Meicníochtaí Móilíneacha Gedúinín Frith-Melanogenic a Díorthaigh Ó Chrann Neem
Mar 28, 2022
Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com
Hwang-Ju Jeon 1, Kyeongnam Kim 1, Chaeeun Kim 2, Myoung-Jin Kim 1, Tae-Oh Kim 3,4,5,† agus Sung-Eun Lee 1,2,*,†
Coimriú:Léiríonn Melanogenesis sraith próiseas a tháirgeann melanin, lí craiceann cosanta (i gcoinne gathanna ultraivialait), agus a chinneann dath craiceann an duine. Bhí éileamh i gcónaí ar an margadh cosmaideach ar cheimiceáin a laghdaíonn táirgeadh meileanin mar gheall ar leasanna cúram craicinn, ar nós whitening. Is é an príomh-mheicníocht chun táirgeadh melanin a chosc ná tyrosinase (TYR) a chosc, príomh-einsím le haghaidh melanógenesis. Anseo, rinneamar measúnú ar fhíor (Ged), limonoid ionadaíoch, as a ghníomh frith-melanogenesis. Spreagadh táirgeadh melanin in vitro le hormón a spreagann alfa-melanocyte ( -MSH) i gcealla melanoma luch B16F10. laghdaigh Ged táirgeadh melanin -MSH-spreagtha, ag cur bac ar ghníomhaíocht TYR agus méid próitéine. Dhearbhaíomar an toradh seo in vivo ina samhail zebrafish do mheileanogenesis. Ní raibh aon chomhartha ar thocsaineacht agus ar mhífhoirmiú na zebrafishembryos le linn forbartha i ngach tiúchan cóireáilte. Laghdaigh Ged líon na poncanna lí suthacha a tháirgtear séabrafish agus an t-ábhar melanin i suthanna. Bhí an tiúchan ardghníomhach Ged (100 µM) i bhfad níos ísle ná an rialú dearfach, aigéad kojic (8 mM). Mar sin, d’fhéadfadh Ged a bheith ina iarrthóir iontach d’imoibrithe frith-melanogenesis.
Eochairfhocail: MITF; fachtóir trascríobh a bhaineann le micreaphthalmia; TYR; tyrosinase; DQ; dopaquinone; TRP-1; próitéin a bhaineann le tyrosinase 1; TRP-2; próitéin a bhaineann le tyrosinase 2; MC1R; receptor melanocortin 1; -MSH; -melanocyte-spreagthach hormone; ACTH; hormone adrenocorticotrópach; asp; próitéin agoutisignaling; cAMP; monophosphate adenosine timthriallach; CREB; eilimint freagartha cAMP
1. Réamhrá
Déantar melanin a shintéisiú in organelles melanosóim, cosúil le lysosome an melanocyte. Sa melanosóim, déantar melanin a tháirgeadh i dhá lí, eumelanin, agus pheomelanin, a ionadaíonn donn-dubh agus dearg-buí, faoi seach [1]. Tosaíonn sintéis na melaninpigments seo ón réamhtheachtaí, L-tyrosine, le imoibriú ocsaídiúcháin L-tyrosine isteach acompound ar a dtugtar dopaquinone (DQ), agus L-DOPA [2]. Sa chéim ocsaídiúcháin seo, feidhmíonn tyrosinase (TYR) mar einsím a theorannú rátaí ar chonair iomlán biosintéise melanin [2,3]. Déanann TRP-1agus TRP-2, a bhfuil dlúthbhaint acu le próitéiní meileanogenesis, conair bithshintéise eumelanin a chatalú agus gníomhaíocht TYR a chobhsú agus a spreagadh [1]. Tarlaíonn an próiseas táirgthe melaninpigments (ar a dtugtar melanogenesis) i melanosóim melanocytes, láithreán sintéise agus stórála formelanin [4]. Sa chonair chomharthaíochta melanogenesis, tá an receptor melanocortin1 (MC1R) ina bhall de ghabhdóirí atá nasctha le próitéin G. Is pointe tosaigh é MCIR do chomharthaíocht melanogenesis agus tá sé i ngníomh ag agonists MC1R cosúil le -melanocyte-stimulatinghormone ( -MSH), hormone adrenocorticotrópach (ACTH), agus próitéin comharthaíochta agouti (ASP) [1,2]. Méadaíonn gníomhachtú an chosáin chomharthaíochta -MSH-MC1R tiúchan timthriallach adenosinemonophosphate (cAMP) agus fosfarylates an eilimint freagartha cAMP (CREB). Cothaíonn CREB fosfarlaithe leibhéal próitéin fachtóir tras-scríofa a bhaineann le micreaphthalmia (MITF), fachtóir trascríobh a rialaíonn géinte melanin-sintéiseach, TYR, próitéin a bhaineann le tyrosinase-1 (TRP-1), agus próitéin a bhaineann le tyrosinase. -2 (TRP-2)trí bhosca M na ngéinte seo a cheangal [1,5,6]. I measc na cúig gabhdóirí melanocortin, MC1Rhas na melanocytes is flúirseach. Rialaíonn sé go príomha táirgeadh eumelanin (lí dubh-donn) trí MC1R a ghníomhachtú nuair a aistrítear agónaithe an ghabhdóra seo, mar shampla a-MSH agusACTH, chuig an receptor seo [2,4,7].
