. Laghdaíonn cisplatin slonn Bcl-2 sa chosán mitochondrial, rud a chuireann bac, de réir dealraimh, ar fhorbairt na móilíní pro-apoptotic (Oltvai agus Korsmeyer, 1994). Sna conairí gabhdóirí báis, gníomhaíonn cisplatin cosáin Fas-spleách agus apoptosis, in vivo (Noga et al.,1998) nó in vitro (Feldenberg et al.,1999). Gníomhaíonn Cisplatin cosáin caspase freisin. Faightear ról caspase-3 den chéad uair sna cealla tubular proximala saothraithe, a fhreagraíonn do cisplatin trí ghníomhaíocht caspase-3 a mhéadú ar bhealach a bhraitheann ar dháileog (Fukuoka et al,1998; Lau, 1999) . Nochtann staidéir tar éis gníomhachtú caspase agus, go pointe níos lú, gníomhachtú caspase (Kaushal et al.2001: Park et al., 2001).

infhéitheachGlútaimínIs -aimínaigéad é (Gln nó Q) a úsáidtear i mbithshintéis próitéine. Tá sé ar cheann de na comhábhair a tháirgeadh glutathione, a bhfuil antioxidant potent. Dáileog amháin deglutamine infhéitheach(0.15-0.75 g/kg)an slonn HSP a mhéadú, gortú orgán deiridh a laghdú, agus an ráta marthanais ó turraing sheipteach i lucha a fheabhsú (Wischmeyer, 2002).infhéitheachGlútaimínméadú freisin ar imoibríocht soithíoch trí léiriú HSP a spreagadh agus cosc ​​a chur ar scaoileadh cítocíní athlastacha agus bithshintéis sárocsaíd i lucha turrainge LPS (Jiang et al...2017).infhéitheachGlútaimínIs féidir leis apoptosis a laghdú freisin trí chosc a chur ar an strus ocsaídiúcháin, mar a breathnaíodh i dtorthaí na dtrialacha ag baint úsáide as lucha le colitis a tharlódh le haigéad sulfónach a2,4,6-trinitrobenzene sulfonic (Crespoet al.2012).

Níl staidéar déanta ar na leibhéil caspase-12 san epithelium glomerular, cé go bhfuil an t-am a nochtar an tocsain a fhaightear don glomerulus ard agus go nochtar na cealla epithelial ar dtús agus ansin na feadáin. Tá sé léirithe ag staidéar go bhfuil ról ag capsúil Bowman i bhfeidhm fiseolaíoch an ghnáth-glomerulus. Spreagann an díobháil podocyte gníomhachtú cealla parietal capsule Bowman, a shíneann isteach sa bhíoma glomerular, a eascraíonn i scléaróis deighleogach agus domhanda trí níos mó maitrísí a tháirgeadh agus a scriosann lumen an glomerulus ribeach (Al Hussain et al., 2017).

Tá sé mar aidhm ag an staidéar seo anailís a dhéanamh ar éifeacht nephroprotective deglutamine infhéitheachar apoptosis na gcealla epithelial glomerular trí scrúdú a dhéanamh ar léiriú caspase-12, arb é a thionscnóir apoptosis sa chonair struis reticulum endoplasmic. Faightear pro-caspase-12 sa reticulum endoplasmic, go háirithe i tubules cóngaracha na duán. Tá anglutamine infhéitheachtáthar ag súil gur réiteach eile a bheidh ann maidir le teip duánacha de bharr módúlachtaí ceimiteiripe cisplatin.

Ábhair agus Modhanna Ainmhithe agus Cóireáil

Cheadaigh Coiste Eitice Taighde Sláinte Scoil an Leighis Universitas Airlangga an taighde seo (Uimh.25/C/KEPKFKUA/2020). Sa taighde seo, fuarthas 30 francach bán fireann (Rattus norvegicus), d'aois 2-3 mí d'aois le meáchan coirp de 150-200 gram ó aonad ainmhithe turgnamhacha Dhámh an Leighis Tréidliachta, Universitas Airlangga. Tionóladh gach ceann acu ar leithligh i mbosca anaplastic, líneáilte le cromáin sa bhun, agus ansin clúdaithe le sreanga fite ar a bharr. Athsholáthraíodh na cromáin gach lá.

