Éifeachtaí Coisctheacha Glicóisídí Feinileatánóil Ó Cistanche Tubulosa

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Shu-Ping Tú, et al

Teibí

Cúlra:CistanchetubulosaIs leigheas luibhe traidisiúnta Síneach é a úsáidtear go forleathan chun díolúine a rialáil.Phenylethanoloildgliocóisídí(CPhGanna) ón monarcha seo na hábhair éifeachtacha go príomha. Ba é aidhm an staidéir seo measúnú a dhéanamh ar éifeachtaí coisctheacha agus teiripeacha CPhGanna ar fhiobróis heipteach arna spreagadh ag BSA i bhfrancaigh agus ar mheicníochtaí móilíneacha gaolmhara a bhaineann le cealla stellate hepatic. Baineadh úsáid as Biejiarangan (BJRG), leigheas luibhe traidisiúnta Síneach eile, mar rialú dearfach.

Modhanna:I dturgnaimh in vivo, roinneadh 75 francach SD go randamach i 6 ghrúpa: gnáth (driogtha le huisce-chóireáilte), múnla (BSA-chóireáilte), druga dearfach (cóireáilte le BSA móide BJRG 600 mg/kg/lá), agus BSA-cóireáilte. móide grúpaí CPhG (125, 250, agus 500 mg/kg/lá). Innéacsanna an ae agus an spleen, leibhéil serum aminotransferase aspartate (AST), alanine aminotransferase (ALT), aigéad heicsidhéineach (HA), laminin (LN), cineál III procollagen (PCIII), cineál IVcollagen (IV-C), hidroxyproline (Hyp). ), agus fachtóir fáis claochlaithe 1 (TGF- 1) a thomhas in ae francach. Rinneadh measúnú ar ghráid histeapaiteolaíocha le haghaidh fiobróis ae do gach grúpa ag baint úsáide as H&E agus staining trichrome Masson. Socraíodh léiriú TGF- 1, collagen I (Col-I), agus collagen III (Col-III) le modh staining imdhíon-histochemical. Rinneadh measúnú breise ar na héifeachtaí seo in vitro trí leibhéil léirithe NF-κB p65 agus Col-I trí anailísí PCR cainníochtúla fíor-ama a chinneadh. Scrúdaíodh léiriú próitéin Col-I freisin ag blotáil an iarthair.

Torthaí: Laghdaigh gach grúpa dáileog (125, 250, agus 500 mg/kg/day) de CPhG go suntasach an t-innéacs ae agus spleen, laghdaigh ALT, AST, HA, LN , leibhéil serum PCIII, IV-C, ábhar TGF- 1 (P < 0.01,="" p="">< 0.01,="" agus="" p="">< 0.01),="" agus="" hyp="" ábhar.="" mhaolaigh="" cphganna="" go="" suntasach="" freisin="" an="" t-at="" i="" gcealla="" ae="" agus="" chuir="" siad="" cosc="" ​​go="" héifeachtach="" ar="" neacróis="" heipiticítí="" agus="" ar="" insíothlú="" cille="" athlastach.="" léirigh="" torthaí="" imdhíon-aisticeimiceacha="" gur="" laghdaigh="" cphg="" go="" suntasach="" slonn="" tgf-="" 1="" (p="">< 0.01,="" p="">< 0.01,="" agus="" p="">< 0.01),="" col-i,="" agus="" col-iii.="" léirigh="" éifeachtaí="" in="" vitro="" cphgs="" (100,="" 75,="" 50,="" agus="" 25="" ug/ml)="" ar="" hsc-t6="" gur="" laghdaigh="" cphganna="" go="" suntasach="" léiriú="" mrna="" de="" nf-κb="" p65="" agus="" col-i,="" agus="" rinne="" cphgs="" íosrialáil="" freisin="" ar="" léiriú="" próitéin="">

Conclúidí:Tá éifeacht shuntasach frith-hepatic fiobróis ag CPhG, agus féadfar iad a úsáid mar oibreáin hepatoprotective chun cóireáil a dhéanamh ar fhiobróis hepatic.

Eochairfhocail:fiobróis hepatic,Cistánach tubulosa,Phenylethanoloildglycosíd,Ceimicín BSA, Cosc agus teiripe

PhenylethanoloildgliceasídisteachCistanchetubulosa

Cúlra

Is freagra leighis créachta é fiobróis hepatic ar ghortú trom ae a tharlaíonn i bpataigineas cróchaipitíteas de bharr fachtóirí éagsúla. Is iad na fachtóirí seo ná ionfhabhtú víreasach, mí-úsáid alcóil, cholestasis, agus galair meitibileach agus uath-imdhíonachta [1-3]. Cuireann carnadh forásach maitrís eischeallach (ECM) agus athmhúnlú laghdaithe isteach ar ghnáth-ailtireacht an ae, rud a fhágann fiobróis hepatic [4]. Tá fiobróis hepatic ríthábhachtach i ngalar ainsealach ae agus is minic a fhorbraíonn cioróis agus carcanaigineas do-aisiompaithe. Faoi láthair, níl aon mhodhanna ná drugaí éifeachtacha ann le haghaidh cóireáil fiobróis hepatic. Dá bhrí sin, tá sé práinneach druga frith-hepatic fiobróis a aimsiú a mhaolóidh dul chun cinn gortú ae ar fhiobróis agus ailse.

CistanchetubulosaIs planda seadánacha é W (den teaghlach Orobanchaceae) a fhástar go forleathan i réigiún theas Xinjiang sa tSín [5]. Is gnách go n-úsáideann daoine é chun na duáin a fhuinneamh, chun an fhuil a chothú, chun an bputóg a scíth a ligean, agus chun moill a chur ar sheanaoise. Tá sé liostaithe go hoifigiúil i Pharmacopoeia na Síne [6].CistanchetubulosaTá éagsúlacht de chomhpháirteanna gníomhacha. Ina measc seo táPhenylethanoloildgliocóisídí(CPhGanna), iridoids, agus polaisiúicrídí. Asone de go leor comhpháirteanna gníomhacha iCistanchetubulosa, léirigh CPhGshave éifeachtaí áititheacha frithocsaídeacha, frith-tuirse, neuroprotective, agus frith-athlastacha i staidéir in vivo agus in vitro [7]. Le blianta beaga anuas, tuairiscíodh go bhfuil éifeachtaí hepatoprotective ag CPhGanna. Is iad na meicníochtaí féideartha atá mar bhunús leis na héifeachtaí seo ná fréamhacha saor in aisce a scavenging, cosaint seicní hepatic, imdhíonrialú, cosc ​​ar apoptosis, cosc ​​ar léiriú HBsAg agus HBeAg, agus cosc ​​ar mhacasamhlú DNA HBV agus daoine eile [8-11]. Mar sin féin, is beag staidéar sa litríocht a thugann aghaidh ar an éifeacht fhrith-hepatic fiobróise atá ag GPhC. Mar sin, bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo imscrúdú a dhéanamh ar éifeacht fiobróis fhrith-hepatic na GPhCanna trí úsáid a bhaint as samhail d’albaimin shéiream buaibheach (BSA) i bhfrancaigh i bhfrancaigh. Rinneadh imscrúdú ar mheicníochtaí móilíneacha gaolmhara i gcealla HSC-T6.