Cé go bhfuil difríochtaí idir mamaigh agus iasc, tá eachtarchóip de MC5R agus MC3R ag zebrafish, rud nach bhfuil ag an gcológ [7], agus tá an cosán comharthaíochta seo fós i séabra agus oibríonn sé go díreach mar a dhéanann sé i melanocytes mamaigh [7]. Thairis sin, tá méadú tagtha ar líon na staidéar ar chosc ar fhoirmiú lí melanin mar gheall ar a buntáistí taighde, mar fhorbairt tapa i suthanna luathchéime agus éascaíocht breathnóireachta [8-11]. Sna feiniméin seo, fuair go leor staidéir roimhe seo go laghdaíonn cosc ar an gcosán comharthaíochta seo táirgeadh melanin agus roinnt coscairí aimsithe, lena n-áirítear bisabolol-Angelone, 4-hiodrocsa-3-meatocsaí cinnamaldehyde, andiphenyl-methylene-hydrazine carbo thiamine [12 –14].
Is limonoid é Gedunin (Ged), ar a dtugtar inhibitor próitéin turraing teasa 90, atá le fáil i géine an phlanda Meliaceae. Tá an limonoid seo flúirseach go príomha i epicarp torthaí crann neem Indiach óg (Azadirachta indica) agus tá gníomhaíochtaí bitheolaíocha éagsúla aige, lena n-áirítear frith-ailse, antimalarial, frith-athlasadh, antidiabetic, antiallergic, feithidicídeach, luibhicídeach, agus antifungal [15-18]. Níl aon tuairisc ann faoi mheicníocht éifeacht frith-melanogenic Ged.
Mar iarrthóir drugaí íocshláinte nó gníomhaire cosmaideacha chun galair a bhaineann le melanin a chóireáil nó athruithe datha craiceann, d'fhéadfadh buntáistí a bheith ag Ged mar gheall ar a n-airíonna sábháilte plandaí a tharlaíonn go nádúrtha [19]. Rinneadh éifeacht frith-melanogenic Ged a mheas in vitro andin vivo ag baint úsáide as cealla melanoma luch B16F10 agus suthanna zebrafish, faoi seach, chun iarrthóir gníomhaire faoitín cuí a aimsiú, ar cheann de na codanna is mó den mhargadh cosmaideacha tráchtála. Rinneadh tástáil freisin chun a thaispeáint conas a d'fhéadfadh dul i bhfeidhm ar ainmhithe.
2. Ábhar agus Modhanna
2.1. Ceimiceáin agus Imoibrithe
Ceannaíodh Ged ó Microsource Discovery Systems, Inc. (Gayloardville, CT, SAM). Ceannaíodh spreagthóir melanogenesis, -MSH, comhdhúil frith-melanóigineach, agus aigéad kojic ó Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, SAM). Bhí gach imoibrí eile níos airde ná grád bitheolaíocht mhóilíneach.