Ceimiceáin

Tá aninfhéitheachGlútaimínfuarthas ó Serva (an Ghearmáin). Tá aninfhéitheachGlútaimínullmhaíodh réiteach i {{0}}.9 faoin gcéad NaCl, le dáileog de lg glutamine i 10 ml de 0.9 faoin gcéad NaCl. Déantar an dáileog glutamine a instealladh 100mg/kg de mheáchan coirp (BW) agus déantar instealladh amháin uasmhéid de 0.2 mL IV. Tá aninfhéitheachGlútaimíninstealladh infhéitheach isteach in eireaball an fhrancaigh ag baint úsáide as an1 mL 27-steallaire tomhsaire.

Fuarthas an t-ábhar cisplatin ó Kalbe Farma (Indinéis), le dáileog de 20 mg/kg BW, arna riaradh trí instealladh intraperitoneal ag baint úsáide as steallaire tomhsaireachta I mL 27-. Chomh maith leis sin, d'úsáideamar Príomh-Antasubstaintí Cassása-12 (PA Antashubstaintí Polachlónacha5-27094 Thermo Scientific) agus Apoptosis Braite Kit in Situ CellPOD(11684817910ROCHE).

Dearadh Turgnamhach

Sa taighde seo, roinneadh 30 francach bán fireann Wistar go randamach i dtrí ghrúpa ag tús an staidéir. Rinneadh an grúpa rialaithe (PO) a íobairt trí dhíláithriú ceirbheacsach tar éis ainéistéise le éitear agus ansin tógadh na duáin le haghaidh ullmhú immunohistochemistry.

Ar an lá 7, tugadh cisplatin don ghrúpa P1 ag dáileog amháin de 20 mg/kg BW trí instealladh intraperitoneal agus ansin breathnaíodh ar feadh 72 h. Rinneadh na francaigh a íobairt ar an 10ú lá ag dislocation ceirbheacs tar éis ainéistéise le éitear, agus ansin tógadh na duáin le haghaidh ullmhú immunohistochemistry. Tá an t-am a fhorghníomhú mar gheall ar na cealla epithelial glomerular apoptosis tar éis instealladh cisplatin ar an lá 10 (Tsuruya et al...2003). Riaradh an grúpa P2 leinfhéitheachGlútaimínag dáileog de 100 mg/kg BW uair sa lá trí instealladh infhéitheach ó lá 1 go lá 7 (Zhang et al.2009). Ar lá 7, tugadh cisplatin do na francaigh ag dáileog amháin de 20 mg/kg instealladh infhéitheach BWvia. Ina dhiaidh sin, breathnaíodh na francaigh ar feadh 72 h agus ansin íobairt ar an 10ú lá trí dislocation ceirbheacs tar éis ainéistéise le éitear. Níos déanaí, tógadh na duáin freisin don ullmhúchán imdhíonhistochemistry.

Ullmhúchán Histeapaiteolaíochta

Socraíodh an fíochán duáin i bhformailin 10 faoin gcéad ar feadh15-24 h. Rinneadh an díhiodráitiú ar feadh 60 nóiméad ag baint úsáide as an tsraith alcóil (30 faoin gcéad , 50 faoin gcéad , 70 faoin gcéad , 80 faoin gcéad , 96 faoin gcéad , agus tiúchan iomlán) chun aon athruithe ar mhoirfeolaíocht fíocháin a chosc. Ansin, rinneadh an t-imréiteach ag baint úsáide as xylol faoi dhó (60 nóiméad an ceann). Ina dhiaidh sin, rinneadh an insíothlú le pairifín tairisceana ar feadh 60 nóiméad ag 48 céim céim . Níos déanaí, cuireadh bac ar an pairifín crua sa mhúnla agus a stóráil ar feadh l lae. An lá dár gcionn, cuireadh an cruaite ar an gcoimeádán agus gearradh ina chodanna 4-5-um-tiubh ag baint úsáide as micreatóim rothlach. Tar éis sin, rinneadh an gléasadh chun gloine réad a dhéanamh leis an sciath pola-L-lísín. Tumadh an fíochán gléasta i xylol faoi dhó (5 nóiméad an ceann). Ina dhiaidh sin, rinneadh an athhiodráitiú ag baint úsáide as an tsraith alcóil (fíor, 96 faoin gcéad, 80 faoin gcéad, 70 faoin gcéad, 50 faoin gcéad, agus tiúchan 30 faoin gcéad) ar feadh 5 nóiméad, faoi seach. Ansin, rinsíodh é i dH, O ar feadh 5 nóiméad.

