Cosc ar Iomadú Cille Duán Crandell-Rees de réir Seanaoise X-ghathach
Mar 29, 2022
Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com
Manabú KOIKE1,2)*, Yasutomo YUTOKU1)agus Aki KOIKE1)
Teibí.Tuairiscíodh radai-fhriotaíocht agus radatocsaineacht tar éis cóireálacha ailse i bhfeilíní. Tá sé ríthábhachtach dáileoga radaíochta a bharrfheabhsú chun éifeachtaí cíteatocsaineacha a thabhairt do chealla ailse amháin agus ní gnáthchealla chun teiripe radaíochta éifeachtach a bhaint amach; áfach, níl meicníochtaí na friotaíochta radaíochta, radatocsaineachta, agus freagairt damáiste DNA (DDR) i gcealla feline soiléirithe go fóill. Briseadh snáithe dúbailte DNA (DSB) an cineál is tocsaineach deDNAdamáiste de bharr X-ghathanna agus léasacha trom-ian a úsáidtear chun ailse a chóireáil. Crandell-Rees FelineDuán(CRFK) tá cealla ar cheann de na cealla cat is mó a úsáidtear i dtaighde eolaíocht beatha. Anseo, tuairiscímid sinDSB- tá séanacht spreagtha a chothaítear le X-ghathanna tábhachtach chun iomadú naCRFKcealla. Léiríomar trí mheasúnacht iomadú cille go bhfuil X-ghathanna ag dáileoga 2 Gy agus 10 Gy tocsaineach doCRFKcealla a chuireann bac ar iomadú cealla ionradaíochta CRFK. I gcealla X-ionradaithe CRFK, braitheadh méadú dáileog-spleách ar shineascacht spreagtha DSB de réir athruithe moirfeolaíocha agus ag baint úsáide as measúnacht staining galactosidase a bhaineann le senescence. Thairis sin, léirigh ár sonraí go bhfuil iCRFKcealla, an príomhchonair DDR, a bhaineann le fosfarylation ofH2AXag Ser139, bhí sé i ngníomh de ghnáth ag kinases ATM. Tá ár dtorthaí úsáideach maidir le tuiscint a fháil ar sheanaoise ceallacha de bharr X-ghathanna agus chun éifeachtaí bitheolaíocha na radaíochta a shoiléiriú, m.sh., tocsaineacht, i gcealla feline. Ina theannta sin, tugann ár dtorthaí le tuiscint gur maitrís den scoth í an líne chill CRFK chun radaifhriotaíocht agus rad-thocsaineacht i gcealla cat a chur in iúl.
EOCHAIRFHOCAL:cat, ainmhí compánach, briseadh snáithe dúbailte DNA, radaíocht, senescence
Sliocht Cistanche deserticola: feabhas a chur ar an gcóras imdhíonachta
Glacann ainmhithe compánacha ról atá ag éirí níos tábhachtaí i sochaí an duine. Mar gheall ar shíneadh shaolré ainmhithe compánacha, tá méadú ag teacht ar líon na madraí agus na gcait scothaosta, agus déantar diagnóisíodh le hailse ar go leor madraí agus cait gach bliain [26, 27]. Tá teiripe radaíochta, atá ar cheann de na trí chóireáil mhóra le haghaidh ailse, in úsáid níos mó agus níos mó in ospidéil tréidliachta mar mhalairt ar ailse a chóireáil i madraí agus cait [24, 26]. Chun an teiripe radaíochta is éifeachtaí a bhaint amach, tá sé tábhachtach an tocsaineacht idir gnáthchealla agus cealla ailse a chothromú. Idir an dá linn, cé go breathnaítear radioresistance i cait agus tumaí cat tar éis radaiteiripe ailse, níl an mheicníocht friotaíochta den sórt sin soiléirithe fós [24].