2.2. Cultúr na Cille
Fuarthas an líne cille melanoma-carcanóma luiche, B16F10, ón American TypeCulture Collection (ATCC, Manassas, VA, USA) agus saothraíodh í le 10 faoin gcéad de shéiream bó féatais(v/v), agus sholáthair peinicillin meáin Eagle-modhnaithe Dulbecco (GE). Healthcare, Chicago,IL, USA) in atmaisféar tais le 5 faoin gcéad CO2. Saothraíodh cealla go dtí gur shroich comhlíofacht 80 faoin gcéad agus roinneadh trí huaire sa tseachtain le cóimheas roinnte de 1:8. Breathnaíodh cealla gach 12 h, agus seiceáladh athruithe moirfeolaíocha. Coinníodh líon pasáiste na gcealla a úsáideadh beag.
2.3. Measúnacht Inmharthanachta Cille
Chun éifeacht iomadúil Ged ar líne chealla melanoma luch B16F1 a mheas, rinneadh measúnacht MTS de réir an phrótacail a tuairiscíodh roimhe seo [20] ag baint úsáide as trealamh Measúnachta Iomadú Cille Réiteach Uisciúil a hAon CellTiter96 (Promega, Madison, WI, SAM). Go hachomair, cuireadh 1 × 103 cill i ngach tobar den 96-pláta tobair agus goraíodh iad le haghaidh aisghabhála 24 h. Tar éis goir, caitheadh le Ged le tiúchain éagsúla: 0, 3.12, 6.25,12.5 25, 50, agus 75 µM. Tar éis 48 h, cuireadh 20 µL de thuaslagán measúnachta MTS le gach tobar ina raibh 100-µL meán le Ged agus gan Ged. Tar éis gor breise ar feadh 4 h, tomhaiseadh ionsúiteacht ag 490 nm ag baint úsáide as speictreafótaiméadar Multiskan GO (ThermoScientific, Waltham, MA, USA). Rinneadh na sonraí ionsúcháin a normalú leis an rialú agus léiríodh iad mar chóimheas coiscthe céatadáin.
2.4. Cinneadh na nÁbhar Melanin
Cinneadh ábhar melanin extracellular agus intracellular tar éis modh modhnaithe a tuairiscíodh roimhe seo [21]. -MSH (200 nM) goradh cealla meileanóma réamhchóireáilte ar feadh 72 h le agus gan aigéad kojic (200 µM) agus Ged (25 agus 50 µM). Tar éis gortha, bailíodh meáin saor ó fheanól-dearg, agus baineadh cealla saothraithe le maolán lysis RIPA. Rinneadh cealla buaite a lártheifneoiriú ag 4 ◦C, 13,000 rpm ar feadh 15 nóiméad agus díscaoileadh millíní i 1 M NaOH, réiteach DMSO 10 faoin gcéad ag 95 ◦C ar feadh 2 h. Rinneadh ionsúchan na meán bailithe agus melanin tuaslagtha a thomhas ag 470 nm ag baint úsáide as speictreafótaiméadar. Normalaíodh na samplaí go léir agus cinneadh a dtiúchan próitéine de réir mhodh an BCA.
2.5. Measúnacht Gníomhaíochta Tyrosinase Intracellular
Cinneadh gníomhaíocht tyrosinase cheallacha trí ráta ocsaídiúcháin L-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA) a thomhas mar a tuairiscíodh roimhe seo, le mionathruithe [22]. Rinneadh réamhchóireáil ar chealla melanoma luch B16F10 le 200 nM de -MSH ar feadh 1 h tar éis cóireáil le 200 µM aigéad kojic, le agus gan Ged (25 agus 50 µM), agus gortha ar feadh 72 h. Tar éis goir, baineadh cealla le maolán lysis ina raibh coscóir próitéineasein, agus lártheifneoiríodh an sampla ag 13,000 × g, 4 ◦C ar feadh 15 nóiméad. Aistríodh an forshnámh chuig feadán nua. Meascadh gach sampla (20 µL) agus 80 µL de L-DOPA 40 mM i 96-phláta tobair agus goraíodh iad ag 37 ◦C ar feadh 2 h. Cinneadh ionsú ag 475 nm ag oxidatedL-DOPA ag baint úsáide as léitheoir microplate. Normalaíodh an luach ionsúcháin le tiúchan próitéine gach sampla.
Sochar sliocht cistanche: bac ar léiriú tyrosinase.
