Athraítear Nochtadh Sceite Díosail Léiriú Líonraí a Bhaineann le Giniúint Néar-ghlúin in Inchinn riabhacha Cuid 1

Teibí

Is príomhchúiseanna míchumais ar fud an domhain iad galair néar-mheathlúcháin, ach ní féidir a gcuid etiologies a fháil den chuid is mó. Ní féidir le fachtóirí géiniteacha ach mionlach riosca a áireamh don chuid is mó de na neamhoird seo, rud a thugann le tuiscint go bhfuil ról suntasach ag fachtóirí comhshaoil ​​i bhforbairt na ngalar seo.

Tagraíonn galair neurodegenerative do chineál an ghalair is cúis le díghiniúint na gcealla inchinn ar chúiseanna éagsúla. I measc na cinn coitianta tá galar Alzheimer, galar Parkinson, galar Huntington, srl. Cuireann na galair seo isteach ar néaróin san inchinn, rud a fhágann go bhfuil lagú ar fheidhm na hinchinne agus comharthaí cosúil le cuimhne, smaointeoireacht, agus athruithe iompraíochta.

Mar sin féin, ní gá dúinn ár ndearcadh dearfach a chailleadh mar gheall ar na tinnis seo. Tá go leor bealaí ann chun cabhrú le hothair cuimhne a fheabhsú agus comharthaí a mhaolú. Breathnaímid ar chuid de na modhanna seo:

Gcéad dul síos, a fháil ar roinnt cleachtadh coirp. Léiríonn taighde go bhfeabhsaíonn gníomhaíocht fhisiciúil scaipeadh fola san inchinn agus go méadaítear scaoileadh ceimiceán cosúil le dopamine agus endorphins, a chabhraíonn le feidhm néaróin a chosaint agus a fheabhsú. Ag an am céanna, is féidir le cleachtadh cabhrú le fadhbanna cosúil le imní, dúlagar agus insomnia a laghdú, rud a fhágann go mbeidh othair níos taitneamhaí chun aghaidh a thabhairt ar an saol.

Dara, caidreamh sóisialta a chothabháil. Tá sé an-tábhachtach freisin go bhfuil dlúthbhaint ag ár líonraí sóisialta le réimsí gaolmhara den inchinn, agus ní féidir le hidirghníomhú sóisialta ní hamháin strus a laghdú, ach freisin sláinte inchinn a fheabhsú trí sonas a mhéadú, dúlagar a chomhrac, agus níos mó.

Ar deireadh, ithe go maith agus a fháil codlata go leor. Féadfaidh éifeachtaí tábhachtacha a bheith ag an dá ghné seo ar shláinte na hinchinne. Ní hamháin go gcaithfidh go leor cothaithigh a bheith in aiste bia maith, ach ní mór dó freisin iomarca siúcra, saill sháithithe agus colaistéaról a ithe arís agus arís eile. Ina theannta sin, is féidir le codladh go leor cabhrú le fadhbanna cuimhne a chomhrac ag céimeanna éagsúla, go háirithe galair cosúil le galar Alzheimer.

I mbeagán focal, ní chiallaíonn galair neurodegenerative a thabhairt suas ionchais don saol. Agus dearcadh dearfach á chothabháil, is gá freisin modhanna eolaíocha agus éifeachtacha a ghlacadh chun cáilíocht na beatha a fheabhsú. Cabhróidh níos mó gáire agus níos mó gréine leat fanacht sláintiúil. Is féidir a fheiceáil go gcaithfimid cuimhne a fheabhsú, agus is féidir le Cistanche deserticola feabhas mór a chur ar chuimhne toisc gur ábhar íocshláinte traidisiúnta Síneach é Cistanche deserticola a bhfuil go leor éifeachtaí uathúla aige, agus is é ceann acu cuimhne a fheabhsú. Tagann éifeachtúlacht Cistanche deserticola ó na comhábhair ghníomhacha iolracha atá ann, lena n-áirítear aigéad tannic, polaisiúicrídí, gliocóisídí flavonoid, etc. Is féidir leis na comhábhair seo sláinte inchinne a chur chun cinn trí bhealaí éagsúla.