Measúnacht imdhíon-isticeimiceach an CSP12

Níodh na sleamhnáin uair amháin le saline maolánach fosfáit (PBS)(Millipore 524650) ag pH 7.4 ar feadh 5 nóiméad trí huaire. Rinneadh an blocáil sárocsaíd ingenous ag baint úsáide as 3 faoin gcéad H2O2 ar feadh 20 nóiméad. Ansin nitear na sleamhnáin arís leis an nós imeachta céanna roimh an gcóireáil blocála. Rinneadh an blocáil próitéine neamhshonrach trí úsáid a bhaint as 5 faoin gcéad PBS(Millipore 524650) ina raibh 0.25 faoin gcéad TritonX-100 (Sigma-Aldrich T8787) agus ansin déan an nós imeachta níocháin arís. Rinneadh gor na príomh-antasubstaintí caspase-12(Polyclonal Antibody PA5-27094 Thermo Scientific) thar oíche ag 40 céim . Tar éis sin, nite na sleamhnáin ag baint úsáide as PBS (Millipore 524650), pH 7.4, trí huaire ar feadh 5 nóiméad an ceann. Rinneadh an gor trí úsáid a bhaint as biotin-chomhchuingeach frith-luiche ar feadh 1 h ag teocht an tseomra agus rinneadh an nós imeachta níocháin arís agus arís eile. Rinneadh an gor trí úsáid a bhaint as sárocsaídíse raidis streptavidin-capall (Thermo Fisher Scientific NI{00) ar feadh 40 nóiméad agus ansin nite arís é. Cuireadh leis na sleamhnáin ansin le titeann le diam i beinsidín (DAB)(Thermo Fisher Scientific 3400) agus gor ar feadh 10 nóiméad agus ansin nite le nós imeachta comhchosúil. Baineadh úsáid as tuaslagán hematoxylin Mayer (Sigma-Aldrich MHS32) ar feadh 10 nóim, ansin nite ag baint úsáide as uisce sconna, rinsithe le dH2O, agus aer-triomaithe. Breathnaíodh na sleamhnáin ullmhaithe ag baint úsáide as micreascóp solais ag formhéadú 400 × tar éis é a shuiteáil agus a chlúdach le clúdach gloine. Bheadh ​​cuma dhonn ar an slonn móilíneach dearfach le hantasubstaintí príomhúla nuair a bhreathnaítear air. Bhí na cealla epithelial glomerular ríofa suite sa limistéar corpuscle duánach marcáilte le sraith comhréidh de chealla epithelial ag an gcuid parietal de spás Bowman.

Scrúdú Apoptosis

Rinneadh deparaffinization fíocháin trí na fíocháin a ní trí huaire le xiléin (Supelco 108297) ar feadh 5 nóiméad. Bhí an fíochán sáithithe faoi dhó in eatánól iomlán ar feadh 5 nóiméad an ceann agus ansin aistríodh é go 95 faoin gcéad eatánól agus 70 faoin gcéad eatánól ar feadh 3 nóiméad an ceann. Níodh an fíochán le PBS (Millipore 524650) ar feadh 5 nóiméad.

