Party1:Airíonna frith-athlastacha agus frithocsaídeacha de mhuilléad méar (Eleusine Coracana (L.) Gaertn.) Cineálacha Saothraithe i Srí Lanca

Le haghaidh tuilleadh eolais. teagmháiltina.xiang@wecistanche.com

Tá leitheadúlacht na ngalar athlastach-idirghabhálaithe agus ocsaídiúcháin a bhaineann le strus ag méadú ar fud an domhain, rud a chruthaíonn éileamh méadaitheach ar fhoinsí núíosachafrith-athlastachgníomhairí agusfrithocsaídeoirí. Díríodh an staidéar seo ar chinneadh in vitro arachidonate {{{0}}lipoxygenase (A5-LOX), xanthine oxidase (XO), hyaluronidase, gníomhaíochtaí coisctheacha pléasctha ocsaídiúcháin, agus airíonna frithocsaídeacha Ravi, Rawana. , agus cineálacha muiléad méar Oshadha ag baint úsáide as sleachta eatánólacha agus meatánólacha. I measc na sleachta go léir, léirigh sliocht meatánólach Oshadha na gníomhaíochtaí coisctheacha A5-LOX ∶ 484.42ug/ml) agus XO (ICsvalue∶764.34ug/ml) is airde. Léirigh gach sliocht níos lú ná 50 faoin gcéad de ghníomhaíocht coisctheach hyaluronidase ag tiúchan 1 mg/ml, léirigh eastóscáin meatánólach poitéinseal coisctheach measartha ar speicis ocsaigine imoibríocha (ROS) a ghintear ó fhagaicítí lánfhola, le raon luachanna ICs0. idir 26.9 agus 27.7 ug/ml, i gcomparáid le iobúpróifein (luach IC.:11.18ug/ml). Léirigh na sleachta go léir cosc ​​láidir ar ROS a tháirgtear ó neutrophils polymorphonuclear scoite ó fhuil an duine i gcomparáid le ibuprofen (luach IC: 2.47 ug/ml) agus bhí luachanna IC eastóscáin meatánólacha agus eatánóil idir 0.29 agus 0.47 ug/ml agus 1.35 go ​​1,70ug/ml agus 1.35 go ​​1,70ug/ml. faoi ​​seach. Bhí méideanna suntasacha arda de chomhdhúile feanólacha ag gach sliocht lena n-áirítearflavonoidsagus an poitéinseal chun 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-aigéad sulfónach) (ABTS) catation,2,2-défheinile-1-picryl-hiodrasail( DPPH), agus fréamhacha ocsaigine. Thairis sin, bhí siad in ann iain miotail agus iain miotail chelate a laghdú, rud a chuir deireadh le frithghníomhartha giniúna radacacha. Is é seo an chéad tuarascáil ar A5-LOX, XO, hyaluronidase, agus airíonna coisctheacha pléasctha ocsaídiúcháin ar aon sliocht d'aon chineál muiléad méar a shaothraítear i Srí Lanca. Léirigh na torthaí go bhféadfaí úsáid a bhaint as na sleachta muiléad méar seo mar fhoinsí nádúrtha d’iarrthóirí drugaí frith-athlastacha. Ina theannta sin, léirigh na torthaí gur foinsí maithe frithocsaídeoirí iad cineálacha Ravi, Rawana agus Oshadha. Dá bhrí sin, d’fhéadfadh ról tábhachtach a bheith ag tomhaltas na gcineálacha muiléad méar seo ar bhonn rialta maidir le galair ocsaídiúcháin a bhaineann le strus a chosc agus a bhainistiú.

Cliceáil anseo chun níos mó táirgí a fhoghlaim

1. Réamhrá

AthlasadhIs imoibriú cosantach animdhíonachcóras chun spreagthaí díobhálacha cosúil le pataiginí, cealla damáiste, agus greannú ailléirgeach nó ceimiceach a dhíchur chomh maith le tús a chur leis an bpróiseas cneasaithe. Cé gur gnáthfhreagairt é athlasadh mura bhfuil sé rialaithe, bíonn go leor galair ghéarmhíochaine agus ainsealacha mar thoradh ar athlasadh iomarcach. Faoi láthair, tá leitheadúlacht na ngalar athlastach-idirghabhála ag méadú ar fud an domhain, rud a chruthaíonn éileamh méadaitheach ar ghníomhairí frith-athlastacha núíosacha agus éifeachtacha [1, 2].

