Éifeachtaí Dé-mhodúlach Diosmin ar Phróisis Foirmithe Cloiche Duán Cailciam Oxalate: Criostalú, Fás, Comhiomlánú, Greamaitheacht Criostail-chealla, Inmheánú i gCealla Tubular Duánach, Agus Ionradh Trí Mhaitrís Eischeallach

le haghaidh tuilleadh eolais:ali.ma@wecistanche.com

Slán Khamchun^a,b,c,1, Sunisa Yoodee^a,1, Visith Thongboonkerd^a,*

^aAn tAonad Próitéamaíochta Leighis, An Oifig um Thaighde agus Forbairt, Dámh an Leighis Ospidéal Siriraj, Ollscoil Mahidol, Bancác 10700, An Téalainn

^bAn Roinn Teicneolaíochta Míochaine, Scoil na nEolaíochtaí Comhghaolmhara, Ollscoil Phayao, Phayao 56000, An Téalainn

^cAonad Sármhaitheasa i mBithleighis Mhóilíneach Chomhtháite, Scoil na nEolaíochtaí Sláinte Gaolmhara, Ollscoil Phayao, Phayao 56000, An Téalainn

Eochairfhocail: Comhdhúil bithghníomhach, Flavonoid, Inhibitor, Modulator, Nephrolithiasis, Tionscnóir, Urolithiasis

Teibí

DiosminIs glycosíd flavone nádúrtha (bioflavonoid) le fáil i torthaí agus plandaí le roinnt gníomhaíochtaí cógaseolaíochta. Baineadh úsáid go forleathan as mar fhorlíonadh chothaithe nó mar ghníomhaire teiripeach i galair/neamhoird éagsúla. Cé go molta, fianaise ar a meicníochtaí cosanta i gcoinneduánBhí galar cloiche (nephrolithiasis/ urolithiasis), go háirithe ocsaláit chailciam (CaOx) monohydrate (COM) arb é an cineál is coitianta, fós doiléir. Sa staidéar seo, rinneamar measúnú córasach ar éifeachtaídiosmin(ag 2.5–160 nm) ar chéimeanna éagsúla deduánpróisis foirmithe cloiche, lena n-áirítear criostalú COM, fás criostail, comhiomlánú, greamaitheacht criostail-chill, inmheánú i gcealla tubular duánach agus ionradh trí mhaitrís eischeallach (ECM). Léirigh na torthaí godiosminbhí éifeachtaí modhnúcháin ag brath ar dháileog ar na próisis chloiche duán uile atá luaite le COM.Diosminméadú suntasach ar líon agus mais criostail COM le linn criostalaithe, ach laghdaigh méid agus fás criostail. Cé godiosminchuir sé comhiomlánú criostail chun cinn, chuir sé bac ar greamaitheacht criostail-chill agus inmheánú i gcealla feadánacha duánach. Ar deireadh, chuir diosmin ionradh criostail chun cinn tríd an ECM. Cuireann ár gcuid sonraí fianaise ar fáil a thaispeánann éifeachtaí diosmin ar COM a chosc agus a chur chun cinnduánpróisis foirmiú cloiche. Bunaithe ar na gníomhaíochtaí dé-mhodhnúcháin seo de diosmin, tá a ról frith-urolithiasis amhrasach agus ba chóir rabhadh a thabhairt maidir lena úsáid iduángalar cloiche.

1. Réamhrá

Diosmin(3′,5,7-trihidroxy-4′-methoxyflavone-7-rhamnogglucoside-7-rhamnogglucoside) is bithfhlavonoid nádúrtha a fhaightear go coitianta i bplandaí agus i dtorthaí éagsúla, go príomha Citrus spp. [1,2]. Is féidir é a shintéisiú nó a dhíorthaítear ón flavonoid eile, hesperidin [1,2]. Úsáidtear Diosmin ina n-aonar nó i gcomhcheangal le hesperidin go forleathan mar dhruga phlebotropic chun cóireáil a dhéanamh ar neamhoird venous agus lymphatic cosúil le neamhdhóthanacht venous ainsealach agus hemorrhoids [3,4]. Ina theannta sin, taispeánann diosmin roinnt gníomhaíochtaí bitheolaíocha agus cógaseolaíochta eile, lena n-áirítear gníomhaíochtaí frithocsaídeacha agus frith-athlastach [5,6], airíonna frith-só-ghineacha agus frith-neoplastacha [7,8], éifeachtaí antaibheathacha [9], maoin frith-hyperglycemic [1]. 10], agus éifeachtaí cosanta i gcoinne damáistí il-orgán, .i.

cardashoithíoch [11], reitineach [12],duán, gortú ae agus inchinne [13].

Duángalar cloiche (nó nephrolithiasis/urolithiasis) is cúis leis an calculi soladach a forbraíodh agus a thaisceadh laistigh den duán agus cuireann sé isteach ar dhaoine i ngach cearn den domhan le ráta ard atarlaithe [14–17]. I measc na gcriostail cúiseacha éagsúla go léir, is é oxalate cailciam (CaOx), go háirithe foirm monohydrate (COM), an chomhpháirt criostalach is pataigineach agus is coitianta a fhaightear sna foirmithe cloiche (othair le clocha duáin) [18]. Go meicniúil, tá an cumas greamaitheachta is potent ag criostail COM agus an chuid is mó éifeachtaí citotocsaineacha ar chealla epithelial tubular duánach [19,20]. Le linn na pathogenesis cloiche, tá gnéithe coitianta de phróisis fhoirmiú cloiche COM ag múnla plaic Randall agus hipitéis intratubular araon, lena n-áirítear criostalú COM, fás, comhiomlánú, coinneáil trí ghreamaitheacht dromchla ar chealla tubular duánach nó pelvis duánach, inmheánú isteach sna cealla, agus ionradh isteach. interstitium duánach trí mhaitrís extracellular (ECM) [21,22].

Le déanaí, dhírigh go leor staidéar ar fhionnachtain drugaí trí úsáid a bhaint as plandaí/torthaí míochaineacha agus a gcomhdhúile bithghníomhacha a bhfuil sé mar aidhm acu foirmiú cloch nua agus/nó athfhillteach a chosc. Léiríodh i roinnt tuarascálacha roimhe seo go bhfuil éifeachtaí coisctheacha ag roinnt comhdhúile bithghníomhacha, go háirithe comhdhúile feanólacha (polyphenol, flavonoid, flavone glycoside, etc.) a bhaintear as roinnt plandaí/torthaí íocshláinte, ar mheicníochtaí pataigineacha.duángalar cloiche in vitro agus in vivo araon [23–25]. I measc na substaintí tairbhiúla seo, mhol roinnt tuarascálacha go bhféadfadh diosmin cosc ​​​​a chur ar thaisceadh criostail CaOx taobh istigh d'fhíochán duáin i múnlaí ainmhithe [26,27]. Mar sin féin, níor imscrúdaíodh a ról modúlach beacht (cosc nó cur chun cinn) agus meicníochtaí (céimeanna nó próisis foirmithe cloiche) i bhfoirmiú cloch duáin COM. Mar sin rinne an staidéar reatha measúnú córasach ar éifeachtaídiosmin(ag 2.5–160 nm) ar chéimeanna éagsúla deduánpróisis foirmithe cloiche, lena n-áirítear criostalú, fás criostail, comhiomlánú, greamaitheacht criostail-chill, inmheánú i gcealla tubular duánach agus ionradh trí ECM.

Cliceáil chunDosage cistanche tubulosa le haghaidh feidhm duáin

2. Ábhair agus modhanna

2.1. Ullmhúchán Diosmin

Diosmin(Tionscal Ceimiceach Tóiceo; Tóiceo, an tSeapáin) a thuaslagadh le 100 faoin gcéad sulfoxide dimethyl (DMSO) (Sigma-Aldrich; St. Louis, MO) agus rinneadh slánchuidithe oibre ag na tiúchana deiridh de 2.5, 5, 10, 20, 40, 80 agus 160 nM chun a éifeachtaí ar chriostail COM a imscrúdú. Ina theannta sin, baineadh úsáid as 100 faoin gcéad DMSO mar an rialú diúltach i ngach turgnaimh.

2.2. Cultúr cille

Iomadaíodh líne cille epithelial tubular duánach MDCK a dhíorthaítear ó deighleog tubular distal den nephron (ATCC; Manassas, VA) i meán riachtanach íosta Eagle (MEM) (Gibco; Grand Island, NY) arna fhorlíonadh le serum bó féatais 10 faoin gcéad (FBS), 60 U/ml peinicillin G (Sigma-Aldrich) agus 60 ug/ml streiptimícin (Sigma-Aldrich). Coinníodh na cealla i gorlann taisithe le 5 faoin gcéad CO2 ag 37 ◦C.