Modhanna

Ceimiceáin agus imoibrithe

Ceannaíodh trealamh Hidroxyproline (hidrealú alcaileach) (Lot: 20140616) ó Institiúid Bithinnealtóireacht Nanjing Jiancheng (An tSín). Ceannaíodh feisteáin ceapaire Rat TGF- 1 ELISA (Lot: 238240615) ó Lianke Biotech Co., Ltd. (An tSín). Sholáthair Beijing BiosynthesisBiotechnology Co., LTD antasubstaint Rabbit Anti-CollagenI (Lot: 140619), antasubstaint Rabbit Anti-Collagen III (Lot: 980788 W), agus Rabbit Anti-TGF- 1 antasubstainte (Lot: 140619). tSín). Iniata le serum gnáthchaorach (sreabhán oibre) (Lot: WP141214), ceannaíodh PV-6000 (Lot: WK141225), agus trealamh DAB (Lot: K136621D) ó Zhongshan Golden Bridge BiotechCo., Ltd. (An tSín). Rinneadh antasubstaintí príomhúla a bhrath trí úsáid a bhaint as 2. Tuaslagán antashubstainte (Alc-Phos.Conjugated, Frith-coinín) agus 2. Tuaslagán antashubstainte (Alc-Phos. Comhchuingeach, Frith-luch) (go leor: 272387) a ceannaíodh ó Invitrogen Company (USA) .

Ceannaíodh albaimin séiream buaibheach (BSA) (Lot: SLBG8239V) ó Sigma (SAM). Sula n-úsáidtear é, ullmhaíodh BSA ag 18 g/L i ngnáth-seile, baineadh na baictéir trí scagachán, agus stóráiltear BSA ag 4 céim . Meascadh aidiúvach neamhiomlán Freund ina raibh 1 g lipid ó ghruaig chaoirigh (Lot: AF0220LA14, Shanghai yuan ye Biotechnology Co., Ltd. (tSín,) le 2 g pairifín leachtach (Lot: 20130815, Tianjin Fuyu Fine Chemical Co., Ltd (tSín,), aimridithe in uathchlábh gaile, agus stóráilte ag céim 4. Fuarthas an druga Thepositive BJRG mar táibléad Biejiarangan ó Istigh Mhongóil Furui Science Science Co., Ltd.(tSín) Ullmhaíodh stoic drugaí BJRG trí thaibléad BJRG a thuaslagadh i uisce driogtha ag tiúchan 600 mg/kg.

Phenylethanoloild gliceasídisteachCistanchetá éifeachtaí coisctheacha

Ábhair phlandaí

Cistanche tubulosa(teaghlach Orobanchaceae) ó réigiún Minfeng i Xinjiang na Síne. Fíordheimhnigh an taighdeoir Jun Zhao, Príomh-Saotharlann um Leigheas Uighur, Institiúid Materia Medica ofXinjiang an t-ábhar. Taisceadh eiseamail dearbháin in Institiúid Materia Medica Xinjiang.

CPhGanna a ullmhú

Riosóim triomaithe agus slisnithe deCistanchetubulosa(6.0 kg) as a chéile faoi aife trí huaire le 70 faoin gcéad eatánól, agus baineadh an tuaslagóir chun eastóscadh eatánóil a tháirgeadh. Glanadh eastóscáin eatánóil trí roisín AB-8 a úsáid chun anfeinileatánóideachgliocóisídí(CPhGanna). Díscaoileadh réitigh stoic de CPhGanna a úsáidtear le haghaidh grúpaí dáileoga difriúla i staidéir ar ainmhithe (50 0 mg/kg, 250 mg/kg, agus 125 mg/kg, faoi seach) i 0.5 faoin gcéad (5 g/L) carboxymethyl cellulose ( salann sóidiam).

CPhGanna a chainníochtú

Cinneadh inneachar dhá chomhpháirt (echinacoside andacteoside) sna CPhG trí úsáid a bhaint as modh a tuairiscíodh roimhe seo (Zhang et al. 2{004)[12]. Rinneadh HPLC trí úsáid a bhaint as Shimadzu LC-10AHPLC atá feistithe le brathadóir UV. Bhí colún HPLC ina cholún Phenomenex Gemini ODS (250 × 4.6 mm,5 μm). Is éard a bhí sa chéim shoghluaiste isocratach ná meatánól-aicéatóintríle-1 faoin gcéad d’aigéad aicéiteach (15:10:75, v/v/v). Bhí an t-elution ar feadh 40 nóiméad agus coinníodh an ráta sreafa ag 0.6 mL/nóim. Coinníodh teocht an cholúin tairiseach ag 30 céim. Bhí braite UV ag 334 nm.

Ainmhithe agus líne chill HSC-T6

[Grád SPF] fireann fásta sláintiúil Ceannaíodh francaigh Sprague-Dawley (SD) (180-220 g) ó Xinjiang MedicalUniversity Ainmhithe Center, Ceadúnas Uimh.: SCXK (Nua) 2011-0004. Cothaíodh francaigh chow sainiúil saor ó phataigin (SPF). D'fhaomh Coiste um Eitic Ainmhithe an Chéad Ospidéal Cleamhnaithe in Ollscoil Leighis Xinjiang na nósanna imeachta go léir a bhaineann leis na turgnaimh ainmhithe. Cuireadh na francaigh i gcliabháin faoi choinníollacha timpeallachta rialaithe (25 céim agus timthriall éadrom/dorcha 12 h) agus bhí rochtain saor in aisce acu ar ghnáthbhia millíní francaigh agus uisce sconna. Bhí acclimated francaigh roimh chóireáil.

Fuarthas líne ceall stellate hepatic francach neamhbhásaithe, HSC-T6, ó Wuhan Procell Gene BiotechnologyCo., LTD. (Wuhan, an tSín). Saothraíodh cealla HSC-T6 i Meándóite Iolar Athraithe Dulbecco (Ard-ghlúcóis) (DMEM, Beijing, an tSín) arna fhorlíonadh le 10 faoin gcéad de shéiream féatais bhó-ainmhithe (Gibco, Meiriceá Theas), peinicillin 100 IU/ml, agus streiptimícin 100 ug/ml (Beijing, An tSín). ) i gorlann ahumidified ag 37 céim le 5 faoin gcéad CO2.

Gortú ae de bharr BSA agus cóireálacha

Roinneadh seachtó cúig francach SD go randamach i sé ghrúpa: Gnáth (uisce-chóireáilte driogtha), múnla (cóireáilte le BSA), druga dearfach (cóireáilte le BSA móide BJRG 600 mg/kg/lá) , agus grúpaí CPhGanna móide cóireáilte ag an BSA (125, 250, 500 mg/kg/lá). Bhí 13 francach i ngach grúpa i ngrúpaí cóireáilte BSA móide CPhG (125, 250, 500 mg/kg/lá), agus bhí 12 francach ag an ngrúpa eile i ngach grúpa. Tá an tsamhail gortú ae arna spreagadh ag BSA roinnte ina íogrú príomhúil agus ionsaí imdhíoneolaíoch ina dhiaidh sin) [13]. Seachas an gnáthghrúpa, tugadh instealltaí subcutaneous iolracha do na grúpaí eile le 0.5 ml (9 mg/ml) aidiúvach neamhiomlán BSAFreund ar lá 1, lá 15, lá 22, lá 29, agus lá 36 le haghaidh íogrú príomhúil. Seacht lá tar éis an cúigiú instealladh, fuarthas fuil tríd an plexus vein ratretinal agus tástáladh le haghaidh antasubstaintí albaimin serum. Braitheadh ​​antashubstaint BSA i séiream francach trí mhodh idirleata agair dúbailte. Rinneadh an t-instealladh ionsaithe trí 0.4 ml de BSA a riaradh i ngnáthsalainn tríd an vein eireaball i bhfrancaigh antashubstainteacha-dearfach BSA dhá uair sa tseachtain ar feadh deich n-uaire. Ba iad na tiúchain agus amanna instealltaí ná 5.00, 5.50, 6.00, 6.50,7.00, 7.50, 8.50, 9.00, 9.50 agus 10.00 g/L ag lá 46 , lá 50, lá 53, lá 57, lá 60, lá 64, lá 67, lá71, lá 74 agus 78, faoi seach. Sa ghnáthghrúpa, baineadh úsáid as gnáth-seile le haghaidh instealltaí imdhíoneolaíocha bunscoile (íogrú) agus tánaisteacha (ionsaí) in ionad BSA, agus bhí coinníollacha eile mar an gcéanna leo siúd sa ghrúpa múnla.

