Glycosides Monaterpene Iridoid Agus Aicimileach, Kankanosides L, M, N, O, agus P Ó Cistanche Tubulosa

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Cistanche tubulosa(SCHRENK) Is planda seadánacha ilbhliantúil é R. WIGHT (Orobanchaceae) a fhásann ar fhréamhacha speiceas Salvadora nó Calotropis, a dháiltear san Afraic Thuaidh, san Shádach, agus i dtíortha na hÁise. a úsáidtear le haghaidh cóireáil impotence, sterility, lumbago, agus laige coirp chomh maith le gníomhaire chun cinn scaipeadh fola. ceithre aimínaiglicóisídí feanileatánóideacha is fiche lena n-áirítear kankanosides H1, H2, I, J1, J2, K1, agus K2, agus dhá oligosugars acylated ó gais úra Cistanchetubulosa.5,6) Ina theannta sin, príomhoidegliocóisídí feinileatánóideach,echinacoside, acteoside,agus isoacteoside, fuarthas amach go gcuireann siad bac ar an méadú ar leibhéil serum aspartate aminotransferase (sAST) agus alanine aminotransferase (sALT) in ae gortaithe na lucha de bharr D-galactosamine (D-GalN) / ​​lipopolysaccharide ag dáileoga 25-100 mg / kg in aghaidh an os ( po). Soiléiríodh freisin riachtanais struchtúracha na gliocóisídí feinileatánóideach don ghníomhaíocht hepatoprotective.5) Sa staidéar leanúnach seo ar chomhábhair sna gais úra Cistanchetubulosa, d'aonraigh muid aon cheann déag de gliocóisídí iridoid lena n-áirítear kankanosides L (1), M (2), agus N (3), seacht gliocóisídí monaterpéine aic-imthriallacha lena n-áirítear kankanosides O (4) agus P(5), trí fheinilprópánóid, agus ceithre lignans. Déileálann an páipéar seo le leithlisiú agus soiléiriú struchtúir cúig chomhdhúil nua (1-5).

Baineadh gais úra C. tubulosa (saothraithe in Urumuqi, Cúige Xin Jiang, an tSín) le meatánól faoi aife chun sliocht meatánólach a thabhairt (8.36 faoin gcéad ó na gais úra). Ón sliocht meatánólach, fuarthas codáin H2O- agus MeOH-eluted (5.63 faoin gcéad agus 2.73 faoin gcéad, faoi seach) le crómatagrafaíocht colún Diaion HP-20 (H2O→MeOH) mar a thuairiscítear roimhe seo.5) Ba é an codán MeOH-eluted faoi ​​réir crómatagrafaíochta colúin SiO2 agus ODS agus faoi dheireadh HPLC chun kankanosides L (1, 0.0026 faoin gcéad ), M (2, 0) a sholáthar.{{ 27}}001 faoin gcéad ), N (3, 0.00{{60}}7 faoin gcéad ) , O (4, 0.0{{90}}2{{105}} faoin gcéad ), agus P (5, {{118} }.0002 faoin gcéad ), 6-deoxycatalpol3,7) (6, 0.197 faoin gcéad ), bartsioside3,7) (7, 0.0583 faoin gcéad ), gluroside3,7) (8, 0.0443 faoin gcéad ), kankanoisíd A3) (9, 22.3 mg, 0.0010 faoin gcéad ), aigéad mussaenosidic3,7) (10, 0.0056 faoin gcéad ), 8- aigéad epiloganic3,8) (11, 0.0023 faoin gcéad ), 8-aigéad eipideocsalógach3,7) (12, 0.0004 faoin gcéad ), aigéad geniposidic3,7) (13, 0.0040 faoin gcéad ), kankanoside E3) (14, 0.0026 faoin gcéad ), (2E,6Z)-8-b D-glucopyranosyloxy-2,6-di meitile-2,6-aigéad octadéanóch3,9) (15, 31.0 mg, 0.0014 faoin gcéad ), (2E,6E){{95 }},7-démheitil-8-hiodrocsaoctadien-1-il-ObD-glú copyranoside10) (16, 0.0082 faoin gcéad ), 8-hiodrocsaigearaniol 8-Ob- D-glucopyranoside11 ) (17, 0.0044 faoin gcéad ), betulalbuside A12) (18, 0.0004 faoin gcéad ), buaircíneach13) (19, 0.0002 faoin gcéad ), steallaire13) (20, 0.0015 faoin gcéad ), aldehéad sinapic {{D-128}Obyrin, 0.0004 faoin gcéad ), 0.0001 faoin gcéad ), ( ) - pinoresinol ObD-glucopyranoside4,8,15) (22, 0.0010 faoin gcéad ), eucommin A16) (23, 0.0002 faoin gcéad ), isoeucommin A17) (24, 0.0010 faoin gcéad ), agus ( Ob ) - syringing glucopyra noside4,8,18) (25, 0.0044 faoin gcéad ).