2.3. Measúnacht criostalaithe COM

Rinneadh criostalú COM mar a thuairiscítear roimhe seo [28,29]. Go hachomair, cuireadh 500 ul de 10 mM CaCl2⋅2H2O i maolán criostalaithe (ina bhfuil 10 mM Tris-HCl agus 90 mM NaCl) (pH 7.4) isteach i ngach tobar den 24-pláta tobair (Corning Inc.; Corning, NY). Toirt comhionann (4 ul) maolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nódiosmin(2.5, 5, 10, 20, 40, 80 nó 160 nM) measctha le CaCl2. Ar deireadh, cuireadh 500 ul de 1.0 mM Na2C2O4 sa mhaolán criostalaithe ansin chun na tiúchain deiridh de CaCl2 agus Na2C2O4 a dhéanamh go 5 mM agus 0.5 mM, faoi seach. Goradh an meascán ag 25 ◦C ar feadh 1 h agus ansin scrúdaíodh é. Gabhadh íomhánna criostail go randamach ó ar a laghad 15 réimse ardchumhachta (HPFanna) faoi mhicreascóp solais codarsnachta pas-chodarsnachta Nikon Eclipse Ti-S (Nikon; Tóiceo, an tSeapáin). Tomhaiseadh méid agus líon criostail ó 15 HPF ar a laghad do gach sampla ag baint úsáide as leagan bogearraí NIS Eilimint D 4.11 (Nikon). Ríomhadh mais chriostail ó 100 criostail ar a laghad i 15 HPF ag baint úsáide as an bhfoirmle seo a leanas: Mais chriostail (µm2/HPF)=Meánmhéid criostail i ngach réimse (µm2) × Líon na criostail i ngach réimse (/HPF) ( 1)

2.4. Measúnacht fáis criostail COM

Rinneadh measúnú fáis criostail mar a thuairiscítear roimhe seo [30,31].

Go hachomair, meascadh toirt chomhionann (500 ul) de 10 mM CaCl2⋅2H2O agus 1.0 mM Na2C2O4 i maolán criostalaithe (1:1) (v/v) i ngach tobar de na { {12}}pláta tobair. Goradh an meascán ag 25 ◦C ar feadh 1 h chun criostalú iomlán a cheadú. Ag an bpointe seo (T0), méid comhionann (4 ul) maolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nódiosmin(2.5, 5, 1{{1{0}}, 20, 40, 80 nó 160 nM) isteach i ngach tobar agus goradh an meascán arís ar feadh 60 nóiméad (T60). Ag T0 agus T60, gabhadh íomhánna criostail go randamach ó 15 HPF ar a laghad faoi mhicreascóp solais codarsnachta céime inbhéartaithe Nikon Eclipse Ti-S. Tomhaiseadh méideanna criostail ag T0 agus T60 ag baint úsáide as bogearraí NIS Element D leagan 4.11 (Nikon), ach ríomhadh fás criostail (arna léiriú ag Δ méid Crystal) ó 100 criostail ar a laghad i 15 HPF ag baint úsáide as an bhfoirmle seo a leanas: Δ Méid criostail (µm2)=Méid criostal ag T60 − Méid criostal ag T0 (2)

2.5. Measúnacht comhiomlánaithe criostail COM

Rinneadh measúnú comhiomlánaithe criostail mar a thuairiscítear roimhe seo [32,33]. Gineadh criostail COM mar a luadh thuas sa mheasúnacht fáis criostail ach le toirt níos mó i 50-ml feadán cónúil (Corning Inc.) agus ansin bainte trí lártheifneoiriú ag 2000 g ar feadh 5 nóiméad. Caitheadh ​​an t-suthach, agus niteadh criostail COM trí huaire le meatánól. Tar éis lártheifneoiriú eile ag 2000 g ar feadh 5 nóiméad, caitheadh ​​amach meatánól agus triomaíodh na criostail thar oíche ag 25 ◦C. Athchóiríodh criostail COM (meáchan tirim 1000 µg) i 1 ml de mhaolán criostalaithe i ngach tobar den 6-pláta tobair (Corning Inc.). Toirt comhionann (4 ul) maolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nódiosmin(2.5, 5, 10, 20, 40, 80 nó 160 nM) isteach sa fhionraí criostail COM i ngach tobar. Croitheadh ​​an pláta go leanúnach i gorlann chroitheadh ​​​​(Zhicheng; Shanghai, China) ag 150 rpm agus 25 ◦C ar feadh 1 h. Ina dhiaidh sin, rinneadh scrúdú agus íomháú ar fhoirmiú comhiomlán criostail COM (arna shainmhíniú mar "tionól de thrí chriostail COM aonair nó níos mó a cheangail go dlúth le chéile" [32]) faoi mhicreascóp solais codarsnachta céime inbhéartaithe Nikon Eclipse Ti-S. Áiríodh líon na gcomhiomlán criostail COM ó 15 HPF randamach ar a laghad in aghaidh an tobair.

2.6. Measúnacht greamaitheachta criostail-chill COM

Rinneadh measúnú greamaitheachta criostail-chill mar a thuairiscítear roimhe seo [34,35]. Go hachomair, gineadh criostail COM mar a luadh thuas i bhfeadán cónúil 50-ml agus ansin baineadh iad trí lártheifneoiriú ag 2000 g ar feadh 5 nóiméad. Caitheadh ​​an t-suthach, agus niteadh criostail COM trí huaire le meatánól. Tar éis lártheifneoiriú eile ag 2000 g ar feadh 5 nóiméad, caitheadh ​​amach meatánól agus triomaíodh na criostail thar oíche ag 25 ◦C. Rinneadh na criostail a dhí-éilliú le radaíocht solais UV ar feadh 30 nóiméad roimh idirghabháil leis na cealla.

Cuireadh cealla MDCK (ar dhlús 2 × 105 cill/tobar) le síolú agus fásadh i ngach tobar den 6-pláta tobair (Corning Inc.) ar feadh 48 u chun monashraith chomhlifeach a fháil. Rinneadh an meán cultúir a athnuachan ansin sular cuireadh criostail COM (100 µg criostail meáchain tirim in aghaidh an mheáin cultúir ml). Toirt comhionann (4 ul) maolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nódiosmin(2.5, 5, 10, 20, 40, 80 nó 160 nm) isteach i ngach tobar. Goraíodh na cealla tuilleadh i gorlann taisithe le 5 faoin gcéad CO2 ag 37 ◦C ar feadh 1 h. Ina dhiaidh sin, nite na cealla go bríomhar le PBS cúig huaire agus íomháíodh iad faoi mhicreascóp solais codarsnachta céime inbhéartaithe Nikon Eclipse Ti-S. Rinneadh líon na gcriostal COM a bhí fágtha a cloíodh ar dhromchla cille feadánacha duánach a chomhaireamh ó 15 réimse randamacha ar a laghad in aghaidh an tobair.

Cistanche le haghaidh feidhm duáin

2.7. Measúnacht inmheánaithe criostail COM

Gineadh na criostail COM atá lipéadaithe ar fhluaraiseacht mar a thuairiscítear roimhe seo [36,37]. Bhí comhdhéanamh/tiúchan ceimiceán a úsáideadh le haghaidh criostalú mar an gcéanna agus a luadh thuas do na criostail shimplí (neamhlipéadaithe), ach bhí 0.1 µg/ml fluorescein isothiocyanate (FITC) (Thermo Scientific Pierce; Rockford, IL) ann curtha le tuaslagán CaCl2⋅2H2O sula measctar é le Na2C2O4. Rinneadh na céimeanna ina dhiaidh sin (criostailiú agus fómhar) mar a luadh thuas, ach sa dorchadas.

Chun inmheánú criostail a mheas i gcealla epithelial tubular duánach, cuireadh cealla MDCK (ag dlús 2 × 105 cealla / tobar) síol agus fásadh i ngach tobar den 6-pláta tobair (Corning Inc.) ar feadh 48 h. monolayer comhlíonta. Goradh an mhonachiseal cille le criostail COM lipéadaithe FITC (1000 µg meán criostail/ml) i gorlann humidithe le 5 faoin gcéad CO2 ag 37 ◦C ar feadh 1 h. Ina dhiaidh sin, nite na cealla le PBS agus gortha le réiteach trypsin-EDTA chun deireadh a chur le criostail neamh-inmheánach (idir ghreamaitheacha agus neamhchloí). Rinneadh céatadán na gcealla le criostail inmheánaithe a chainníochtú ó iomlán de 10,000 teagmhais a fuarthas ag baint úsáide as cíteaiméadar sreafa (BD Accuri C6) (BD Biosciences; San Jose, CA). Baineadh úsáid as na cealla a raibh criostail COM simplí (neamhlipéadaithe) orthu chun an torann agus an tairseach don chomhartha fluaraiseachta dearfach a réamhshocrú. Rinneadh na cealla le comharthaí fluaraiseachta deimhneacha a chomhaireamh ansin agus úsáideadh iad chun céatadán den sórt sin a ríomh.