Cliceáil a fhios 10 bealaí chun cuimhne a fheabhsú

Tá nochtadh fada do thruailliú aeir sainaitheanta le déanaí chun an baol galar Alzheimer agus Parkinson a mhéadú, ach ní thuigtear go maith na meicníochtaí móilíneacha a fheidhmíonn sé.

Is éard a bhíonn mar thoradh ar shamhailí séabra a nochtar d’eastóscadh na gcáithníní sceite díosail (DEPe) uathphagaireacht mhífheidhmiúil agus caillteanas néaránach. Anseo, nochtamar suthanna séabraéisc do DEPe agus rinneamar anailísí ard-thréchur próitéamacha agus traschriptimí slinne óna n-inchinn chun conairí pataigineacha a tharlódh de bharr truailliú aeir a shainaithint. D'athraigh cóireáil DEPe go leor próiseas bitheolaíoch agus bealaí comharthaíochta a bhí ábhartha do phróisis néar-mheathlúcháin, lena n-áirítear meitibileacht seineabiotach, aibiú phagosome, agus próiseáil amyloid. Ba i Cyp1A (thar 30-huaire) an ionduchtú is mó d’inbhrains slonn géine.

Deimhníodh ábharthacht an athraithe slonn seo trí ionduchtú a bhlocáil ag baint úsáide as CRISPR/Cas9, rud a d’fhág gur tháinig méadú suntasach ar íogaireacht do thocsaineacht DEPe, ag dearbhú gur meicníocht chúiteach cosanta a bhí i ionduchtú Cyp1A.

D'aithin na staidéir seo go raibh isteach ar bhealaí móilíneacha a d'fhéadfadh cur le pataigineas neamhoird néar-mheathlúcháin. Sa deireadh, má chinntear ar an mbonn móilíneach a mhéadaíonn truailliú an aeir ar an mbaol néar-mheathlaithe cabhróidh sé le teiripí modhnuithe galair a fhorbairt.

Eochairfhocail

Truailliú aeir · Néaltrú · Galar Pharkinson · Galar Alzheimer · Transcriptomics · Proteomics.

Réamhrá

Cuireann truailliú aeir go mór le básmhaireacht agus baineann sé le galair riospráide, galar croí, stróc, ailse scamhóg agus diaibéiteas. Tacaíonn fianaise eipidéimeolaíoch atá ag teacht chun cinn le nasc idir nochtadh do thruailliú aeir agus forbairt galair néar-mheathlúcháin, lena n-áirítear galair Alzheimer agus Parkinson (AD andPD) (Fu et al. 2019). Is beag taighde a dhéanann imscrúdú ar na meicníochtaí trína bhféadfadh truailliú aeir an baol AD ​​agus PD a mhéadú, ach is beag duine atá ann a thacaíonn le gaolmhaireacht chúise (Fu et al. 2019).

Is gné uilíoch de neamhoird néar-mheathlúcháin é carnadh cuimsiú próitéine san inchinn agus is dócha gur cosán coitianta é as a dtiocfaidh mífheidhm néarónach agus bás. Mar shampla, tá foirmiú struchtúir amyloid-beta (A-beta) agus tau ina sainmharcanna paiteolaíocha de chomhiomláin AD agus -synuclein (-syn) nó Comhlachtaí Lewy inPD (Ross and Poirier 2004; Woulfe 2008).