Cistanche tubulosafeabhas a chur ar fheidhm ghnéasach

Struchtúir Kankanosides L (1), M (2), agus N (3)

Fuarthas Kankanoside L (1) mar phúdar bán le rothlú optúil diúltach ([a]D 26 45.7 i MeOH). Thaispeáin a speictream IR banna láidir ionsúcháin ag 3433 agus 1{{20}}80 cm 1 a thugann le tuiscint go raibh taise glicóisíd ann. Léirigh an bhuamáil ghasta adaimh (FAB)-MS de 1 rith sa mhodhanna dearfacha agus diúltacha-ian buaiceanna ian leathmhóilín ag m/z 371 [M Na] agus 347 [MH], faoi seach, agus socraíodh an fhoirmle mhóilíneach mar C15H24O9 trí thomhas FAB-MS ardtaifigh. Hidrealú aigéid 1 le haigéad hidreaclórach 1.0 M (HCl) scaoileadh D-glúcóis, a aithníodh ag anailís HPLC ag baint úsáide as brathadóir rothlaithe optúla.3-6) Na speictrim 1 H- agus 13C-NMR de 1 (CD3OD, Táblaí 1, 2), a sannadh ag turgnaimh NMR éagsúla, 19) léirigh comharthaí inchomhartha do cheithre meitiléine [d 1.43 (1H, br dd, J ca. 5, 13 Hz, 4a-H), 1.73 (1H, br dd, J ca. 12, 14 Hz, 6a-H), 1.85 (1H, m, 4b-H), 1.93 (1H, br dd, J= ca. 8, 14 Hz, 6b-H), 3.50 ( 1H, ddd, J 2.4, 12.5, 13.0 Hz, 3a-H), 3.83 (1H, br dd, J=ca. 5, 13 Hz, 3b-H), 3.78, 4.12 (1H an ceann, an dá d, J 13.1 Hz, 10-H2)], dhá mheitine [d 2.15 (1H, dd, J 7.2, 8.9 Hz, 9-H) agus 2.23 (1H, m, 5- H)], agus grúpa aicéalóg [d 4.81 (1H, d, J 8.9 Hz, 1-H)] mar aon le bogas b-glúcóipiranóisil [d 4.70 (d, J 7.9 Hz, 1 - H)]. Mar a thaispeántar i bhFíor 1, léirigh an turgnamh 1 H–1H speictreascópacht chomhghaolaithe (1 H–1 H COSY) ar 1 láithreacht struchtúir pháirteacha scríofa i línte troma. Sa turgnamh comhghaolaithe il-bhannaí heitrea-núicléacha (HMBC) ar 1, breathnaíodh comhghaolta fadraoin idir na prótóin agus na carbóin seo a leanas (1-H agus 3-C, 8-C; {{ 124}}H agus 1-C; 7-H agus 8-C, 10-C; 9-H agus 8-C; {{131} }}H2 agus 7-C, 8-C; 1 -H agus 1-C) mar a thaispeántar i bhFíor 1. Ansin, bhí an steiréstruchtúr coibhneasta de 1 tréithrithe ag núicléach céim-íogair Turgnamh speictreascópachta feabhsaithe olltáirgthe (NOESY le céim-íogair), a léirigh comhghaolta NOE idir na péirí prótóin seo a leanas (1-H agus 3a H; 3a-H agus 4a-H; 3b-H agus 4b-H; 4b-H; agus 5-H, 9-H; 5- H agus 6b-H, 9-H; 6a-H agus 7-H; 7-H; 7-H agus 10-H2), mar a thaispeántar i bhFíor 1. Bhí speictream 1 H- agus 13C-NMR de 1 forshuite orthu siúd de phríomh-chomhábhar iridoid 6-deoxycatalpol (6), ach amháin i gcás na gcomharthaí dlite chun an tsáithithe d-lachtóil. Ar deireadh, thug hidriginiú 6 1, ionas gur léiríodh steiréstruchtúr kankanosíd L mar 3,4- dihydro-6-deoxycatalpol (1).

