Gníomhaíocht Iltreoch Bakuchiol i gCoinne Meicníochtaí Ceallacha Aosaithe Aghaidhe - Fianaise Thurgnamhach Do Chur Chuige Cóireála Iomlánaíoch Cuid 1

Teibí

Cuspóir: Is próiseas ilfhachtóiriúil é aosú craiceann a bhaineann le foirmiú speiceas ocsaigin imoibríoch, athlasadh i ndiaidh a chéile le hinmharthanacht laghdaithe cille eipideirm agus deirmeach, agus damáiste dá bharr don mhaitrís extracellular. Go hidéalach, ba cheart go dtabharfadh módúlachtaí éifeachtacha cóireála deirm-chosmaidí aghaidh ar na sainmharcanna sin i gcur chuige iomlánaíoch. Anseo, chinneamar an phróifíl ghníomhaíochta chomhfhreagrach de bakuchiol, meroterpene atá díorthaithe ó phlandaí, i raon de staidéir in vitro, ex vivo, agus in vivo agus chuireamar i gcomparáid é le retinol, a mheastar faoi láthair an caighdeán óir i gcosmaidí frith-aosaithe tráthúla.

Is féidir le glycoside cistanche méadú freisin ar ghníomhaíocht SOD i bhfíocháin chroí agus ae, agus laghdaítear go mór an t-ábhar lipofuscin agus MDA i ngach fíocháin, ag scavening go héifeachtach fréamhacha ocsaigine imoibríocha éagsúla (OH-, H₂O₂, etc.) agus a chosaint i gcoinne damáiste DNA a dhéantar. ag OH-radacach. Tá cumas láidir scavenging fréamhacha saor in aisce ag gliocóisídí cistanche feinileatánóideach, cumas laghdaithe níos airde ná vitimín C, feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD i bhfionraí sperm, laghdaigh ábhar MDA, agus tá éifeacht chosanta áirithe acu ar fheidhm membrane sperm. Is féidir le polaisiúicrídí cistanche feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD agus GSH-Px in erythrocytes agus fíocháin scamhóg lucha senescent turgnamhacha de bharr D-galactós, chomh maith le hábhar MDA agus collagen sa scamhóg agus plasma a laghdú, agus ábhar elastin a mhéadú. éifeacht scavenging maith ar DPPH, fadú am hypoxia i lucha senescent, feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD i serum, agus moill a chur ar dhíghiniúint fiseolaíoch na scamhóg i lucha senescent turgnamhach Le díghiniúint moirfeolaíoch cheallacha, tá sé léirithe ag turgnaimh go bhfuil an cumas frithocsaídeach maith ag Cistanche. agus tá an cumas aige a bheith ina dhruga chun galair aosaithe craicinn a chosc agus a chóireáil. Ag an am céanna, tá cumas suntasach ag echinacoside i Cistanche fréamhacha saor in aisce DPPH a scavening agus féadann sé speicis ocsaigine imoibríocha a scavening, cosc ​​a chur ar dhíghrádú collagen saor ó radacach saor in aisce, agus tá éifeacht mhaith deisiúcháin aige freisin ar damáiste anion radacach saor ó thymine.

Cliceáil ar Antioxidant Cistanche Tubulosa

【Le haghaidh tuilleadh eolais:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Modhanna: Rinneadh anailís ar chumas agus ar chumhacht frithocsaídeach bakuchiol agus retinol trí laghdú 2,2′-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) a thomhas trína mheath ionsú agus a speictreascópacht athshondais leictreoin, faoi seach. Éifeachtaí ar prostaglandin E2 (PGE2), fachtóir coisctheach imirce macrophage (MIF), fachtóir fáis fibroblast 7 (FGF7), cineál collagen I agus VII (COL1A1, COL7A1), leibhéil fibronectin (FN) chomh maith le meitibileacht tetrazolium intuaslagtha in uisce. 1 (WST-1) a aimsíodh i fibroblasts deirmeacha daonna. Rinneadh measúnú ar athghiniúint eipideirm ag baint úsáide as samhail cneasaithe créachta in vitro. Rinneadh anailís ar leibhéil próitéin FN ex vivo tar éis cóireála le foirmliú ina raibh bakuchiol, retinol, nó feithicil ag baint úsáide as sreabhán blister trí shúchán. Cinneadh feabhas ar riocht craiceann in vivo i staidéar comparáide aghaidh scoilte tar éis bakuchiol nó feithicle a chur i bhfeidhm.

