Rialú Comhdhlútháin Imd atá rialaithe ag Theaflaivin agus Hoiméastáis Stéigeach Drosophila agus Aosú

Déan teagmháil le do thoiloscar.xiao@wecistanche.comle haghaidh tuilleadh eolais

ACHOIMRE

Is é an tae dubh an deoch tae is mó a itear ar domhan agus tuairiscíodh go seasta go bhfuil buntáistí frith-aosaithe aige. Mar sin féin, ní fios den chuid is mó an bhfuil baint ag teaflavins, cineál amháin de na fíteasceimiceach sainiúil i sleachta tae dubh, le haosú agus saolré tomhaltóirí a rialáil. Sa staidéar seo, léirímid go n-imríonn naaflavins ról tairbheach chun sceitheadh ​​intestinal agus dysbiosis ag tosú ag aois a chosc, rud a chuireann moill ar aosú i Drosophila. Go meicniúil, rialaíonn naaflavins comhthionól comhdhlúthán Imd chun róghníomhaíocht chomharthaí Imd i intestines eitilt torthaí a rialú go diúltach. Ina theannta sin, cuireann na teil-abháin cosc ​​​​ar cholitis a tharchuirtear le DSS i lucha, rud a thugann le tuiscint go bhfuil ról ag na teaifigh chun sláine stéigeach a mhodhnú. Tríd is tríd, taispeánann ár staidéar meicníocht mhóilíneach trína rialaíonn naaflavins hoiméastáis gut is dócha trí chomhtháthú Imd a rialú.

Cliceáil anseo le do thoil chun tuilleadh eolais a fháil

RÉAMHRÁ

Is éard atá i gceist le dul in aois, arb iad is sainairíonna é laghdú ar fheidhmeanna fiseolaíocha i gcórais orgán aonair agus baol méadaitheach galair agus báis, carnadh damáiste do mhóilíní, cealla agus fíocháin (Alavez et al., 2011; Bartke et al., 2019; Engeet al., 2017). Is ríthábhachtach gan dabht sainaithint ábhar feidhme nó ceimiceán a chuireann cosc ​​ar mheath bitheolaíoch chun moill a chur ar an bpróiseas aosaithe agus chun saolré a fhadú (Bar-ardo et al., 2017; Kapahi et al., 2017). Thuairiscigh staidéir roimhe seo go bhfuil gníomhaíochtaí suntasacha ag tae dubh, an tae is mó a itear ar domhan, a chuireann moill ar aosú (Cameron et al., 2008; Fei et al., 2017; Kumar agus Rizvi, 2017; Naumovski et al., 2019 ; Peng et al., 2009; Xiao et al., 2020). Síneann forlíonadh cothaithe le sleachta tae dubh go héifeachtach saolré ainmhithe turgnamhacha cosúil le péisteanna (Feet al., 2017), cuileoga torthaí (Peng et al., 2009; Site al., 2011), lucha (Site al., 2011). ; Xiao et al., 2020), agus francaigh (Kumar agus Rizvi, 2017).

Tá a fhios go maith go bhfuil dhá chineál fíteiceimiceach go príomha i sleachta tae dubh, eadhon, catechins agus theaflavins (TFs) (Cameron et al., 2008; Kondo et al., 2019; Li et al., 2013), agus an dara ceann acu a tháirgtear ó catechins ag polyphenol oxidase endogenous agus peroxidase le linn an phróisis ocsaídiúcháin i dtáirgeadh tae dubh (Li et al., 2013). D’aithin sraith staidéar ról frith-aosaithe na catechins trí strus ocsaídiúcháin agus athlasadh a bhaineann le haois a fheabhsú agus damáiste fíocháin a laghdú (Cameron et al., 2008; Niu et al., 2013; Peng et al., 2009; Si et al. .2011; Waaner et al., 2015). Mar sin féin, tá staidéir fheidhmiúla ar rannchuidiú TFanna le dul in aois go mór chun deiridh orthu siúd ar catechins, toisc go bhfuil sé deacair méideanna leordhóthanacha TF a bhaint as duilleoga tae dubh le haghaidh staidéir leighis (Takemoto agus Takemoto, 2018). Le déanaí, forbraíodh roinnt modhanna bithsintéiseach le haghaidh olltáirgeadh TFanna (Takemoto agus Takemoto, 2018), rud a fhágann gur féidir iniúchadh a dhéanamh ar na héifeachtaí bitheolaíocha atá ag TFanna agus na meicníochtaí rialála bunúsacha.

Le déanaí, tá sraitheanna méadaithe sonraí tar éis béim a chur ar róil lárnacha na n-intestí maidir le dul in aois agus modhnú saoil (Guo et al., 2014; Jji et al., 2019; Maynard agus Weinkove, 2018; Rothenberg agus Zhang, 2019; Salazar et al. ,2018). Ceadaíonn an epithelium intestinal, a fheidhmíonn mar bhac roghnach, ionsú cothaithigh, iain, agus uisce agus cuireann sé teorainn le teagmháil óstaigh le haonáin díobhálacha, lena n-áirítear miocrorgánaigh, antaiginí aiste bia, agus tocsainí comhshaoil ​​(Capo et al., 2019; Nicholson et al. , 2012; Ryu et al., 2010). Mar fhíochán ard-láimhdeachais i ndaoine aonair, soláthraíonn an conradh intestinal an timpeallacht mhaireachtála is fearr do mhiocrorgánaigh siombóiseacha, lena n-áirítear coinníollacha anaeróbach nádúrtha, cothaithigh flúirseach, agus teocht oiriúnach agus pH.

Figiúr 1. Síneann Theaflavins saolré Drosophila agus feabhsaíonn siad an cumas dreapadóireachta

(A agus B) Saothraíodh cuileoga torthaí baineanna le bianna caighdeánacha a forlíonta le 1 mg/ml nó 2.5 mg/mL theaflavins (TFs) nó gan TFanna mar bhunachar. Aistríodh cuileoga chuig vials úra ina raibh meáin nua gach dara lá, agus scóráil cuileoga marbh le linn shaolré an duine fásta, rinneadh anailís agus léiríodh ar chuair marthanais (A) agus ar mheánfhad saoil (B) na gcuileoga baineanna.

(Ceand D) Tugadh bianna caighdeánacha Drosophila do mhná w18 (Basal dá dtagraítear) nó le bianna a forlíonta le 1mg/ml nó 2.5mg/ETF, faoi seach. Cuireadh sé ghrúpa neamhspleácha cuileoga ag na haoiseanna sonraithe (10 lá, 30 lá, 40 lá, agus 50 lá, faoi seach) faoi réir na dtástálacha caifé(C) agus beathú Fluorescein (D). luach, ag foirmiú nideoga áitithe ag speicis baictéaracha ar leith sa chorp (Bonfini et al., 2016; Buchon et al., 2013; Nicholson et al., 2012). Idir an dá linn, cuireann na miocrorgánaigh siombóiseacha seo agus a meitibilítí isteach go díreach nó go hindíreach ar phróiseáil cothaitheach; díleá agus ionsú; cothromaíocht fuinnimh; feidhm imdhíonachta; forbairt gastrointestinal agus aibithe; agus go leor gníomhaíochtaí fiseolaíocha tábhachtacha eile (Bonfini et al., 2016; Broderick, 2016; Maynard agus VVeinkove, 2018; Nicholson et al., 2012). Is féidir leis an gcaidreamh comhthairbheach idir an dá shiombail cobhsaíocht agus cothromaíocht dhinimiciúil an mhicrea-éiceachórais intestinal a chothabháil (Bonfini et al., 2016; Brodeerick, 2016; Broderick et al., 2014; Guo et., 2014; May-nard agus Weinkove, 2018; Nicholson et al., 2012).

