Éifeacht ísliú aigéad uric agus meicníocht acteoside agus echinacoside a bhaintear as cistanche tubulosa
Mar 03, 2025
Achoimre:Déan iarracht iniúchadh a dhéanamh ar na héifeachtaí agus na meicníochtaí íslithe aigéid uric (AS) agus echinacoside (ECH) a bhaintear asCistanche tubulosa.
ModhannaBunaíodh samhail francach Hyperuricemia (HUA) ag baint úsáide as potaisiam oxonate (1.5 g · kg -1 · d {-1) in éineacht le adenine (100 mg · kg -1 · d -1). Roinneadh na francaigh mhúnla HUA go randamach i ngrúpa rialaithe samhail, grúpa allopurinol (30 mg · kg -1 · d -1), chomh híseal agus ard (50, 100 mg · kg -1 · d {-1) Grúpaí a dháileadh, agus ECH (50, 100, 100, 100 {{{13}), agus ECH (50, 100, 100 {{{13}) a dháileadh grúpaí, agus ECE (50, 100, 100 {{{}}}) mg · kg -1 · d {-1) grúpaí dáileoige. Bunaíodh gnáthghrúpa rialaithe roimhe seo. Tar éis ceithre seachtaine riaracháin, baineadh úsáid as an Anailíseoir Bithcheimice Fola chun SUA úiré, CREA, adenosine deminase (ADA) agus leibhéil aigéad uric (UUA) a bhrath i bhfual. Baineadh úsáid as measúnacht imdhíonachta atá nasctha le heinsím chun leibhéil oxidase xanthine (XOD) a bhrath i serum. Bailíodh fíochán duáin, agus rinneadh comhéifeacht duáin a mheá agus a ríomh. Baineadh úsáid as smálú hematoxylin eosin (HE) chun athruithe paiteolaíocha duánacha a bhreathnú. Baineadh úsáid as immunohistochemistry (IHC) agus PCR fíor -ama chun na leibhéil léirithe próitéine agus mRNA a bhrath de iompróir urate 1 (URAT1), iompróir glúcóis 9 (GLUT9), iompróir anion orgánach 1 (OAT1), agus iompróir anion orgánach 3 (OT3) i bhfíochán dul. D'fhéadfadh na torthaí AS agus ECH feabhas a chur ar fheidhm duánach i bhfrancaigh mhúnla HUA, leibhéil aigéid uric fola a laghdú, eisfhearadh aigéad uric a chur chun cinn, leibhéil serum ADA agus XOD a laghdú, agus léiriú próitéine agus mRNA Urat1 agus GLUT9 i bhfíochán duánach a ghreamú, agus léiriú próitéine agus mRNA mRNA de OAT1 agus OAT3 i bhflaitheas recnal a uasmhéadú.
Conclúidí Is féidir leis na gliocóisídí phenylethanoid mar agus ECH ó Cistanche tubulosa éifeachtaí a ísliú aigéad uric a ísliú trí fheidhm duánach a fheabhsú i bhfrancaigh mhúnla HUA, leibhéil ADA agus XOD a laghdú, agus léiriú Urat1, GLUT9, OAT1, agus OAT3 a rialú.
Eochairfhocail: Cistanche Tubulosa; aicteoside. Echinacoside; Hyperuricemia; aigéad uric a laghdú; meicníocht
Sliocht Cistanche Tubulosa le 16% acteoside
Is galar meitibileach é Hyperuricemia (HUA) de bharr meitibileacht purine neamhordúil i gcorp an duine, as a dtiocfaidh leibhéil ardaithe aigéad uric fola [1]. Déantar é a dhiagnóisiú de ghnáth nuair a sháraíonn leibhéil aigéad uric fola 7. {0 mg · dl⁻¹ (416. Baineann forbairt hyperuricemia go príomha le tosca amhail aistí bia ard-phurine, tomhaltas ainsealach alcóil, úsáid cógais, agus hypothyroidism. Ní hamháin go méadaíonn sé an baol a bhaineann le galair chardashoithíoch, diaibéiteas, agus Hipirtheannas [{3-4] ach bíonn tionchar suntasach aige ar shláinte na n -othar.
