Méadaíonn Sliocht Cistanche Deserticola Foirmiú Cnámh in Osteoblasts
Mar 05, 2022
Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com
Te-Mao Lia, Hsin-Chih Huangb, Chen-Ming Suc, Stáin-Yun Hoa, Chi-Ming Wua, Wen-Chi Chend, Yi-Chin Fonga,eagus Chih-Hsin Tangf,c
Teibí
Cuspóirí:Rinneamar imscrúdú ar éifeachtCistanche deserticola Ma. (CD) ar fhoirmiú cnámh ag osteoblasts saothraithe.ModhannaBaineadh úsáid as an measúnacht um fhoirmiú nodule mianraithe chun scrúdú a dhéanamh ar éifeachtaí in-vitro CD ar fhoirmiú cnámh. Rinneadh anailís ar phosphatase alcaileach (ALP), próitéiní morphogenetic cnámh (BMP)-2, agus abairt mRNA osteopontin (OPN) trí imoibriú cainníochtúil slabhra polaiméaráise fíor-ama. Rinneadh iniúchadh ar mheicníocht gníomhaíochta sliocht CD trí úsáid a bhaint as blotáil an Iarthair. Rinneadh measúnú ar éifeacht frith-osteoporotic in-vivo sliocht CD i lucha ovariectomized.PríomhthorthaíNí raibh aon éifeacht ag sliocht CD ar iomadú, imirce nó leigheas créachta oistéablastaí saothraithe, ach mhéadaigh sé ALP, BMP-2, agus OPN mRNA agus mianrú cnámh. Laghdaigh coscairí próitéin kinase mitogen-gníomhachtaithe (MAPK) nó fachtóir núicléach (NF) -kB foirmiú cnámh CD-spreagtha agus sliocht ALP, BMP-2, agus OPN. Mar sin féin, níor chuir sliocht CD isteach ar osteoclastogenesis. Ina theannta sin, chuir sliocht CD cosc ar an gcaillteanas cnámh a tharlódh de bharr ovariectomy in vivo.ConclúidíD'fhéadfadh CD a bheith ina ghníomhaire foirmithe cnámh úrscéal le haghaidh cóireáil oistéapóróis.
Réamhrá
Is fíochán casta é cnámh comhdhéanta de roinnt cineálacha cille a théann faoi phróiseas leanúnach athnuachana agus deisiúcháin ar a dtugtar 'athmhúnlú cnámh'. Dhá mhórchineál cille atá freagrach as athmhúnlú cnámh is ea oistéaclaistí, a athshocraíonn cnámh, agus oistéablastaí, a fhoirmíonn cnámh nua. Tá athmhúnlú cnámh á rialú ag roinnt hormóin sistéamacha (m.sh. hormón parathyroid, 1, 25-hiodrocsaivitamin D3, hormóin ghnéis, agus calcitonin) agus fachtóirí áitiúla (m.sh. ocsaíd nítreach, prostaglandins, fachtóirí fáis, agus cítocíní).[1]
Tarlaíonn oistéapóróis nuair a bhíonn an t-athionsú agus foirmiú cnámh neamh-chomhordaithe agus nuair a sháraíonn briseadh síos cnámh barrachais tógáil cnámh.[2] I measc na gcóireálacha atá ann faoi láthair le haghaidh oistéapóróis tá bisphosphonates, calcitonin, agus estrogen, ar coisctheoirí aisghabhála cnámh iad a chothaíonn mais chnámh trí ghníomhaíocht oistéaclasta a chosc.[3] Mar sin féin, is beag an éifeacht a bhíonn ag na drugaí seo maidir le mais chnámh a mhéadú nó a aisghabháil, agus is cinnte nach mó ná 2 faoin gcéad in aghaidh na bliana í.[3] Tá gá, mar sin, le gníomhairí tógála cnámh, mar shampla teriparatide, a spreagann foirmiú cnámh nua agus a cheartaíonn an t-athrú ar mhicraililtireacht trabecular ar saintréith de chuid oistéapóróis seanbhunaithe é.[4,5] Toisc go bhfuil foirmiú cnámh nua go príomha mar fheidhm de is féidir leis an oistéablast, gníomhairí a ghníomhaíonn trí mhéadú ar iomadú cealla an tsínte oistéablastach nó trí dhifreáil na n-osteoblastaí a spreagadh, foirmiú cnámh a fheabhsú.[5,6]
