Maolaíonn Kaempferol Damáiste LD-mitochondrial Trí Uathphagy a Chur Chun Cinn: Impleachtaí i nGalar Parkinson Cuid 2

Déan teagmháil le do thoiloscar.xiao@wecistanche.comle haghaidh tuilleadh eolais

I MPP cealla móide -treated, a bhí droim ar ais ag Ka (Fig.5a agus b).

Táthar ag tuar go spreagfaidh gníomhaíocht mhéadaithe neuronal sárocsaídiú lipid agus FA [33] agus is féidir é a tharlú le MPP móide nochtadh. Rinneamar measúnú ansin cibé an ndeachaigh na LDanna taiscthe faoisárocsaídiútar éis cóireáil MPP móide ag baint úsáide as an braiteoir sárocsaídiúcháin lipid cóimheasmhéadrach BODIPY 581/591 C11 (BD-Cl1). Tar éis sárocsaídiúcháin, aistríonn buaic astaíochta fluaraiseachta BD-C1 ó 590 (dearg) go 510 (glas) nm [34]. Thugamar faoi deara méadú ar an gcóimheas BD-C11 (glas go dearg) i SH-SY5Y

Fíor 4. (a) Tomhaiseadh inmharthanacht cille i gcealla Ka-chóireáilte (0, 3,30,60,100,300, nó 600 μM; 24 h) SH-SY5Y ag measúnachtaí CCK-8. Taispeántar struchtúr ceimiceach Ka faoin gcuar. (b)Tástálacha LDH ar chealla SH-SY 5Y atá cóireáilte le Ka (3.10.30, nó 60 uM) agus/nó MPP(400 uM.24 h). (ce) Ka (30 UMD-agus/nó MPp móide (400 uM))-cóireáilte SH-SY5Y cealla dhaite le Hoechst 33,342 agus PI agus ansin breathnaíodh le micreascópacht fhluaraiseachta. Barraí Scála, 80 μm Cainníochtú Hoechst-dearfach (d )agus rinneadh cealla dúbailte-dearfach (e) Hoechst/PI. (fg) Cóireáladh cealla SH-SY5Y le Ka(30 UMD- agus/nó MPp plus (400 UMD ar feadh 24 h, ansin rinne Annexin V/ measúnú ar apoptosis). Staining PI agus cíteiméadracht sreafa.Cuirtear na sonraí le haghaidh anailíse citeiméadrachta sreafa i láthair mar chéatadán den daonra cille trí normalú chun samplaí a rialú. (hk) Spreagadh cealla SH-SY5Y réamhchóireáilte Ka (30 uM) le MPp móide nó gan é (400 uM, imdhíon-blotaí ionadaíocha (h) agus anailís chainníochtúil ar Bcl-2, Bax,procaspase-3, agus caspase scoilte-3 i sleachta cille(i,j,k). Cuirtear na sonraí in iúl mar mheán ± SEM agus ionadaíoch ar thrí thurgnamh neamhspleácha ar a laghad *P<0.05,><0.01,><0.001, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="">caimpéar.

Fig, 5. Sochtann Ka carnadh LD móide-spreagtha MPp agus damáiste mitochondrial ocsaídiúcháin lipid-idirghabhála i gcealla SH-SY5Y.SH-SY

Rinneadh réamhchóireáil ar chealla 5Y le Ka (30 μM) ar feadh 3 h roimh MPP móide （400 μM） spreagadh le haghaidh 24 h (ab） Íomhánna ionadaíocha de staining BODIPY 493/503 (a) agus anailís chainníochtúil ar charnadh LD). Déantar na sonraí cainníochtaithe a normalú chuig an ngrúpa rialaithe. barraí scála.20 um,(cd) Léiríonn íomhánna ionadaíocha de BODIPY 581/591 Cl1(BD-Cl1)staining(c).Dearg(591 nm)agus glas (488 nm) lipidí iomlána agus sárocsaídithe, faoi seach. Cainníochtú an chóimheas sárocsaídiúcháin lipid (glas/dearg) normalaithe go dtí an grúpa rialaithe(d). Rinneadh trí thurgnamh neamhspleách; n =5 duillín clúdaigh/cóireáil. Barraí scála, 20 um. (ef) Rinneadh cealla beo a dhathú le JC-1 ar feadh 30 nóiméad agus rinneadh anailís orthu trí mhicreascópacht (e), Cainníochtú poitéinseal an scannáin miteachondrial (f. Tá na sonraí ionadaíoch do thrí thurgnamh neamhspleácha, líon iomlán de {{22} } scóráladh cealla/cóireáil don anailís chainníochtúil.(gh)Rinneadh monatóireacht ar anailís mhicreascópach ar mhiotochondria trí imdhíon-chóireáil do Tomm20(g).Cainníochtúde namiteachondriallimistéar normalaithe go dtí an grúpa rialaithe (h). Rinneadh trí thurgnamh neamhspleách; scóráladh 20 cill/cóireáil don anailís chainníochtúil.

