Comhábhair Monoterpene Ó Cistanche Tubulosa — Struchtúir Cheimiceacha Kankanosides A—E Agus Kankanol—

Cistanche tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT(Orobanchaceae) planda seadánacha ilbhliantúil a fhásann ar fhréamhacha naSalvadoranóCalotropisspeicis agus a dháileadh san Afraic Thuaidh, san Araib, agus i dtíortha na hÁise.1) Úsáidtear gais an phlanda seo (Kanka-nikujuyou sa tSeapáinis) go traidisiúnta chun impotence, sterility, lumbago, agus laige coirp a chóireáil.2) Roimhe seo, roinnt iridoids, monoterpenoids,feinileatánóidigh, agus lignans leithlis ó na Síne agus na PacastáineC. tubulosa. 1,3–7) Le linn ár staidéir srathach ar chomhábhair bhithghníomhacha ó leigheasanna nádúrtha na Síne,8–18) ceithre glycosídí iridoid nua, kankanosides A (1), B (2), C (3), agus D (4), iridoid chlóirínithe, kankanol (5), agus gliocóisíd monaitéarpéine aicimileach, kankanoside E (6), a bhí scoite amach ó sliocht meatánólach na míochaine luibhe seo mar aon le 16 chomhdhúil aitheanta lena n-áirítear 12 monaterpenes (7-18). Déileálann an páipéar seo le leithlisiú agus le soiléiriú struchtúr na gcomhábhar monaterpéine nua (1-6). 

TUBULOSA CISTANCHE NÁDÚRTHA CHUN FEIDHM Gnéis A FHEABHSÚ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Cuireadh an sliocht meatánólach ó ghais triomaithe C. tubulosa (26.8% ón leigheas luibhe seo) faoi réir crómatagrafaíocht colún glóthach shilice de ghnáthphase agus de chéim droim ar ais agus HPLC arís agus arís eile chun kankanosides A a thabhairt (1, 0.{{7}). }{{10}}54%), B (2, 0.030%), C (3, 0.{ {32}}027%), agus D (4, {{40}}.0015%), kankanol (5, {{57 }}.0034%), agus kankanoside E (6, 0.027%) mar aon le haigéad mussaenosidic19) (7, 0 .020%), aigéad géineasóideach19) (8, 0.030%), 8-aigéad epiloganic7) (9, 0.033%), gluroside19) (10, 0.14%), antairrhide20) (11, 0.0079 %), ajugol19) (12, 0.011%), bartsioside19) (13, 0.21%), 6-deoxycatalpol19) (14, 0.11%), argyol21) (15, 0.0030%), cistanin22,23) (16 , 0.0040%), cistaclóirín22) (17, 0.0035%), (2E,6Z)-8-bD-glúcópyranosilocsa-2,6-démheitil-2,6- aigéad octadienoic24) (18, 0.0028%), Dmannitol25) (4.19%), úráin25) (0.0069%), (3R) -3-hiodrocsa-2- pirrolidinone26,27) (0.0020%), agus (3R) )-3-hiodrocsa-1-meitil- 2-piorrolidinone27) (0.0059%).

Struchtúr Kankanoside A (1)

Fuarthas Kankanoside A (1) mar phúdar éagruthach agus léirigh sé rothlú optúil diúltach ([a]D 25 - 107.4 céim i MeOH). Thaispeáin an speictream IR de 1 banna ionsúcháin ag 1647 cm- 1 atá insannta don fheidhm olaifín chomh maith le bandaí ionsúcháin láidre ag 3410 agus 1076 cm- 1 a thugann le tuiscint go bhfuil taise glicóisíd ann. Sa bhuamáil mhear-adaimh (FAB)-MS de 1 dearfach- agus diúltach-ian, breathnaíodh buaiceanna ian leathmhóilíneach ag m/z 369