Cé go bhfuil meicníochtaí an oistéapóróis doiléir fós, is dóichí go mbaineann siad le hinfhaighteacht laghdaithe nó le hiarmhairtí fachtóirí fáis cnámh, mar phróitéiní cnámh-morphogenetic (BMPanna).[7] Sainaithníodh BMPanna, a bhfuil baint acu ó thaobh struchtúir de le fortheaghlach fachtóir fáis-b trasfhoirmithe, ag a gcumas foirmiú cnámh ectopic i creimirí a spreagadh.[8] Tá ról tábhachtach ag BMPanna i bhfoirmiú cnámh agus difreáil cnámhchill trí ghníomhaíocht fosfatase alcaileach (ALP) a spreagadh chomh maith le sintéis próiteagánach, collaigine agus osteopontin (OPN).[9] Fuair staidéar le déanaí nasc idir oistéapóróis agus polymorphisms sonracha sna géinte BMP, ALP, agus OPN, rud a thugann le tuiscint go bhfuil baint acu le forbairt oistéapóróis.[10]
Cistanche deserticola Ma.(Orobanchaceae; giorraithe mar CD) is luibh dhúchais sa tSín agus úsáidtear go forleathan i leigheas traidisiúnta mar oibreán teiripeacha mar gheall ar a sedative, analgesic, agus airíonna inmunostimulatory.[11] Tá sé léirithe ag staidéir chógaseolaíochta nua-aimseartha gur féidir le sleachta CD díolúine a spreagadh, [12] radacach saor in aisce a scamhadh[13], agus gníomhaíocht superoxide dismutase a mhéadú.[14] D'fhéadfadh gníomhairí frith-athlastacha agus frith-ocsaídeacha oistéapóróis a chóireáil trí fhoirmiú cnámh a mhéadú agus/nó trí ionsú cnámh a shochtadh. Anseo, tuairiscímid nach ndearna sliocht CD difear d'iomadú, imirce, nó gníomhaíocht cneasaithe créachta osteoblasts saothraithe, ach gur mhéadaigh sé ALP, BMP-2, agus léiriú OPN agus mianrú cnámh. Ina theannta sin, léirímid go bhféadfadh na cosáin chomharthaíochta kinase próitéin mitogen-gníomhachtaithe (MAPK) agus fachtóir núicléach (NF)-kB a bheith bainteach leis an méadú CD-idirghabhála i léiriú géine agus mianrú cnámh. I gcodarsnacht leis sin, níor chuir an sliocht CD osteoclastogenesis in vitro faoi chois. Go háirithe, chuir cóireáil lucha le sliocht CD cosc ar chaillteanas cnámh de bharr ovariectomy in vivo. Tugann ár gcuid sonraí le fios, mar sin, go bhféadfaí CD a úsáid chun foirmiú cnámh a spreagadh chun oistéapóróis a chóireáil.
Cistanche deserticola
Abhair agus modhanna
Sliocht agus ábhair Cistanche deserticola
Ceannaíodh sliocht CD ó Chuang Song-Zong Pharmaceutical Company (Kaohsiung, Taiwan). Leanadh eastóscadh agus leithlisiú CD mar a thuairiscítear roimhe seo (ar bhonn sonraí speictreach tá an comhdhéanamh ceimiceach aitheanta acu lena n-áirítear béite-sitosterol, daucosterol, aigéad succinic, triacontanol, acteoside, betaine, agus polaisiúicríd).[17] Ceannaíodh antasubstaintí polyclonal coinín atá sonrach do kinases p-extracellular rialaithe comharthaí (ERK), ERK, p-p38, p38, pc-Meitheamh N-críochfort kinases (JNK), JNK, p-p65, agus p65 ó Santa Cruz Biteicneolaíocht ( Santa Cruz, SAM). Ceannaíodh an trealamh osteocalcin ELISA ó Biosource Technology (Nivelles, an Bheilg). Fuarthas na telopeptides C-críochfort den trealamh ELISA collagen cineál-I ó Cross Laps (Herlev, an Danmhairg). Ba é an Dr. J. Han (Ionad Leighis an Iardheiscirt, Dallas, SAM) a sholáthair an tsóiteán ceannasach-diúltach p38. Chuir an Dr. M. Karin (Ollscoil California, San Diego, SAM) an tsóiteán ceannasach-diúltach JNK ar fáil. Chuir an Dr M. Cobb (Ionad Leighis an Iardheiscirt) an tsóiteán ceannasach-diúltach ERK2 ar fáil. Fuarthas gach imoibrí eile ó Sigma-Aldrich (St Louis, SAM).