Cliceáil anseo le do thoil chun tuilleadh eolais a fháil

(ij)Tomhaiseadh leibhéil ATP(i) agus gníomhaíocht Na móide -K móide -ATPase (j). Cuirtear na sonraí in iúl mar mheán ± SEM ó thrí thurgnamh neamhspleách. ns, ní suntasach, *P<><><0.001, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" ka,="" kaempferol;="" mpp+,1-methyl-4-phenylpyridinium..(for="" interpretation="" of="" the="" references="" to="" color="" in="" this="" figure="" legend,="" the="" reader="" is="" referred="" to="" the="" web="" version="" of="" this="">

cealla cóireáilte le MPP móide , rud a léiríonn sárocsaídiú lipid méadaithe, rud a chuir cosc ​​​​ar Ka ( Fíor. 5c agus d ).

Is féidir le hathruithe i LDanna mífheidhm a spreagadh i go leor orgánaill intracellular, go háirithe mitochondria [16], agus tá strus ocsaídiúcháin ina fhachtóir tábhachtach a bhaineann le damáiste mitochondrial a d'fhéadfadh MPP móide [35] a tharlú. Rinneadh iarrachtaí iniúchadh a dhéanamh ar an ról atá ag sárocsaídiú lipid i ndamáiste mitochondrial MPp móide-spreagtha, agus scrúdaigh muid athruithe ar acmhainneacht miteachondrial agus ar mhoirfeolaíocht mitochondrial i gcealla rialaithe agus MPP móide-chóireáilte. Mar a breathnaíodh, bhí laghdú ar acmhainneacht membrane mitochondrial i gcealla cóireáilte le MPP* (Fíor 5e agus D, chomh maith le laghdú ar mhéid mitochondrial, mar is léir óimdhíonachtdo Tomm20, próitéin atá suite sa membrane mitochondrial seachtrach (Fig.5g agus h), agus maolaíodh na héifeachtaí seo trí a-tócaifearóil a chur leis, frithocsaídeoir sonrach intuaslagtha in lipid (Fíor 5e-h). Ina theannta sin, mhaolaigh a-tócaifearóil go mór ganntanais fuinnimh MPP-spreagtha, mar a léirítear le leibhéil ATP agus gníomhaíocht Na plus -K plus -ATPase (Fig.5i agus j), rud a léiríonn feidhm mitochondrial freisin. Tugann na sonraí seo le fios go maolaíonn Ka carnadh LD MPp móide-spreagtha chun sárocsaídiú lipid a chosc, rud a mhéadaíonn damáiste mitochondrial i gcealla SH-SY5Y.