Rinneadh go leor staidéir ar éifeachtaí na radaíochta ar chealla a dhíorthaítear ó dhaoine agus ó chreimirí [6, 10, 23, 28]. Is é DNA genomic an príomhsprioc bhitheolaíoch de theiripí a úsáideann radaíocht mar X-ghathanna agus léasacha trom-ian. Is é briseadh snáithe dúbailte (DSB) an cineál damáiste DNA is tábhachtaí de bharr radaíochta. Cuirtear bealaí éagsúla freagartha damáiste DNA (DDR) i ngníomh, lena n-áirítear braiteadh damáiste DNA, comharthaíocht DDR, agus deisiú DNA, nuair a tharlaíonn DSB. Mar thoradh air sin, déantar na cealla a aisghabháil ó ghortú radaíochta, agus déantar an DNA difear a dheisiú go cruinn agus go héifeachtach [8, 25]. I gcealla madraí agus cat, is féidir DSBanna a dheisiú go príomha trí mheicníocht deisiúcháin neamh-homalógach ceangail deiridh (NHEJ), rud a chothaíonn foircinn DSB an heterodimer Ku, comhdhéanta de Ku70 agus Ku80 [14-17]; áfach, tá gá le tuilleadh staidéir chun é sin a shoiléiriú. Ina theannta sin, sa chéim deisiúcháin luath, tá kinases, mar shampla kinases DNA-PK agus ATM, i ngníomh, agus tá na fosphorylate Ser139 seo den histone H2AX in aice le láithreáin DSB [5, 6]. Is dócha go ngníomhóidh DSBanna meicníochtaí bás cille cláraithe, lena n-áirítear apoptosis agus senescence, nuair nach féidir na cealla a dheisiú [9, 32]. Tá droch-staidéar déanta ar mheicníochtaí móilíneacha DDRanna éagsúla, mar shampla deisiú DNA, i gcealla cat.
An Feline Crandell-Rees neamhbhásaitheDuán(CRFK) tá líne cille ar cheann de na línte cille cat is mó a úsáidtear. Bunaíodh an líne chill CRFK den chéad uair i 1964 ó naduáncortex de 12-phiscín baineann seachtaine d'aois [3]. Crandell et al. [3] cur síos go bhfuil an líne cille CRFK úsáideach i dtaighde víreas feline agus leigheas diagnóiseacha agus tá suim ar leith i dtaighde ailse. Faoi láthair, tá an líne cille CRFK fíor-riachtanach i dtaighde eolaíochta beatha, lena n-áirítear taighde ailse agus víreas. Mar sin, tá sé tábhachtach tuiscint a fháil ar rad-íogaireacht cealla CRFK, a bhfuil anailís déanta ar a gcuid cosáin mhóilíneacha éagsúla, chun faisnéis phríomha taighde a fháil chun meicníochtaí móilíneacha éifeachtaí bitheolaíocha na radaíochta i gcait a shoiléiriú. Mar sin féin, níl aon tuairiscí faoi láthair ar éifeachtaí agus meicníochtaí na radaíochta ar iomadú cealla CRFK.
Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar éifeachtaí bitheolaíocha X-ghathanna ar iomadú cealla CRFK. Léiríonn ár dtorthaí gur chuir X-ghathanna isteach go mór ar iomadú cealla CRFK. Ina theannta sin, thug ár dtorthaí le fios gur tharla an t-iomadú a shochtadh mar gheall ar sheansaireacht cheallacha méadaithe a spreag na DSBanna. Ina theannta sin, dheimhnigh muid i gcealla CRFK go bhfuil an príomhchonair DDR i ngníomh de ghnáth ag kinases ATM.
sliocht cistanche tubolosa: cóireáil galar duáin
ABHAIR AGUS MODHANNA
Cultúir cille, ceimiceáin, agus X-ghathanna
Rinneadh cealla CRFK (HSRRB, Osaka, an tSeapáin) a chothú i meán Eagle modhnaithe Dulbecco arna fhorlíonadh le serum bó féatais 10 faoin gcéad mar a thuairiscítear roimhe seo [17]. Rinneadh ionradaithe ar chealla greamaitheacha le X-ghathanna ag 1, 2, nó 10 Gy agus ag ráta dáileoige 0.71–{0.77 Gy/nóim (200 kV/20 mA le 0.5-mm Al agus 0.5-mm Cu scagairí) ag baint úsáide as Pantak HF320S (Shimadzu, Kyoto, an tSeapáin) ag teocht an tseomra, mar a thuairiscítear i staidéir roimhe seo [17]. Ceannaíodh KU-55933, coscaire kinase ATM, ó Wako Pure Chemical (Osaka, an tSeapáin). Caolaíodh an KU-55933 in DMSO (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, SAM) agus caolaíodh é i meán cultúir díreach roimh úsáid.
