Próifíl na Lipidí Bithghníomhacha agus Aigéid Shailleacha ar Cistanche Phelypaea

le haghaidh tuilleadh eolais:ali.ma@wecistanche.com

Mohamed Fawzy Ramadan, et al

Teibí

Ola a bhaintear as an planda fiáin deCistanche phelypaearinneadh anailís ar a inneachar aigéid shailligh, stéaróil, hidreacarbóin agus tócaifearóil. 10 g/kg (ar bhonn meáchain thirim) a bhí i gcion iomlánlipidí (TL). aigéid iomlána sailleacha. Ba é aigéad oiléach an t-aigéad sailleach ba thábhachtaí agus aigéid phailmíteacha agus líonóileacha ina dhiaidh. Fuarthas méideanna arda stéaróil san ola le b-sitosterol mar phríomh-chomhpháirt. Bhí fíteastaróil eile (m.sh. stiogmasterol, D7-avenasterol, agus D{5-avenasterol) i láthair ag méideanna comhionann beagnach (6–9 faoin gcéad de na stéaróil iomlán). Ba iad na príomh-chomhábhair hidreacarbóin a aithníodh ná C21, C26, agus C32 arbh ionann iad agus thart ar 61.2 faoin gcéad de na hidreacarbóin iomlána. Braitheadh méideanna beaga C12, C18, agus C22, áfach. Bhí leibhéil tócaifearóil ard san ola (3.36 g/kg ola), inarb é tócaifearól an phríomh-chomhpháirt agus isiméir ina dhiaidh sin. Bhí an dá chomhpháirt tócaifearóil comhdhéanta de níos mó ná 87 faoin gcéad den ábhar iomlán vitimín E san ola. Ina theannta sin, braitheadh c- agus d-tócaifearóil méideanna beaga san ola arbh ionann é agus 14-16 faoin gcéad den ábhar iomlán vitimín E. Beidh an t-eolas a sholáthróidh an obair seo ríthábhachtach maidir le feidhmchláir bhia agus ceimileacanóimeCistanchepelypaea.

Eochairfhocail: Cistanchepelypaea, Ola, Aigéid sailleacha, Stéaróil, Hidreacarbóin, Tócaifearóil

cistanche deserticola d

Cliceáil chun sliocht Cistanche chun sochair do tháirgí Cistanche

1 Réamhrá

Cuimsíonn an ghéineas Cistanche a bhaineann leis an teaghlachOrobanchaceae 16 speiceas. Cruthaíonn siad grúpa thar a bheith tarraingteach de pharasítí fréamhacha phanerogamic.Tá tarlú an ghéineas teoranta do réigiúin áirithe agus leath-thirim san Afraic, san Áise, agus sa limistéar Meánmhara lena n-áirítear codanna de dheisceart na hEorpa. Is ionann an teaghlach Orobanchaceae agus Cistanche dhá ghlúin agus Orobanche. Léirítear an ghéineas Cistanche san Éigipt ag trí speiceas, eadhon C. phelypaea (Fíor 1), C. tubulosa, agus C. violacea de réir Tackholm (1974). Cuirtear go leor úsáidí inite agus íocshláinte i leith an ghéineas seo. Úsáidtear gléasra iomlán Cistanche tubulosa go míochaine sa Phacastáin mar leigheas ar bhuinneach agus ar chnuic (Kobayashi et al. 1987). Is féidir shoots agus gais de speicis Cistanche a úsáid le haghaidh feidhmeanna bia agus asa tonic i leigheas traidisiúnta Síneach le haghaidh easnamh na duáin. Ina theannta sin, baintear úsáid as mothaithe forfhuar sna leoin agus sna glúine, sterility baineann, agus constipation de bharr triomacht an bputóg sa seanaoise (Mabberley 1997; Namba 1994). Cuimsíonn an ghéineasOrobanche (Orobanchaceae) thart ar 100 speiceas de phlandaí holoparasitic. Mhol Beack-Mannagetta (1930) aicmiú subgeneric den ghéineas i gceithre chuid: Gymnocaulis Nutt., Myzorrhiza(Phil.) Beck., Trionychen Wallr. agus Osproleon Wallr. Sa lá atá inniu ann tugtar seict ar an dara ceann. Orobanche de réir rialacha an Chóid Idirnáisiúnta um Ainmníocht Luibheolaíoch (Greuter 1988). Tuairiscíodh go leor gníomhaíochtaí bitheolaíocha do roinnt speiceas den teaghlach seo lena n-áirítear gníomhaíochtaí frithmhiocróbacha, frith-athlastacha (Endo et al. 1982), antispasmodic, scíthe matán mín (El-Shabrawy et al. 1989), agus gníomhaíocht charda (Pennacchio et al. 1969). Ina theannta sin, itheann Orobanche, cosúil le asparagus, mar a luaigh Rubiales et al le déanaí. (1999).