2.6. Leithlisiú RNA agus qRT-PCR
Rinneadh leithlisiú RNA iomlán agus qRT-PCR de réir modh a thuairiscítear roimhe seo [18]. Baineadh RNA iomlán go hachomair as gach sampla ag baint úsáide as imoibrí Trizol (Ambion, Austin, TX, SAM). Socraíodh tiúchan iomlán RNA eastósctha trí ionsúchán ag 260 nm, agus rinneadh cáilíocht an RNA iomlán a sheiceáil le cóimheas ionsúcháin de 260:280 agus 260:230 nm ag baint úsáide as léitheoir microplate Multiskan GO (Thermo Scientific). Rinneadh TotalRNA (5 µg) a shintéisiú isteach i cDNA le trealamh sintéise cDNA céad-snáithe Maxima (Thermo Scientific) agus sintéisíodh cDNA. Cinneadh leibhéil slonn mRNA de Mitf, Tyr, Trp-1, agus Trp-2 trí úsáid a bhaint as Luna Universal qPCR Master Mix (New England Biolabs, Ipswich, MA, USA) agus QuantStudio 3 Real-Time PCR instrument ( Bithchórais Fheidhmeach, Foster City, CA, SAM) de réir phrótacal an teagascóra. Rinneadh leibhéal slonn na ngéinte a normalú le glyceraldehyde 3-fosfáit dehydrogenase (GAPDH).
2.7. Anailís Immunoblot
Rinneadh anailís immunoblot de réir na modhanna a ndearnadh cur síos orthu roimhe seo [23]. Bailíodh próitéiní cealla B16f10 ag baint úsáide as maolán Ceti lysis (Translab, Daejeon, An Chóiré), agus socraíodh an tiúchan le trealamh measúnaithe próitéin Pierce BCA (Thermo Scientific). Lódáladh an méid céanna próitéiní (30 µg) de gach sampla ar fhoirmiú polaiacrylamide sulfáit-óidideicile sulfáit-agus leictreafóiréis. Tar éis scaradh, aistríodh próitéiní chuig membrane nitrocellulose, agus cuireadh bac ar an membrane i dtuaslagán bainne neamhfatskim 10 faoin gcéad ar feadh 2 h. Goradh na seicní blocáilte le príomh-antasubstaint thar oíche ag 4 ◦C, agus ina dhiaidh gor eile le hantasubstaint tánaisteach ag 26 ◦C ar feadh2 h. Caolaíodh antasubstaintí príomhúla agus tánaisteacha i gcóimheas 1:1000 agus 1:3000, faoi seach. Ar deireadh, rinneadh seicní blotted a dhoiciméadú ag baint úsáide as ChemiDoc (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) le himoibrí ECL (SuperSignal, Thermo Scientific). Ceannaíodh antasubstaintí príomhúla agus tánaisteacha ó Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, SAM).
2.8. Tástáil suth Zebrafish
Wild-type zebrafish were thankfully obtained from Professor Tae-Lin Huh, the School of Life Science and Biotechnology, Kyungpook National University, Daegu, Republic of Korea. The strain was kept for more than eight generations in a laboratory condition of 26 ◦C ± 1 ◦C, and a day-to-night ratio of 8:16. General fish care and breeding conditions, as previously described, were followed [24]. Ten groups of zebrafish were mated to obtain embryos with a mating ratio (male: female, 1:2), and among obtained embryos, healthy embryos had >Ráta toirchithe 80 faoin gcéad agus roghnaíodh agus úsáideadh iad don turgnamh. Bhí dhá cheann déag de shuthanna sláintiúla i ngach grúpa cóireáilte suite i ngach tobar de 96-phláta tobair laistigh agus gan Ged (25, 50, 75, agus 100 µM) agus aigéad kojic (8 mM) i meán E3 ag céim na sciath. 24 h iar-toirchithe (h/pf), díchóiríodh suthanna, agus seiceáladh mínormáltacht gach 24 h go dtí 72 h/pf. Tógadh feinitíopa na suthanna i radharc cliathánach agus droma chun difríochtaí idir grúpaí a úsáideann micreascóp díreach BX53 a chur i gcomparáid le DP80CCD (Olympus Life Science Solutions, Waltham, MA, SAM). Tar éis pictiúr a dhéanamh, rinneadh suthanna a homogenized le maolán Ceti lysis (TransLab), agus rinneadh tiúchan melanin a chinneadh, a bhí comhionann le cinneadh ábhar melanin cille B16F10.