Uimhir chill inmharthana a chinneadh
Baineadh úsáid as tástáil eisiamh gorm Trypan chun líon na gceall inmharthana a chinneadh. Síolaíodh cealla ag dlús 2.2 × 104 chealla in aghaidh an mhias i 60- miasa mm. An lá dár gcionn, ionradaíodh na cealla le X-ghathanna agus goraíodh iad ar feadh 5 lá tar éis an ionradaíochta. Ina dhiaidh sin, nitear na cealla le saline maolánach fosfáit (PBS), ar crochadh i dtuaslagán Trypsin-EDTA (T3924, Sigma-Aldrich), a bailíodh, a lártheifneoiriú, a dhaite le 0.4 w/v faoin gcéad Trypan Blue Solution ( Wako Pure Chemical) nó 0.4 faoin gcéad Trypan Blue (Bith-Rad, Hercules, CA, SAM), agus a chomhaireamh ag baint úsáide as TC10™ Uathoibrithe Cille Áiritheoir (Bith-Rad). Rinneadh gach ionradaíocht faoi thrí.
Imdhíonadh
Rinneadh eastóscadh próitéin iomlán agus anailís blot an iarthair de réir ár modhanna a thuairiscítear roimhe seo [11, 17] leis na modhnuithe seo a leanas. Rinneadh na próitéiní iomlána a leictreafóiréis ar Glóthach Réamhtheilgthe Breise LEATHANACH a hAon 5-20 faoin gcéad (Nacalai Tesque, Kyoto, an tSeapáin) nó Glóthach ACE Super Sep 5-20 faoin gcéad (Wako Pure Chemical). Aistríodh na táirgí codánaithe go leictreafóiréisigh go seicní Hybond-P (GE Healthcare Bio-Sciences Corp., Piscataway, NJ, SAM). Ansin, cuireadh bac ar na seicní i Blocáil a hAon (Nacalai Tesque) ar feadh 60 nóiméad ag teocht an tseomra agus gortha iad le antasubstaint mhonaclónach frith-H2AX (JBW301) (Upstate Biotechnology Inc., Charlottesville, VA, SAM) nó luch-actin antasubstaint mhonaclónach (JBW301). Sigma-Aldrich). Tar éis níocháin, goradh na seicní leis an IgG HRP-Linked Whole Ab (ó chaoirigh) (NA931) (GE Healthcare Bio-Sciences Corp.) frith-luch ar feadh 60 nóiméad ag teocht an tseomra. Rinneadh Immunoblotting ag baint úsáide as Select Western Blotting Detection System (GE Healthcare Bio-Sciences Corp.). Léiríodh bannaí próitéine ag baint úsáide as an gcóras ChemiDoc XRS (Bio-Rad).
Imdhíon-cheimic
Rinneadh imdhíonadh mar a thuairiscítear roimhe seo [12, 17] leis na modhnuithe seo a leanas. Go hachomair, socraíodh cealla saothraithe i 4 faoin gcéad paraformaildéad ar feadh 30 nóiméid, tréscaoilteach le 0.5 faoin gcéad Triton X-100 i PBS ar feadh 5 nóiméad, bacáilte ag baint úsáide as tuaslagán blocála, agus goradh le luch antashubstaint mhonaclónach frith- H2AX (JBW301) (Upstate Biotechnology Inc.) ar feadh 60 nóiméad ag teocht an tseomra. Tar éis na cealla a ní le PBS, rinneadh an braite trí úsáid a bhaint as antashubstaint thánaisteach comhchuingeach Alexa Fluor (Molecular Probes, Eugene, OR, USA) nó antashubstaint thánaisteach comhchuingeach isothiocyanate-comjugated fluorescein (Cappel Laboratories, Durham, NC, USA). ). Ansin, dathaíodh núicléis le 0.025 µg/ml de 4, 6-diamino-2-phenylindole (DAPI) dath fluaraiseacha (Boehringer Mannheim, Mannheim, an Ghearmáin). Fuarthas íomhánna de chealla ag baint úsáide as Olympus Fluaraiseacht Mhicreascóip BX51 (Olympus, Tóiceo, an tSeapáin) feistithe le ceamara digiteach (Olympus DP50, Olympus).
Measúnú staining galactosidase (SA- -gal) atá bainteach le seanaoise
Don mheasúnacht seo, plátaíodh cealla (5 × 103) i bplátaí 35-mm agus dathaíodh iad ag baint úsáide as Senescence -Galactosidase Staining Kit (Cell Signaling Technology Inc., Danvers, MA, USA) 5 lá ina dhiaidh sin ionradaíocht de réir threoracha an mhonaróra leis na modhnuithe seo a leanas. Dathaíodh núicléí le 0.025 µg/ml de ruaim fluaraiseacha DAPI. Fuarthas íomhánna de na cealla dhaite tar éis 18 uair trí úsáid a bhaint as Micreascóp Olympus CKX41 atá feistithe le ceamara digiteach (Olympus DP12, Olympus) nó ag baint úsáide as Mhicreascóip Fluaraiseachta Olympus BX51 atá feistithe le ceamara digiteach (Olympus DP50). Cinneadh céatadán na gceall daite go dearfach trí anailís a dhéanamh ar thrí réimse randamach de 100 cill ar a laghad ag baint úsáide as bogearraí Image J. Cinneadh méid na cille núicléach trí anailís a dhéanamh ar thrí réimse randamach de 10 gceall gach ceann ag baint úsáide as na bogearraí Image J. Rinneadh gach ionradaíocht faoi thrí.