is féidir cistanche frith-aging

Tá sé léirithe ag sraith staidéar go bhfuil an freagra imdhíonachta dúchasach ríthábhachtach chun homeostasis miocróib intestinal a chothabháil agus go ndéantar é a chaomhnú ó inveirteabraigh go veirteabraigh (Guillouet al., 2016; Guo et al., 2014; Ryu et al., 2006, 2010; Vijay- Kumar et al., 2010). I Drosophila, tá baint ag dhá mhórbhealach comharthaíochta, eadhon, cosáin an Tola agus easnaimh imdhíonachta (Imd), leis na freagairtí imdhíonachta dúchasacha (Lu et al., 2020; Myllymakiet al., 2014; Valanne et al., 2011). Go háirithe, tá cosúlachtaí idir cosán Dola Drosophila agus na conairí gabhdóirí idirleukin-1 mamaigh (IL-1R) agus MyD88-spleách ar nós dola (TLR), cé go bhfuil cosán an imd cosúil leis. chuig cosán gabhdóra fachtóir neacróis meall (TNFR) agus an cosán TLR-spleách TLR i mamaigh (Imler, 2014; Myllymaki et al., 2014; Valanne et al., 2011). Rialaíonn an dá chonair seo léiriú na peptides frithmhiocróbach (AMPanna) trí ghníomhachtú fachtóirí trascríobh NF-KB (Imler, 2014; Myllymaki et al., 2014; Valanne et al., 2011).bithfhlavonoidsIs gnách go ngníomhaíonn ionfhabhtú baictéarach Gram-diúltach cosán comharthaíochta Imd agus cuirtear sraith eile AMPanna in iúl, mar shampla Attacin, Cecropin, agus Diptericin (Kleino agus Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2014). Éilíonn léiriú na AMPanna seo an próitéin aitheantais peptidoglycan (PGRP) - receptor LC sa chonair Imd agus scoilteacht comhartha-spleách agus traslonnú núicléach Relish, fachtóir trascríobh teaghlaigh NF-kB (Kleino agus Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2014). Léirigh staidéar le déanaí go bhfuil gá le foirmiú amyloid chun cosán Drosophila Imd a ghníomhachtú nuair a aithnítear peptidoglycans baictéarach (Kleino et al., 2017). Mar sin féin, ní fios go fóill an bhfuil baint ag an gcomhdhlúthán Imd seo le próisis bhitheolaíocha eile, amhail cothabháil hoiméastáis intestinal agus rialáil aosaithe.

Sa staidéar seo, d'úsáideamar cuileoga torthaí agus lucha mar mhúnlaí ainmhithe chun rólanna TF a fhiosrú maidir le sláine stéigeach agus aosú a rialú. Thaispeáin muid go gcuireann TFanna moill ar ró-iomadú aois-tosaithe na ngascheall intestinal, go gcosnaíonn siad i gcoinne dysbiosis an mhicribhithóim gut, agus go gcuireann siad cosc ​​​​ar ghníomhachtú cosán comharthaíochta IMD, rud a chuireann síneadh le saolré Drosophila. Léirigh staidéir mheicníochta breise go bhféadfadh TFanna cur go diúltach le comharthaíocht Imd trí chomhdhlúthú Imd a bhlocáil seachas a uileláithreacht. Ina theannta sin, fuaireamar amach go bhfuil TFanna an-éifeachtach chun colitis spreagtha DSS a chosc i lucha. Nuair a chuirtear le chéile iad, léiríonn ár dtorthaí ról féideartha TFanna maidir le hiompar IMD a mhodhnú, rud a d'fhéadfadh a bheith mar phríomhfhachtóir lena rannchuidiú dearfach le hoiméastáis intestinal agus síneadh saoil.

TORTHAÍ

Leathnaíonn forlíonadh aiste bia theaflavins saolré Drosophila

Chun scrúdú a dhéanamh an bhfuil tionchar ag teaflavins (TFanna) ar aosú agus ar shaolré i Drosophila, d’ardaigh muid cuileoga baineann w’118 le bianna tógála caighdeánacha a forlíonta le TFanna 1mg/mL nó 2.5mg/ml agus rinneamar measúnuithe saoil mar a thuairiscítear roimhe seo (Ji et al .,2019). Measadh rialuithe a bheith ag cuileoga a chothaítear aiste bia a raibh an méid céanna de thuaslagóirí TF (H2O) mar fhorlíonadh air. Mar a léirítear i bhFíor 1A, chuir cur leis an aiste bia de thiúchan sách íseal TFanna (1 mg/mL) le saolré na heitilte torthaí beagán fada, agus bhí tionchar dearfach suntasach ag tiúchan ard TFanna (2.5 mg/mL) ar fhadú saolré. Go háirithe, ba é an toradh a bhí ar ghlacadh fadtéarmach tiúchan ard TFanna (2.5 mg/mL) go raibh thart ar 8 lá ardaithe i saolréanna meánacha na gcuileoga baineann (Fíor 1B), rud a thugann le tuiscint go bhfuil ról tairbheach ag TFsin maidir le fad saoil a rialú i Drosophila. Fuarthas torthaí comhchosúla nuair a rinneamar tástáil ar éifeachtaí féideartha TF breise ar shaolré na gcuileoga fireanna w'*'''8 (Figiúirí S1A agus S1B).

Figiúr 2. Coscann Theaflavins mífheidhmiú gut aois-tosaithe agus dysbiosis microbiota i Drosophila

(A agus B) Mheas an Smurftest cailleadh sláine stéigeach ag aois 10 lá, 30 lá, 40 lá, agus 50 lá d’aosaigh mná w18. Léiríodh samplaí de neamh-Smurf agus Smurf in (A). Rinneadh anailís ar na céatadáin Smurf i ngrúpaí léirithe éagsúla agus taispeánadh iad in (B).

(C) Rinneadh anailís agus léiríodh ar shaotharlanna baictéar a shábháil qPCR den ghéin rRNA 16S i gcomhaid w18 baineann ó ghrúpaí éagsúla léirithe.

(DF) Rinneadh seicheamhú na géine rRNA baictéarach 16S comhthráthach. Rinneadh anailís agus cur i láthair ar chomhréireanna na tacsa baictéarach (D), léarscáil teasa den phríomh-tacsa miocróbach (F), agus raidhse coibhneasta Gammaproteobacteria (F).

Fíor 2. Ar lean

(G agus H) Scaradh inní ó na cuileoga baineanna a tugadh le fios le TF 2.5 mg/ml nó gan TFanna mar rialú ag an 10 lá agus 40 lá d'aois. Gabhadh íomhánna de shleamhnáin midgut le micreascópacht fhluaraiseachta le haghaidh comharthaí GFP (G). Taispeántar anailís staitistiúil a thaispeánann céatadáin na gcealla GFP-dearfach in(H).