2.9. Anailís staitistiúil
Rinneadh na hanailísí staitistiúla go léir a cuireadh i láthair sa staidéar seo trí úsáid a bhaint as GraphPad Prismv.8.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, SAM). Baineadh úsáid as ANOVA aontreo le tástáil Tukey le haghaidh comparáidí iolracha. Léirítear na sonraí go léir mar an meán ± na diallais chaighdeánacha. Measadh go raibh difríochtaí suntasacha suntasacha staitistiúla ag p <>
3. Torthaí
3.1. Éifeacht cíteatocsaineacha Piperlongumine i gCealla B16F10
Sular imscrúdaíodh éifeacht frith-melanogenic Ged, rinneamar tástáil inmharthanachta sa líne chill B16F10 chun an raon dáileog a shocrú sa staidéar seo. Sa raon tiúchana ó 3.12 go 50 µM, níor léirigh cealla aon éifeacht coisctheach ar fhás, agus bhí a n-iomadú coibhneasta ó 91.0 faoin gcéad go 118.7 faoin gcéad (Fíor 1). I gcodarsnacht leis sin, cé go raibh suntas ar bith ag baint le staitisticí, cuireadh bac beag ar fhás na ngrúpaí 75 µM ar cuireadh cóireáil orthu (89.3 faoin gcéad; Fíor 1). Mar sin, socraíodh an tiúchan ab airde go 50 µM sna turgnaimh chill-líne a bhí fágtha.
Fíor 1. Citotocsaineacht gedunin (Ged) i gcealla B16F10
3.2. Cuireann Gedunin cosc ar Tháirgeadh Meilanin agus ar Ghníomhaíocht Tyrosinase Incheallach i gCealla Mealanoma Luiche B16F10
Rinneamar measúnú ar éifeacht frith-melanóigineach Ged i gcealla melanoma luch B16F10. Rinne agónaí TheMC1R, -MSH, táirgeadh melanin incheallach agus eischeallach a tharlódh go héifeachtach (Fíor 2a–c). Bhí dath na meán bailithe dorcha le -MSH (Fíor 2a). Tháinig laghdú ar an dath nuair a cuireadh Ged leis, agus bhí an éifeacht ag brath ar dháileog (Fíor 2a). Mar thoradh ar an ábhar iomlán melanin, -MSH mhéadaigh táirgeadh melanin i melanocytes thart ar seacht n-huaire níos airde ná an grúpa rialaithe agus spreagtha laghdú melanin trí aigéad kojic a chur leis, rialú dearfach ar a dtugtar i melanogenesis (Fíor 2d). Ghiorraigh Ged freisin táirgeadh melanin a spreagann spreagthaí i melanocytes ag gach tiúchan a tástáladh sa staidéar seo (Fíor 2d). Thairis sin, sa tástáil gníomhaíochta tyrosinase, léirigh Ged éifeacht choisctheach láidir ar an einsím teorannaithe ráta, tyrosinase, i melanogenesis (Fíor 2e). Tháinig laghdú 20 faoin gcéad agus 12.24 faoin gcéad ar ghníomhaíocht tyrosinase i ngrúpa cóireáilte 50 µM Ged i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe agus a-MSH-spreagtha, faoi seach.
Fíor 2. Éifeacht frith-melanogenic fíor (Ged) ar tháirgeadh melanin spreagtha alfa-melanocyte-spreagtha ( -MSH) i gcealla B16F10.
3.3. Laghdaíonn Gedunin -MSH Léiriú Géine a Bhaineann le Melanogenesis
-MSH (200nM) leibhéal mRNA spreagtha Mitf; fachtóir trascríobh melanogenesis; agus spriocghéinte Tyr, Trp-1, agus Trp-2 (Fíor 3). Laghdaigh cóireáil Ged an leibhéal mRNA de na géinte go léir ar bhealach dáileog-spleách ag an tiúchan de 25 agus 50 µM (Fíor 3). I gcomparáid leis an rialú dearfach, aigéad kojic (200 µM), bhí Ged níos éifeachtaí chun an mRNA a laghdú. leibhéal na ngéinte a bhaineann le melanogenesis i gcealla B16F10. Ina theannta sin, tháinig laghdú 0.10- agus 0.26-huaire níos ísle ná cealla ionduchtaithe -MSH, faoi seach, ag tiúchan 50 µM (Fíor 3a,b) ar leibhéal Miitfand Tyr (Fíor 3a,b). Laghdaigh leibhéil mRNA a íos-rialaítear leo seo leibhéal Tyr agus laghdaigh siad an méid TYR de tháirgeadh melanin níos lú ná an grúpa rialaithe.
