Aistriú Gníomhach Céim Chuimhne Eagla Ó Athdhlúthú Go Múchadh Trí Chosc ar Athdhlúthú trí mheán ERK

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

An aisghabháileaglacuimhneasdaíonn sé dhá phróiseas chuimhne chontrártha, ie, athdhlúthú agus díothú. Spreagann aisghabháil ghairid athdhlúthú chun eagla a chothú nó a fheabhsúcuimhne, cé go múchtar an chuimhne seo trí aisghabháil fhada. Cé gur imscrúdaíodh meicníochtaí athdhlúthaithe agus díothaithe, ní fios fós conas a aistrítear céimeanna cuimhne eagla ó athdhlúthú go díothú le linn aisghabháil cuimhne. Anseo, léirímid go rialaíonn próiseas aistrithe cuimhne extracellular kinase-rialaithe comhartha (ERK) tar éis aisghabhála aistriú na gcéimeanna cuimhne ó athchomhdhlúthú go díothú trí ionduchtú athchomhdhlúthaithe a chosc i dtasc seachanta coisctheach (IA) i lucha fireann. Ar dtús, aithníodh an chéim cuimhne trasdula, a chealaíonn an ionduchtú athchomhdhlúthaithe, ach nach leor chun díothú a fháil, tar éis an athchomhdhlúthaithe, ach roimh na céimeanna díothaithe. Sa dara háit, na céimeanna athdhlúthaithe, trasdula agus díothaithe tar éisaisghabháil cuimhneléirigh sínithe móilíneacha agus ceallacha ar leith trí phróitéin ceangailteach d’eilimintí freagrúla cAMP (CREB) agus fosfarylation ERK san amygdala, hippocampus, agus cortex prefrontal medial (mPFC). Léirigh an chéim athdhlúthaithe fosfarylation CREB méadaithe, agus léirigh an chéim díothaithe roinnt daonraí néaracha le teaglaim éagsúla de fosfarylation CREB agus/nó ERK, sna réigiúin inchinne seo. Suimiúil go leor, léirigh na trí chéim chuimhne, lena n-áirítear an chéim aistrithe, gníomhachtú ERK neamhbhuan díreach tar éis aisghabháil. Níos tábhachtaí fós, chuir imshuí ERK san amygdala, hippocampus, nó mPFC ag an gcéim cuimhne aistrithe bac ar fheabhsú cuimhne IA de bharr ath-chomhdhlúthú. Tugann na tuairimí seo le tuiscint go rialaíonn cosán comharthaíochta ERK go gníomhach aistriú na céime cuimhne ó athdhlúthú go dtí díothú agus go bhfeidhmíonn an próiseas seo mar lasc a chealaíonn athdhlúthú eagla.cuimhne.

Eochairfhocail: ERK; éag ; cuimhne eagla; athdhlúthú ; trasdul

1An Roinn Bitheolaíochta, Dámh na nEolaíochtaí Beatha, Ollscoil Talmhaíochta Tóiceo, Tóiceo 156-8502, an tSeapáin, agus

2Graduate Scoil na Talmhaíochta agus na nEolaíochtaí Beatha, Ollscoil Tóiceo, Tóiceo 113-8657, an tSeapáin

Ráiteas Tábhachta

Cuimhne eagla a aisghabháilasdaíonn sé dhá phróiseas chuimhne chontrártha; athdhlúthú agus díothú. Cothaíonn/feabhsaítear an t-athdhlúthúeagla cuimhne, cé go lagaíonn díothú cuimhne eagla. Ní fios fós conas a aistrítear céimeanna cuimhne ó athdhlúthú go díothú le linn aisghabhála. Anseo, d'aithníomar próiseas aistrithe cuimhne gníomhach a fheidhmíonn mar lasc a chuireann bac ar athdhlúthú. Léirigh an chéim aistrithe cuimhne seo méadú neamhbhuan ar phosphorylation kinase extracellular rialaithe comhartha (ERK) san amygdala, hippocampus, agus cortex prefrontal medial (mPFC). Is díol suntais é, chuir cosc ​​ar ERK sna réigiúin seo ag an gcéim trasdula bac ar fheabhsú cuimhne um sheachaint coisctheach trí mheán ath-chomhdhlúthaithe (IA). Tugann na torthaí seo le tuiscint go rialaíonn an próiseas cuimhne trasdula go gníomhach aistriú na gcéimeanna cuimhne eagla de chuimhne eagla trí ionduchtú athchomhdhlúthaithe a chosc trí ghníomhachtú an chonair comharthaíochta ERK.

Réamhrá

Cuimhnení próiseas éighníomhach é aisghabháil ach is próiseas dinimiciúil é a cheadaíonn coinneáil, neartú, lagú, nó athrú/nuashonrú ar chuimhne bhunaidh (Misanin et al., 1968; Schneider agus Sherman, 1968; Lewis, 1979; Mactutus et al; ., 1979; Gordon, 1981; Nader et al., 2000; Nader agus Hardt, 2009; Dudai, 2012; Fukushima et al., 2014). Is é an rud is tábhachtaí ná go n-éireoidh cuimhne eagla choinníollaithe aisghafa trí athnochtadh gairid don spreagadh coinníollaithe (CS) labile agus éilíonn sé athdhlúthú géine-spleách ar léiriú chun é a chothabháil nó a fheabhsú (Nader et al., 2000; Dudai, 2002; Kida et al., 2002; Suzuki et al., 2004; Tronel et al., 2005; Fukushima et al., 2014). Os a choinne sin, cuireann athnochtadh leanúnach nó arís agus arís eile ar an CS astú cuimhne, rud a lagaíonn cuimhne eagla (Pavlov, 1927; Rescorla, 2001; Myers agus Davis, 2002). Mar sin, cothaíonn aisghabháil cuimhne eagla dhá phróiseas chuimhne chontrártha, ie, athdhlúthú agus díothú, cé go gcothaítear an dá phróiseas trí ath-nochtadh do CS comhionann, ach go bhfuil difríocht acu de réir ré ath-nochta don CS.