Measúnacht apoptóis Iarscríbhinn V/próipidiam iaidíd (PI).
Plátáladh cealla (2.2 × 104) i bplátaí 60-mm agus ionradaithe le X-ghathanna an lá dár gcionn. Cúig lá tar éis an ionradaíochta, rinneadh na cealla a bhaint agus a dhaite le hIarscríbhinn V Alexa Fluor 488-réiteach PI (Tali™ Apoptosis Kit, Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) de réir threoracha an mhonaróra. Baineadh úsáid as caolú 200-huaire den tuaslagán ruaimnithe PI le haghaidh staining. Ina theannta sin, aimsíodh cealla apoptotic lipéadaithe Iarscríbhinn V ag baint úsáide as Cítiméadar Tali Image-bhunaithe (Invitrogen). Rinneadh gach ionradaíocht faoi thrí.
Anailís staitistiúil
Cuirtear torthaí staidrimh i láthair mar mhodh ± diallais chaighdeánacha (n{{0}}). Rinneadh anailís staitistiúil gan méid núicléach san áireamh trí úsáid a bhaint as tástálacha iolracha ANOVA agus Ryan (ANOVA4 ar an WEB, https://www.hju.ac.jp/~kiriki/anova4/). Rinneadh measúnú ar an méid núicléach ag t-thástáil an Mhic Léinn. Measadh go raibh luach P níos lú ná 0.05 suntasach go staitistiúil.
cisteán maireachtála an fhásaigh
TORTHAÍ
Cosc ar iomadú cille CRFK ag X-ghathanna
Chun imscrúdú a dhéanamh ar éifeacht X-ghathanna ar iomadú cealla CRFK, rinneadh ionradaíocht ag 2 agus 10 Gy. Mar a léirítear i bhFíor 1, cuireadh bac suntasach ar iomadú cille ar bhealach dáileog-spleách (P<0.05). these="" findings="" indicate="" that="" the="" proliferation="" was="" inhibited="" by="" x-rays="" at="" both="">
Ionduchtú DSBanna i gcealla CRFK trí X-ghathanna
Tá fosfarú H2AX ag Ser139 ar cheann de na DDRanna móra agus luath-cheallacha do DSBanna [8, 20, 28]. Is bithmharcóir caighdeánach óir é H2AX do DSBanna [8, 20, 28]. Roimhe seo, ag baint úsáide as blotting an iarthair, chinneamar an t-athrú ar léiriú H2AX i gcealla CRFK idir 1 hr go 24 hr iar-ionradaíochta le X-ghathanna ag dáileog amháin de 10 Gy [17]. Mar thoradh air sin, bhí an leibhéal slonn de H2AX is airde tar éis 1 hr [17]. Chun scrúdú a dhéanamh an raibh fosfarylation H2AX ionduchtaithe i dáileog-spleách sna sleachta iomlána ó chealla CRFK 1 uair iar-ionradaíochta, rinneadh anailís blot an iarthair leis an antashubstaint frith-H2AX. Mar a léirítear i bhFíor 2A, léirigh anailís blot an iarthair gur mhéadaigh léiriú H2AX ag brath ar an dáileog X-ghathanna. Ansin, rinneamar scrúdú ar cibé an bhfuarthas an fócas H2AX i gcealla ionradaithe trí mheasúnacht imdhíon-chothaithe ag baint úsáide as an antashubstaint frith-H2AX. Léirigh ár dtorthaí gur foirmíodh fócais H2AX i núicléis na gcealla CRFK ag 1 uair an chloig iar-ionradaíochta (Fíor 2 B).