Fíor 1 Is ball den teaghlach broomrape (Orobanchaceae) é an planda iontach ach tá cruth lúipíní air, bláthanna cúig lúibín agus dhá liopaí, agus féadann sé fás leath mhéadar ar airde

Tá roinnt comhábhar sa phlanda lena n-áirítear gliocóisídí feinileatánóideach (ar a dtugtar uaireanta feinilpropanoids), iridoids (Xiong et al.1996), agus polaisiúicrídí (Naran et al. 1995). Cinneadh agus aithníodh taimínaigéid inCistanche solesa (Jiao et al. 1989). Tuairiscíodh aigéad sailleach agus rinneadh imscrúdú le déanaí ar chomhdhéanamh tócchromanóil i síolta an teaghlaigh Orobanche (Velasco et al. 2000). Eolas ar chomhdhéanamh lipid deCistanchepelypaea, áfach, níl sé leordhóthanach agus tá na sonraí atá ar fáil neamhiomlán. Sa staidéar reatha, rinneamar anailís ar an ngléasra iomlán, chun tOllamh faisnéiseach a fháilile de na lipidí iCistanchepelypaeaa bheidh mar bhonn d'imscrúdú ceimiceach mionsonraithe agus luacháil chothaitheach an luibh.

2 Ábhair agus modhanna

2.1 Ábhair

Na plandaí fiáine iomlán deCistanchepelypaeaa bailíodh ó Shíonái Theas (an Éigipt) le linn Aibreán 2008.D'fhíordheimhnigh an tOllamh Dr. El Hadidy, Dámh na hEolaíochta, Ollscoil Cairo, an Éigipt, na plandaí go cineálta. Coinníodh eiseamail luibhiam ag Roinn na Bithcheimice Talmhaíochta, Dámh na Talmhaíochta, Ollscoil Zagazig. Ceannaíodh caighdeáin a úsáidtear le haghaidh tréithriú stéaróil, colaistéaról, b-sitosterol, stigmasterol, lanosterol, ergosterol, campesterol, D5-avenasterol, agus D7-avenasterol ó Supelco (Bellefonte, PA, USA). Ceannaíodh caighdeáin a úsáidtear chun vitimín E (a-, b-, c-, agus d-tócaifearóil) a thréithriú ó Merck (Darmstadt, an Ghearmáin). Bhí na himoibrithe agus na ceimiceáin go léir a úsáideadh den íonacht ab airde a bhí ar fáil.

Cistanche phelypaea

2.2 Modhanna

2.2.1 Asbhaint iomlán lipidí (TL)

Triomaíodh plandaí slán agus talamh. Baineadh na lipidí iomlána trí éitear peitriliam ag 60–80 C ag baint úsáide as gaireas Soxhlet. Galú an tuaslagóir todryness ar evaporator rothlach ag 40 brú underreduced.