Is féidir le Cistanche díolúine a fheabhsú

Toradh 6. Cuireann Ka uathphagaíocht chun cinn agus laghdaítear táirgeadh mtROS i gcealla SH-SY5Y MPP móide-chóireáilte De ghnáth, seachadtar LDanna chuig líosóim trí uathphagy agus is féidir iad a bhriseadh síos ina FAnna chun sárocsaídiú a sheachaint. Mar sin féin, léiríonn an fhianaise go bhfuil lagú ar uathphagy, a bhfuil ról ríthábhachtach aige i PD[2]. Nuair a bhíonn baint ag autophagy le LDanna a roinnt le briseadh síos i líseasóim (Fíor 6a), tugtar lipophagy ar an bpróiseas go sonrach [2]. Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil baint ag autophagy le héifeacht neuroprotective Ka, rinneamar scrúdú ar leibhéil na bpróitéiní a bhaineann le autophagy. Mar a léirítear i bhFíor 6b-d, i gcealla saothraithe SH-SY5Y, laghdaíodh leibhéal an tslabhra solais próitéine a bhaineann le microtubule 3 (LC3)-I go suntasach, agus tháinig méadú suntasach ar léiriú p62 i gcealla MPP móide-chóireáilte, arna dtomhas ag imdhíonoblotting, agus d'aisiompaigh Ka an éifeacht seo go suntasach. Rinneamar scrúdú breise ar na hathruithe ar uathphagaíocht trí imdhíon-chothú do LC3. Chun gur féidir autophagosomes a charnadh laistigh de chealla, cuireadh bafilomycin leis chun cosc ​​​​a chur ar chomhleá autophagosome le lysosomes. Mar a léiríodh, braitheadh ​​líon méadaithe puncta LC3b i gcealla MPP móide-chóireáilte, rud a léiríonn díghrádú uathphagach lagaithe, agus d'aisiompaigh Ka(Fig.6e agus f. na torthaí seo freisin go bhfuil LDanna i gcealla SH-SY5Y slógtha ag autophagy lena bhaint sa deireadh agus gur féidir le Ka autophagy a chur chun cinn chun carnadh lipid ocsaídithe a laghdú Is féidir le sárocsaídiú lipid méadaithe damáiste mitochondrial a dhéanamh níos measa trí strus ocsaídiúcháin mitochondrial a mhéadú [4]. Ina theannta sin, laghdaigh cóireáil Ka go mór giniúint láidir mtROS, mar a chinntear le staining MitoSOX (Fig. .6g agus h), agus laghdaigh líon na mitochondria mífheidhmiúil, mar a chinntear le lipéid shonracha mitochondria chun idirdhealú a dhéanamh idir riospráid (MitoTracker domhain dearg) agus iomlán (MitoTracker glas) mitochondria (Fíor 6i agus j). Ina theannta sin, a bheith acu. léargas díreach ar athruithe miteachondrial, bhraitheamar an ráta tomhaltais ocsaigine (OCR) ag an anailísí Seahorse XF. laghdaithe i gcealla MPP móide-chóireáilte, agus is léir go n-aisiompóidh cóireáil Ka an damáiste seo de bharr MPP móide (Fíor. 6k).

Toradh7. Déanann cosc ​​​​autophagy an éifeacht shochtadh atá ag carnadh Kaon LD, mífheidhm mitochondrial, agus díobháil néarónach DA in vitro a aisiompú

Scrúdú a dhéanamh an bhfuil uathphagaíocht ar cheann de na príomh-mheicníochtaí trína ndéanann Ka idirghabháil ar DAneuroprotection, baineadh úsáid as an coscaire autophagy 3-MA. Fuaireamar amach go raibh éifeachtaí coisctheacha Ka ar ghortú MPp móide-spreagtha, lena n-áirítear laghdú ar charnadh LD (Fíor 7a agus b), táirgeadh mtROS laghdaithe (Fíor.7c agus d), agus maolaíodh mífheidhm mitochondrial (Fíor 7e agus f i SH). -Cuireadh bac suntasach ar chealla SY5Y le 3-MA. Ós rud é go bhfuil dlúthbhaint ag ocsaídiú LD agus mífheidhm mitochondrial le bás néarónach DA, rinneamar scrúdú ar néaróin DA bunscoile saothraithe. líon agus fad na bpróiseas néaránach TH a chainníochtú trí imdhíonadh.Léirigh anailís mhoirfeolaíoch go raibh laghdú suntasach tagtha ar líon agus ar fhad na bpróiseas néarónach ag MPP móide agus á gcosaint ag Ka, agus rinneadh an chosaint seo a aisiompú tuilleadh le 3-MA (Fíor. 7g-i) Léiríonn na sonraí seo go maolaíonn Ka damáiste néaránach DA trí autophagy a chur chun cinn.

