Airíonna Frith-tyrosinase de Speicis Éagsúla Turmeric agus Leithlisiú Comhdhúile Gníomhacha Ó Curcuma Amada

Jesmin Akter1 ● Md. Zahorul Islam1,2 ● Md. Amzad Hossain1 ● Kensaku Takara1

1 Dámh na Talmhaíochta, Ollscoil Ryukyus, Okinawa, an tSeapáin

2 An Roinn Cógaseolaíochta, Dámh na hEolaíochta Tréidliachta, Ollscoil Talmhaíochta Bhanglaidéis, Mymensingh, An Bhanglaidéis

Le haghaidh tuilleadh eolais:Scotty.Wang@wecistanche.com

Teibí

Úsáidtear Turmeric go traidisiúnta mar chosmaid craiceann i roinnt ócáidí reiligiúnacha agus cultúrtha ar fho-ilchríoch na hIndia. Sa staidéar seo, rinneamar comparáid idir na hairíonna coisctheacha tyrosinase de cheithre Curcuma spp., eadhon, C. xanthorrhiza, C. aramatacha, C. amada, agus C. zedoaria. Leithlisiú agus íonú faoi threoir bithmheasúnaithe ar choscóirí tyrosinase ag baint úsáide as colún glóthach shilice agus crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta. Rinneadh sainaithint struchtúrach na gcomhdhúile ag baint úsáide as 1 H NMR, 13C

NMR, agus crómatagrafaíocht leachtach-speictriméadracht i gcomhar. Léirigh C. amada an ghníomhaíocht coisctheach tyrosinase ab airde, le IC50 de 53.4 ug/mL. Dá bhrí sin, roghnaíodh é le haghaidh aonrú agus íonú coscairí tyrosinase. Ba iad na comhdhúile íonaithe ná zederone (1), furanodienone (2), 1,5-epocsa-3-hiodrocsa-1-(3,4-dé-hiodrocsa-5-methocsafheinile){ {13}}(4-hiodrocsafheinile) heiptín (3), 3,5-dé-hiodrocsa-1-(3,{20}}dé-hiodrocsafeinil)-7-({{22) }}hiodrocsa-3-meitiocsafheinile) heiptín (4) agus 1,5- eapocsa 3-hiodrocsa-1-(3,4-dé-hiodrocsa-5-meitiocsafheinile) -7-(4-hiodrocsa-3-meitiocsaifeinil) heipitín (5). Na luachanna IC50 don muisiriúnfrith-tyrosinaseba é gníomhaíocht na gcomhdhúile 1, 2, 3, 4, agus 5 ná 108.2, 89.2, 92.3, 21.7, agus 41.3 µM, faoi seach. Chuir na comhdhúile seo bac freisin ar ghníomhaíocht tyrosinase intracellular, rud a laghdaigh sintéis melanin i gcealla melanoma B16F10. Léirigh cumaisc 4 go suntasach níos láidrefrith-tyrosinasegníomhaíocht ná gníomhaíocht arbutin (druga rialaithe dearfach). Níor tugadh faoi deara aon difríocht shuntasach san éifeacht coisctheach tyrosinase idir cumaisc 5 agus arbutin. Tugann ár dtorthaí le fios go láidir gur foinse tuar dóchais inti é C. Amanda de choscóirí tyrosinase nádúrtha chun melanogenesis a chosc agus go bhféadfaí é a úsáid mar chosmaidí whitening.

Eochairfhocal: Curcuma amada ● Comhdhúile gníomhacha ● NMR ● Frith-tyrosinase ● Antimelanogenic

Click to Cistanche le haghaidh frith-tyrosinase

Réamhrá

Is é melanin an lí dubh sa ghruaig agus sa chraiceann agus tá sé riachtanach chun an craiceann a chosaint ar radaíocht UV. Déantar an lí a tháirgeadh trí chealla melanocyte, atá i láthair i gciseal basal an deirm trí phróiseas fiseolaíoch ar a dtugtar melanogenesis. Mar sin féin, is cúis le táirgeadh neamhghnácha melanin neamhoird dermatological cosúil le freckles, melasma, lentigines, spotaí aoise, epeliides, agus hyperpigmentation postinflammatory [1]. I dtionscal an bhia, mar thoradh ar hyperpigmentation torthaí agus glasraí, caillteanais shuntasacha ar cháilíocht chothaitheach agus luach margaidh [2]. Is féidir Melanogenesis a rialú trí ghníomhaíocht tyrosinase a chosc, einsím a theorannú ráta do shintéis melanin i mamaigh, plandaí, miocrorgánaigh agus fungais [3]. Dá bhrí sin, cuireann cosc ​​ar ghníomhaíocht tyrosinase cosc ​​​​ar hyperpigmentation agus mar thoradh ar whitening craicinn. Rialaíonn sé freisin cáilíocht glasraí agus torthaí trí dhonnú neamh-inmhianaithe glasraí agus bia a rialú. Is coscairí tyrosinase potent iad an chuid is mó de ghníomhairí éadromaithe craiceann, mar shampla hidroquinone, aigéad azelaic, aigéad kojic, agus arbutin. Mar sin féin, tá éifeachtaí neamh-inmhianaithe éagsúla acu mar cíteatocsaineacht, ochronosis, vitiligo, greannú, feannadh craiceann, agus deargadh [4]. Thairis sin, léiríonn aigéad kojic agus -arbutin droch-chobhsaíocht foirmithe agus cumas treá craiceann, agus éifeachtacht íseal in vivo [5]. Tá éifeachtaí frith-melanogenic ag roinnt salainn mearcair orgánacha agus neamhorgánacha agus úsáidtear iad i ngníomhairí bánú craiceann. Mar sin féin, trí ionsú cutaneous, is féidir le comhdhúile mearcair a bheith ina chúis le héifeachtaí tocsaineacha cosúil le dídhathú craicinn, damáiste duáin, frithghníomhú ailléirgeach, agus scarring [6]. Mar sin, tá gá le himscrúdú ar choscóirí tyrosinase nach bhfuil chomh tocsaineach agus níos éifeachtaí. Tá speictream leathan feidhmeanna cógaseolaíochta ag Turmeric (teaghlach: Zingiberaceae; ghéineas: Curcuma), planda íocshláinte traidisiúnta a fhásann go príomha i réigiúin trópaiceacha agus fothrópaiceacha na hÁise agus na hAfraice. Tá sé in úsáid go traidisiúnta i deasghnátha réamh-pósta ar feadh na mílte bliain i bhfo-roinne Indiach mar ghníomhaire lightening craicinn. Creidtear go bhfeabhsaítear turmeric casta craiceann trí fhás gruaige aghaidhe, acne, agus dul in aois craiceann [7, 8] a laghdú. Dá bhrí sin, tá táirgí cúraim craicinn arna bhforlíonadh le turmeric ar fáil ar bhonn tráchtála ar an margadh [9]. Sainaithníodh níos mó ná 70 speiceas/cineál turmeric a bhfuil airíonna ceimiceacha agus cógaseolaíochta éagsúla acu. Mar sin féin, tá easpa faisnéise eolaíocha ann maidir le hairíonna frith-melanogenic speiceas éagsúla turmeric agus na comhpháirteanna gníomhacha a d'fhéadfadh a bheith i láthair i turmeric. Is iad curcuminoids na príomh-chomhdhúile gníomhacha atá freagrach as formhór na ngníomhaíochtaí bitheolaíocha turmeric. Curcuminoids bhfuil acmhainneacht i cosmeceuticals marfrithocsaídeach, frith-athlastach,agus gníomhaire éadromaithe craicinn [7, 8]. Mar sin féin, i staidéar roimhe seo, fuair muid éagsúlachtaí suntasacha in ábhar curcuminoid i turmeric, agus ní raibh fiú curcumin ag roinnt speiceas (C. amada, C. zedoaria) [10]. Thugamar tuairisc freisin ar an antifungal,frithocsaídeach, agus gníomhaíochtaí vasodilatory de speicis éagsúla agus cineálacha turmeric [10-13]. Dá bhrí sin, bhí sé mar aidhm ag an staidéar seo meastóireacht a dhéanamh ar éifeachtaí speicis éagsúla turmeric, eadhon, C. xanthorrhiza, C. aromatica, C. amada, agus C. zedoaria, ar an einsím tyrosinase agus chun na comhdhúile ceimiceacha sonracha atá freagrach as nafrith-tyrosinaseghníomhaíocht. Rinneamar meastóireacht freisin ar ghníomhaíocht coisctheach tyrosinase agus ar éifeachtaí frith-melanóigineacha de chomhdhúile gníomhacha íonaithe ar shintéis melanin i gcealla melanoma B16F10.