Tugadh uisce driogtha ó bhéal don ghnáthghrúpa le dáileog de 10 ml/kg/lá. Riaradh an grúpa múnla ó bhéal 10 ml/kg/lá 0.5 faoin gcéad CMC-Na tuaslagán. Tugadh 125, 250, agus 500 mg/kg/lá CPhG do na grúpaí CPhG a chóireáil BSA (125,250, agus 500 mg/kg/lá) ó bhéal, faoi seach.

Tar éis na tréimhse turgnamhacha, troscadh francaigh ar feadh 12 u roimh hiodráit chlórach 10 faoin gcéad agus ansin euthanized láithreach. Bailíodh samplaí séirim ó gach ratand a úsáideadh láithreach. Baineadh ae le haghaidh dhá chuspóir: (1) caomhnú i nítrigine leachtach le haghaidh trealamh Hyp agus (2) fosúchán i 10 faoin gcéad formaildéad le haghaidh scrúduithe histological agus imdhíon-histochemical. Ba é 93 lá fad iomlán na staidéar ar ainmhithe.

Phenylethanoloild gliceasídisteachCistanchetá éifeachtaí coisctheacha

Innéacsanna ae agus spleen

Rinneadh an t-ae agus an spleen a dháileadh le laparotomy agus nite le gnáth-shalainn 4 chéim. Tar éis an iomarca uisce a ionsú le scagpháipéar, rinneadh an t-ae agus an spleen a mheá chun na hinnéacsanna comhfhreagracha a ríomh:Meáchan orgán choibhneasta=mais orgán (g)/maiseacht choirp aonair (g) × 100 faoin gcéad [14].

Anailís ar mharcóirí fiobróis ae

Rinneadh éifeacht chosanta CPhGanna i gcoinne gortuithe ae de bharr BSA a mheas trí ALT agus AST (anailíseoir bithcheimiceach uathoibríoch gha Meabhrach, A086A0182) a thomhas. Cinneadh forbairt fiobróis ae agus éifeachtaí cóireála trí scrúdú a dhéanamh ar HA, LN, PC III, agus IV-C (anailíseoir Chemiluminescence, TaiGeKeXin, MP2808).

Ábhar hyp agus anailís TGF- 1

Socraíodh an leibhéal Hyp i bhfíochán ae trí mhodh speictreafótaiméadrach de réir threoracha an trealaimh. Léiríodh an leibhéal Hyp mar Hyp (ug)/próitéin (mg).Hyp (ug/mg)=(OD Tomhais - OD bán)/(OD caighdeánach bán OD) × 5 (ug/ml) × 10/meáchan fliuch fíocháin (ml/mg). Braitheadh ​​an tiúchan hepatic de TGF- 1 trí úsáid a bhaint as feisteáin ELISA de réir threoracha an déantóra. Deimhníodh éifeacht coisctheach CPhG ar fhiobróis ag leibhéil slonn TGF- 1.

Scrúdú histeapaiteolaíochta

Rinneadh an fíochán ae sa chuid chéanna den lobe clé a resected agus a shocrú i dtuaslagán formaildéad 10 faoin gcéad. Dathaíodh na fíocháin le gnáth-staining H&E agus stríocrom Masson chun athruithe histeapaiteolaíocha a bhreathnú faoi mhicreascóp solais. Rinneadh anailís ar léiriú collagen cineál I, collagen cineál III, agus TGF- 1 i bhfíocháin ae trí staining imdhíon-histochemical [15].

Rinneadh immunohistochemistry leathchainníochtúil de réir modhanna tuairiscithe [16, 17]. Baineadh úsáid as na haicmithe seo a leanas le haghaidh cealla dearfacha TGF- 1: " -" léiríonn beagnach aon slonn, 20=l; léiríonn " móide " cealla dearfacha a bailíodh ina n-aonar sa limistéar loit, 21=2; léiríonn " móide móide " cealla dearfacha i ngrúpaí beaga a bailíodh timpeall an limistéir loit, 22=4; Léiríonn " móide móide " cealla dearfacha scaipthe arna shloinneadh, mar 23=8. Is ionann na torthaí agus comhtháthú ordlathach. Tiontaíodh an chéim agus an scóip chróigineach cineál collagen Iand collagen III go CRI le haghaidh anailíse staitistiúla (céim chromogenic × raon chromogenic). Tá an chéim chromogenic roinnte ina lag " móide " , measartha " móide ", agus láidir " móide móide ". Roinntear an raon crómogenic i " móide ", a raon crómagánach < amharc="" 1/4;="" "="" plus="" plus="" ",="" a="" raon="" crómagogenic="" radhairc/4-2/4;="" "="" plus="" plus="" plus="" ",="" a="" raon="" crómaigineach="" radhairc="" 2/4-3/4;="" "="" plus="" plus="" plus="" plus="" ",="" a="" raon="" crómanach=""> 3/4. Rinne beirt scóráil dall nuair is é " móide " 1; Is é " móide móide " 2, is é " móide móide " ná 3, agus " móide móide móide " is 4 é. Roghnaíodh trí réimse breathnadóireachta micreascóp (méadú × 200) go randamach do gach cuid, agus úsáideadh meánleibhéal na dteiseamláirí mar a leibhéal leathchainníochtúil.

Turgnaimh cille

Plátáladh cealla HSC-T6 i 96-phláta tobair. Ar dtús, saothraíodh cealla le DMEM ina raibh 10 faoin gcéad FBS ar feadh 48 h. Ansin cuireadh DMEM gan FBS in ionad an mheán chun na cealla a ocras ar feadh 12 uair an chloig. Saothraíodh na cealla ansin le DMEM ina raibh 5.0 ng/mLTGF- 1 (gan FBS) ar feadh 24 h. Ar deireadh, tá tiúchan éagsúla CPhGs (100ug/ml, 50ug/ml, agus 25ug/ml), acteoside (6 ug/ml, 3 ug/ml, agus 1.5 ug/ml), andechinacoside (500ug/ml, 250ug/ml, agus 125ug/ml) a rinneadh sa phláta i toibreacha ceithre-dhúbailte agus gortha ar feadh 48 u.

Anailís PCR fíor-ama

Cinneadh an leibhéal slonn mRNA de NF-κB, p65, agus collagenI ag PCR fíor-ama. Chun na habairtí mRNA a chinneadh i gcealla HSC-T6, síolaíodh na cealla (4 × 10 5cells) i bplátaí sé-tobair le 3 mL DMEM le 10 faoin gcéad FBS agus goraíodh iad thar oíche ag 37 céim agus 5 faoin gcéad CO2, agus ina dhiaidh sin cuireadh an Athraíodh meáin chultúir na gceall DMEM saor ó toserum. Ar aghaidh, CPhGs (100 ug/ml, 50 ug/ml, agus 25 ug/ml), acteoside (6 ug/ml, 3 ug/ml, agus 1.5 ug/ml), agus echinacoside (500 ug/ml, 250 ug /ml, agus 125ug/ml) leis na toibreacha. Tar éis 48 h de gor le CPhG nó cumadóireachta monaiméireacha, asbhaineadh RNA iomlán ag baint úsáide as imoibrí TRIzol (Invitrogen, SAM) agus corraithe go bríomhar le clóraform ar feadh 15 s. Tar éis suí ag teocht an tseomra ar feadh 3 nóiméad, lártheifneoiríodh an lysate ag 12,000 × g ar feadh 15 nóiméad ag 4 céim . Cuireadh deascadh RNA sa chéim uiscí le isopropanol, agus aistríodh an chéim uiscí uachtarach chuig feadán nua micrealártheifneoir. Cuireadh deascadh RNA trí eatánól 0.75 faoin gcéad a chur leis, agus ina dhiaidh sin dhírigh an feadán microcentrifuge ag 12, 000 × g ag 4 céim ar feadh níos mó ná 5 nóiméad. Baineadh an súthach agus triomaíodh an RNA ag teocht an tseomra ar feadh 5-10 nóiméad. Sraitheanna sonracha de phriméirí (Sangon, Shanghai, An tSín) a úsáideadh chun aimpliú francach -actin [GenBank: NM_031144.3], Collagen I [GenBank: NM_ 053304.1], agus NF- κB p65[GenBank: NM_199267.2] géinte deartha ag baint úsáide as Batch Primer 3. Ba iad seo a leanas na primers ar aghaidh (FW) agus droim ar ais (RV): Collagen I (FW: GGA GAGAGC ATG ACC GAT GG, RV: GGG ACT TCT TGAGGT TGC CA), NF-κB p65 (FW: CAT ACG CTG ACCCTA GCC TG, RV: TTT CTT CAA TCC GGT GGCGA), -actin (FW: TAA GGC CAA CCG TGA AAA GATG, RV: AGA GGC ATA) CAg gGA CAg CAC A). Rinneadh na torthaí a normalú go mRNA an ghéine tís -actin mar rialú inmheánach agus cuirtear i láthair na leibhéil mRNA a bhaineann leo.