Torthaí: I gcodarsnacht le retinol, léirigh bakuchiol éifeachtacht ard frithocsaídeach. Tháinig laghdú suntasach ar leibhéil PGE2 agus MIF de réir bakuchiol agus retinol araon. Mhéadaigh Bakuchiol ach ní retinol leibhéil próitéin FGF7 go suntasach. Méadaíodh leibhéil meitibileachta WST-1 go suntasach le bakuchiol agus retinol. Bakuchiol agus cur i bhfeidhm retinol ba chúis le méadú suntasach ar leibhéil próitéin COL1A1, COL7A1, agus FN. Tháinig méadú suntasach ar athghiniúint an eipideirm i gcás créachta arna bhforlíonadh le bakuchiol ach ní retinol. Go cliniciúil, léirigh limistéir a ndearnadh cóireáil orthu le foirmliú ina raibh bakuchiol méadú suntasach go staitistiúil ar luachanna próitéine FN tar éis 4-fheidhmchlár seachtaine i gcomparáid le limistéir neamhchóireáilte agus limistéir a ndearnadh cóireáil orthu le feithicil.

Conclúid: Soláthraíonn na sonraí seo fianaise ar éifeachtúlacht iltreoch bakuchiol i gcoinne sainmharcanna ceallacha aosaithe craicinn. Roinneann a phróifíl gníomhaíochta roinnt gnéithe coitianta le retinol ach léiríonn sé roinnt éifeachtaí dearfacha nach raibh ar eolas go dtí seo inár staidéir, eadhon spreagadh na comhpháirte maitrís eischeallach ríthábhachtach FN, agus athghiniúint eipideirm luathaithe agus leigheas créachta.

EOCHAIRFHOCAL

frith-aosú, bakuchiol, bunús éilimh in vivo/ex vivo/in vitro, retinol, fiseolaíocht craicinn/ struchtúir

RÉAMHRÁ

Tá craiceann d'aois tréithrithe ag roic, lí míchothrom, garbh an chraiceann, agus laxity. Tá na comharthaí cliniciúla seo mar thoradh ar athruithe struchtúracha agus meitibileach de bharr próisis aosaithe intreach agus eistreach. Tá aosú intreach curtha i leith fachtóirí lena n-áirítear giorrú telomere, athlasadh ainsealach, sócháin aonair DNA mitochondrial, agus fréamhacha saor in aisce [1]. Cuimsíonn craiceann aosta freisin laghdú ar a chórais frithocsaídeacha[2]. Chomh maith leis sin, laghdaítear ráta iomadú cille mar gheall ar an bpróiseas aosaithe bitheolaíoch as a dtagann caillteanas ar struchtúr agus ar fheidhm an chraiceann. Is é ionradaíocht UV agus tionchair timpeallachta go príomha a spreagann aosú eistreach. Mar thoradh ar na maslaí seo déantar damáiste don chraiceann a threisíonn an meath cróineolaíoch agus a luathaíonn aosú cutaneous. Cailleann craiceann an duine tuilleadh an cumas chun dul i ngleic le coinníollacha athlastacha le linn dul in aois, agus mar thoradh ar staid proinflammatory ainsealach.