Torthaí agus plé

I measc na gceithre speiceas turmeric éagsúla, léirigh sliocht MeOH de C. amada an éifeacht coisctheach uasta tyrosinase muisiriún le luach IC50 de 53.4 ± 2.7, agus ina dhiaidh sin C. xanthorrhiza, C. aramatacha, agus C. zedoaria (Fíor 1a). Is é Curcumin an príomh-chomhpháirt ghníomhach de turmeric (Curcuma longa) agus tá raon leathan gníomhaíochtaí bitheolaíocha aige, lena n-áirítear gníomhaíochtaí frith-ailse, frith-athlastach, frith-baictéarach, frith-fhungacha agus frithocsaídeacha. Thaispeáin sé 75-gníomhaíocht fhrith-tyrosinase níos láidre ná mar a bhí arbutin agus aigéad kojic [14]. Mar sin féin, i staidéar roimhe seo, thuairiscigh muid go raibh éagsúlachtaí suntasacha in ábhar curcumin i speicis éagsúla turmeric [10].

Bhí Curcumin i láthair i C. xanthorrhiza agus C. aramatacha ach as láthair i C. zedoaria agus C. amada [10]. Is iad torthaí suimiúla an staidéir seo ná, gan curcumin, léirigh C. amada gníomhaíocht choisctheach láidir tyrosinase. Léiríonn an toradh seo go gcaithfidh go bhfuil roinnt comhdhúile gníomhacha de C. amada curtha i leith a éifeacht láidir frith-tyrosinase. D'fhéadfadh gníomhaíocht frith-tyrosinase C. xanthorrhiza agus C. aromatica a bheith mar gheall ar a n-ábhar curcumin. Mar sin féin, níorbh fhéidir linn a chur as an áireamh an fhéidearthacht go mbeadh comhdhúile eile i láthair. Rinneadh sliocht MeOH de C. amada a chodánú le huisce, n-heacsán, agus EtOAc. I measc na dtrí chodán seo, léirigh EtOAc éifeacht coisctheach i bhfad níos láidre ná uisce agus n-heacsán (Fíor 1b). Dá bhrí sin, glacadh an chuid EtOac le haghaidh codáin bhreise. Na gníomhaíochtaí frith-tyrosinase de sé chodán [n-heacsán:EtOAc; 100:0 (F1), 80:20 (F2), 60:40 (F3), 40:60 (F4), 20:80 (F5), agus 0:100 (F6)] faighte ón gcuid EtOAc de C. amada a chur i gcomparáid. I measc na sé chodán, léirigh F6 agus F3 gníomhaíocht frith-tyrosinase i bhfad níos airde ná na cinn eile (Fíor 1c). Ansin aithníodh struchtúir cheimiceacha na gcúig chomhdhúil ó chodáin F3 agus F6 de réir a speictrim 1 H NMR agus 13C NMR. Seo a leanas na sonraí buaic:

Comhdhúil 1:

Criostail cruth snáthaid gan dath; UV λmax: nm 234, 285. ESI-MS ( móide ) m/z: 247.3 [M móide H] móide , 229.4 [M móide H-H2O] móide . 1 H-NMR (CD3OD): δ 7.22 (1H, s, H-12), 5.59 (1H, br d, J=12 Hz, H{{20}}) , 3.99 (1H, s, H{-5), 3.85 (1H, d, J=16 Hz, H-9a), 3.69 (1H, d, J=16 Hz, H-9b), 2.57 (1H, dddd, J=13, 13, 12, 4 Hz, H-2a), 2.26 (1H, m, H{{46 }}a), 2.20 (1H, m, H{{50}}b), 2.09 (3H, s, H-13), 1.57 (3H, s, H-15), 1.32 (1H, ddd, J=13, 13, 4 Hz, H-3b), 1.28 (3H, s, H-14). 13C-NMR (CD3OD): δ 194.2(C-6) 160.2(C-8), 139.7(C12), 132.8 (C-1), 132.0(C-10) ), 124.3(C-11), 123.0(C-7), 67.8(C-5), 65.2(C-4), 42.5(C-9 ), 39.0(C-3), 25.4(C-2), 15.7 (C-15), 15.4(C-14), 10.7(C-13 ) (Sonraí Forlíontacha). Ó chomparáid na sonraí seo leis na cinn a tuairiscíodh sa litríocht [15, 16], aithníodh an tsubstaint mar zederone (Fíor 2). Is sesquiterpene é, a bhí scoite amach roimhe seo ó C. amada agus C. zedoaria agus tá sé tuairiscithe mar gheall ar a éifeachtaí analgesic, frith-athlastacha, frith-fhungacha agus citotocsaineacha [12, 17-20].