Fosfarylation cleithiúnach ATMkinase de H2AXat Ser139 i bhfo-ghathanna cealla CRFK
Ceann de na róil thábhachtacha atá ag ATGM kinase nó DNA-PK i DDR arna spreagadh ag X-ghathanna ná H2AX a phosphorylate timpeall na suíomhanna DSB i gcealla daonna agus creimirí éagsúla [18, 29]; áfach, níor imscrúdaíodh ról den sórt sin fós i gcealla cat, lena n-áirítear cealla CRFK. Chun a dheimhniú an bhfuil ATM kinase freagrach as fosfarylation H2AX spreagtha X-gha ag Ser139 i gcealla CRFK, goraíodh na cealla i meán ina raibh an t-inchomhshóite ATM kinase KU-55933 (10 µM) nó tuaslagóir (DMSO) ar feadh 1 uair roimh ionradaíocht (10 Gy). Mar a léirítear i bhFíor 3, cuireadh bac ar fhoirmiú fócais H2AX i gcealla ionradaithe i láthair KU- 55933. Tugann na torthaí seo le fios gurb é ATM an príomh-kinase le haghaidh fosfarú H2AX ag Ser139 de bharr ionradaíochta i gcealla CRFK.
Ionduchtú seanaoise i gcealla CRFK trí X-ghathanna
Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil baint ag cosc ar iomadú cille CRFK mar fhreagra ar ionradaíocht le seangacht agus apoptosis, ionradaithe na cealla le X-ghathanna ag 2 agus 10 Gy. Ar an gcéad dul síos, 5 lá tar éis an ionradaíochta, rinneadh anailís ar chealla trí úsáid a bhaint as staining SA- -gal, measúnú caighdeánach óir le haghaidh seanaoise. Thugamar faoi deara moirfeolaíochtaí senescence-shonracha, mar shampla cruth ceallacha móra agus cothrom (Fíor 4 A) agus núicléis neamhghnácha, lena n-áirítear núicléis mhéadaithe nó multinucleated (Fig. 4 B), i gcealla ionradaithe. Ina theannta sin, i gcealla CRFK ionradaithe, mhéadaigh cealla gal-dearfach SA go suntasach ar bhealach dáileog-spleách (Fíor 4A-C). Rinneamar anailís chainníochtúil freisin ar an méadú ar mhéid an núicléis cille, ar comhartha eile é do chealla seanaoise. Mar a léirítear i bhFíor 4D, bhí méid na núicléas cille i bhfad níos mó i gcealla CRFK ionradaithe (P<0.05). altogether,="" these="" findings="" indicate="" that="" x-rays="" highly="" induce="" senescence="" in="" crfk="" cells.="" next,="" to="" examine="" whether="" x-rays="" induced="" apoptosis="" in="" the="" irradiated="" crfk="" cells,="" apoptosis="" was="" quantified="" using="" tali™="" image-based="" cytometer.="" dual="" staining="" with="" fluorescent="" annexin="" v="" and="" pi="" was="" performed="" to="" detect="" apoptotic="" cells.="" cells="" stained="" positive="" for="" annexin="" v="" are="" considered="" apoptotic="" cells.="" as="" shown="" in="" fig.="" 5,="" the="" proportion="" of="" apoptotic="" cells="" was="" significantly="" higher="" in="" the="" 10-gy="" group="" than="" in="" the="" non-irradiated="" group="" and="" the="" 2-gy="" group="" but="" was="" lower="" (approximately="" 6%)="" in="" the="" 10-gy="" group.="" in="" addition,="" no="" significant="" increase="" in="" apoptosis="" was="" observed="" in="" the="" 2-gy="" group="" compared="" with="" the="" non-irradiated="">
sochair sláinte cistanche: frith-ailse
PLÉ
Tá sé tábhachtach éifeacht bhitheolaíoch na radaíochta ar chealla cat a thuiscint chun radatocsaineacht a shoiléiriú agus chun prótacail teiripeacha nua a fhorbairt le haghaidh cóireáil ailse. Sa staidéar seo, fuair muid amach go bhfuil iomadú an catduáncuireadh an líne chill CRFK faoi chois go suntasach ag X-ghathanna ag dáileoga 2 agus 10 Gy. Léiríonn na torthaí seo go bhfuil X-ghathanna tocsaineach d'fhás cealla CRFK faoi na coinníollacha a úsáidtear sa staidéar seo. Ina theannta sin, tháinig méadú suntasach ar chealla seanaoise i gcealla CRFK ionradaithe. Idir an dá linn, léirigh ár dtorthaí i gcealla CRFK, spreagann ATM kinase fosfarú H2AX ag Ser139, atá ar cheann de na príomh-DDRanna chuig DSBanna arna dtáirgeadh ag X-ghathanna. Tuairiscítear gur féidir le DSBanna radaíochta-spreagtha seangacht agus apoptosis a chothú i gcealla daonna agus creimirí [4, 22]. Tugann ár dtorthaí le fios gur chuidigh an mheicníocht seangachta a ghníomhaigh DSBanna le iomadú cealla CRFK trí X-ghathanna a shochtadh.
