Comhábhair Éifeachtacha na Cistanche: Modh Scartha Agus Íonúcháin Glicóisídí Feinileatánóideach
Mar 14, 2022
Déan teagmháil le:joanna.jia@wecistanche.com
Leithlisiú agus Íonú Glicóisídí Feinileatánóideach Ó Cistanche Deserticola Trí Chrómatagrafaíocht Frithreatha Ardluais
Li a, b, Rong Tsao b,*, Raymond Yang b, Chunming Liu a,
J. Christopher Young b, Honghui Zhu b
le Roinn na Ceimice, Changchun Gnáth-Ollscoil, Changchun 130032, an tSín
b Ionad Taighde Bia Guelph, Talmhaíocht agus Agraibhia Ceanada, 93 Stone Road West, Guelph, Ontario, Ceanada N1G 5C9
Arna fháil 31 Bealtaine 2007; faighte i bhfoirm athbhreithnithe 16 Deireadh Fómhair 2007; glacadh leis ar 29 Deireadh Fómhair 2007
Coimriú:
Cúigeargliocóisídí feinileatánóideach(PhGs),echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside, agus 20-aicéitilacteoside, a leithlisiú agus a íonghlanadh óCistanche deserticoladen chéad uair trí chrómatagrafaíocht fhrithshrutha ardluais (HSCCC) ag úsáid dhá chóras déphasic, ceann acu comhdhéanta d'aicéatáit eitile-eatánól-uisce (5:0.5:4.5, v/v/v) agus ceann eile d'aicéatáit eitile–n-butanol–eatánól-uisce ({{10}}.5:0.5:0.1:1, v/v/v/v). Iomlán de 28.5 mg de echinacoside, 18.4 mg decistanoside A, 14.6 mg deaicteóis, íonaíodh 30.1 mg isoacteoside agus 25.2 mg de 20-acetylacteoside ó 1412 mg de sliocht n-butanol deCistanche deserticola, gach ceann acu ag os cionn 92.5 faoin gcéad íonachta mar a chinneann HPLC. Sainaithníodh na struchtúir ag a n-am coinneála, UV, LC-ESI-MS sa mhodh ian diúltach, agus deimhníodh iad le turgnaimh NMR. Déantar plé ar phatrún ilroinnte sainiúil LC-ESI-MSn na gcúig chomhdhúil, agus fuarthas amach gur uirlis an-sonrach agus úsáideach é chun PGanna a shainaithint ón bplanda míochaine tábhachtach seo.
Cóipcheart na Corónach © 2007 Arna fhoilsiú ag Elsevier Ltd. Gach ceart ar cosaint.
Eochairfhocail:Cistanche deserticola; Phenylthanoid;Echinacoside; Cistanoside A;Aicteoside; Iseaacteoside; 20-Aicéitilacteoside; HSCCC; LC–ESI-MS; NMR
1. Réamhrá
Cistanche deserticolaIs leigheas luibhe Síneach cáiliúil é YC Ma agus baineadh úsáid as go forleathan in ullmhóidí traidisiúnta cosúil le comhábhair bia feidhmiúla nó forlíontaí bia (Wong, Li, Cheng, & Chen, 2006). Is iad na príomh-chomhábhair bhithghníomhacha i C. deserticolafeinileatánóideachgliocóisídí (PhGanna), lena n-áirítearechinacoside, acteoside, isoacteoside, 20-aicéitilacteoside, aguscistanoside A(Kobayashi, Karasawa, & Miyase, 1984; Kobayashi et al., 1987). Déantar PhGanna a dháileadh go forleathan i ríocht na bplandaí agus rinneadh staidéar forleathan orthu maidir lena bhfeidhmeanna bitheolaíocha éagsúla, mar shampla hepatoprotective (Xiong et al., 1998), gníomhaíocht frith-athlastach, antinociceptive (Schapoval et al., 1998), agus gníomhaíochtaí frithocsaídeacha (Cheng). , Wei, Guo, Ni, & Liu, 2005; He, Lau, Xu, Li, & Ach, 2000; Li, Wang, & Wang, 1997; Li, Wang, Zheng, Liu, & Jia, 1993; Wang, Jiang , Wu, & Wang, 2001; Xiong, Kadota, Tani, & Namba, 1996), feabhas ar fheidhm ghnéasach (Xie & Wu, 1993; Zong, He, Wu, & Chen, 1996), agus éifeacht sedative (Lu, 1998) .