Comhdhúil 2:

Ola gan dath; UV λmax: nm 243, 280. ESIMS ( móide ) m/z: 231.0 [M móide H] móide , 223.3 [M móide H-H2O] móide . 1 H-NMR (CD3OD): δ 7.16 (1H, s, H-12), 5.83 (1H, s, H-5), 5.21 (1H, dd, J=12 Hz , 5 Hz, H-1), 3.73 (1H, d, J=16 Hz, H-9a), 3.63 (1H, d, J=16 Hz, H -9b), 2.45 (1H, dddd, J=15 Hz, 11 Hz, 4 Hz, H-3a), 2.31 (1H, m, H-2a ), 2.20 (1H, dddd, J=12 Hz, 12 Hz, 12 Hz, 4 Hz, H-2b), 2.06 (3H, s, H{{57} }), 1.92 (3H, s, H-14), 1.89 (1H, m, H-3b), 1.25 (3H, s, H-15). 13C-NMR (CD3OD): δ 191.8 (C-6), 158.6 (C-8), 147.6 (C-4), 140.0 (C-12), 136.1 ( C-10), 133.3 (C-5), 132.0 (C-1), 124.6 (C-11), 123.1 (C-7), 42.4 ( C-9), 41.4 (C-3), 27.3 (C-2), 19.3 (C-14), 15.9 (C-2), 9.9 ( C-13) (Sonraí Forlíontacha). Ó chomparáid na sonraí seo leis na cinn a tuairiscíodh sa litríocht [21], aithníodh an tsubstaint mar furanodienone (Fíor 2). Bhí sé scoite amach ó Lindera pulcherrima (Nees.) Benth. sean duán. f [22], Curcuma zedoaria [19], Curcuma amada [12] agus Curcuma wenyujin [23]. Is furanosesquiterpenoid é a thaispeánann gníomhaíochtaí frith-fhungacha [12], frith-athlastach [19], frith-ailse [24], frith-baictéarach agus frith-oxidant [22].

Comhdhúil 3:

ola buí; UV λ max: nm 275. ESIMS ( móide ) m/z: 383.3 [M móide Na] móide , 361.3 [M móide H] móide , 343.2 [M móide H-H2O] móide . 1 H-NMR (CD3OD): δ 6.99 (2H, dd, J=9, 2 Hz, H-2’´, -6´´), 6.67 (2H, d, J=9 Hz, H-3’´, -5´´), 6.52 (2H, s, H-2´, -6´), 4.63 (1H , br b, J=12 Hz, H-1), 4.21 (1H, m, H-3), 3.89 (1H, m, H{-5), 3.85 ( 3H, s, 5´-OCH3), 2.63 (2H, m, H-7), 1.82 (1H, m, H{343a), 1.78 (1H, m, H{{6{ {107}}}}a), 1.73 (1H, m, H{-2b), 1.69 (1H, m, H{-4a), 1.68 (1H, m, H{{72} }b), 1.53 (1H, m, H-4b). 13C-NMR (CD3OD): δ 156.3 (C-4’´), 149.5 (C-5’), 146.4 (C-3’), 134.5 (C-4 ´), 134.44 (C-1´), 134.41 (C-1´´´), 130.4 (C-2´´, -6´´), 116.1 (C{ {104}}’´, -5’´), 108.0 (C-2’), 102.8 (C-6’), 75.2 (C-1), 72.6 ( C-5), 65.6 (C3), 56.6 (5’-OCH3), 41.1 (C-2), 39.5 (C-4), 39.2 (C-6) 31.8 (C-7) (Sonraí Forlíontacha). Ó chomparáid a dhéanamh idir na sonraí seo agus na sonraí a tuairiscíodh sa litríocht [25], aithníodh an tsubstaint mar 1, 5- eapocsa -3- hidrea -ocsaíd -1- (3, {4- dihydroxy { {145}} meatocsafheinile)-7-(4-hiodrocsafheinile) heiptáin (Fíor 2). Bhí sé scoite ó na riosóim de Zingiber officinale, agus rinneadh staidéar ar a n-airíonna frithocsaídeacha [25].

Comhdhúil 4:

Síoróip slaodach; UV λ max: nm 281. ESIMS ( móide ) m/z: 385.3 [M móide Na] móide , 363.3 [M móide H] móide , 345.2 [M móide H-H2O] móide . 1 H-NMR (CD3OD): δ 6.75 (1H, d, J=2 Hz, H-2´), 6.68 (1H, d, J=8 Hz, H{{21 }}’), 6.64 (1H, J=8 Hz, H-5’´), 6.61 (1H, J=2 Hz, H-2´´), 6.60 (1H, dd, J=8, 2 Hz, H-6´), 6.49 (1H, dd, J=8, 2 Hz, H-6´´), 3.80 (3H, s, 3´-OCH3), 3.73 (2H, m, H-3, -5), 2.64-2.47 (4H, m, H{{59 }}a, -1b, -7a, -7b), 1.71-1.65 (4H, m, H-2a, {{ 68}}b, -6a, -6b), 1.61 (2H, m, H-4a, -4b). 13C-NMR (CD3OD): δ 148.8 (C-3’), 146.1 (C-3’´), 145.4 (C{-4´), 144.2 (C-4 ´´), 135.24 (C-1´ nó C-1´´), 135.22 (C-1´ nó C-1´´), 121.8 (C{{101 }}’), 120.6 (C-6’´), 116.5 (C-2’´), 116.3 (C-5´´), 116.1 (C-5´ ), 113.2 (C-2’), 70.94 (C-3 nó C-5), 70.92 (C-3 nó C-5), 56.4 (3 ´-OCH3), 44.9 (C-4), 40.8 (C-2, -6), 32.3 (C-1), 32.1 (C-7) (Sonraí Forlíontacha). Ó chur i gcomparáid na sonraí seo leo siúd a tuairiscíodh sa litríocht [26, 27], aithníodh an tsubstaint mar ola 3, 5-dé-hiodrocsa-1-(3,4-dé-hiodrocsaifeinil){{150 }} (4-hiodrocsa-3-meitiocsafheinile) heiptín (Fíor 2). Bhí sé scoite ó na riosóim de Tacca chantrieri [26] agus Curcumalonga L. [27]. Is diarylheptanoids iad a thaispeánann gníomhaíochtaí citotocsaineacha [26] agus frith-meall [27].