(I) Bailíodh inní ó na cuileoga baineanna a tugadh le fios agus rinneadh iad faoi thástálacha imdhíon-chothaithe ag baint úsáide as antasubstaintí i gcoinne Histone 3(pH3) fosfariláitithe. Rinneadh anailís agus taispeánadh torthaí staitistiúla a chainníochtú pH3-chealla dearfacha in aghaidh na putóige. I B, C, H, agus, déantar anailís ar shonraí de réir thástáil an Dalta dhá earr agus taispeántar iad mar acmhainn ± SEM.NS, nach bhfuil suntasach,*p<><0.001. see="" also="" figure="">

Tá sé ar eolas go bhfuil blas searbh ar ETFanna, agus is gnách go seachnaítear bianna searbh ag an dá thomhaltóirí lena n-áirítear cuileoga torthaí agus mamaigh (Yamazaki et al., 2014; Yang et al., 2018). Ansin rinneamar iarracht a shoiléiriú an féidir le TFanna tionchar a imirt ar iontógáil bia Drosophila, mar go bhfuil sé cruthaithe ag staidéir roimhe seo go bhfuil saolré fada i veirteabraigh agus inveirteabraigh mar thoradh ar shrianadh aiste bia (Hudry et al., 2019; Kapahi et al., 2017; Moger-Reischer et al. ., 2020). Chun seo a dhéanamh, rinneamar an measúnú caifé ar dtús, cur chuige a úsáidtear go forleathan chun an ráta beathaithe a thomhas go díreach agus go cruinn trí úsáid a bhaint as friothálacha ribeach ina bhfuil meán leachtach, mar a thuairiscítear roimhe seo (Ja et al., 2007). Mar a léirítear i bhFíoracha 1C agus S1C, is ar éigean a d’athraigh forlíonadh aiste bia TFanna (1 mg/mL agus 2.5 mg/mL, faoi seach) tomhaltas bia na gcuileoga a tástáladh. Chun é seo a dheimhniú tuilleadh, bhaineamar úsáid as an Fluorescein mar rianaire bia (Rera et al., 2012; Wang et al., 2005) agus rinneamar measúnú beathaithe nádúrtha (Danilov et al., 2015). Mar a léirítear i bhFíoracha 1D agus S1D, níor thugamar faoi deara aon chomhghaolta idir forlíonadh TFanna agus leibhéil iontógáil bia. Le chéile, thug ár dtorthaí le tuiscint go bhféadfadh sé nach mbeadh róil thairbheacha TFanna maidir le fad saoil a fhadú mar gheall ar shrianadh aiste bia i Drosophila.

Tá TFanna breise inchurtha chun tionchar a imirt ar homeostasis fuinnimh Drosophila

Tá sé molta go n-imríonn polyphenols tae dubh tionchar dearfach ar otracht a chosc trí dhíleá lipid agus saccharide a chosc, ionsú agus iontógáil, rud a laghdódh iontógáil calraí (Cameron et al., 2008). Rinneamar iarracht ansin a shoiléiriú an bhfuil síneadh saoil LDrosophila TF-rialaithe mar gheall ar athruithe ar ionsú cothaitheach agus stóráil fuinnimh. Chun seo a dhéanamh, rinneamar scrúdú ar dtús ar leibhéil triacylglyceride (TAG), ceann de na meitibilítí lipid is coitianta a braitheadh ​​(Tennessen et al., 2014), i gcuileoga baineanna ar feadh a saoil ar fad mar a thuairiscítear roimhe seo (Fan et al., 2017).ceannaigh cisteanMar a léirítear i bhFíor 1E, is ar éigean a chuaigh cóireáil TFanna i bhfeidhm ar fhlúirse foriomlán TAG ag aoisphointí difriúla. Nuair a bhraitheamar a thuilleadh inneachar glycogen agus cainníochtaithe carbaihiodráití a scaiptear (glúcóis agus trehalose) ag an trealamh Hexokinase (Li et al., 2018; Ten-nessen et al., 2014), léirigh na torthaí nach raibh aon athruithe soiléire idir samplaí le nó gan chóireáil TFs (Fíoracha 1F-1H). Is díol suntais é, fuarthas torthaí comhsheasmhacha nuair a scrúdaíomar feinitíopaí meitibileach ag baint úsáide as w118 fireann mar mhúnlaí ainmhithe (Figiúirí S1E-S1H). I dteannta a chéile, mhol na sonraí seo go bhfuil forlíonadh aiste bia TFanna thar a bheith riachtanach chun carbaihiodráit agus hoiméastáis fuinnimh a rialáil ar feadh shaolré Drosophila.

Rinneamar imscrúdú breise ar chinéitic na seanaoise nádúrtha Drosophila faoi idirghabháil TFanna aiste bia trí thástálacha mear geotaxis diúltach atriallach (RING) a dhéanamh mar a thuairiscítear roimhe seo (Dilliane et al., 2017; Staats et al., 2018). Mar a léirítear i bhFíoracha 1l,1J, S1l, agus S1J, cuireadh feabhas suntasach ar innéacsanna dreapadóireachta d’aois (40 lá) w1118 (baineann agus fireannaigh) i ngrúpaí forlíonta TF (méadú beagnach 12 faoin gcéad i mná agus beagnach 18 faoin gcéad ingearchló i bhfireannaigh. ) i gcomparáid le grúpaí rialaithe, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh TFanna gníomhaíochtaí dreapadóireachta agus locomotor Drosophila a fheabhsú.

Coscann Theaflavins sceitheadh ​​​​gut aois-tosaithe agus dysbiosis microbiota

Léiríodh i staidéir roimhe seo go bhfuil baint mhór ag gníomhaíochtaí agus saolré innill eitilte torthaí le riocht sláinte an óstaigh, amhail gnéas, aiste bia, aois, agus géinitíopa (Caruso et al., 2013; Heintz agus Mair, 2014). Le déanaí, tá roinnt línte fianaise cruthaithe go maolaíonn caomhnú hoiméastáis comharthaíochta Imd intestinal sláine guta trí ró-iomadú cealla ISC agus réamhtheachtaithe a chosc agus trí mhífheidhm epithelial intestinal aois-tosaithe a mhoilliú, rud a chuireann go dearfach le sláinte orgánach (Clark et al. , 2015; Guo et al., 2014). I Drosophila, baineann saolré giorraithe go dlúth le mífheidhmiú an bhacainn epithelial intestinal, agus mar thoradh ar fhorbairt sláine an bhacainn seo le linn dul in aois síneadh saoil (Clark et al., 2015; Guoet al., 2014; Jet al., 2019). Mar sin, rinneamar iarracht a chinneadh an athraíonn TFanna sláine an intestine trí mheasúnú Smurf a dhéanamh, modh a bhfuil cur síos air roimhe seo (Clark et al., 2015; Rera et al., 2011). Mar a léirítear i bhFíor 2A, tagraíodh do na cuileoga torthaí tástálaithe ina raibh ruaimeanna gorma teoranta don chonair díleá mar neamh-Smurf (an painéal ar chlé i bhFíor 2A). Dá bhfeicfí ruaimeanna gorma

Fíor 3. Ar lean

(EG) Rinneadh inní a leithlisiú ó chomhaid w1118 baineanna a chothaíodh le TFanna 2.5 mg/ml nó gan TFanna mar bhunachar ag 10 lá, 30 lá, 40 lá, agus 50 lá d'aois, faoi seach. Baineadh RNA iomlán amach agus cuireadh faoi anailísí ART-PCR é. Rinneadh anailís ar na leibhéil slonn mRNA de diptericin (F), attacin (F). agus cecropin A1(G) agus léiríodh iad. In EG, déantar anailís ar na sonraí trí thástáil t dhá earball an Mhic Léinn agus taispeántar iad mar acmhainn ± SEM.NS, nach bhfuil suntasach, *p<><><0.001. see="" also="" figure="">