Mar gheall ar na bithghníomhaíochtaí suntasacha thuas, tá gá práinneach le méideanna móra de chomhdhúile íona mar chaighdeáin thagartha agus le haghaidh staidéir in vitro agus in vivo éagsúla a bhaineann le húsáid leigheasanna traidisiúnta Síneacha. Dá bhrí sin tá gá le modhanna éifeachtacha chun aonrú, íonú agus tréithriú struchtúrach PhGanna. Éilíonn obair den sórt sin, áfach, go n-úsáidfí ilchéimeanna crómatagrafacha chun samplaí a ghlanadh suas agus a leithlisiú (Gross, Lahloub, Anklin, Schulten, & Sticher, 1988; Nishimura, Sasaki, Inagaki, Chin, & Mitsuhashi, 1991; Ravn, Nishibe , Sasahara, & Li, 1990; Shoyama, Matsumoto, & Nishioka, 1987), a mbíonn rátaí aisghabhála ísle mar thoradh air de ghnáth mar gheall ar asaithe do-aisiompaithe PhG ar an tacaíocht soladach le linn scaradh (Lei et al., 2001). I gcodarsnacht leis sin, tá crómatagrafaíocht fhrithshrutha ardluais (HSCCC) tar éis teacht chun bheith ina rogha éifeachtach eile ar na gnáth-theicnící crómatagrafaíochta chun roinnt PhG a scaradh ó shleachta plandaí (Lei et al., 2001; Li et al., 2005). Lei et al. scartha go rathúilaicteóisagus 20-acetylacteoside ó Cistanches salsa (CA Mey.) G. Beck trí úsáid a bhaint as HSCCC (Lei et al., 2001). Thuairiscigh údair an pháipéir seo scaradh naaicteóisagus isoacteoside ó Plantago psyllium L. le HSCCC (Li et al., 2005). Mar sin féin, níl aon tuarascáil foilsithe ar scaradh agus íonú PhGanna iolracha óCistanche deserticolaag baint úsáide as HSCCC. Mar gheall ar an easpa caighdeán, forbraíodh modhanna LC-MS agus úsáideadh iad mar uirlis chumhachtach anailíse chun roinnt PhG a thréithriú go tapa agus iad a shainaithint i sliocht plandaí (Li et al., 2005; Wang et al., 2000).
Sa pháipéar seo, tuairiscímid modh HSCCC a forbraíodh chun echinacoside a ullmhú,cistanoside A, acteoside, isoacteoside agus 20-aicéitilacteoside óCistanche deserticola. Baineadh tréithriú agus anailís ar na cúig PhG scartha amach trí úsáid a bhaint as LC in éineacht le mais-speictriméadracht ESI agus turgnaimh NMR. Cuirtear an t-am coinneála, an meáchan móilíneach, agus na hiain shaintréithe de na cúig PhG i láthair agus pléitear iad sa pháipéar seo. Taispeántar struchtúir na gcúig PhG a sainaithníodh san imscrúdú seo in Fíor 1.
2. Turgnamhach
2.1. Ceimiceáin agus imoibrithe
Aicteosideó Sigma–Aldrich (Darach-Ville, ON), ceannaíodh echinacoside ó ChromaDex (Santa Ana, CA). Bhí Isoacteoside scoite ó P. psyllium L. (Li et al., 2005).Cistanche deserticolaceannaíodh ó Beijing TongRenTang Leighis Store (tSín). Bhí na tuaslagóirí go léir de ghrád HPLC agus ceannaíodh iad ó Caledon Laboratories Ltd. (Georgetown, ON).
2.2. Ullmhúchán samplach
Cistanche deserticola(20 g) a bhaintear cúig huaire ag teocht an tseomra ar feadh 12 u gach ceann acu le 100 ml d'eatánól uiscí 80 faoin gcéad. Gach uair a rinneadh an meascán eastósctha a scagadh trí pháipéar scagtha Whatman Uimh.1 (Whatman International Ltd., Maidstone, Sasana). Díríodh an comhscagadh go 100 ml i bhfolús ag < 40="" céim="" .="" baineadh="" an="" tuaslagán="" uiscí="" mar="" thoradh="" air="" sin="" faoi="" dhó,="" gach="" ceann="" acu="" le="" 100="" ml="" heacsán,="" agus="" ansin="" eastósctar="" é="" i="" ndiaidh="" a="" chéile="" ar="" feadh="" cúig="" huaire,="" gach="" ceann="" acu="" le="" 100="" ml="" n-butanol.="" cuireadh="" na="" sraitheanna="" n-butanol="" le="" chéile="" agus="" comhchruinníodh="" iad="" go="" dtí="" triomacht="" i="" bhfolús="" ag="">< 40="" céim="" ,="" rud="" a="" thug="" 2.2="" g="" de="" sliocht="" n-butanol.="" stóráladh="" an="" sliocht="" ag="" -20="" céim="" roimh="" scaradh="">
2.3. Nós imeachta idirscartha HSCCC
Rinneadh an HSCCC ullmhúcháin i crómatagrafaíocht ardluais fhrithshrutha CCC (Pharma-Tech Research, Baltimore, Maryland USA). Bhí trí chorna ullmhúcháin ag an ngaireas seo, ceangailte i sraith (toirt iomlán, 325 mL). D'fhéadfaí luas réabhlóide an ghaireas a rialú idir 0 agus 2000 rpm. Bhí an córas HSCCC feistithe le caidéal HPLC (Pharma-Tech Research, Baltimore, Maryland, USA), brathadóir UV Samhail 450 (Alltech, SAM), taifeadán árasán L 120 E (Linseis Inc., Princeton Jct,) USA), bailitheoir codán (Advantec MFS Inc., USA) agus comhla insteallta samplach a bhfuil lúb shamplach 10-ml aici.