Is eochair-einsím é Arachidonate 5-lipoxygenase(A5-LOX) a bhaineann le bithshintéis idirghabhálaithe láidre neamhoird athlastacha agus frithghníomhartha ailléirgeacha. Catalaíonn sé foirmiú leukotrienes ó aigéad arachidónach [3]. Is idirghabhálaithe endogenous iad leukotrienes i pathogenesis roinnt galair athlastacha lena n-áirítear asma, riníteas ailléirgeach, bronchitis ainsealach, airtríteas réamatóideach, galar putóige athlastach, agus frithghníomhartha ailléirgeacha [3,4]. Mar sin, tá cosc ​​ar A5-LOX tábhachtach chun neamhoird athlastacha éagsúla a chosc agus a chóireáil.

Déanann Xanthine oxidase(XO) ocsaídiú hypo-xanthine go xanthine agus xanthine go haigéad úrach a chatalú[5]. Cuireann coscairí XO bac ar bhithshintéis aigéad uric agus dá bhrí sin laghdaítear leibhéil aigéad uric chomh maith le strus ocsaídiúcháin soithíoch. Le linn gníomh catalaíoch XO, cruthaítear speiceas ocsaigin imoibríoch (ROS), agus mar sin, tá ról pataigineach ag XO i neamhoird athlastacha eile freisin. Dá bhrí sin, tá coscairí XO tábhachtach i gcóireáil neamhoird athlastacha éagsúla in éineacht le gníomh catalaíoch XO [2,5].

Is einsím lysosomal é Hyaluronidase a chatalaíonn hidrealú mucopolysaccharides cosúil le haigéad hyaluronic. I airtríteas réamatóideach, díghrádaíonn hyaluronidase aigéad hyaluronic go ró-mhór agus laghdaítear a mhéid agus a meáchan móilíneach, rud a tháirgeann comharthaí airtríteacha [6]. Tá cosc ​​ar dhíghrádú aigéid hyaluronic ríthábhachtach agus ríthábhachtach chun coinníollacha paiteolaíocha trí mheán hyaluronidase a rialú[7].

I gcoinníollacha athlastacha, tarraingítear cealla imdhíonachta chuig suíomh an athlasadh. Le linn imoibrithe cosanta agus imdhíoneolaíocha, déantar ocsaídí NADPH a chónaíonn sna cealla imdhíonachta a ghníomhachtú agus gineann siad ROS i gcainníochtaí móra ag cruthú pléasctha ocsaídiúcháin [1, 8]. Tá cainníochtaí íseal agus measartha de ROS tairbheach i bpróisis fiseolaíocha éagsúla. Mar sin féin, dírialaíonn ró-tháirgeadh ROS na feidhmeanna ceallacha rud a chuireann feabhas ar an riocht athlastach [8,9]. Dá bhrí sin, d’fhéadfadh cosc ​​a chur le pléasctha ocsaídiúcháin de bharr ROS chun galair athlastacha-idirghabhála a chosc agus a bhainistiú.

Le linn fosfarylation ocsaídiúcháin,fréamhacha saor in aiscelena n-áirítear ROS a fhoirmiú mar sheachtháirgí [10]. Chomh maith le meitibileacht cheallacha gnáth, tá go leor fachtóirí eile a bhfuil mar thoradh ar an foirmiú na fréamhacha saor in aisce, agus má tá an ráta giniúna fréamhacha saor in aisce níos mó ná an ráta neodraithe, strus ocsaídiúcháin. cruthaithe, agus cuireann sé go mór le gach galar athlastach. Ós rud é go bhfuil frithocsaídeoirí in ann foirmiú fréamhacha saor in aisce a chosc agus fréamhacha saor in aisce a mhúchadh, tá cothromaíocht idir frithocsaídeoirí agus fréamhacha saor in aisce riachtanach chun feidhmeanna fiseolaíocha a chothabháil i gceart [8,11,12].

Is é an muiléad méar (Eleusine coracana(L.)Gaertn.) an muiléad beag is tábhachtaí sna trópaicí, agus tá roinnt airíonna teiripeacha ag muiléad méar tuairiscithe roimhe seo [13-17]. Mar sin féin, maidir leis na cineálacha muiléad méar a shaothraítear agus a chaitear faoi láthair i Srí Lanca, tá easpa fianaise eolaíoch ar na hairíonna teiripeacha.