Dealraíonn sé go bhfuil athruithe i próitéostasis mar bhonn taca go páirteach ar a laghad le foirmiú na gcomhiomlán seo, ach níl na meicníochtaí beachta fós ar eolas agus féadfaidh siad a bheith éagsúil i ndaoine aonair ag brath ar fhachtóirí riosca géiniteacha agus comhshaoil. Tá a fhios againn go bhféadfadh AD agus PD a bheith mar thoradh ar léiriú méadaithe nó díghrádú laghdaithe A-betaor -syn (Bostancıklıoğlu2019; Johnson et al. 2019).

Gnéithe coitianta eile i neamhoird neurodegenerative ná athlasadh agus strus ocsaídiúcháin. Is féidir microglia gníomhachtaithe, na cealla athlastacha sa CNS, a thuiscint go héasca i n-uathpsies inchinn AD agus PD agus is dócha go gcuireann siad le pataigineas na néar-mhíothlaithe (Kannarkat et al. 2013). Ceaptar go bhfuil strus ocsaídiúcháin mar thoradh ar an athlasadh seo agus b’fhéidir mífheidhm mitochondrial, rud a bhfuil meas freisin ar inchinní uathpsied (Picca et al. 2020).

Tá an chuid is mó de na staidéir mheicníochta ar thruailliú aeir agus néar-mheathlú go dtí seo tar éis díriú ar athlasadh (Jayaraj et al. 2017). Is cosúil go méadaíonn truailliú aeir athlasadh CNS agus strus ocsaídiúcháin in inchinn ainmhithe agus daonna (Calderón-Garcidueñas et al. 2004, 2007, 2008a,b agus c; Levesque et al. 2011a, b, 2013; Moultonand Yang 2012; Mumaw et. 2017;

Is díol spéise ar leith iad na torthaí go méadaíonn truailliú aeir léiriú roinnt géinte athlastacha san oifig bolgán olfactory (OB), réigiún inchinn ina bhfeictear paiteolaíocht PD go han-luath sa ghalar (Levesque et al. 2011a, b; Yokota et al. 2013a) . Chonacthas athlasadh freisin ar indogs ina gcónaí i gceantair uirbeacha i gcomparáid leo siúd a bhfuil cónaí orthu i gceantair thuaithe, agus na húdair tuairimíocht go raibh na hathruithe seo mar gheall ar leibhéil arda truaillithe aeir (Calderón-Garcidueñas et al. 2003).

Mhol na húdair chéanna freisin go raibh -syn carntha in inchinn na ndaoine a chónaíonn i gcathracha de bharr truaillithe aeir (Calderón-Garcidueñas et al. 2004, 2008a,b). I staidéar a rinneadh le déanaí ar shamhail iasc séabra, tuairiscíodh go raibh nochtadh do DEPe ina chúis le néarthocsaineacht agus laghdú suntasach ar líon na néaróin trí chur isteach ar uathphagy (Barnhill et al. 2020).

Tá go leor de na comhpháirteanna tocsaineacha de thruailliú aeir in DEPe agus úsáidtear go coitianta é chun nochtadh a shamhaltú i gcórais shaothraithe cille (Costa et al. 2014; Hesterberg et al. 2010; Levesque et al. 2011b). Meicníocht riachtanach intracellular is ea an t-uathphagy chun próitéiní mífhillte agus orgánaill damáiste a bhaint agus a dhíothú.

Go deimhin, tá gá le gníomhaíocht uathphagach bheacht le haghaidh hoiméastáis cheallacha, agus eascraíonn mífheidhm uathphagóideacht i néaróin go n-athraítear marthanacht agus néar-ghlúin (Kesidou et al. 2013). agus PD. Is teoranta an tuiscint atá againn ar na meicníochtaí trína méadaíonn truailliú an riosca seo, ach is féidir le cáithníní ultra mín agus roinnt comhpháirteanna de thruailliú aeir dul isteach san inchinn go díreach tríd an bolgán olfactory trí na scamhóga tríd an sruth fola (Kilian andKitazawa 2018).