Croitheadh meascán d’aicéatáit eitile–eatánól-uisce (5:0.5:4.5, v/v/v) go bríomhar i dtonnadóir deighilte agus lig sé seasamh agus scaradh ag teocht an tseomra. Baineadh úsáid as an dá chéim sa HSCCC tar éis dóibh cothromaíocht a bhaint amach. Líonadh an colún coiled ar fad ar dtús leis an gciseal uachtarach, a fheidhmíonn mar chéim stadach. Ansin pumpáladh an ciseal íochtair (céim shoghluaiste) isteach i gceann ceann an cholúin ag ráta sreafa 1.5 mL/nóim. Socraíodh an luas rothlaithe ag 105{0 rpm. Lódáladh sampla (thart ar 230 mg gach uair) i 8 ml den mheascán d'aicéatáit eitile-eatánól-uisce (5:0.5:4.5, v/v/v) isteach sa chomhla insteallta tar éis don chóras teacht ar an hidridinimiciúil. cothromaíochta. Roghnaíodh an córas tuaslagóir déphasic seo bunaithe ar an gcomhéifeacht deighilte (K), arbh ionann é agus 0.87, 1.11, agus 1.32 doaicteóis, isoacteoside, agus 20 acetylacteoside, faoi seach. Ba é luach K an cóimheas idir na tiúchain i sraitheanna barr agus bun an chomhdhúil chéanna arna chinneadh ag HPLC (Fíor 2). Rinne brathadóir UV ag 254 nm monatóireacht leanúnach ar an eisilteach ó asraon an cholúin agus bailíodh é isteach i bhfeadáin tástála le bailitheoir codáin socraithe ag 4 nóiméad do gach feadán.
2.4. Coinníollacha LC
úsáideadh uathshamplóir statach agus brathadóir eagair fóta-óid (DAD) chun anailís a dhéanamh ar PhGanna sa sliocht n-butanol deCistanche deserticolaagus codáin a bailíodh ón deighilt HSCCC. Rinneadh an scaradh i gcolún Phenomenex ODS-C18 (250 × 4.6 mm, 5 lm) le colún garda C18. Bhí an chéim dhénártha soghluaiste comhdhéanta de acetonitrile (tuaslagóir A) agus uisce ina raibh 2 faoin gcéad aigéad aicéiteach (tuaslagóir B). Scagadh na tuaslagóirí go léir trí a
{{0}}.45 lm scagaire roimh é a úsáid. Coinníodh an ráta sreafa tairiseach ag 1.0 mL/nóiméad ar feadh aga reatha iomlán 25 nóim. Ritheadh an córas le clár grádáin: 0–20 nóim: 90 faoin gcéad B go 60 faoin gcéad B; 20–22 nóim: 60 faoin gcéad B go 0 faoin gcéad B; agus 22 - 25 min, 0 faoin gcéad B go 90 faoin gcéad B. Ba é méid an insteallta samplach ná 10 lL. Rinne brathadóir DAD monatóireacht ar bhuaicphointí spéise ag 320 nm.
2.5. Turgnaimh LC-ESI-MS
Rinneadh turgnaimh LC-MS ag baint úsáide as mais-speictriméadar gaiste ian LCQ DECA Finnigan (Thermo Finnigan, San Jose, CA, SAM) atá feistithe le foinse ianaithe leictrispré (ESI). Rinneadh anailís ar na samplaí sa riocht crómatagrafach céanna. Baineadh úsáid as samhail diúltach chun sonraí a bhailiú. Socraíodh na rátaí sreafa gáis agus cúnta ag 96 agus 7 (aonad treallach), faoi seach. Socraíodh an voltas ribeach ag 29 V agus rialaíodh a theocht ag 350 céim. Socraíodh voltas an lionsa isteach ag 40 V agus socraíodh an aimplitiúid RF ilpholach ag 540 V. Rinneadh voltas snáthaidí ESI a rialú ag 4.5 kV. Ba é 16 V fritháireamh an fheadáin, 8.20 V an lionsa ilpholach 1 agus 10.5 V an lionsa ilpholach 2. Socraíodh voltas an iolraitheora leictreon ag 980 V chun ian a bhrath.