Is í an ghné bithcheimiceach choitianta agus chriticiúil den athdhlúthú agus den díothú ná an ceanglas maidir le léiriú géine trí mheán na próitéine le heilimintí atá freagrach as cAMP (CREB) (Mamiya et al., 2009). Is díol spéise é go bhfuil sínithe codarsnacha móilíneacha, anatamaíocha agus iompraíochta léirithe againn idir céimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe na cuimhne eagla comhthéacsúla (Suzuki et al., 2004; Mamiya et al., 2009). Cuireann blocáil sintéise próitéine le linn na céime athdhlúthaithe isteach ar an eagla bunaidhcuimhne, ach ní mhainnítear é seo a dhéanamh trí shintéis próitéin a bhlocáil le linn na céime díothaithe, cé gur athghníomhaíodh an chuimhne eagla comhthéacsúil. Tá difríocht idir an riachtanas maidir le réigiúin inchinn a thaispeánann gníomhachtú léiriú géine trí mheán CREB idir athdhlúthú agus díothú; Braitheann athdhlúthú ar an amygdala agus hippocampus, ach braitheann díothú ar an amygdala agus cortex réamhéadanach medial (mPFC). Mar sin féin, tá difríocht idir an tréimhse ama de ghníomhachtú CREB amygdaloid idir na céimeanna cuimhne athdhlúthaithe agus díothaithe. Thug na tuairimí seo le tuiscint nach bhfuil na céimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe neamhspleách, ach go n-idirghníomhaíonn siad lena chéile. Suimiúil go leor, d'aithin staidéir le déanaí fuinneog ama (céim aistrithe) a léiríonn nach bhfuil aon ghníomhachtú kinase extracellular rialaithe comhartha (ERK) san amygdala tar éis athchomhdhlúthú, ach roimh na céimeanna díothaithe tar éis aisghabháil cuimhne eagla cloisteála (Merlo et al., 2018). ). Nuair a chuirtear le chéile iad, tugann na torthaí seo le fios na meicníochtaí féideartha trína n-aistrítear céimeanna cuimhne ó athdhlúthú go dtí díothú le linn cuimhne eagla a aisghabháil. I bhfocail eile, is féidir go rialaíonn an próiseas aistrithe cuimhne an lasc seo go gníomhach.

I dtasc seachanta coisctheach (IA), faigheann lucha suaitheadh ​​coise leictreach tar éis dóibh dul isteach in urrann dhorcha ó urrann éadrom agus foirmcuimhnechun an urrann dorcha a sheachaint. Roimhe seo, trí úsáid a bhaint as an tasc seo, léirigh muid gur féidir idirdhealú a dhéanamh ar na céimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe ag an bpointe ama nuair a théann luch isteach i urrann dorcha ó urrann solais le linn seisiún ath-nochta (Fukushima et al., 2014). Mar sin, cuireann an tasc seo ar ár gcumas sínithe móilíneacha peirspictíochta na gcéimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe a thréithriú, i gcodarsnacht leis an paraidím um riochtú eagla comhthéacsúil clasaiceach ina gcuireann athghníomhú cuimhne eagla coinníollaithe trí ath-nochtadh don CS tús le hathchomhdhlúthú agus díothú; (3 nóim) gearr (3 nóim) go gcothaítear athdhlúthú de bharr athnochtadh gearr (3 nóim) don chomhthéacs coinníollaithe, ach is cúis le díothú as a dtagann nochtadh fada (30 nóiméad) nó athnochtadh arís agus arís eile don chomhthéacs seo (Eisenberg et al., 2003; Pedreira agus Maldonado, 2003; Suzuki et al., 2004; Lee et al., 2008; Mamiya et al., 2009). Ina theannta sin, fuaireamar amach go gcuirtear feabhas ar an gcuimhne IA aisghafa trí athdhlúthú cuimhne sa tasc seo (Fukushima et al., 2014).

Chun an mheicníocht a thuiscint maidir leis an aistriú ó athdhlúthú go díothú le linn aisghabháil eaglacuimhne, bhí sé mar aidhm againn sínithe móilíneacha, cheallacha agus iompraíochta na gcéimeanna athdhlúthaithe, aistrithe agus díothaithe de chuimhne IA a aithint agus a thréithriú. Rinneamar anailís ar ghníomhachtú CREB agus ERK san amygdala, hippocampus, agus mPFC sna céimeanna athdhlúthaithe, aistrithe agus díothaithe agus scrúdaigh muid róil gníomhachtaithe ERK sna próisis chuimhne seo.

Abhair agus modhanna

Lucha Rinneadh na turgnaimh go léir de réir an Treoir um Chúram agus Úsáid Ainmhithe Saotharlainne (Cumann Néareolaíochta na Seapáine agus Ollscoil Talmhaíochta Tóiceo). D'fhormheas Coiste um Chúram agus Úsáid Ainmhithe Ollscoil Talmhaíochta Tóiceo (údarú #280037) na turgnaimh ainmhithe go léir a rinneadh sa staidéar seo. Rinneadh gach gnáthamh máinliachta faoi ainéistéise Nembutal agus rinneadh gach iarracht an fhulaingt a íoslaghdú. Fuarthas lucha fireann C57BL/6N ó Charles River. Cuireadh na lucha i gcliabháin cúig nó sé cinn, coinníodh iad ar thimthriall éadrom/dorcha 12/12 h, agus cheadaigh siad rochtain ar bhia agus uisce ad libitum. Bhí na lucha ar a laghad ocht seachtaine d'aois nuair a tástáladh iad. Rinneadh tástáil le linn chéim éadrom an timthrialla. Rinneadh na turgnaimh go léir dall ar riocht cóireála na lucha.

Tástáil IA Is éard a bhí sa ghaireas céim-trí IA (OHARA Pharmaceutical) bosca le urranna ar leith éadrom agus dorcha (idir 15.5 12.5 11.5 cm). Bhí an urrann solais soilsithe ag solas fluaraiseacha (2500 lux; Fukushima et al., 2008, 2014; Zhang et al., 2011; Ishikawa et al., 2016). Sular cuireadh tús le hoiliúint IA, rinneadh na lucha a láimhseáil ina n-aonar ar feadh 2 nóiméad gach lá ar feadh seachtaine amháin. Le linn na seisiún oiliúna, ceadaíodh do gach luch dul i dtaithí ar an urrann solais ar feadh 30 s, agus ardaíodh an doras gilitín chun rochtain a cheadú ar an urrann dorcha. Measadh go raibh latency dul isteach sa urrann dorcha mar thomhas éadála. Chomh luath agus a chuaigh an luch isteach sa urrann dorcha, dúnadh an doras guillotine. Tar éis 5 s, seachadadh footshock (0.2 mA) ar feadh tréimhse iomlán 2 s (oiliúint). Ag 24 h tar éis an tseisiúin oiliúna, cuireadh an luch ar ais san urrann solais go dtí go ndeachaigh sé isteach san urrann dorcha (meán 459 6 15.49 s). Díreach tar éis don luch dul isteach sa urrann dorcha, dúnadh an doras gilitín agus d'fhan an luch sa urrann dorcha ar feadh tréimhsí éagsúla ama (0, 1, nó 10 min) gan footshock (athghníomhachtú). Rinneadh measúnú ar chuimhne 48 h níos déanaí [tástáil cuimhne fadtéarmach iar-ghníomhaithe (PR-LTM)] mar an latency crossover don luch dul isteach sa urrann dorcha nuair a athsholáthrófar san urrann solais, mar atá in athghníomhachtú.