(M Na) agus 345 (M- H)-, agus léirigh anailís ardtaifigh FAB-MS gurb é an fhoirmle mhóilíneach 1 ná C16H26O8. Hidrealú aigéid de 1 le 1.0 M aigéad hidreaclórach (HCl) scaoilte D-glúcós, a sainaithníodh ag anailís HPLC ag baint úsáide as brathadóir optúil uainíochta.8,10-12,15-18) An Léirigh speictream 1 H- (CD3OD, Tábla 1) agus 13C-NMR (Tábla 2) de 1, a sannadh ag turgnaimh NMR éagsúla, 28) comharthaí insannta do dhá mheitil [d 1.31 (s, 10-H3) , 1.51 (br s, 11-H3)], dhá mheitiléine [d 1.49, 2.02 (m, 6a- agus 6b-H araon), 1.64, 1.67 (an dá m, 7b- agus 7a-H)], dhá meatán [d 2.21 (dd, J= 2.7, 9.5 Hz, 9-H), 2.71 (m, 5-H)], agus a,b-ghrúpa aicéatacha neamhsháithithe [d 5.33 (d, J= 2.7 Hz, 1-H), 5.95 (br s, 3-H)] mar aon le bogas b-glúcóipeiranóisil [d 4.62 (d, J= 7.9 Hz, 1' -H)]. Mar a léirítear i bhFíor 1, léirigh an turgnamh 1 H–1 H speictreascópacht chomhghaolaithe (1 H–1 H COSY) ar 1 láithreacht struchtúir pháirteacha scríofa i línte troma. Sa turgnamh comhghaolta il-bhannaí heitrea-núicléacha (HMBC) ar 1, breathnaíodh comhghaolta fadraoin idir na prótóin agus na carbóin seo a leanas (3-H, 1' -H agus 1-C; {{88}) }H3 agus 3-C; 3-H, 5-H, 6-H2, 9-H, 11-H3 agus 4- C; 11-H3 agus 5-C; 10-H3 agus 7-C; , 10-H3 agus 8-C; 10-H3 agus 9-C; 7-H2 agus 10-C) mar a thaispeántar i bhFíor 1. Thug hidrealú einsímeach de 1 le b-glucosidase aglycon, kankagenin a (1a) mar a thaispeántar i bhFíor 3. Léirigh comparáid idir an speictream 13CNMR do 1 leo siúd do 1a an t-athrú glycosilúcháin timpeall an 1-suímh in 1 [ 1: d C 94.1 ({1-C), 134.6 (3-C), 53.3 (9-C); 1a:d C 92.9 ({1-C), 135.3 (3-C), 54.7 (9-C)]. Mar sin, soiléiríodh nascacht an ghluaiseacht bD-glucopyranosyl in 1 freisin le bheith ag 1-suíomh 1a. Ansin, bhí an steiréstruchtúr coibhneasta de 1 tréithrithe ag turgnamh speictreascópachta feabhsaithe Oll-chónaí (NOESY), a léirigh comhghaolta NOE idir na fo-

péirí prótón a ísliú ({{0}}H agus 10-H3; 3-H agus 11-H3; 5-H agus 6b-H, {{9 }}H; 6b-H agus 7b-H; 7a-H agus 10-H3; 7b-H agus 9-H) mar a thaispeántar i bhFíor 2. Ar deireadh, cumraíocht absalóideach an {{ 22}}cinneadh suíomh i 1 trí chur i bhfeidhm riail an aistrithe glycosilúcháin 13CNMR de 1,1'-déshiúicríd,29) a fuarthas a bhain leis na comhdhúile hemiacéitiúla.30,31) Steiréstruchtúr an tsuímh 1- Deimhníodh in 1 a choinneáil in 1a trí chomparáid a dhéanamh idir anailís 1 H- NMR lena n-áirítear turgnamh NOESY. Fuarthas amach go raibh na luachanna aistrithe glycosylation [Dd 1.2 ppm (1' -C) agus 0.9 ppm (1- C), i pyridine-d5] mar thréith den chomhcheangal R, Rdihemiacetal, a fhreagraíonn don steiréstruchtúr iomlán de 1 mar a thaispeántar i bhFíor 3. Dá bhrí sin, socraíodh gurb é an chumraíocht iomlán ag suíomh 1 ná cumraíocht S agus léiríodh steirstruchtúr iomlán 1 mar a thaispeántar.