Breathnaítear ar chur i bhfeidhm tráthúla retinoids amhail aigéad retinoic, reitineach, nó retinol mar an caighdeán óir cliniciúil le haghaidh cóireáil éifeachtach frith-aosaithe [3, 4]. Tá cur síos cuimsitheach déanta ar mheicníochtaí móilíneacha retinoids [5-10]. Laghdaíonn retinoids tráthúla go héifeachtach comharthaí infheicthe aosaithe cosúil le roic, laxity, nó roughness [4, 11] agus laghdaítear dílípeáil craiceann fótadamáiste lena n-áirítear reticularis liveo agus leintíní actinic [12]. Mar sin féin, d'fhéadfadh triomacht agus greannú craiceann atá ag brath ar thiúchan a bheith mar thoradh ar chóireáil tráthúla le retinoids [13]. Toisc go n-eascraíonn cur i bhfeidhm retinol frithghníomhartha díobhálacha beaga i gcomparáid le retinoids eile cosúil le haigéad retinoic [6, 14], úsáidtear é go forleathan i gcóireáil chosmaideach ar aosú aghaidhe.

I gcodarsnacht le retinol a cuireadh i bhfeidhm i dtáirgí cúram craicinn ó 1984 [15], ní bhfuair bakuchiol aird ach le déanaí mar chomhdhúil frith-aosaithe tráthúla. Is meroterpene é Bakuchiol (Fíor 1) a dhíorthaítear ó shíolta corylifolia Psoralea. Tá sé in úsáid i leigheas traidisiúnta Indiach agus Síneach feadh na gcéadta bliain [16, 17] agus tá sé tolerated go maith [18]. Moladh Bakuchiol feidhmeanna cosúil le retinol a thaispeáint, mar atá i múnla ionadach craiceann, léiríonn an dá shubstaint patrúin léirithe géine comhchosúla in vitro [19] agus feabhas ar photodamage cutaneous in vivo [20]. Mar sin, tagraíodh dó freisin mar analóg feidhmiúil retinoid díorthaithe ó phlandaí [21]. Léirigh staidéir bhreise frithocsaídeacha [19, 22-24], frith-athlastach [19, 25-27], antibacterial [28] chomh maith le héifeachtaí antiproliferative agus antitumor [29, 30] de bakuchiol.

Chun próisis aosaithe craiceann ilfhachtóiriúla a mhaolú agus a mhoilliú go héifeachtach, is gá aghaidh a thabhairt ar mheicníochtaí ceallacha éagsúla i gcur chuige comhtháite. Déanann Bakuchiol spriocanna éagsúla a mhodhnú ag an am céanna, rud a fhágann gur cumaisc a bhfuil gealladh fúthu ina leith seo. Toisc go bhfuil dlúthbhaint ag struis ocsaídiúcháin agus athlastacha le haosú sceana, d’fhéadfadh a gcosc le bakuchiol an riocht iomlán craiceann a chur chun cinn. Mar sin féin, rinneadh measúnú criticiúil ar cháilíocht na fianaise eolaíche reatha [31]. Sa chomhthéacs seo, chinneamar na cumais (i) frithocsaídeacha agus (ii) frith-athlastacha bakuchiol agus retinol agus scrúdaigh muid a gcumas meitibileacht cheallacha agus sintéis fachtóir fáis 7 a achoimriú mar (iii) gníomhaíocht cille a fheabhsú. Rinneamar anailís bhreise an bhfuil tionchar ag bakuchiol agus retinol ar léiriú comhpháirteanna áirithe (iv) ECM agus feabhas a chur ar (v) athghiniúint eipideirm agus ath-epithelization. Ar deireadh, rinneadh staidéar in vivo chun cumas frith-aosaithe cliniciúil bakuchiol i gcraiceann an duine a fhíorú.

ABHAIR AGUS MODHANNA

Ábhair tástála

Fuarthas Bakuchiol ó Sytheon Ltd (Boonton, New Jersey, Stáit Aontaithe Mheiriceá). Ceannaíodh Retinol ó Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, Stáit Aontaithe Mheiriceá). Le haghaidh turgnaimh cultúir cille, caolaíodh an dá shubstaint tástála go húr i DMSO (Merck, Darmstadt, an Ghearmáin). I gcás na dtuaslagáin stoic DMSO, bhí an tiúchan feidhmithe de shubstaintí tástála 1000-fillte os cionn an chomhchruinnithe ab airde a cuireadh i bhfeidhm i shaothrú na gceall a thugann 0.1 faoin gcéad DMSO sna meáin nó i maolán. Rinneadh tuilleadh caolúcháin trí úsáid a bhaint as meáin nó maolán le 0.1 faoin gcéad DMSO. Mar sin, rinneadh gach turgnaimh ar shaothrúchán cille i láthair 0.1 faoin gcéad DMSO. Maidir leis na staidéir in vivo, foirmíodh retinol tráthúla san fheithicil chéanna le bakuchiol.