Cultúr cille
Ceannaíodh an líne chill osteoblast murine MC3T3-E1 ó American Type Culture Collection (ATCC; Rockville, USA). Saothraíodh cealla in aer 95 faoin gcéad, 5 faoin gcéad CO2 le a-MEM a forlíontar le 20 mm HEPES agus 10 faoin gcéad serum lao féatais teas-neamhghníomhaithe, 2 mm-glutamine, peinicillin (100 U / ml), agus streptomycin (100 mg). /ml).
Foirmiú nodule mianraithe a thomhas
Rinneadh measúnú ar fhoirmiú nodule mianraí mar a thuairiscítear.[18] Go hachomair, saothraíodh osteoblasts i meán ina raibh vitimín C (50 mg / ml) agus b-glycerophosphate (10 mm) ar feadh dhá sheachtain, agus athraíodh an meán gach trí lá. Tar éis goir le sliocht CD ar feadh 12 lá, nite cealla faoi dhó le saline maolánach 20 mm Tris ina raibh
0.15 m NaCl (pH 7.4), seasta in oighearfhuar 75 faoin gcéad (v/v) eatánól ar feadh 30 nóiméad, agus aer-triomaithe. Cinneadh sil-leagan cailciam ag baint úsáide as staining dearg-S alizarin. Go hachomair, bhí dhaite cealla agus maitrís eatánól-seasta ar feadh 1 h le 40 mm alizarin dearg-S (pH 4.2) agus rinsed go forleathan le huisce. Rinneadh an stain theoranta a mhaolú le clóiríd cetylpyridinium 10 faoin gcéad (w/v), agus cainníochtaíodh alizarin red-S sna samplaí trí ionsúchán a thomhas ag 550 nm agus i gcomparáid le cuar caighdeánach. Ceanglaíonn caochÚn amháin de alizarin dearg-S thart ar dhá mhól cailciam go roghnach.
Imoibriú slabhra polaiméaráise cainníochtúil fíor-ama
Baineadh RNA iomlán as osteoblasts ag baint úsáide as trealamh TRIzol (MDBio Inc., Taipei, Taiwan). Rinneadh tras-scríobh droim ar ais ag baint úsáide as RNA iomlán 2 mg agus primer oligo(dT).[19,20] Rinneadh imoibriú slabhra polaiméaráise fíor-ama cainníochtúil (qPCR) ag baint úsáide as TaqMan® aon-chéim PCR Master Mix (Applied Biosystems, Carlsbad, USA). Cuireadh iomlán cDNA leis (100 ng in aghaidh 25-ml imoibriú) le primers seicheamh-shonracha agus tóireadóirí Taqman®. Ceannaíodh gach sprice-primer agus probe ar bhonn tráchtála, lena n-áirítear b-actin mar rialú inmheánach (Bithchórais Fheidhmeach). Rinneadh measúnachtaí qPCR faoi thrí ar chóras braite seicheamh SteppOnePlus (Bithchórais Fheidhmeach). Ba iad na coinníollacha rothaíochta ná 10-nóiméad gníomhachtaithe polaiméire ag 95 céim agus ina dhiaidh sin 40 timthriall de 95 céim ar feadh 15 s agus 60 céim ar feadh 60 s. Socraíodh an tairseach os cionn an chúlra rialaithe neamhtheimpléad agus laistigh den chéim líneach den aimpliú géine sprice chun an uimhir timthrialla ag ar aimsíodh an athscríbhinn (CT sainithe) a ríomh.