Don chéad turgnamh, rinneamar scrúdú ar éifeacht chosc ar shintéis próitéin tar éis athghníomhaithe (ath-nochtadh don urrann dorcha le haghaidh 0, 1, nó 10 min; Fíor 1). Díscaoileadh an t-inisomycin coscaire sintéise próitéine (ANI; Wako) i saline (pH coigeartaithe go 7.0–7.4 le NaOH). Cuireadh oiliúint ar na lucha mar a thuairiscítear thuas, agus ag 24 h níos déanaí, fuair siad feithicil (VEH) nó ANI (150 mg / kg, ip) díreach tar éis iad a ath-nochtadh don urrann dorcha ar feadh 0, 1, nó 10 nóiméad gan turraing coise. (athghníomhachtú). Ag an dáileog seo, cuireann ANI cosc ​​ar .90 faoin gcéad de shintéis próitéine san inchinn le linn na chéad 2 h (Flood et al., 1973). Ag 48 h tar éis an tseisiúin athghníomhaithe, cuireadh lucha aonair arís san urrann solais agus rinneadh measúnú ar latency crossover.

Don dara turgnamh [imdhíonhistochemistry CREB fosfarylated (pCREB) agus fosfarylated ERK (pERK); Figí. 2–5], scrúdaíomar na réigiúin inchinne a cuireadh i ngníomh tar éis ath-nochtadh don solas (go dtí go ndeachaigh na lucha isteach san urrann dhorcha, athnochtadh don urrann dorcha ar feadh 0 nóim) nó urrann dorcha (ath- nochtadh don urrann dorcha ar feadh 1 nó 10 nóiméid). Roinneadh na lucha i gceithre Fukushima et al. · Aistriú Céimeanna Cuimhne Eagla tar éis Aisghabhála J. Neurosci., 10 Feabhra, 2021, • 41(6):1288–1300 • 1289grúpa. Ag 24 h tar éis na hoiliúna, rinneadh lucha aonair a ath-nochtadh don urrann solais agus ansin d'fhan siad san urrann dorcha tar éis dóibh teacht isteach ón urrann dorcha [athghníomhachtú: 0 min sa ghrúpa urrann dorcha, athdhlúthú (Recon); 1 min, trasdul (Tran) grúpa; 10 nóim, grúpa díothaithe (Folíne)]. Níor cuireadh grúpa lucha eile ar ais chuig an urrann solais/dorcha [grúpa neamh-athghníomhaithe (NR)]. Rinneadh na lucha a ainéistéisiú ansin le Nembutal (750 mg/kg, ip) ag 5, 15, nó 30 nóiméad tar éis athghníomhaithe.

Don tríú turgnamh (micrinfusion U0126; Figs. 6,7), scrúdaíomar éifeachtaí chosc ERK san amygdala, hippocampus, nó mPFC arcuimhneathdhlúthú/feabhsú, trasdul, agus díothú. Rinneadh an t-inhibitor MEK U0126 (Sigma-Aldrich) a thuaslagadh i sreabhán cerebrospinal saorga a raibh trí bhraoin de Tween 80 (Sigma) ann i 2.5 ml de 7.5 faoin gcéad démheitiol sulfocsaíd (Wako) agus coigeartaíodh é go pH 7.4 le NaOH. Cuireadh oiliúint ar na lucha mar a thuairiscítear thuas, agus 24 h ina dhiaidh sin, cuireadh ar ais iad san urrann solais (athghníomhachtú). Rinneadh na lucha a mhicrinileadh le U0126 (1 mg) nó VEH isteach i réigiúin éagsúla na hinchinne díreach ina dhiaidh (Fíoracha 6A, C, E–H, 7A–C) nó ag 30 nóiméad ina dhiaidh sin. (Fíor 6B, D) athghníomhachtú. Ag 48 h tar éis athghníomhaithe, cuireadh lucha aonair arís san urrann solais agus rinneadh measúnú ar latency crossover (PR LTM). Rinneadh micri-insileadh isteach sa hippocampus agus sa mPFC (0.5 ml) ag ráta 0.25ml/nóim. Rinneadh microinfusions isteach san amygdala (0.2 ml) ag ráta 0.1ml/nóim. Fágadh an cannula insteallta in áit ar feadh 2 nóiméad tar éis micrea-inileadh agus cuireadh na lucha ar ais chuig a gcáis baile ansin. Rinneadh an t-inhibitor MEK SL327 (Biteicneolaíocht Santa Cruz) a thuaslagadh i sulfocsaíd dimethyl agus caolaithe le saline. Cuireadh oiliúint ar na lucha mar a thuairiscítear thuas, agus 24 h ina dhiaidh sin, cuireadh lucha aonair ar ais san urrann solais (athghníomhachtú). Na lucha a bhí instealladh córasach le SL327 (10 nó 20 mg / kg) nó VEH díreach tar éis athghníomhachtú (Fig. 7D-F). Ag 48 h tar éis athghníomhaithe, cuireadh lucha aonair arís san urrann solais agus rinneadh measúnú ar latency crossover (PR-LTM).

Rinneadh immunohistochemistry mar a thuairiscítear roimhe seo (Mamiya et al., 2009; Suzuki et al., 2011; Zhang et al., 2011; Fukushima et al., 2014; Ishikawa et al., 2016; Hasegawa et al., 2019). Tar éis ainéistéiseach, bhí gach lucha perfused le 4 faoin gcéad paraformaldehyde. Baineadh na brains, socraíodh iad thar oíche, aistríodh go 30 faoin gcéad siúcrós iad, agus stóráiltear iad ag 4 céim . Gearradh codanna corónacha (30mm) i gcriostat.