Staidéir in vitro

Cinneadh an acmhainn frithocsaídeach

Caolaíodh Bakuchiol, retinol (an dá chur i bhfeidhm ag tiúchan deiridh de 100μM), nó an trolox ardchaighdeáin (Merck, tiúchan deiridh 25μM) i DMSO. Go hachomair, cuireadh 30μL de na comhdhúile seo (10-tiúchan níos airde ná an tiúchan measúnaithe deiridh) le 96-pláta bun cothrom. Ina dhiaidh sin, cuireadh 270μL de 39ug/mL DPPH (Merck, caolaithe i meascán 1:1 uisce/eatánól) le gach tobar go tapa rud a thugann tiúchan deiridh de 10 faoin gcéad DMSO. Mar rialú, bhí an réiteach DPPH gortha le DMSO gan substaintí tástála. Ina theannta sin, rinneadh rialuithe bána trí bhakuchiol nó retinol a chothú le huisce/eatánól (1:1) nó gan ach an meascán uisce/eatánól (1:1) ina raibh 10 faoin gcéad DMSO in éagmais DPPH. Tar éis 10, 30, agus 60min, tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 524nm ag baint úsáide as léitheoir microplate ilmhód Spark (Tecan, Männedorf, an Eilvéis). Baineadh comharthaí de rialuithe bána.

Cinneadh an chumhacht frithocsaídeach

Síolaíodh HDFanna i {{0}}plátaí tobair le 150 000 cealla/tobar i meán 2 mL ina raibh 10 faoin gcéad de shéiream lao agus goraíodh iad ar feadh 24 uair. Ina dhiaidh sin, caitheadh ​​amach an sean-mheán, agus déileáladh le cealla le meán ina raibh 2 faoin gcéad de serum lao agus bakuchiol nó retinol i dtiúchan deiridh de 10 μM. Forlíontar HDFanna rialaithe le 0.1 faoin gcéad DMSO easpa bakuchiol nó retinol. Rinneadh rialuithe bána trí mheán gan cealla a chothú. Tar éis 24 uair an chloig, aistríodh an meán coinníollaithe chuig colúin chasmhóiminte tiúchana próitéin Vivaspin (5000 MWCO; Sartorius, Göttingen, an Ghearmáin) agus dhírigh sé timpeall 10-huaire. Cothromaíodh toirteanna na meánmhéide ar fad tríd an sreabhadh tríd a chur leis an athuair. Rinneadh anailís ar leibhéil phróitéin FGF7 den mheán comhchruinnithe comhchruinnithe ag baint úsáide as trealamh ELISA atá ar fáil go tráchtála de réir threoracha an déantóra (Bio-Techne GmbH). Rinneadh tomhais ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta ilmhód Spark (Tecan). Baineadh comharthaí a fuarthas ó rialuithe bána agus normalaíodh leibhéil próitéine FGF7 go dtí an líon iomlán cille a socraíodh ag baint úsáide as cuntar cille (Scepter, Merck).