ag sceitheadh ​​​​as an inní isteach sa bolg, áiríodh na hóstach mar Smurf (an painéal ar dheis i bhFíor 2A). Ag teacht le torthaí roimhe seo (Clark et al.,2015), tháinig méadú de réir a chéile ar chomhréireanna Smurf le linn aosaithe (Fíor 2B). Is díol spéise é gur tháinig laghdú mór ar chomhréireanna daoine fásta Smurf sna grúpaí a chothaítear le TFanna i gcomparáid leis na rialuithe aois-mheaitseála sa dá baineannach (ó 8.2 faoin gcéad go 3.7 faoin gcéad , ó 19.4 faoin gcéad go 15.6 faoin gcéad , agus ó 35.4 faoin gcéad go 27.1 faoin gcéad do ghrúpaí). ag aois 30 lá, 40 lá, agus 50 lá, faoi seach, Figiúr 2B) agus fir fásta (ó 2.7 faoin gcéad go 0.9 faoin gcéad , ó 6.9 faoin gcéad go 0.9 faoin gcéad , agus ó 8.3 faoin gcéad go 2.7 faoin gcéad ag aois 30 lá, 40 lá, agus 50 lá, faoi seach, Fíor S2A), rud a thugann le fios gur féidir le TFanna mífheidhm bacainn intestinal a chosc i gcuileoga torthaí aosta. Díol suntais, thugamar faoi deara laghduithe níos mó ar chéatadáin Smurf i bhfireannaigh (laghdaithe de bheagnach 65.8 faoin gcéad , 86.9 faoin gcéad , agus 67.4 faoin gcéad ag aoiseanna 30 lá, 40 lá, agus 50 lá, faoi seach) ná iad siúd in aois. baineannaigh (laghdaithe de bheagnach 54.1 faoin gcéad ,19.5 faoin gcéad , agus 23.3 faoin gcéad ag aois 30 lá, 40 lá, agus 50 lá, faoi seach), rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh ról níos fearr a bheith ag TFanna chun sceitheadh ​​intestinal i gcuileoga fireann a laghdú.

Tá sé tugtha le tuiscint ag staidéir roimhe seo go ndéantar comhghaolú go minic ar mhífheidhm bhacainn intreach aois-tosaithe le dysbiosis an mhicribhiota gut (Clark et al., 2015; Guo et al., 2014). Dá bhrí sin, scrúdaíomar an comhdhéanamh baictéarach commensal intestinal tar éis forlíonadh TFs. Bhaineamar úsáid as primers uilíocha ar dtús agus rinneamar turgnaimh chainníochtúla PCR chun leibhéil ghéine rRNA 16S baictéarach a chainníochtú. Mar a léirítear i bhFíor 2C, i gciorruithe aosta, léirigh an daonra baictéarach iomlán ó ghrúpaí idirghabhála TFanna laghdú suntasach (beagnach 45 faoin gcéad -55 faoin gcéad) i gcomparáid leis na rialuithe, rud a thugann le tuiscint gur dócha go gcuireann forlíonadh TFanna cosc ​​​​ar leathnú micribiota le linn dul in aois. . Ansin, rinneamar meitigenomics chun mionscrúdú a dhéanamh ar na hathruithe sa phobal miocróbach intestinal de bharr fhorlíonadh chothaithe le TFanna. Mar a léirítear i bhFíoracha 2D-2F, is léir gur tháinig laghdú ar chomhréir na Gammaproteobacteria, a bhfuarthas go raibh dlúthbhaint ag a leathnú le teip bhacainn intestí (Clark et al., 2015), de bharr forlíonadh TFs in inní d’aois( laghdú beagnach7 faoin gcéad), rud a thugann le tuiscint go gcuireann TFanna go dearfach le hoiméastáis an mhicribhiota putóige le linn dul in aois i Drosophila.

Feabhsaíonn Theaflavins homeostasis iomadúil intestinal i Drosophila

We further examined the intestinal integrity of flies that were treated with or without TFs. First, we employed the widely-used P{Esg-Gal4}/P{Uasp-GFP};{Tub-Gal80*s}strain(referred to as esgts>GFP), inar lipéadaíodh na gaschealla intestinal (ISCanna) agus na cealla giniúna le GFP. Mar a léirítear i bhFigiúirí 2G agus 2H, bhí líon na gcealla GFP-dearfach sna grúpaí idirghabhála TF ag aois 40 lá (cuireadh 20 inní a chomhaireamh) i bhfad níos lú (beagnach 29.7 faoin gcéad) ná mar a bhí sna rialuithe aois-oiriúnaithe (beagnach 47.6 faoin gcéad agus áiríodh 19 guta), rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh TFanna bac a chur ar ró-iomadú aoise-tosaithe na ISCanna. Ina theannta sin, rinneamar turgnaimh imdhíon-chothaithe ag baint úsáide as antasubstaintí i gcoinne Phospho-Histone 3(pH3), sainmharcóir do chealla miotóiseacha i bhfíocháin na putóige. Thugamar faoi deara níos lú de chealla dearfacha pH3-sa inní ó dhaoine fásta a bhí forlíonta le TFanna d’aois (ba é an meánlíon 20.6) ná iad siúd ó na rialuithe (ba é an meánlíon ná 39.5, Fíor 2). Nuair a chuirtear le chéile, tugann ár dtorthaí le fios go maolaíonn forlíonadh aiste bia le TFanna hoiméastáis iomadúil intestinal agus go seachnaíonn sé dysplasia micribiota ag tosú le haois, rud a chuireann moill ar aosú i Drosophila.

Déanann Theaflavins comharthaí Imd intestinal a mhodhnú go diúltach

Chun iniúchadh a dhéanamh ar na meicníochtaí móilíneacha bunúsacha trína gcuireann TFanna go dearfach le hoiméastáis gut Drosophila, rinneamar anailís RNA-seq ag baint úsáide as samplaí intestinal aois-mheaitseála ó dhaoine fásta w1118 mná ar cuireadh cóireáil orthu le nó gan TFanna. Thug blúirí in aghaidh an chileagraim in aghaidh an mhilliúin (FPKM) le fios go raibh patrúin foriomlána slonn géine cosúil leis an dá ghrúpa turgnamhacha (Fíor 3A). Mar sin féin, d’aithin anailís bhreise ar léiriú difreálach 229 géinte a léiríodh go difreálach, ar athrialaíodh 99 díobh agus ar íosrialáil 126 (Fíor 3B). Díol spéise é, léirigh anailís ontology géine ar na géinte seo go raibh athrú mór ar an gcosán freagartha imdhíonachta trí fhorlíonadh chothaithe le TFanna (Fíor 3C).

I Drosophila, tá sé cruthaithe go bhfuil ról ceannasach ag cosáin chomharthaíochta imdhíonachta dúchasacha maidir le hoiméastáis agus fad saoil guta ag tús aoise a rialáil (Clark et al,2015; Guo et al,2014). Dhírigh muid ansin ar scrúdú a dhéanamh ar phatrúin slonn na peiptídí frithmhiocróbacha (AMPanna) le sruth ó na comharthaí imdhíonachta dúchasacha. Mar a thaispeántar

Fíor 4. Ar lean

(D) Goradh próitéiní IMD íonaithe le tiúchain éagsúla TF (50 uM, 100 uM, agus 200 uM, faoi seach) ag teocht an tseomra ar feadh 5 nóiméad. Rinneadh samplaí ansin faoi anailís speictrim astaíochta fluaraiseachta ag baint úsáide as na tonnfhaid léirithe (excitation ag 430 nm, astú ó 450 nm go 550 nm le leithead scoilte de 5 nm). Baineadh úsáid as sampla gan TFanna mar rialú bunlíne.

（E and F）Lysates of guts from NP11>Ullmhaíodh cuileoga Myc-Imd agus goraíodh iad le TFanna (100μM) ag teocht an tseomra ar feadh 30 nóiméad. Rinneadh measúnachtaí SDD-AGE (painéal uachtair in E) agus SDS-PAGE (painéal íochtair in E) chun anailís a dhéanamh ar chomhiomláin próitéine Imd. Baineadh úsáid as Tubulin mar an rialú luchtaithe.cistéirRinneadh anailís densitometry chun comhdhlútháin Imd a chainníochtú i samplaí éagsúla, agus léiríodh na torthaí in (F). (G) Crómatagram ionadaíoch de shampla TFs.