Le haghaidh staining pCREB agus pERK, déileáladh le hailt saorshnámhacha le 1 faoin gcéad H2O2 agus goraíodh iad thar oíche le hantasubstaint frith-fosfa-CREB polaclónach coinín (seirine 133; S133); #{{10} }}, Millipore) agus/nó antashubstaint mhonaclónach frith-fosfa-ERK1/2 (T202/Y204) coinín (1: 300; # 4370; Teicneolaíocht Comharthaíochta Cille) i dtuaslagán blocála (salainn mhaolánach fosfáit móide 1 faoin gcéad de sheireum albaimin gabhair, 1 mg/ml albaimin séiream buaibheach, agus 0.05 faoin gcéad Triton X-100). Níodh na hailt le saline maolánach fosfáit agus goraíodh iad le IgG frith-choineán sárocsaíde horseradish-chomhchuingeach asal (1:500; Jackson ImmunoResearch) le haghaidh pCREB nó IgG frith-choinín gabhar sárocsaíd-chomhchuingeach do pERK ar feadh 1 h ag teocht an tseomra. Méadaíodh comharthaí pCREB le biotin tyramide agus léiríodh iad ag baint úsáide as streptavidin comhchuingeach Alexa Fluor (Invitrogen). Méadaíodh comharthaí pERK le TSA-FCM (Invitrogen). Cuireadh na codanna ar shleamhnáin agus clúdaíodh iad ag baint úsáide as meán gléasta (Millipore).

Rinneadh cainníochtú mar a thuairiscítear roimhe seo (Frankland et al., 2006; Fukushima et al., 2014; Mamiya et al., 2009; Zhang et al., 2011; Suzuki et al., 2008). Sainmhíníodh struchtúir go hanatamaíoch de réir atlas Franklin agus Paxinos (1997). Rinne turgnamhaí a bhí dall ar an riocht cóireála a chomhaireamh gach néaróin imdhíon-imoibríoch

Torthaí

Tréithriú céimeanna cuimhne tar éis aisghabháil sa tasc IA

Ceadaíonn an tasc IA dúinn idirdhealú a dhéanamh ar na céimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe ag an bpointe ama nuair a théann luch isteach i urrann dorcha ó urrann solais (Fukushima et al., 2014). Chun an mheicníocht atá mar bhunús le hathrú na gcéimeanna cuimhne ó athdhlúthú go díothú a thuiscint, thugamar faoi deara na céimeanna cuimhne IA tar éis aisghabháil cuimhne trí scrúdú a dhéanamh ar na héifeachtaí a bhaineann le sintéis próitéin a chosc atá ag teastáil le haghaidh athdhlúthú agus díothú cuimhne IA (Fukushima et al., 2014). Cuireadh na lucha ar dtús san urrann solais. Ag 5 s tar éis dóibh dul isteach sa urrann dorcha, seachadadh turraing coise gairid leictreach (oiliúint). Bhí na lucha ath-nochtadh don urrann solais 24 h tar éis na hoiliúna (seisiún athghníomhaithe; Fíor. 1A) agus rinneadh measúnú ar a n-latency crossover chun dul isteach sa urrann dorcha (Fig. 1 B). Tugadh na lucha ar ais isteach ina gcliabháin tí díreach tar éis dóibh dul isteach sa urrann dorcha ón urrann solais (0-nóiméad ath-nochtadh don urrann dhorcha; céim athdhlúthaithe) nó d’fhan siad san urrann dhorcha ar feadh 1, 3, nó 10 nóiméad gan turraing coise a fháil (céim éagtha; Fíor 1C–E). Díreach tar éis an tseisiúin athghníomhaithe, fuair na lucha instealladh sistéamach de VEH nó an t-inhibitor sintéise próitéin ANI. Ag 48 h níos déanaí, rinneadh measúnú ar latency trasover PR-LTM.

Ag teacht lenár staidéar roimhe seo (Fukushima et al., 2014), ath-nochtadh don urrann solais (0 mionghrúpa) spreagtha athdhlúthú agus feabhsú cuimhne IA. Nocht ANOVA dhá bhealach éifeachtaí suntasacha ama (F(1,24)=10.433, p=0.{{20}}036), druga (F(1) ,24)=23.197, p , 0.0001) agus idirghníomhú drugaí ama (F(1,24)=25.022, lch , 0.0001; Fíor 1B). Léirigh tástáil post hoc Bonferroni agus t-tástáil péireáilte gur mhéadaigh nó gur laghdaigh na grúpaí VEH agus ANI, a léiríodh go suntasach, faoi seach, latency trasover ag PR-LTM i gcomparáid leis an seisiún athghníomhaithe (ps , 0.05; VEH, t(6) {{28 }} 5.134, p=0.0021, ANI, t(6)=4.804, p=0.003; Fíor 1B). Tugann na tuairimí seo le fios gur chuir aisghabháil cuimhne IA san urrann solais feabhas ar an gcuimhne, agus chuir cosc ​​​​sintéise próitéin isteach ar an gcuimhne aisghabhála, ag deimhniú an bhreathnaithe roimhe seo go gcuireann aisghabháil cuimhne IA an chuimhne chun cinn trí athdhlúthú ar bhealach a bhraitheann ar shintéis próitéin.

I gcodarsnacht leis sin, mar gheall ar an ath-nochtadh don urrann dorcha díothaithe fadtéarmach [ANOVA dhá-bhealach, am (Fíor 1C, F(1,28)=9.575, p=0.{ {50}}04; Fíor 1d, F(1,36)=11.699, p=0.0016), druga (Fíor 1C, F(1,28)=4.674, p=0.039; Fíor 1d, F(1,36)=12.285, p {{29 }}.0012), am idirghníomhaíocht drugaí (Fíor 1C, F(1,28)=7.916, p=0.009; Fíor 1d, F(1,36) {{41 }}.915, p=0.0079)], mar a breathnaíodh roimhe seo (Fukushima et al., 2014). Léirigh na grúpaí VEH a d’fhan san urrann dorcha ar feadh 3 nó 10 nóim gur tháinig laghdú suntasach ar fholaíochas trasnánach ag PR-LTM i gcomparáid leis an seisiún athghníomhaithe, ach léirigh na grúpaí ANI latency crossover inchomparáide ag PR-LTM i gcomparáid leis an seisiún athghníomhaithe agus leis an. Grúpaí VEH (tástáil post hoc Bonferroni, ps , 0.05; tástáil t péireáilte, Fíor 1C, VEH, t(7)=4.976, p=0.0016, ANI, t(7) { {59}}.796, lch . 0.05; Fíor 1D, VEH, t(9)=10.211, lch , 0.0001, ANI, t(9)=1.02, lch. 0.05 ). Léiríonn na breathnuithe seo gur mhúchadh cuimhne IA mar gheall ar an athnochtadh don urrann dorcha ar feadh 3 nó 10 nóiméad agus gur chuir cosc ​​ar shintéis próitéin bac ar mhúchadh fadtéarmach. Mar sin, múchann aisghabháil cuimhne IA san urrann dorcha cuimhne IA ar mhodh a bhfuiltear ag súil leis maidir le léiriú géine.