agus tairbhí sláinte féideartha do thomhaltóirí. Dá bhrí sin, tá sé ríthábhachtach staidéar a dhéanamh ar airíonna frith-athlastacha agus frithocsaídeacha de chineálacha muiléad méaracha Sri Lankan agus a n-acmhainneacht a aithint chun stádas cothaithe agus sláinte na dtomhaltóirí a fheabhsú. Tá leitheadúlacht na ngalar athlastach-idirghabhálaithe agus ocsaídiúcháin a bhaineann le strus ag méadú ar fud an domhain, rud a chruthaíonn éileamh atá ag teacht chun cinn ar fhoinsí núíosacha oibreán frith-athlastach agus frithocsaídeoirí[1, 2]. Leis an gcúlra seo, díríodh sa staidéar reatha ar mheasúnacht a dhéanamh ar chineálacha muiléad méir Sri Lankan le haghaidh airíonna frith-athlastacha in vitro i dtéarmaí A5-LOX, XO, hyaluronidase, gníomhaíochtaí coisctheacha pléasctha ocsaídiúcháin, agus airíonna frithocsaídeacha ag baint úsáide as measúnachtaí frithocsaídeacha éagsúla. .

2. Ábhair agus Modhanna

2.1.Bailiú Samplach agus Ullmhúchán. Bailíodh cineálacha muiléad méar a mholann an Roinn Talmhaíochta do shaothrú i Srí Lanca, eadhon, Ravi, Rawana, agus Oshadha, ón Institiúid Taighde agus Forbartha Barra Allamuigh (FCRDI), Mahailuppallama, Srí Lanca. Saothraíodh na cineálacha seo i gceapacha turgnamhacha sa Chrios Tirim Íseal Tíre, ag FCRDI, Mahailuppallama, agus dheimhnigh Seirbhís Deimhnithe Síl na Roinne Talmhaíochta, Srí Lanca na síolta.

Baineadh na síolta muiléad méar amach (TM 05C, Satake Cor-poration, an tSeapáin), agus fuarthas plúir ó slánghráin trí mhuilleoireacht (Pulverisette 14, Fritsch, an Ghearmáin) agus ag dul trí chriathar 0.5 mm. Baineadh plúir slánghráin le eatánól agus meatánól ar leithligh. Baineadh plúr gráin iomláin (100g) leis an tuaslagóir (400 ml) thar oíche ag teocht an tseomra (28±2 céim ) ag baint úsáide as stirreoir maighnéadach agus lártheifneoirithe ag 4000 rpm ar feadh 20 nóiméad. Bailíodh an sásar ar leithligh, agus rinneadh an t-iarmhar a aistarraingt faoi dhó ag baint úsáide as na coinníollacha céanna. Comhcheanglaíodh na sútháin agus galaíodh iad go triomacht faoi bhrú laghdaithe ag 40 céim ag baint úsáide as evaporator rothlach (R-114, Büchi Labortechnik AG, An Eilvéis). Stóráladh na heastóscáin saor ó thuaslagóirí i gcoimeádáin ghloine aerdhíonach ag céim{-20 go dtí gur úsáideadh iad don anailís.

2.2.Einsímí, Ceimiceáin, agus Trealamh. Imoibrí feanól Folin-Ciocalteu, clóiríd alúmanaim,2,4,6-Tri(2-piridil)-s-triazine (TPTZ), 2,2'-azobis (2-amidinopropane) déhidreaclóiríd (AAPH), 2, 2-défheinile-1-picricrihidrazil (DPPH), quercetin,6-hiodrocsa-2,5,7,8-teitreamheitiolchróman{{19} }aigéad carbocsaileach (Trolox), aigéad eitiledé-aimíntetraaicéiteach (EDTA), 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-aigéad sulfónach), salann diamóiniam(ABTS), fluaraiséis,3-( 2-Piridile)-5,6-défheinile-1,2,4-triazine-p,salann monosodium aigéid pdisulfónacha

ceannaíodh hiodráit (ferrozine), arachidonate 5-lipoxygenase, aigéad linóleic, baicalein, xanthine oxidase, xanthine, allopurinol, hyaluronidase, salann sóidiam aigéad hyaluronic, p-dimethylaminobenzaldehyde, aigéad galach, aigéad tannic, sulfocsaíd démheitile, agus ibuprofen ó Sigma-Aldrich, MO, Stáit Aontaithe Mheiriceá. Ceannaíodh HBSs* plus agus HBSS ó Thermo Fisher Sci-entific Inc., Massachusetts, SAM. Ceannaíodh Zymosan ó Wako Pure Chemical Industries Ltd., Osaka, an tSeapáin.