2.6. NMR le haghaidh Aitheantais
Rinneadh speictrim NMR a thaifeadadh ar speictriméadar Bruker Avance-600 (Bruker BioSpin Ltd., Baile Mhuilinn, Ceanada). Níor cuireadh ach comhdhúile 2 agus 5 (gan aon chaighdeáin ar fáil) faoi thurgnaimh NMR. Díscaoileadh samplaí i CD3OD.
3. Torthaí agus plé
3.1. Scaradh HSCCC
An sliocht n-butanol deCistanche deserticolaagus rinne HPLC anailís ar na codáin a fhreagraíonn do gach buaic arna leithlisiú ag HSCCC, agus tá na torthaí tugtha i bhFíor 2. Scaradh agus braitheadh cúig chomhdhúil mhóra (buaiceanna 1-5) le hamanna coinneála ag 9.2 min, 10.7 min, 12.3 min ,
13.3 min agus 16.2 min, faoi seach.
Braitheann scaradh rathúil HSCCC den chuid is mó ar chóras tuaslagóir dhá chéim oiriúnach a sholáthraíonn comhéifeacht deighilte idéalach (K) timpeall 1 don chomhdhúil atá ag teastáil. Ba cheart go mbeadh am socraithe réasúnta gearr mar thoradh ar chóras déphasic dá leithéid (Chen, Games, & Jones, 2003; Foucault & Chevolot, 1998; Oka, Oka, & Ito, 1991). Inár dturgnamh, roghnaigh muid ceithre shraith de chórais tuaslagóirí de réir tuaslagthacht na gcomhdhúile sprice iCistanche deserticola. Baineadh úsáid as HPLC chun an tiúchan i ngach céim a thomhas, ónar ríomhadh luachanna K na gcomhdhúile sprice. Dhá chóras, aicéatáit eitile– n-butanol–eatánól-uisce (4:0.6:0.6:5, v/v/v/v) agus aicéatáit eitile–uisce (1: 1, v/v), a úsáideadh roimhe seo i HSCCC chun scaradhaicteóisagus 20-aicéitilacteoside óC. salsa,aicteóis, agus isoacteoside ó P. Psyllium, faoi seach (Lei et al., 2001; Li et al., 2005). Cé go raibh aga socraithe réasúnta gearr ag an gcéad chóras, bhí feidhmíocht lag aige maidir le scaradh PhGannaCistanche deserticola, mar gheall ar na luachanna íseal K do chomhdhúile 1 agus 2, agus luachanna arda K do chomhdhúile 3–5. Bhí na luachanna K an-íseal do chomhdhúile 1–4 sa dara córas, ach an-ard do chomhdhúil 5 (Tábla 1). Thug córas modhnaithe ina bhfuil aicéatáit eitile–eatánól-uisce (5:{{10}}.5:4.5, v/v/v), luach idéalach K do chomhdhúile 3–5 ag 0.87, 1.11, agus 1.32, faoi seach, agus mar thoradh ar scaradh maith na trí chomhdhúile (Fíor 3A agus B). An córas seo, áfach, a tháirgtear
luach ró-bheag K do chomhdhúile 1 agus 2, rud a fhágann go mbíonn an dá chomhdhúile ag comhleá in aice le tosaigh an tuaslagóra (codán 1 i bhFíor 3A). Mionathrú breise ar an gcóras (aicéatáit eitile–n-butanol–eatánól-uisce (0.5:0.5:0.1:1, v/v/v/ v) ardaithe na luachanna K do chomhdhúile 1 agus 2 go dtí 0.52 agus 0.92, faoi seach, agus mar thoradh ar scaradh iomlán (Fíor 3C) Taispeánann Fíor 3A scaradh HSCCC a sampla ina bhfuil 230 mg den sliocht n-butanol deCistanche deserticolaag baint úsáide as aicéatáit eitile–eatánól-uisce (5:0.5:4.5, v/v/v). Codáin a dheimhnigh HPLC nach raibh iontu ach comhdhúile 3, 4, nó 5 a cuireadh le chéile ar leithligh, agus comhthiomsaíodh iad siúd ina bhfuil comhdhúile 3 agus 4, reo-triomaítear iad, agus cuireadh faoi réir an HSCCC arís iad le haghaidh scaradh breise (Fíor 3 B). Thug an scaradh HSCCC dhá chéim a thuairiscítear thuas 14.6 mg, 30.1 mg, agus 25.2 mg de chomhdhúile 3-5 ó 1412 mg n-butanol sliocht. Taispeánann Fíor 3C deighilt HSCCC de shampla ina bhfuil comhdhúile 1 agus 2 (codán 1 sa chéad deighilt) ag baint úsáide as aicéatáit eitile–n-bútánól-eatánól-uisce (0.5:0.5 :0.1:1, v/v/ v/v). Fuarthas iomlán de 28.5 agus 18.4 mg de chomhdhúile 1 agus 2. Bhí íonachtaí crómatagrafacha na gcomhdhúile reoite-triomaithe 1-5 os cionn 92.5 faoin gcéad , a úsáideadh go díreach le haghaidh anailísí LC-ESI-MS agus NMR.