Rud atá tábhachtach, léirigh an grúpa VEH latency tras-over inchomparáide ag PR-LTM i gcomparáid leis an seisiún athghníomhaithe agus leis an ngrúpa ANI nuair a d'fhan siad san urrann dorcha ar feadh 1 nóiméad [ANOVA dhá-bhealach, am (F(1,36) {{ 5}}.03, lch . 0.05), druga (F(1,36)=0.019, lch . 0.05), am idirghníomhaíocht drugaí (F(1,36)=0.011, lch . 0.05); tástáil post hoc Bonferroni, ps . 0.05; t-tástáil péireáilte, VEH, t(9)=0.091, lch . 0.05, ANI, t(9)=0.328, lch . 0.05; Fíor 1E]. Tugann na tuairimí seo le fios nár léirigh an grúpa VEH feabhas ná díothú cuimhne IA agus nár léirigh an grúpa ANI aon cur isteach ar chuimhne IA. Dá bhrí sin, chuir athnochtadh don urrann dorcha ar feadh 1 nóim bac ar an bhfeabhsú agus ar an gcur isteach de bharr ANI ar an gcuimhne IA athghníomhaithe, ach níor mhúchadh an chuimhne IA, rud a thugann le tuiscint go gcuireann an 1-nimithe ath-nochtaithe seo ar ceal ionduchtú an chomhdhlúthaithe. , ach níl sé leordhóthanach chun cuimhne IA a mhúchadh.

Go hachomair, léirigh na torthaí seo go n-eascraíonn athnochtadh don urrann solais an chéim athdhlúthaithe, ach go n-eascraíonn athnochtadh níos faide don urrann dorcha (3 nó 10 nóim) an chéim díothaithe. Níos tábhachtaí fós, má fhanann tú ar feadh 1 nóiméad san urrann dorcha, spreagtar an chéim aistrithe ón athdhlúthú go dtí an díothú, rud a chuireann bac ar athdhlúthú cuimhne eagla gan aslú.

Sínithe móilíneacha na gcéimeanna athdhlúthaithe, aistrithe, agus díothaithe san amygdala, hippocampus, agus mPFC tar éis aisghabháil cuimhne IA

Léiríonn athdhlúthú agus díothú na cuimhne eagla comhthéacsúla méaduithe i bhfosfarylation CREB ag S133, marcóir ar ghníomhachtú slonn géine a theastaíonn le haghaidh athdhlúthú agus díothú fadtéarmach, ach a léiríonn dinimic shainiúla fosfarylation CREB (Mamiya et al., 2009 ). Suimiúil go leor, léirigh staidéir le déanaí nach bhfuil aon mhéadú ar phosphorylation ERK, rialtóir in aghaidh an tsrutha de CREB (Impey et al., 1998; Wu et al., 2001), i réigiún basolateral an amygdala ag an aistriú ó athchomhdhlúthú le cuimhne eagla cued a bheith imithe in éag, cé go méadaítear an fosfaracht seo sa réigiún basothaobhach nuair a dhéantar cuimhne eagla cued a chomhdhlúthú agus a mhúchadh (Merlo et al., 2014, 2018). Léirigh staidéar eile nach ngníomhaítear hippocampal ERK ach amháin nuair a dhéantar cuimhne eagla comhthéacsúil a mhúchadh, ach nach ndéantar é a chomhdhlúthú (Tronson et al., 2009). Tugann na torthaí seo le fios go léiríonn céimeanna athdhlúthaithe, trasdula agus díothaithe sínithe móilíneacha agus ceallacha ar leith. Mar sin, rinneamar leibhéil pCREB agus pERK a thomhas agus a chur i gcomparáid sna céimeanna athdhlúthaithe, trasdula agus díothaithe ag baint úsáide as imdhíon-histochemistry. Rinneamar sceidil turgnamhacha comhchosúla mar atá i bhFíor 1B, D, E ag baint úsáide as ceithre ghrúpa turgnamhacha. Rinneadh na lucha a ath-nochtadh don urrann solais ag 24 h tar éis na hoiliúna agus ansin d'fhan siad san urrann dorcha [athghníomhachtú: 0 min sa ghrúpa urrann dorcha, athdhlúthú (Recon); 1 min, trasdul (Tran) grúpa; 10 nóim, grúpa díothaithe (Folíne)]. Níor cuireadh grúpa lucha eile ar ais chuig an urrann solais/dorcha (neamh-athghníomhachtaithe, grúpa NR). Rinneamar néaróin pCREB-dearfach (pCREB1) a chomhaireamh, néaróin pERK-dearfach (pERK1), agus néaróin dúbailte-dearfach (pCREB1 / pERK1) san amygdala, hippocampus, agus mPFC ag 30 min tar éis an tseisiúin athghníomhaithe.

Amygdala (réigiún cliathánach) Cuireadh CREB i ngníomh sna céimeanna díothaithe agus athchomhdhlúthaithe, ach níor cuireadh ERK i ngníomh ach amháin sa chéim díothaithe (Fíor 2A-C). Nocht ANOVA aon-bhealach éifeacht shuntasach grúpa (Fíor 2B, F(3,29)=14.85, p , 0.0001). Cosúil le torthaí roimhe seo (Mamiya et al., 2009), léirigh an tástáil post hoc Newman-Keuls gur léirigh na grúpaí Recon agus Ext i bhfad níos mó néaróin pCREB1 ná na grúpaí eile (lch, 0.05). Léirigh na barúlacha seo, cosúil leis na breathnuithe ar na leibhéil iompraíochta (Fíor 1), go gcealaítear "casadh ar" fosfarylation CREB a mhéadófaí sa chéim athdhlúthaithe má nochtar an urrann dorcha ar feadh 1 nóiméad (céim an aistrithe). I gcodarsnacht leis sin, breathnaíodh i bhfad níos mó néaróin pERK1 sa ghrúpa Ext ná sna grúpaí eile, cé go raibh i bhfad níos lú néaróin pERK1 ná néaróin pCREB1 sa ghrúpa Folíne (F(3,29)=3.793, p { {23}}.0207; Fíor 2C).