Níl an mheicníocht is bun leis an difríocht i radai-íogaireacht i measc daoine, madraí, cait agus meicníocht deisiúcháin na gceall cait soiléirithe go fóill. Mar a luadh thuas, léirigh ár gcuid sonraí go bhfuil an DDR atá ag brath ar kinase ATM i ngníomh ag X-ghathanna i gcealla CRFK. Ina theannta sin, léiríonn an staidéar seo agus staidéir roimhe seo gur féidir DSBanna X-gha-spreagtha i gcealla CRFK a bhrath trí anailís blot an iarthair agus imdhíon-cheimic ag baint úsáide as an antashubstaint frith-H2AX atá ar fáil go tráchtála [17]. Tugann na torthaí seo le fios go bhfuil cealla CRFK úsáideach chun meicníochtaí móilíneacha DDR i gcealla cat a shoiléiriú. Chuir Moor [24] síos go bhfuil teiripe radaíochta do chait difriúil ó theiripe do mhadraí i dtéarmaí freagraí siadaí agus gnáth-thocsaineacht fíocháin. Tá Fujii et al. Léirigh [7] go bhfuil na fibroblasts i cait níos radai-resistant ná iad siúd i ndaoine in anailís fhoirmithe coilíneachta agus féadfar fócais H2AX de bharr radaíochta a dheisiú níos tapúla agus níos éifeachtaí i fibroblasts feline. Ina theannta sin, mhol siad an fhéidearthacht go ndéanfaí damáiste DNA agus crómasóim de bharr X-ghathanna a dheisiú ar bhealach níos éifeachtaí i limficítí feline ná i limficítí daonna nó madraí. Tugann na torthaí seo le fios go bhféadfadh baint a bheith ag na difríochtaí i radai-fhriotaíocht i measc daoine, madraí agus cait leis an difríocht in in-athsholáthar DNA. Le déanaí, léirigh muid ag baint úsáide as cealla CRFK go bhfuil na príomhphróitéiní deisiúcháin NHEJ, .i. cat Ku70, Ku80, agus XLF, carntha ag láithreáin DSB arna tharlú ag an 405-nm microlaser [17]. Táimid tar éis a nochtadh freisin go bhfuil earcú cat XLF, XLF daonna, nó madra XLF ag brath ar láithreacht Ku [13, 14, 17]; tacaíonn na torthaí seo go láidir go bhfuil rialáil spásúlachta ar phríomhfhachtóirí NHEJ, lena n-áirítear Ku70, Ku80, agus XLF, tábhachtach maidir le deisiú NHE a rialáil [10, 19]. I dteannta a chéile, d’fhéadfadh cealla CRFK a bheith úsáideach chun na meicníochtaí móilíneacha is bun leis na difríochtaí radaimhinicíochta i measc cealla cait, madraí agus cealla daonna a nochtadh ach freisin DDRanna, lena n-áirítear deisiúchán NHEJ atá ag brath ar Ku a chaomhnaítear iontu.
Is meicníocht thábhachtach é an t-aistriú epithelial-mesenchymal (EMT) le haghaidh claochlú urchóideacha, m.sh., athrú ar fhriotaíocht cealla ailse go radaíocht agus drugaí frith-ailse. Le déanaí, tuairiscíodh go bhfuil tréithe fibroblast ag cealla CRFK, go háirithe maidir le moirfeolaíocht, bithcheimic, agus bitheolaíocht mhóilíneach, cé gur bunaíodh cealla CRFK mar líne cille epithelial [21]. Thairis sin, van Beusekom et al. [31] thuairiscigh gur athraigh TGF deilbhíocht cealla CRFK ó fheinitíopa epithelial go feinitíopa fibroblastic agus gur spreag sé go suntasach léiriú roinnt géinte marcála EMT i gcealla CRFK, rud a thugann le tuiscint gur féidir le cealla CRFK dul faoi EMT. Sa staidéar reatha, bhí an chuma ar sheansacht níos tábhachtaí ná apoptosis maidir le fás a chosc i gcealla CRFK ionradaithe. San iomlán, d’fhéadfadh líne chill CRFK a bheith ina modhúlacht den scoth chun ní hamháin an t-idirghaolmhaireacht idir nó i measc seangacht X-ghathach, radai-fhriotaíocht, agus/nó radatocsaineacht i gcait a léiriú.duáncealla epithelial ach freisin chun éifeachtaí EMT i gcoinne radaíochta agus ceimiteiripe a shoiléiriú.