Rinneadh frithghníomhartha le 8 μL IQ SYBR GreenSupermix, 1 μL 10 pm péire primer, 8.5 μL uisce driogtha, agus 2.5 μL cDNA. Rinneadh gach imoibriú slabhra polaiméiráis faoi na coinníollacha seo a leanas: 95 céim ar feadh 3 nóiméad, ansin 40 timthriall de 10 s ag 95 céim, 30 s ag 55 céim, agus 10 s ag 55 céim - 95 céim le síneadh, agus tomhas fluaraiseachta aonair ina dhiaidh sin. Cuireadh síos ar na torthaí deiridh leis na luachanna coibhneasta (2-ΔΔCt). Rinne Córas Braite PCR Fíor-Ama iQ5 ríomh agus anailís.

Anailís blot an Iarthair

Socraíodh leibhéil slonn próitéine Collagen I (Abcam, Cambridge, UK, Art No: ab34710) ag Westernblotting [le -actin (Lot: 60008-1-lg; Proteintech, China) mar rialú bainistíochta tí. Ullmhaíodh eastóscáin lánchealla trí úsáid a bhaint as maolán measúnaithe Radioimmunoprecipitation (RIPA) (Thermo Scientific, SAM) le manglam coscaire Haltprotease 1 faoin gcéad (Thermo Scientific, USA) agus 1 faoin gcéad mhanglaim coscairí Halt phosphatase (Thermo Scientific, USA). Rinneadh an tiúchan próitéine a thomhas agus a chainníochtú ag modh Bradford [18]. Scaradh próitéin(10–50 ug) ar fhoirmiú SDS-PAGE 10 faoin gcéad agus aistríodh go seicní PVDF (Millipore, SAM). Cuireadh bac ar na membranes ar feadh 1 h ag teocht an tseomra le 5 faoin gcéad BSA, agus na príomhantasubstaintí (Anti-Colla gen I). antashubstaint, 1:200 caolú nó luch mAb de -actin, 1:5000 caolú) gor ag 4 céim thar oíche. An Alc-Phos comhfhreagrach. goraíodh antasubstaintí tánaisteacha comhchuingeacha ag teocht an tseomra. Ar deireadh, niteadh téamaí téama trí huaire le 1 × Tris-HClsaline le 0.1 faoin gcéad Tween 20, agus scanadh agus léirshamhlú comharthaí ag GEL DOC XR Íomháithe System (Bith-Rad). Rinneadh anailís densitometric ar phróitéiní inspéise agus normalaíodh go -actin le bogearraí GEL DOCImage Studio (Bio-Rad). - úsáideadh actin mar an rialú inmheánach.

Anailís staitistiúil

Cuireadh tástáil normáltachta Shapiro-Wilk agus tástáil homogeneity éagsúlachta Levene i bhfeidhm chun normáltacht agus aonchineálacht athraithis a fhíorú. Baineadh úsáid as anailís ar athraithis (ANOVA) tar éis tástáil post hoc Tukey chun difríochtaí staitisticiúla a aithint, sonraí neamhaonchineálacha, a dháiltear de ghnáth. Baineadh úsáid as tástáil neamhpharaiméadrach Kruskal-Wallis chun anailís a dhéanamh ar shonraí nach bhfuil dáileadh de ghnáth nó aonchineálach. Cuireadh na torthaí in iúl mar mheán ± SD. Socraíodh tábhacht ag P < 0.05.="" rinne="" bogearraí="" spss="" 16.0="" (ollscoil="" leighis="" xinjiang)="" anailís="" ar="" na="" sonraí="" go="">

Torthaí

Cinneadh cainníochtúil CPhGsCPhGanna iCistanchetubulosaTá dháPhenylethanoloildgliocóisídí, echinacoside, agus acteoside, agus chinn anailís HPLC (Fíor 1) gur 42.71 ± 0.42 faoin gcéad agus 14.27 ± 0.18 faoin gcéad , faoi seach, a bhí sna CPhGanna.

Innéacsanna ae agus spleen

Mar a léiríodh i dTábla 1, ardaíodh innéacsanna ae agus spleen an ghrúpa mhúnla go suntasach [P < 0.01,p="">< 0.05].="" laghdaíodh="" innéacsanna="" ae="" agus="" spleen="" na="" ndrugaí="" deimhneacha="" bjrg="" agus="" cphg="" ag="" grúpaí="" dáileoga="" éagsúla="" go="" suntasach="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" samhail[pliver="0.004," pliver="0.003," pliver="0.004," piver="0.005;" pspleen="0.017," pspleen="0.027," pspleen="0.024,PSpleen=0.070," faoi="" seach].="" bhí="" na="" hinnéacsanna="" ae="" agus="" spleen="" níos="" ísle="" ná="" iad="" siúd="" an="" ghrúpa="">

Éifeachtaí CPhG ar ghníomhaíochtaí ALT, AST, agus ar mharcóirí fiobróis ae

Sa staidéar reatha, méadaíodh leibhéil serum na hepatic en zymes AST agus ALT go suntasach sa ghrúpa múnla, rud a léiríonn damáiste hepatocellular i bhfrancaigh fiobróis ae spreagtha BSA. Mar sin féin, léirigh na turgnaimh gur tháinig laghdú suntasach ar chóireáil le BJRG (600 mg/kg) agus CPhGs(125, 250, agus 500 mg/kg) AST[PAST < 0.001,="" past="">< 0.001,="" past="">< 0.001,="" past="">< 0.001,="" faoi="" leith]="" agus="" alt="" [palt="0.117," palt="0.139," palt="0.189" ,="" palt="0.255," faoi="" seach]="" leibhéil="" i="" fiobróisrats="" hepatic.="" (tábla="">

Méadaíodh go suntasach na leibhéil HA, LN, PC agus IV-C i francaigh mhúnla [PHA < 0.001,="" pln="">< 0.{{39}="" }01,="" ppciii="0.002," piv-c="">< 0.001,="" faoi="" seach].="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" samhlacha,="" tá="" leibhéil="" ha="" [pha="0.009," pha="0.007,PHA=0.009," pha="0.023," faoi="" seach],="" ln="" [pln="0.011," pln="0.004," p="" ln="0.026," p="" ln="0.069," faoi="" seach],="" pc="" iii[p="" pciii="" {{26="" }}.006,="" p="" pciii="0.067," p="" pciii="0.136," p="" pciii="0.296," faoi="" seach],="" agus="" iv-c="" [p="" iv-c="">< 0.001,="" tháinig="" laghdú="" suntasach="" ar="" p="" iv-c="">< 0.001,="" p="" iv-c="">< 0.001,="" p="" iv-c="">< 0.001,="" faoi="" seach]="" i="" bhfrancaigh="" faoi="" ghrúpaí="" dáileoga="" difriúla="" bjrg="" (600="" mg/kg)="" agus="" cphg="" (125,="" 250,="" agus="" 500="" mg/kg).="" )="" (tábla="">

Ábhar hyp agus TGF- 1

Braitheadh ​​ábhar collagen freisin trí Hyplevels i bhfíochán ae a thomhas. Mar a léirítear i dTábla 4, bhí an meánleibhéal Hyp sa mhúnlaghrúpa i bhfad níos airde ná an gnáthghrúpa, ach tháinig laghdú suntasach air sa ghrúpa BJRG agus sna grúpaí dáileoga éagsúla CPhG.