CÓGAIS NÁDÚRTHA CISTANCHE TUBULOSA CÓGAIS TRAIDISIÚNTA SÍNEACHA PHGS75% ECH 30% ACHT 12%

Struchtúir Kankanosides B (2) agus C (3)

Bhí Kankanoside B (2) scoite amach freisin mar phúdar éagruthach le rothlú optúil diúltach ([a]D 26 - 118.7 céim i MeOH). Léirigh an speictream IR de 2 bandaí ionsúcháin ag 3410, 1647, agus 1{085 cm- 1 atá inchurtha le feidhmeanna hiodrocsaile, olaifín agus éitear. Rinneadh an fhoirmle mhóilíneach C15H24O10 de 2 a chinneadh ag na beanna ian leathmhóilínigh i FABMS ian deimhneach agus trí FAB-MS ardtaifigh. Hidrealú aigéadach de 2 le 1.0 M HCl liberated D-glúcós, a sainaithníodh ag anailís HPLC ag baint úsáide as brathadóir optúil uainíochta.8,10-12,{15-18) An 1 H- ( Léirigh CD3OD, Tábla 1) agus 13C-NMR (Tábla 2) speictream28) de 2 comharthaí insannta do dhá mheitiléine [d 1.40 (ddd, J= 5.2, 7.3, 13.5 Hz, 6a-H), 2.52 ( dddd, J= 7.0, 9.2, 13.5 Hz, 6b-H), 3.85, 3.99 (dá d, J1647.9 Hz, 10-H2)], ceithre mheitine [ d 2.21 (dd, J= 6.4, 8.6 Hz, 9-H), 2.83 (m, 5-H), 4.02 (dd, J= 5.2, 7.0 Hz, 7-H), 5.49 (d, J= 6.4 Hz, 1-H)], agus péire cis-olifin [d 4.95 (dd, J{{84 }} . 4.72 (d, J= 7.9 Hz, 1' -H)]. Bhí na comharthaí prótóin agus carbóin sna sonraí 1 H- agus 13C-NMR de 2 cosúil leo siúd de 6-deoxycatalpol (14), ach amháin i gcás na gcomharthaí de bharr 7- agus 8- seasaimh. Mar a léirítear i bhFíor 1, léirigh turgnamh 1 H–1 H COZY ar 2 láithreacht struchtúr páirteach scríofa i línte troma, agus, i dturgnamh HMBC, breathnaíodh comhghaolta fadraoin idir na péirí prótón agus carbóin seo a leanas ({ {117}}H, 1' -H agus 1-C; 1-H agus 3-C; }H, 7-H, 9-H, 10-H2 agus 8-C; C; 7-H agus 10-C). Ba shaintréith an steiréstruchtúr coibhneasta de 2 turgnamh NOESY, a léirigh comhghaolta NOE idir na péirí prótóin seo a leanas (1-H agus 10-H2; 3- H agus 4-H; 1-H agus 10-H2; 3- H agus 4-H; { {144}}H agus 6b-H, 9-H; 6b-H agus 7-H; 7-H agus 9-H) mar a thaispeántar in Fíor 2. Ar deireadh , thug cóireáil alcaileach de 14 le hiodrocsaíd photaisiam uiscí 5% (KOH) 2 agus 19, 32) ionas go soiléiríodh steiréstruchtúr 2.

KankanosideRinneadh C (3) a leithlisiú mar phúdar éagruthach le rothlú optúil diúltach ([a]D 26 - 34.0 céim i MeOH). Sa FAB-MS ian diúltach de 3, breathnaíodh péire beanna ian leathmhóilín iseatóp ag m/z 399 agus 401 (M- H)-. Cinneadh gurbh í an fhoirmle mhóilíneach de 3 ná C15H25ClO10 trí thomhas FAB-MS ardtaifigh. Hidrealú aigéadach de 3 le 1.0 M HCl liberated D-glúcóis, a aithníodh trí anailís HPLC ag baint úsáide as brathadóir optúil uainíochta.8,10-12,15-18) An 1 H- (CD3OD, Tábla 1) agus Léirigh speictream 13C-NMR (Tábla 2) de 3 comharthaí insannta do thrí mheitiléine [d 1.70 (br dd, J= ca. 3, 13 Hz, 4a-H), 2.70 (br dd, J{{ 41}} ca. 6, 13 Hz, 4b-H), 1.68 (br d, J= ca. 13 Hz, 6aH), 2.44 (m, 6b-H), 4.01, 4.04 (an dá d, J= 11.3 Hz, 10-H2)], cúig mheitin [d 2.47 (dd, J= 2.5, 7.9 Hz, 9-H), 2.61 (m , 5- H), 3.94 (br s, 7-H), 5.10 (br d, J= ca. 3 Hz, 3-H), 5.48 (d, J= 2.5 Hz, 1-H)], agus cuid b-glucopyranosyl [d 4.60 (d, J= 8.0 Hz, 1' -H)]. Bhí na comharthaí prótóin agus carbóin i speictream 1 H- agus 13C-NMR de 3 forshuite orthu siúd de 2, ach amháin i gcás na gcomharthaí de bharr na suíomhanna 3- agus 4-. Soilsíodh suíomhanna bD-glucopyranosil agus feidhm chlóirín i 3 ó thurgnaimh H-H COZY agus HMBC mar a thaispeántar i bhFíor 1. Dá bharr sin, tógadh struchtúr plánach 3 le bheith mar a thaispeántar. Cinneadh an steiréstruchtúr coibhneasta de 3 ag turgnamh NOESY, inar breathnaíodh comhghaolta NOE idir na péirí prótóin seo a leanas (1-H agus 3-H, 10-H2; 3- H agus 4a-H; }H agus 9-H) mar a thaispeántar in Fíor 2.