Ceannaíodh Luminol (3-aminophthalhydrazide) ó Alfa Aesar GmbH & Co KG, Karlsruhe, an Ghearmáin. Ceannaíodh meán deighilte limficítí ó MP Biomedicals, Inc., Ohio, SAM. Ba de ghráid ACS, HPLC, agus anailíseacha na ceimiceáin agus na himoibrithe eile go léir a úsáideadh sna turgnaimh. Chun cumas ionsúcháin radacach ocsaigine a chinneadh, baineadh úsáid as léitheoir micreaphláta fluaraiseachta (SpectraMax-Gemini EM, Molec-ular Devices Inc., USA). Le haghaidh measúnachtaí cemiluminescence, baineadh úsáid as luminometer (Luminoskan RS, Labsystems, An Fhionlainn). I gcás gach bithmheasúnaithe eile, baineadh úsáid as léitheoir micreaphláta (Spectra-Max Plus384, Molecular Devices Inc, USA).

2.3.Cinneadh ar Ábhar Feanólach Iomlán. Socraíodh ábhar feanólach iomlán (TPC) de réir an mhodha Folin-Ciocalteu 【18】. Meascaíodh sliocht muiléad méar (218ul) le 110ul d’imoibrí Folin-Ciocalteu caolaithe 10 n-uaire úrullmhaithe agus 70ul de thuaslagán carbónáit sóidiam (10 faoin gcéad w/v) agus é gortha ag teocht an tseomra (RT) ar feadh 30 nóiméad. Tomhaiseadh ionsú ag 765 nm. Úsáideadh aigéad galach chun an cuar caighdeánach (y{=0.0532x móide 0.0339; r=0.9992) a bhreacadh, agus ríomhadh TPC mar mg coibhéis d'aigéad gailleach (GAE) in aghaidh 100g plúir ar thirim tirim bonn meáchain.

2.4. Cinneadh ar Ábhar Iomlán Flavonoid. Socraíodh ábhar iomlán flavonoid (TFC) de réir modh dathmhéadrach clóiríd alúmanaim [19]. Meascaíodh sliocht muiléad méar (100ul) le tuaslagán clóiríd alúmanaim （2 faoin gcéad w / v, 100ul）, gortha ar feadh 10 nóiméad ag RT, agus tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 415nm. Úsáideadh quercetin chun an cuar caighdeánach (y=0.0349x-0.2091) a bhreacadh; r²=0.9974）, agus ríomhadh TFC mar choibhéis mg quercetin in aghaidh 100g plúr ar bhonn meáchain thirim.

2.5.Gníomhaíocht Scavening Radacach DPPH a chinneadh. Cinneadh an cumas chun fréamhacha DPPH a scavenge de réir an mhodha a ndearna Blois [20] cur síos air. Meascaíodh sliocht méar-mhíle (50 ul) le 90ul meatánóil agus 60ul de thuaslagán DPPH (0.02 faoin gcéad w/v) agus goradh ag RT sa dorchadas ar feadh 10 nóiméad. Tomhaiseadh luachanna ionsúcháin an tsampla (As) agus an rialaithe (Ac) ag 517nm. Baineadh úsáid as Trolox mar chaighdeán. Ríomhadh gníomhaíocht scavenging radacach DPPH mar chosc ar chéatadán ag baint úsáide as Cothromóid(1). Ríomhadh luach IC ag baint úsáide as graif dáileog-fhreagartha.

2.6. Cinneadh ar Ghníomhaíocht Scagaireachta Radacach Aibhn ABTS. Cinneadh an cumas chun radacacha ABTS a scaveneáil de réir an mhodha a ndearna Re et al. [21] le roinnt modhnuithe. Ullmhaíodh tuaslagán radacach cataithe ABTS trí 10mg de ABTS a ghoradh i 2.5 ml de shársulfáit photaisiam ag 37 céim C sa dorchadas ar feadh 16h agus trí 7 huaire a chaolú le saline maolánach fosfáite 50mM (pH 7.4). Meascaíodh sliocht muiléad méar (12.5ul) le saline maolánach fosfáit (147.5ul) agus tuaslagán radacach iarratais ABTS a ullmhaíodh go húr (40ul) agus gor é ag RT sa dorchadas ar feadh 10 nóiméad. Tomhaiseadh luachanna ionsúcháin an tsampla(As) agus an rialaithe (Ac) ag 734nm. Baineadh úsáid as Trolox mar chaighdeán. Ríomhadh gníomhaíocht scabhála radacach ABTS mar chosc ar chéatadán ag baint úsáide as Cothromóid(2). Ríomhadh luach IC ag baint úsáide as graif dáileog-fhreagartha.