Cinneadh ar mheitibiliú WST-1

Síolaíodh HDFanna i {{0}plátaí tobair le 3000 cill/tobar i meán 100μL ina raibh 10 faoin gcéad de shéiream lao agus goraíodh iad ar feadh 24h. Caitheadh ​​an meán laghdaithe, agus déileáladh le cealla le meán 100μL ina raibh retinol nó bakuchiol i dtiúchan deiridh de 1 μM nó 10 μM, faoi seach. Forlíontar HDFanna rialaithe le 0.1 faoin gcéad DMSO easpa bakuchiol nó retinol. Mar rialú breise, déileáladh le cealla le 10 faoin gcéad triton-X (Merck). Rinneadh rialuithe bána trí mheán gan cealla a chothú. Tar éis 72h, dathaíodh cealla ag baint úsáide as an imoibrí iomadú cille WST-1 atá ar fáil go tráchtála de réir threoracha an déantóra (Merck). Tomhaiseadh ionsú ag 450 agus 620nm ag baint úsáide as léitheoir microplate Tecan Infinity M200 (Tecan). Baineadh úsáid as an difríocht sna tomhais seo le haghaidh anailíse. Baineadh comharthaí de rialuithe bána.

Leibhéil próitéin COL1A1 agus COL7A1 a chinneadh

Síolaíodh HDFanna i {{0}}plátaí tobair le 10  000 cealla/ tobar i meán 100μL ina raibh 10 faoin gcéad de shéiream lao agus goraíodh iad ar feadh 24 uair an chloig. Caolaíodh Bakuchiol nó retinol i meán 100μL gan serum lao, agus forlíontar é go dtí an meán reatha i dtiúchan deiridh de 1 μM nó 10 μM, faoi seach. Forlíontar an rialú le meán saor ó serum 100μL a thugann tiúchan 0.1 faoin gcéad DMSO a fhreagraíonn don chóireáil retinol agus bakuchiol. Mar chaighdeán ard, cuireadh fachtóir fáis claochlaitheach 10 ng/mL i bhfeidhm- (TGF- ) agus ascorbate sóidiam 11ug/mL (an dá Merck). Rinneadh rialuithe bána trí mheán gan cealla a chothú. Tar éis 4 h, rinneadh anailís ar leibhéil próitéine COL1A1 agus COL7A1 den mheán coinníollaithe ag baint úsáide as feisteáin ELISA atá ar fáil go tráchtála de réir threoracha an mhonaróra (Novus Biologicals, Littleton, Colorado, Stáit Aontaithe Mheiriceá). Rinneadh tomhais ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta ilmhód Spark (Tecan). Baineadh comharthaí de rialuithe bána. normalaíodh leibhéil próitéin COL1A1 agus COL7A1 go dtí an méid iomlán próitéin lysate cille a socraíodh trí úsáid a bhaint as trealamh measúnaithe aigéad bicinchoninic atá ar fáil go tráchtála (Thermo Fisher Scientific) de réir threoracha an mhonaróra. Réamhriachtanas maidir le húsáid na dtorthaí ab ea imoibriú dearfach na gceall ar ard-chaighdeán TGF- agus ascorbate sóidiam.

Chun anailís a dhéanamh ar leibhéil próitéine COL7A1 tar éis aga goir sínte, cuireadh HDFanna i 96-phlátaí tobair le 3000 cill/tobar i meán 100μL ina raibh 10 faoin gcéad de shéiream lao. Rinneadh gach cóireáil, rialú, agus an anailís mar a thuairiscítear thuas ach amháin nár úsáideadh bakuchiol agus retinol ach amháin i dtiúchan deiridh de 10 μM. Baineadh cealla nuair a thángthas ar fho-chomhfhliúchas, go háirithe, tar éis 72 nó 96h.

Leibhéil próitéine FN a chinneadh

Síolaíodh HDFanna i {{0}}plátaí tobair le 10 000 cealla/tobar i meán 100μL ina raibh 10 faoin gcéad de shéiream lao agus goraíodh iad ar feadh 24h. Cuireadh meán ina raibh 2 faoin gcéad de serum lao agus bakuchiol nó retinol i dtiúchan deiridh de 10 μM in ionad an sean-mheán. Forlíontar an rialú le 0.1 faoin gcéad DMSO easpa bakuchiol nó retinol. Rinneadh rialuithe bána trí mheán gan cealla a chothú. Tar éis 24h, rinneadh anailís ar leibhéil próitéine FN den mheán coinníollaithe ag baint úsáide as trealamh ELISA atá ar fáil go tráchtála de réir threoracha an mhonaróra (R&D Systems, Minneapolis, Minnesota, Stáit Aontaithe Mheiriceá). Rinneadh tomhais ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta ilmhód Spark (Tecan). Baineadh comharthaí de rialuithe bána. normalaíodh leibhéil próitéin FN go dtí an méid iomlán próitéin lysate cille a cinneadh mar a dúradh.