2.8. Ionradh criostail COM trí mheasúnú ECM

Ullmhaíodh criostail COM mar a thuairiscítear thuas le haghaidh comhiomlánú criostail agus measúnachtaí greamaitheachta criostail-chealla. Rinneadh measúnacht ionraidh criostail de réir prótacail a bunaíodh roimhe seo [38,39]. Go hachomair, iomlán de chriostail 20 µg COM atá brataithe le maolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach), albaimin (Sigma-Aldrich) (rialú dearfach) nódiosmin(2.5, 5, 1{{1{0}}, 20, 40, 80 nó 160 nM) isteach i 200 ul MEM. Ina dhiaidh sin, rinneadh 200 ul de 0.3 pm Lys-plasminogen (Fitzgerald Industries International; Acton, MA) i PBS a mheascadh agus a ghoradh leis an gcoimpléasc criostail-próitéin ag 37 ◦C ar feadh 1 h. Caitheadh ​​an plasminogen neamhcheangailte trí lártheifneoiriú ag 2000 g ar feadh 5 nóiméad agus nite an millíní le PBS uair amháin. Ina dhiaidh sin, rinneadh 100 ul de 0.15 pm gníomhachtaithe plasminogen urokinase (uPA) (Fitzgerald Industries International) i PBS a mheascadh leis an gcoimpléasc criostail-próitéin-plasminogen/plasmin. Cuireadh an meascán ansin ar bharr an fhoirmiú maitrís laistigh den seomra imirce ECM agus gor ag 37 ◦C. Tar éis 24-h goir, baineadh an tuaslagán a bhí fágtha ar an gcuid uachtarach den seomra imirce trí úsáid a bhaint as uige nó páipéar fíocháin. Rinneadh na criostail COM ionradh taobh istigh den fhoirmiú maitrís a íomháú ansin ag baint úsáide as micreascóp solais le modh codarsnachta trasnaíochta difreálach (DIC) (Nikon H600L). Rinneadh an t-achar ionraidh criostail a thomhas agus a mheánú ó 15 réimse ísealchumhachta (LPFanna) ar a laghad laistigh den seomra céanna ag baint úsáide as leagan bogearraí NIS Element D 4.11 (Nikon).

2.9. Anailís staitistiúil

Rinneadh na turgnaimh thuas go léir i dtrí thurgnamh (trí thurgnamh neamhspleácha) agus tuairiscítear na sonraí cainníochtúla mar mheán ± SEM. Rinneadh comparáidí iolracha trí úsáid a bhaint as anailís aontreo ar athraithis (ANOVA) le tástáil iar-hoc Tukey. Rinneadh tástáil chomhghaolaithe Pearson chun an gaol idir athróga a chinneadh. Rinneadh gach anailís staitistiúil trí úsáid a bhaint as bogearraí SPSS (leagan 18) (IBM SPSS; Armonk, NY). Measadh go raibh luach P níos lú ná 0.05 suntasach go staitistiúil.

3. Torthaí

3.1. Éifeacht diosmin ar chriostalú COM

Tá criostalú ar cheann de na céimeanna tosaigh riachtanacha deduánpróisis foirmiú cloiche de gach cineál. Tar éis criostalaithe 1-h le nó gandiosminag comhchruinnithe éagsúla (2.5, 5, 10, 20, 40, 80 nó 160 nM), tomhaiseadh méid agus líon criostail COM agus ríomhadh mais criostail. D'fheidhmigh maolán criostalaithe agus an DMSO caolaithe mar na rialuithe bána agus diúltacha, faoi seach. Léirigh na sonraí go léir dáileoga (2.5-160 nm) de disomin laghdú suntasach ar an méid criostail ach méadú ar líon na criostail ar bhealach dáileog-spleách i gcomparáid le bán agus rialuithe diúltacha ( Fíor. 1 A - 1 C ). I gcomhréir leis an uimhir chriostail, mhéadaigh mais criostail dáileog-spleách (Fíor 1D). Tríd is tríd, léiríonn na sonraí seo go gcuireann diosmin criostalú COM (neocrystals) chun cinn.

3.2. Éifeacht diosmin ar fhás criostail COM

Éifeacht modhnaitheach nadiosminRinneadh measúnú ar fhás criostail COM trí athrú ar mhéid criostail a thomhas (Δ méid criostal) tar éis 60-nóiméad breise goir tar éis an chéim criostalaithe tosaigh a chríochnú, nuair a bhí neocriostail as láthair. Léirigh na torthaí gur laghdaigh gach dáileog (2.5-160nM) de disomin go suntasach Δ méid Crystal ar bhealach dáileog-spleách i gcomparáid leis na rialuithe bána agus diúltacha (Fíor 2). Léiríonn na torthaí seo go gcuireann diosmin bac ar fhás criostail COM.

3.3. Éifeacht diosmin ar chomhiomlánú criostail COM

Chomh maith le fás criostail, is céim thábhachtach eile é comhiomlánú criostail aonair a chloíonn go docht le chéileduánpathogenesis cloiche. D'fhéadfadh méadú cloiche agus bac a chur ar lumen tubular beag duánach mar thoradh ar an leibhéal ard comhiomlánaithe criostail. Comparáid a dhéanamh le rialuithe bána agus diúltacha,diosminag 10-160nM dáileog-spleách méadú ar líon na gcomhiomlán criostail COM (Fig. 3). Léiríonn na torthaí seo go gcuireann diosmin comhiomlánú criostail COM chun cinn.

Cistanche le haghaidh feidhm duáin

3.4. Éifeacht diosmin ar greamaitheacht COM criostal-chealla

Tá coinneáil na gcriostal cúiseach ar cheann de na céimeanna ríthábhachtacha le haghaidhduánfoirmiú cloiche agus is féidir é a tharlú le greamaitheacht criostail-chill a chuireann cosc ​​ar na criostail a dhíbirt mar aon leis an eis-sreabhadh fuail. Mar sin rinneamar measúnú ar ghníomhaíocht mhodhnúcháin nadiosminar greamaitheacht criostail-chill COM. Léirigh na sonraí gur laghdaigh diosmin ag 5-160nM go suntasach cumas greamaitheacha criostail COM ar chealla tubular duánach ar bhealach dáileog-spleách i gcomparáid le rialuithe bána agus diúltacha ( Fíor. 4 ). Léiríonn na sonraí seo go gcuireann diosmin bac ar greamaitheacht COM criostalach.

3.5. Éifeacht diosmin ar inmheánú criostail COM isteach i gcealla tubular duánach

Tar éis greamaitheacht, is féidir roinnt criostail COM a inmheánú isteach sna cealla tubular duánach agus is cúis le roinnt freagraí ceallacha ina dhiaidh sin [37,40]. Rinneadh measúnú ar inmheánú criostail trí úsáid a bhaint as criostail COM lipéadaithe FITC agus é a chainníochtú de réir cíteiméadracht sreafa. Baineadh úsáid as criostail COM plain (gan lipéadú) chun torann teicniúil a dhealú agus chun a chinntiú go raibh an déine fluaraiseachta ó chomhartha FITC. I gcomparáid le rialuithe bána agus diúltacha, tháinig laghdú suntasach ar chéatadán na gcealla le criostail inmheánaithediosminag 10-160nM ar bhealach dáileog-spleách (Fig. 5). Léiríonn na torthaí go gcuireann disomin bac ar inmheánú criostail COM isteach i gcealla tubular duánach.

3.6. Éifeacht diosmin ar ionradh criostail COM trí ECM

Is próiseas pataigineach/millteach é ionradh criostail trí ECM lena linnduánpataigineas cloiche a d'fhéadfadh freagairtí agus cascáidí athlastacha éagsúla a spreagadh, rud a théann in olcas ar mheicníochtaí an ghalair. Scrúdaigh muid an feiniméan seo trí úsáid a bhaint as prótacal bunaithe bunaithe ar ghníomhaíocht plasminogen-plasmin den choimpléasc criostail-próitéin [38,39]. Léirigh na torthaí gur chuir gach dáileog de disomin (2.5-160nM) go mór le hionradh criostail COM tríd an ECM ar bhealach dáileog-spleách (Fíor 6). Suimiúil,diosminag 160nM d'fhéadfadh an t-ionradh criostail COM a chur chun cinn atá inchomparáide le halbaimin, arb é an tionscnóir cumhachtach aitheanta d'ionradh criostail COM [41] (Fíor 6). Léiríonn na torthaí seo go gcuireann diosmin go láidir chun cinn ionradh criostail COM tríd an ECM.