Toradh 8. Tost Chuir Atg5 deireadh le cosc ​​Ka-mediated ar chaillteanas néarónach in vivo

Chun a dheimhniú tuilleadh go dtugann Ka cosaint i gcoinne MPTP/TH spreagtha p-chomh maith le caillteanas néarónach ar bhealach atá ag brath ar uathphagy, chuireamar Atg5 ina thost trí víreas adeno-ghaolmhar a mhicrinstealladh (AAV-ag cur shRNA ar saintréith roimhe seo in aghaidh Atg5 in iúl isteach sa mesencephalon déthaobhach (Fíor. 8a) mar a thuairiscítear roimhe seo [25]. I réamh-turgnaimh, thugamar faoi deara go raibh aistriú shRNA Atg5 ar feadh 2 sheachtain bainte amach go leor léiriú GFP i néaróin THt (Fig.8b) agus bac ar léiriú ATG5 i SNpc na lucha instealladh (Fig.8c) Fuaireamar amach gur aisiompaigh Atg an éifeacht neuroprotective de Ka, mar is léir ón slonn próitéin upregulated de TH (Fíor 8d agus e) agus méadú ar líon na néaróin TH (Fig.8f agus g). tacú tuilleadh le rannchuidiú autophagy le héifeacht chosanta Ka i lucha PD Mar fhocal scoir, dhearbhaíomar go dtugann Ka cosaint i gcoinne díobhála MPTP/p-spreagtha trí LD a laghdúocsaídiúcháin agus mífheidhm mitochondrialtrí autophagy a chur chun cinn.

4. Plé

Léirigh an staidéar reatha go raibh an móilín beag nádúrtha Ka ina phríomhfhachtóir trína bhféadfadh comharthaíocht uathphagic bac a chur ar thocsaineacht ocsaídiúcháin lipid. Léirigh ár dtorthaí go bhfuil an cosán autophagy ina phríomhlúb rialála trína maolaíonn Ka sárocsaídiú LD agus damáiste mitochondrial ina dhiaidh sin agus dhírigh sé ar ról na tocsaineachta LD a rialaítear le autophagy maidir le damáiste mitochondrial a mhaolú agus néarmheathghiniúint de bharr strus ocsaídiúcháin iomarcach a chosc (Fíor. 9).

Is iad LDanna na suíomhanna intracellular de stóráil neodrach lipid [5] agus tá siad ríthábhachtach do mheitibileacht lipid agus homeostasis fuinnimh, cé go bhfuil mífheidhm LD nasctha le go leor galair [16]. Tugann fianaise carntha le fios go bhfuil na róil a imríonn LDanna sa bhitheolaíocht agus sa phaiteolaíocht i bhfad níos leithne ná mar a ceapadh roimhe seo. Sa CNS, léirigh fianaise go bhfuil LDanna méadaithe i néaróin agus glia bainteach le paiteolaíocht neurodegenerative [10,36].Go mion, braitheadh ​​​​LDanna in axons néaróin Aplysia saothraithe in vitro [37] agus i ranna inchinn ó Samhlacha galar Huntington [38]. Ina theannta sin, léiríodh go bhfuil néaróin go háirithe íogair do thocsaineacht lipid, agus mar thoradh ar charnadh LDanna nach féidir a bhaint go tráthúil tá sárocsaídiú LD luathaithe agus is féidir go dtiocfadh neurodegeneration [171.

Tá carnadh lipid i néaróin hipirghníomhaíochta tocsaineach, ní hamháin toisc go bhfuil na lipidí seo so-ghabhálach i leith sárocsaídiúcháin. Thairis sin, féadfaidh ábhar na LDanna iomarcacha dul isteach ar bhealaí meitibileach neamhocsaídeacha, rud a chuireann tús le táirgeadh iomarcach ceramide, atá tocsaineach do chealla [39]. Léirigh staidéir le déanaí freisin gur féidir FAanna a thiontú ina acylcarnitines i gcealla lochtacha LD, rud a fhágann go bhfuil mífheidhm mitochondrial agus táirgeadh ROS ina dhiaidh sin [40]. Is dócha go mbeidh iarmhairtí sonracha agus domhain ag na próisis seo i néaróin hipirghníomhacha toisc go gcuireann mitochondria mífheidhmiúil isteach ar an gcumas tomhaltas FA, agus go n-eascraíonn táirgeadh mtROS tuilleadh sárocsaídiú lipid membrane.