Athghiniúint eipideirm a chinneadh i múnla cneasaithe créachta in vitro

Rinneadh na turgnaimh mar a thuairiscítear roimhe seo [34]. Chun samhlacha cneasaithe créachta a chóireáil, caolaíodh bakuchiol nó retinol i DPBS agus cuireadh é i dtiúchan deiridh de 10 0μM leis an réigiún créachta (5 μL in aghaidh an chréachta). Forlíontar na créachtaí tagartha leis an méid céanna DPBS ina raibh 0.1 faoin gcéad DMSO gan bakuchiol nó retinol. Fágadh créachta breise gan chóireáil mar smacht eile. Goradh samhlacha cneasaithe créachta ar feadh 43h ag 95 faoin gcéad taise, 5 faoin gcéad CO2, agus 37 céim . Ina dhiaidh sin, rinneadh snap-reoite na samplaí in isopentane a réamhfhuaraithe le nítrigin leachtach, agus a stóráil ag −80 céim . Rinneadh ath-epithelialization a mheas i rannóga hematoxylin agus eosin-daite cryostat trí fhad an eipideirm athghinte a thomhas ag baint úsáide as micreascóp Leica DMLS (10 ×), ceamara Leica MC 170 HD CCD agus na bogearraí Leica LAS V4.9 (Leica Microsystems, Wetzlar, an Ghearmáin). Rinneadh cainníochtú ar bhealach dalláilte.

Staidéir in vivo I agus II

Maidir leis an dá staidéar in vivo, breathnaíodh moltaí an leagain reatha de Dhearbhú Heilsincí agus threoirlíne na Comhdhála Idirnáisiúnta um Chomhchuibhiú Dea-Chleachtais Chliniciúil a bheith infheidhme maidir le staidéar cosmaideach. D'fhaomh an Coiste Eitice Neamhspleách Freiburg (cód feki 08/2610) an prótacal staidéir I. Sa dá staidéar, thug gach oibrí deonach toiliú eolasach i scríbhinn. Bhí craiceann sláintiúil ag na hábhair, bhain siad le cineál craicinn Fitzpatrick I go III agus ba chritéar eisiaimh é tosú nó athrú cógas hormónach.

Le linn 10-tréimhse réamhchoinníollacha agus le linn na tréimhse staidéir ar fad, ceanglaíodh ar dhaoine is ábhar do staonadh ó nochtadh UV sna réimsí tástála. Cuireadh cosc ​​ar ghníomhaíochtaí chun allais a chur chun cinn 24 uair an chloig roimh mheasúnuithe sceidealaithe.

Léirigh imscrúdaitheoir cur i bhfeidhm ceart foirmlithe ag baint úsáide as méid, a fhreagraíonn do ghnáth-réimeas cúram craicinn na n-ábhar.

Staidéar I: Cinneadh ex vivo ar leibhéil próitéine FN

As 52 ábhar baineann, a cláraíodh sa staidéar seo faoi fheithicil-rialaithe, chríochnaigh 33 ábhar an staidéar, agus áiríodh sonraí 31 ábhar (30-64 bliain, meánaois: 50.9 bliain) san anailís sonraí. Tharla titimí de bharr paindéime SARS-CoV-2 agus cúiseanna pearsanta (13 ábhar) chomh maith le frithghníomhartha neamh-chomhoiriúnachta (cúig ábhar, de bharr cóireála retinol). Ba chúis le frithghníomhartha neamh-chomhoiriúnachta trí mheán retinol chomh maith le saincheisteanna samplála líon éagsúil ábhar a tástáladh do gach coinníoll (féach na torthaí le haghaidh sonraí).