Fíor 1. Éifeachtdiosminar criostalú COM. Rinneadh measúnacht criostalaithe le toirt comhionann (4ul) de mhaolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nó diosmin (2.5-160nM). (A): Moirfeolaíocht chriostail i ngach coinníoll tar éis criostalaithe 1-h. Ba é 400 × an formhéadú bunaidh do na painéil go léir. (B): Méid criostail. (C): Uimhir chriostail. (D): Rinneadh anailís ar mhais chriostail (féach Foirmle 1 in "Ábhair agus Modhanna") ó 100 criostail ar a laghad i 15 HPF. Léiríonn gach barra meán ±SEM de na sonraí a fuarthas ó 3 thurgnamh neamhspleácha. *=lch< 0.05="" vs.="" blank="" control;="" #="">< 0.05="" vs.="" dmso.="">

Fíor 2. Éifeachtdiosminar fhás criostail COM. Rinneadh measúnacht fáis criostail tar éis don chriostalú a bheith críochnaithe (chun neocrystallization a chosc) le toirt comhionann (4ul) de mhaolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nó diosmin (2.5–160nM). (A): Moirfeolaíocht chriostail i ngach riocht ag T0 agus T60. Ba é 400 × an bunmhéadú do gach painéal. (B)-(J): Histeagraim de mhéideanna criostail arna dtomhas ó chriostail aonair ag T0 agus T60 i ngach grúpa. (K): Δ Rinneadh anailís ar mhéid criostail (féach Foirmle 2 i "Ábhair agus Modhanna") ó chriostail 100 ar a laghad i 15 HPF. Léiríonn gach barra meán ± SEM de na sonraí a fuarthas ó 3 thurgnamh neamhspleách. *= p < 0.05="" vs.="" rialú="" bán;="" #="p">< 0.05="" vs.="">

Fíor 3. Éifeachtdiosminar chomhiomlánú criostail COM. Rinneadh measúnacht chomhiomlánaithe criostail le toirt comhionann (4ul) de mhaolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nó diosmin (2.5-160nM). (A): Micreagraif de na criostail COM comhiomlán (lipéadaithe le ciorcail poncaithe). Ba é 400 × an formhéadú bunaidh do na painéil ar fad. (B): Áiríodh líon na gcomhiomlán criostail ó 15 HPF randamach ar a laghad i ngach tobar. Léiríonn gach barra meán ± SEM de na sonraí a fuarthas ó 3 thurgnamh neamhspleách. *=lch< 0.05="" vs.="" blank="" control;="" #="p" <="" 0.05="" vs.="" dmso.="">

Fíor 4. Éifeachtdiosminar greamaitheacht criostail-chill COM. Rinneadh measúnú ar ghreamaitheacht chriostail-chealla le toirt comhionann (4ul) de mhaolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nó diosmin (2.5–160nM). (A): Micreagraif de na criostail atá fágtha a chloígh go docht ar an monashraith cille tar éis na criostail neamhcheangailte a bhaint trí nite bríomhar le PBS. Ba é 200 × an formhéadú bunaidh do na painéil go léir. (B): Áiríodh líon na gcriostal greamaithe ó 15 réimse randamacha ar a laghad i ngach tobar. Léiríonn gach barra meán ±SEM de na sonraí a fuarthas ó 3 thurgnamh neamhspleácha. *= lch<0.05 vs.="" blank="" control;="" #="p"><0.05 vs.="">

Fíor 5. Éifeachtdiosminar inmheánú criostail COM isteach i gcealla feadánacha duánach. Rinneadh measúnacht inmheánaithe criostal ag baint úsáide as criostail COM lipéadaithe FITC (FITC-COM), ach baineadh úsáid as na criostail COM (neamhlipéadaithe) simplí le haghaidh dealú cúlra/torainn. Rinneadh an mheasúnacht le toirt comhionann (4ul) de mhaolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach) nó diosmin (2.5–16{0nM). (A): Sreabhadh anailís ponc-plota citoiméadrach ar mhéid (y-ais) agus déine fluaraiseachta FITC (x-ais) de na cealla tar éis criostail neamh-inmheánaithe a bhaint le 0.1 faoin gcéad trypsin / 2.5mM EDTA. (B): Céatadán na gceall le criostail COM inmheánaithe lipéadaithe FITC. Léiríonn gach barra meán ± SEM de na sonraí a fuarthas ó 3 thurgnamh neamhspleách. *= lch<0.05 vs.="" fitc-com="" +="" blank="" control;="" #="">< 0.05="" vs.="" fitc-com="" +="" dmso.="">

Fíor 6. Éifeachtdiosminar ionradh criostail COM tríd an ECM. Rinneadh ionradh criostail trí mheasúnú ECM ag baint úsáide as criostail COM atá brataithe le maolán criostalaithe (rialú bán), DMSO (rialú diúltach), albaimin (rialú dearfach) nó diosmin (2.5-160nM). (A): Tháinig micreagraif de na criostail COM isteach nó chuaigh siad ar imirce tríd an seomra imirce ECM. Ba é 100 × an formhéadú bunaidh do na painéil go léir. (B): Tomhaiseadh fad ionraidh criostal ó 15 LPF randamach ar a laghad i ngach seomra. Léiríonn gach barra meán ±SEM de na sonraí a fuarthas ó 3 thurgnamh neamhspleácha. *= lch<0.05 vs.="" blank="" control;="" #="p" <="" 0.05="" vs.="">

4. Plé

Tá galar cloiche duáin de bharr foirmiú calculi taobh istigh denduánagus córas pelvocalyceal. I measc na bpróiseas foirmithe cloiche duáin coitianta tá criostalú COM, fás, comhiomlánú, coinneáil trí ghreamaitheacht criostail-chill, agus ionradh tríd an interstitium duánach saibhir le ECM [21,22]. Tá roinnt iarrachtaí chun an galar seo a chosc trí úsáid a bhaint as cógais éagsúla agus/nó forlíontaí cothaitheacha. Thuairiscigh go leor línte fianaise le déanaí go bhféadfadh éifeachtaí coisctheacha a bheith ag flavonoids, gliocóisídí flavóin agus comhdhúile eile a bhaintear as torthaí citris ar ghalar cloiche duáin agus neamhoird eile [23-25]. Ina measc seo,diosmin, díorthach glycosíde flavone nádúrtha agus hesperidin a fhaightear go príomha i dtorthaí citris [1,2], chun ról coisctheach a imirt i gcoinne díobhála agus damáisteduánfíochán [13,42]. Thairis sin, tuairiscíodh a ról frith-urolithiasis i roinnt staidéar roimhe seo ag baint úsáide as samhlacha ainmhithe [26,27]. Mar sin féin, d'fhan éifeachtaí tairbhiúla agus meicníochtaí bunúsacha diosmin maidir le clocha duáin a chosc soineanta. Mar sin rinneamar scrúdú ar ghníomhaíocht mhodhnaíoch diosmin ar chriostail COM. Rinneadh na hanailísí córasacha ar chéimeanna éagsúla de COMduánfoirmiú cloiche, lena n-áirítear criostalú, fás criostail, comhiomlánú, greamaitheacht criostail-chill, inmheánú i gcealla tubular duánach agus ionradh trí ECM.

Tar éis iontógáil ó bhéal dediosmin, tá a leibhéal plasma i ndaoine sa raon ó {{0}}.5 go 200ng/ml (nó 0.8–300nM) [43,44]. Tá an tiúchan plasma uasta (Cmax) thart ar 50ng/ml (nó 85nM) [43,44]. Mar sin, bhí na dáileoga diosmin a úsáideadh inár staidéar faoi láthair (2.5-160nM) sa raon ábhartha ó thaobh cógaseolaíochta de dá chógaschinéitic. Toisc gur úsáideadh DMSO mar chaolaitheoir chun diosmin a thuaslagadh go hiomlán de réir an mholta, úsáideadh DMSO mar an rialú diúltach sa staidéar seo chomh maith leis an rialú bán chun a chinntiú nach raibh aon éifeachtaí ón gcaolaitheoir féin a d’fhéadfadh cur isteach ar léirmhíniú na sonraí. I ngach measúnacht, léirigh na sonraí nach raibh aon éifeachtaí suntasacha ó DMSO a breathnaíodh agus bhí na sonraí cainníochtúla go léir a fuarthas ón rialú diúltach inchomparáide leo siúd a bhain leis an rialú bán.

