Tionchar Cosanta na gCistánach Luibhe ar Mhítocsaineacht de bharr Statin in Vitro
Mar 24, 2022
Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com
Elaine Wat a,b,1, Chun Fai Ng a,b,1, Chi Man Koon a,b, Eric Chun Wai Wong a,b, Brian Tomlinson c, Clara Bik San Lau a,b,n
Institiúid Leighis na Síne, Ollscoil na Síne Hong Cong, Shatin, Críocha Nua, Hong Cong
b Príomhshaotharlann Stáit Fíteiceimice agus Acmhainní Plandaí in Iarthar na Síne, Ollscoil na Síne Hong Cong, Shatin, Críocha Nua, Hong Cong
c Rannóg na Cógaseolaíochta Cliniciúla, Roinn an Leighis agus Teiripeach, Ollscoil na Síne Hong Cong, Shatin, Críocha Nua, Hong Cong
Coimriú:
Ábharthacht eitnopharmacological: Luibhcistéir(HC,Cistanchefásach, nóCistanchetubulosa) is luibh Síneach a úsáidtear go traidisiúnta le haghaidh fadhbanna muscle. Léirigh staidéir roimhe seo go bhféadfadh sliocht HC damáiste muscle a laghdú agus stóráil ATP a fheabhsú i bhfrancaigh iar-chleachtaidh. Mar sin féin, níor imscrúdaíodh a éifeacht ar thocsaineacht mhatán arna spreagadh le statin.
Aidhm:Ba é cuspóir an staidéir seo a chinneadh an bhféadfadh sliocht uiscí HC (HCE) cosc a chur ar thocsaineacht arna spreagadh ag simvastatin i gcealla matán cnámharlaigh L6 francach agus an é verbascoside an príomh-chomhábhar bithghníomhach a chuireann leis na héifeachtaí.
Abhair agus modhanna:Rinneadh MTT chun éifeachtaí HCE ({{0}}–2000 mg/ml) nó verbascoside (0–160 mM) ar chealla L6 atá cóireáilte le simvastatin (10 mM) a chinneadh. Rinneadh measúnacht apoptosis Annexin V-FITC/PI agus measúnacht Caspase 3 chun ról cosanta HCE ar bhás cille de bharr simvastatin a chinneadh, agus chun a mheas an ndearna HCE a éifeacht chosanta tríd an gcosán caspase. Rinneadh táirgeadh ATP a thomhas chun imscrúdú a dhéanamh an bhféadfadh HCE cosc a chur ar laghdú de bharr simvastatin i dtáirgeadh ATP in vitro.
Torthaí:Mhéadaigh Simvastatin bás cille apoptotic go suntasach i gcealla L6. Rinne HCE laghdú suntasach ar dháileog-spleách ar chealla apoptotic de bharr simvastatin, b’fhéidir trí chonair caspase-3. Laghdaigh Simvastatin an táirgeadh ATP i gcealla L6, rud a chuir HCE cosc ar dháileog-spleách. Ní raibh ach treocht ach ní raibh éifeacht shuntasach (ach amháin ag dáileog ard) de verbascoside ar chosaint tocsaineachta matán arna spreagadh ag simvastatin.
Conclúidí:Mar fhocal scoir, léirigh muid don chéad uair go bhféadfadh HCE éifeacht chosanta ag brath ar dháileog a chur i bhfeidhm ar thocsaineacht in vitro de bharr simvastatin, rud nach dócha mar gheall ar láithreacht verbascoside. Mhol ár staidéar go bhféadfaí úsáid a bhaint as HC faoi chás na tocsaineachta matán arna spreagadh ag simvastatin.