Fuarthas Kankanoside M (2) mar phúdar bán le rothlú optúil diúltach ([a]D 26 18.7 i MeOH). Thaispeáin an speictream IR de 2 bandaí ionsúcháin ag 3433, 1736, 1655, agus 1076 cm 1 inchurtha i leith hiodrocsaile, d-lachtóin, oilfín agus éitear. Léirigh an speictream FAB-MS deimhneach-ian de 2 buaic ian leathmhóilín ag m/z 353 [M Na] , agus socraíodh an fhoirmle mhóilíneach mar C15H22O8 trí thomhas FAB-MS ardtaifigh deimhneach-ian. Hidrealú aigéadach de 2 le D-glúcós liberated 1.0 M HCl. Léirigh an speictream NMR 1 H- agus 13C de 2 (CD3OD, Táblaí 1, 2) comharthaí insannta do cheithre mheitiléine [d 1.66, 2.11 (1H an ceann, an dá m, 4-H2), 2.15, 2.75 (1H an ceann , an dá m, 6-H2), 4.29 (1H, dddd, J 2.8, 8.4, 14.3 Hz, 3b-H), 4.32, 4.51 (1H an ceann, an dá d, J 13.1 Hz, 10- H2), 4.35 (1H, dddd, J 3.1, 6.7, 14.3 Hz, 3a-H)], dhá mheitin [d 2.97 (1H, m, 5-H), 3.82 (1H, br s, {{ 84}}H)], olaifín [d 5.94 (1H, m, 7-H)], agus grúpa lachtóin sáithithe (d C 174.9) mar aon le moiety bD-glucopyranosyl [d 4.32 (1H, d , J 7.9 Hz, 1 -H)]. Mar a léirítear i bhFíor 1, léirigh turgnamh 1 H–1H COZY ar 2 láithreacht struchtúr páirteach scríofa i línte troma agus, i dturgnamh HMBC, breathnaíodh comhghaolta fadraoin idir na péirí prótón agus carbóin seo a leanas ({{105) }}H agus 1-C; 7-H agus 9-C; 9-H agus 1-C, 8-C; {{112} }H2 agus 7-C, 8-C, 9-C; 1 -H agus 10-C). Bhí an steiréstruchtúr coibhneasta de 2 mar thréith ag turgnamh NOESY atá íogair ó thaobh céime de, a léirigh comhghaolta NOE idir na péirí prótóin seo a leanas (3a-H agus 4a-H; 3b-H agus 4b-H; 4b-H agus 5- H; 5-H agus 6b-H, 9-H) mar a thaispeántar i bhFíor 1. Mar sin, rinneadh steiréstruchtúr 2 a shoiléiriú mar a thaispeántar.

Rinneadh Kankanoside N (3) a aonrú mar phúdar bán le rothlú optúil diúltach ([a]D 25 24.6 i MeOH). Sa FAB-MS deimhneach-ian de 3, breathnaíodh buaic ian leathmhóilín ag m/z 371 [M Na] . Cinneadh an fhoirmle mhóilíneach C16H28O8 trí thomhas FAB-MS ard-réiteach. Hidrealú aigéadach de 3 le 1.0 M HCl scaoilte D-glúcóis. Léirigh na sonraí 1 H- agus 13C-NMR (CD3OD, Táblaí 1, 2) comharthaí insannta do mheitile [d 1.07 (3H, d, J 7.2 Hz, 10-H3)] , ceithre mheitiléine {d 1.37, 1.87 (1H an ceann, an dá m, 7-H2), 1.65, 1.81 (1H an ceann, an dá m, 6-H2), [3.65 (1H, dd, J 9.1 , 9.8 Hz), 3.90 (1H, dd, J 5.9, 9.8 Hz), 11-H2], agus [3.70 (1H, dd, J 3.3, 12.0 Hz), 3.88 (1H, m), {{ 71}}H2]}, ceithre mheitine [d 1.69 (1H, m, 4-H), 1.75 (1H, m, 9-H), 2.06 (1H, m, 8- H), 2.16 (1H, m, 5-H)], agus grúpa hemiacetal [d 4.67 (1H, d, J 7.4 Hz, 1-H)] mar aon le moiety bD-glucopyranosyl [d] d 4.26 (1H, d, J 7.9 Hz, 1 -H)]. Soiléiríodh struchtúr iridoid 3 le turgnaimh 1 H-1 H COZY agus HMBC agus bhí an steiréstruchtúr coibhneasta mar thréith ag turgnamh céim-íogair NOESY mar a thaispeántar i bhFíor 1. Dá bhrí sin, léiríodh steirstruchtúr 3 mar a thaispeántar.