Comhdhúil 5:

Ola gan dath; UV λ max nm: 279. ESI-MS ( móide ) m/z: 413.3 [M móide Na] móide , 391.3 [M móide H] móide , 373.3 [M móide HH2O] móide . 1 H-NMR (CD3OD): δ 6.76 (1H, s, H-2’´), 6.67 (1H, d, J=8 Hz, H{{20}}} ´´), 6.21 (1H, dd, J=8, 2 Hz, H-6´), 6.53 (2H, s, H-2´, -6´´ ), 4.63 (1H, br d, J=12 Hz, H-1), 4.21 (1H, m, H-3), 3.83 (3H, s, 5´-OCH3) , 3.78 (3H, s, 3-OCH3), 2.65 (2H, m, H-7), 1.84 (1H, m, H-2a), 1.79 (1H, m, H-6a), 1.74 (1H, m, H{-2b), 1.69 (1H, m, H-4a), 1,68 (1H, m, H{{ 75}}b), 1.53 (1H, m, H-4b). 13C-NMR (CD3OD): δ 149.5 (C-5’), 148.8 (C-3’´), 146.4 (C{-3´), 145.4 (C-4 ´´), 135.3 (C-1´), 135.2 (C-1´´´), 134.4 (C-4´), 121.9 (C-6´´), 116.1 (C-5´´), 113.4 (C-2´´´), 108.0 (C-2´), 102.7 (C-6´), 75.2 (C{ {121}}), 72.5 (C-5), 65.6 (C-3), 56.6 (5´-OCH3), 56.3 (3´´-OCH3), 41.2 (C{{140}) }), 39.4 (C-4), 39.3 (C-6), 32.2 (C-7) (Sonraí Forlíontacha). Ó chomparáid a dhéanamh idir na sonraí seo agus na sonraí a tuairiscíodh sa litríocht [20], aithníodh an tsubstaint mar 1, {5- eapocsa -3- hidrea -ocsaíd -1- (3, {{4- dihydroxy { {157}}methocsafheinile)- 7-(4-hiodrocsa-3-methoxyphenyl) heptanes (Fíor 2) agus níl aon fhaisnéis faoina ngníomhaíocht bhitheolaíoch. Rinneamar comhdhúile 3, 4, agus 5 a leithlisiú den chéad uair ó C. amada. Léirigh na comhdhúile go léir gníomhaíocht choisctheach i gcoinne tyrosinase muisiriún

Cúig chomhdhúil, eadhon, séidrón, fóranodienóin, 1,5-eapocsa-3-hiodrocsa-1-(3,4-dé-hiodrocsai-5-meitiocsaifeinil)- 7-( 4-hiodrocsafheinile) heiptáin, 3,5-dé-hiodrocsa-1-(3,4-hiodrocsafheinile miasúil)-7-(4-hiodrocsa-3- meatocsaifheinile) heiptín agus 1,5-epocsa-3-hiodrocsa-1-(3,4-dé-hiodrocsai-5-methocsaifeinil)- 7-({4-) heipitín hiodrocsa-3-methocsafheinile), a leithlisiú ó chodáin F3 agus F6. Léirigh na comhdhúile scoite gníomhaíocht frith-tyrosinase ar bhealach a bhí ag brath ar thiúchan. I measc na gcúig chomhdhúile, léirigh cumaisc 4 gníomhaíocht frith-tyrosinase i bhfad níos láidre ná arbutin. Ní raibh aon difríochtaí suntasacha sna héifeachtaí frith-tyrosinase idir cumaisc 5 agus arbutin (Fíor 3). Rinneadh staidéar ar éifeachtaí an chomhdhúil scoite ar inmharthanacht cheallacha ar chealla melanoma murine B16F10. Cóireáladh na cealla le tiúchan 50, 100, 200, agus 400 μM den chomhdhúil ar feadh 48 h. Níor léirigh na comhdhúile scoite éifeachtaí citotocsaineacha suas le 200 μM, áfach, breathnaíodh thart ar caoga faoin gcéad de bhásanna ceallacha i ngach cás ag tiúchan 400 μM (Fíor 4). Mar sin, úsáideadh tiúchan suas le 200 μM chun a n-éifeachtaí antyrosinase intracellular agus frith-melanogenic a mheas.