3.2. Sainaithint struchtúrach ag LC-ESI-MS agus NMR
Baineadh amach sainaithint sealadach comhdhúile 1, 3, agus 4 trí amanna coinneála iomchuí agus sonraí speictreach UV leo siúd den echinacoside barántúla,aicteóis, agus isoacteoside (Fig. 2). Ní raibh anaithnid ar chomhdhúile 2 agus 5, ach bhí speictream UV na gcúig chomhdhúil go léir an-chosúil, rud a léirigh gnéithe struchtúracha comhchosúla.
Chun imscrúdú breise a dhéanamh ar struchtúir na gcúig chomhdhúil seo, rinneadh iarracht ar thurgnaimh LC-ESI-MSn agus léirítear na torthaí i bhFíor 4 agus i dTábla 2. Thaispeáin comhdhúile a bhain leis na beanna (1-5) i bhFíor 2 iain mhóilíneacha dhian díprotonaithe [MH]— ag m/z 785, 799, 623, 623, agus 665, faoi seach, sa mhodh diúltach. Breathnaíodh iain diméireacha [2M H]— freisin do bhuaiceanna 1–4 i bhFíor 2. Dhearbhaigh siad seo gur 786, 800, 624, 624, agus 666, faoi seach, meáchain mhóilíneacha na mbuaiceanna 1–5. Chuir na sonraí LC-MSN (Tábla 2) faisnéis struchtúrach thar a bheith úsáideach ar fáil do na cúig PhG, mar shampla caillteanas neodrach
Nós imeachta turgnamhach: rinneadh thart ar 1 mg de gach sampla a mheá i bpromhadán 10 ml inar cuireadh 1 ml de gach céim den chóras tuaslagóra dhá phas réamhchothromaithe isteach. Cuireadh caipín ar an bpromhadán agus croith é go bríomhar ar feadh 1 nóiméad, agus ligeadh dó seasamh go dtí go scar sé go hiomlán. Tógadh slánchuid de 100 lL de gach ciseal amach agus galaithe go leithleach go triomacht i bhfolús ag<40 °c.="" the="" residue="" was="" dissolved="" in="" 10="" ll="" methanol="" and="" analyzed="" by="" hplc="" for="" determining="" the="" partition="" coefficient="" (k)="" of="" compounds="" 1–5.="" the="" k="" value="" was="" expressed="" as="" the="" peak="" area="" of="" the="" target="" compound="" in="" the="" upper="" phase="" divided="" by="" that="" in="" the="" lower="">
an caffeoyl moiety (162), an moiety glúcóis (162), an rhamnose moiety (146), radacach CH2 (14), agus an grúpa COCH2 (42).
Taispeántar an LC–ESI-MS de bhuaic 1 in Fíor 4A. An t-ian móilíneach díphróitínithe [MH]— ag m/z 785 le raidhse ard agus móilíneach díphróitínithe dimeric
ian [2M H]— ag m/z breathnaíodh 1571 sa mhodh diúltach, rud a thugann le tuiscint go raibh meáchan móilíneach 786 ann, a bhí mar an gcéanna leis an echinacoside. Fuarthas tuilleadh imscrúdaithe i dturgnamh LC-MS2 ar na hiain m/z 785 mar phríomh-ianán amháin ag m/z 623 (Fíor 4B) a táirgeadh go díreach ó m/z 785 mar gheall ar chaillteanais caiféile nó ghluaiseacht heicseóis mar [M 162 H]—. An speictream LC-MS3 de m / z 623 ar taispeáint dhá ian mór ag m / z 477 agus 461, agus dhá ian mion ag m / z 315 agus 179 ( Fíor. 3 C, Tábla 2 ). Ba iad na difríochtaí maise idir m/z 623 agus na hiain blúirí m/z 477 agus 461 ná 146 agus 162, faoi seach, a fhreagraíonn do chaillteanais aonaid rhamnose agus moiety glúcóis nó bog-mhothúcháin [M 162 H]—. Chaill na hiain m/z 623 freisin taise caffeoile agus rhamnose chun na hiain m/z 315 a tháirgeadh. Táirgeadh an t-ian ag m/z 179 ó scoilteacht an chaisleáin, agus an lucht diúltach fágtha ar thaobh an chaifiil. Léirigh turgnamh LC-ESI-MSN ar an echinacoside barántúil an patrún scoilte céanna. Dá bhrí sin deimhníodh go raibh buaic 1 mar echinacoside.