Méadaíodh an tiúchan hepatic de TGF{{0}} den mhúnlaghrúpa i bhfrancaigh go suntasach [P < 0.001].i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="" samhlacha,="" laghdaíodh="" leibhéil="" tgf-="" 1="" den="" druga="" dearfach="" agus="" na="" grúpaí="" dáileoga="" éagsúla="" cphg="" go="" suntasach="" [p="" tgf-="" 1="">< 0.001,="" p="" tgf-="" 1="">< 0.001,p="" tgf{{10="" }}="">< 0.001,="" ptgf-="" 1="">< 0.001,="" faoi="" seach].="" tá="" achoimre="" ar="" na="" torthaí="" i="" dtábla="">

Scrúdú histeapaiteolaíochta

Léiríonn breathnuithe ar ghnáthchodanna fíocháin ae daite le H&E agus tríchrome Masson heipitéablóibíní ar leith agus sinusoids hepatic. Rinneadh neamhord ar struchtúr an fhíocháin ae sna francaigh mhúnla, agus cuireadh líon mór fíocháin nascacha in ionad fíocháin ae agus sinusoids hepatic. Mar sin féin, braitheadh ​​​​cítoailtireacht níos gnáth agus níos lú fíocháin nascacha sa ghrúpa cóireála ná iad siúd sa ghrúpa samhail.

staining H&E

Sa ghnáthghrúpa, breathnaíodh sláine struchtúrach lobule hepatic gan limistéir thairseach neamhghnácha agus sinusoids hepatic. Socraíodh na cordaí hepatic ar bhealach ordúil, leis an gcroí cruinn agus soiléir. Tá na núicléis lonnaithe i lár na cille, le cíteaplasma flúirseach. Níl ach méid beag fíochán snáithíneach i limistéar an tairseach (Fíor 2a).

Sa ghrúpa múnla, rinneadh damáiste mór don struchtúr lobular. Léirigh cealla ae meath éadrom uisceach, díghiniúint balún den chuid is mó agus/nó meathlú sailleacha. Breathnaíodh freisin foirmiú insíothlú cille athlastach, hipearpláis fíocháin shnáithíneacha fhairsing, foirmiú líon mór an septum snáithíneach, lobules scoilte, agus iomadú suntasach cealla ae. Dhearbhaigh na tuairimí seo rathúlacht bhunú an mhúnla ainmhithe díobhála imdhíonachta francaigh. fiobróis hepatic (Fíor 2b).

I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, bhí laghdú ar insíothlú cille athlastacha sna CPhGanna éagsúla. Chomh maith leis sin a breathnaíodh bhí níos lú neacróis agus díghiniú sailleacha de chealla ae chomh maith le laghdú fiobróis. Mhaolaigh CPhG go suntasach paiteolaíocht na fiobróis BSA-ionduchtaithe i bhfrancaigh, mhaolaigh sé at na gcealla ae, agus chuir sé cosc ​​​​go héifeachtach ar insíothlú neacróis heipiticítí agus cealla athlastacha, rud a thugann le tuiscint go mbeadh éifeacht chosanta ag CPhGsexert ar fhiobróis hepaticeach francach spreagtha BSA. (Fig. 2c–f ).

staining trichrome Masson

Sa ghnáthghrúpa, bhí an fíochán ae gnáth. Léirigh limistéar tairseach Thehepatic líon beag snáithíní bluecollagen, agus bhí struchtúr an fhíocháin ae de ghnáth (Fíor 3a). I gcomparáid leis an fíochán ae den ghrúpa gnáth, fíochán snáithíneach iomadú ag thecentral bhileog agus leathnaithe isteach sa parenchyma ae. Leathnaigh snáithíní collagen agus nasc siad agus chlúdaigh siad an lobule iomlán agus timpeall an vein lárnach. Chuir na héifeachtaí seo, mar aon le fiobróis heipitocyte, damáiste struchtúrach lobular, fiobróis periportal, agus foirmiú pseudolobule (Fíor 3b) fianaise ar fáil gur bunaíodh an tsamhail.

I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, leathnaíodh na snáithíní collaigine sa ghrúpa rialaithe drugaí dearfach amach go beag ó limistéar na tairsí forimeallach (Fíor 3c). I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, laghdaíodh na snáithíní collaigine sna grúpaí dáileoga CPhG éagsúla go suntasach, cuireadh bac ar iomadú snáithíní, agus laghdaíodh go mór ar iomadú fíocháin shnáithíneacha laistigh den pharenchyma ae. Thug na torthaí seo le tuiscint go gcosnódh CPhGanna francaigh ó fhiobróis heipteach arna spreagadh ag BSA ( Fíor. 3d - f ).

Staining inmunohistochemical

Tá sé tábhachtach go n-imríonn léiriú collaigine cineál I agus collagen cineál III róil riachtanacha i bhforbairt fiobróis hepatic, agus d'fhéadfadh a nginiúint agus a sil-leagan i bhfíochán ae feidhmiú mar chinntitheach tábhachtach ar éifeachtúlacht fiobróis fhrith-hepatic. Tá achoimre ar na torthaí i dTábla 5.

Collagen cineál I

Chuir an gnáthghrúpa in iúl cineál collagen I soithí fola den chuid is mó agus an limistéar tairsí. Chuir an grúpa múnla fiobróis soithíoch cineál I collagen in iúl go hard i limistéir thairseach. I spás Disse, breathnaíodh staining collagen de chineál I mar stríoc nó mar dháileadh fánach. Collagen clúdaithe fibroussepta chun pseudolobule a fhoirmiú. Sna turgnaimh seo, foirmíodh níos lú septa snáithíneach do BJRJ (600 mg/kg) agus grúpaí dáileoige difreálach de CPhG s (125, 250, agus 500 mg/kg) [PCol I= 0.002, PCol I {{6 }}.001, PCol I=0.023, agus PCol I=0.044, go háirithe]. Léirigh na torthaí leathchainníochtúla go raibh léiriú a gcineál collaigine I go suntasach níos ísle i gcomparáid leis an ngrúpa samhail (Fíor 4).

Collagen cineál III

Cuireadh collagen cineál III in iúl go lag sa ghnáthghrúpa, agus léirigh limistéir imeallacha timpeall na veins andhepatic tairseach méid beag buí mín in ionad snáithíní leanúnacha (Fíor 5a). Sa ghrúpa múnla, thaispeáin snáithíní collaigine cordaí leathana agus tiubh, rud a léirigh léiriú láidir, atá lonnaithe go príomha sna limistéir thairseach agus fíocháin shnáithíneacha (Fíor 5b).

Bhí snáithíní collagen de BJRJ (600 mg/kg) agus dáileogghrúpaí éagsúla de CPhGs (125, 250, agus 500 mg/kg) filamentous agus dáileadh ar fud na réimsí vein lárnach agus tairseach. I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, laghdaíodh na snáithíní collaigine go suntasach, bhí an staining paleand tanaí, agus bhí staining inmunhistochemical lag dearfach ( Fíor. 5c - f ). Léiríonn na torthaí leathchainníochtúla seo go bhfuil na cealla in iúl go dearfach sna grúpaí dáileog dearfacha agus difriúla [PCol III=0.015, PCol III=0.001, PColIII=0.010, agus PCol III Bhí=0.037, faoi seach] difriúil leo siúd sa mhúnlaghrúpa.