2.2.2 Anailís crómatagrafaíocht leacht gháis ar eistir sailleacha aigéidmeitile

Aistríodh aigéid shailleacha isteach i eistir mheitile trí théamh i mbóróntrifluairíd (tuaslagán 10 faoin gcéad i meatánól, Merck, Darmstadt, an Ghearmáin) de réir an nós imeachta a thuairiscigh Metcalfe et al. (1966). Aithníodh eistir meitile fattyacid (FAME) ar aShimadzu GC-14A atá feistithe le brathadóir ianaithe lasair agus comhtháthóir crómatapac C-R4AX (Kyoto, an tSeapáin). Ba é ráta sreafa an gháis iompróra (héiliam) ná 0.6 mL/nóim agus úsáideadh an luach scoilte le cóimheas 1:40. Instealladh sampla de 1 lL ar cholún ribeach a30 m 9 0.25 mm 9 0.2 g tiús scannáin Supelco SPM-2380 (Bellefonte, PA, SAM). Socraíodh teocht an insteallta agus an bhrathadóra ag 250céime.Ba é 100 teocht an cholúin tosaighcéimeríomhchláraithe ag 5céime/nóiméad go dtí 175 céim agus coinnithe ar feadh 10 nóiméad ag 175céime, ansin 8céime/nóiméad go dtí 220céimeagus choinnigh sé 10 nóiméad ag 220céime. Rinneadh comparáid idir amanna coinneála na samplaí agus na hamanna de mheascán barántúil (Sigma, St. Louis, MO, SAM; íonachta 99 faoin gcéad go sonrach le haghaidh GLC), arna rith ar an gcolún céanna faoi na coinníollacha céanna, chun é a éascú. Rinneadh cainníochtú gach aigéid shailligh trí bhuaic-achar a eistear meitile a chur i gcomparáid le neamhdhéanóáit meitile gan aon fhachtóir ceartúcháin a chur i bhfeidhm.

2.2.3 Anailís crómatagrafaíocht gháis-leachtach ar stéaróil

Rinneadh deighilt stéaróil (ST) tar éis na samplaí ola a shannadh (Ramadan agus Morsel 2002a). Tar éis aicéatáit colaistéaról (1.5 mg; Sigma, MO, SAM) a chur leis mar chaighdeánlipid inmheánach (250 mg) rinneadh tóireadóirí a aife le tuaslagán ethanolic KOH 5 mL (6 faoin gcéad , w / v) agus cúpla gráinníní frith-chaptha ar feadh 60. nóim. Ar dtús, baineadh na neamhshamhlaithe trí huaire le héitear peitriliam 10 ml. Cuireadh na sleachta le chéile agus nite trí huaire le 10 ml d'eatánól neodrach / uisce (1:1, v / v) a thriomú ansin thar oíche le sulfáit ainhidriúilsóidiam. Galú an sliocht i evaporator arotary ag 25 céim faoi bhrú laghdaithe, agus ansin bhí an tuaslagóir galú go hiomlán faoi nítrigin. Rinneadh anailís chrómatagrafaíochta gháis nach bhféadfaí a chur in oiriúint trí úsáid a bhaint as Sraith Mega (HRGC 5160, Carlo Erba Strumentazione; Milan, an Iodáil) a bhí feistithe le FID. Ba é ID chéim DB 5 an colún, pacáilte le 5 faoin gcéad phenylmethyl polysiloxane (J&W eolaíoch; Falsom, CA, SAM), fad 30 m, tiús scannáin 0.25 mm id1.0 bioráin le gás iompróra (héiliam) ráta sreafa 38 mL / min agus scoilte instealladh. Socraíodh an brathadóir agus an t-instealladh ag 280céime. Coinníodh teocht an oigheann seasmhach ag 310céimeagus ba é 2 lL an toirt instealladh. Cuireadh gach homalóg ST taobh istigh de 45 nóiméad agus socraíodh anailís iomlán ag 60 nóiméad chun réiteach gach ST a chinntiú. Rinneadh cainníochtú na gcomhdhúile stéaróil le caighdeán inmheánach aicéatáit colaistéaróil agus ríomhadh é trí fhreagra braite sitosterol a chur i bhfeidhm. Rinneadh tástáil ar in-atrialltacht an nós imeachta anailíse agus rinneadh an diall caighdeánach coibhneasta de thrí anailís arís agus arís eile ar shampla aonair.<5 %.="" quantitative="" analyses="" were="" performed="" with="" a="" shimadzu="" (c-r6a="" chromatopac;="" kyoto,="" japan)="">