（H agus I） Goradh próitéiní Brat-Imd Íonaithe le TFs, TF1, TF2a, TF2b, nó TF3 (100 μM do gach sampla) nó le méid comhionann maoláin (rialú) ag teocht an tseomra ar feadh 30 nóiméad mar a léirítear. Ansin cuireadh samplaí faoi réir thástálacha SDD-AGE (painéal uachtarach in H) agus SDS-PAGE (painéal íochtair in H) chun patrúin comhiomlánaithe Imd a chinneadh. Rinneadh anailís densitometry chun comhdhlútháin Imd a chainníochtú i samplaí éagsúla agus taispeánadh i (). In C, F, agus I, déantar anailís ar shonraí de réir thriail an Dalta dhá earr agus taispeántar iad mar acmhainn ± SEM.***p< 0.001.="" see="" also="" figure="">

i bhFíor 3D, géinte AMP arna rialú ag cosán an easpa imdhíonachta (Imd), lena n-áirítear diptericin A (DptA), diptericin B(DptB), attacin A(AttA), cecropin A1 (CecA1), cecropin A2(CecA2), agus cecropin C (Cece), tháinig laghdú suntasach (39.4 faoin gcéad , 72.3 faoin gcéad , 10.5 faoin gcéad , 86.5 faoin gcéad ,99.8 faoin gcéad , agus 36.1 faoin gcéad , faoi seach) i ngrúpaí TF-cóireáilte i gcomparáid leis na grúpaí rialaithe. Chun na torthaí a fuarthas ó anailís RNA-seq a dheimhniú tuilleadh, rinneamar imoibriú slabhra tras-trascríobh-polaiméaráise cainníochtúil droim ar ais (gRT-PCR) chun leibhéil léirithe coibhneasta na ngéinte AMP a bhaineann le Imd i samplaí gut Drosophila a chainníochtú ag ceithre phointe aoise éagsúla. lena n-áirítear 10 lá, 30 lá, 40 lá, agus 50 lá. Mar a léirítear i bhFíoracha 3E-3G, tháinig laghdú suntasach ar leibhéil slonn mRNA de ghéinte áirithe, lena n-áirítear diptericin, attacin, agus cecropin A1 (beagnach 35.9 faoin gcéad -66.6 faoin gcéad) sna TFanna a ndearnadh cóireáil orthu gutaí aois. Le chéile, léirigh ár gcuid sonraí go bhféadfadh TFanna cur i gcoinne gníomhachtú an chosáin chomharthaíochta Imd i gcealla gut Drosophila le linn aosaithe.

Tá na haiflaváin inchurtha le haghaidh rialú trascríobh ar chonair Imd nó uileláithreacht Imd

D’fhéachamar le scrúdú a dhéanamh ar an mbaint atá idir TFanna agus Imd agus rinneamar an measúnú ar athshondas plasmón dromchla (SPR) mar a cuireadh síos air roimhe seo (Lan et al., 2020). Mar a léirítear i bhFíor 4A. Léirigh TFanna cleamhnas measartha ceangailteach le próitéin íonaithe Imd ag tairiseach Kp measta de 8.078 uM. Ansin is gnách linn a chinneadh conas a rialaíonn TFanna cosán comharthaíochta intestinal Imd. Bunaithe ar thorthaí anailíse transcriptome ó shonraí RNA-seq, fuair muid amach gur ar éigean a athraíodh leibhéil léirithe na bpríomhfhachtóirí rialála i gcosán comharthaíochta Imd, mar PGRP-LC, Imd, agus Relish, de bharr cóireáil TFs (Fíor S3A ). Bhailíomar tuilleadh samplaí putóige ó chuileoga a cuireadh faoi fhorlíonadh aiste bia le nó gan TFanna ag aoiseanna éagsúla agus rinneamar turgnaimh qRT-PCR chun patrúin slonn na ngéinte seo a bhrath go sonrach. Mar a léirítear i bhFíor S3B, bhí na leibhéil mRNA de ghéinte áirithe, lena n-áirítear effete, faded, tak1, pgrp-Ica, uev1a, bendless, relish, imd, pgrp-sc2, tab2, ird5 Kenny, agus diap2, mar an gcéanna idir na grúpaí rialaithe. agus grúpaí idirghabhála TFanna, rud a thugann le tuiscint nach bhfuil baint ag TFanna le comharthaí IMD a rialáil ar an leibhéal tras-scríbhinne.

Ina dhiaidh sin, scrúdaíomar próifílí uileláithreachta Imd mar gur thug staidéir roimhe seo le fios go bhfuil ubigui-tination of Imd riachtanach le haghaidh aistriú comhartha iartheachtacha i gcosán Imd (Myllymaki et al., 2014; Zhou et al., 2005). Rinneamar measúnacht aistrithe in vitro E1 ar dtús agus fuaireamar amach nach bhfuil aon tionchar dealraitheach ag cóireáil le TFanna ar imoibrithe einsímeacha E1 agus ubiquitin chun E1/Ub comhchuingeach a fhoirmiú (Fíor S4A). Ina theannta sin, d'aistrigh muid cealla Drosophila S2 le plasmids a léirigh Imd Brat-chlibithe mar aon le Ub le clib HA agus ansin chóireáil muid na cealla le TFanna nó gan iad. Thug tuilleadh measúnachtaí uileláithreachta le fios gur ar éigean a chuir forlíonadh TFanna isteach ar leibhéil Imd uileláithreach i gcealla saothraithe (Figiúirí S4B agus S4C). Chun na caidrimh idir TFanna agus ubiquitination Imd in vivo a chinneadh, d'úsáideamar an eitilt trasgenach P {NP1-Gal4}/P{Uasp-Myc-Imd};P{Tub-Gal80*} (dá dtagraítear mar NP1* s > Myc-Imd), ina raibh próitéin Myc-clibeáilte Imd in iúl go mór i gcealla putóige (Fíor S4D). Thaispeáin ár dturgnaimh uileláithreach go raibh forlíonadh aiste bia le TFanna inchurtha chun uileláithreacht Imd i bhfíocháin gut a mhodhnú (Figiúirí S4D agus S4E). Le chéile, léirigh ár dtorthaí go rialaíonn TFanna comharthaí Drosophila Imd go diúltach trí gan tionchar a imirt ar phatrún uileláithreachta Imd.

Cuireann Theaflavins cosc ​​​​ar thionól comhdhlúthán Imd

Mhol staidéar le déanaí go bhfuil comhiomlánú Imd riachtanach chun géinte le sruth a ghníomhachtú sa chonair Imd (Kleino et al., 2017). Rinneamar iarracht ansin scrúdú a dhéanamh ar cibé an rialaíonn TFanna próiseas na

Fíor 5. Ar lean

(F agus G) Tógadh mná w18 (dá ngairtear imd móide / móide ), imd’ mutants heitrisigeacha agus homaisigeacha (dá ngairtear imd móide /- agus imd-/-, faoi seach) mar bhianna caighdeánacha Drosophila (dá dtagraítear mar Basal) nó forlíonadh aiste bia le 2.5 mg/mL (dá ngairtear TFanna) agus ansin cuireadh faoi réir measúnaithe ar feadh an tsaoil Rinneadh anailís ar chuar marthanais (F) agus meánfhad saoil (G) agus taispeánadh iad.