2.7.Cumas Ionsúite Ocsaigine a Chinneadh (ORAC). Rinneadh ORAC a mheas de réir an mhodha a ndearna Ou et al cur síos air.[22] le roinnt modhnuithe. Ullmhaíodh tuaslagáin fluorescein (4.8uM) agus AAPH(40mg/ml) i maolán fosfáite 75mM (pH 7.4). Meascaíodh sliocht muiléad méar (10ul) le 40ul de mhaolán fosfáit agus 100ul de fluaraiséin agus gor é ag 37 céim ar feadh 10 nóiméad. Cuireadh AAPH(50ul) leis, agus tomhaiseadh an meath ar fhluaraiséis ag tonnfhaid excitation agus astaithe 494nm agus 535nm, faoi seach, ag 37 céim ar feadh 35 nóiméad ag eatraimh I min ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta fluaraiseachta. Baineadh úsáid as Tro-lox mar an caighdeán. Taifeadadh an t-achar faoi chuar(AUC)luachanna an tsampla(AUCanna), an rialaithe (AUC), agus Trolox (AUC-). Ríomhadh luach ORAC trí úsáid a bhaint as Cothromóid(3) i gcás conc. sheasann do thiúchan. Cuireadh na torthaí in iúl mar choibhéis mg Trolox in aghaidh an 100g plúr ar bhonn meáchain thirim.

2.8. Cinneadh ar Ghníomhaíocht Chealaithe ian Feiriúla (FIC).. Cinneadh an cumas chun hiain neamhfheiriúla a chelate de réir an mhodha a ndearna Carter cur síos air [23]. Meascaíodh sliocht muiléad méar (100ul) le tuaslagán sulfáit neamhfheiriúil 1 mM (20ul) agus 40ul d'uisce driogtha. Ansin, cuireadh tuaslagán ferrozine 1 mM (40ul) leis agus gor é ar feadh 10 nóiméad ag RT. Taifeadadh luachanna ionsúcháin an tsampla(As) agus an rialaithe(Ac) ag 562nm. Baineadh úsáid as EDTA mar an caighdeán. Ríomhadh gníomhaíocht FIC mar chéatadán chelation ag baint úsáide as Cothromóid (4).

2.9.Cinneadh Cumhacht Frithocsaídeach Laghdaithe Ferric (FRAP). Socraíodh FRAP de réir an mhodha a ndearna Benzine agus Szeto cur síos air [24] le roinnt modhnuithe. Ullmhaíodh imoibrí FRAP trí mhaolán aicéatáit 300mM (pH 3.6), clóiríd ferric 20mM, agus 10mM TPTZ a mheascadh i gcóimheas 10:1:1 agus gor ag 37 céim C ar feadh 10 nóiméad. Meascaíodh sliocht muiléad méar(20ul) le 30ul de mhaolán aicéatáite agus 150ul d’imoibrí FRAP a ullmhaíodh go húr, gortha ag RT ar feadh 8 nóiméad, agus taifeadadh ionsúiteacht ag 600nm. Baineadh úsáid as Trolox chun an cuar caighdeánach (y=0.17x móide 0.15; 产=1.00) a bhreacadh, agus ríomh FRAP mar choibhéisí mg Trolox in aghaidh an 100g plúir ar bhonn meáchain thirim.

2.10.Gníomhaíocht Chosc A5-LOX a chinneadh. A{{{0}}Measúnaíodh gníomhaíocht choisctheach LOX de réir an mhodha a ndearna Tappel cur síos air [25] le roinnt modhnuithe. Meascaíodh sliocht muiléad méar (10ul) le 115ul de mhaolán fosfáit sóidiam 100mM (pH 8.0) agus 50ul de thuaslagán A5-LOX(5000U/ml) agus gor é ag RT ar feadh 10 nóiméad. Cuireadh tús leis an imoibriú nuair a cuireadh 25ul d'aigéad linóleic 0.08mM leis. Taifeadadh an t-athrú ionsúcháin ag 234nm ag eatraimh 1min ar feadh 10 nóiméad ag RT, agus taifeadadh luachanna uastreoluas (Vmxk) an tsampla (Vmaxs) agus an rialaithe (Vmaxc). Baineadh úsáid as Baicalein mar an caighdeán. A5-Ríomhadh gníomhaíocht choisctheach LOX mar chosc ar chéatadán aoise trí úsáid a bhaint as Equation(5).Ríomhadh ICs.value ag baint úsáide as graif dáileog-fhreagartha.