Cistanche tubulosa

Struchtúir Kankanosides O (4) agus P (5)

Fuarthas Kankanosides O (4) agus P (5), C16H26O8, freisin mar phúdair bhána le rothlaithe optúla diúltacha (4: [a]D 23 26.1; 5: [a]D 21 32.7 araon i MeOH). Léirigh an speictream IR de 4 agus 5 bandaí ionsúcháin ag 3433, 1696, 1647, agus 1076 cm 1 do 4, agus ag 3434, 1701, 1647, agus 1{{{96} }76 cm 1 in aghaidh 5, inchurtha i leith feidhmeanna glycosidic, carboxyl, agus olaifín. Léirigh a speictrim UV uasmhéid ionsúcháin coitianta ag 217 nm rud a léiríonn láithreacht b-neamhsháithithe aigéid charbocsaileacha sa dá cheann acu. Hidrealú aigéadach de D-glúcóis 4 agus 5, ach trí hidrealú einsímeach le b glucosidase, thug 4 agus 5 (2E,6E)-8-hiodrocsa-2,6-démheitil{39) }},{{40}}aigéad octadé-aicéineach20) (4a) agus (2E,6E)-8-hiodrocsa-3,7- démheitiol{{ 48}},6-aigéad octadecenoic21) (5a), faoi seach. Léirigh sonraí 1 H- agus 13C-NMR de 4 (CD3OD, Táblaí 2, 3) comharthaí insannta do dhá mheitil [d 1.71 (3H, br s, 10-H3), 1.81 (3H, d, J 1.0 Hz , 9-H3)], trí mheitiléine {d 2.19 (2H, br t, J ca. 7 Hz, 5-H2), 2.36 (2H, m, 4-H2), [ 4.24 (1H, dd, J 7.6, 12.0 Hz), 4.33 (1H, dd, J 6.2, 12.0 Hz), 8-H2]}, agus dhá olaifín trí-shuiteáilte [d 5.41 (1H, dddd, J 1.2, 6.2, 7.6 Hz, 7- H), 6.75 (1H, tq, J 7.2, 1.0 Hz, 3-H)] mar aon le cuid glucopyranosil bD [d 4.34 (d, J 7.8 Hz, 1 -H)]. Trí chomharthaí carbóin a chur i gcomparáid sa speictream 13C-NMR de 4 leo siúd de 4a, breathnaíodh athrú glycosilithe ag an suíomh 8- (d C 4: 65.5; 4a: 59.4). Dheimhnigh turgnaimh HMBC suíomh an nasc glúcósaigh freisin mar a thaispeántar i bhFíor 2. Dá bhrí sin, soiléiríodh steiréstruchtúr 4 mar (2E,6E) bD-glúcópyranosyloxy-2,{{{ 143}}démheitil-2,{6-aigéad octadééineach. Ar an láimh eile, léirigh na sonraí 1 H- agus 13C-NMR de 5 (CD3OD, Táblaí 2, 3) láithreacht hiodrocsa (2E,6E)-8-hiodrocsa-3,{{158} }démheitil-2,6-taise aigéid octadecenoic [d 1.70 (3H, br s, 10-H3), 2.14 (3H, br s, 9-H3), 2.24 ( 2H, m, 4-H2), 2.27 (2H, m, 5-H2), 4.05, 4.20 (1H an ceann, an dá br d, J ca. 12 Hz, 8-H2) , 5.47 (1H, tq, J 7.1, 0.9 Hz, 6-H), 5.67 (1H, br s, 1-H)] mar aon le cuid bD-glucopyranosil [d 4.23 (d, J 7.7 Hz, 1 -H)]. Soilsíodh nascacht an ghluaiseacht bD-glucopyranosyl i 5 ar bhonn thurgnaimh HMBC mar a thaispeántar i bhFíor 2. Ina theannta sin, breathnaíodh gnáth-aistriú glycosilachta do na comharthaí ag 8-suíomh (d C 5: 75.6; 5a: 68.8). Ar bhonn na fianaise thuasluaite, socraíodh go raibh steiréstruchtúr 5 (2E,6E)-8-bD-glucopyranosyloxy-3,7-démheitil-2),{ {230}}octa dienoic aigéad.

Éifeachtaí na gComhábhar ar Fhachtóir Neacróis Tumor-a (TNF-a)-Cíteatocsaineacht i gCealla L929