I agus F, baineadh úsáid as an triail Log Log le haghaidh anailíse staitistiúla. I BE, agus, baineadh úsáid as t-tástáil dhá earball an Mhic Léinn le haghaidh anailíse staitistiúla, agus cuirtear na sonraí ar fáil mar acmhainn ± SEM. NS, ní suntasach, *p<0.05, **p="" <="" 0.01,=""><0.001. see="" also="" figure="">

Imd foirmiú comhiomlán. Ar dtús, íonaigh muid próitéiní Myc-clibeáilte Imd ó chealla saothraithe S2 agus ghoradh na próitéiní le tiúchain éagsúla TFanna (Fíor 4B). Is díol suntais é gur chuir TFanna cosc ​​suntasach ar chomhiomlánú Imd (laghdú 81.7 faoin gcéad -89.7 faoin gcéad , Fíoracha 4B agus 4C), mar a mhol ár dtástálacha leictreafóiréis glóthach agairóis glantach leath-déine (SDD-AGE). Chun an toradh seo a dhearbhú, rinneamar tuilleadh measúnachtaí ceangailteacha thioflaivin-T agus fuaireamar torthaí comhsheasmhacha (Fíor 4D). Ar deireadh, d'ardaigh muid NP1ts > Myc-Imd cuileoga transgenic a cuireadh faoi fhorlíonadh aiste bia le nó gan TFs agus bhailigh samplaí putóige ó dhaoine fásta níos sine. Mhol na turgnaimh SDD-AGE go raibh comhiomlánú Imd íosrialaithe go mór ag TFanna i gcealla intestinal (laghdú 16.7 faoin gcéad -22 faoin gcéad , Fíoracha 4E, agus 4F).

Chun a fháil amach conas a rannchuidíonn TFanna le cóimeáil comhdhlútháin Imd a rialú, chuireamar TFanna faoi réir HPLCanal-is agus fuarthas amach go raibh ceithre chineál monaiméirí den chuid is mó iontu (Fíor 4G), eadhon, theaflaivin (TF1), theaflaivin 3-O-gallate ( TF2a), theaflavin 3'-O-gallate (TF2b), agus theaflavin 3,3'-di-O-gallate (TF3), a bhí comhsheasmhach le tuarascálacha roimhe seo (Li et al., 2013; Takemoto agus Takemoto, 2018) . Ansin, ghoradh muid gach ceann de na ceimiceáin seo le Imdprotein íonaithe agus rinneamar turgnaimh SDD-AOIS. Mar a léirítear i bhFíoracha 4H agus 4l, mar thoradh ar chóireáil na TFmonomers seo go léir tháinig laghdú suntasach (59.5 faoin gcéad ,60.9 faoin gcéad ,58.4 faoin gcéad .58.2 faoin gcéad . agus 55.8 faoin gcéad do TFanna, TF1, TF2a, TF2b, agus TF3, faoi seach) i na leibhéil chomhiomlán Id. I dteannta a chéile, thug ár dtorthaí le tuiscint go rialaíonn TFanna cosán comharthaíochta Drosophila Imd go diúltach is dócha trí iompar comhdhlúthán Imd a rialú.

Síneann Theaflavins saolré Drosophila ar bhealach atá ag brath ar IMD

To examine whether TFs prolong Drosophila lifespan depending on their regulatory role in Imd, we specifically knocked down Imd in gut tissues using the transgenic flies P{NP1-gal4)PITub-gal80*}/P{Uasp-imd-IR(KK)} (referred to as Imd RNAi). As shown in Figures 5A and 5B, dietary supplementation of TFs extended the lifespan of controls (elevation of nearly 7.2 days in the mean lifespan), whereas prevention of Imd expression in guts apparently reversed the lifespan extension caused by TFs. Consistent results were obtained when we utilized male Imd RNAi and control flies to perform lifespan assays (Figures S5A and S5B). Further qRT-PCR assays showed that the mRNA expression levels of AMP genes at ages of 10 days, 30 days, 40 days, and 50 days, including diptericin, attacin, and cecropin A1.hardly changed in the gut tissues of Imd RNAi flies(Figures 5C-5E), whereas additional TFs caused reductions of 31%-72.3% in mRNA abundances of these genes in samples from control groups. To confirm these results from Imd RNAi flies, we first performed lifespan assays using w18(control, referred to as imd+/+), imd' heterozygous (referred to as imd+/-), and homozygous(referred as imd-/-)mutant flies. We found that TFs addition extended lifespan and increased mean life longevity of imd+/-flies (elevation of nearly 6.2 days, Figures 5F and 5G). However, this lifespan extension effect by TFs was almost abolished in imd-/-flies (Figures 5F and 5G). Next, we performed lifespan assays utilizing Relish RNAi(NP1's>Relish RNAi and control(NP1ts>móide ) cuileoga. toisc gurb é Relish an príomhfhachtóir trascríobh atá freagrach as léirithe géine AMP Imd-srutha (Myllymaki et al., 2014). Mar a léirítear i Fiqures S5C agus S5D. Chuir breis chothaithe TFanna go suntasach le fad saoil na gcuileoga rialaithe, agus cuireadh cosc ​​suntasach ar an síneadh saoil seo i gcuileoga Relish RNAi. I dteannta a chéile, léirigh ár gcuid sonraí go gcuireann forlíonadh aiste bia TFanna go dearfach le saolré Drosophila is dócha ag brath ar chomharthaí Imd intestinal.

D'fhonn féachaint an dtarlaíonn síneadh na saolré ag TFstill i gcúlra aiseach, rinneamar measúnuithe ar shaolré ag baint úsáide as w1118 baineannaigh faoi choinníollacha aiseacha. Mar a léirítear i bhFíoracha S5E agus S5F, is ar éigean a chuir comhchruinnithe éagsúla TFanna (1 mg/mL agus 2.5 mg/mL) isteach ar chóimheasa básmhaireachta agus meánfhad saoil in w18 daoine fásta. Toisc gur féidir le coinníollacha tógála aiseacha cosc ​​a chur ar fhlúirse micribiota den chuid is mó, rud a chuireann srian ar chomharthaí Imd i gciorruithe (Clarke al., 2015), mhol ár gcuid sonraí go gcuireann TFanna le saolré Drosophila trí mhodhnú a dhéanamh ar chomharthaí imdhíonachta dúchasacha a rialaítear le microbiota gut.

Fíor 6. Maolaíonn Theaflavins colitis spreagtha DSS i lucha CD-1

(A) Ní raibh tionchar ag cóireáil TFs ar thomhaltas uisce i ngrúpaí éagsúla lucha CD-1.

(BD) Le riaradh tomhas ar thiúchan éagsúla TFanna (1 mg/mL, 2.5 mg/mL, agus 5mg/mL, faoi seach) feabhsaíodh giorrú an idirstad agus méadú ar an spleen de bharr DSS i lucha CD-1. Taispeánadh íomhánna ionadaíocha (B) agus anailísí staitistiúla ar an colon(C) agus ar an spleen (D). (E) Chuir riarachán tiúchain éagsúla TFanna (1 mg/mL, 2.5 mg/ml, agus 5mg/mL, faoi seach) cosc ​​ar sceitheadh ​​putóige a tharlódh DSS i lucha CD-1. (F agus G) Bailíodh coilíneachtaí ó ghrúpaí lucha a bhí léirithe. Baineadh RNA iomlán amach agus cuireadh faoi thástálacha qRT-PCR é chun leibhéil slonn mRNA TNFa(F) agus IL-6 (G) a bhrath.