Maidir le buaic 2, thaispeáin an LC–ESI-MS m/z 799 mar an t-ian móilíneach díphróitíneach [MH]— agus m/z 1599 mar a ian dimeric, a thugann le tuiscint go bhfuil mais mhóilíneach 800 ann. Le linn turgnaimh MS2, an m/z 799 hiain déanta triúr iníon
iain ag m/z 637, 623, agus 475 (Tábla 1). Táirgeadh an t-ian ag m/z 637 go díreach ón máthair-ian de m/z 799 arís mar gheall ar chaillteanas neodrach an chaifitéire [M—162-H]— nó moiety glúcóis [M—162-H]—. Tharla an t-ian ag m/z 623 mar gheall ar chailleadh radacach CH2. Cruthaíodh an t-ian ag m/z 475 de bharr cailleadh neodrach an tsleachta caifíl [M 162 H]— agus an taise glúcóis ón máthair-ian araon. Tháirg an turgnamh MS3 ar m/z 637 trí ian ag m/z 619, 491, agus 475, a fhreagraíonn do chaillteanais uisce amháin, aonad rhamnose, agus taise glúcóis, faoi seach. Tháirg an iníon-ian m/z 623 m/z 461 agus 315 sa staidéar MS3, a lean na cosáin ilroinnte céanna le echinacoside mar a pléadh thuas. Thacaigh na sonraí LC- ESI-MSN le sainaithint trialach do bhuaic 2 marcistanoside A.
Rinneadh turgnaimh LC-ESI-MS freisin le haghaidh buaicphointí
3 agus 4 (tR 12.49 agus 13.46 min i bhFíor 2). Thaispeáin an dá bhuaic mar an gcéanna [MH]— ian ag m/z 623 agus dimer ag m/z 1247 sa mhodh diúltach (Tábla 1), rud a thugann le fios gur féidir gur isiméirí iad a bhfuil an meáchan móilíneach céanna acu.
624, mar an gcéannaaicteóisagus isoacteoside. Thaispeáin speictream MS2 na n-ian [MH]— iníon-ian amháin de m/z 461 freisin, rud a thug le fios gur cailleadh an taise caiféoil ón máthair-ian m/z 623 (Tábla 1). Fuarthas speictream MS3 den chineál céanna don dá chomhdhúil. Maidir le buaic 3, foirmíodh speictream MS3 an iain ag m/z 461 trí ian ag m/z 315, 161, agus 135. Cruthaítear an m/z 315 tar éis an rhamnose a chailliúint mar a pléadh níos luaithe. Táirgeadh an t-ian m/z 161 nuair a scoilttear an caiféile, agus cailleadh uisce amháin eile ina dhiaidh sin; D'fhan an muirear ar thaobh an Chaifiil. D'eascair an t-ian ag m/z 135 [uig-chón 18 H]— as scoilt an naisc glycosidic ag suíomh C1 le caillteanas breise uisce amháin, rud a d'fhág go raibh an lucht ar an gcuid den ghluaiseacht aglycóin. Lean speictream MS3 buaic 4 an chonair ilroinnte chéanna le buaic 3 ach amháin an t-ian a bhí in easnamh ag m/z 135. Tá an t-ian móilíneach agus patrúin scoilte an dá chomhdhúil seo comhsheasmhach le sonraí na litríochta araicteóisagus isoacteoside (Wang et al., 2000), cé go bhfuarthas ian breise m/z 153 agus
arna sannadh mar [aglycone H]— ag Wang et al. (Wang et al., 2000). Seans go raibh an t-ian seo éagobhsaí agus gur chaill sé uisce le m/z 135 a thabhairt inár dturgnamh. Bunaithe ar shonraí na mBallstát agus ar na hamanna coinneála iomchuí de bhuaicphointí 3 agus 4 leis na caighdeáin, sainaithnítear mar sin iad maraicteóisagus isoacteoside, faoi seach.
Taispeántar na sonraí LC-ESI-MS de bhuaic 5 i dTábla 2. Ba é ian móilíneach díphróitínithe [MH]— (m/z 665) an t-aon ian a fuarthas sa mhód diúltach, rud a thugann mais mhóilíneach 666 le tuiscint. breathnaíodh ag m/z 623, 503, agus 461 sa turgnamh MS2 (Tábla 2). Cruthaíodh na hiain iníonacha ag m/z 623 agus 503 go díreach ón máthair-ian trí ghrúpa COCH2 agus cuid caifiil a chailleadh, faoi seach. Tháinig an t-ian ag m/z 461 as cailleadh an chaife agus an COCH2 [M 162 42 H]— ón máthair-ian. Sa turgnamh MS, tháirg m/z 623 m/z 461, agus thug m/z 503 trí ian ag m/z 485, 461, agus 315. Thug speictream MS3 an hiain-ian m/z 461 dhá ian ag 443 agus 315. Trí phatrún ilroinnte LC- MSN bhuaic 5 a chur i gcomparáid le comhdhúile eile a tuairiscíodh sa staidéar seo agus le comhdhúile eile a tuairiscíodh (Li et al., 2005; Wang et al., 2000), tháinig muid ar an gconclúid go raibh an-bhaint ag buaic 5 ó thaobh struchtúir de. go taobh an acteóis agus is é an t-aon difríocht amháin atá ann ná an t-aonad COCH3 ar an suíomh R3. Mar sin tugadh aitheantas trialach do bhuaic 5 mar 20-aicéitilacteoside (Fíor 1).