Is eol do TNF-a idirghabháil a dhéanamh ar éagsúlacht díobhálacha orgán trína ionduchtú apoptosis ceallacha. I gcás an ae, tá baint ag éifeachtaí bitheolaíocha TNF-a le gortú hepatic de bharr tocsainí hepatic, ischemia/reperfusion, heipitíteas víreasach, agus alcól.22-24) Dá bhrí sin, meastar gur rud tábhachtach TNF-a. sprioc chun gníomhairí frith-athlastacha agus hepatoprotective a fháil amach. Ar bhonn an choincheapa thuasluaite, rinneamar imscrúdú ar chomhábhair chosanta ó tháirgí a tharlaíonn go nádúrtha ar bhás cille TNF-a-spreagtha i gcealla L929, líne cille TNF-a-íogair.25) Roimhe seo, thuairiscigh muid go bhfuil roinnt comhábhair ó Fuarthas amach go raibh Piper Chaba, 26-29) Boesenbergia rotunda, 30,31) Punica granatum, 32) Helichrysum arenarium, 33-35) agus Sapindus rarak, 36-38) le feiceáil sna héifeachtaí hibitory TNF-a -cíteatocsaineacht spreagtha i gcealla L929. Ós rud é go raibh na comhábhair phenylthanoid de C. tubulosa (m.sh. echinacoside, acteoside, agus isoacteoside, etc.) 5) bac ar an cíteatocsaineacht seo freisin, rinneamar scrúdú breise ar chomhábhair iridoid, phenylpropanoid, agus lignan mar a thaispeántar i dTábla 4. Mar thoradh air sin, kankanoside A. (9, cosc: 16.3 2.0 faoin gcéad ag 100 mM), aigéad mussaenosidic (10, 44.7 8.7 faoin gcéad ), 8-aigéad epiloganic (11, 10.7 0.4 faoin gcéad ), 8-hiodrocsaigeraniol 8-Fuarthas go léiríonn ObD-glucopyranoside (17, 21.3 2.4 faoin gcéad ), agus ( )-pinoresinol ObD-glucopyranoside (22, 22.3 1.6 faoin gcéad ), gníomhaíocht signifies- cant. Cé go raibh a gcuid gníomhaíochtaí níos laige ná iad siúd de echinacoside (IC50 31.1 mM), acteoside (17.8 mM), agus isoaceteoside (22.7 mM), an prionsabal phenylthanoid con stituents.5).

Turgnamhach

Baineadh úsáid as na hionstraimí seo a leanas chun sonraí speictreach agus fisiceacha a fháil: uainíochtaí sonracha, Polaiméadar digiteach Horiba SEPA (l 5 cm); speictrim UV, speictriméadar Shimadzu UV-1600; speictrim IR, speictriméadar Shimadzu FTIR-8100; 1 speictream H- agus 13C-NMR, speictriméadar JEOL JNM-ECA600 (600, 150 MHz) agus JEOL JNM-ECS400 (400, 100 HMz) le tetramethylsilane mar chaighdeán inmheánach; FAB-MS agus mais-speictriméadar FAB-MS, JEOL JMS-SX 102A; Brathadóir HPLC, Shimadzu RID-10Innéacs athraonta, Shimadzu SPD{22}A UV–VIS, agus brathadóirí rothlaithe optúla Shodex OR{-2. Úsáideadh colúin HPLC, Cosmosil 5C18-MS-II, agus pNAP (Nacalai Tesque Inc., 250 4.6 mm id) agus (250 20 mm id) chun críocha anailíse agus ullmhúcháin, faoi seach.

Úsáideadh na coinníollacha turgnamhacha seo a leanas le haghaidh crómatagrafaíocht: crómatagrafaíocht colún glóthach shilice gnáth-chéim (CC), glóthach shilice 60N (Kanto Chemical Co., Ltd., 63-210 mogalra, sféarúil, neodrach); glóthach shilice céim droim ar ais CC, Diaion HP-20 (Nippon Rensui), agus Chromatorex ODS DM1020T (Fuji Silysia Chemical, Ltd., 100-200 mogalra); TLC gnáth-chéim, plátaí TLC réamh-brataithe le glóthach shilice 60F254 (Merck, 0.25 mm); TLC céim droim ar ais, plátaí TLC réamh-brataithe le glóthach shilice RP-18 F254S (Merck, 0.25 mm); HPTLC céim droim ar ais, plátaí TLC réamh-brataithe le glóthach shilice RP-18 WF254S (Merck, 0.25 mm), baineadh amach an braite trí spraeáil le 1 faoin gcéad Ce(SO4)2-10 faoin gcéad uiscí H2SO4, agus téamh ina dhiaidh sin. .

Ábhar Plandaí

Rinneadh cur síos ar an mír seo i dtuarascáil roimhe seo.