Eochairfhocail:Luibhcistéir, StatinColesterol, Hipirlipidemia, Tocsaineacht Matán, Verbascoside, Caspase-3
1. Réamhrá
Tá doiciméadaithe maith ag baint le coscairí reductase HMG-CoA (statins), atá ar an aicme drugaí ar oideas is mó díol ar domhan sa stair, a bheith tairbheach d’othair den dá inscne ag aoiseanna difriúla a bhfuil riosca measartha agus ard-riosca galar cardashoithíoch (CVD) acu (Golomb agus). Evans, 2008). Forbraíodh agus faomhadh statins éagsúla ansin go cliniciúil lena n-áirítear pravastatin, atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pitavastatin, rosuvastatin, agus simvastatin. Go ginearálta, gníomhaíonn gach statins trí laghdú HMG-CoA go haigéad mevalonic a chosc le linn na luathchéime den chonair mevalonate chun táirgeadh colaistéaról a laghdú (Kromer agus Moosmann, 2009; Thompson et al., 2003). Cé go nglactar go maith le statins de ghnáth, is é ceann de na héifeachtaí díobhálacha cliniciúla is tábhachtaí agus is cáiliúla ná tocsaineacht matáin chnámharlaigh (rhabdomyolysis) (Kobayashi et al., 2008). Is féidir le neamhghnáchaíochtaí matán cnámharlaigh a bheith éagsúil ó mialgia neamhurchóideach go miopaitít thromchúiseach. Cé go bhfuil meascán meicníochtaí beartaithe agus go bhféadfadh siad a bheith freagrach as éifeachtaí díobhálacha statín ar mhatán, creidtear go bhfuil ról tábhachtach ag meicníochtaí miteachondrial (Golomb agus Evans, 2008). Ní hamháin gur réamhtheachtaí colaistéaróil é Mevalonate, ach freisin do chomhdhúile eile lena n-áirítear selenoproteiní, dolichol, agus ubiquinone (Kaufmann et al., 2006; Vaklavas et al., 2009). Dá bhrí sin chuirfeadh cumas statins mevalonate bac ar tháirgeadh selenoproteiní mar glutathione peroxidase (GPx), ar einsímí tábhachtacha iad chun an mheicníocht cosanta frith-ocsaídiúcháin a chothabháil (Kromer agus Moosmann, 2009). D’fhéadfadh ídiú ubiquinone a bheith mar thoradh ar statins freisin, rud a fhágann go laghdófaí tomhaltas ocsaigine agus sintéis ATP (Beltowski et al., 2009). Ina theannta sin, léirigh staidéir mhéadaitheacha in vitro agus in vivo go bhféadfadh statín gníomhú go díreach freisin ar mhiotochondria fíocháin chun trasdul tréscaoilteachta membrane Ca2þ-spleách (MPT) a spreagadh ar bhealach dáileog-spleách (Beltowski et al., 2009; Velho et al., 2006 ). Tá baint aige freisin le speiceas méadaithe ocsaigin imoibríoch (ROS) agus strus ocsaídiúcháin mitochondrial, rud a fhágann bás cille agus mar sin cuireann sé le díobháil ae agus muscle (Beltowski et al., 2009; Velho et al., 2006).
Luibhcistéir, planda iomlán triomaithe Cistanche deserticola YC Ma, nó Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight (teaghlach Orobanchaceae), is plandaí seadánacha iad a fhásann go príomha i gceantair fhásacha thuaidh agus oirthuaisceart na Síne (Siu agus Ko, 2010).LuibhcistéirIs luibh tonic Síneach bríomhar Yang a úsáidtear go príomha chun easnamh duáin a chóireáil le hairíonna cosúil le impotence, infertility, ejaculation roimh am. Moistens nádúr trom agus cloy an luibh an intestines freisin agus cabhraíonn sé le constipation a mhaolú. Is luibh Síneach é freisin a fhorordaítear go traidisiúnta d’othair le haghaidh pian sna loin agus na glúine agus is luibh é a úsáidtear go coitianta i bhfoirmlithe Síneacha chun fadhbanna matán a chóireáil (Siu agus Ko, 2010; Xiong et al., 