Fíor 3. Éifeacht an laghdaithe ar ghéinte a bhaineann le melanogenesis.
3.4. Gedunin Laghdaithe TYR agus TYR-1 Méid
Tá ról ríthábhachtach ag TYR i melanogenesis, agus bíonn tionchar díreach ag leibhéal próitéine an einsím seo ar melanogenesis. Rinneamar iarracht a dhearbhú an t-athrú ar an méid próitéine, TYR, de bharr leibhéal laghdaithe mRNA trí anailís imdhíon-blot. Tháinig laghdú suntasach ar TYR i gcomparáid le rialú, agus déileáladh le -MSH de réir dáileog-spleách (Fíor 4a). Ina theannta sin, laghdaíodh TRP-1, fachtóir riachtanach trascríobh TYR, beagán (Fíor 4a). Bhí na torthaí níos soiléire nuair a normalaíodh banna gach próitéine ag an bpróitéin coimeádta tí, GAPDH (Fíor 4b,c).
Fíor 4. Blotting an iarthair ar chealla B16F10 spreagtha alfa-melanocyte-spreagtha (-MSH) le fíorchóireáil.
3.5. Tocsaineacht Gedunin in aghaidh riabhánach i bhForbairt na Luathchéime
Rinneadh meastóireacht thocsaineolaíoch ar Ged ar fhorbairt luathchéime zebrafish sular rinneadh measúnú ar thástáil frith-mheileaigineach ar Ged in vivo. Níor breathnaíodh mínormáltacht moirfeolaíoch ar shuthanna séabra iasc in aon tiúchan cóireáilte Ged (Fíor 5a). Ní raibh aon difríochtaí suntasacha ag tiúchana tástáladh Ged, 25, 50, 75, agus 100 µM, ráta marthanais na ngrúpaí cóireáilte Ged ag 72 h den tréimhse cóireáilte le ceimiceán (Fíor 5b).
Figiúr 5. Tocsaineacht fhíor (Ged) ar fhorbairt luathchéime iasc séabra.
3.6. Ábhar Melanin Laghdaithe Gedunin i Suthanna Zebrafish
Toisc nach bhfuil aon tocsaineacht forbraíochta ag Ged i suthanna zebrafish, scrúdaíomar éifeacht frith-melanogenic ag sraith tiúchana de Ged, 25, 50, 75, agus 100 µM. Sa bhreathnóireacht theoptúil, rinneamar seiceáil ar na poncanna d'iasc séabra lí; taispeántar taobh-amharc lasnairde ar shuthanna séabra éisc i bhFíor 5a. Tá éifeacht choiscthe ag aigéad Kojic ar lí a tháirgeadh suthanna zebrafish. Bhí níos lú líochaidí ar an gcloigeann freisin ar shuthanna séabra-éisc cóireáilte (Fíor 6a). Ina theannta sin, tháinig laghdú ar an ábhar melanin iomlán a bhaintear as an gcorp iomlán de shuthanna séabrafish tar éis nochtadh Ged ar feadh 72 h i ngrúpaí aigéad kojic, rialú adeimhneach, agus Ged (Fíor 6b,c) araon.
Fíor 6. Tionchar fíor ar tháirgeadh melanin in vivo.