Glacadh antaigin trí phróitéineas K (Sigma-Aldrich 70663) ar feadh 15 nóiméad a thabhairt don sampla. Ansin, nite an fíochán faoi dhó le HO i bhfeadán Coplin ar feadh 2 nóiméad. Baineadh an peroxidase endogenous trí sileadh 3 faoin gcéad H, O, PBS agus d'fhág sé ar feadh 5 min ag teocht an tseomra. Ansin, nite an fíochán faoi dhó le PBS (Millipore 524650) ar feadh 2 nóiméad an ceann i bhfeadán Coplin. Triomaíodh an barrachas leacht le páipéar. Tite thart ar 75 ul de mhaolán cothromaíochta ar an bhfíochán agus ansin goraíodh é ar feadh 10 nóiméad ag teocht an tseomra. Triomaíodh an leacht timpeall an fhíocháin ansin le páipéar. Laghdaíodh an ghníomhaíocht einsím faoi 55ul/5 cm i bhfíochán TdT (Sigma-Aldrich SAB5600268). agus ansin goradh an fíochán ag 37 céim i gcoimeádán tais ar feadh l h. Cuireadh na hullmhúcháin i bpróca Coplin ina raibh maolán láidir/jab glantacháin agus ansin goraíodh iad ar feadh 10 nóiméad ag teocht an tseomra. Níodh na hullmhúcháin ceithre huaire le PBS (Millipore 524650) ar feadh 2 nóiméad i bpróca Coplin ag teocht an tseomra. Triomaíodh an barrachas leacht timpeall an fhíocháin le páipéar. Comhchuingeach frith-dhíogocsaiginin (Roche 11333089001), a baineadh as an stóráil roimhe seo agus a théadh go teocht an tseomra, a thit ar dhromchla fíocháin 65 ul/5 cm² agus ansin goraíodh é ar feadh 30 nóiméad ag teocht an tseomra. Níodh an t-ullmhúchán ceithre huaire le PBS (Millipore 524650) i bpróca Coplin ar feadh 2 nóiméad ag teocht an tseomra. Ansin, triomaíodh an leacht iomarcach timpeall an fhíocháin le páipéar. Nochtadh an dath tar éis an tsubstráit peroxidase (Sigma-Aldrich CPS160) titeann 75ul / 5cm2 ar dhromchla an fhíocháin agus fágtar é ar feadh 10 nóiméad ag teocht an tseomra. Níodh na hullmhúcháin trí huaire le DH, O le haghaidh I min i prócaí Coplin agus ansin goraíodh iad. le DH, Oin Coplin prócaí ar feadh5 min ag teocht an tseomra Rinneadh an counterstaining glas meitile (Sigma-Aldrich M8884) do na 30í ag teocht an tseomra.Ansin, nite an t-ullmhúchán trí huaire le dH.O ar feadh 1 nóiméad i Coplin ar Glanadh na hullmhúcháin le xiléin (Supelco 108297), agus triomaíodh an barrachas leacht timpeall an fhíocháin le páipéar, breathnaíodh na hullmhúcháin ag baint úsáide as micreascóp solais ag formhéadú 400 × agus rinneadh na cealla epithelial donn ón epithelium duánach glomerular a chomhaireamh. i ngach réimse radhairc.

Anailís staitistiúil

Ba é an cóimheas an scála sonraí a úsáideadh le haghaidh caspase-12 chun cealla slonn agus cealla apoptotic, mar sin b'éigean tástáil normáltachta a dhéanamh ag baint úsáide as an tástáil Shapiro-Wilk (=0.05)agus an tástáil aonchineálachta ag baint úsáide as an Leaven tástáil ( =0.05). Más rud é go raibh na torthaí sa ghnáthdháileadh agus go haonchineálach, rinneadh tástáil dhifriúil ag baint úsáide as ANOVA aontreo (=0.05). Má bhí na torthaí gnáth ach ilchineálach, ansin ba é Kruskal-Wallis( =0.05) an tástáil a rinneadh. Má bhí difríocht sna sonraí a fuarthas. ansin lean an anailís le tástáil Mann-Whitney U (=0.05). Faoi dheireadh, rinneadh tástáil chomhghaolaithe Pearson chun an comhghaol idir cealla slinne caspase agus cealla apoptotic a fháil amach.

Torthaí

Moirfeolaíocht na gCealla Epithelial Glomerular

Sular breathnaíodh an caspase-12 ag léiriú cealla agus cealla apoptotic, breathnaíodh ar mhoirfeolaíocht epithelium duánach capsule Bowman den chéad uair le staining hematoxylin-eosin (HE) ag formhéadú 400 ×. Roghnaíodh an réad breathnaithe go randamach chun pictiúr histeolaíoch gach grúpa a léiriú. Fuarthas an cisplatin ó am go chéile i necróis feadánacha fócasach, ramhrú an bhunscannáin sna tubules duánach agus capsúil Bowman, agus insíothlú cealla mononuclear fócasacha sa glomerulus. Is minic a thaispeánann roinnt neacróis taithí glomeruli agus glomeruli iarmharach gnáth spásanna periglomerular méadaithe.

Caspase-12 Slonn Próitéine agus Cealla Apoptotic sna Cealla Eipideilise Glomerular

Léirigh torthaí fíocháin duáin dhaite imdhíon-histochemical athruithe ar léiriú caspase-12 i ngach grúpa. Thaispeáin riarachán instealladh cisplatin i ngrúpa P1 meánshloinn níos airde de caspase-12 tar éis 72 h(4.1±0.86) ​​i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (P{{9}). }). Léirigh riaradh instealladh glutamine agus instealladh cisplatin (P2) meánléiriú níos ísle caspase-12 tar éis 72 h (2.54± 0.72) i gcomparáid le P1 (Tábla 1).