2.11.Gníomhaíocht Chosc XO a Chinneadh. Cinneadh gníomhaíocht coisctheach XO de réir an mhodha a ndearna Lee et al cur síos air. [26] le roinnt modhnuithe. Meascaíodh sliocht muiléad méar (10ul) le 150ul de mhaolán fosfáit sóidiam 50 mM (pH 7.4) agus 20ul de XO (0.15U/ml) agus gor é ar feadh 10 nóiméad ag RT. Cuireadh tús leis an imoibriú nuair a cuireadh 20ul de 0.1 mM xanthine leis. Taifeadadh an t-athrú ionsúcháin ag 295nm ag eatraimh íosta ar feadh 15 nóiméad ag RT, agus taifeadadh luachanna Vmax an tsampla (Vmaxs) agus an rialaithe (Vmaxc). Baineadh úsáid as Allopurinol mar an caighdeán. Ríomhadh gníomhaíocht choisctheach XO mar chosc ar chéatadán trí úsáid a bhaint as Cothromóid(6).Ríomhadh ICs.value ag baint úsáide as graif dáileog-fhreagartha.

2.12.Gníomhaíocht Chosc Hyaluronidase a Chinneadh. Rinneadh gníomhaíocht coisctheach Hyaluronidase a mheas de réir an mhodha a ndearna Sahasrabudhe agus Dedhar cur síos air [27] le roinnt modhnuithe. Meascaíodh sliocht muiléad méar (50ul) le 10ul de hyaluronidase (8400U/ml) agus gor é ag 37 céim ar feadh 10 nóiméad. Cuireadh an einsím i ngníomh trí 20ul de chlóiríd chailciam (12.5mM) a chur leis agus gor ag 37 céim ar feadh 10 nóiméad. Cuireadh tús leis an imoibriú trí hyaluronate sóidiam (50ul) a chur leis agus é a ghoradh ag 37 céim C ar feadh 40 nóiméad. Ansin, cuireadh 10ul de hiodrocsaíd sóidiam 0.9 M agus 20ul de bhóráit sóidiam 0.2M leis agus gor é ag 100 céim ar feadh 3 nóiméad. Tar éis fuaraithe go RT, cuireadh 50ul de 67mM p-dimethylaminobenzaldehyde leis agus gor é ag 37 céim ar feadh 10 nóiméad. Tomhaiseadh luachanna ionsúcháin an tsampla(As) agus an rialaithe(Ac) ag 585nm. Baineadh úsáid as aigéad tannic mar an caighdeán. Ríomhadh gníomhaíocht choisctheach Hyaluronidase mar chosc ar chéatadán ag baint úsáide as Cothromóid (7).

2.13.Gníomhaíochtaí Cosc ar Phléasctha Ocsaídeacha a Chinneadh. Cinneadh féidearthachtaí frith-athlastacha i dtéarmaí gníomhaíochtaí coisctheacha pléasctha ocsaídiúcháin san fhuil iomlán daonna agus neutrophils polymorphonuclear scoite trí úsáid a bhaint as measúnacht chemiluminescence feabhsaithe luminol [28, 29] le roinnt modhnuithe. Rinneadh turgnaimh ag Ionad an Dr. Panjwani um Leigheas Móilíneach agus Taighde Drugaí, an Lárionad Idirnáisiúnta um Eolaíochtaí Ceimiceacha agus Bitheolaíocha, Ollscoil Karachi, an Phacastáin, agus tá imréiteach eiticiúil ag an institiúid le haghaidh staidéir ar fhuil dhaonna ón gcoiste neamhspleách eitice, ICCBS, UoK . Níl: ICCB-S/IEC-008-BC-2015/Prótacal/1.0.

2.13.1. Cinneadh ar Ghníomhaíocht Chosc ar Phléasctha Ocsaídeach san Fhuil Dhaonna Uile. Bailíodh fuil dhaonna(1ml) go aiseipteach trí phuncture féitheacha isteach i bhfeadán heipirínithe ó oibrí deonach sláintiúil nach raibh ag caitheamh tobac, nár ghlac aon chógas nó forlíontaí ar feadh níos mó ná seachtain amháin, agus a caolaíodh (caolú 1:20) le HBSanna móide *(Hanks Balanced). Tuaslagán Salann, ina bhfuil cailciam agus maignéisiam). Meascaíodh sliocht muiléad méar (25ul) le fuil iomlán caolaithe (25 ul) agus gor é ag 37 céim C ar feadh 15 nóiméad. Ansin, cuireadh 25ul de serum opsonized zymosan agus 25ul de luminol. Rinneadh monatóireacht ar tháirgeadh ROS pléasctha ocsaídiúcháin ar feadh 50 nóiméad ag baint úsáide as luminometer le scanadh arís agus arís eile ag eatraimh 30s agus 1 s pointí tomhais ama. Baineadh úsáid as Ibuprofen mar an druga caighdeánach. Ríomhadh an céatadán coiscthe ag baint úsáide as Cothromóid (8).