Chun gníomhaíochtaí frith-melanogenic agus frith-tyrosinase na gcomhdhúile scoite a chinneadh, rinneadh meastóireacht ar a n-éifeachtaí ar ábhar melanin agus ar ghníomhaíocht tyrosinase i gcealla melanoma B16F10. Mar a léirítear i dTábla 1, chuir ár gcomhdhúile leithlisithe bac ar ábhar melanin intracellular agus ar ghníomhaíocht tyrosinase go spleách ar dháileog. Bhí Comhdhúil 4 i bhfad níos láidre ná an druga rialaithe dearfach arbutin maidir le héifeachtaí coisctheacha melanin agus tyrosinase araon. Níor tugadh faoi deara aon difríocht shuntasach idir cumaisc 5 agus arbutin. De réir mar a fheabhsaíonn tyrosinase ceallacha táirgeadh melanin, is straitéis éifeachtach é laghdú gníomhaíochta tyrosinase chun gníomhairí frith-melanogenic a fhorbairt. Chun seo, rinneamar meastóireacht ar airíonna coisctheacha gníomhaíochta tyrosinase intracellular agus melanógenesis i gcealla melanoma B16F10. Cosúil le torthaí gníomhaíochta coisctheach tyrosinase muisiriún, cuireann na comhdhúile leithlisithe bac ar ghníomhaíocht tyrosinase intracellular agus melanógenesis ar bhealach dáileog-spleách. Mar thoradh ar éifeachtaí frith-tyrosinase na gcomhdhúile scoite a n-airíonna frith-melanogenic. Ba é ord gníomhaíochta frith-tyrosinase agus frith-melanogenic na gcomhdhúile seo cumaisc 4 > arbutin > 5 > 2 > 3 > 1. Bhí luach ríofa IC50 cumaisc 4 i bhfad níos ísle ná luach arbutin. Ba é éifeachtacht chomhdhúil 4 ná 1.9- go {5-huaire níos airde ná iad siúd de na ceithre chomhdhúil eile. Léirigh Comhdhúil 5 freisin gníomhaíocht láidir frith-tyrosinase a bhí inchomparáide le gníomhaíocht arbutin. Léirigh ár dtorthaí go bhféadfaí comhdhúile 4 agus 5 a úsáid mar choscóirí tyrosinase nádúrtha féideartha agus i gcosmaidí bánú craicinn. Tá sé molta go mbeadh baint ag strus ocsaídiúcháin le meicníocht bhunúsach ró-tháirgeadh melanin [28]. Dá bhrí sin, tá imscrúdú déanta ar an ról frithocsaídeach i raon leathan neamhoird craiceann, lena n-áirítear photocarcinogenesis nó melanoma [9]. Thuairiscigh muid féin agus daoine eile roimhe seo airíonna frith-ocsaídeacha C. amada [13, 29] a d'fhéadfadh a bheith freagrach as éifeachtaí antimelanogenic na gcomhdhúile scoite. Sa staidéar seo, bhraitheamar éifeachtaí coisctheacha na gcomhdhúile leithlis ar shintéis melanin intracellular agus gníomhaíocht tyrosinase a tharlódh de bharr -MSH. Mar sin, is féidir ár gcomhdhúile scoite a úsáid mar ghníomhairí i gcosmaidí feidhmiúla chun cóireálacha éifeachtacha craiceann-bhánú a fhorbairt.

Conclúid

Molaimid go láidir gur féidir le C. amada ról tábhachtach a bheith aige mar inhibitor tyrosinase éifeachtach. D'fhéadfaí C. amada agus a chomhdhúile bithghníomhacha a úsáid sa tionscal cosmaideacha mar ghníomhairí whitening nádúrtha, tionscal an bhia mar ghníomhairí frithdhonnúcháin, agus an réimse leighis le haghaidh cóireáil hipearpigmentation. Mar sin féin, tá gá le tuilleadh staidéir chun imscrúdú a dhéanamh ar éifeachtaí frith-melanogenic na gcomhdhúile leithlisithe i múnlaí ainmhithe.

abhair agus modhanna

Ceimiceáin

Ceannaíodh Tyrosinase ó muisiriún agus arbutin ó Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, SAM). Tháinig L-Tyrosine ó thionscail cheimiceacha íon Wako Ltd. (Osaka, an tSeapáin). Ceannaíodh meatánól (MeOH), aicéatáit eitile (EtOAc), agus n-heacsán ó Nacalai Tesque (Kyoto, an tSeapáin). Ceannaíodh glóthach shilice (63–200 μm, Kanto Chemical Co. Tokyo, an tSeapáin) agus MeOH-d4 (CD3OD, Merck KGaA, an Ghearmáin).

Ullmhúchán ábhar plandaí Saothraíodh ceithre speiceas turmeric éagsúla eadhon C. xanthorrhiza, C. aromatica, C. amada, agus C. zedoaria i réimse na hithreach liath (gaineamh garbh 3.6 faoin gcéad, gaineamh mín 36.9 faoin gcéad , siolta 24.3 faoin gcéad , cré 32.8 faoin gcéad , pH 7.4, NÍL{{10}}N 0.07 faoin gcéad , NH 4-N 0.08 faoin gcéad , P 4.6 ng/g, K 42.9 ng/g) ag an Lárionad Eolaíochta Allamuigh Fothrópaiceacha, Ollscoil Ryukyus, Okinawa, an tSeapáin. Ba é an meánteocht míosúil , taise , agus deascadh le linn na tréimhse saothraithe 17-29 céim , 61-83 faoin gcéad , agus 22-369 mm , faoi seach . Soláthraíodh cleachtais agranamaíochta coitianta lena n-áirítear leasachán agus uisciúcháin. Baineadh riosóim nuair a thit shoots na speiceas go hiomlán. Níodh na riosóim, slisnithe, agus triomaíodh iad in oigheann aer te ag 50 céim le haghaidh 72 h.

Astarraingt samplaí

Rinneadh na heastóscadh trí na púdar turmeric éagsúla (300 g) a thuaslagadh isteach i MeOH (3 L) ag teocht an tseomra (25 céim ) agus brú an atmaisféir agus coinníodh iad ar feadh dhá lá le corraigh maighnéadach leanúnach chun ocsaídiú aer a chosc agus sciath ó sholas na gréine. Scagadh na comhdhúile tuaslagóir-intuaslagtha ag baint úsáide as páipéar scagtha (Uimh. 2, Advantec, Tokyo Roshi Kaisha Ltd., Tóiceo, an tSeapáin). Cuireadh tuaslagóirí úra (MeOH) leis an ábhar plandaí a úsáideadh agus rinneadh an próiseas arís trí huaire. Triomaíodh na tuaslagáin scagtha ina raibh comhdhúile plandaí ag evaporator rothlach faoi bhrú laghdaithe ag 40 céim. Coinníodh toradh na n-sleachta go léir sa chuisneoir ag 4 chéim le haghaidh anailísí turgnamhacha.