Go comhsheasmhach, breathnaíodh i bhfad níos mó néaróin deimhneacha dúbailte (pCREB1/pERK1) sa ghrúpa Folíne (F(3,29)=6.698, p=0.00 14; Fíor 2D), ach breathnaíodh i bhfad níos mó néaróin pCREB1/ pERK – (pCREB dearfach amháin) sna grúpaí Recon agus Fo-líne (F(3,29)=13.689, p , 0 .0001; Fíor 2E). Mar sin, níor léirigh an chéim athdhlúthaithe ach daonra amháin de néaróin pCREB1/pERK-. I gcodarsnacht leis sin, léirigh an chéim díothaithe dhá dhaonra de néaróin pCREB1/pERK– agus pCREB1/perK1, rud a thugann le fios nach bhfuil ERK gníomhachtaithe ach amháin i bhfo-thacar de néaróin pCREB1. Rud atá tábhachtach, breathnaíodh torthaí comhchosúla i réigiún basothaobhach an amygdala (Fíor 2G, F(3,29)=13.042, lch , 0.0001; Fíor 2H, F(3,29) {{32} }.824, p=0.0201; Fíor 2I, F(3,29)=12.633, lch , 0.0001; Fíor 2J, F(3,29)=12 .505, lch , 0.0001).

Gníomhachtú déphasic ERK sa chéim díothaithe Is gníomhaí in aghaidh an tsrutha de CREB é ERK agus mar sin, tá gníomhachtú ERK ag teastáil chun cuimhne eagla a chomhdhlúthú agus a athdhlúthú (Schafe et al., 200{{31) }}; Duvarci et al., 2005). Mar sin féin, go neamhréireach, níor breathnaíodh aon ghníomhachtú ERK san amygdala, hippocampus, nó mPFC sa chéim athdhlúthaithe nuair a rinneadh pERK a thomhas ag 30 nóiméad tar éis an tseisiúin athghníomhaithe (Figs. 2-4). Dá bhrí sin, scrúdaíomar na cúrsaí ama a bhaineann le fosfarylation ERK agus CREB. Rinneamar turgnamh cosúil leis mar atá i bhFíoracha 2-4, ach amháin gur tomhaiseadh leibhéil pCREB agus pERK ag 5, 15, agus 30 nóim tar éis an tseisiúin athghníomhaithe (athnochtadh don urrann dorcha le haghaidh {{). 66}}, 1, nó 10 nóim; Fíor 5A). Ag teacht leis na sonraí a léirítear i bhFíoracha 2-4, breathnaíodh méaduithe suntasacha ar néaróin pCREB1 ag 30 min, ach ní ag 5 min, tar éis an tseisiúin athghníomhaithe sa Recon (amygdala, mPFC agus hippocampus) agus Ext (amygdala agus mPFC ) grúpaí, ach ní grúpa Tran (Fíor 5E, ANOVA aontreo, amygdala, 5 nóim, F(3,23)=0.346, lch 0.05, 30 nóim, F(3,23)=15.272, lch , 0.0001; mPFC, 5 nóim, F(3,23)=1.169, lch . 0.05, 30 nóim, F(3,23)=32. 346, lch , 0.0001; hippocampus, 5 nóim, F(3,23)=0.154, lch 0.05, 30 nóim, F(3,23)=16.197, lch , 0.0001; tástáil t gan phéire, amygdala, athdhlúthú, 5 vs 30 nóim, t(12)=7.807, p , 0.0001, díothú, 5 vs 30 nóim, t(12)=5.405, p { {73}}.0002; mPFC, athdhlúthú, 5 vs 30 nóim, t(12)=5.727, lch , 0.0001, díothaithe, 5 vs 30 nóim, t(12)=4.188 , p=0.0013; réigiún CA1 hippocampal, athdhlúthú, 5 vs 30 nóim, t(12)=2.339, p=0.0374).

Rud suimiúil, breathnaíodh méaduithe suntasacha i néaróin pERK1 sna grúpaí amygdala, mPFC agus hippocampus de na grúpaí Recon, Tran, agus Ext ag 5 min tar éis an tseisiúin athghníomhaithe i gcomparáid leis an ngrúpa NR (Fíor 5F, amygdala, F(3,23)).=10.961, p=0.0001; mPFC, F(3,23)=7.525, p { {13}}.0011; hippocampus, F(3,23)=6.924, p=0.0017). Léirigh na tuairimí seo go gcuirtear ERK i ngníomh díreach tar éis an tseisiúin athghníomhaithe i ngach céim chuimhne. Mar sin féin, d'fhill na méaduithe seo ar líon na néaróin pERK1 go leibhéil basal (inchomparáide leis an ngrúpa NR) ag 15 nóiméad tar éis an tseisiúin athghníomhaithe (Fíor 5F, amygdala, F(3,20)=2.676, p. .0.05; mPFC, F(3,23)=0.683, lch 0.05; hippocampus, F(3,20)=0.74, lch . 0.05). Ina theannta sin, ag teacht leis na torthaí a léirítear i bhFíoracha 2-4, chonacthas i bhfad níos mó néaróin pERK1 san amygdala, mPFC, agus hippocampus ag 30 min tar éis an tseisiúin athghníomhaithe sa ghrúpa Ext amháin (Fíor 5F, amygdala, F (Fíor 5F, amygdala, F). 3,23)=6.616, p=0.022; mPFC, F(3,23)=8.012, p=0.0008; hippocampus, F( 3,23)=6.206, p=0.003). Mar sin, ní léiríonn na céimeanna athdhlúthaithe agus aistrithe gníomhachtú neamhbhuan ERK ach ag an bpointe ama luath (5 nóiméad), ach léiríonn an chéim díothaithe gníomhachtú déphasic ERK ag na pointí ama luatha (5 min) agus déanach (30 nóiméad) tar éis an athghníomhaithe. seisiún. Thug na barúlacha sin le fios go bhfuil difríocht idir na meicníochtaí chun gníomhachtú ERK a rialáil sna céimeanna athdhlúthaithe/aistrithe agus díothaithe. Le chéile, léirigh ár dtuairimí go léiríonn na céimeanna athdhlúthaithe, trasdula agus díothaithe sínithe móilíneacha ar leith.

Róil ghníomhachtú ERK i gcéimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe cuimhne IA

Léirigh na céimeanna athdhlúthaithe/aistrithe agus díothaithe gníomhachtú ERK monophasic agus déphasic, faoi seach. Rinneamar imscrúdú agus chuireamar i gcomparáid leis na róil a bhaineann le gníomhachtú ERK go luath (5 nóiméad) agus go déanach (30 nóiméad) sa mPFC sna céimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe trí scrúdú a dhéanamh ar na héifeachtaí a bhaineann le cosc ​​a chur ar ERK (Fíor 6).