TGF- 1

Is beag léiriú ar TGIF- 1 i ngnáthchealla ae francaigh. Bhí an slonn teoranta do líon beag cealla interstitial (Fíor 6a). Sa ghrúpa múnla, scaipeadh an abairt TGF- 1 go forleathan sa limistéar tairseach, spásanna snáithíní, cealla stellate hepatic, cealla athlastacha, an balla sinusoidal, agus cíteaplasma. Léirigh limistéar tairsí ar leith slonn an-dearfach le dathú donn-buí (Fig. 6b)

Bhí méid beag léirithe i limistéar na tairsí agus septa snáithíneach de BJRJ (600 mg/kg) agus grúpaí dáileoga éagsúla de CPhGs (125, 250, agus 500 mg/kg). Laghdaíodh go mór méid an smálaithe dearfacha sna grúpaí seo i gcomparáid leis an múnlaghrúpa. Tháinig laghdú ar staining sna cealla interstitial sa septa snáithíneach agus cíteaplasma na gcealla athlastacha ( Fíor. 6c - f ). Léirigh torthaí leathchainníochtúla go raibh BJRJ agus grúpaí dáileoga éagsúla de CPhG [P TGF- 1=0.001, P TGF- 1 < 0.001,="" p="" tgf-="" 1="0.009," ptgf-="" 1="0." 004,="" faoi="" seach]="" i="" gcomparáid="" leis="" an="" ngrúpa="">

Mar a luadh níos luaithe san alt, tá TGF - 1 cítocine ríthábhachtach i pathophysiology fiobróis ae, ag spreagadh táirgeadh extracellularmatrix [19]. Léiríomar gur mhéadaigh leibhéal an TGF- 1 sa ghrúpa múnla ar bhealach a bhí ag teacht le déine na fiobróis ae. Bhí leibhéil slonn TGF- 1 san ae comhsheasmhach le leibhéil serumTGF- 1. Léiríonn sé seo gur féidir le CPhGanna fiobróis ae a laghdú go suntasach de bharr slonn TGF- 1 trí pháirt a ghlacadh i sintéis agus díghrádú ECM.

Is féidir le léiriú collaigine cineál I, collagen cineál III, agus TGF- 1 próiseas paiteolaíoch na fiobróis hepatic a bhrath. Tháinig laghdú suntasach ar a leibhéil cainte sna grúpaí cóireála agus léirigh siad gur féidir le CPhGs feabhas a chur ar ghníomhaíocht collagenase, ag cothabháil cothromaíocht dhinimiciúil shintéis agus díghrádú ECM ae, rud a chuireann moill ar fhoirmiú fiobróis ae agus a chosc.

Léiriú NF-κB p65 agus collagen I tar éis idirghabháil dhrugaí i gcealla HSC-T6

Chun comharthaí fiobróis hepatic a shainiú, rinneadh dhá phríomhghéin rialála san ae a chinneadh trí mheasúnú RT-PCR. Léirigh na sonraí go raibh leibhéil níos ísle de NF κB agus collagen cineál I mRNA ag cealla tHSC-T6 ón ngrúpa rialaithe. Os a choinne sin, rinne TGF- 1 cealla HSC-T6 ionduchtaithe chun NF-κB (P < 0.01)="" agus="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna="" a="" uprialú="" go="" suntasach,="" le="" leibhéil="" níos="" airde="" ná="" iad="" siúd="" sa="" ghrúpa="" rialaithe.="" i="" láthair="" na="" tiúchana="" éagsúla="" de="" cphgs="" ,="" torthaí="" nf-κb="" p65="" [p="" nf-κb="0.001" do="" 100="" ug/ml,="" p="" nf-κb="0.002" le="" haghaidh="" 75="" ug/ml="" ,="" p="" nf-κb="0.007" le="" haghaidh="" 50="" ug/="" ml,="" agus="" p="" nf-κb="0.012" le="" haghaidh="" 25="" ug/ml,="" faoi="" seach]="" agus="" col-i="" [p="" col-i="" {{32="" }}.006,="" p="" col-i="0.009," p="" col-i="0.014," p="" col-i="0.019," faoi="" seach]="" slonn="" laghdaithe="" na="" mrnas="" seo="" (="" fíor="">

Anailís blot an Iarthair ar leibhéal collagen I tar éis idirghabháil dhrugaí i gcealla HSC-T6

Léiríonn Fíor 8 na leibhéil slonn próitéine collagen I i gcealla HSC-T6 de na grúpaí turgnamhacha éagsúla. Laghdaíodh leibhéal slonn próitéine collagen I go suntasach sna grúpaí dáileoga éagsúla de CPhGanna (100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml, agus 25 ug/ml) i gcomparáid leis an ngrúpa TGF- 1.

Plé

Is glycosíde feinileatánóideach é CPhGs atá scoite amach agus íonaithe ó rhizome Cistanche, a úsáidtear mar leigheas luibhe traidisiúnta Síneach. Le blianta beaga anuas, léiríodh go raibh cumas cumhachtach ag CPhGs chun gortuithe ae a chosc [20]. Mar sin, bhí sé mar aidhm againn imscrúdú a dhéanamh an bhfuil éifeachtaí coisctheacha ag CPhGanna ar fhiobróis heipitíteas ag fiobróis heipteach arna spreagadh ag BSA i bhfrancaigh. Úsáidtear BJRG go coitianta mar dhruga teiripeacha le haghaidh fiobróisín hepatic tSín. Tá sé déanta as sliogáin turtar. Tá éifeachtaí ag Radix PaeoniaRubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis, etc. chun Qi agus fola a athlánú, tuirse a mhaolú, nóid a mhaolú. Ina theannta sin, léiríonn staidéir roimhe seo go bhfuil an fheidhm shoiléir aige bac a chur ar fhiobróis luath-ae, cosc ​​a chur ar iomadú cealla stórála saill, agus sintéis collagen a laghdú [21]. Mar sin, úsáideadh BJRG mar dhruga dearfach sa staidéar seo.

Tá athruithe paiteolaíocha fiobróis hepatic i bhfrancaigh a tharlódh ó instealltaí BSA cosúil leis na cinn i cioróis humanportal [22]. Laghdaigh CPhGanna leibhéal na fiobróis ae go dáileog-spleách agus chuir siad bac ar chlaochlú HSC go cealla cosúil le miófibreblast, laghdaigh sé leibhéil ardaithe serum ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1, agus an t-innéacs ae, agus léiriú collagen faoi chois go suntasach. I, collaigine III, agus TGF- 1 i bhfíochán ae.

Déantar céimeanna na fiobróis hepatic a chomhghaolú leis na leibhéil seo de HA, LN, agus IV-C, a d'fhéadfadh ról a bheith acu mar mharcóirí maidir le méid fiobróis hepatic a bhrath [23]. Tuairiscíodh gurb é HA príomh-acmhainn na maitrís eischeallach. Déanfar IV-C mar eilimint riachtanach an membrane íoslach a shintéisiú go flúirseach agus a thaisceadh go mór sna céimeanna níos luaithe den ae cirrhosis. Is iad na leibhéil serum LN agus IV-C na hinnéacsanna de ráta láimhdeachais an membrane íoslach agus léiríonn siad an méid fiobróis sa limistéar tairseach agus ribeadáin sinusoidal [24]. Is marcóir é PC III maidir le diagnóis fiobróis hepatic agus cirrhosis luath, ach níl a íogaireacht agus a shainiúlacht ard, agus níl difríocht shuntasach idir céimeanna éagsúla fiobróis i go leor tagairtí [24, 25]. Fuair ​​an staidéar seo toradh comhchosúil.