Measúnacht ar chosc Tyrosinase

Cinneadh gníomhaíocht choiscthe Tyrosinase de réir an mhodha roimhe seo [30], ag tomhas an tiúchan de DOPA chrome a tháirgtear trí ghníomhaíocht einsím tyrosinase ar fhoshraith tyrosine. Go hachomair, díscaoileadh an sampla tástála i 80 faoin gcéad MeOH chun tiúchain éagsúla a fháil (25, 50, agus 100 µg/mL). Socraíodh an 96-pláta tobair san ord seo a leanas: 120 μL de mhaolán fosfáite (20 mM, pH 6.8), 20 μL den sampla, agus 20 μL de tyrosinase muisiriún (500 U/mL i bhfosfáit 20 mM maolán). Tar éis gor ar feadh 15 nóiméad ag 25 céim, tionscnaíodh an t-imoibriú trí 20 μL de thuaslagán L-tyrosine 0.85 mM a chur leis agus é a ghoradh ar feadh 10 nóiméad ag 25 céim. Cinneadh gníomhaíocht Tyrosinase tríd an ionsúiteacht a thomhas ag 470 nm ag baint úsáide as léitheoir microplate (speictrophotometer Biotek Powerwave XS2). Baineadh úsáid as Arbutin mar rialú dearfach, ach baineadh úsáid as 80 faoin gcéad MeOH mar rialú diúltach. Ríomhadh an céatadán de chosc tyrosinase mar seo a leanas:

nuair is é C ionsúchán an rialaithe diúltach, is é B ionsú an fholamh, agus is é S ionsúchán an tsampla tástála.

Comhdhúile bithghníomhacha a leithlisiú ón sliocht amh Curcuma amada

Ag smaoineamh ar thorthaí na gceithre sliocht turmeric, léirigh C. amada gníomhaíocht frith-tyrosinase i bhfad níos airde ná na cinn eile. Dá bhrí sin, rinneadh íonú faoi threoir bithmheasúnaithe ar chomhdhúile gníomhacha ó eastóscadh amh C. amada. Chun na comhdhúile frith-tyrosinase a aithint, rinneadh codánúchán ó eastóscán amh C. amada mar a thuairiscítear i bhFíor 5. Caolaíodh an t-amhábhar le huisce driogtha agus ansin eastósctar é le n-heacsán, agus EtOAc ina dhiaidh sin. Ansin rinneadh toirteanna comhionanna de gach tuaslagóir agus tuaslagán eastósctha amh a mheascadh trí chroitheadh ​​​​ar feadh 3 nóiméad i dtonnadóir deighilte. Dhírigh galú rothlach na codáin go léir go triomacht ag 40 céim . Socraíodh gníomhaíochtaí frith-tyrosinase na dtrí chodán seo de réir an nós imeachta thuas. Toisc gur léirigh an codán EtOAc an ghníomhaíocht frith-tyrosinase is airde, roghnaíodh é le haghaidh aonrú agus íonú an chomhdhúil bithghníomhach. Galú an codán gníomhach EtOAc go triomacht agus cuireadh faoi réir crómatagrafaíochta ar cholún glóthach shilice (75 g) (30 × 3 cm). Baineadh úsáid as Elution ag baint úsáide as n-hexane agus EtOAc le méideanna méadaithe EtOAc [100:0 (F1), 80:20 (F2), 60:40 (F3), 40:60 (F4), 20:80 (F5) , agus 0:100 (F6)]. Rinneadh gníomhaíocht frith-tyrosinase na sé chodán seo de réir an nós imeachta thuas, agus fuarthas an chuid is mó de na gníomhaíochtaí i F3 agus F6. Rinneadh codáin F3 agus F6 a íonú le C18 HPLC céim droim ar ais (COSMOSIL 5C18-AR-II; Nacalai Tesque, Inc., Kyoto, an tSeapáin) atá feistithe le huisce agus aicéatóintríle mar an chéim shoghluaiste le ráta sreafa de 2.5 mL min−1, braite ag 280 nm.

Mhéadaigh trí bhuaic ó F3 ag 9.55, 13.66, agus 16.47 nóim, agus tháinig laghdú ar cheithre bhuaic ó F6 ag 11.56, 12.2{{0, 12.75, agus 15.03 nóim mar shubstaintí bána gan dath, a bhfuil cosc ​​orthu. braitheadh ​​gníomhaíocht i gcúig chodán buaic a luadh ag 9.55 agus 16.47 nóim ó F3 agus 11.56, 12.75, agus 15.03 nóiméad (Sonraí Forlíontacha) ó F6 (Fíor 5). Tuaslagadh na comhdhúile leithlisithe (~10 mg) i MeOH-d4 agus ansin rinneadh anailís speictreach orthu. Taifeadadh speictrim athshondais mhaighnéadaigh núicléach (NMR) ar speictriméadar BRUKER NMR (500 MHz do 1 H agus 125 MHz do 13C) ag teocht an tseomra. Taifeadadh aistrithe ceimiceacha (δ) mar chodanna in aghaidh an mhilliúin (ppm) i gcoibhneas le tetramethylsilane (TMS) mar an gcaighdeán inmheánach. Rinneadh turgnaimh mais-speictriméadrachta ar Mais-speictriméadar Uiscí ag baint úsáide as taiscéalaí ianúcháin leictreaspré (ESI − MS) faoi na coinníollacha uirlise seo a leanas: Colún: COSMOSIL 5C18-AR-II, (2 × 150) mm. Tuaslagóir A: Uisce (aigéad formach 0.1 faoin gcéad), Tuaslagóir B: aicéatóintríle, ráta sreafa: 4 mL/min, toirt insteallta: 100 µL, am rite: 35 min, clár ama le haghaidh F3: 75 faoin gcéad B (0 min) → 75 faoin gcéad B (20 min) → 100 faoin gcéad B (20.1 min) → 100 faoin gcéad B (27 min) → 75 faoin gcéad B (27.1 min) → 75 faoin gcéad B (35 min). Clár ama le haghaidh F6: 45 faoin gcéad B (0 min) → 45 faoin gcéad B (14 min) → 100 faoin gcéad B (14.1 min) → 100 faoin gcéad B (20 min) → 45 faoin gcéad B (20.1 min) → 45 faoin gcéad B (25 min). Modh caidéil: grádán dénártha. Sonraí an oighinn: CTO-20AC, teocht 40 céim . Modh ianaithe MS: ES ( móide ), voltas ribeach: 4.0 kV, voltas cón: 20 V, teocht foinse: 120 céim , teocht díscaoilte: 350 céim, sreabhadh gáis cón: 100 L/h, sreabhadh gáis díothaithe: 800 L /h (Sonraí Forlíontacha).