2.2.4 Anailís crómatagrafaíochta gás-leachtach ar Hidreacarbóin

2.2.4.1 Socraíodh ullmhú ábhar neamhshonraithe de réir an téama a bhfuil cur síos air in AOAC (2000). Rinneadh meáchan ar a dtugtar an ola (5 g) a thuaslagadh in eatánól (30 mL), ansin cuireadh 1.5 ml alcólach KOH (50 faoin gcéad ) leis. Sábháladh an ola ar dhabhach uisce ar feadh 30 nóiméad faoi chomhdhlúthadán aer aife. Díríodh an tuaslagán alcóil agus aistríodh é go cainníochtúil isteach i dtonnadóir deighilte ag baint úsáide as iomlán d'uisce driogtha 50 ml agus éitear peitriliam 50 ml. Baineadh an t-ábhar neamhshamhraithe trí huaire le héitear peitriliam, é a ní arís agus arís eile le huisce driogtha sulfáit sóidiam ró-ainhidriúil triomaithe, agus ansin scagtha isteach i bhfleascán meáite. Galú an tuaslagóir le dabhach uisce fiuchta agus triomaíodh an fleascán ag 105céimego dtí gur thángthas ar mheáchan leanúnach.

2.2.4.2 Anailís ar hidreacarbóin ag GLC Sainaithníodh comhdhúile hidreacarbóin trí úsáid a bhaint as crómatagraf gáis PYEUNICAM PRO-GC a bhí feistithe le brathadóir ianúcháin lasrach (FID). Ba é an colún a úsáideadh chun an t-ábhar doshéanta a dheighilt ná (OV-17)1.5 m 9 4 mm id colún ribeach shilice comhleáite atá brataithe le sreabhán meitile feinile silicone. Rinneadh na coinníollacha crómatagrafaíochta seo a leanas: Cóimheas scoilte 1: 200, méid an tsampla 1 mL, nítrigin gáis iompróra ag sreabhadh 1 mL/nóim, teocht insteallta250céime, oigheann cláraithe ó 70céimego 270céimeag5céimeeatraimh /min ina dhiaidh sin 20 nóim ag 270céime, ba é an teocht braite ná 300céime; ráta sreafa nítrigine gáis cúnta (comhdhéanamh braite) ag 30 mL/nóim, bhí rátaí hidrigine agus sreafa aeir 33 agus 330 mL/nóim, faoi seach. Tomhaiseadh na buaiclimistéir ag baint úsáide as comhtháthóir Hewlett-Packard 3392.

phenylethanoid glycosides in Cistanche deserticola

2.2.5 Anailís leachtchromatagrafaíocht ardfheidhmíochta gnáthchéime (NP-HPLC) ar thócaifearóil

2.2.5.1 Nós Imeachta Roghnaíodh NP-HPLC chun cóireáil bhreise samplach a sheachaint (eg, saponification). Rinneadh anailís le LC seachadta tuaslagóra-9A HPLC (Shimadzu, Kyoto, an tSeapáin). Áiríodh sa chóras crómatagrafach samhail 87.00 brathadóir tonnfhad athraitheach agus colún 250 9 4 mm id LiChrospher-Si 60, 5 lm (Knauer, Beirlín, an Ghearmáin). Bhí deighilt na gcomhpháirteanna go léir bunaithe ar elution isocratach nuair a coinníodh ráta sreafa an tuaslagóra ag 1 ml/nóim ag cúlbhrú colúin de thart ar 65–70 barra. Ba é an córas tuaslagóra a roghnaíodh le haghaidh leachtú tócaifearóil ná aicéatáit isea-octan/eitile (96:4, v/v) le braite ag 295 nm. Instealladh díreach isteach sa cholún HPLC 20 lL den tuaslagán caolaithe TL sa chéim shoghluaiste roghnaithe. Sainaithníodh tócaifearóil trína n-amanna coinneála a chur i gcomparáid leo siúd a bhain le caighdeáin bharántúla.