Ina theannta sin, léiríonn breathnuithe ar rannán tríchróim-dhaite de chuid H&E agus Masson gnáth-fhíocháin ae le lobules hepatic sainiúla agus sinusoids hepatic. Rinneadh neamhord ar an struchtúr ae sa ghrúpa múnla, agus cuireadh méid mór fíochán nascach in ionad an fhíocháin ae agus an sinusoid hepatic. Mar sin féin, chonacthas feabhas suntasach sna grúpaí cóireála i gcomparáid leis an ngrúpa múnla.

Is é an rud is tábhachtaí ná go n-imríonn collagen de chineál I agus de chineál collagen IIIexpression róil riachtanacha i bhforbairt fiobróis hepatic, ar féidir leis an blocáil fiobróis heipteach a chosc agus a chóireáil. Dá bhrí sin, d'fhéadfadh giniúint agus taisceadh collagen de chineál I agus de chineál collagen III san ae a bheith ina chinntitheach tábhachtach maidir le héifeachtúlacht fiobróis fhrith-hepatic. Is cítocín próibroigineach tábhachtach é an TGF freisin maidir le gortú ae agus tá sé gníomhach go bitheolaíoch le gníomhaíochtaí cógaseolaíochta iolracha[26]. Tá gá le cothromaíocht i measc na ngníomhartha seo chun hoiméastáis fíocháin a chothabháil. Tá baint ag léiriú aberrant TGF 1 le pataigineas galair ae [27, 28]. Spreagann strus ocsaídeach TGF- 1, rud a spreagann táirgeadh agus sil-leagan ECM dá bharr [29]. Mar sin, is é ceann de na straitéisí éifeachtacha chun drugaí frith-hepatic fiobróis a tháirgeadh ná gníomhairí frith-TGF{- 1 a shainaithint. Léirigh anailís imdhíon-cheimiceach go bhféadfadh na habairtí collaigine cineál I, collagen cineál III, agus TGF- 1 próiseas paiteolaíoch na fiobróis hepatic a bhrath. Laghdaítear na habairtí de collagentype I, collagen type III, agus TGF- 1 sna grúpaí cóireála, a bhí i bhfad níos ísle sa ghrúpa cóireála CPhGs ard-dáileog go háirithe, agus mhol sé gur cineál collagen éifeachtach I CPhGs, collagen cineál III. , agus coscaire TGF- 1. Is dócha go bhfeabhsóidh CPhGscan gníomhaíocht collagenase, ag cothabháil cothromaíocht dhinimiciúil shintéis agus díghrádú ECM, rud a chuireann moill ar fhoirmiú fiobróis ae agus a chosc.

Ní hamháin go bhféadfadh CPhGanna heipitíteas spreagtha BSA a fheabhsú i bhfrancaigh ach d’fhéadfadh baint a bheith acu freisin le bac a chur ar ghníomhachtú HSC in vitro. Ceaptar gurb ionann gníomhachtú HSC agus céim ríthábhachtach fibrogenesis. Sa staidéar seo, léirigh na torthaí gur mhaolaigh riarachán CPhG ó 25 go 100 ug/ml go suntasach an laghdú NF-κB p65, slonn collagen I mRNA, agus slonn próitéin collagen I i HSC.

Tá ról tábhachtach ag NF-κB maidir leis an bhfreagra imdhíonachta ar ionfhabhtú nó spreagthaí a mhodhnú [30]. D’fhéadfadh earcú cítocíní/idirghabhálaithe athlastacha a bheith mar thoradh ar thógáil NF-κB i gcealla ae, rud a chothaíonn forbairt fiobróis [31, 32]. Thairis sin, is innéacs íogair é collagen freisin a léiríonn an leibhéal fiobróis agus is ionann é agus thart ar 50 faoin gcéad den phróitéin iomlán san ae snáithíneach [33]. Mar thoradh air sin, rinneamar postáil go bhfuil an mheicníocht mhóilíneach i gcoinne fiobróis hepatic nasctha le díghníomhú NF-κB trí mheán CPhGs, ina gcuireann an tairbhe le róil sineirgisteacha maidir le maolú ar thocsaineacht imdhíon-thocsaineacht agus strus athlasadh i bhfíochán ae loit BSA, ag ceartú tuilleadh dí-mheitibileachta ar fheidhmeanna aife.

Conclúidí

Mar fhocal scoir, léiríonn ár gcuid staidéir go maolaíonn CPhG go mór méid na fiobróis hepatic a tharlódh de bharr BSA i bhfrancaigh. D’fhéadfadh a mheicníocht bheith i bpáirt ar a laghad mar gheall ar éifeacht coisctheach CPhG ar chomhdhéanamh ECM agus ar dhíghrádú ECM a spreagadh, agus/nó trí chosc díreach ar shintéis collagen typeI, collagen type III, agus léiriú TGF{{0 }}. Ar an ábhar sin, bhíomar ag súil go bhféadfaí CPhGanna a úsáid i dtáirgí cúraim sláinte nó i gcógas cliniciúil chun fiobróis ae an duine a chosc. Tá gá le staidéir amach anseo chun éifeachtúlacht CPhGanna mar dhruga fiobróise frith-heipaticeach a bhunú.

Giorrúcháin

CPhGanna: gliocóisídí anóil ón gcistanche;

BSA: albaimin serum bó-ainmhithe;

HSC-T6: Cealla stellate hepatic;

Hyp: Hidroxyproline;

BJRG: táibléad CompoundBiejiarangan;

TGF- 1: Fachtóir fáis 1 á athrú;

ALT: Alanineaminotransferase;

AST: Aspartate aminotransferase;

HA: Aigéad hyaluronic;

LN: Lainnin; PC III: Procollagen Cineál III;

IV-C: Cineál IV collagen;

NF-κB: kappa-light-slabhra-feabhsaithe núicléach de chealla B gníomhachtaithe;

RT-PCR: imoibriú slabhra Reversetranscriptase-polymerase;

SDS-PAGE: Leictreafóiréis glóthach dodeicil sulfáit-polyacrylamide sóidiam.

Leasanna iomaíocha

Dearbhaíonn na húdair nach bhfuil aon leasanna iomaíocha acu

Ranníocaíochtaí údair

Rinne TL, JZ, SPY, LM, MT, agus SLZ na turgnaimh a cheapadh agus a dhearadh. Rinne SPY, TL, agus JZ anailís ar na sonraí. Scríobh SPY agus JZ an lámhscríbhinn. Rinne TL,LM agus JZ athbhreithniú ar an lámhscríbhinn. Léigh agus cheadaigh na húdair go léir an lámhscríbhinn deiridh.

Admháil

Thacaigh Fondúireacht Náisiúnta Eolaíochta Nádúrtha na Síne (81260624) leis an taighde seo. Ba mhaith leis na húdair a mbuíochas ó chroí a ghabháil leis an Ollamh Tao Liu as na feabhsuithe a mhol sé do scríobh an pháipéir seo.

Sonraí an Údair

1An Roinn Tocsaineolaíochta, Scoil na Sláinte Poiblí, Ollscoil Leighis Xinjiang, Uimh. 393 Bóthar Xinyi, Urumqi 830011Xinjiang Uyghur AutonomousRegion, China. Saotharlann 2Key do Leigheas Uighur, Institiúid MateriaMedica Xinjiang, Urumqi 830004, an tSín. 3Uimh. 140 Xinhua Bóthar Theas, Tianshan Dúiche, Urumqi 830000Xinjiang Uyghur Réigiún Uathrialach, an tSín.