Dheimhnigh 1H NMR struchtúir an dá chomhdhúil a shainaithnítear go sealadach, buaic 2 (mar chistanosíd A) agus buaic 5 (mar 20-aicéitil-aicéatóis) dá struchtúir. Na haistrithe ceimiceacha agus na tairisigh cúplála de gach prótón i gcomhdhúile 2 agus 5, mar a léirítear i dTábla 3., meaitseáilte leis na sonraí NMR tuairiscithe docistanoside Aagus 20-aicéitilacteoside, faoi seach (Kobayashi et al., 1984, 1987). Rinneadh turgnaimh 2D NMR (comhghaolú fadraoin COSY, ROESY, agus CH) sa staidéar seo freisin agus dheimhnigh siad an t-aitheantas a thuilleadh (níl na sonraí léirithe).
feinileatánóideachgliocóisídí i gcistinche
4. Conclúidí
Sa pháipéar seo, baineadh úsáid rathúil as HSCCC chun aonrú agus íonú echinacoside,cistanoside A, acteoside, isoacteoside, agus 20-aicéitilacteoside ón sliocht n-butanol de C. deserticola. Dá bhrí sin is modh cruthaithe é le haghaidh scaradh leath-ullmhachtach de bhithghníomhach. Idir an dá linn, rinneadh imscrúdú ar struchtúir na gcúig PhG i Cistanche deserticola trí bhíthin LC-ESI-MSN; Fuarthas roinnt gnéithe sainiúla de PhGanna, rud a thug deis dúinn na grúpaí feidhme sna struchtúir a chinneadh. Is uirlis chumhachtach mar sin an modh LC-ESI-MSN chun aithint thapa a dhéanamhfeinileatánóidighagus a n-gliocóisídí iCistanche deserticolasleachta, go háirithe nuair a thugann sonraí NMR bunús leo.
Admháil
Ba mhaith leis na húdair buíochas a ghabháil le Jun Gu ón Ionad Athshondais Mhaighnéadaigh Núicléach, Ollscoil Guelph, Ontario, Ceanada as a cúnamh i dturgnaimh NMR. Fuair an tionscadal seo tacaíocht pháirteach ó mhaoiniú ó Chúige Jilin, an tSín (Uimh. 20060904).
Tagairtí
Chen, LJ, Cluichí, DE, & Jones, J. (2003). Leithlisiú agus sainaithint ceithre chomhábhar flavonoid ó shíolta Oroxylum Indicum trí chrómatagrafaíocht fhrithshrutha ardluais. Iris na Crómatagrafaíochta A, 988, 95–105.
Cheng, XY, Wei, T., Guo, B., Ni, W., & Liu, CZ (2005).Cistanche deserticolacultúir fionraí cille:Feinileatánóideachbithshintéis gliocóisídí agus gníomhaíocht frithocsaídeach. Bithcheimic Próisis, 40, 3119–3124.
Foucault, AP, & Chevolot, L. (1998). Crómatagrafaíocht fhrithshrutha: ionstraimíocht, roghnú tuaslagóirí, agus roinnt feidhmchlár le déanaí ar íonú táirgí nádúrtha. Iris na Crómatagrafaíochta A, 808, 3–22.
Gross, G.-A., Lahloub, MF, Anklin, C., Schulten, H.-R., & Sticher, O. (1988). Teucrioside, gliocóisíd feinilpropanoid ó Teucrium Chamaedrys. Fíteiceimic, 27, 1459–1463.
He, ZD, Lau, KM, Xu, HX, Li, PC, & But, PPH (2000).
Gníomhaíocht frithocsaídeach defeinileatánóideachgliocóisídí ó seans Brandisia. Journal of Ethnopharmacology, 71, 483-486.
Kobayashi, H., Karasawa, H., & Miyase, T. (1984). Staidéir ar chomhábhair Cistanchis Herba. III. Leithlisiú agus struchtúir gliocóisídí nua feinilpropanoid,Cistanoside Aagus B. Feasachán Ceimiceach & Cógaisíochta, 32, 3009–3014.
Kobayashi, H., Oguchi, H., Takizawa, N., Miyase, T., Ueno, A., Usmanghani, K., et al. (1987). Nuafeinileatánóideachgliocóisídí óCistanchetubulosa (Schrenk) Hook. Feasachán Ceimiceach & Cógaisíochta FI, 35, 3309–3314.