Is straitéis frith-ailse nua í teiripe pro-senescence ar bhonn senescence cille ailse a aslú. Chun an straitéis seo a chur i bhfeidhm maidir le cóireáil cait, is gá meicníocht mhóilíneach an ionduchtaithe senescence i gcealla feline a shoiléiriú. Ar an láimh eile, Li et al. [22] tar éis cur síos a dhéanamh go bhfuil acmhainneacht mhór ag gníomhairí senolytic, aicme de mhóilíní beaga ar féidir leo cealla séanacha a mharú go roghnach, fo-iarmhairtí radaiteiripe a laghdú go suntasach agus iad ag stiúradh soiléir ó charcanaigineas. Le déanaí, léiríodh go gcuireann gníomhaire senolytic ABT-737 deireadh le cealla senescent radaíochta ianaíoch ó scamhóga lucha ionradaithe [35]. Mar a luadh thuas, léirigh ár gcuid sonraí gur tháinig méadú suntasach ar chealla séiseach i gcealla CRFK ionradaithe. D’fhéadfadh go mbeadh ár dtorthaí agus ár gcuid staidéir bhreise ag baint úsáide as cealla CRFK ar fáil le haghaidh buntaighde d’fhorbairt ní amháin teiripe ionchúisimh marine ach freisin oibreáin seinolaíoch chun fo-iarmhairtí radaiteiripe a laghdú.
CRFKtá sí ar cheann de na línte cille mamaigh is tábhachtaí agus úsáidtear go forleathan é i dturgnaimh lena n-áirítear iad siúd ar víris, amhail an choróinvíreas géar-shiondróm riospráide (SARS-CoV) nó SARS-CoV-2; deisiú DNA agus taighde ailse i gcait;ainsealachduán galar; agus táirgeadh vacsaíní [1, 2, 17, 30, 33, 34]. Is féidir le cealla CRFK a bheith ionfhabhtaithe le víris éagsúla, lena n-áirítear oncoviruses [1-3, 34]. Bunaithe orthu seo, déanaimid tuairimíocht go bhféadfadh an líne chill CRFK a bheith oiriúnach do thaighde bunúsach ar athruithe ar radai-íogaireacht de bharr ionfhabhtú víreasach agus ar éifeacht na radaiteiripe ar siadaí de bharr ionfhabhtú víreasach.CRFKis féidir cealla a úsáid chun na meicníochtaí is bun le radai-fhriotaíocht agus radatocsaineacht i gcealla epithelial duán cait a shoiléiriú agus éifeacht ionfhabhtú víreasach ar radai-íogaireacht. Go cinntitheach, féadfaidh cealla CRFK a bheith ina línte cille den scoth chun taighde a dhéanamh ar radatocsaineacht i gcait agus taighde bunúsach chun modhanna cóireála ailse nua a fhorbairt.
sochair sláinte cistanche tubolosa
COIMHLINT LEASA.Ní dhearbhaíonn na húdair aon choinbhleacht leasa.
BUÍOCHAS.Rinneadh an obair seo le tacaíocht ó na hInstitiúidí Náisiúnta um Eolaíocht agus Teicneolaíocht Chandamach agus Raideolaíoch, agus Roinn na Bitheolaíochta Rialála, Dámh na hEolaíochta, Ollscoil Saitama.
TAGAIRTÍ
1. Altamura, G., Power, K., Martano, M., Degli Uberti, B., Galiero, G., De Luca, G., Maiolino, P. agus Borzacchiello, G. 2018. Felis catus
cineál víreas papilloma-2 Ceanglaíonn E6 le E6AP, cuireann sé ceangal E6AP/p53 chun cinn agus cuireann sé le díghrádú próitéamómach p53. Sci. Ionadh 8: 17529.
2. Chu, H., Chan, JF, Yuen, TT, Shuai, H., Yuan, S., Wang, Y., Hu, B., Yip, CC, Tsang, JO, Huang, X., Chai, Y., Yang, D., Hou, Y., Chik, KK,
Zhang, X., Fung, AY, Tsoi, HW, Cai, JP, Chan, WM, Ip, JD, Chu, AW, Zhou, J., scamhóg, DC, Kok, KH, Chun, KK, Tsang, OT, Chan, KH agus Yuen, KY 2020. Trópaiceacht chomparáideach, cinéitic macasamhlú, agus próifíliú damáiste cille de SARS-CoV-2 agus SARS-CoV a bhfuil impleachtaí aige ar ghnéithe cliniciúla, in-tarchurtha, agus staidéir saotharlainne ar COVID-19 : staidéar breathnadóireachta. Miocrób Lancet 1: e14–e23.