Faoi láthair, tá drugaí a chuireann cosc ar tháirgeadh aigéad uric agus eisfhearadh aigéad uric chun cinn go príomha i gcóireálacha cliniciúla le haghaidh hyperuricemia. Mar sin féin, tá teorainneacha áirithe ag na cóireálacha seo d'othair a bhfuil feidhm ae nó duáin lagaithe acu [5-6]. Dá bhrí sin, tá tábhacht mhór ag baint le hiniúchadh a dhéanamh ar dhrugaí éifeachtacha a bhfuil fo -iarsmaí ísle acu maidir le hyperuricemia a chosc agus a chóireáil.
Cistanche Tubulosa (Schenk) R. Wight, a úsáidtear go coitianta i leigheas traidisiúnta na Síne mar luibh a dhéanann duáin, a úsáidtear chun cóireáil a dhéanamh ar choinníollacha amhail neamhinniúlacht, neamhthorthúlacht, easnamh bunúsach agus fola, laige sa chúl íochtarach agus sa ghlúine, laige matáin, agus constipation mar gheall ar thriomacht stéigeach [7]. Léirigh staidéir sinCistanche tubulosatá neuroprotective [8], frith-athlastach [9], rialáil meitibileachta cnámh [10], agus éifeachtaí feabhsaithe éifeachtúlachta i gceimiteiripe d'othair ailse [11]. I measc na gcomhpháirteanna gníomhacha éagsúla atá aige, is iad gliocóisídí feinylethanoid na cinn is flúirsí.
Acteoside (AS) agus Echinacoside (ECH), dhá gliocóisíd feinylethanoid le hábhar ard iCistanche tubulosa, gníomhaíocht bhitheolaíoch láidir a thaispeáint agus poitéinseal suntasach a bheith ann maidir le forbairt agus cur i bhfeidhm. Dá bhrí sin, roghnaigh ár ngrúpa taighde AS agus ECH le haghaidh tuilleadh staidéir. Trí réamh-mheastacháin chógaseolaíochta líonra agus réamh-turgnamh i lucha, fuaireamar amach go bhfuil sleachta glycoside feinilítéití óCistanche tubulosaD'fhéadfadh éifeacht áirithe a ísliú aigéad uric a bheith aige. Mar sin féin, níl na conairí agus na meicníochtaí de na héifeachtaí seo soiléir.
Dá bhrí sin, ag baint úsáide as meicníochtaí táirgthe aigéid uric agus a phríomhbhealaí eisfhearadh mar an fócas taighde, rinneamar imscrúdú ar na héifeachtaí íslithe aigéid uric a bhí ag na sleachta glycoside phenylethanoid mar agus ECH. Tá sé mar aidhm ag an staidéar seo na conairí agus na meicníochtaí a shoiléiriú trínar féidir a n-éifeachtaí a ísliú aigéad uric a chur i bhfeidhm.
1 ábhar
1.1 Ainmhithe Turgnamhacha
Ceannaíodh francaigh Sprague-Dawley (SD) SPF-fireann fireann, a mheá 150-180 g, ó Ionad Turgnamhach Ainmhithe Ollscoil Leighis Xinjiang. Uimhir Cheadúnas Táirgeadh Ainmhithe: Scxk (xin) 2023-0001. D'fhaomh an Coiste Eitice Ainmhithe de chuid Institiúid Taighde Uygur Medicine Réigiún Xinjiang Réigiún Xinjiang, leis an Uimhir Cheadaithe Eitice Ainmhithe: IACUC- (ZHUN) -2024-009.
1.2 Drugaí agus Imoibrithe
Sleachta glycoside feinylethanoid (AS agus ECH)óCistanche tubulosa (purity >Baineadh 98%, arna fhíorú ag crómatagrafaíocht leachtach ardfheidhmíochta), íonaithe, agus ullmhaíodh iad ag príomh-shaotharlann na heolaíochta foirmithe Uygur, Xinjiang Réigiún Uathrialach Institiúid Taighde Leigheas Uygur. Uimhreacha Baisc: 20220617 (AS) agus 20220526 (ECH).
Táibléad allopurinol.
Oxonate potaisiamisallaín, Uimhreacha Baisc: I2130050 agus C2202255, a ceannaíodh ó Shanghai Aladdin Teicneolaíocht Bithcheimiceach, Ltd.
Crea (creatinín), UA (aigéad uric), úiré, agus trealamh measúnachta ADA (adenosine Deaminase).
Kit Measúnachta Gníomhaíochta XOD (Xanthine Oxidase), Uimhir Bhaisc: Y10001219, a ceannaíodh ó Shanghai Macklin Biochemical Technology Co., Ltd.