Cliceáil anseo chun seiceáilCistanchetubulosatáirgí

Tagairtí
1. Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Stádas reatha na dteiripí frithshnáithíneacha núíosacha in othair a bhfuil galar ae ainsealach orthu. Ther Adv Gastroenterol. 2011; 4(6):391–417.
2. Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Cealla stellate hepatic agus fiobróis ae. Compr Fisiol. 2013; 3(4):1473–92.
3. Hernandez-Gea V, Friedman SL. Pathogenesis fiobróis ae. Annu Rev Pathol. 2011; 6:425–56.
4. Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Alt athbhreithnithe: inchúlaitheacht cioróis. Cógaslann Bia Ther. 2012; 36(9):824–32.
5. Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Acadamh Eolaíochtaí na Síne. 23ú eag. An tSín: Coiste Eagarthóireachta Flora na Síne; 2013. lch. 1–16.
6. Coimisiún Pharmacopoeia na Síne d'Aireacht Sláintíochta Daon-Phoblacht na Síne. Pharmacopoeia na Síne, Cuid 1. An tSín: Teach Foilsitheoireachta an Tionscail Cheimiceach; 2010. lch. 126.
7. Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Dul chun cinn taighdefeinileatánóideachgliocóisídíóCistanchetubulosa. Pharm Láir Theas. 2012; 10:692–5.
8. Li J, Huang D, He L. Éifeacht Rou Cong Rong (Herba Cistanches Deserticolae) ar thocsaineacht atáirgthe i lucha a tharlódh trí glycosíde Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014; 34(3):324–32.
9. Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, et al. ACE, agus coscairí comhiomlánaithe pláitíní ó Tamarix hohenackeri Bunge (plandaí ósta deLuibhcistéir) ag fás i Xinjiang. Pharmacogn Mag. 2014; 10(38):111–7.
10. Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P, et al. Feabhsú colitis dextran sulfáit sóidiam-spreagtha i lucha le sliocht echinacoside-saibhrithe deCistanchetubulosa. Phytother Res. 2014; 28(1):110–9.
11. Wong HS, Ko KM. Spreagann Herba Cistanches rothaíocht redox glutathione cheallacha ag speicis ocsaigine imoibríocha a ghintear ó riospráid mitochondrial i cardiomyocytes H9c2. Pharm Biol. 2013; 51(1):64–73.
12. Zhang SJ, Liu L, Yu JY. ARP: Modh RP-HPLC chun echinacoside agus acteoside a chinneadh go comhuaineach i Herbie Cistanches. Chin Pharm J 2004; 39(10): 740-741.
13. Zhu QG, Fang BW, Zhu QN, Wu HS, Fu QL. Staidéar ar shamhail imdhíonachta fiobróis an ae ainmhithe a tharlódh de bharr albaimin séiream buaibheach. Chin J Pathol. 1993; 22:121–2.
14. Qin DM, Wen ZP, Nie YR, Yao GM. Éifeacht eastóscáin glandulosum Cichorium ar fhiobróis hepatic spreagtha CCl4-. Corrán Dearg na hIaráine Med J. 2013; 15, e10908.
15. Niu HM, Zeng DQ, Long CL, Peng YH, Wang YH, Luo JF, et al. Diterpenoids Clerodane agus flavonoids prenylated ó Dodonaea viscosa. J Asian Nat Prod Res. 2010; 12(1):7–14.
16. Li WW, Song XW, Wang HW, Shen BS, Wang QC. Comhghaol NF-κB agus céimniú paiteolaíoch fiobróis ae in othair le heipitíteas ainsealach B. Imdhíonacht Chin J. 2013; 29(3):251–4.
17. Zhang GL, Shi XF, Ran CQ, Xu M, Zhu ZJ. Éifeachtaí saponins iomlána Panax notoginseng i gcoinne fiobróis ae i bhfrancaigh. Acta Academiae Medicinae Militaris Treasach. 2007; 29: 2212–4.
18. Rossi O, Maggiore L, Necci F, Koberling O, MacLennan CA, et al. Comparáid idir thástálacha dathmhéadracha agus anailís chainníochtúil aimínaigéad le haghaidh cainníochtú próitéine ar mhodúil ghinearálaithe le haghaidh antaiginí membrane (GMMA). Biteicneolaíocht Mol. 2015; 57(1):84–93.
19. Dang SS, Li YP. Dul chun cinn maidir le tuiscint a fháil ar an ról atá ag fachtóir fáis- 1 a chlaochlú i bpataigineas fiobróis ae. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi. 2010; 18:1631–6.
20. Zhao J, Liu T, Ma L, Yan M, Zhao Y, Gu Z, et al. Éifeacht chosanta acteoside ar ghortú ae imdhíoneolaíoch de bharr Bacillus Calmette-Guerin móide lipopolysaccharide. Planta Med. 2009; 75(14):1463–9.
21. Yang FR, Fang BW, Lou JS. Éifeachtaí pills Fufang Biejia Ruangan ar fiobróis hepatic in vivo agus in vitro. Domhanda J Gastroenterol. 2013; 19(32):5326–33.

22. Liu P, Fang BW, Liu C. An ról atá ag fachtóir fáis 1 a athrú agus a ghlacadóir i fibrogenesis ae spreagtha imdhíoneolaíoch i bhfrancaigh agus éifeacht polaisiúicríd cordyceps orthu. Smig J Hepatol. 1998; 6:232–3.

23. Xu GG, Luo CY, Wu SM, Wang CL. An gaol idir céimniú hepaticfiobróis agus leibhéil na bithcheimice serum. HBPD INT. 2002; 1:246–8.Tú et al. DARU Journal of Pharmaceutical Sciences (2015) 23:52 Lch 12 de 13

24. Liu J, Wang JY, Lu Y. Marcóirí fiobróis serum chun fiobróis ae a dhiagnóisiú. smigJ Intéirneach Med. 2006; 145:475-7.

25. Li CZ, Wan MB, Zeng MD, Mao YM, Fan ZP, Cao AP, et al. Réamh-staidéar ar an meascán de pharaiméadair neamh-ionracha i ndiagnóis fiobróis ae. Smig J Hepatol. 2001; 9:261–3.

26. Chen YL, Li ZY. An gaol idir TGF- 1, PDGF-BB, CTGF, agus heipitíteas ainsealach B le fiobróis. Chin J Diffic Compl Cas. 2010;9:19–20.

27. Sferra R, Vetuschi A, Catitti V, Ammanniti S, Pompili S, Melideo D, et al. Laghdaíonn eastóscáin Boswellia serrata agus Salvia miltiorrhiza fiobróis hepatic DMN-spreagtha i lucha trí íosrialáil TGF-beta1. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2012; 16(11):1484–98.
28. Liu L, Li XM, Chen L, Feng Q, Xu LL, Hu YY, et al. Tionchar Gypenosides ar TGF- 1/chonair smad i fiobróis ae arna spreagadh ag teitreaclóiríd charbóin i bhfrancaigh. Intéirneach J Integr Med. 2013; 1:1–6.
29. Zhang BJ, Xu D, Guo Y, Ping J, Chen LB, Wang H. Cosaint trí mheicníocht frithocsaídeach berberine i gcoinne fiobróis ae francach a tharlódh de bharr fachtóirí hepatotocsaineacha iolracha. Clin Exp Pharmacol Fisiol. 2008; 35(3):303–9.
30. Tornatore L, Thotakura AK, Bennett J, Moretti M, Franzoso G. An fachtóir núicléach kappa B cosán comharthaíochta: meitibileacht a chomhtháthú le athlasadh. Treochtaí Cell Biol. 2012; 22(11):557–66.
31. Luedde T, Schwabe RF. NF-κB sa ghortú a nascann ae, fiobróis, agus carcanóma hepatocellular. Nat Rev Hepatol Gastroenterol. 2011; 8(2):108–18.
32. Petrasek J, Csak T, Szabo G. Gabhdóirí cosúil le dola i ngalar ae. Adv Clin Chem. 2013; 59:155–201.
33. Wang Y, Cheng M, Zhang B, Nie F, Jiang H. Cuireann forlíonadh aiste bia sú fraochán feabhas ar léiriú hepatic de mhiotaloitiainéin agus maolaíonn sé fiobróis ae i bhfrancaigh. PLoS a hAon. 2013; 8, e58659.