2.2.5.2 Cuar caighdeánach a ullmhú Ullmhaíodh réitigh chaighdeánacha tócaifearóil trí chaolú sraitheach go dtí an tiúchan de thart ar 5 mg/mLof vitimín E. Ullmhaíodh tuaslagáin chaighdeánacha go laethúil ó stoc- thuaslagán a bhí stóráilte sa dorchadas ag-20 C. 20 Instealladh lL agus socraíodh limistéir bhuaic chun sonraí cuar caighdeánach a ghiniúint.

2.2.5.3 Cainníochtú Rinneadh an chainníochtú go léir trí bhuaic-achar a thomhas agus úsáid á baint as comhtháthóir croinópach ShimadzuC-R6A (Kyoto, an tSeapáin). Rinneadh cuair chaighdeánacha (tiúchan in aghaidh buaiclimistéir) a ríomh ó shé leibhéal tiúchana trí aischéimniú líneach. Bunaithe ar na coinníollacha crómatagrafaíochta bunaithe, rinneadh instealltaí arís agus arís eile de thiúchan difriúla de na tócaifearóil chaighdeánach ar an gcóras HPLC trí huaire. Cuireadh an obair ar fad i gcrích faoi choinníollacha solais báite. Is meánluachanna iad na torthaí go léir a chuirtear i láthair i dtrí thurgnamh ar a laghad, nach bhfuarthas aon difríocht shuntasach staitistiúil (P [0.05) i measc na dturgnamh.

3 Torthaí agus plé

Tá sonraí maidir le comhdhéanamh lipid an ghéineasOrobanche gann. Fuarthas amach go raibh lipidí iomlána a bhaintear as planda iomlán Orobanche 10 g/kgn ar bhonn meáchain thirim. Is é seo an chéad uair chun staidéar a dhéanamh ar phróifíl thelipid den ghéineas Orobanche.

3.1 Comhdhéanamh aigéid shailligh

Tá achoimre ar na sonraí faoi chomhdhéanamh cáilíochtúil agus cainníochtúil aigéid shailleacha i dTábla 1.I measc na lipidí iomlána atá i láthair saCistanchepelypaea, léiríonn an phróifíl aigéid shailligh na lipidí mar fhoinse maith don aigéad linóleic riachtanach ó thaobh cothaitheach de, ina raibh an cóimheas idir aigéad oiléach agus aigéad linóleic thart ar 3:2. Ba é aigéad oiléach (28.1 faoin gcéad) an t-aigéad sailleach ceannasach agus aigéad phailmít ina dhiaidh (25.0 faoin gcéad) agus aigéad linóleic (16.6 faoin gcéad ). Tá Aurand et al. (1987) go bhfuil luach cothaitheach aigéid linóleic mar gheall ar a mheitibileacht ag leibhéil fíocháin a tháirgeann prótaglandiní cosúil le hormón. Áirítear le gníomhaíocht na prostaglandins seo brú fola a ísliú agus matán mín a shrianadh. Aigéid shailleacha neamhsháithithe ab ea formhór na n-aigéid shailleacha (50.4 faoin gcéad d'aigéid shailleacha iomlána), agus b'ionann aigéid shailleacha sháithithe (aigéad pailmiteach go príomha) thart ar 43.2 faoin gcéad de na haigéid shailleacha iomlána. Déanann an comhdhéanamh aigéid sailleacha agus méideanna ard aigéid shailleacha neamhsháithitheCistanchepelypaealuibh speisialta atá oiriúnach le haghaidh iarratais chothaithe.