Mar sin, ba cheart homeostasis LD a rialú go maith i néaróin, rud atá ríthábhachtach chun tocsaineacht a sheachaint agus chun sláinte na hinchinne a chothabháil ar deireadh thiar. Sa staidéar seo, fuaireamar amach go gcuireann an móilín beag nádúrtha Ka bac ar thocsaineacht néarónach LD a léirigh mar charnadh méadaithe LD, sárocsaídiú lipid ardaithe, agus léiriú géine a bhaineann le tocsaineacht lipid upregulated i gcealla MPP móide-inslithe SH-SY5Y. Níos tábhachtaí fós, tá sé léirithe againn freisin go laghdaíonn cóireáil Ka an

Fíor 6. Cuireann Ka uathphagaíocht chun cinn agus laghdaítear táirgeadh mtROS i gcealla SH-SY5Y móide-chóireáilte MPP.

Spreagadh Ka (30 uM, 3 h)-cealla SH-SY5Y réamhchóireáilte le (nó gan) MPP(400 uM, 24 h). (a) Díghrádú LDanna (LDanna) trí uathphagaíocht, ar a dtugtar lipophagy.(bd) Imdhíon-blotaí ionadaíocha (b)agus anailís chainníochtúil ar LC3 (c) agus p62(d) i gcíteaplasma cealla SH-SY5Y. Déantar na sonraí cainníochtaithe a normalú chuig an ngrúpa rialaithe. (ef) Rinneadh anailís ar íomhánna ionadaíocha de LC3B puncta ag baint úsáide as micreascópacht chomhfhócasach (e). Cuireadh cóireáil ar chealla le bafilomycin roimh imdhíonadh. Barra scála, 20 um. Rinneadh líon na bpunc LC3B in aghaidh na cille a chainníochtú(f). (gh)Raiteadh cealla SH-SY5Y le MitoSOX agus rinneadh anailís orthu trí mhicreascópacht chomhfhócasach (g). Bhí daite núicléi le DAPI (gorm). Barraí scála, 20 um. Cainníochtú déine fluaraiseachta MitoSOX ag baint úsáide as bogearraí ImageJ (h). (ii) Dathaíodh cealla SH-SY5Y le MitoTracker Green agus MitoTracker domhain dearg agus rinneadh anailís orthu de réir cíteiméadracht sreafa (h) agus rinneadh líon na miteachondria mífheidhmiúil a chainníochtú (i). Cuirtear na sonraí in iúl mar mheán ± SEM de thrí go cúig thurgnaimh neamhspleácha.

(k) Chinn an anailísí Seahorse XF an ráta tomhaltais ocsaigine (OCR) de chealla beo SH-SY5Y, tar éis instealladh oligomycin. FCCP, agus rotenone/antimycin A. (n =3, meán ± SD). *P<0.05.**p><>< 0.001,="" by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" ka.="" kaempferol;="" mpp+,1-methyl-4-phenylpyridinium..(for="" interpretation="" of="" the="" references="" to="" color="" in="" this="" figure="" legend,="" the="" reader="" is="" referred="" to="" the="" web="" version="" of="" this="">