Gníomhaíocht frith-tyrosinase de na comhdhúile scoite

Díscaoileadh comhdhúile scoite i MeOH ag tiúchan 5, 10, 30, 50, 100, agus 200 μM do gach cumaisc. Cinneadh gníomhaíocht frith-tyrosinase ag baint úsáide as an nós imeachta a thuairiscítear roimhe seo.

Cosc intracellular ar tyrosinase agus melanogenesis ag na comhdhúile iargúlta

Cultúr cille

Saothraíodh cealla melanoma B16F10 i meán modhnaithe Eagle (DMEM) Dulbecco agus forlíonta le 10 faoin gcéad de shéiream bó féatais féatais (FBS) agus 1 faoin gcéad peinicillin (10,000 U/mL)/streptomycin (100 ug/mL) ag 37 céim in atmaisféar humidified ina bhfuil 5 faoin gcéad CO2.

Inmharthanacht cille

Plátáladh cealla B16F10 ag dlús 5 × 104 cill/tobar i 96-phláta tobair. Tar éis 24 h, nochtadh cealla do thiúchan éagsúla den chomhdhúil iargúlta agus goraíodh iad ar feadh 48 h breise ag 37 céim . Tar éis goir, shocraigh measúnacht MTS inmharthanacht na gceall. Cuireadh fiche microliter de thuaslagán MTS leis agus gor é ar feadh 60 nóiméad. Tar éis goir, socraíodh ionsúcht na gceall ag 490 nm ag baint úsáide as léitheoir microplate (Tagarmharc Plus).

Gníomhaíochtaí frith-tyrosinase agus frith-melanogenic de na comhdhúile scoite

Rinneadh cinneadh ábhar melanin cheallacha agus measúnachtaí gníomhaíochta tyrosinase mar a thuairiscítear roimhe seo [31], le modhnuithe beaga. Plátáladh cealla meileanóma B16F10 ag dlús 5 × 104 cill/tobar i 96-phláta tobair. Tar éis 24 h, bhí cealla faoi lé tiúchain éagsúla den chomhdhúil iargúlta nó arbutin. Tar éis 1 h, cuireadh hormone spreagtha 100 nM -melanocyte ( -MSH), agus gor na cealla ar feadh 48 h breise ag 37 céim . Maidir leis an staidéar gníomhaíochta frith-tyrosinase, nite na cealla ansin le maolán fosfáit fuar-oighear agus lysed le maolán fosfáit (pH 6.8) ina raibh 1 faoin gcéad Triton-X (90 μL/tobar). Bhí na plátaí reoite ag −80 céim ar feadh 30 nóiméad. Tar éis leá agus meascadh, cuireadh 10 μL de 1 faoin gcéad L-DOPA le gach tobar. Tar éis goir ag 37 céim ar feadh 2 h, tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 490 nm. Maidir leis an measúnacht ábhar melanin, nite na cealla faoi dhó le maolán fosfáit agus ansin tuaslagtha i 100 μL de NaOH (1 N) ina bhfuil 10 faoin gcéad DMSO. Goradh samplaí ag 80 céim ar feadh 1 h agus meascadh iad chun meileanin a thuaslagadh. Tomhaiseadh dlús optúil an aonchineálaigh mheasctha ag 490 nm.

Anailís staitistiúil

Cuirtear torthaí in iúl mar mheán ± SEM. Rinneadh difríochtaí staitistiúla idir an dá acmhainn a mheas i dtástáil an Mhic Léinn. Rinneadh comparáidí iolracha trí úsáid a bhaint as anailís aontreo ar athraithis agus tástáil Bonferroni ina dhiaidh sin. Measadh go raibh difríochtaí suntasacha ag P <>

Is é seo ár dtáirge frith-tuirse! Cliceáil ar an bpictiúr le haghaidh tuilleadh eolais!

Tagairtí

1. Solano F, Briganti S, Picardo M, Ghanem GH. Gníomhairí hipopigmented: athbhreithniú nuashonraithe ar ghnéithe bitheolaíocha, ceimiceacha agus cliniciúla. Res cille lí. 2006; 19:550–71.

2. Loizzo MR, Tundis R, Menichini F. Coscairí tyrosinase nádúrtha agus sintéiseacha mar ghníomhairí frithdhonnúcháin: Nuashonrú. Compr Rev Bia Sci Food Saf. 2012; 11:378–98.

3. Lin YS, Chen HJ, Huang JP, Lee PC, Tsai CR, Hsu TF, et al. Cinéitic de ghníomhaíocht choisctheach tyrosinase ag baint úsáide as sleachta duille Vinifera Viti. Biomed Res Int. 2017: 5232680.

4. Manini P, Napolitano A, Westerhof W, Riley PA, d'Ischia M. Orta-quinone imoibríoch a ghintear trí ocsaídiú tyrosinase-catalyzed ar an monobenzone gníomhaire dílíofa craiceann: féinchúplála agus imoibrithe thiol-conjugation agus impleachtaí féideartha do melanocyte tocsaineacht. Ceimic Res Tocsaineach. 2009; 13: 1398-405.

5. Couteau C, Coiffard L. Forbhreathnú ar ghníomhairí whitening craiceann: drugaí agus táirgí cosmaideacha. Cosmaidí. 2016; 3:27.

6. Al-Saleh I, Shinwari N, El-Doush I, Billedo G, Al-Amodi M, Khogali F. Comparáid idir leibhéil mearcair i bhfíocháin éagsúla de lucha albino agus pigmented cóireáilte le dhá bhrandaí éagsúla mearcair uachtair lightening craicinn. Bithmhiotail: Ról Int J Iain Met Biol, Biochem, Med. 2004; 17:167–75.

7. Gopinath H, Karthikeyan K. Turmeric: a condiment, cosmaideacha agus leigheas. Indiach J Dermatol Venereol Leprol. 2018; 84:16–21.

8. Vaughn AR, Branum A, Sivamani RK. Éifeachtaí turmeric (Curcuma longa) ar shláinte an chraicinn: athbhreithniú córasach ar an bhfianaise chliniciúil. Phytother Res. 2016; 30: 1243-64.