Anailís blot an Iarthair
Ullmhaíodh lísáití cille mar a thuairiscítear roimhe seo.[21,22] Réitíodh próitéiní trí SDS-PAGE agus aistríodh iad chuig seicní défluairíde polaivinile Immobilon (Millipore, Billerica, SAM). Cuireadh bac ar na blots le 4 faoin gcéad albaimin serum buaibheach ar feadh 1 h ag teocht an tseomra agus ansin scrúdaíodh iad le antasubstaintí frith-dhaonna coinín i gcoinne p-65, nó p-p65 (1: 1000) ar feadh 1 h ag teocht an tseomra. Tar éis trí nite, goradh na blotaí le antashubstaint thánaisteach frith-choineán asal peroxidase-conjugated (1: 1000) ar feadh 1 h ag teocht an tseomra. Rinneadh na blots a léirshamhlú le cemiluminescence feabhsaithe ag baint úsáide as scannán X-OMAT LS (Eastman Kodak, Rochester, SAM).
Ovariectomy-spreagtha oistéapóróis
Baineadh úsáid as lucha ICR baineanna, ceithre seachtaine d'aois, 22 ~ 28 g, don staidéar seo. Ovariectomized lucha go déthaobhach faoi ainéistéise tríchlóirea-aicéatildéad (100 mg/kg) agus lucha rialaithe a oibríodh seam (Sham) chun comparáid a dhéanamh. Rinneadh dlús mianraí cnámh agus ábhar mianraí cnámh a thomhas tar éis tiúchain éagsúla sleachta CD a riaradh ó bhéal gach dhá lá ar feadh ceithre seachtaine. Cinntíodh dlús mianraí cnámh coirp iomlán agus cion mianraí cnámh trí ionsúiméadar défhuinnimh X-gha (DEXA; XR-26; Norland, Fort Atkinson, SAM) ag baint úsáide as modh le haghaidh ábhair bheaga mar a thuairiscítear roimhe seo.[18, 23] Chomhlíon na prótacail go léir treoirlínte institiúideacha agus d'fhormheas Coiste Cúraim Ainmhithe Ollscoil Leighis na Síne iad.
Anailís staitistiúil
Rinneadh anailís staitistiúil le Prism 4.01soft-ware. (GraphPad Software Inc., San Diego, SAM). Is iad na luachanna a thugtar ná meán ± SEM. Rinneadh anailís staitistiúil idir dhá shampla agus úsáid á baint as t-tástáil an Mhic Léinn. Rinneadh comparáid staitistiúil de níos mó ná dhá ghrúpa ag baint úsáide as anailís aontreo ar an éagsúlacht le tástáil posthoc Bonfer-Roni. I ngach cás, measadh go raibh P < 0.05="">
Sliocht cistanche deserticola
Torthaí
Méadaíonn sliocht Cistanche deserticola mianrú cnámh ag osteoblasts
Níor chuir cur leis an sliocht CD ar feadh 24 nó 48 h isteach ar iomadú cealla osteoblast MC3T 3-E1 luch i measúnacht MTT (sonraí gan a thaispeáint). Toisc gur próiseas casta é difreáil oistéablast a bhaineann le iomadú cille agus imirce, rinneamar tástáil freisin ar chumas imirce cealla MC3T3-E1 tar éis cóireála le sliocht CD. Ag baint úsáide as Transwell agus measúnachtaí leighis fhoirceannadh, fuaireamar amach nach raibh tionchar ag sliocht CD ar imirce osteoblast (sonraí nach bhfuil léirithe). Tá foirmiú nodules mianraí ar cheann de na marcóirí ar aibiú osteoblast. Léirigh staining Alizarin red S gur foirmíodh nodules mianracha nuair a saothraíodh osteoblasts ar feadh dhá sheachtain i meán ina raibh vitimín C (50 mg / ml) agus b-glycerophosphate (10 mm), agus méadaíodh é seo ar bhealach tiúchan-spleách trí chur leis. de CD (Fíor 1a). Mar sin, d'eascair foirmiú nodule cnámh de bharr sliocht CD ag osteoblasts saothraithe, ach níor tharla a iomadú ná a n-imirce. Rinneamar scrúdú freisin ar ról sliocht CD in osteoclastogenesis RANKL-spreagtha ach ní bhfuarthas aon éifeacht (níor léirítear sonraí).