Seacht lá roimh mheasúnuithe sceidealta, cuireadh cosc ​​ar úsáid táirgí cúram craicinn, glantacháin agus gallúnach ar na forearms. Ar an gcéad lá staidéir, bunaíodh ceithre réimse tástála ar na forearms istigh. Ar dhá réimse tástála, cuireadh dhá fhoirmliú verum i bhfeidhm chun {{{0}}.5 faoin gcéad bakuchiol nó 0.15 faoin gcéad retinol a chuimsiú, faoi seach. I dtuairim a d’fhoilsigh an Coiste Eolaíoch um Shábháilteacht Tomhaltóirí in 2016, measadh gur cóireáil chosmaideach an tiúchan retinol feidhmithe [35]. Sa dá réimse tástála eile, baineadh úsáid as an bhfeithicil chomhfhreagrach, nó fágadh an limistéar gan chóireáil. Bhí suíomh na láithreacha cóireála iomalartaithe. Tar éis 4 seachtaine d'fheidhmiú foirmlithe tástála dhá uair sa lá, d'fhill na hoibrithe deonacha chuig an institiúid tástála. I ngach réimse tástála, gineadh trí blisters súchán (7 mm ar trastomhas) mar a thuairiscítear roimhe seo [36, 37]. Go hachomair, cuireadh cupáin blister trí shúchán saincheaptha ar na limistéir thástála agus cuireadh folús 550–850 mbar i bhfeidhm. Tar éis thart ar 90–150 nóiméad, nuair a bhí blisters súchán déanta, scaoileadh an bhfolús, agus asúiteadh an sreabhach as an blister ag baint úsáide as 24-snáthaid tomhsaireachta. Reoiteadh sreabhán láithreach ag −80 céim ar oighear tirim go dtí go ndearnadh anailís orthu. Rinneadh leibhéil próitéine FN a chainníochtú i samplaí sreabhán blister trí shúchán ag baint úsáide as trealamh ELISA (Córais T&F) atá ar fáil go tráchtála. Rinneadh tomhais ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta ilmhód Spark (Tecan). Normalaíodh leibhéil FN go leibhéil iomlána próitéine de shamplaí sreabhán blister trí shúchán a socraíodh mar a dúradh.

Staidéar II: Cinneadh in vivo ar fheabhsú riocht craicinn

San iomlán, cláraíodh 43 oibrí deonach baineann sa staidéar comparáide aghaidh scoilte seo atá rialaithe ag feithiclí. De réir measúnuithe leighis, léirigh na hábhair cineálacha craiceann measctha (craiceann tirim, gnáth, olacha agus teaglaim). Chríochnaigh 34 ábhar (39-66 bliain, meánaois: 56.2 bliain) an staidéar agus cuireadh san áireamh iad san anailís. Bhí fadhbanna teicniúla agus neamhchomhlíonta (ocht n-ábhar) mar thoradh ar dropouts, chomh maith le frithghníomhartha neamh-chomhoiriúnachta (ábhar amháin, de bharr cóireáil feithicle agus bakuchiol).

Dhá sheachtain roimh thús an staidéir agus le linn na tréimhse staidéir ar fad, bhí ar oibrithe deonacha staonadh ó úsáid a bhaint as táirgí féin-súdaireachta nó cóireálacha cosmaideacha dian aghaidhe (eg deireadh a chur le sraitheanna craiceann superficial). Le linn na tréimhse réamhchoinníollacha 10-lá agus le linn an staidéir, iarradh ar na hábhair staonadh ó chóireáil bhuan-chumadóireachta, fabhraí agus mala, maisc súl agus paistí. Trí lá roimh an gcéad mheasúnú, iarradh ar na hábhair gan úsáid a bhaint as táirgí cúraim aghaidhe. Ar an tráthnóna roimh an ngrádú sceidealta, bhí na hábhair ag teastáil chun stop a chur le cur i bhfeidhm cosmaidí maisiúla.