Thairis sin, léirigh instealladh cisplatin i ngrúpa PI ráta níos airde apoptosis cille tar éis 72h(52.7±17.06) i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (P0). Léirigh riarachán instealladh glutamine agus instealladh cisplatin i P2 meánléiriú caspase níos ísle-12 tar éis 72 h (31.5 ±6.73) i gcomparáid le PI (Tábla 1). Léirigh tástáil Kruskal-Wallis na difríochtaí i líon na gceall epithelial glomerular a chuireann caspase in iúl-12 agus i líon na gceall apoptotic sna trí ghrúpa cóireála. Ina dhiaidh sin, bhain triail Mann-Whitney U de thátal as go raibh difríochtaí i líon na gceall epithelial parietal a léirigh próitéin caspase-12 agus i líon na gcealla apoptotic idir na grúpaí P1 agus P2 leis an ngrúpa rialaithe agus idir na grúpaí P1 agus P2. Grúpaí P2. Bhí difríochtaí freisin i líon na gceall epithelial parietal a léirigh an próitéin caspase{-12 agus líon na n-apoptosis cille (Tábla 2).

An Comhghaol idir Capase-12 Cealla Slonn agus Cealla Apoptotic

Léirigh torthaí tástála comhghaoil ​​Pearson go bhfuil comhghaol suntasach idir na cealla epithelial glomerular a léiríonn caspase{{{{0}} agus líon na gcealla faoi apoptosis le comhéifeacht comhghaolaithe 0.707, atá láidir agus dearfach. Mar sin, is féidir a thabhairt i gcrích má laghdaítear líon na gcealla léirithe próitéine, go laghdaítear líon na gcealla apoptotic freisin, agus vice versa.

Tábla 1. Staitistic Tuairisciúil na gCealla Slonn Caspase agus Apoptotic. P{0}}: grúpa rialaithe. P1:cisplatininstealladh ar an 7ú lá. Cuireadh cóireáil ar P2 leinfhéitheachglutamineinstealladh 7 lá i ndiaidh a chéile sula instealladh lecisplatinar an 7ú lá.	Tábla 2. Torthaí Tástála Mann–Whitney U

Plé

Sa staidéar seo, rinneadh an chóireáil sna hainmhithe turgnamhacha a roinneadh i dtrí ghrúpa: an grúpa rialaithe (PO); an grúpa PI, a fuair instealladh cisplatin intraperitoneal; agus an grúpa P2, a fuair instealladh cisplatin intraperitoneal agusglutamine infhéitheachinstealladh. Breathnaíodh an freagra cóireála ar feadh 72 h tar éis cóireála toisc go raibh apoptosis soiléir tar éis 72 h d'instealladh cisplatin (Tsuruya et al...2003). Ba é an suíomh a breathnaíodh sa staidéar seo ná an epithelium glomerular. Go dtí seo, níl aon taighde déanta fós ar nephrotoxicity cisplatin san epithelium glomerular. Tá an glomerulus níos cóngraí ná na feadáin agus mar sin meastar go dtéann sé i bhfeidhm ar nephrotocsaineacht cisplatin níos luaithe ná na feadáin.

Bhí na difríochtaí i leibhéal slonn caspase-12 comhréireach go díreach leis an leibhéal riartha glutamine i ngach cóireáil. Tá na torthaí seo tacaithe ag staidéar a dhearbhaigh gur féidir le glutamine leibhéil arda de léiriú HSP a spreagadh i ngach orgán, lena n-áirítear na duáin (Zhang et al., 2009). Dáileog amháin deglutamine infhéitheachis féidir leis an léiriú HSP a mhéadú, gortú orgán deiridh a laghdú, agus feabhas a chur ar mharthanas ó turraing seipteach i lucha iomlána (Wischmeyer, 2002). D’fhéadfadh go mbeadh airíonna cytoprotective agus frithocsaídeacha glutamine ríthábhachtach i gcásanna ard-catabolism, ina ndéantar gníomhaíocht agus léiriú bealaí athlastacha arna n-idirghabháil ag NF-kB a mhodhnú (Cruzat et al., 2014). Tuairiscíodh go bhfuil infhaighteacht laghdaithe glutamine plasma ina chúis le laghdú ar iomadú limficítí, go lagaíonn sé léiriú próitéiní gníomhachtaithe dromchla agus táirgeadh cítocín, agus go gcothaíonn sé apoptosis i gcealla (Roth. 2008). Is é seo an chúis a d'fhéadfadh a bheith mar gheall ar glutamine cosc ​​a chur ar na cealla i dtreo apoptosis sa staidéar seo.