Méadaíonn sliocht Cistanche deserticola fosfatase alcaileach, próitéin morphogenetic cnámh-2, agus slonn osteopontin in osteoblasts saothraithe
Léiríonn osteoblasts difreáilte gníomhaíocht ALP ardaithe, a bhfuil comhghaol ann le leibhéil arda de shloinneadh einsíme.[18] Fuaireamar amach gur mhéadaigh cóireáil le sliocht CD ar feadh 72 h gníomhaíocht ALP osteoblast (Fíor 1b). I bhfianaise ról ríthábhachtach BMP-2, ALP, agus OPN i idirdhealú oistéablast, rinneamar tástáil ar cibé an bhfeidhmíonn sliocht CD a éifeacht ar dhifreáil oistéablast trí shloinneadh BMP-2, ALP, agus OPN a rialáil. Mhéadaigh cóireáil cealla le sliocht CD slonn mRNA ALP, BMP-2, agus OPN ar bhealach a bhí ag brath ar thiúchan (Fíor 1c), rud a thaispeánann gur spreag sliocht CD idirdhealú a dhéanamh ar oistéablastaí trí ALP, BMP a uasrialáil-2 , agus slonn OPN.
Méadaíonn sliocht Cistanche deserticola foirmiú cnámh nodule trí chosán kinase próitéin mitogen-gníomhachtaithe
Tuairiscíodh go bhfuil ról tábhachtach ag MAPK i bhfoirmiú cnámh[24,25] agus mar sin scrúdóimid an chéad chéim eile an bhfuil baint ag an gcosán comharthaíochta seo le mianrú cnámh CD-spreagtha sleachta. Pretreatment na cealla le ERK inhibitor U0126, p38 inhibitor SB203580, nó JNK inhibitor SP600125 laghdú CD sliocht-méadú mianraíiú cnámh (Fíoracha 2a, 3a, agus 4a). Ina theannta sin, chuir na coscairí bac freisin ar ALP CD-spreagtha, BMP-2, agus slonn OPN (Figiúirí 2b–4c). Aistriú cealla le ERK2, p38, nó JNK mutant laghdaithe CD sliocht-méadú i ALP, BMP-2, agus slonn mRNA OPN (Figiúirí 2c, 3c, agus 4c). Ansin, rinneamar scrúdú díreach ar ghníomhachtú ERK, p38, agus JNK tar éis cóireála sliocht CD. Goir cealla le sliocht CD spreagtha ERK, p38, agus JNK fosfarylation (Figiúirí 2d, 3d, agus 4d). Mar sin, déanann ERK, p38, agus JNK idirghabháil ar fhoirmiú cnámh méadaithe a tharlódh de bharr cóireáil CD ar osteoblasts.
Méadaíonn sliocht Cistanche deserticola foirmiú nodule cnámh tríd an gcosán fachtóir-kB núicléach
Mar a luadh cheana, tá gá le gníomhachtú NF-kB chun cnámh a fhoirmiú.[26,27] An chéad uair eile chuireamar cóireáil ar osteoblasts leis na coscairí NF-kB pyrrolidine dithiocarbamate (PDTC) agus N-tosyl-L-feinilalainín cloromethyl ketone (TPCK) ó Calbiochem (Darmstadt, an Ghearmáin) chun a chinneadh an bhfuil gníomhachtú NF-kB páirteach i mianrú cnámh CD-spreagtha sliocht. Léirítear i bhFíor 5a gur chuir réamhchóireáil osteoblasts le PDTC nó TPCK bac ar fhoirmiú nodule cnámh CD-spreagtha sliocht agus freisin gur laghdaigh sé an méadú ar léiriú ALP, BMP-2 agus OPN (Fíor 5b agus 5c). Tá fosfarylation an fho-aonaid NF-kB p65 ina tháscaire ar ghníomhachtú NF-kB;[28] ag teacht leis seo, fuair muid amach gur mhéadaigh sliocht CD fosfarylation p65 sna osteoblasts (Fíor 5d). Léirigh na torthaí seo go bhfuil gníomhachtú NF-kB tábhachtach le haghaidh ALP sliocht-spreagtha CD, BMP-2, agus léiriú OPN agus foirmiú nodule cnámh.