TUBULOSA CISTANCHE NÁDÚRTHA CHUN FEIDHM Gnéis A FHEABHSÚ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Struchtúir Kankanoside D (4) agus Kankanol (5)

Bhí Kankanoside D (4) scoite amach mar phúdar éagruthach le rothlú diúltach optúil ([a]D 25 - 30.6 céim i MeOH). Thaispeáin an speictream IR de 4 banda ionsúcháin ag 1655 cm- 1 atá inchurtha le feidhm olaifín agus bandaí ionsúcháin láidre ag 3410 agus 1{078 cm- 1 a thugann le tuiscint dá ghliocosideach struchtúr. Sa FAB-MS deimhneach-ian de 4, breathnaíodh buaic ian leathmhóilín ag m/z 341 (M Na). Cinneadh an fhoirmle mhóilíneach C15H26O7 de 4 trí thomhas FAB-MS ardtaifigh. Fuarthas hidrealú aigéadach de 4 le 1.0 M HCl D-glúcós saortha,8,10-12,15-18) ach fuarthas (R)-rotundiol (4a) 33,34) trí hidrealú einsímeach de 4 le b- glúcóisidáis. Léirigh speictream 1 H-NMR (Tábla 3, CD3OD) agus 13C-NMR (Tábla 4) de 4 comharthaí insannta do mheitile [d 1.69 (s, 10-H3)], trí mheitiléine [d 1.41, 2.06 (an dá m, 4-H2), 1.51, 2.01 (m, 6a- agus 6b-H araon), 2.23 (br dd, J= ca. 8, 15 Hz, 7a-H) , 2.37 (br dd, J= timpeall 8, 15 Hz, 7b-H)], meatán [d 2.90 (m, 5-H)], agus dhá mheitiléine a bhfuil feidhm ocsaigine acu { d [3.56 (ddd, J= 2.8, 7.4, 13.2 Hz), 3.97 (ddd, J= 4.9, 8.0, 13.2 Hz), 3-H2], 4.04, 4.18 (an dá d, J= 12.2 Hz, 1-H2)} mar aon le cuid b-glúcóipyranosil [d 4.25 (d, J= 7.7 Hz, 1' -H )]. Soiléiríodh suíomh na coda bD-glucopyranosil i 4 ag turgnamh HMBC mar 3-suíomh (Fíor 1). Bunaithe ar an bhfianaise seo, socraíodh go raibh an steiréstruchtúr iomlán de 4 mar a thaispeántar.