Tá na cáithníní seo comhdhéanta de chroí-charbóin agus de chomhdhúile asaithe mar hidreacarbóin aramatacha iltimthriallacha, miotail, níotráit, sulfáit, agus eilimintí eile agus is cuid shuntasach de thruailleáin aeir iad, go háirithe i gceantair uirbeacha. tocsaineacht a chuireann sochreidteacht le comhlachas cúisíoch truaillithe aeir agus néar-dhíghiniúint.

Is féidir le himscrúduithe mionsonraithe ildisciplíneacha, lena n-áirítear samhlacha ceallacha agus ainmhithe, léargas a thabhairt ar chúiseanna galair agus cur chuige teiripeach díreach amach anseo (Cannon agus Greenamyre 2011). I measc na n-orgánach samhalta a úsáidtear le haghaidh staidéir in vivo, is samhail chumhachtach é Danio rerio (zebrafish) chun staidéar a dhéanamh ar thocsaineolaíocht, ar ghéineolaíocht mhóilíneach, ar thocsaineolaíocht agus ar fhionnachtain drugaí.

Tá an chuid is mó de na cosáin bhitheolaíocha caomhnaithe go mór i veirteabraigh, agus tá homalóga i séabra iasc ag formhór na ngéinte feidhmeacha daonna (Vaz et al.2018). Ina theannta sin, forbraíonn suthanna zebrafish go tapa agus go neamhspleách, rud a ligeann d'anailís ag céim forbartha inmhianaithe. Déanann na gnéithe seo, mar aon le atáirgeadh tapa agus costas íseal feirmeoireachta, eiseamláir fhabhrach chun staidéar a dhéanamh ar éifeachtaí tocsaineacha neamhchosaintí comhshaoil.

Chun tuiscint níos fearr a fháil ar na meicníochtaí móilíneacha taobh thiar de phataigineas an ghalair, forbraíodh raon leathan de mhodhanna próifílithe géine ard-thréchuir. Tá gealltanas ar leith ag baint le próitéamaíocht mais-speictriméadrachta agus seicheamhú RNA ard-thréchuir maidir le conairí spéise bitheolaíocha a shainaithint. Baineadh úsáid go forleathan as na teicníochtaí seo chun freagairt na samhlacha ceallacha agus ainmhithe ar spreagthaigh comhshaoil ​​a thuiscint (Duan et al. 2017; García-Estrada et al. 2013; Jamiet al. 2014a, b, 2015; Kosalková et al. 2012).

Sa staidéar seo, tá anailís léirithe againn ar éifeachtaí cóireála DEPe ar na próifílí próitéamacha agus tras-scríofa laistigh de chinn na n-iasc séabra. Cheadaigh leithlisiú samplaí ón gcloigeann atá comhdhéanta den chuid is mó den fhíochán inchinne níos mó próifílí fíocháin-shonracha a fháil agus íoslaghdú a dhéanamh ar lochtanna a tháinig ó fhíocháin eile. Déanaimid cur síos anseo ar léiriú géine agus próifílí próitéine a athrú i go leor bealaí a bhaineann le néar-ghiniúint i gcloigeann iasc riabhánach nochta DEPe. Soláthraíonn na torthaí seo léargais nua ar na meicníochtaí féideartha trína méadaíonn truailliú aeir an baol AD ​​agus PD.

Ábhar agus modhanna

Cóireáil éisc agus CRISPR/Cas9-dírithe géine anuas

D'fhormheas Coiste Cearta Ainmhithe UCLA na staidéir go léir. Póraíodh séabrafish (AB) le spreagadh solais ar feadh 1 h, agus goraíodh líon iomlán 200 ubh ar feadh 24 h ag 28 céim . Díchóiríodh na suthanna a d’eascair as sin i bprósás (2 mg/ml) agus déileáladh leo le DEPe (Ábhair Thagartha Caighdeánacha, NIST, Gaithersburg, MD) ag tiúchan deiridh 20 ug/ml nó feithicle go dtí 5 lá tar éis toirchithe (DPF).