Cosc ar chaillteanas cnámh ag sliocht Cistanche deserticola i lucha ovarectomized
Chun scrúdú a dhéanamh ar éifeacht sliocht CD ar chaillteanas cnámh, spreag ovariectomy i lucha baineanna. De réir mar a bhíothas ag súil leis, laghdaigh lucha ovarectomized a taispeánadh dlús mianraí cnámh iomlán an choirp agus cion mianraí cnámh (Fíor 6a agus 6b). Chuir cóireáil le sliocht CD ar feadh ceithre seachtaine bac ar chaillteanas dlús mianraí cnámh agus ábhar mianraí cnámh ar bhealach dáileog-spleách (Fíor 6a agus 6b). Is féidir le tiúchan fola ALP gníomhaíocht oistéablastach a léiriú.[29] Mar a léirítear i bhFíor 6c, chuir sliocht CD bac ar an laghdú ar ghníomhaíocht ALP serum de bharr ovariectomy. Ina theannta sin, mhéadaigh sliocht CD freisin an leibhéal osteocalcin, marcóir foirmiú cnámh, agus laghdaigh leibhéal na telopeptides C-críochfort de collagen cineál-I, marcóir resorption cnámh (Fíor 6d agus 6e). Mar sin tacaíonn na torthaí seo le hacmhainneacht agus le héifeachtúlacht sliocht CD chun caillteanas cnámh in vivo a chosc.
Plé
Cistanche deserticolaÚsáidtear Ma, luibh dhúchais sa tSín, go forleathan sa leigheas traidisiúnta le haghaidh cóireálacha teiripeacha éagsúla mar gheall ar a ghníomhaíocht sedative, analgesic, agus imdhíon-spreagthach. ní chuireann siad isteach ar imirce nó iomadú cille. Ina theannta sin, fuaireamar amach gur spriocphróitéiní iad ALP, BMP-2, agus OPN de chomharthaíocht spreagtha CD, a éilíonn gníomhachtú ERK, p38, JNK, agus NF-kB.
Is fíochán casta é cnámh atá comhdhéanta de chineálacha éagsúla cille a mbíonn próiseas athnuachana agus deisiúcháin ar siúl acu go leanúnach.[30] Nuair a bhíonn éagothroime aisghabhála agus foirmiú cnámh, sáraíonn briseadh cnámh foirmiú cnámh agus torthaí oistéapóróis.[30] D’úsáideamar lucha ovariectomized chun éifeacht frith-osteapóróis sliocht CD a scrúdú. Laghdaigh lucha ovariectomized dlús mianraí cnámh comhlacht iomlán agus ábhar mianraí cnámh, rud a mhaolú trí chóireáil le sliocht CD. Mhéadaigh sliocht CD freisin leibhéil serum an marcóir osteogenach ALP agus osteocalcin. Mar sin, is oibreán foirmithe cnámh é an CD a chuireann cosc ar chaillteanas cnámh a tharlaíonn de bharr ovariectomy in vivo.
Cé nach bhfuil meicníochtaí an oistéapóróis go hiomlán soiléir, is dócha go mbaineann siad le hinfhaighteacht laghdaithe, nó le hiarmhairtí laghdaithe, fachtóirí fáis cnámh, mar ALP, BMP-2 agus OPN. Tá ról tábhachtach ag na trí fhachtóir seo i bpróiseas foirmiú cnámh agus athmhúnlú,[31] agus tá sé doiciméadaithe go maith go bhfuil spreagadh difreála cille oistéablast go príomha mar léiriú méadaithe ar ALP, BMP-2 agus OPN.[32] ] Sa staidéar seo, fuaireamar amach gur mhéadaigh sliocht CD ALP, BMP-2 agus léiriú OPN agus feabhas ar mhianrú cnámh. Mar sin, meánlaíonn sliocht CD foirmiú cnámh go páirteach trí shloinneadh ALP, BMP-2, agus OPN a upregulating.