Eastóscadh agus Leithlisiú

Gearradh gais úra de C. tubulosa (2.98 kg) go mín agus baineadh amach trí huaire iad le meatánól faoi aife ar feadh 3 h. Galú an tuaslagóir faoi bhrú laghdaithe ar fáil sliocht meatánólach (249.1 g, 8.36 faoin gcéad ). Cuireadh an sliocht meatánólach faoi réir Diaion HP-20 CC (5.0 kg, H2O→MeOH) chun codáin H2O- agus MeOH-eluted (167.84 g, 5.63 faoin gcéad agus 81.21 g, 2.73 faoin gcéad, a thabhairt, faoi ​​seach). Cuireadh an chuid MeOH-eluted (61.00 g) faoi ghnáthghlóthach shilice CC [1.8 kg, CHCl3– MeOH–H2O (15 : 3 : 0.4→1{{ 36}} : 3 : 0.5→6 : 4 : 1, v/v/v)→MeOH] seacht gcodán a thabhairt [Fr. 1 (1.12 g), 2 (9.56 g), 3 (0.89 g), 4 (10.69 g), 5 (8.84 g), 6 (12.52 g), agus 7 (4.6{{104}} g)], mar a cuireadh síos air roimhe seo.5) Scaradh an codán 1 (1.12 g) le glóthach shilice de phas droim ar ais CC [55 g, MeOH–H2O (4 0 : 60, v/v)→MeOH] chun cúig chodán a thabhairt [Fr. 1-1 (132.8 mg), 1-2 (267.0 mg), 1-3 (182.8 mg), {{80}} (31{{ 156}}.9 mg), agus 1-5 (91.4 mg)]. Rinneadh an codán 1-1 (132.8 mg) a íonú tuilleadh ag HPLC [Cosmosil 5C{{9{{160}}}}MS-II, CH3CN–1 faoin gcéad uiscí AcOH (1{{166}) } : 90, v/v)] kankanoside M (2, 2.8 mg, 0 a thabhairt.{{2{03}}{{22{{24{{248 }}}}}}01 faoin gcéad ), bartsioside (7, 5.2 mg, 0.0002 faoin gcéad ), aildéid sinapach {{1{{295 }}6}}O- bD-glucopyranoside (21, 1.4 mg, {{3{{3{{3{{310}}9}}5}}{{320} }}}.0001 faoin gcéad ). Rinneadh an codán 1-2 (267.{{350}} mg) a íonú tuilleadh ag HPLC [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1 faoin gcéad uiscíoch AcOH (7 : 93, v/v)] (2E,6E)-3,7-démheitil-8-hiodrocsaoctadien{{13{{360}}}il-O- bD -glucopyranoside (16, 15.8 mg, {{370}}.{406}}007 faoin gcéad ), 8-hiodrocsaifearaniol 8-ObD glucopyranoside (17, 5.2 mg, 0.0002 faoin gcéad ), ( ) - pinoresinol ObD-glucopyra noside (22, 22.0 mg, 0.0010 faoin gcéad ), eucommin A (23, 5.0 mg, 0.0002 faoin gcéad), iso (24, 21.3 mg, 0.0010 faoin gcéad ), agus ( ) - syringaresinol obD-glúcóis ranoside (25, 98.0 mg, 0.0044 faoin gcéad ). Scaradh an codán 2 (9.56 g) le glóthach shilice de phas droim ar ais CC [400 g, MeOH–H2O (10 : 90, v/v) → MeOH → aicéatón] chun cúig chodán a thabhairt [Fr. 2-1 (55.9 mg), 2-2 (4.48 g), 2-3 (3.42 g), 2-4 (1.16 g), agus 2-5 (31.9 mg) ], mar a cuireadh síos cheana.5) Bhí an codán 2-2 (500.0 mg) faoi réir HPLC [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1 faoin gcéad uiscí AcOH (5 : 95, v/v )] a thabhairt kkananoside L (1, 6.6 mg, 0.0026 faoin gcéad ) agus 6-deoxycatalpol (6, 455.5 mg, 0.182 faoin gcéad ). Cuireadh an codán 2-3 (1.00 g) faoi réir HPLC [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1 faoin gcéad uiscí AcOH (7 : 93, v/v)] chun seacht gcodán a thabhairt [Fr . 2-3-1 (66.5 mg), 2-3-2 (20.4 mg), 2-3-3 (26.0 mg), 2-3-4 (136.6 mg), 2-3-5 [ 7 (380.6 mg), , 0.0581 faoin gcéad )], 2-3-6 [ gluroside (8, 285.1 mg, 0.0435 faoin gcéad )], agus 2-3-7 (84.9 mg)]. Rinneadh an codán 2-3-4 (106.6 mg) a íonú tuilleadh ag HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN–1 faoin gcéad uiscí AcOH (5 : 95, v/v)] chun 6 (68.4 mg, 0.0134 faoin gcéad) a thabhairt mar aon le salidroside5) (13.7 mg, 0.0027 faoin gcéad ). Bhí an codán 2-4 (1.16 g) faoi réir HPLC [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1 faoin gcéad uiscíoch AcOH (15 : 85, v/v) agus Cosmosil pNAP, CH3CN–1 faoin gcéad AcOH uiscí (10 : 90 nó 15 : 85, v/v)] chun kankanosides N (3, 15.6 mg, 0.0007 faoin gcéad ), O (4, 44.1 mg, 0.0020 faoin gcéad ), agus P (5, 4.2 mg, 0.0002) a thabhairt faoin gcéad ), 6 (24.0 mg, 0.0011 faoin gcéad ), 8 (17.7 mg, 0.0008 faoin gcéad ), kankanoiside A (9, 22.3 mg, 0.0010 faoin gcéad ), 8-aigéad epideoxyloganic (12, 8.1 mg, 0.0 faoin gcéad), 0.004 faoin gcéad kankanoside E (14, 58.1 mg, 0.0026 faoin gcéad ), (2E,6Z)-8-bD-glúcóip ranosylocsa-2,6-démheitil-2,6-octadéanoic aigéad (15, 31.0 mg, 0.0014 faoin gcéad ), 16 (168.6 mg, 0.0075 faoin gcéad ), 17 (94.3 mg, 0.0042 faoin gcéad ), betulalbuside A (18, 8.1 mg, 0.0004 faoin gcéad ), buaircíneach. ), agus syringin (20, 33.9 mg, 0.0015 faoin gcéad ). Scaradh an codán 4 (10.69 g) le glóthach shilice de phas droim ar ais CC [500 g, MeOH–H2O (30 : 70, v/v) → MeOH → aicéatón] chun ceithre chodán a thabhairt [Fr. 4-1 (878.2 mg), 4-2 (7.06 g), 4-3 (1.57 g), agus 4-4 (792.8 mg)], mar a thuairiscítear roimhe seo.5) The íonaíodh codán 4-1 (500.0 mg) ag HPLC [Cosmosil 5C18-MS-II, CH3CN–1 faoin gcéad AcOH uiscí (10 : 90, v/v)] chun aigéad mussaenosidic a thabhairt (10, 39.1 mg, 0.0031 faoin gcéad ) agus aigéad geniposidic (13, 51.2 mg, 0.0040 faoin gcéad ). Scaradh an codán 5 (8.84 g) le glóthach shilice de phas droim ar ais CC [400 g, MeOH–H2O (20 : 80 → 30 : 70, v/v) → MeOH → aicéatón] chun seacht gcodán a thabhairt [Fr. 5-1 ​​(870.2 mg), 5-2 (478.9 mg), 5-3 (3.72 g), 5-4 (979.9 mg), 5-5 (1.19 g), 5-6 (1.27 g), agus 5-7 (130.1 mg)], mar a thuairiscítear roimhe seo.5) Rinneadh an codán 5-1 (870.2 mg) a íonú tuilleadh ag HPLC [Cosmosil pNAP, CH3CN –1 faoin gcéad AcOH uiscí (5 : 95, v/v)] a thabhairt 10 (55.3 mg, 0.0025 faoin gcéad ) agus 8-aigéad epiloganic (11, 51.5 mg, 0.0023 faoin gcéad ).