Antasubstaintí (Urat1, Glut9, OAT1, OAT3).
Gabhar Lipéadaithe HRP IgG IgG, uimhir bhaisc: 245440113, a ceannaíodh ó ZSGB-BIO.
Tuaslagán staining hematoxylin, uimhir bhaisc: 24135741H, a ceannaíodh ó Beijing Lanjieke Technology Co., Ltd.
Trealamh imoibrí chromóigineach DAB, uimhir bhaisc: 240010512, a ceannaíodh ó ZSGB-BIO.
DEPC (Pireacarbónáit Diethyl), uimhir chatalóg: D 60029-500 ml, a ceannaíodh ó Amresco (SAM).
M5 HICLEAL DL2000 DNA Marker.
Imoibrí Trizol ™, Uimhir Chatalóg: 15596026, a ceannaíodh ó Thermo Fisher Scientific (SAM).
5x All-in-One RT MastermixisEvagreen Express 2 × QPCR Mastermix-Low Rox, Uimhreacha Catalóg: G492 agus G891, a ceannaíodh ó Applied Biological Materials Inc. (ABM).
2 mhodh
2.1 Bunú agus Grúpáil Múnla
Rinneadh seachtó francach fireann Sprague-Dawley (SD) a chur i bhfeidhm agus a roinnt ina dhá ghrúpa: gnáthghrúpa rialaithe (1 0 francaigh) agus grúpa rialaithe samhail (60 francaigh). Rinneadh an gnáthghrúpa rialaithe a riaradh 0.5% CMC-NA trí gavage. Riaradh an grúpa rialaithe samhail oxonate potaisiam (1.5 g · kg⁻¹) in éineacht le adenine (100 mg · kg⁻¹) ag dáileog de 10 ml · kg⁻¹, uair amháin sa lá ar feadh 14 lá as a chéile. Measadh go raibh an tsamhail bunaithe go rathúil nuair a tháinig méadú suntasach ar leibhéil úiré, CREA, agus SUA, arna dtomhas ag anailíseoir bithcheimiceach.
Roinneadh na francaigh mhúnla hyperuricemia níos mó sna grúpaí seo a leanas bunaithe ar leibhéil SUA, úiré, agus CREA: grúpa rialaithe samhail, grúpa allopurinol (3 {0 mg · kg⁻¹), dáileog íseal mar ghrúpa (50 mg · kg⁻¹), ard-dáileog mar ghrúpa (100 mg · kg⁻¹), grúpa mg-· · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · sna Grúpa Mg-Dáile (50 mg · Grúpa ECH (100 mg · kg⁻¹), le 10 bhfrancaigh i ngach grúpa. Chun hyperuricemia cobhsaí a choinneáil, riaradh gach grúpa seachas an gnáthghrúpa rialaithe oxonate potaisiam (500 mg · kg⁻¹) in éineacht le adenine (100 mg · kg⁻¹) trí ghavage ar maidin, agus ina dhiaidh sin riarachán na ndrugaí faoi seach i ngach grúpa cóireála san iarnóin. Fuair an gnáthghrúpa rialaithe tuaslagán 0.5% CMC-NA ar maidin agus uisce óil san iarnóin ag dáileog de 10 ml · kg⁻¹, uair sa lá ar feadh 14 lá as a chéile. Ina dhiaidh sin, cuireadh stop le riaradh gníomhairí samhaltaithe, agus riaradh na drugaí faoi seach go laethúil ar feadh 14 lá breise.
2.2 Bailiúchán Samplach
Tar éis na dáileoige deiridh, bhí na francaigh greamaithe thar oíche (ní raibh srian ar uisce). Bailíodh fual ó gach grúpa le haghaidh tástála aigéid uric. Rinneadh meáchan coirp a thomhas tar éis an troscadh, agus bailíodh samplaí fola faoi ainéistéise. Rinneadh serum a dheighilt le lártheifneoiriú agus a stóráil lena úsáid sa todhchaí. Bailíodh agus meáigh fíocháin duáin. Socraíodh duán amháin i dtuaslagán paraformaldehyde 4%, agus bhí an ceann eile reoite i nítrigin leachtach le haghaidh anailíse breise.
2.3 Aigéad uric a thomhas i bhfual francach
Rinneadh samplaí fual ó gach grúpa a lártheifneáil (3, 000 r · min⁻¹, 10 nóiméad, ga lártheifneoir 14 cm), agus bailíodh an supernatant. Rinneadh samplaí fuail a chaolú 1: 9 le salanda agus rinneadh anailís orthu le haghaidh ábhar aigéad uric ag baint úsáide as anailíseoir bithcheimiceach.