(AL) Bailíodh coilíneachtaí ó ghrúpaí éagsúla lucha ar bhonn fadaimseartha agus cuireadh faoi mheasúnachtaí staining HE iad. Scrúdaíodh samplaí trí mhicreascópacht, agus fuarthas agus taispeánadh íomhánna ionadaíocha de na samplaí léirithe (HL). Barraí scála, 40 μm. (M-Q') Íomhánna SEM a thaispeánann na micritrichomes de choilín ó shamplaí éagsúla léirithe. Barraí scála, 50 um (MQ) agus 4 um (M'-Q').

In CG, déantar sonraí a anailísiú de réir thástáil an Mhic Léinn dhá eireaball agus taispeántar iad mar acmhainn ± SEM.NS, nach bhfuil suntasach, *p<><><0.001. see="" also="" figure="">

Maolaíonn Theaflavins colitis a tharchuirtear le DSS i lucha CD-1

Chun imscrúdú breise a dhéanamh ar an ról a d’fhéadfadh a bheith ag TFanna maidir le hoiméastáis intestinal a chothabháil i mamaigh, baineadh úsáid as lucha CD-1 chun colitis a aslú trí sóidiam dextran sulfáit (DSS). Riaradh lucha go hingastrach tiúchain éagsúla TFs (1 g/L, 2.5 g/L, nó 5 a/L) nó uisce mar rialú ar feadh ceithre seachtaine, agus ina dhiaidh sin cóireáil le 2 faoin gcéad DSS in uisce óil ar feadh 7 lá. D'fhonn a fháil amach an mbíonn tionchar ag TFanna ar an méid óil de DSSa trasna grúpaí éagsúla lucha, rinneamar monatóireacht ar ólachán lucha gach lá. Mar a léirítear i Fiqure6A, tá cóireáil TFanna thar ceal chun tionchar a imirt ar thomhaltas dí i lucha colitis spreagtha DSS, chuir lucha cóireáilte DSS siondróm colitis i láthair le buinneach agus/nó hematochezia, ar cuireadh cosc ​​orthu trí chóireáil TF-spleách ar dháileog (Figiúirí S6A-S6E).cistanche AstráilIna theannta sin, d'éirigh le hidirghabháil le TFanna an laghdú ar fhad an colon de bharr DSS agus chuir sé feabhas ar mhéadú an spleen (Fíoracha 6B-6D).

D’úsáideamar dextran-4000-FITC (FITC-DX) ansin chun feidhm bhacainn stéigeach na lucha seo a scrúdú. Mar a thaispeántar i bhFíor 6E, léirigh lucha ó na grúpaí cóireáilte DSS tiúchan ard de FITC-DX i samplaí fola, rud a léirigh sceitheadh ​​​​gut sna hainmhithe seo, Mar sin féin, chuir idirghabháil le TFanna cosc ​​suntasach ar iompar FITC-DX ó orgáin díleácha isteach sa córas imshruthaithe (laghdaithe de 56.1 faoin gcéad -77.5 faoin gcéad , Fíor 6E). Go háirithe, níor athraigh riaradh TFanna tréscaoilteacht gut na lucha faoi ghnáthchoinníollacha (Fíor S6F). Toisc go n-imríonn athlasadh ról lárnach i bhforbairt colitis samhail luiche, rinneamar turgnaimh qRT-PCR a thuilleadh, ag taispeáint go ndearna cóireáil TFs íosrialáil suntasach ar nathanna IL-6 agus TNF i stéig lucha cóireáilte DSS (Figiúirí 6F agus 6G).

Chun anailís bhreise a dhéanamh ar na hathruithe paiteolaíocha sa colon, rinneamar measúnachtaí staining hematoxylin-eosin (HE). Mar a léirítear i bhFigiúirí6H-6L agus S6G-S6J, feabhsaíodh an damáiste trom epithelial de bharr DSS go suntasach le cóireáil TFs ar bhealach dáileog-spleách. Sholáthair scanadh íomháithe micreascópachta leictreon de na samplaí intestinal seo torthaí comhsheasmhacha a thuilleadh (Fíoracha 6M-6Q' agus S6K-S6N'). Le chéile, léirigh ár dtorthaí go bhfuil ról tairbheach ag TFanna maidir le feidhm bhacainn intestinal a chosaint i bhfeithidí agus i mamaigh araon.

PLÉ

Sa staidéar seo, rinneamar imscrúdú ar fheidhmeanna fiseolaíocha TFanna maidir le hoiméastáis intestinal agus fad saoil a mhodhnú agus na meicníochtaí móilíneacha bunúsacha. Thaispeáin muid go gcuireann forlíonadh aiste bia le TFanna go dearfach le cosc ​​a chur le dysbiosis aois-tosaithe an mhicribhiota intestinal agus an mhoill ar mhífheidhm epithelial gut, rud a chuireann le saolré Drosophila. Léirigh ár gcuid staidéir mheicníochta in vitro agus in vivo gur dócha go mbeidh ról diúltach ag TFanna maidir le cosán comharthaíochta Imd a rialú trí chomhtháthú Imd a bhac. Ina theannta sin, fuaireamar amach gur féidir le colitis spreagtha DSS a mhaolú go héifeachtach trí fhorlíonadh TF i lucha CD-1. Tacaíonn ár dtorthaí leis an nóisean go gcuireann TFanna go tairbheach le hoiméastáis intestinal in inveirteabraigh agus veirteabraigh araon.

Méadaíonn forlíonadh cothaithe le theaflavins saolré Drosophila

Tá an-tóir ar thae ar fud an domhain agus níl sé ach sa dara háit maidir le tomhaltas uisce (Rothenberg agus Zhang, 2019). Dhírigh go leor staidéar ar na feidhmeanna fiseolaíocha go minic trí chur chuige turgnamhacha agus cliniciúla araon (Cameron et al., 2008; Niu et al., 2013; Peng et al., 2009; Rothenberg agus Zhang.2019; Spindleret al., 2013; Takemotoret al., 2013; agus Takemoto, 2018; Unno et al., 2020; Zhou et al., 2020.Tá sé léirithe go forleathan go dtéann tae chun leasa an tsláinte trí leibhéil lipid a ísliú agus trí éifeachtaí frith-otracht, agus is catechins na príomh-chomhdhúile feidhmiúla i tae, go háirithe epigallocatechin gallate (EGCG)(Abbas agus Wink, 2009; Modernelli et al., 2015; Niu et al., 2013; Wagner et al., 2015; Xiong et al., 2018) Léirigh staidéir roimhe seo freisin go bhfuil tae glas agus is féidir le tae dubh réim sláinte agus saolré cuileoga torthaí a mhéadú (Suíomh al., 2011; Wagner et al., 2015), péisteanna (Fei et al., 2017; Xiong et al., 2018), agus francaigh (Imran et al. ., 2018; Niu etal.2013) agus is é an príomh-mheicníocht rialála cosc ​​éifeachtach ar strus ocsaídiúcháin trí EGCG trí chomharthaí ROS a mhodhnú.sochair cisteanche,Mar sin féin, ní fios go mór an bhfuil ról ag TFanna, mar na comhdhúile "órga" tréithiúla i tae dubh, maidir le haosú agus saolré a rialáil. Soláthraíonn an staidéar seo fianaise an-láidir a thugann le fios go bhfuil idirghabháil TFanna thar a bheith riachtanach chun tionchar a imirt ar iontógáil bia, agus go gcuireann glacadh fadtéarmach TFanna tríd an aiste bia go mór le saolré na gcuileoga torthaí fireanna agus baineanna. Soláthraíonn na torthaí seo treoirlínte le haghaidh staidéir bhreise ar fheidhmeanna TFanna i fad saoil mamaigh.