Léirigh measúnacht criostalaithe COIM go bhfuil gach tiúchan dediosmin(2.5, 5, 10, 20, 40, 80 agus 160nM) d'fhéadfadh laghdú ar mhéid criostail COM ach, ar an láimh eile, mhéadaigh líon na criostail. Toisc gurb é mais criostail an táirge deiridh de mhéid agus uimhir chriostail araon agus go bhfuil sé níos ábhartha chun an méid criostalaithe COM a léiriú, rinneamar measúnú ansin an raibh tionchar ag diosmin ar an innéacs criostail seo. Léirigh na sonraí go raibh an éifeacht chur chun cinn ag gach tiúchan diosmin ar mhais criostail COM, ag teacht leis na sonraí ar líon criostail. Tar éis criostalú, is féidir le criostail COM fás breise go dtí an méid níos mó don chéad chéim eile deduánfoirmiú cloiche.

I gcodarsnacht le criostalú, léirigh diosmin ag gach tiúchan an éifeacht coisctheach ar fhás criostail COM ar an modh dáileog-spleách. Thuairiscigh roinnt staidéir roimhe seo gur féidir tuaslagthacht criostail CaOx a mhéadú trí dhíorthaigh hidroxyanthraquinones le glycosylation [45]. Ina theannta sin, is féidir le láithreacht siúcraí i gcomhdhúile bithghníomhacha den sórt sin ceangal le hian cailciam saor in aisce b'fhéidir mar gheall ar na grúpaí hiodrocsaile sa struchtúr móilíneach, rud a chuireann bac ar fhoirmiú criostail CaOx [45,46]. D’fhéadfadh tionchar a bheith ag Diosmin freisin ar aistriú na n-ian intuaslagtha cailciam agus oxalate isteach sna cáithníní criostalach COM i sreabhán tubular duánach sa phróiseas criostalaithe COM bunaithe ar an meicníocht seo.

Mar sin féin, chuir 10-160nM comhiomlánú criostail COM chun cinndiosmin, ag cur le cumas diosmin gníomhú mar nascóir nó móilín greamaitheacha chun criostail aonair a earcú chun ceangal le chéile chun na comhiomláin criostail a fhoirmiú. Mar thoradh ar an gceangal seo freisin go dtiocfaidh droichid ghreamaitheacha ar aghaidh i measc criostail aonair agus féadann sé foirmiú struchtúr mór criostail COM a aslú, rud a chuireann go héasca le sil-leagan cloch nidus taobh istigh den.duán[32].

Tá coinneáil criostail COM trí ghreamú criostail ar dhromchlaí cille tubular duánach bunaithe mar chéim thábhachtach eile maidir le foirmiú clocha duáin [47]. Nocht ár sonraí go bhféadfadh diosmin an cumas greamaitheacha de chriostail COM a laghdú chun ceangal le dromchlaí apical de chealla tubular duánach MDCK. Léirigh roinnt staidéir roimhe seo gur féidir le glycosaminoglycans (comhdhúile polaisiúicríde) atá brataithe ar chriostail CaOx nó a chuirtear in iúl ar chealla tubular duánach cur isteach ar chumas greamaitheacha criostail CaOx ar chealla tubular duánach [48]. Ina theannta sin, tá léiriú gabhdóirí criostail ar chealla tubular duánach ar cheann de na meicníochtaí ríthábhachtacha a chinneann greamaitheacht criostail-chill [21]. Cé go n-eascraíonn criostail CaOx gortú seicní apical, go háirithe microvilli, is féidir le roinnt polyphenols mar epigallocatechin gallate (EGCG) cosc ​​a chur ar greamaitheacht criostail-chill agus díobháil cheallacha [49]. Thairis sin, tuairiscíodh roimhe seo go n-ardóidh substaint flavonoid i sleachta plandaí éagsúla leibhéal pH urinary, rud a fhágann go gcuirtear bac ar greamaitheacht criostail-chill [50,51]. B'fhéidir,diosmind'fhéadfadh an díobháil cheallach sin a tharlódh ó COM a mhaolú freisin, rud a laghdódh greamaitheacht criostail-chealla.

Tá sé léirithe go bhfuil inmheánú criostail COM le feiceáil go príomha trí endocytosis trí chonair macropinocytosis idirghabhálaithe actin cíteascóp [40]. Tuairiscíodh go bhfuil tionchar ag flavonoids cosúil le quercetin ar chitoskeleton actin a theastaíonn le haghaidh macropinocytosis [52,53]. Léirigh ár dtorthaí gur laghdaigh diosmin go suntasach cumas cealla MDCK chun criostail COM a inmheánú. D'fhéadfadh éifeacht coisctheach den sórt sin de diosmin a bheith bainteach le cóimeáil nó eagrú cíteascóp actin taobh istigh de na cealla a théann i bhfeidhm go díreach ar an gcosán macropinocytosis [54,55].

Tar éis inmheánú, díghrádaíodh na criostail COM ag endolysosomes a d'eascair méaduithe ar iain chailciam agus oxalate saor in aisce san interstitium duánach [37]. Is féidir le méaduithe den sórt sin ar iain chailciam agus oxalate a bheith mar thoradh ar neocrystallization COM sa interstitium duánach [56,57]. Ina theannta sin, d'fhéadfadh láithreacht criostail COM interstitial a bheith ó lochtanna acomhal daingean agus bacainní greamaitheacht paracellular, a eascraíonn i méadú ar thréscaoilteacht paracellular agus traslonnú criostail [58-60]. Is féidir leis na criostail seo ansin an interstitium duánach a ionradh tríd an ECM agus ina dhiaidh sin spreagann siad roinnt freagairt athlastacha agus damáiste fíocháin [58-60]. Sa staidéar seo, thugamar faoi deara gur tharla ionradh na gcriostail COM tríd an seomra imirce ECM de bharr gach tiúchan diosmin. D'fhéadfadh Diosmin ceangal a dhéanamh leis na dromchlaí criostail COM agus d'idirghníomhaigh sé le córas plasminogen-plasmin a spreag an imirce criostail sa seomra imirce ECM [38,39].

Ciste do na duáin

Mardiosmintar éis éifeachtaí a chosc agus a chur chun cinn ar phróisis éagsúla foirmithe cloiche COM, chinneamar mar sin a ngaol ag baint úsáide as tástáil chomhghaolaithe Pearson. Léirigh an anailís comhghaolaithe go raibh comhghaolú contrártha ag uimhir chriostail le méid criostail agus fás criostail (Δ méid Crystal) (Fíor 7A agus B). Bhí comhghaolú láidir idir méid criostal agus fás criostail (Fíor 7C) ach comhghaolú contrártha le mais chriostail (Fíor 7D). Ar deireadh, bhí comhghaol láidir idir mais chriostail agus uimhir chriostail agus comhiomlánú criostail (Fíor 7E agus F). Ón anailís chomhghaolaithe, léiríonn na sonraí go bhfuil líon criostail agus mais criostail níos ábhartha chun criostalú a léiriú ná méid criostail (Fíor 7A, D agus E). Ina theannta sin, tá baint ag méid na neocrystals le linn criostalaithe le fás na gcriostal réamhfhoirmithe (Fíor 7C), ach tá dlúthbhaint ag leibhéal criostalaithe (mar a léirítear le líon criostail agus mais chriostail) leis an méid comhiomlánaithe criostail (Fíor 7E agus F). Mar sin féin, is dóichí go mbaineann na comhghaolta seo go sonrach leis na héifeachtaí diosmin, ach d'fhéadfadh na comhghaolta céanna a bheith ag éifeachtaí ó mhodhnóirí eile nó nach mbeadh. Mar shampla, laghdaíonn fibronectin mais criostail agus cuireann sé bac ar fhás criostail, ach cuireann sé comhiomlánú criostail chun cinn [31]. Ina theannta sin, méadaíonn Escherichia coli slán inmharthana méid criostail agus mais ach níl aon éifeachtaí aige ar líon criostail [33]. Tugann na sonraí seo le fios nach bhfuil na comhghaolta i measc measúnachtaí criostail éagsúla COM uilíoch do gach modúlóir.