4. Plé
Sa staidéar seo, rinneadh luacháil ar airíonna coiscthe Ged i gcoinne táirgeadh melanin. Bhí 50 µM) níos ísle ná sin d'aigéad kojic (200 µM), an rialú dearfach. Meaitseáladh é le gníomhaíocht lag intracellulartyrosinase, einsím a thiontaíonn L-Dopa go DQ, an príomh-réamhtheachtaí ofemelanin agus pheomelanin. Is éard atá i gceist le laghdú ar ghníomhaíocht Tir ná moilliú ar phróisis táirgthe iomlána melanin agus ganntanas an dá tháirgí deiridh, eumelanin agus feomelanin [1-3]. Rinneadh na leibhéil tras-scríofa agus TYR a rialú ag sraith fachtóirí tras-scríofa: Mitf, Trp-1, agus Trp-2 [1,2]. Ciallaíonn méid laghdaithe próitéine agus leibhéil mRNA MC1R gníomhachtaithe trí -MSH-MC1R-PKA-ais comharthaíochta CREB le -MSH a íosrialáil le cóireáil Ged ag tiúchan 25 agus 50 µM, dáileog-spleách i PCR cainníochtúil agus blotting an Iarthair araon. Mar a thuairiscítear roimhe seo, má laghdaítear an méid MITF bíonn ganntanas Tyr, Trp-1, agus Trp-2 trí níos lú ceangailteach le réigiún tionscnóra na ngéinte seo [25–27]. Laghdaíonn na fachtóirí trascríobh seo TYR go leibhéal níos ísle agus cuireann sé bac ar tháirgeadh lí melanin i gcealla B16F10. Ina theannta sin, léiríonn torthaí reatha éifeacht coisctheach TYR Ged, pointe ríthábhachtach eile de tháirgeadh meileanin sa mheileanicít. Léirigh Ged freisin go raibh éifeacht choiscthe aige ar tháirgeadh lí le linn forbairt luathchéime zebrafish sna samhlacha in vitro agus in vivo.Léirigh ár dtorthaí gur laghdaigh cóireáil le Ged le haghaidh 72 h embróipigmentú zebrafish go suntasach. Laghdaíodh ábhar iomlán melanin agus leibhéil mRNA de ghéinte gaolmhara le láithreacht Ged, agus thacaigh claonadh na dtorthaí seo go láidir le maoin in vitroanti-melanogenesis Ged.
Ina theannta sin, bhí cumas coiscthe Ged i bhfad níos láidre ná aigéad kojic, ceann de na comhdhúile is coitianta ar a dtugtar mar imoibrí whitening sa tionscal cosmaideacha [6,28]. Bhí an tiúchan ag a d'fheidhmigh Ged réasúnta níos ísle ná aigéad kojic. Ina theannta sin, léirigh tuarascáil roimhe seo go raibh éifeacht frith-melanogenic cosúil le haigéad kojic [2] ag imoibrí whitening coitianta eile, arbutin. Dá bhrí sin, ba cheart Ged a mheas mar imoibrí whitening in ionad an aigéad arbutin nó kojic a úsáidtear faoi láthair, agus mar fhrith-melanomadrug maidir lena airíonna gealltanais.
Moladh airíonna frith-melanigineacha Ged roimh [29,30], ach níor dhírigh na staidéir seo ar mheicníochtaí sonracha na héifeachta, agus thug siad faoi deara go simplí athrú ar éifeachtaí citotocsaineacha agus méid táirgeachta melanin in vitro, ach gníomhaíocht frith-iomadaithe agus éifeachtaí coisctheacha ar. Tá slonn HSP 90 aibhsithe [31–33]. Tá an fhéidearthacht Ged mar ghníomhaire frith-melanogenetic tuairiscithe; áfach, níor dhírigh na staidéir seo ar mheicníochtaí sonracha na héifeachta, agus níor breathnaíodh iontu ach athrú ar éifeachtaí cíteatocsaineacha agus méid táirgeachta melanin in vitro. Rinneamar iarracht an mheicníocht leibhéal ceallacha a chinneadh trí leibhéal mRNA agus méid próitéine na ngéinte a bhaineann le táirgeadh melanin a dhearbhú. In éineacht le tuarascálacha roimhe seo, léirigh an staidéar seo peirspictíocht nua ar Gedas mar chomhpháirt de chomhábhair chosmaideacha le haghaidh dhá bhuntáiste, frith-ailse gan íoc agus frith-melanogenesis, a d'fhéadfaí a chur i bhfeidhm ar mheileánoma UV-spreagtha agus carnadh lí, go háirithe, ag an am céanna.
púdar sliocht cistanche: fréamhacha saor in aisce soiléir
5. Conclúidí
Mar fhocal scoir, thaispeáin na torthaí seo go léir gur féidir comhdhúil úrnua, Ged, a úsáid mar imoibrí adepigmentation le haghaidh bithsintéise melanin, a ghiorrú próitéiní iartheachtachaTYR, TRP{0}}, agus TRP-2 faoi mhéid laghdaithe i gcomparáid leis an máistir. próitéin rialaithe, MITF, i gcórais in vitro agus in vivo de shamhail iasc riabhacha.
táibléad cistanche