Fíor 7. Trí chosc a chur ar autophagy aisiompaítear éifeacht chosanta Kaon MPp móide gortaithe i gcealla néarónacha. Cóireáladh cealla SH-SY5Y le 3-MA (3 mM) ar feadh 1 h roimh Ka (30 μM, 3 h）) cóireáil ina dhiaidh sin MPP móide （400 μM,24 h） spreagadh. （ab） Íomhánna ionadaíocha (a) agus cainníochtú (b） de charnadh LD i gcealla SH-SY5Y. Bhí daite núicléi le DAPI (gorm). Barra scála, 40 μm. (cd) dhaite cealla SH-SY5Y le MitoSOX (c), agus rinneadh cainníochtú ar mtROS (d）. Barra scála, 40 μm. （ef） Bhí dhaite cealla SH-SY5Y le MitoTracker Green agus MitoTracker domhain dearg agus rinneadh anailís orthu de réir cíteiméadracht sreafa (e) agus cainníochtaíodh líon na mitochondria mífheidhmiúil (f). (gi) Rinneadh réamhchóireáil ar néaróin phríomhúla Mesencephalic le 3-MA (3 mM,1 h), agus cóireáil Ka (30 uM,3 h) agus MPp móide (50uM,24 h) ina dhiaidh sin. Íomhánna ionadaíocha de TH imdhíonta néaróin (g) agus cainníochtú na meánuimhir brainse (h) agus fad iomlán néarít (i). Barra scála, 100 μm. Tá na sonraí ionadaíoch ar thrí thurgnamh neamhspleácha, rinneadh líon iomlán de 17-20 néaróin/cóireáil a chainníochtú in (h,j). Cuirtear na sonraí in iúl mar mheán ± SEM de thrí go cúig thurgnaimh neamhspleácha.*P<><><0.001, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" ka,="" kaempferol;="" mpp+,1-methyl-4-phenylpyridinium..(for="" interpretation="" of="" the="" references="" to="" color="" in="" this="" figure="" legend,="" the="" reader="" is="" referred="" to="" the="" web="" version="" of="" this="">

carnadh LDanna agus laghdaítear léiriú na ngéinte tocsaineachta lipid sa mhúnla luchóg PD MPTP-spreagtha. Léiríonn na sonraí seo gur féidir le Ka tocsaineacht LD in vitro agus i lucha múnla PD a shochtadh.

Nochtann ár staidéar tuilleadh an mheicníocht mhóilíneach atá mar bhunús leis na héifeachtaí faoi chois na tocsaineachta Kaon LD-idirghabhála. Tá sé léirithe go bhféadfadh LDanna a stóráiltear go hectópach agus na hidirmheánacha lipid tocsaineacha a ghintear a bheith ina gcúis le héifeachtaí díobhálacha ar a dtugtar le chéile mar lipotocsaineacht agus go gcuirfeadh siad le comharthaíocht cheallacha lagaithe, mífheidhm mitochondrial, agus bás cille [29,41]. Léiríonn fianaise atá ag teacht chun cinn comhghaol diúltach idir laghdú ar uathphagy

Fíor 8. Laghdaíonn Atg5 cosc ​​ar néarmheathghiniúint trí mheán Ka-idirghabhála i lucha MPTP/p-ghortaithe.

Rinneadh gach lucha a instealladh le AAV-EGFP-shRNA i gcoinne Atg5 nó rialaithe (1 ul de 1013 genomes víreasach / ul, go déthaobhach), agus ina dhiaidh sin MPTP / p-spreagtha (seile mar ghortú rialaithe agus / nó cóireáil Ka, mar a thuairiscítear roimhe seo. (ab)D'fhíoraigh imdhíonadh aistriú AAV (GFP) i TH móide néaróin (dearg)(a). Tá barraí scála mar a léirítear. Dhearbhaigh immunoblotting an cnagadh ar ATG5 sa mesencephalon de lucha insteallta (b). (cd)blotting an Iarthair (c) agus anailís densitometric (d) de

cainníochtú(f). Tá an barra scála mar a léirítear. Sloinntear na sonraí mar mheán±SEM.n=4-5 lucha in aghaidh an ghrúpa.ns, níl siad suntasach, *P<><0.01, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" ka,="" kaempferol;="" mptp,1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine..(for="" interpretation="" of="" the="" references="" to="" color="" in="" this="" figure="" legend,="" the="" reader="" is="" referred="" to="" the="" web="" version="" of="" this="">

agus PD [42,43].Is córas díghrádaithe catabólach é Autophagy trína ndéantar comhpháirteanna ceallacha gan ghá nó damáiste a dhíghrádú agus a athchúrsáil [44]. Tugann fianaise le fios go bhfuil ról lárnach ag autophagy maidir le hoiméastáis lipid cheallacha a chothabháil i bhfíocháin iolracha [18,28]. Is foirm speisialaithe autophagy é lipophagy a bhfuil baint aige le baint LDanna trí dhíghrádú tríd an gcóras autophagy-lysosomal [18, 29]. Féadfaidh gníomhachtú cógaseolaíoch nó géiniteach autophagy, moill a chur ar thosú agus paiteolaíocht PD a mhaolú [25,44]. Tá ról fíor-riachtanach ag Lipophagy i néar-mhíothlú a bhaineann le PD, ag nascadh rialú cáilíochta mitochondrial le néar-mhíothlú ainsealach [38,