Ar deireadh, tá achoimre déanta againn ar na torthaí a fuarthas ó thástálacha éagsúla agus rinneamar iad a chomhtháthú le meicníochtaí pataigineacha deduángalar cloiche (féach schematics i bhFíor 8). Ón anailís comhghaoil, cuireann diosmin criostalú chun cinn (Fíor 8A). Idir criostalú agus fás criostail,diosmincoinníonn sé cothromaíocht mhaith trí chriostalú a chur chun cinn ach, ar an láimh eile, cuireann sé bac ar fhás criostail (Fíor 8B). Maidir leis na héifeachtaí go léir ar chriostail COM amháin (gan breithniú a dhéanamh ar chealla agus ECM a dhéanann idirghabháil freisin), tá gníomhaíocht spreagtha diosmin níos suntasaí ná a ghníomhaíocht choiscthe ar chriostail COM mar go gcuireann sé criostalú agus comhiomlánú criostail chun cinn, ach ní chuireann sé bac ar fhás criostail amháin ( Fíor 8C). Cé go n-ardaíonn criostalú, laghdaítear an méid criostail agus baineann sé leis an gcosc ar fhás (Fíor 7C). Tá na sonraí seo comhsheasmhach leis na torthaí a thuairiscigh Kavanagh et al. [61-63], rud a léiríonn go dtagann meath ar fhorsháithiú na n-ian cailciam agus oxalate sa tuaslagán de bharr méadú criostalaithe, rud a laghdaíonn an fás. Mar sin féin, ní hé fás criostail an t-aon fhachtóir a chinneann anduánpathogenesis cloiche [64], go háirithe nuair a sháraíonn an mais criostail agus go bhfuil baint aige le méadú ar chomhiomlánú criostail (Fíor 7F) a d'fhéadfadh an seans go dtiocfaidh ábhair chriostail i bhfostú i gcodanna feadánacha beaga (sa hipitéis intratubular), rud a mhéadaíonn. seans foirmiú cloiche. Thairis sin, léirigh staidéar roimhe seo go bhfuil na sonraí comhsheasmhach lenár dtorthaí, rud a léiríonn go bhfuil baint ag an méadú ar líon na gcriostal le méadú ar chomhiomlánú criostail agus ar mhéadú cloiche [63].

Fíor 7. Anailís comhghaoil. (A) – (F): Rinneadh anailís ar chomhghaolta idir uimhir chriostail COM, méid criostail, Δ méid criostal, mais chriostail, agus roinnt comhiomláin criostail ag tástáil comhghaolaithe Pearson.

Fíor 8. Scéimreacha ina ndéantar achoimre ar éifeachtaí modhnúcháindiosminar COMduánpróisis foirmiú cloiche. (A): Éifeachtaí diosmin ar chriostalú COM. (B): Éifeachtaí diosmin ar chriostalú COM agus ar fhás criostail. (C): Éifeachtaí diosmin ar chriostalú, fás agus comhiomlánú COM. (D): Éifeachtaí diosmin ar phróisis iomlána foirmithe cloch duáin COM.

Nuair a bhreathnaítear ar idirghníomhaíochtaí le cealla tubular duánach agus ECM, déantar an pictiúr domhanda de na dé-éifeachtaí dediosminar COM éiríonn foirmiú cloch duáin i bhfad níos soiléire (Fíor 8D). Coscann Diosmin greamaitheacht criostail-chill, rud a laghdaíonn inmheánú criostail isteach sna cealla. Is féidir é seo a mhíniú go bhfuil cumas níos lú greamaitheacha ag méid níos lú criostail COM chun na cealla feadánacha duánach a cheangal i gcomparáid leis na cinn níos mó mar a tuairiscíodh inár staidéar le déanaí [34] agus staidéar roimhe seo ag grúpa eile [65]. Tá cumas níos lú greamaitheacha na gcriostal COM níos lú mar gheall ar a bhfórsa níos lú greamaitheacha ar an dromchla cille agus líon níos lú de na gabhdóirí criostail COM atá ceangailte leo mar a chinntear le micreascópacht fórsa adamhach agus anailís proteome, faoi seach [34]. Coscann Diosmin inmheánú criostail freisin. Tabhair faoi deara gur claíomh dhá-imeall é an próiseas inmheánaithe a dteastaíonn léiriú cúramach air. Inmheánú nó endocytosis i gceann de na meicníochtaí cosanta go cealla a úsáidtear chun deireadh a chur le criostail ag endlysosomes. Mar sin féin, gineann díghrádú na criostail slán iain chailciam agus oxalate saor in aisce ar féidir leo bogadh ó urrann intracellular go dtí an interstitium duánach, áit ar féidir leo neocrystals a ghiniúint [56,57]. Ar an láimh eile, cuireann diosmin ionradh criostail chun cinn tríd an ECM, atá ar cheann de na meicníochtaí atá tábhachtach do phaitigineas na cloiche duáin (go háirithe i múnla plaic Randall) [58-60]. Tríd is tríd, déanann Fíor 8D achoimre ar na dé-éifeachtaí modhnúcháin uile atá ag diosmin ar COMduánpróisis foirmiú cloiche. Ba chóir a thabhairt faoi deara nach féidir cothromaíocht na n-éifeachtaí spreagtha agus coiscthe seo a ríomh go beacht (murab ionann agus cothromóid matamaitice). Ina theannta sin, tá go leor fachtóirí endogenous agus exogenous eile ann a d'fhéadfadh idirghabháil a dhéanamh freisin ar phróisis foirmithe cloiche. Ar deireadh, taispeánann diosmin freisin roinnt éifeachtaí indíreacha ar fhoirmiú clocha duáin, lena n-áirítear a airíonna frithocsaídeacha agus frith-athlastacha [5,6] ar cheart a chur san áireamh. Dá bhrí sin, is é toradh deiridh na n-éifeachtaí dé-mhodhnúcháin seo dediosminar COMduántá gá le tuilleadh imscrúdaithe in vivo agus staidéar ionchasach mórchohórt.

5. Conclúidí

Go hachomair, tuairiscímid anseo ar éifeachtaí dé-diosmin ar mhodhnú criostail COM ar bhealach dáileog-spleách. Cé go gcuireann sé bac ar fhás criostail COM, greamaitheacht criostail-chealla, agus inmheánú i gcealla tubular duánach,diosmincuireann sé criostalú COM, comhiomlánú, agus ionradh chun cinn tríd an ECM. Dá bhrí sin, tá a ról frith-urolithiasis amhrasach agus ba chóir rabhadh a thabhairt chun é a úsáid i galar cloiche duáin.

Ráiteas ranníocaíochta údaraithe CRediT

Supaporn Khamchun: Coincheapú, Modheolaíocht, Bogearraí, Bailíochtú, Anailís Fhoirmiúil, Imscrúdú, Coimeád Sonraí, Scríbhneoireacht – Bundréacht, Amharcléiriú, Sunisa Yoodee: Coincheapú, Modheolaíocht, Bogearraí, Bailíochtú, Anailís Fhoirmiúil, Imscrúdú, Coimeád sonraí, Scríbhneoireacht – Bundréacht, Amharcléiriú, Tabhair cuairt ar Thongboonkerd: Coincheapú, Modheolaíocht, Bogearraí, Bailíochtú, Acmhainní, Scríbhneoireacht – athbhreithniú & eagarthóireacht, Maoirseacht, Riarachán tionscadail, Fáil maoinithe.

Ráiteas coinbhleachta leasa

Dearbhaíonn na húdair NÍL coinbhleacht leasa.

Buíochas

Táimid buíoch as cúnamh teicniúil Kittiya Suwanakud. Thacaigh Oifig na Comhairle Náisiúnta um Beartas um Thaighde agus um Nuálaíocht san Eolaíocht Ardoideachais (NXPO) leis an obair seo trí PMU-B agus Ciste Taighde na Téalainne (IRN60W0004). Faigheann VT tacaíocht freisin ón Deontas "Chalermphrakiat", Dámh an Leighis Ospidéal Siriraj.

Tagairtí

[1] A. Bogucka-Kocka, M. Wozniak, M. Feldo, J. Kockic, K. Szewczyk,Diosmin– teicnící leithlisithe, cinneadh maidir le hábhar plandaí agus foirmlithe cógaisíochta, agus úsáid chliniciúil, Nat. Táirg. Cumann. 8 (2013) 545–550.

[2] Y. Zheng, R. Zhang, W. Shi, L. Li, H. Liu, Z. Chen, L. Wu, Metabolism agus gníomhaíochtaí cógaseolaíochta an diosmin cumaisc nádúrtha chun tairbhe sláinte, Food Funct. 11 (2020) 8472–8492.

[3] MR Cesarone, G. Belcaro, L. Pellegrini, A. Ledda, G. Vinciguerra, A. Ricci, A. Di Renzo, I. Ruffini, G. Gizzi, E. Ippolito, F. Fano, M. Dugall , G. Acerbi, U. Cornelli, M. Hosoi, M. Cacchio, Venoruton vs Daflon: meastóireacht ar éifeachtaí ar cháilíocht na beatha i neamhdhóthanacht venous ainsealach, Angeolaíocht 57 (2006) 131–138.

[4] KA Lyseng-Williamson, CM Perry, Codán flavonoid íonaithe micrínithe: athbhreithniú ar a úsáid i neamhdhóthanacht venous ainsealach, ulcraí venous agus hemorrhoids, Drugaí 63 (2003) 71-100.

[5] AS Shalkami, M. Hassan, AG Bakr, Frith-athlastach, gníomhaíocht frithocsaídeach agus frith-apoptotic diosmin i colitis ulcerative de bharr aigéad aicéiteach, Hum. Cait. Tocsain. 37 (2018) 78–86.