9. Baliga MS, Katiyar SK. Chemoprevention of photocarcinogenesis ag luibheolaíochta aiste bia roghnaithe. Photochem Photobio Sci. 2006; 5:243–53.

10. Akter J, Hossain MA, Sano A, Takara K, Ioslam MZ, Hou DX. Gníomhaíocht antifungal de speicis éagsúla agus tréithchineálacha turmeric (Curcuma spp.) i gcoinne Fusarium Solani Sensu Lato. Cógaslann J. 2018; 52:292–7.

11. Akter J, Ioslam MZ, Hossain MA, Kawabata S, Takara K, Nguyen H, et al. Endothelium-neamhspleách agus cainéal cailciam-spleách ar an artaire cheirbreach muc ag speicis éagsúla agus cineálacha turmeric. J Tradit Comhlánú Med. 2018; 9:297–303.

12. Akter J, Takara K, Ioslam MZ, Hossain MA, Sano A, Hou DX. Leithlisiú agus soiléiriú struchtúrach na gcomhdhúile antifungal ó Curcuma amada. Pac na hÁise J Trop Med. 2019; 12:123–9.

13. Akter J, Hossain MA, Takara K, Ioslam MZ, Hou DX. Gníomhaíocht frithocsaídeach de speicis agus de chineálacha éagsúla turmeric (Curcuma spp): Aonrú na gcomhdhúile gníomhacha. Comp Biochem Fisiol C Tocsaineach Pharm. 2019; 215:9–17.

14. Khunlad P, Tundulawessa Y, Supasiri T, Chutrtong W. Tyrosinase gníomhaíocht choisctheach de curcuminoids as an púdar turmeric (Curcuma longa Linn.). J SWU Sci. 2008; 24:125–39.

15. Giang PM, Mac PT. Leithlisiú sesquiterpenoids ó na riosóim de Salisb aramatacha Curcuma Vítneaimis. J Ceimic. 2000; 38:96–9.

16. Asem SD, Laitonjan SW. Imscrúdú ar an ngaol idir struchtúr agus neamhlíneacht an tsídéaróin ó riosóim Curcuma caeca Roxb. Ind J Chem. 2012; 51:1738–42.

17. Faiz Hossain C, Al-Amin M, Rahman KM, Sarker A, Alam MM, Chowdhury MH, et al. Prionsabal analgesic ó Curcuma amada. J Eitnopharmacol. 2015; 163:273–7.

18. Ahmed Hamdi OA, Syed Abdul Rahman SN, Awang K, Abdul Wahab N, Looi CY, Thomas NF, Abd Malek SN. Comhábhair citotocsaineacha ó na riosóim de Curcuma zedoaria. Sci World J. 2014;2014:321943.

19. Makabe H, Maru N, Kuwabara A, Kamo T, Hirota M. Sesquiterpenes antiinflammatory ó Curcuma zedoaria. Nat Prod Res. 2006; 20:680–5.

20. Kikuzaki H, Nakatani N. Diarylheptanoids Cyclic ó riosóim de Zingiber officinale. Fíteiceimic. 1996; 43:273–7.

21. Dekebo A, Dagne E, Sterner O. Furanosesquiterpenes ó Commiphora sphaerocarpa agus adhaltranas gaolmhar mirrh fíor. Fiteateiripe. 2002; 73:48–55.

22. Joshi SC, Mathela CS. Gníomhaíochtaí frithocsaídeacha agus antibacterial na duille ola riachtanach agus furanodienone agus curzerenone a chomhábhar ó Lindera pulcherrima (Nees.) Benth. sean duán. f. Pharmacogn Res. 2012; 4:80–4.

23. Yang Ceisteanna Coitianta, Li SP, Zhao J, Lao SC, Wang YT. Coinníollacha GC-MS a bharrfheabhsú bunaithe ar réiteach agus ar chobhsaíocht anailítí chun naoi sesquiterpenoid a chinneadh go comhuaineach i dtrí speiceas de riosóim Curcuma. J Pharm Biomed Anal. 2007; 43:73-82.

24. Li YW, Zhu GY, Shen XL, Chu JH, Yu ZL, Fong WF. Cuireann Furanodienone bac ar iomadú agus maireachtáil cille trí chomharthaíocht ER a shochtadh i gcealla MCF-7 ailse chíche daonna. J Bithcheimic Cille. 2011; 112:217–24.

25. Tao QF, Xu Y, Lam RY, Schneider B, Dou H, Leung PS, et al. Diarylheptanoids agus monoterpenoid ó riosóim Zingiber officinale: airíonna frithocsaídeacha agus cytoprotective. J Nat Prod. 2008; 71:12–17.

26. Yokosuka A, Mimaki Y, Sakagami H, Sashida Y. Diarylheptanoids nua agus glúcóisídí diarylheptanoid ó riosóim Tacca chantrieri agus a ngníomhaíocht citotocsaineach. J Nat Prod. 2002; 65:283–9.

27. Jiang JL, Jin XL, Zhang H, Su X, Qiao B, Yuan YJ. Comhábhair antitumor i curcuminoids a shainaithint ó Curcuma longa L. bunaithe ar an gcaidreamh comhdhéanamh-gníomhaíochta. J Pharm Biomed Anal. 2012; 70:664–70.

28. Marrot L, Meunier JR. Photodamage DNA craicinn agus a iarmhairtí bitheolaíocha. J Am Acad Dermatol. 2008; 58:139–48.

29. Policegoudra RS, Abiraj K, Channe Gowda D, Aradhya SM. Leithlisiú agus tréithriú an chomhdhúil fhrithocsaídeach agus antibacterial ó riosóim mango ginger (Curcuma amada Roxb.). J Chromatogr B Teicneolaíocht Anal Bithmed Sci Beatha. 2007; 852:40–8.

30. Tadtong S, Viriyaroj A, Vorarat S, Nimkuntat S, Suksamrarn S. Antityrosinase agus gníomhaíochtaí antibacterial sliocht pericarp mangosteen. J Sláinte Res. 2009; 23:99–102.

31. Li X, Guo L, Sun Y, Zhou J, Gu Y, Li Y. Coscann Baicalein melanogenesis trí ghníomhachtú cosán comharthaíochta ERK. Int J Mol Med. 2010; 25:923–7.