Mar a luadh sna torthaí, laghdaigh riarachán glutamine apoptosis de chealla cóireáilte cisplatin. Tá sé seo cruthaithe dá mhalairt i staidéar le Kadri et al. (2017) nuair is féidir le cosc ​​a chur ar mheitibileacht glutamine acmhainneacht cíteatocsaineacha roinnt drugaí teiripeacha, mar shampla cisplatin, a mhéadú, rud a fhágann gur féidir dáileog chomhdhúile ceimiteiripe a laghdú chun tocsaineacht agus frithghníomhartha díobhálacha a íoslaghdú.

Braitheann meicníochtaí báis na gceall ar an dáileog riartha cisplatin, trí necróis nó apoptosis (Lieberthal et al,1996). I dturgnaimh in vitro, bíonn tiúchan íseal cisplatin ina chúis le cealla dul faoi apoptosis, agus neacróis ag tiúchan ard (Megyesi et al. 1998: Ramesh agus Reeves.2003). Sa taighde seo, bhí an dáileog go leor chun a chur faoi deara na cealla epithelial chun dul faoi apoptosis.

Sa staidéar reatha, léirigh instealladh cisplatin sa P1 ráta níos airde apoptosis cille tar éis 72 h i gcomparáid leis an rialú (PO). Fuaireamar amach freisin gur léirigh instealladh glutamine agus cisplatin sa P2 slonn caspase níos ísle-12 tar éis 72 h i gcomparáid le P1.

Is féidir le cosán ER-strus a bheith i gceist le apoptosis tar éis cóireála cisplatin freisin. Is é an tionscnóir caspase sa chonair ER ná caspase-12, atá logánaithe d'aghaidh chitosólach an ER agus arna ghníomhachtú ag brú ER (Boyce agus Yuan, 2006). Gníomhachtaítear Caspase-12 le linn cóireáil cisplatin i gcealla LLC-PK1 (Liu agus Baliga,2005). Leathnaíodh breathnuithe in vitro le déanaí chuig múnlaí luiche de nephrotocsaineacht cisplatin, áit a gcuireann ER strus agus comharthaíocht ghaolmhar, mar scoilteacht. de caspase-12, breathnaíodh (Peyrou et al., 2007).

Is féidir a thabhairt i gcrích go dtarlaíonn apoptosis de bharr riarachán cisplatin mar gheall ar léiriú méadaithe caspase-12, rud a spreagann apoptosis sna cealla epithelial glomerular duánach. Ag 72 h breathnóireachta tar éisglutamine infhéitheachriarachán, cuireadh bac suntasach ar mhinicíocht apoptosis i gcealla epithelial glomerular duánach (p<0.0001)between the="" groups="" and="" was="" directly="" proportional="" to="" the="" effect="" of="" glutamine,="" which="" inhibited="" the="" expression="" of="">

Mar fhocal scoir, bunaithe ar na torthaí, tá laghdú ar léiriú caspase-12 agus cealla apoptotic i gcealla epithelial glomerular na bhfrancach bán fireann atá faoi lé cisplatin tar éisglutamine infhéitheachriaradh. An slonn laghdaithe de caspase-/2 inglutamine infhéitheachtar éis riarachán tá laghdú ar apoptosis san epithelium glomerular. Mar sin, glactar leis gur féidir scrúdú inmunhistochemical ar an epithelium glomerular duánach a úsáid mar mharcáil ar éifeacht nephrotoxicach cisplatin.