áit arb é RLU an léamh luminometer i dtéarmaí na n-aonad solais choibhneasta (RLU) le haghaidh rialaithe agus gurb é RLU an léamh luminometer in RLU don sampla. Ríomhadh luach IC ag baint úsáide as graif dáileog-fhreagartha.

2.13.2. Cinneadh ar Ghníomhaíocht Chosc ar Phléasctha Ocsaídeacha i Neodróifilí Pola-moirf-núicléacha Scoite. Meascaíodh fuil iomlán an duine (10 ml) le toirteanna comhionanna HBSS (Hanks Réiteach Salann Cothromaithe, gan cailciam agus maignéisiam) agus meán deighilte limficítí (LSM) agus lig sé d'erythrocítí socrú síos ar feadh 30 nóiméad ag RT. Ansin, leagadh an plasma go cúramach ar LSM agus lártheifneoiriú ag 400 × g ar feadh 20 nóiméad ag RT. Baineadh an supernatant; Cuireadh cealla fola dearga sa millíní mar thoradh air sin trí mheascadh le huisce fuar dí-ianaithe, measctha le HBSS7 fuar, agus lártheifneoirithe ag 300 × g ar feadh 10 nóiméad ag 4 céim . Rinneadh an millín a nite faoi dhó, agus rinneadh seiceáil ar inmharthanacht na neodrófilí polymorphonuclear mar thoradh air trí úsáid a bhaint as modh eisiamh gorm Trypan. Coigeartaíodh tiúchan na gceall go dtí cealla céime 1 × 10 / ml. Meascadh neodróifilí polymorphonuclear scoite (25 山l) le sliocht muiléad méar (25ul) agus goraíodh iad ar feadh 15 nóiméad ag 37 céim . Ansin, cuireadh 25ul de serum opsonized zymosan agus 25ul de luminol leis, agus rinneadh monatóireacht ar tháirgeadh ROS pléasctha ocsaídiúcháin ar feadh 50 nóiméad ag baint úsáide as luminometer le scanadh arís agus arís eile ag eatraimh 30s agus am tomhais pointí ls. Baineadh úsáid as Ibuprofen mar an druga caighdeánach. Ríomhadh an céatadán coiscthe ag baint úsáide as Cothromóid(8).

2.14. Anailís staitistiúil. Rinneadh anailís staitistiúil ar shonraí gach turgnaimh ag baint úsáide as bogearraí IBM SPSS Statistics (leagan 20), agus cuireadh na torthaí in iúl mar mheán-earráid chaighdeánach (SE). Socraíodh tábhacht staitistiúil ag leibhéal muiníne 95 faoin gcéad. Baineadh úsáid as anailís aontreo ar athraitheas (ANOVA) agus tástáil Tukey chun na difríochtaí idir na cineálacha agus na sleachta a chinneadh. Baineadh úsáid as comhéifeacht comhghaolaithe Pearson don anailís comhghaolaithe.

Aicmiú Athlasadh

Géar-athlasadh: go príomha arb iad is sainairíonna deargadh, swelling, pian, etc, is é sin, athlasadh comhdhéanta go príomha ar an imoibriú an chórais soithíoch.

Athlasadh ainsealach: go príomha roinnt galair athlastacha ainsealacha, mar shampla gastroenteritis ainsealach, heipitíteas ainsealach, athlasadh gínéiceolaíoch athfhillteach agus galair eile.

Cúis Athlasadh

Is féidir aon fhachtóir a d'fhéadfadh damáiste fíocháin a bheith ina chúis le athlasadh, is é sin, is féidir fachtóirí athlastacha a ghrúpáil sna catagóirí seo a leanas:

(1) Fachtóirí bitheolaíocha

Is iad baictéir, víris, mycoplasmas, fungais, spirochetes, agus paraisítí na cúiseanna athlasadh is coitianta. Tugtar ionfhabhtú freisin ar athlasadh de bharr pataiginí bitheolaíocha. Is féidir le heacsotocsainí agus endotoxins arna dtáirgeadh ag baictéir damáiste díreach a dhéanamh d'fhíocháin; tá neacróis cille mar thoradh ar mhacasamhlú víreasach i gcealla ionfhabhtaithe; déanann pataiginí antaigineacha áirithe damáiste d’fhíocháin trí fhreagraí imdhíonachta spreagtha tar éis ionfhabhtaithe, amhail ionfhabhtuithe seadánacha agus eitinn.