1998). Is díol spéise é go bhfuil sé seo comhsheasmhach freisin leis na staidéir eolaíocha nua-aimseartha a léirigh gníomhaíochtaí frith-tuirse sliocht polaisiúicríd-saibhir agus feinileatánoid-saibhir deLuibhcistéiri bhfrancaigh iar-chleachtadh trí laghdú damáiste matáin agus feabhas a chur ar stóráil ATP (Cai et al., 2010). Léirigh obair le déanaí go bhféadfadh sliocht meatánóil de Herba Cistanches feabhas a chur ar ghiniúint ATP mitochondrial (Leung agus Ko, 2008). Léirigh Siu agus Ko (2010) é sinLuibhcistéird'fhéadfadh feabhas a chur ar stádas glutathione mitochondrial freisin trí leibhéil sintéise glutathione agus GPx a idirghabháil, rud a chosnódh fíocháin ó strus ocsaídiúcháin i gcroí na bhfrancach. Léirigh Siu and Ko (2010) é sin freisinLuibhcistéird'fhéadfadh laghdú a dhéanamh ar ábhar Ca2þ mitochondrial, rud a laghdódh MPT atá ag brath ar Ca2þ. Ina theannta sin,LuibhcistéirCruthaíodh freisin gur frithocsaídeoir láidir agus scavenger radacach saor in aisce é in orgáin éagsúla, ag laghdú strus ocsaídiúcháin agus gníomhaíochtaí ROS i staidéir vivo (Lu et al., 1995; Sui et al., 2011). Níos suimiúla, mar iarracht chun a chinneadh an codán gníomhach a chuireann le gníomhaíocht frith-tuirse deLuibhcistéir, fuarthas amach gurbh é verbascoside an comhábhar is mó sa chodán gníomhach (Cai et al., 2010). Léiríodh freisin go laghdódh Verbascoside tuirse muscle i n-eascraí, b'fhéidir mar gheall ar a ghníomhaíochtaí frithocsaídeacha (Liao et al., 1999), ag moladh go bhféadfadh verbascoside a bheith ina chomhpháirt bhithghníomhach a chuireann le héifeachtaí tairbhiúla na gCistanches Luibhe.
Ba é aidhm an staidéir seo a chinneadh an bhféadfadh úsáid eastóscán uisce Cistanches luibhe (HCE) an tocsaineacht matán a tharlódh de bharr simvastatin in vitro a laghdú. Ceapadh go bhféadfadh úsáid HCE na fo-iarmhairtí a bhaineann le tocsaineacht matán de bharr simvastatin a cheartú. Rinneadh iarracht freisin a fháil amach an raibh na héifeachtaí tairbhiúla agLuibhcistéircurtha i leith láithreacht verbascoside.
2. Ábhair agus modhanna
2.1. Fíordheimhniú agus ullmhú ábhair luibhe
Ábhar luibhe amh deLuibhcistéirCeannaíodh é ó sholáthraí clúiteach i Guangzhou, an tSín.Luibhcistéirfíordheimhnithe go ceimiceach ag baint úsáide as crómatagrafaíocht tanaí-chiseal (TLC) de réir Pharmacopoeia na Síne (CP), 2010, le verbascoside agus echinacoside mar na marcóirí ceimiceacha (sonraí nach bhfuil léirithe). Ar fhíordheimhniú ceimiceach, dearbhán luibhiam eiseamal deLuibhcistéirtaiscthe ag Músaem Institiúid an Leighis Síneach ag Ollscoil na Síne Hong Cong (CUHK), le dearbhán uimhir eiseamal 2014-3434.
Go hachomair, bhí 1 kg den luibh amh sáithithe ar feadh 1 h, agus ina dhiaidh sin eastóscadh faoi dhó trí théamh ar feadh 1 h faoi aife ag 100 céim ag baint úsáide as 10 uisce driogtha le haghaidh gach eastóscadh. Rinneadh na heastóscáin uiscí (HCE) a chomhcheangal agus a scagadh. Díríodh an scagáit faoi bhrú laghdaithe ag 60 céim. Rinneadh an sliocht tiubhaithe a lyophilized go triomacht. Ba é 50.1 faoin gcéad w/w céatadán an toraidh. Baineadh úsáid as méid beag chun an chainníocht verbascoside agus echinacoside a chinneadh ag baint úsáide as crómatagrafaíocht leacht ultrafheidhmíochta (UPLC). Rinneadh gach púdar a bhaintear a phacáil i bhfolús agus a stóráil go dtí go n-úsáidfí é.