Fuarthas Kankanol (5) mar phúdar éagruthach le rothlú optúil dearfach ([a]D 25 11.1 céim ). Léirigh an t-ianúchán ceimiceach (CI)-MS de 5 péire buaic iain iseatóp ag m/z 221 agus 223 mar gheall ar ian leathmhóilín (MH). Léirigh an tomhas CI-MS ardtaifigh de 5 gurb é C9H13ClO4 an fhoirmle mhóilíneach. Léirigh na speictream 1 H-NMR (Tábla 1, CD3OD) agus 13C-NMR (Tábla 2) de 5 láithreacht na bhfeidhmeanna seo a leanas: trí mheitiléine [d 1.60 (ddd, J= 2 .5, 5.5, 13.1 Hz, 4a-H), 1.80 (br dd, J= ca. 3, 13 Hz, 4bH), 1.83 (br d, J= ca. 12 Hz, 6a-H), 2.57 (m, 6b-H), 3.75, 3.88 (dá d, J= 9.2 Hz, 10-H2)], cúig mheitin [d 2.76 (dd, J{ {58}}.3, 8.0 Hz, 9-H), 2.50 (m, 5-H), 3.80 (br s, 7-H), 5.17 (br d, J{ {71}} ca. 3 Hz, 3-H), 5.26 (d, J= 4.3 Hz, 1-H)]. Deimhníodh struchtúr plánach 5 le turgnaimh 1 H–1 H COZY agus HMBC. Is é sin, léirigh an turgnamh COZY 1 H–1 H ar 5 láithreacht na struchtúr páirteach scríofa i línte trom, agus i dturgnamh HMBC, breathnaíodh comhghaolta fadraoin mar a thaispeántar i bhFíor 1. Ba é an steiréstruchtúr coibhneasta de 5 ná arna chinneadh ag turgnamh NOESY, inar breathnaíodh comhghaolta NOE idir na péirí prótóin seo a leanas (1-H agus 9-H; 3-H agus 4a-H; 4b-H agus {{95) }} H; 5-H agus 6b-H, 9-H; 6b-H agus 7-H; Fíor 2. I gcomparáid leis na sonraí 1 H- agus 13C-NMR do 5 leo siúd do 14a, a fuarthas trí chóireáil 14 le HCl uiscí 5% mar a thaispeántar i gCairt 1,35) suíomh an ghrúpa clóirín tacaíodh i 5 le bheith mar 3-suíomh. Ina theannta sin, thug aicéatáitiú 5 le ainhidríd aicéiteach (Ac2O) agus piridín an 3,7-ocsaíd (5a), agus thug 14a an dé-aicéatáit (14b) faoin gcoinníoll aicéitilithe céanna. De bharr na fianaise seo freisin, dheimhnigh muid suíomh na feidhme clóirín mar shuíomh 3b (Cairt 3). Mar thoradh air sin, socraíodh go raibh steiréstruchtúr 5 mar a thaispeántar.

Struchtúr Kankanoside E (6) Rinneadh Kankanoside E (6) a aonrú mar phúdar éagruthach le rothlú optúil diúltach ([a]D 25 - 20.0 céim i MeOH). Léirigh an speictream IR de 6 bannaí ionsúcháin ag 3410, 1647, agus 1085 cm- 1 inchurtha le feidhmeanna glycosidic agus carbóinile, agus léirigh a speictream UV ionsú uasta ag 211 nm (log e 4.63), rud a léiríonn láithreacht aigéid charbocsaileacha a,b-neamhsháithithe. Bhí an fhoirmle mhóilíneach C16H28O8 de 6 tréithrithe ag an FAB-MS dearfach- agus diúltach-ian agus ag tomhas MS ardtaifigh. Hidrealú aigéid de 6 D-glúcós saortha,8,10-12,15-18) ach (2E,6R)-8-hiodrocsa-2,6-démheitil{{31) }} fuarthas aigéad octanóch (6a) 36) trí hidrealú einsímeach 6 le b-glúcosidase. Léirigh speictream 1 H-NMR (Tábla 3, CD3OD) agus 13C-NMR (Tábla 4) de 6 láithreacht (2E,6R)-8-hiodrocsa-2,6- démheitil-2-taise aigéid ochtéinóigh [d 0.95 (d, J{= 6.4 Hz, 10-H3), 1.30, 1.48 (an dá m, 5-H2), 1.45, 1.70 (an dá m, 7-H2), 1.65 (m, 6-H), 1.81 (s, 9-H3), 2.22 (2H, m, 4-H2) , 3.61, 3.94 (an dá m, 8-H2), 6.78 (dd, J= 1.2, 7.3 Hz, 3-H)] mar aon le cuid bD-glucopyranosyl [d 4.26 (d, J= 7.6 Hz, 1' -H)]. I gcomparáid leis na comharthaí carbóin sa speictream 13C-NMR de 6 leo siúd de 6a, breathnaíodh an t-aistriú glycosylation thart ar shuíomh 8-6. Dheimhnigh turgnaimh HMBC suíomh an nasc glúcósíde freisin mar a léirítear i Fíor 1. Dá bhrí sin, soiléiríodh steirstruchtúr iomlán 6 mar (2E,6R)-8-bD-glúcópyranosylocsa-2,6-démheitiol-2-aigéad octéanóch.

TUBULOSA CISTANCHE NÁDÚRTHA CHUN FEIDHM Gnéis A FHEABHSÚ PHGS75% ECH 30% ACT 12%