[6] M. Berkoz, cuireann Diosmin na hidirghabhálaithe proinflammatory faoi chois i macraphages RAW264.7 spreagtha lipopolysaccharide trí bhealaí comhartha NF-kappaB agus MAPKs, Gen. Physiol. Bithfhis. 38 (2019) 315–324.

[7] Déanann M. Rajasekar, K. Suresh, K. Sivakumar, Diosmin apoptosis a chothú trí chomharthaíocht STAT-3 a mhodhnú i 7,12 carcanaigineas pouch buccal harmster spreagtha ag antraisín, Biomed. Pharm. 83 (2016) 1064–1070.

[8] A. Lewinska, J. Adamczyk-Grochala, E. Kwasniewicz, A. Deregowska, M. Wnuk, senescence Diosmin-spreagtha, apoptosis agus autophagy i cealla ailse chíche de stádas p53 éagsúla agus gníomhaíocht ERK, Toxicola. Lett. 265 (2017) 117–130.

[9] AC Pushkaran, V. Vinod, M. Vanuopadath, SS Nair, SV Nair, AK Vasudevan, R. Biswas, CG Mohan, Teaglaim diosmin drugaí athúsáid le amoxicillin- aigéad clavulanic is cúis le cosc ​​sineirgisteacha ar fhás mycobacterial, Sci. 9 (2019) 6800.

[10] Tá CC Hsu, MH Lin, JT Cheng, MC Wu, gníomh antihyperglycaemic diosmin, flavonoid citris, ionduchtaithe trí béite-endorphin endogenous i francaigh diaibéitis cineál I-mhaith, Clin. Cait. Pharm. Fisiol. 44 (2017) 549–555.

[11] O. Senthamizhselvan, J. Manivannan, T. Silambarasan, B. Raja,Diosminfeabhsaíonn réamhchóireáil feidhm chairdiach agus cuireann sé faoi chois strus ocsaídiúcháin i gcroí na bhfrancach tar éis ischemia/reperfusion, Eur. J. Pharm. 736 (2014) 131–137.

[12] Cosnaíonn N. Tong, Z Zhang, Y. Gong, L. Ceann, X. Wu, Diosmin reitine francach ó ghortú ischemia/reperfusion, J. Ocul. Pharm. Ther. 28 (2012) 459–466.

[13] AE Elhelaly, G. AlBasher, S. Alfarraj, R. Almeer, EI Bahbah, MMA Fouda, SG Bungau, L. Alya, MM Abdel-Daim, Éifeachtaí cosanta hesperidin agus diosmin i gcoinne ae spreagtha aicriolaimíde, duáin, agus damáiste ocsaídiúcháin inchinne i bhfrancaigh, An Timpeallacht. Sci. Truailliú. Res. Int. 26 (2019) 35151–35162.

[14] C. Thongrayoon, AE Krambeck, Riail AD, Ag Cinneadh an ualach fíorduángalar cloiche, Nat. An tUrr Nephrol. 16 (2020) 736–746.

[15] K. Easpag, T. Momah, J. Ricks, Nephrolithiasis, Prim. Cúram 47 (2020) 661–671.

[16] A. Viljoen, R. Chaudhry, J. Bycroft, Clocha Duánach, Ann. Clin. Bithcheimic 56 (2019) 15–27.

[17] PM Ferraro, R. Marano, A. Primiano, J. Gervasoni, M. Bargagli, G. Rovere, PF Bassi, G. Gambaro, Comhdhéanamh cloiche agus calcifications soithíoch in othair le nephrolithiasis, J. Nephrol. 32 (2019) 589–594.

[18] G. Schubert, Anailís chloiche, Urol. Res. 34 (2006) 146–150.

[19] A. Vinaiphat, S. Aluksanasuwan, J. Manissorn, S. Sutthimethakorn, V. Thongboonkerd, Freagra cealla tubular duánach ar chineálacha difreálach agus dáileoga de chriostail oxalate cailciam: anailís líonra proteome comhtháite agus imscrúduithe feidhmiúla, Proteomics 17 (2017). ), 1700192.

[20] P. Peerapen, S. Chaiyarit, V. Thongboonkerd, Anailís líonra próitéine agus staidéir fheidhmiúla ar cíteatocsaineacht oxalate cailciam-spreagtha i gcealla epithelial tubular duánach, Proteomics 18 (2018), 1800008.

[21] KP Aggarwal, S. Narula, M. Kakkar, C. Tandon, Nephrolithiasis: meicníocht mhóilíneach foirmiú cloch duánach agus an ról ríthábhachtach a imríonn modhnóirí, Biomed. Res. Int. 2013 (2013), 292953.

[22] VN Ratkalkar, JG Kleinman, Meicníochtaí foirmiú cloiche, Clin. Mianadóir Cnámh Rev. Metab. 9 (2011) 187–197.

[23] X. Zeng, Y. Xi, W. Jiang, Róil chosanta flavonoids agus sleachta plandaí saibhir flavonoid i gcoinne urolithiasis: athbhreithniú, Crit. Bia Sci. Nutr. 59 (2019) 2125–2135.

[24] MC Nirumand, M. Hajialyani, R. Rahimi, MH Farzaei, S. Zingue, SM Nabavi, A. Bishayee, Plandaí cothaitheacha chun cosc ​​a chur agus a bhainistiúduánclocha: fianaise réamhchliniciúil agus chliniciúil agus meicníochtaí móilíneacha, Int. J. Mol. Sci. 19 (2018) 765.

[25] S. Ahmed, MM Hasan, H. Khan, ZA Mahmood, S. Patel, Léargas meicniúla ar polyphenols i maolaithe urolithiasis oxalate cailciam, Biomed. Pharm. 106 (2018) 1292–1299.

[26] VV Prabhu, D. Sathyamurthy, A. Ramasamy, S. Das, M. Anuradha, S. Pachiappan, Meastóireacht ar éifeachtaí cosanta diosmin (a flavonoid citris) i urolithiasis ceimiceach-spreagtha i francaigh turgnamhacha, Pharm. Biol. 54 (2016) 1513–1521.

[27] A. Noorafshan, S. Karbalay-Doust, F. Karimi,Diosminlaghdaíonn sil-leagan oxalate cailciam agus meathlú fíocháin i nephrolithiasis i bhfrancaigh: staidéar steireolaíoch, Cóiréis J. Urol. 54 (2013) 252–257.

[28] V. Thongboonkerd, T. Semangoen, S. Chutipongtanate, Tosca a chinneann cineálacha agus moirfeolaíochtaí criostail oxalate cailciam: tiúchan molar, maolánú, pH, corraigh agus teocht, Clin. Chim. Gníomhartha 367 (2006) 120–131.

[29] V. Thongboonkerd, T. Semangoen, S. Sinchaikul, ST Chen, Anailís próitéamaíche ar chiteatocsaineacht oxalate monohydrate criostail-spreagtha i gcealla feadánacha duánach distal, J. Proteome Res. 7 (2008) 4689–4700.

[30] P. Amimanan, R. Tavichakorntrakool, K. Fong-ngern, P. Sribenjalux, A. Lulitanond, V. Prasongwatana, C. Wongkham, P. Boonsiri, WJ Umka, V. Thongboonkerd, Fachtóir fadú Tu ar Escherichia coli scoite ó fual na n-othar cloch duáin chun cinn fás criostail oxalate cailciam agus comhiomlánú, Sci. 7 (2017) 2953.

[31] S. Khamchun, K. Sueksakit, S. Chaiyarit, V. Thongboonkerd, Éifeachtaí modúlach fibronectin ar criostalú oxalate cailciam, fás, comhiomlánú, greamaitheacht ar chealla tubular duánach, agus ionradh trí mhaitrís extracellular, J. Biol. Inorg. Ceimic. 24 (2019) 235–246.

[32] S. Chaiyarit, V. Thongboonkerd, Anailís chórasach ar innéacsanna comhiomlánaithe a shainiú chun leibhéal comhiomlánú criostail oxalate cailciam a mheas, Tosaigh. Ceimic. 5 (2017) 113.

[33] Tá R. Kanlaya, O. Naruepantawart, V. Thongboonkerd, Flagellum freagrach as éifeachtaí Escherichia coli inmharthana a chur chun cinn ar chriostalú oxalate cailciam, fás criostail, agus comhiomlánú criostail, Front. Micribhil 10 (2019) 2507.

[34] P. Peerapen, V. Thongboonkerd, próitéiní faoi cheangal difreálach agus cumais ghreamaitheacha de chriostail monohydrate oxalate cailciam le méideanna éagsúla, Int. J. Biol. Macromol. 163 (2020) 2210–2223.

[35] K. Fong-ngern, K. Sueksakit, V. Thongboonkerd, Feidhmíonn próitéin turraing teasa dromchla 90 mar receptor féideartha le haghaidh criostail oxalate cailciam ar membrane apical de chealla epithelial tubular duánach, J. Biol. Inorg. Ceimic. 21 (2016) 463–474.