2.2. Anailís UPLC ar an sliocht uiscí
Rinneadh anailísí UPLC trí úsáid a bhaint as an gCóras LC Ultrafheidhmíochta Acquity Waters (Waters, USA). Ceannaíodh na tuaslagóirí go léir a theastaíonn le haghaidh anailísí UPLC ó Roinn na Ceimice in Ollscoil Hong Cong i Síne. Ceannaíodh Verbascoside agus echinacoside ón Institiúid Náisiúnta um Rialú Táirgí Cógaisíochta agus Bitheolaíochta, an tSín. Instealladh an réiteach samplach isteach i gcolún Acquity Waters UPLC BEH C18 (10{{20}} 2.1 mm2 id, méid na gcáithníní 1.7 mm) le Uiscí ACQUITY UPLC BEH C18 VanGuard Réamhcholún ( 5-2.1 mm2 id, méid na gcáithníní 1.7 mm). Rinneadh gach tuaslagóir a réamhscagadh le 0.45 mm diosca scagaire Millipore (Millipore) agus dí-ghásaíodh é. Baineadh úsáid as na córais tuaslagóirí seo a leanas le leachtú grádáin: céim shoghluaiste A – aicéataitrile; soghluaiste céim B – uisce driogtha dúbailte/aigéad formach (99.9/ 0.1; v/v). Rinneadh an elution le nós imeachta grádán mar seo a leanas: 0-5 min, 88 faoin gcéad B; 5-10 nóim, ó 88 faoin gcéad B go 83 faoin gcéad B. Ba é an ráta sreafa a úsáideadh ná 0.4 ml/nóiméad agus rinneadh braite ag 331 nm de réir CP (2010). Instealladh gach sampla (5 ul) isteach sa cholún tar éis scagacháin trí dhiosca scagaire 0.2 mm. Rinneadh na marcóirí ceimiceacha a shainaithint trí na hamanna coinneála agus ionsú UV na mbuaiceanna anaithnide a chur i gcomparáid leo siúd sna caighdeáin. Rinneadh cuar calabraithe a bhreacadh le sraith de thiúchan verbascoside agus echinacoside (40, 20, 10, 5, 2.5, agus 1.25 mg/ml) le haghaidh cainníochtaithe. Rinneadh cainníochtú verbascoside agus echinacoside laistigh den sliocht luibhe i dtrí chóip. Rinne ríomhaire a raibh Bogearraí Waters MassLynx air le haghaidh bailiú sonraí, comhtháthú agus anailíse monatóireacht ar an gcóras.
2.3. Cultúr cille
Ceannaíodh an líne cille matán cnámharlaigh francach L6 ón mBailiúchán Cultúir Cineál Meiriceánach (ATCC, Manassa, VA, USA). Coinníodh na cealla ag dlús fo-chomhlíonta i Meán-Iolar Athraithe Dulbecco (DMEM, ATCC, Manassas, VA, SAM) arna fhorlíonadh le 10 faoin gcéad v/v séiream bó féatais (FBS) agus 1 faoin gcéad peinicillin-streiptimícin (P/S), agus gortha ag 37 céim in atmaisféar humidified ina bhfuil 5 faoin gcéad CO2 agus 95 faoin gcéad aer.
Chun éifeachtaí HCE ar thocsaineacht mhatán spreagtha statín a chinneadh, déileáladh le cealla L6 le simvastatin ag 10 μM ar feadh 48 h chun tocsaineacht a chothú. Cuireadh HCE (ag tiúchan 0, 250, 500, 1000, agus2000 ug/ml) nó verbascoside (ag tiúchan 0, 20, 40, 80, agus160 μM) mar chomhchóireáil le statín chun a fháil amach an bhfuil an d’fhéadfadh sliocht luibhe cosc a chur ar thocsaineacht statín-spreagtha i gcealla matán cnámharlaigh agus dá bhféadfadh verbascoside éifeachtaí cosanta comhchosúla a bheith aige agus atá ag an sliocht uiscíoch luibhe.
Sliocht Herba Cistanche éifeacht chosanta ar thocsaineacht de bharr simvastatin in vitro
2.4. Citeatocsaineacht in vitro
Cealla L6 (1x105/well) curtha i {{0}}plátaí saothraithe bun cothrom (Iwaki, an tSeapáin) thar oíche, agus cóireáil ina dhiaidh sin le 10 μM de simvastatin, mar aon le nó gan dáileoga éagsúla HCE ( 0–2000 ug/ml) nó verbascoside (0–160 μM), ar feadh 48 h. Cuireadh meán gnáth (DMEM) leis na toibreacha rialaithe. Rinneadh an sliocht agus an comhdhúil luibhe a thuaslagadh i DMEM.