45]. Sa staidéar seo, thugamar faoi deara autophagy / lipophagy lochtach i MPP móide -gortaithe cealla néaránach, lena n-áirítear leibhéil LC3-II laghdaithe agus slonn ardaithe p62, agus líon méadaithe puncta LC3B i dtaisce i gcealla. Aisiompaíodh lipohagy lochtach i gcealla gortaithe SH-SY5Y trí chóireáil le Ka. Mar thoradh air sin, laghdaigh Ka carnadh LDanna ocsaídithe, mitochondria damáiste, agus giniúint mtROs i gcealla SH-SY5Y cóireáilte MPP. Rud atá tábhachtach, chuir an cosc ​​ar uathphagaíocht le 3-MA deireadh le díothú LDanna ocsaídithe agus miteacoindria millte agus maolú ar ghortú néaróin DA in vitro. Ina theannta sin, d'aisiompaigh an cosc ​​ar autophagy ag cnagadh Atg5 in vivo na héifeachtaí cosanta a bhí ag meathlú néaróineach Kaon DA sa mhúnla luch PD spreagtha MPTP. I dteannta a chéile, tugann na torthaí seo le fios go gcuireann Ka bac ar dhamáiste mitochondrial LD ​​a bhaineann le tocsaineacht trí autophagy a chur chun cinn i múnla PD turgnamhach.

Léiríonn fianaise carntha go bhfuil giniúint mhéadaithe mtROS ina phríomhthréith de néaróin ardghníomhaíochta agus breathnaíodh i go leor NDDanna, lena n-áirítear PD [46]. Tá tuairiscí maidir le cibé acu an bhfuil ROS ina chúis nó ina iarmhairt d’fhoirmiú LD salach ar a chéile [47,48]. Is díol spéise é gur léirigh ár dtorthaí in vitro gur chuir cosc ​​cógaseolaíochta ar shárocsaídiú LD le -tócaifearóil cosc ​​ar ghiniúint mtROS agus membrane mitochondrial neamhghnácha agus laghduithe mitochondrial a mhaolú, mar is léir ó staining Tomm20 i gcealla SH-SY5Y, a thacaíonn leis an smaoineamh go n-imríonn sárocsaídiú LD cúiseach. ról i mífheidhmiú miteachondrial de bharr MPP agus giniúint mtROS. Mar sin féin, d’fhéadfadh ROS ardaithe foirmiú LDanna a luathú ar dtús, agus ina dhiaidh sin, go gcothaíonn LDanna giniúint bhreise ROS agus go n-ardóidh leibhéil ROS incheallach agus miteachondrial.

Sa staidéar reatha, léirigh muid go raibh leibhéil arda carntha LD ag lucha a raibh PD spreagtha ag MPTP orthu, a raibh caillteanas méadaithe néaróin DA, strus luathaithe ROS-idirghabhála, agus easnaimh iompraíochta ag gabháil leo. Chuir cóireáil Ka cosc ​​​​ar thocsaineacht LD in vitro agus mhaolaigh sé caillteanas neuronal DA agus easnaimh iompraíochta sa mhúnla luch PD, agus bhí na héifeachtaí seo ag brath ar autophagy. Mar sin, tá sé réasúnta a thabhairt i gcrích go gcuireann Ka an t-uathphagy chun cinn, agus laghdaíonn an t-uathphagy feabhsaithe seo carnadh LD ocsaídithe, laghdaítear táirgeadh mtROS, agus maolaíonn sé damáiste mitochondrial i néaróin DA, rud a chuireann le cosc ​​ar thocsaineacht LD, rud a mhaolaíonn paiteolaíocht PD (Fig. . 9).

Baintear an t-alt seo as https://doi.org/10.1016/j.redox.2021.101911 Arna fháil 23 Samhain 2020; Arna fháil i bhfoirm athbhreithnithe 1 Feabhra 2021; Glactha 18 Feabhra 2021