2) Fachtóirí fisiceacha

Teocht ard, teocht íseal, substaintí radaighníomhacha, ghathanna ultraivialait, etc., agus damáiste meicniúil.

(3) Fachtóirí ceimiceacha

Ceimiceáin eisghineacha amhail aigéad láidir, alcaile láidir, agus tuirpintín. Substaintí tocsaineacha ingenous cosúil le táirgí dianscaoilte fíocháin necrotic agus meitibilítí cosúil le úiré carntha sa chorp faoi choinníollacha paiteolaíocha áirithe.

(4) Comhlacht eachtrach

Is féidir le comhlachtaí eachtracha a théann isteach sa chorp daonna trí bhealaí éagsúla, mar shampla miotail éagsúla, smionagar adhmaid, deannach san aer, comhuaimeacha máinliachta, etc., céimeanna éagsúla freagraí athlastacha a chur faoi deara mar gheall ar a n-antigéineacht éagsúla.

(5) Fíochán necrotic

Is féidir le cúiseanna cosúil le ischemia nó hypoxia a bheith ina chúis le necróis fíocháin, rud a d'fhéadfadh a bheith ina fhachtóir athlastach féideartha. Is léiriú athlasadh iad bannaí hemorrhagic congestive agus insíothlú cealla athlastacha ar imill infarcts úra.

(6) Ailléirgí

Nuair a bhíonn freagra imdhíonachta an chomhlachta neamhghnácha, féadann sé freagra imdhíonachta míchuí nó iomarcach a chur faoi deara, rud a fhágann damáiste fíocháin agus cille agus athlasadh mar thoradh air. Den sórt sin mar riníteas ailléirgeach, colitis, urtacáire, eitinn, glomerulonephritis, agus galair eile.

Tá antaibheathaigh bactericidal agus frith-athlastach, scriosfaidh úsáid fadtéarmach gnáth-fhlóra an chorp daonna, déanfaidh sé baictéir mhaith a mharú, éagothroime flóra intestinal a chur faoi deara, éagsúlacht de mhífheidhm intestinal agus frithghníomhartha díobhálacha a chur faoi deara, agus ionfhabhtú tánaisteach a chur faoi deara, an comhlacht a laghdú. friotaíocht. Ina theannta sin, déantar antaibheathaigh a mheitibiú den chuid is mó ag an ae agus na duáin, agus is dóichí go ndéanfaidh mí-úsáid antaibheathaigh damáiste d'ae agus d'fheidhm na duáin. Is féidir leat aird a thabhairt ar na focail "úsáid go cúramach in othair a bhfuil droch-fheidhm ae agus duáin acu" ar threoracha na ndrugaí frith-athlastacha go léir. Ina theannta sin, is féidir le antaibheathaigh frithghníomhartha ailléirgeacha ar dhrugaí a mhéadú freisin. Le blianta beaga anuas, tá baint ag an ardmhinicíocht riníteas ailléirgeach agus asma ailléirgeach le mí-úsáid antaibheathaigh.

Tá sé léirithe ag turgnaimh go bhfuil éifeacht feabhsaithe maith ag sliocht Cistanche pipiensis saibhir i echinacoside ar colitis; Tá éifeacht coisctheach maith ag Cistanche glycoside K agus piposide B ar an secretion ocsaíd nítreach i gcealla, rud a léiríonn go bhfuil a éifeacht frith-athlastach maith.Cistancheis ábhar míochaine Síneach é a bhfuil an bunús céanna aige le leigheas agus bia. Tá sé ar cheann de na deich leigheas luibhe Síneach is fearr i mo thír. Is taisce é ó dhoimhneas an fhásaigh agus tonic nádúrtha. Tá stair leighis de nach mór 2,000 bliain ag Cistanche Cistanche. Taifeadadh é den chéad uair i "Shen Nong's Materia Medica". Sa bhliain 2005, cuireadh Cistanche san áireamh i "Pharmacopoeia Daon-Phoblacht na Síne" mar ábhar míochaine fíor. Is tonic maith é Cistanche ó am ársa, gan aon taifead tocsaineachta, rud a chruthaíonn go hiomlán a sábháilteacht.