Lei, L., Yang, FQ, Zhang, TY, Tu, PF, Wu, LJ, & Ito, Y. (2001).
Leithlisiú ullmhúcháin agus íonúaicteóisagus aicéitilíd 2'-aicéitil ó Cistanches salsa (CA Mey) G. Beck trí chrómatagrafaíocht fhrithshrutha. Iris na Crómatagrafaíochta A, 912, 181–185.
Li, L., Tsao, R., Liu, ZQ, Liu, SY, Yang, R., Óga, JC, et al. (2005). Leithlisiú agus íonúaicteóisagus isoacteoside ó Plantago psyllium L. trí chrómatagrafaíocht fhrithshrutha ardluais. Journal of Chromatography A, 1063, 161–169.
Li, LL, Wang, XW, & Wang, XF (1997). Sárocsaídiú antilipid agus gníomh frithradacach gliocóisídí i gCistanches luibhe. An tSín Journal of Chinese Materia Medica, 22, 364–367.
Li, J., Wang, PF, Zheng, RL, Liu, ZM, & Jia, ZJ (1993). Gliogóisídí feanilpropanoid a chosaint ó Pedicularis i gcoinne hemolysis ocsaídiúcháin in vitro. Planta Medica, 59, 315–317.
Lu, MC (1998). Staidéir ar éifeacht sedative deCistanche deserticola.Journal of Ethnopharmacology, 59, 161–165.
Nishimura, H., Sasaki, H., Inagaki, N., Chin, M., & Mitsuhashi, H. (1991). Naoi gliocóisídí alcóil feinitile ó Stachys szeboldzz. Fíteiceimic, 30, 965–969.
Oka, F., Oka, H., & Ito, Y. (1991). Cuardach córasach do chórais tuaslagóra dhá phas oiriúnach do chromatagrafaíocht fhrithshrutha ardluais. Journal of Chromatography, 538, 99–108.
Ravn, H., Nishibe, S., Sasahara, M., & Li, X. (1990). Comhdhúile feanólacha ó Plantago Asiatica. Fíteiceimic, 29, 3627–3631.
Schapoval, EES, Winter de Vargas, MR, Chaves, CG, Bridi, R., Zuanazzi, JA, & Henriques, AT (1998). Gníomhaíochtaí frith-inflamacha agus frith-ghin-ghiniúna sleachta agus comhdhúile scoite ó Stachytarpheta cayennensis. Journal of Ethnopharmacology, 60, 53-59. Shoyama, Y., Matsumoto, M., & Nishioka, I. (1987). Gliogóisídí feanólacha ó fhréamhacha ghalraithe Rehmannia glutinosa Var. Purpurea. Fíteiceimic, 26, 983–986.
Wang, XW, Jiang, XY, Wu, LY, & Wang, XF (2001). Éifeacht scavening gliocóisídí deCistanche deserticolaar shaorfhréamhacha agus a chosaint ar dhamáiste DNA in vitro de bharr OH. Journal of Chinese Pharmacology, 36, 29–31.
Wang, YM, Zhang, SJ, Luo, GA, Hu, YN, Hu, JP, Liu, L., Zhu,
Y., & Wang, HJ (2000). Anailís arfeinileatánóideachgliocóisídí in eastóscadh luibheanna Cistanchis le LC/ESI-MS/MS. Acta Pharmaceutica Sinica, 35, 839–842.
Wong, C.-C., Li, H.-B., Cheng, K.-W., & Chen, F. (2006). Suirbhé córasach ar ghníomhaíocht frithocsaídeach ar 30 gléasra míochaine Síneach ag baint úsáide as an measúnú cumhachta frithocsaídeach laghdaithe ferric. Ceimic Bhia, 97, 705–711. Xie, JH, & Wu, CF (1993). Éifeacht eastósc eatánólach deCistanche deserticolaar inneachar neurotransmitters monoamine i francach
inchinn. Drugaí Traidisiúnta agus Luibhe na Síne, 24, 417–419.
Xiong, Q., Hase, K., Tezuka, Y., Tani, T., Namba, T., & Kadota, S. (1998). Gníomhaíocht hepatoprotective defeinileatánóidighóCistanche deserticola. Planta Medica, 64, 120–125.
Xiong, QB, Kadota, S., Tani, T., & Namba, T. (1996). Éifeachtaí frithocsaídeacha feinileatánóid óCistanche deserticola. Feasachán Bitheolaíochta & Cógaisíochta, 19, 1580–1585.
Zong, G., He, W., Wu, GL, & Chen, LH (1996). Comparáidí idirCistanche deserticolaYC Ma agusCistanchetubular (Schenk) Wight ar roinnt gníomhaíochtaí cógaseolaíochta. Journal of Traidisiúnta Leigheas na Síne, 21, 436-438.