2.4 Tomhas ADA, Úiré, Crea, agus Sua i Serum francach
Rinneadh samplaí fola ó gach grúpa a lártheifneáil (3, 000 r · min⁻¹, 10 nóiméad, ga lártheifneoir 14 cm), agus bailíodh serum. Tomhaiseadh leibhéil ADA, úiré, CREA, agus SUA sa serum trí anailíseoir bithcheimiceach a úsáid.
2.5 tomhas Xod i serum francach
Tomhaiseadh athruithe ar leibhéil XOD i serum francach ag baint úsáide as measúnacht einsímeach de réir threoracha an déantóra. Taifeadadh an t -ionsúchán tosaigh (A₁) agus an t -ionsúchán deiridh (A₂) ag 290 nm, agus ríomhadh ΔA (ΔA=a₂ - a₁). Cuireadh ΔA in ionad na foirmle:
Xod (nmol⁻¹ · min⁻¹ · ml⁻¹) {= [ΔA × Córas imoibriúcháin toirt iomlán ÷ (comhéifeacht díothaithe molar d'aigéad uric × fad cosáin optúil) × 10⁹] ÷ toirt samplach ÷ am=4262 × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × × ΔA {{{} × × × ΔA,
Chun méid an aigéid uric a ríomhtar in aghaidh an nóiméid in aghaidh an mhillilítear serum a ríomh.
2.6 tomhas comhéifeacht duáin
Bailíodh fíocháin duáin, nite le salanda, agus baineadh an iomarca uisce amach. Rinneadh meáchan an orgáin a thomhas go cruinn, agus ríomhadh an chomhéifeacht duáin mar seo a leanas:
Comhéifeacht na duáin=meáchan duáin (mg) / meáchan coirp (g).
2.7 Breathnóireacht Histopathological ar fhíochán duáin ag an smálú
Rinneadh fíocháin duáin a socraíodh i dtuaslagán paraformaldehyde 4% a dhíhiodráitíodh le tiúchan eatánóil grádaithe, glanta le xiléin, leabaithe sa pharaifín, agus roinn siad i slisní 4- μm. Rinneadh na rannóga a dhíspreagadh le xiléin, hiodráitithe le eatánól grádaithe, daite le hematoxylin agus eosin (HE), agus séalaithe le guma neodrach. Breathnaíodh na hathruithe moirfeolaíocha i bhfíochán na duáin faoi mhicreascóp solais, agus gabhadh íomhánna ag formhéadú 400 ×.
2.8 Urat1, GLUT9, OAT1, agus léiriú próitéine OAT3 a bhrath i bhfíochán duáin ag IHC
Rinneadh fíocháin duáin a socraíodh i dtuaslagán paraformaldehyde 4% a dhíhiodráitíodh le tiúchan eatánóil grádaithe, glanta le xiléin, leabaithe sa pharaifín, agus roinnte. Rinneadh aisghabháil antaiginí agus blocáil serum gabhar. Cuireadh antasubstaintí príomhúla (URAT1, GLUT9, OAT1, OAT3) leis ag caolú 1: 200 agus rinneadh iad a ghoradh thar oíche ag 4 chéim. An lá dár gcionn, rinneadh na rannóga a ní le PBS, a bhí triomaithe ar an aer, agus iad a ghoradh le IgG frith-choinín gabhar biotin-lipéadaithe ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad. Rinneadh na rannóga a ní le PBS agus iad a ghoradh le himoibrí chromóigineach DAB ar feadh 10 nóiméad, agus ina dhiaidh sin sruthlú PBS, smálú hematoxylin ar feadh 3 nóiméad, difreáil le tuaslagán eatánóil aigéid hidreaclórach, gorm -charbónáit litiam, díhiodráitiú le neodrach le neodrach, ag glanadh le xiléin, agus seall le guma neodrach.
I gcás gach francach, roghnaíodh dhá pháirceanna randamacha 4 0 0 × de na rannóga duáin. Rinneadh anailís ar dhathú dearfach (donn-bhuí), agus tomhaiseadh dlús optúil comhtháite (IOD) gach réimse ag baint úsáide as Image-Pro Plus 6.0 le haghaidh anailíse staitistiúil.