Is é an teorannú ar an staidéar seo nach bhfuil athróga éagsúla tugtha faoi deara. Ní dhearna an taighdeoir barúlacha ar an seiceadadóir caspase(caspase-3)toisc go raibh an taighdeoir ag iarraidh a fheiceáil go ndearnadh tábhacht na cóireála i caspase an tionscnóra. Ní fhaca an staidéar seo freisin an mhinicíocht apoptosis trí dhá bhealach nó níos mó. Sa chás seo, ba mhaith leis an taighdeoir iarracht a dhéanamh dul trí bhealach amháin ar dtús agus ní gá staidéar a dhéanamh ar níos mó ná bealach amháin má tá na torthaí suntasach. Moltar freisin tuilleadh taighde a dhéanamh ar chur i bhfeidhm naglutamine infhéitheachinfhéitheach do dhaoine ag fáil ceimiteiripe cisplatin agus freisin ar an chóireáil san ainmhí le hailse ionas gur féidir an éifeacht glutamine i ngrúpa ailse agus neamh-ailse a thabhairt faoi deara.

Fíor 1. Moirfeolaíocht Chealla Epithelial Glomerular tar éis CSP-12 Antashubstaint. P{0}}: grúpa rialaithe. P1:instealladh cisplatin ar an 7" lá.P2 cóireáilte leglutamine infhéitheachinstealladh ar feadh 7 lá as a chéile sular ionfhabhtaithe le cisplatin ar an lá 7"h. Léirigh an toradh dearfach le cíteaplasma donn.	Fíor 2. Moirfeolaíocht na gCealla Epithelial Glomerular tar éis Kit Braite Apoptosis. PO: grúpa rialaithe. P1:instealladh cisplatin ar an 7" lá.P2 cóireáilte leglutamine infhéitheachinstealladh ar feadh 7 lá i ndiaidh a chéile sula ndéantar é a instealladh le cisplatin ar na 7 lá. Léirigh an toradh dearfach le cíteaplasma donn.

Tagairtí

1. AkcayA, Turkmen K, Lee D, Edelstein CL(2010). Nuashonrú ar dhiagnóisiú agus ar bhainistiú géarghortaithe duán.Int J Nephrol Renovasc Dis, 3,129-40

2. Al Hussain T, Al Mana H, Hussein M, Akhtar M (2017). Idirghníomhaíochtaí cille epithelial podocyte agus parietal i sláinte agus galair. Ady Anat Pathol, 24,24-34.

3. Bovce M. Yuan J(2006). Freagra cheallacha ar strus endoplasmic reticulum; ábhar beatha nó báis. CellDeathDiffer, 13,363-73

4. Crespo I, San-Miguel B, Prause C.et al (2012).Maolaíonn cóireáil glutamine strus reticulum endoplasmic agus apoptosis i colitis arna spreagadh ag TNBS.PLoS One,7,50407 Cruzat VF,BittencourtA,Scomazzon SP, et al (2014) Laghdaíonn foirmeacha ó bhéal saor in aisce agus dépheptíde d'fhorlíonadh glutamine strus ocsaídiúcháin agus ian athlasadh de bharr endotoxemia. Cothú, 30,602-11

5. Feldenberg ó chlé, Thevananther S, Del Rio M, De Leon M, Devarajan P(1999). Spreagann ídiú páirteach ATP apoptosis Fas-agus caspase-idirghabhála i gcealla MDCK.Am.J/ Physiol (Fisiol Duánach),276.837-46.

6. Fillipski KK,Loos WJ, Verweij J, Sparreboom A(2008). Idirghníomhaíocht cisplatin leis an iompróir caitiúcháin orgánach daonna 2. Clin Cancer Res,15,3875-80

7. Fukuoka K, Takeda M, Kobayashi M et al(1998). Idirleukin ar leith-1 -tiontaíonn próitéisí teaghlaigh einsímí a dhéanann idirghabháil ar apoptóis cisplatin-agus staurosporine-spreagtha de chealla tubulacha cóngaracha luiche. Saol Sei,62.1125-38.

8. Guo Y, Wang M, MouJ,etal (2018). Cosnaíonn sliocht Pretreatmentofhuaiqihuang i gcoinne nephrotocsaineacht cisplatin-spreagtha. Ionadaí Sci, 8, 7333

9. Hanigan MH. Devarajan P(2003). Nephrotoxicity cisplatin: Meicníochtaí móilíneacha. Ailse Ther,1,47-61

10. Jing L, Wu O, Wang F(2017). Cothaíonn glutamine próitéin turraingthe teasa agus cosnaíonn sé in aghaidh Escherichia coli

Nóta:ní liosta tagartha iomlán é an méid thuas