Roghnaíodh an tiúchan seo toisc gur cailleadh néaróin mar a tuairiscíodh roimhe seo mar thoradh air ach gan básmhaireacht shuntasach (Barnhillet al. 2020). Ullmhaíodh iasc leagain Cyp1A mar seo a leanas.Úsáid uirlisí atá ar fáil ag http://crispr.mit.edu, theCRISPR RNA (Cyp1A-crRNA ) a dearadh bunaithe ar shuíomh na suíomhanna PAM oiriúnacha sa chéad exonof den ghéin Cyp1A.

Ceannaíodh an dearadh is fearr ó IDT DNA (www.idtdna.com) mar aon leis an tracrRNA caighdeánach CRISPR-Cas9. Athchuireadh an crRNA don Cyp1Agene agus tracrRNA go leithleach i 10 mM Tris–EDTA chun tiúchan deiridh 100 μM a bhaint amach. Ansin, rinneadh tracrRNA a chomhcheangal le maolán crRNAin 1 × déphléacsacha (aicéatáit photaisiam 100 mM; 30 mM HEPES, pH 7.5; IDT DNA) chun tiúchan deiridh de 10 μM a tháirgeadh. Téiteadh an meascán go 95 céim ar feadh 5 nóiméad i ndabhach fiuchphointe uisce agus fuaraíodh é go mall go teocht an tseomra chun na sraitheanna comhlántacha núicléitíde incrRNA agus tracrRNA a annealú agus foirmiú treoir-treoir feidhme RNA (gRNA).

Ansin rinneadh toirt 3 μL d'annealedgRNA a chomhcheangal leis an toirt chéanna de DNA aonshnáithe deontóra (ssDNA; 200 μM) mar sheicheamh an teimpléid le haghaidh mutant Cyp1A. Cuireadh méid 3 ug de Núicléas Cas9 (IDT) i maolán insteallta 1 × (5 mM KCl; fosfáit sóidiam 0.1 M, pH 6.8) leis an meascán chun na coimpléisc deiridh CRISPR/Cas9ribonucleoprotein (Cyp1A-RNP) a fhoirmiú.

Chun Scramble RNP (SC-RNP) a ullmhú, cuireadh crRNA commercialScramble-crRNA gan aon sprioc ar an ngéanóm in ionad an Cyp1A-crRNA ar leith. Tá seicheamh na n-oligonucleotides go léir a úsáideadh san obair seo liostaithe i dTábla Forlíontach 1. Instealladh uibheacha faoi steiréamaicreascóp le timpeall 3 nL de mheascán insteallta RNP.

Rinneadh cúig instealladh macasamhail bitheolaíoch (cuimsíodh gach macasamhail 400-600 uibheacha a instealladh le Cyp1A-RNPand 100-200 instealladh le SC-RNP), agus críochnaíodh gach microinstealladh laistigh de 60 nóiméad. Cuireadh uibheacha i miasa Petri plaisteacha 100 mm agus gor iad ag 28 céim in uisce uibheacha. Rinneadh monatóireacht ar ráta marthanais suthanna ar feadh suas le 7 lá.

Rinneadh athbhreithniú ar íomhánna na n-iasc a tháinig slán chun an mhífhoirmiú a scóráil. Scóráladh gach larbha ar bhealach dalláilte le haghaidh láithreacht 4 anabaí forbraíochta lena n-áirítear míchumadh cloiginn, míchumadh eireaball, éidéime cairdiach, agus éidéime buíocáin.Bheadh ​​scóráil 4 ar larbhaí le gach ceann de na 4 dhrochfhoirmí, agus scóráil larbhaí gnáthfhorbartha 0. Baineadh úsáid as an T-tástáil staidrimh chun na difríochtaí suntasacha a mheas.

For more information:1950477648nn@gmail.com