[36] S. Chaiyarit, S. Mungdee, V. Thongboonkerd, Lipéadú neamh-radaighníomhach de chriostail oxalate cailciam le haghaidh imscrúduithe ar idirghníomhaíocht agus inmheánú criostail-chill, Anal. Modhanna 2 (2010) 1536–1541.

[37] S. Chaiyarit, N. Singhto, V. Thongboonkerd, Cailciam oxalate criostail monohydrate inmheánaithe i gcealla tubular duánach díghrádaithe agus tuaslagtha ag endolysosomes, Chem. Biol. Idirghníomhú. 246 (2016) 30–35.

[38] W. Chiangjong, V. Thongboonkerd, Measúnacht nua chun meastóireacht a dhéanamh ar éifeachtaí a chuireann próitéiní chun cinn ar ionradh criostail oxalate cailciam trí mhaitrís eischeallach bunaithe ar ghníomhaíocht plasminogen/plasmin, Talanta 101 (2012) 240-245.

[39] Mhéadaigh W. Chiangjong, V. Thongboonkerd, criostail Cailciam oxalate secretion enolase-1 ó chealla tubular duánach a d'fheabhsaigh ionradh criostail agus monocyte ina dhiaidh sin trí interstitium duánach, Sci. 6 (2016) 24064.

[40] Is é R. Kanlaya, K. Sintiprungrat, S. Chaiyarit, V. Thongboonkerd, Macropinocytosis an meicníocht mhór le haghaidh endocytosis criostail oxalate cailciam isteach i gcealla tubular duánach, Cell Biochem. Bithfhis. 67 (2013) 1171–1179.

[41] S. Sassanarakkit, P. Peerapen, V. Thongboonkerd, StoneMod: bunachar sonraí le haghaidhduánpróitéiní modúlach cloiche le fianaise turgnamhach, Sci. 10 (2020) 15109.

[42] G. Eraslan, ZS Sarica, LC Bayram, MY Tekeli, M. Kanbur, M. Karabacak, Éifeachtaí diosmin ar ae spreagtha aflatocsain agus damáiste duáin, Environ. Sci. Truailliú. Res. Int. 24 (2017) 27931–27941.

[43] R. Russo, D. Chandradhara, N. De Tommasi, Bith-infhaighteacht chomparáideach dhá cheanndiosminfoirmlithe tar éis riarachán béil d'oibrithe deonacha sláintiúla, Móilíní 23 (2018) 2174.

[44] JQ Silveira, TB Cesar, JA Manthey, EA Baldwin, J. Bai, S. Raithore, Cógaschinéitic de gliocóisídí flavanone tar éis dáileoga aonair de shú oráiste úrbhrúite a ionghabháil i gcomparáid le sú oráiste a phróiseáiltear ar bhonn tráchtála i ndaoine sláintiúla, J. Agric . Ceimic Bhia. 62 (2014) 12576–12584.

[45] A. Frackowiak, P. Skibinski, W. Gawel, E. Zaczynska, A. Czarny, R. Gancarz, Sintéis díorthaigh glycosíde de hidroxyanthraquinone le cumas a dhíscaoileadh agus bac a chur ar fhoirmiú criostail oxalate cailciam. Comhdhúile féideartha i dteiripe cloch duáin, Eur. J. Med. Ceimic. 45 (2010) 1001–1007.

[46] F. Grases, J. Perello, B. Isern, RM Prieto, Staidéar ar uachtar myo-inositol heicsafosfáit-bhunaithe chun cosc ​​​​a chur ar diostrófach calcinosis cutis, Br. J. Dermatol. 152 (2005) 1022–1025.

[47] V. Thongboonkerd, Próitéamaíocht na n-idirghníomhaíochtaí criostail-chill: múnla le haghaidh taighde ar chloch duáin, Cealla 8 (2019) 1076.

[48] ​​CF Verkoelen, Coinneáil Crystal i galar cloiche duánach: ról ríthábhachtach don hyaluronan glycosaminoglycan? J. Am. Soc. Nephrol. 17 (2006) 1673–1687.

[49] K. Fong-ngern, A. Vinaiphat, V. Thongboonkerd, gortú Microvillar i gcealla epithelial feadánacha duánach de bharr criostail oxalate cailciam agus ról cosanta epigallocatechin -3-gallate, FASEB J. 31 (2017) 120 –131.

[50] J. Zhou, J. Jin, X. Li, Z. Zhao, L. Zhang, Q. Wang, J. Li, Q. Zhang, S. Xiang, Iomlán flavonoids Desmodium styracifolium attenuates an foirmiú hiodrocsa- Úrolithiasis oxalate cailciam de bharr L- proline i bhfrancaigh, Urolithiasis 46 (2018) 231–241.

[51] J. Manissorn, K. Fong-ngern, P. Peerapen, V. Thongboonkerd, Meastóireacht chórasach ar éifeachtaí pH fual ar chriostalú oxalate cailciam, greamaitheacht criostail-chill agus inmheánú i gcealla tubular duánach, Sci. 7 (2017) 1798.

[52] S. Cui, J. Qian, P. Bo, Éifeacht choisctheach ar fagaicíotóis Candida albicans de bharr réamhchóireáil le quercetin trí chur isteach actin cytoskeleton, J. Tradit. smig. Med. 33 (2013) 804–809.

[53] Cuireann S. Cui, Q. Wu, J. Wang, M. Li, J. Qian, S. Li, Quercetin bac ar imirce macraphage spreagtha ag LPS tríd an gcosán iNOS/FAK/paxillin a shochtadh agus an cíteshnámharlach, Cill Adhes a mhodhnú. . Imirceach. 13 (2019) 1–12.

[54] Y. Li, WG Gonzalez, A. Andreev, W. Tang, S. Gandhi, A. Cunha, D. Prober, C. Lois, ME Bronner, thiomáineann athchúrsáil membrane Macropinocytosis-idirghabhála imirce suaitheantas neural trí sheachadadh F- actin chuig an lamellipodium, Proc. Natl. Acad. Sci. Stáit Aontaithe Mheiriceá 117 (2020) 27400–27411.

[55] H. Inaba, K. Yoda, H. Adachi, Tá gá le RapGEF GflB F-actin-ceangailteach le haghaidh macropinocytosis éifeachtach i Dictyostelium, J. Cell Sci. 130 (2017) 3158–3172.

[56] A. Khan, Leitheadúlacht, meicníochtaí pathophysiological agus fachtóirí a mbíonn tionchar acu ar urolithiasis, Int. Urol. Nephrol. 50 (2018) 799–806.

[57] AP Evan, EM Worcester, FL Coe, J. Williams Jr., JE Lingeman, Meicníochtaí foirmiú cloiche duán daonna, Urolithiasis 43 (Suppl 1) (2015) 19–32.

[58] S. Chaiyarit, V. Thongboonkerd, Mífheidhm mitochondrial agusduángalar cloiche, Tosaigh. Fisiol. 11 (2020), 566506.

[59] SR Khan, Gnéithe histeolaíocha den mhúnla "cáithníní seasta" de fhoirmiú cloiche: staidéir ainmhithe, Urolithiasis 45 (2017) 75–87.

[60] VY Bird, SR Khan, Conas a fhoirmíonn clocha? An féidir teoiricí ar fhoirmiú cloiche a aontú? Áirse. Esp. Urol. 70 (2017) 12–27.

[61] JP Kavanagh, Modhanna chun staidéar a dhéanamh ar chriostalú oxalate cailciam agus a gcur i bhfeidhm ar thaighde urolithiasis, Scanning Microsc. 6 (1992) 685–704, plé 704-5.

[62] JP Kavanagh, L. Jones, PN Rao, Cinéitic criostalaithe oxalate Cailciam ag tiúchan éagsúla fual daonna agus saorga, le cóimheas tairiseach cailciam go oxalate, Urol. Res. 27 (1999) 231–237.

[63] NK Saw, PN Rao, JP Kavanagh, A. nidus, crystalluria agus comhiomlánú: príomh-chomhábhair le haghaidh méadú cloiche, Urol. Res. 36 (2008) 11–15.

[64] A. Borissova, GE Goltz, JP Kavanagh, TA Wilkins, Innealtóireacht droim ar ais na duáin: samhaltú criostalú monohydrate oxalate cailciam sa nephron, Med. Biol. Eng. Ríomhaire. 48 (2010) 649–659.

[65] LA Thurgood, ES Sorensen, RL Ryall, Éifeacht osteopontin ionchriostalach agus dromchla faoi cheangal ar chriostail déhiodráití oxalate cailciam a cheangal le cealla duáin Madin-Darby canine (MDCK) i bhfual daonna ultra-scagtha, BJU Int. 109 (2012) 1100–1109.