Sna chéad 7 lá de 10-chéim an réamhchoinníollacha lae, fuair na hábhair próca uachtair ina raibh uachtar na feithicle staidéir (gan aon fhaisnéis faoin ábhar) agus chuir siad é ar a n-aghaidh iomlán faoi dhó sa lá. Ag bunlíne, rinne oibrithe deonacha féinghrádú. Go háirithe, rinne siad measúnú amhairc ar chuma iomlán a gcraiceann aghaidhe trí úire agus speictream a bhreathnú chomh maith le haon chomharthaí d'aosú craiceann. Mar sin cuireadh scála analógach amhairc i bhfeidhm ó 1 (an-tuirse, aois) go 10 (an-úr, gan aon chomharthaí d’aois chraiceann). Ansin, fuair na hábhair dhá prócaí uachtar dalláilte ina raibh an verum (feithicil ina bhfuil 0.5 faoin gcéad bakuchiol) nó an fheithicil, faoi seach, gan aon sonraíocht ar an ábhar. Le linn na tréimhse staidéir de 12 seachtaine, cuireadh cóireáil ar thaobh aghaidhe amháin dhá uair sa lá le verum agus caitheadh ​​leis an taobh aghaidhe eile leis an bhfeithicil faoi dhó sa lá. Bhí leithdháileadh na gcóireálacha ar na láithreacha tástála iomalartaithe. Tar éis 12 sheachtain d'úsáid rialta, rinne oibrithe deonacha an féinghrádú arís mar a luadh.

Anailís staitistiúil

Rinneadh anailís staitistiúil ag baint úsáide as Microsoft Excel le haghaidh Office 365 (Microsoft Corporation, Redmond, Washington, Stáit Aontaithe Mheiriceá), SAS Software Package do Windows V9.4 (SAS Institute GmbH, Heidelberg, an Ghearmáin), agus GraphPad Prism V8 (GraphPad Software, San Diego). , California, Stáit Aontaithe Mheiriceá).

Rinneadh measúnú ar ghnáthdháileadh na sonraí ag baint úsáide as tástáil Shapiro-Wilk. Má deimhníodh an dáileadh gnáth, rinneadh anailís tomhais arís agus arís eile ar athraitheas (RM-ANOVA) le comparáid iar-hocaí péire. Má diúltaíodh don hipitéis normáltachta, rinneadh measúnú ar chéimeanna Blom-chlaochlaithe de na sonraí bunaidh trí úsáid a bhaint as RM-ANOVA le comparáid pairwise iar-hoc, nó rinneadh measúnú ar na sonraí bunaidh trí úsáid a bhaint as tástáil céime comhartha Wilcoxon. Bhí dhá thaobh na dtrialacha staitistiúla ar fad ag leibhéal suntais alfa=0.05.

TORTHAÍ

Staidéir in vitro

Éifeachtaí frithocsaídeacha a chinneadh

Chun anailís a dhéanamh ar (i) éifeachtaí frithocsaídeacha bakuchiol agus retinol, rinneamar dhá mheasúnú éagsúla ag baint úsáide as DPPH mar mhóilín braite.

Cumas frithocsaídeach

Cinneadh an cumas frithocsaídeach trí laghdú DPPH a thomhas trína mheath ionsú. Léirigh an Trolox ard-chaighdeán cumas frithocsaídeach ardaithe go suntasach i gcoibhneas leis an rialú (p=0.0000 i gcás gach pointe ama a luaitear) ag fíorú tomhas ceart (Fíor 2a). Maidir leis an rialú, laghdaíodh an t-ionsúchtúchán i samplaí cóireáilte le bakuchiol go suntasach freisin ag gach pointe ama a imscrúdaíodh (10 nóim: p=0.0003, 30 agus 60 nóim: p=0.0000 ) cumas méadaithe frithocsaídeach a léiriú. I gcodarsnacht leis sin, níor léirigh Retinol aon chumas frithocsaídeach suntasach i gcomparáid leis an rialú.

【Le haghaidh tuilleadh eolais:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】