3. Crandell, RA, Fabricant, CG agus Nelson-Rees, WA 1973. Forbairt, tréithriú, agus so-ghabhálacht víreasach líne cille duánach feline (Felis catus) (CRFK). In Vitro 9: 176–185.
4. d'Adda di Fagagna, F. 2008. Maireachtáil ar bhriseadh: senescence cheallacha mar fhreagairt DNA-damáiste. Nat. Ath. Ailse 8: 512-522.
5. Durocher, D. agus Jackson, SP 2001. DNA-PK, ATM, agus ATR mar braiteoirí damáiste DNA: éagsúlachtaí ar théama? Curr. Tuairim. Cill Biol. 13: 225–231.
6. Firsanov, DV, Solovjeva, LV agus Svetlova, MP 2011. H2AX phosphorylation ag láithreacha bristeacha DNA snáithe dúbailte i cealla agus fíocháin mamaigh saothraithe. Clin. Eipigéineolaíocht 2: 283-297.
7. Fujii, Y., Yurkon, CR, Maeda, J., Genet, SC, Kubota, N., Fujimori, A., Mori, T., Maruo, K. agus Kato, TA 2013. Staidéar comparáideach ar an raidió-fhriotaíocht idir cealla feline agus cealla daonna. Radaíocht. Res. 180: 70–77.
8. Huang, RX, agus Zhou, PK 2020. Conairí comharthaíochta freagartha damáiste DNA agus spriocanna le haghaidh íogrú radaiteiripe in ailse. Tarchur Comhartha. Sprioc. Ther. 5: 60.
9. Jackson, SP 2002. Sosanna snáithe dúbailte DNA a bhrath agus a dheisiú. Carcanaigineas 23: 687-696.
10. Koike, M. 2002. Toise, trasghluaiseacht, agus logánú próitéiní Ku70 agus Ku80. J. Radiat. Res. (Tóiceo) 43: 223–236.
11. Koike, M. agus Koike, A. 2008. Carnadh próitéiní Ku80 ag briseadh snáithe dúbailte DNA i gcealla beo. Cait. Cill Res. 314: 1061–1070.
12. Koike, M., Shiomi, T. agus Koike, A. 2001. Toise agus logánú núicléach próitéiní Ku. J. Biol. Ceimic. 276: 11167–11173.
13. Koike, M., Yutoku, Y. agus Koike, A. 2011. Carnadh ofKu70 ag briseadh snáithe dúbailte DNA i gcealla epithelial beo. Cait. Cill Res. 317: 2429–2437.
14. Koike, M., Yutoku, Y. agus Koike, A. 2017. Clónáil, logánú, agus foirmiú fócas ag láithreáin damáiste DNA de canine XLF. J. Tréidlia. Med. Sci. 79:22–28.
15. Koike, M., Yutoku, Y. agus Koike, A. 2017. Clónáil, logánú, agus foirmiú fócas ag láithreáin damáiste DNA de canine Ku70. J. Tréidlia. Med. Sci. 79: 554–561.
16. Koike, M., Yutoku, Y. agus Koike, A. 2017. Clónáil canine Ku80 agus a logánú agus a charnadh ag láithreáin damáiste DNA. Bitheolaíocht Oscailte FEBS 7: 1854–1863.
17. Koike, M., Yutoku, Y. agus Koike, A. 2019. Carnann Feline XLF ag láithreáin damáiste DNA ar bhealach Ku-spleách. FEBS Oscail Bith 9: 1052-1062.
18. Koike, M., Sugasawa, J., Yasuda, M. agus Koike, A. 2008. Fosfarylation H2AX DNA-PK-chleithiúnach ar fhíocháin agus díothú gáma-H2AX tar éis X-ionradaíocht in vivo. Bithcheimic. Bithfhis. Res. Cumann. 376: 52–55. [Medline] [CrossRef]
19. Koike, M., Awaji, T., Kataoka, M., Tsujimoto, G., Kartasova, T., Koike, A. agus Shiomi, T. 1999. Logánú difreálach subcellular de DNA- comhpháirteanna kinase próitéin spleách Ku agus DNA-PKcs le linn miotóis. J. Cill Sci. 112: 4031–4039. [Medline]
20. Kopp, B., Khoury, L. agus Audebert, M. 2019. Bailíochtú bithmharcóir H2AX le haghaidh measúnú géineatocsaineachta: athbhreithniú. Áirse. Tocsain. 93: 2103–2114. [Medline] [CrossRef]