table 1

3.2 Comhdhéanamh stéaróil agus hidreacarbóin

Soláthraíonn an anailís ar na stéaróil saor in aisce faisnéis shaibhir maidir le cáilíocht agus céannacht an ola a ndearnadh imscrúdú air. I olaí seasta, níor aimsíodh go n-athródh saothrú línte nuaphóraithe ná fachtóirí comhshaoil ábhar agus comhdhéanamh na stéaróil saor in aisce go suntasach i gcodarsnacht leis an gcomhdhéanamh aigéid shailligh, a athraíodh go mór trí chláir phóraithe (Lechner et al. 1999; Ramadanet al. 2006) . Ina theannta sin, is éard atá i stéaróil an chuid is mó díobh nach féidir a shamhlú i go leor olaí. Is díol spéise iad mar gheall ar a dtionchar ar shláinte. Le déanaí, cuireadh stéaróil le olaí glasraí mar shampla de bhia feidhmiúil rathúil (Ntanios 2001; Ramadanet al. 2009). Tá an cineál seo táirge ar fáil anois agus tá sé cruthaithe go heolaíoch go laghdaítear colaistéaról LDL san fhuil thart ar 10-15 faoin gcéad mar chuid d’aiste bia folláin (Jones et al. 2000). Ábhar agus comhdhéanamh an chuid is mó de na stéaróil iCistanchepelypaeatá an ola léirithe i dTábla 2. Measadh leibhéil arda stéaróil san ola, a bhí comhdhéanta de 29.4 g/kg oil.b-sitosterol, D7-avenasterol, stigmasterol agus D5-ave nasterol na príomh-chomhpháirteanna . Ba é b-sitosterol an príomh-chomhpháirt a bhí mar ionadaí. 77.4 faoin gcéad den ábhar stéaróil iomlán. Bhí comhpháirteanna eile, m.sh. stigmasterol, D7-avenasterol, agus D5-avenasterol, i láthair ag méideanna comhionanna thart ar (6-9 faoin gcéad de na stéaróil iomlán).

table 1

Próifíl hidreacarbóin naCistanchepelypaeaa mheas trí úsáid a bhaint as crómatagrafaíocht gás-leachtach san ábhar do-mhínithe agus cuirtear i láthair é i dTábla 3. Ba iad na príomh-chomhdhúile a aithníodh ná C21, C26, agus C32 arb ionann iad le chéile agus thart ar 61.2 faoin gcéad de hidreacarbóin iomlánaithe. Braitheadh méideanna beaga C12, C18, agus C22 freisin san ábhar nach féidir a chur ar fáilCistanchepelypaea. D’fhéadfadh go mbeadh luach ag pictiúr na hidreacarbóin i gceimeatacsanomaíocht na bplandaí.

table 3

3.3 Comhdhéanamh tócaifearóil

Feabhsaíonn comhpháirteanna cothaitheacha ar nós tócaifearóil (vitimín E) cobhsaíocht olaí. Tá achoimre ar shonraí faoi chomhdhéanamh cáilíochtúil agus cainníochtúil vitimín E i dTábla 4. Baineadh úsáid as teicníc NP-HPLC chun deireadh a chur le fadhbanna éillithe colúin agus chun úsáid a bhaint as eastóscadh ginearálta lipid le haghaidh scaradh tócaifearóil a cheadú (Ramadan andMo¨rsel 2002b, 2003). Inár staidéar, ní raibh gá le saponification samplaí ola, rud a cheadaigh am anailíse níos giorra agus cobhsaíocht vitimín níos mó le linn anailíse. Aithníodh gach díorthach tócaifearóil sa dá shampla. Bhí leibhéil Vitimín E ard san ola (3.35 g/kg). Ba é b-tócaifearóil an príomh-chomhpháirt agus a-tócaifearól ina dhiaidh sin. Bhí níos mó ná 87 faoin gcéad den chion iomlán vitimín E san ola ag an dá isiméirí tócaifearóil. braitheadh c- agus d-tócaifearóil i méideanna beaga san ola arbh ionann é agus 14-16 faoin gcéad den ábhar iomlán vitimín E. D'fhéadfadh leibhéil arda vitimín E a bhraitear sna holaí cur leis an gcobhsaíocht iontach i dtreo ocsaídiúcháin.

table 4

4 Conclúid

Is dócha go dtiocfaidh méadú ar an treocht i dtreo comhábhair nádúrtha agus táirgí a chothaíonn sláinte. Beidh na sonraí a gheofar tábhachtach mar léiriú ar áirgiúlacht chothaitheach agus eacnamaíoch a d’fhéadfadh a bheith annCistanchepelypaea. Cistanchephelypaeasoláthraítear táirgeacht íseal ola ach is foinse shaibhir é d’aigéid shailleacha riachtanacha, stéaróil, agus vitimíní intuaslagtha saille.