Tuairiscíodh go bhfuil baint ag p38 le rialú slonn ALP le linn difreáil na gceall oistéablastacha;[33] mar an gcéanna, tá ERK1/2 tábhachtach maidir le hiomadú agus difreáil oistéablasts.[34,35] Tá baint ag JNK le foirmiú osteoclast. .[36] Thaispeáin muid anseo gur chuir sliocht CD ionduchtú fosfarylation ERK, p38 agus JNK, agus coscairí na n-einsímí seo salach ar chumhacht eastósctha CD mianrú cnámh, rud a thugann le tuiscint go bhfuil ról éigeantach ag gníomhachtú ERK, p38 agus JNK i bhfoirmiú cnámh CD-spreagtha trí eastóscadh. osteoblasts. Ina theannta sin, laghdaigh coscairí einsímeacha agus mutants ceannasach-diúltacha ERK, p38 agus JNK ALP sliocht-fheabhsaithe CD, BMP-2 agus slonn OPN. Tugann na sonraí seo le fios go bhfuil gníomhachtú na gcosán ERK, p38 agus JNK ag teastáil chun léiriú ALP, BMP-2 agus OPN a mhéadú agus aibithe de bharr sliocht CD in osteoblasts. Tuairiscíodh go méadaíonn ERK iomadú agus difreáil oistéablast.[34,35] Mar sin féin, níor bhraitheamar éifeacht sliocht CD ar iomadú oistéablast. Dá bhrí sin, d’fhéadfadh go mbeadh cosáin eile tar éis dul i ngleic le héifeacht ERK tar éis spreagadh sliocht CD, nó a bheith riachtanach le haghaidh iomadú. Maidir leis seo, tá sé faighte amach againn go laghdaíonn coscairí PI3K agus Akt mianrú cnámh CD-spreagtha agus sliocht ALP, BMP-2 nó slonn mRNA OPN (sonraí nach dtaispeántar). Mar sin, d'fhéadfadh go mbeadh na cosáin seo ag teastáil le haghaidh foirmiú cnámh CD-spreagtha sleachta.
Tá sé léirithe go rialaíonn NF-kB feidhm oistéablasta sa chnámh.[37] Léiríonn torthaí an staidéir seo go gcuireann gníomhachtú NF-kB le mianrú cnámh sliocht-spreagtha CD agus léiriú ALP, BMP-2 agus OPN in osteoblasts saothraithe agus go gcuireann cosc ar chonair comharthaíochta NF-kB-spleách (PDTC agus TPCK). ) mianrú cnámh CD-spreagtha asbhainte agus slonn ALP, BMP-2 agus OPN. Déantar p65 a phosphorylated ag Ser536 ag cineálacha éagsúla kinases i roinnt conairí comharthaíochta, rud a chuireann le cumas trasghníomhaithe p65.[38] Léirigh torthaí an staidéir seo gur mhéadaigh sliocht CD an phosphorylation de p65. Le chéile, tugann na torthaí seo le fios go bhfuil gá le gníomhachtú NF-kB le haghaidh foirmiú cnámh CD-spreagtha in osteoblasts saothraithe. Fuaireamar amach freisin gur aisiompaigh coscairí ERK, p38 agus JNK gníomhaíocht luciferase NF-kB sliocht-spreagtha CD (sonraí nach bhfuil léirithe), comhsheasmhach leis na heinsímí seo a bheith ina n-idirghabhálaithe in aghaidh an tsrutha ar ghníomhachtú CD-spreagtha NF-kB a d'eascair as sliocht. Mar sin, spreagann sliocht CD foirmiú cnámh trí na cosáin ERK/p38/JNK/ agus NF-kB.
Conclúidí
Léirigh an staidéar seo go spreagann sliocht CD idirdhealú osteoblast agus aibithe ach nach bhfuil iomadú nó imirce. Mhéadaigh sliocht CD freisin ALP, BMP-2 agus slonn OPN agus mianrú cnámh. Thaispeáin muid go bhfuil baint ag na conairí ERK, p38, JNK agus NF-kB le foirmiú cnámh CD-idirghabhálaithe agus slonn ALP, BMP-2 agus OPN. Ina theannta sin, chuir sliocht CD cosc ar chaillteanas cnámh in-vivo de bharr ovariectomy. Mar sin, d'fhéadfadh CD a bheith tairbheach chun foirmiú cnámh a spreagadh i gcóireáil galair oistéapóróis.