Plé

Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar na meicníochtaí chun cuimhne a aistriú ón gcéim athchomhdhlúthaithe go dtí na céimeanna díothaithe tar éis cuimhne IA a aisghabháil. Ar dtús saintréith againn sínithe iompraíochta na gcéimeanna cuimhne IA tar éis aisghabháil. Ag teacht lenár staidéar roimhe seo (Fukushima et al., 2014), athdhlúthú agus díothú cuimhne IA-spreagtha trí ath-nochtadh don solas (0 nóim sa urrann dhorcha) agus dorcha ( 3 nó 10 nóim) urranna, faoi seach. Is díol spéise é nach raibh cuimhne IA feabhsaithe ná múchta agus léirigh sé frithsheasmhacht in aghaidh cosc ​​​​ar shintéis próitéine nuair a cuireadh na lucha ar ais chuig an urrann dorcha ar feadh 1 nóiméad amháin. Mar sin, tugann na breathnuithe seo le tuiscint go gcealaítear ionduchtú an athchomhdhlúthaithe de bharr 1-nóiméad ath-nochtadh don urrann dorcha, ach nach leor é chun cuimhne IA a mhúchadh. Ina theannta sin, fuair muid amach go raibh ERK i ngníomh san amygdala, hippocampus, agus mPFC ag pointe ama luath (5 min) tar éis ath-nochtadh don urrann dorcha ar feadh 0, 1, nó 10 min. Go comhsheasmhach, chuir cosc ​​ar ERK sna réigiúin inchinne seo bac ar athdhlúthú/feabhsú agus díothú cuimhne IA. Níos tábhachtaí fós, chuir cosc ​​​​ERK san amygdala, hippocampus, agus mPFC tar éis 1-nóiméad ath-nochtadh don urrann dorcha bac ar fheabhsú cuimhne IA trí mheán ath-chomhdhlúthú, rud a thugann le tuiscint gur cheart gníomhachtú ERK tar éis ath-nochtadh gairid (1 min). go dtí an urrann dorcha ag teastáil le haghaidh an chosc ar athdhlúthú cuimhne IA. Os a choinne sin, níor leor ath-nochtadh 1-nóiméad don urrann dhorcha chun cuimhne IA a mhúchadh, cé gur mhúch athnochtadh sínte don urrann dhorcha (3 nó 10 nóim) an chuimhne seo. Mar sin, tugann ár dtorthaí le tuiscint go n-eascraíonn athnochtadh 1-nóiméad don urrann dorcha próiseas aistrithe cuimhne a chealaíonn athdhlúthú/feabhsú ach nach gcuireann tús le foghlaim éagtha. I dteannta a chéile, molaimid go gcuidíonn an próiseas aistrithe cuimhne le hathrú na gcéimeanna cuimhne ó athchomhdhlúthú go dtí díothú trí athdhlúthú a chosc trí mheán ERK.

Cosúil lenár dtuairimí reatha, léirigh staidéar le déanaí ag baint úsáide as riochtú eagla cloisteála go n-eascraíonn cur i láthair CS aonair (1) nó fada (10) athdhlúthú cuimhne agus díothú, faoi seach, trí mhéadú ar leibhéil pERK i réigiún basothaobhach an amygdala. I gcodarsnacht leis sin, ní athraíonn cur i láthair CS idirmheánach (4-7) leibhéil pERK i réigiún basothaobhach an amygdala. Rud atá tábhachtach, níor chuir cosc ​​ERK ag cur i láthair CS idirmheánach isteach ar chuimhne eagla. Mhol an staidéar seo go bhfuil aistriú céime cuimhne ó athdhlúthú go díothú tar éis aisghabháil cuimhne eagla (Merlo et al., 2018). Sa staidéar reatha, leathnaíomar an toradh seo agus mholamar go n-aistreofaí go gníomhach le céim an aistrithe na céimeanna cuimhne ó athdhlúthú go dtí díothú trí ghníomhachtú chonair aistrithe comhartha ERK. I gcodarsnacht le torthaí roimhe seo (Merlo et al., 2018), fuaireamar amach go mbaineann fosfar ERK san amygdala, hippocampus, agus mPFC leis an gcéim aistrithe. B'fhéidir go bhfuil na neamhréireachtaí seo mar gheall ar an difríocht idir na pointí ama a scrúdaíonn fosfarylation ERK; thomhais an staidéar roimhe seo leibhéil pERK ag; 12 nóiméad tar éis cur i láthair CS (Merlo et al., 2018), agus léirigh ár staidéar gur tháinig méadú ar leibhéil pERK ar ais go dtí an leibhéal bunúsach ag thart ar an bpointe ama seo (15 nóiméad tar éis an ath-nochta). Ina theannta sin, tá sé tábhachtach a thabhairt faoi deara go gcumasaíonn tasc an IA breathnú ar fheabhsú cuimhne IA trí athdhlúthú, rud a fhágann go dtagann ár gcinneadh go gcuireann cosc ​​ar ERK ag an gcéim aistrithe bac ar fheabhsú cuimhne IA.

Tá sé léirithe ag staidéir roimhe seo go bhfuil méadú ar fhosfarylation ERK i réigiún basolateral an amygdala ag 20-60 nóiméad tar éis cuimhne eagla cued a fhoghlaim (Herry et al., 2006; Merlo et al., 2014, 2018), ach léiríonn an hippocampus an gníomhachtú seo ag 1 h tar éis díothú na cuimhne eagla comhthéacsúla (Fischer et al., 2007; Tronson et al., 2009). Sa staidéar reatha, fuaireamar tuairimí comhchosúla go méadaítear pERK ag 30 nóiméad tar éis an tseisiúin athghníomhaithe sa chéim díothaithe. Tugann na torthaí le fios go bhfuil ERK phosphorylation síniú móilíneach coitianta na céime díothaithe déanach (20-60 min).

Ina theannta sin, thugamar faoi deara go dtarlaíonn gníomhachtú ERK go déphasically ag pointí ama luath agus déanach (5 agus 30 min) tar éis an tseisiúin athghníomhaithe sa chéim díothaithe, ach tarlaíonn an gníomhachtú seo mona go céimneach ag an bpointe ama luath sa chéim athdhlúthaithe (Fíor 5). . Go comhsheasmhach, chuir cosc ​​ar ERK i réigiúin inchinn ag na pointí ama seo de na céimeanna athdhlúthaithe agus díothaithe bac ar athdhlúthú / feabhsú agus díothú fadtéarmach, faoi seach (Fíor 6 A, C - H). Tugann na tuairimí seo le fios go bhfuil gá le gníomhachtú ERK monophasic agus déphasic chun cuimhne IA a fheabhsú agus a dhíbirt trí mheán ath-chomhdhlúthaithe, faoi seach. Tá sé tábhachtach a thabhairt faoi deara go bhfeidhmíonn ERK mar rialtóir in aghaidh an tsrutha ar fhosfarylation CREB. Dá bhrí sin, féadfaidh gníomhachtú neamhbhuan ERK sa chéim chuimhne luath, go páirteach ar a laghad, cur leis an bhfosphorylation CREB seo, a ghníomhaíonn léiriú na ngéinte atá ag teastáil le haghaidh athdhlúthú agus díothú fadtéarmach.