Tar éis na cóireála 48 h, caitheadh an meán ó na cealla go léir agus 30 ul de 5 mg/ml 3-(4,5-démheitilthiazol-2-il)-2,{{ Cuireadh 8}}bróimíd défheinile-tetrazolium (MTT; Sigma, SAM) i saline maolánach fosfáit (PBS) le gach tobar agus goraíodh na plátaí tuilleadh ar feadh 3 h ag 37 céim . Baineadh an forshnáthán ansin agus cuireadh 100 ul de DMSO le gach tobar chun na criostail formazan corcra a thuaslagadh (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO. USA). Léadh ionsúiteacht gach sampla ag 540 nm ag baint úsáide as léitheoir microplate (Biotek μ-Quant, SAM). Léiríodh torthaí mar chéatadán ionsúcháin MTT maidir le cealla rialaithe.
2.5. Measúnú staining FITC/PI Annexin-V
Cealla L6 (3 x105/go maith) cóireáilte le simvastatin, mar aon le nó gan dáileoga éagsúla HCE nó verbascoside. Ansin bailíodh, nite agus dhaite cealla le feiste FITC iarscríbhinn-V de réir phrótacal an déantóra (Trevigen, MD, SAM). Go hachomair, nite cealla faoi dhó le 1 x maolán ceangailteach agus i cubated i 100 ul réiteach lipéadaithe ina raibh 1 ul annexin-V FITCconjugate agus 10 ul PI sa dorchadas ar feadh 15 nóiméad ag teocht an tseomra. Braitheadh fluaraiseacht na samplaí ag cíteiméadracht sreafa (Becton Dickinson FACSCanto II, USA).
2.6. Measúnacht gníomhaíochta Caspase 3 saor in aisce
Socraíodh gníomhaíocht Caspase 3 trí úsáid a bhaint as measúnacht einsímí fluairiméadrach, imdhíon-ionsorbent (Sigma) de réir threoir an mhonaróra. Go hachomair, rinneadh cealla L6 (3 105/go maith) a bhí cóireáilte le simvastatin, mar aon le dáileoga éagsúla verbascoside nó HCE a líseáil ag baint úsáide as an maolán lysis. Rinneadh 7-aimín-4-saor in aisce-4-methylcoumarin (AMC) a ghintear trí scoilteacht próitéalaíoch an tsubstráit ag Caspase 3 a thomhas agus a chainníochtú go fluairiméadrach leis an tonnfhad excitation ag 360 nm, agus tonnfhad astaithe ag 460 nm le BMG FLUOstarOptimamicroplate léitheoir (BMG LABTECH GmbH, an Ghearmáin).
2.7. Measúnacht cheallacha ATP
Cealla L6 (3x105/go maith) cóireáilte le simvastatin, mar aon le nó gan dáileoga éagsúla HCE nó verbascoside. Tar éis cóireála, bailíodh cealla agus rinneadh an t-ábhar ATP a thomhas ag baint úsáide as an trealamh dathmhéadrach atá ar fáil go tráchtála (Abcam, RA) trí ábhar fosfáit gliocról na gcealla lysed a thomhas agus a léamh ag 570 nm ag baint úsáide as léitheoir micreaphláta (Biotek μ-Quant, SAM ). Cuireadh tomhas ar tháirgeadh ATP in iúl mar chéatadán i gcoibhneas leis an ngrúpa rialaithe.
2.8. Anailís staitistiúil
Cuireadh sonraí i láthair mar means7SD, baineadh úsáid as Prism 5 for Window (leagan 5.0c, GraphPad Software, Inc., USA) le haghaidh anailís staitistiúil. Rinneadh difríochtaí suntasacha i measc na ngrúpaí go léir a mheas ag ANOVA aontreo, agus Tástáil Ilchomparáide Bonferroni ina dhiaidh sin. Measadh go raibh dóchúlacht po0.05 suntasach go staitistiúil.
3. Torthaí
3.1. Anailís UPLC ar sliocht uiscí Herba Cistanches
Léirigh Fíor S1A próifíl UPLC de mheascán caighdeánach ina bhfuil echinacoside agus verbascoside. Cuireadh pointí ama coinneála gach ceann de na marcóirí seo i gcomparáid le próifíl UPLC deLuibhcistéirsliocht uiscí (Fig. S1B). An méid echinacoside agus verbascoside laistigh deLuibhcistéirFuarthas amach go raibh an t-eastóscán uiscí {{{0}}.45 faoin gcéad w/w agus 0.085 faoin gcéad w/w, faoi seach.