Feabhsaíonn Theaflavins dysbiosis micribhithe aois-tosaithe agus cuireann siad hoiméastáis intestinal chun cinn Is sainmharc éagothroime fhorásach hoiméastáis iomadúil agus cumas athghiniúna ar aosú agus galair a thosaíonn ag aois (Clark et al., 2015; Heintz agus Mair, 2014; Maynard agus Weinkove, 2018; Rera; et al. 2012). Tá baint ag athlasadh ainsealach le caillteanas homeostasis agus méadú ar mhinicíocht ailse in orgánaigh atá ag dul in aois (Bartke et al., 2019; Kapahi et al., 2017; Xiao et al., 2020). Tá sé seo suntasach go háirithe in epithelia bacainn mar an epithelium intestinal (Guo et al., 2014; Maynard agus Weinkove, 2018). Le múnla chun dysplasia a bhaineann le haois a fhorbairt sa stéig atá ag dul in aois, léirigh muid go bhféadfadh feabhas a chur ar idirghníomhaíochtaí óstach-comhmheasúla in epithelia bacainn aosaithe sláinte agus saolré a chur chun cinn. D’úsáideamar roinnt cineálacha cur chuige neamh-ionracha maidir le measúnú a dhéanamh ar fheidhm stéigeach agus ar dhinimic mhicribhiota le linn aosaithe. Ar dtús, léirigh measúnacht Smurf ról dearfach na TFanna maidir le mífheidhmiú bacainn epithelial a rialáil le linn aosaithe. Ansin, léirigh an measúnú imdhíon-chothaithe ag baint úsáide as roinnt cuileoga trasgenacha gur chuir TFanna moill ar ró-iomadú ISCanna agus ar láimhdeachas na gceall difreáilte. Mar fhocal scoir, thug seicheamhú an mhicribhithóim le fios go ndéanfadh TFanna íosrialáil ar leathnú tosú aoise an mhicreflora comhthiomsamach intestinal. Léirigh na torthaí seo go láidir go bhfuil ról lárnach ag TFanna maidir le moill a chur ar phróiseas aosaithe an óstaigh trí homeostasis gut a chothabháil.

Maolaíonn Theaflavins freagairtí imdhíonachta iomarcacha sa bhroinn trí chomharthaíocht Imd a rialáil go diúltach

Tá sé ráite go gcaithfear an chothromaíocht íogair idir feidhm imdhíonachta an phutóige agus an mhiocróibóta a choinneáil chun homeostasis fadtéarmach epithelia bacainn a chinntiú (Guo et al., 2014; Maynard agus Weinkove, 2018). Tá sé léirithe ag staidéir roimhe seo freisin go bhfuil baint ag athlasadh iomarcach ainsealach sa phuitín le mífheidhm a bhaineann le haois san epithelia bacainn agus gur sainmharc é an dul in aois (Clark et al., 2015; Guo et al., 2014; Ji et al., 2019) . Dá bhrí sin, is cur chuige gealtach é daonra sláintiúil coimeálach a chothabháil trí hoiméastáis imdhíonachta dúchasach a chaomhnú ina leithéid de epithelia (Bonfini et al., 2016; Broderick, 2016; Clark et al., 2015). Chun na meicníochtaí móilíneacha a iniúchadh trí a chuireann moill ar aosú TF, rinneamar anailís RNA-seq ag baint úsáide as stéig scartha le cóireáil TFs nó gan é. Thug ár sonraí le fios gur saibhríodh an grúpa géinte a cuireadh in iúl go mór i inní na gcuileoga torthaí rialaithe i gcomparáid le géinte ainmhithe a ndearnadh cóireáil orthu le TFanna le géinte a aicmítear mar ghéinte "freagra imdhíonachta". Léirigh tuilleadh anailíse bithfhaisnéise agus measúnachtaí get-PCR go raibh bac suntasach ar léiriú na ngéinte AMP a bhaineann le Imd mar gheall ar TFanna a chur leis san aiste bia. Dhearbhaigh torthaí na dturgnaimh luch CD{-1 ag baint úsáide as DSS chun freagairtí imdhíonachta neamhghnácha a spreagadh sna intestines an nóisean go bhfeidhmíonn TFanna mar chosantóirí ar athlasadh stéigeach.

Déanann Theaflavins comharthaí a shochtadh trí thionól amyloid Imd a chinneadh

Conas a rialaíonn TFanna cosán comharthaíochta Imd go diúltach? Bunaithe ar thorthaí na hanailíse tras-scríofa, fuaireamar amach go bhfuil TFanna thar a bheith riachtanach chun na príomhfhachtóirí a rialáil i gcosán comharthaíochta Imd. Díol spéise é, thugamar faoi deara an cleamhnas ceangailteach dealraitheach atá ag TFanna le próitéin íonaithe Imd trí mheasúnacht SPR, rud a thug le tuiscint go bhféadfadh ról a bheith ag TFanna maidir le hiompar próitéine Imd nó a próiseas modhnuithe iar-aistriúcháin a rialú. Tá aird tugtha ag staidéir roimhe seo ar ról lárnach an uileláithreachta in aistriú comhartha Imd (Kleino agus Silverman, 2014; Myllymaki et al., 2014), agus tá cosc ​​ar uileláithreacht Imd mar thoradh ar mhúchadh as cuimse ar chomharthaíocht Imd (Myllymaki et al., 2014; Thevenon et al., 2009). Mar sin féin, léirigh ár dtástálacha in vitro agus in vivoubiquitination gur ar éigean a théann TFanna i bhfeidhm ar phatrún uileláithreachta Imd. Tá sé léirithe ag staidéar le déanaí go bhfuil gá le foirmiú amyloid chun cosán Drosophila Imd a ghníomhachtú nuair a aithnítear peptidoglycans baictéarach (Kleino et al., 2017). Is díol suntais é gur mhol ár gcuid measúnachtaí SDD-AGE agus ThTbinding go bhfuil cosc ​​ar chomhthiomsú Imd trí TFanna. Is cosúil gur aisiompaíodh éifeachtaí tairbhiúla TFanna ar shíneadh ré saoil má chosc ar chomhiomlánú imd trí chnagadh nó sóchán a dhéanamh ar Imd i gcealla putóige. Chun ár gcinneadh a dheimhniú a thuilleadh, bheadh ​​sé suimiúil a scrúdú an bhfuil TFanna níos feidhmiúla chun saolré na mbileog torthaí a shíneadh nuair a scriostar go sonrach móitíf Imd RHIM cripteach caomhnaithe (cRHIM, aimínaigéid ón 118ú go dtí an 121h), bunaithe ar an gcinneadh go bhfuil an choir san Imd riachtanach dá comhiomlánú agus dá foirmiú amyloid (Kleino et al.,2017). Mar sin féin, leagann ár staidéar béim ar ról lárnach na TFanna maidir le hoiméastáis stéigeach agus an próiseas aosaithe a rialú, b'fhéidir trí chónascadh Imd a mhodhnú. Ba cheart go ndíreodh staidéir amach anseo ar iniúchadh a dhéanamh ar cé na hiarmhair nó na réigiúin Imd atá faoi cheangal ag TFanna agus conas mar a bhíonn cosc ​​ar chomhdhlúthú Imd mar thoradh ar an gceangal sin. Ina theannta sin, léirigh ár dtorthaí sa chóras mamaigh go bhféadfadh TFanna an colon a chosaint go héifeachtach i gcoinne athlasadh de bharr an cheimiceáin nimhiúil exogenous DSS, rud a thugann le tuiscint go bhfuil ról rialála caomhnaithe ag TFanna maidir le hoiméastáis intestinal a chothabháil. Is fiú a fhiosrú an bhfuil ról ag TFanna maidir le cóimeáil próitéin a rialú i bhfíocháin mhamach.

Baineadh an t-alt seo as zhongwenxie@ahau.edu.cn