Cosúil lenár dtorthaí roimhe seo ag baint úsáide as riochtú eagla comhthéacsúil (Mamiya et al., 2009), cuireadh CREB i ngníomh sna céimeanna cuimhne athdhlúthaithe (amygdala / hippocampus / mPFC) agus díothaithe (amygdala / mPFC), agus níor cuireadh ERK i ngníomh ach amháin sa chéim díothaithe. ag 30 nóiméad tar éis an tseisiúin athghníomhaithe. Go comhsheasmhach, níor breathnaíodh ach daonra amháin de pCREB1/pERK- néaróin sa chéim athdhlúthaithe, agus breathnaíodh daonraí néaróin ar leith sa chéim díothaithe: pCREB1/pERK – agus néaróin pCREB1/pERK1 san amygdala (Fíor 2); pCREB– /pERK1 néaróin sa hippocampus (Fíor 3); agus pCREB1/pERK–, pCREB– /pERK1, agus néaróin pCREB1/pERK1 sa mPFC (Fíor 4). Tugann na breathnuithe seo, go háirithe an bhreathnóireacht chodarsnachta ar néaróin pCREB-/ pERK1 agus pCREB1/pERK-, le fios go ndéantar gníomhachtú CREB agus ERK a rialú ar bhealach difriúil i ngach limistéar inchinn nuair a mhúchtar an chuimhne agus go n-imríonn gníomhachtú céim dhéanach ERK go sonrach agus go sainiúil. róil chun cuimhne eagla a dhíbirt i gcomparáid le próisis chuimhne eile cosúil le comhdhlúthú agus athdhlúthú mar a phléitear thíos. Rud suimiúil, thugamar faoi deara go raibh néaróin pERK1 níos flúirseach sa mPFC i gcomparáid leis an hippocampus agus amygdala, ó léirigh an mPFC cóimheas níos airde de néaróin pERK1 (céim díothaithe) agus néaróin pCREB1 (céim athdhlúthaithe) i gcomparáid leis an hippocampus agus amygdala, ag moladh go tá ról níos sainiúla ag gníomhachtú ERK sa mPFC maidir le díothú cuimhne.

Níl sé soiléir fós an bhfuil na daonraí céanna nó difriúla néaróin i ngníomh sna céimeanna cuimhne athdhlúthaithe, aistrithe agus díothaithe. D'aithin staidéar roimhe seo gníomhachtú "néaróin eagla" agus "néaróin éagtha" san amygdala nuair a athghníomhaítear nó nuair a mhúchtar cuimhne eagla cued, faoi seach (Herry et al., 2008). Mar sin, is féidir go gcuirfí ERK agus CREB i ngníomh i ndaonraí éagsúla néaróin le próifílí ama éagsúla (ie, "néaróin ath-chomhdhlúthaithe" agus néaróin díothaithe). Mar a pléadh thuas, féadfaidh néaróin pCREB1, lena n-áirítear néaróin pCREB1/pERK1, athdhlúthú agus díothú fadtéarmach cuimhne IA a rialáil trí léiriú géine a ghníomhachtú mar néaróin ath-chomhdhlúthaithe agus díothaithe, faoi seach. Os a choinne sin, féadfaidh gníomhachtú ERK i néaróin pCREB– /pERK1 cur le cealú gníomhachtú tras-idirghabhála CREB-idirghabhála a bheadh ​​ag teastáil le haghaidh athchomhdhlúthú ós rud é go dtugtar an gníomhachtú ERK seo faoi deara go sonrach sa chéim díothaithe dhéanach; Chuir ERK i ngníomh sna néaróin athdhlúthúcháin chun gníomhachtú léiriú géine sa chéim díothaithe a chealú. Suimiúil go leor, léirigh staidéar roimhe seo go gcuireann gníomhachtú hippocampal ERK bac ar ionduchtú c-fos nuair a dhéantar cuimhne eagla comhthéacsúil a mhúchadh (Guedea et al., 2011), ag ardú an fhéidearthacht go gcuireann an gníomhachtú ERK seo antagonizes ar chonair na comharthaíochta CREB. Tá sé tábhachtach na daonraí néarónacha a rialaíonn athdhlúthú, trasdul, agus díothú a aithint agus chun sínithe móilíneacha agus tábhacht fheidhmiúil na néaróin sin a imscrúdú. Ina theannta sin, tá idirghníomhaíochtaí i measc na ndaonraí néaracha a aithníodh sa staidéar seo fós anaithnid. Is féidir go modhnódh "néaróin éagtha (idirthréimhse)" feidhm na néaróin ath-chomhdhlúthaithe chun athchomhdhlúthú a chosc a chur ar ceal trí idirghníomhaíochtaí eatarthu (Eisenberg et al., 2003; Merlo et al., 2014). Dá bhrí sin, tá sé tábhachtach freisin na hidirghníomhaíochtaí seo a scrúdú san amygdala, mPFC, agus hippocampus agus ina measc.

Roimhe seo, thaispeáin muid nach léiríonn an hippocampus aon athrú ar phosphorylation CREB agus léiriú Arc tar éis foghlaim éagtha ar eagla comhthéacs, agus go comhsheasmhach, theipeann ar chosc ar shintéis próitéine sa hippocampus sa chéim díothaithe bac fadtéarmach extinction (Mamiya et al. , 2009). D'ardaigh na tuairimí seo an fhéidearthacht nach bhfuil an hippocampus ag teastáil le haghaidh díothaithe go fadtéarmach. Mar sin féin, léirigh muid go bhfuil ERK i ngníomh sa hippocampus tar éis foghlaim éag cuimhne IA, agus go comhsheasmhach, bac ar ghníomhachtú ERK sa hippocampus bac fadtéarmach extinction. Mar sin, léiríonn ár dtuairimí reatha róil riachtanacha don hippocampus i ndíothú cuimhne. Agus ár dtorthaí roimhe seo á gcur san áireamh againn, molaimid go bhfuil an hippocampus ag teastáil chun cuimhne a dhíbirt ach ní le haghaidh próiseas comhdhlúthaithe chun "cuimhne éagtha" a chobhsú trí léiriú géine a ghníomhachtú.