Kankanoside L (1): A púdar bán, [a]D 26 45.7 (c 0.48, MeOH). FAB-MS dearfach-ian ardtaifigh: Calcd le haghaidh C15H24O9Na [M Na] 371.1318; Aimsíodh 371.1309. IR (KBr, cm 1 ): 3433, 2928, 1080. 1 H-NMR (600 MHz, CD3OD) d: tugtha i dTábla 1. 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) d C: tugtha i dTábla 2. Dearfach- ian FAB-MS m/z: 371 [M Na] . Ian diúltach FAB-MS m/z: 347 [MH] .

Kankanoside M (2): A púdar bán, [a]D 26 18.7 (c 0.11, MeOH). FAB-MS dearfach-ian ardtaifigh: Calcd le haghaidh C15H22O8Na [M Na] 353.1212; Aimsíodh 353.1208. IR (KBr, cm 1 ): 3433, 2924, 1736, 1655, 1076. 1 H-NMR (600 MHz, CD3OD) d: tugtha i dTábla 1. 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) d C: tugtha sa Tábla 2. FAB-MS dearfach-ian m/z: 353 [M Na] .

Kankanoside N (3): Púdar bán, [a]D 25 24.6 (c 1.00, MeOH). FAB-MS dearfach-ian ardtaifigh: Calcd le haghaidh C16H28O8Na [M Na] 371.1682; Aimsíodh 371.1686. IR (KBr, cm 1 ): 3415, 2874, 1076, 1028. 1 H- NMR (600 MHz, CD3OD) d: tugtha i dTábla 1. 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) d C: tugtha i dTábla 2. -ian dearfach FAB-MS m/z: 371 [M Na] .

Kankanoside O (4): Púdar bán, [a]D 23 26.1 (c 2.30, MeOH). FAB-MS dearfach-ian ardtaifigh: Calcd le haghaidh C16H26O8Na [M Na] 369.1525; Aimsíodh 369.1528. UV [l max (log e), MeOH, nm]: 217 (4.04). IR (KBr, cm 1 ): 3433, 2926, 1696, 1647, 1076. 1 H-NMR (600 MHz, CD3OD) d: tugtha i dTábla 3. 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) d C: tugtha sa Tábla 2. Positive-ian FAB-MS m/z: 369 [M Na] .

Kankanoside P (5): A púdar bán, [a]D 21 32.7 (c 0.18, MeOH). FAB-MS dearfach-ian ardtaifigh: Calcd le haghaidh C16H26O8Na [M Na] 369.1525; Aimsíodh 369.1520. UV [l max (log e), MeOH, nm]: 217 (4.08). IR (KBr, cm 1 ): 3434, 2926, 1701, 1647, 1076. 1 H-NMR (600 MHz, CD3OD) d: tugtha i dTábla 3. 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) d C: tugtha sa Tábla 2. Positive-ian FAB-MS m/z: 369 [M Na] .

Hidrealú Aigéad Kankanosides L-P (1-5): Bhí tuaslagáin de 1-5 (gach 1.0 mg) in 1.0 M HCl (1.0 ml) téite ag 80 céim ar feadh 3 h. Tar éis dó a bheith fuaraithe, neodaíodh an meascán imoibriúcháin le foirm Amberlite IRA-400 (OH), agus baineadh na roisíní trí scagachán. Tar éis an tuaslagóir a bhaint faoi bhrú laghdaithe, scartha an t-iarmhar leis an gcolún cartúis Sep-Pak C18 (H2O→MeOH). Rinneadh anailís HPLC ar an gcodán H2O-eluted faoi na coinníollacha seo a leanas: colún HPLC, Kaseisorb LC NH2-60-5, 4.6 mm id 250 mm (Tokyo Kasei Co., Ltd., Tokyo, Japan); braite, rothlú optúil [Shodex OR-2 (Showa Denko Co., Ltd., Tokyo, Japan); céim shoghluaiste, CH3CN–H2O (85: 15, v/v); ráta eile 0.8 ml/nóim]. Sainaithníodh glúcóis D atá i láthair sna codáin H2O-eluted de 1-5 trí chomparáid a dhéanamh idir a n-amanna coinneála agus a n-uainíocht optúil le sampla barántúil [tR 17.9 min (dearfach)].

Hidriginiú {{0}}Deoxycatalpol (6) Fionraí de 6 (12.0 mg) agus 10 faoin gcéad de charbón pallaidiam (5.0 mg) i MeOH (2.0 ml) ag teocht an tseomra faoi atmaisféar H2 ar feadh 2 h. Scagtha an chatalaíoch amach, agus comhdhlúthaíodh an scagáit faoi bhrú laghdaithe chun 1 (12.0 mg, quant.) a thabhairt.

Hidrealú einsímeach Kankanosides O (4) agus P (5) le b-Glucosidase Cuireadh b-glucosidase (4.7 mg, ó almond, le tuaslagán 4 (8.0 mg) i H2O (1.5 ml) de almond, Oriental Yeast Co., Tóiceo, an tSeapáin), agus corraíodh an réiteach ag 37 céim ar feadh 24 h. Múchadh an t-imoibriú trí EtOH (5.0 ml) a chur leis, comhdhlúthaíodh an meascán faoi bhrú laghdaithe. Baineadh an t-iarmhar le EtOAc agus thug galú an tuaslagóra (2E,6E)-8-hiodrocsa-2,{{20}}démheitil-2,{{22} }aigéad octadecenoic20) (4a, 3.9 mg, 92 faoin gcéad ). Trí nós imeachta comhchosúil, (2E,6E)-8-hiodrocsa-3,7-démheitil-2,6-aigéad octadéanóch21) (5a, 0.9 mg, 94 faoin gcéad ) a fuarthas ó kkananoside P (5, 1.8 mg).

Modh Bithmheasúnaithe Rinneadh éifeacht choisctheach ar chiteatocsaineacht TNF-a-spreagtha i gcealla L929 a mheas tríd an modh a thuairiscítear i bpáipéar roimhe seo.5)

Staitisticí Cuirtear luachanna in iúl mar acmhainn SEM Baineadh úsáid as anailís aontreo ar athraitheacht (ANOVA) agus tástáil Dunnett ina dhiaidh sin le haghaidh anailís staitistiúil. Measadh go raibh luachanna dóchúlachta (p) níos lú ná 0.05 suntasach.

luibh cistanche