3.2. Éifeacht HCE agus verbascoside ar chiteatocsaineacht in vitro simvastatin i gcealla matán cnámharlaigh L6
Mar a léirítear i bhFíor 1A, ba chúis le simvastatin cíteatocsaineacht suntasach do chealla L6 mar a léirítear leis an laghdú suntasach ar inmharthanacht cealla L6 ag simvastatin 10 mM. Ag brath ar dháileog cóireála HCE agus chuir sé cosc suntasach ar an gcíteatocsaineacht spreagtha ag simvastatin ag 500, 1000, agus 2000 mg/ml. Chuir Verbascoside treocht chun feabhas a chur ar inmharthanacht na gcealla L6 arna gcomhchóireáil le simvastatin. Mar sin féin, ní raibh tábhacht staitistiúil bainte amach ag aon cheann de na comhchruinnithe (Fíor 1 B).
Fíor 1. Éifeacht chosanta (a) HCE; agus (b) verbascoside ar cíteatocsaineacht arna spreagadh ag simvastatin i gcealla L6. Is ionann luachanna agus acmhainn 7SD (n¼3). Difríocht shuntasach idir cóireáil simvastatin amháin agus an grúpa rialaithe a úsáideann t-thástáil an Mhic Léinn: ### po0.{{10}}01. Difríocht shuntasach i measc na ngrúpaí ar fad atá cóireáilte le simvastatin le nó gan comhchóireáil verbascoside HCE ag baint úsáide as ANOVA aontreo: ** po0.01, *** po0.001.
3.3. Éifeacht HCE agus verbascoside ar bhás cille de bharr simvastatin i gcealla matán cnámharlaigh L6
Chun modh báis cille a tharlódh le simvastatin a scrúdú agus ról cosanta HCE nó verbascoside ar bhás cille de bharr simvastatin a chinneadh, aimsíodh cion na gceall apoptotic le staining iaidíde propidium (PI). Léirigh na torthaí gur spreag simvastatin méadú suntasach ar chomhréir na gcealla apoptotic luatha (Iarscríbhinn V-FITC dearfach agus PI diúltach, Q4-2), agus cealla déanacha apoptotic / marbh (Iarscríbhinn V-FITC dearfach agus PI-dearfach, Q2 - 2) i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe. Laghdaigh comhchóireáil le HCE an cion de chealla apoptotic luath, agus apoptotic déanach / marbh ar bhealach dáileog-spleách suas go dtí 1000 mg / ml (Fíor 2 A). Breathnaíodh an éifeacht chosanta seo freisin i ngrúpaí comhchóireála verbascoside. Mar sin féin, ní raibh tábhacht staitistiúil bainte amach ag aon cheann de na tiúchain a tástáladh (Fíor 2 B).
Fíor 2. Éifeacht simvastatin le nó gan comhchóireáil HCE nó verbascoside ar sheachtrú fosfatidylserine i gcealla L6. Bhí na cealla dhaite le Annexin-V FITC agus I agus braitheadh cíteiméadracht sreafa
3.4. Éifeacht HCE agus verbascoside ar ghníomhaíocht caspase 3 i gcealla matán cnámharlaigh L6 cóireáilte le simvastatin
Mar a léirítear i bhFíor 3A, spreag simvastatin 10 mM gníomhaíocht caspase 3 go suntasach i gcealla L6, rud a thugann le tuiscint apoptosis spreagtha simvastatin go cealla L6 tríd an easghluaiseachta caspase. Mar sin féin, i gcealla L6 comhchóireáilte le simvastatin agus HCE, laghdaigh dáileog-spleách HCE go suntasach gníomhaíocht caspase 3, rud a thugann le tuiscint go bhfuil cumas HCE chun apoptosis spreagtha simvastatin a chosc tríd an caspase caspase. Ar an láimh eile, cé gur fheidhmigh verbascoside treocht freisin chun an méadú a spreagtar le simvastatin i ngníomhaíocht einsím caspase 3 a laghdú, níor shroich ach an tiúchan ag 160 mM tábhacht staitistiúil (Fíor 3 B).
Fíor 3. Éifeacht chosanta (a) HCE; agus (b) verbascoside maidir le gníomhaíocht einsímeach caspase 3 arna spreagadh ag simvastatin i gcealla L6. Is ionann luachanna agus acmhainn 7SD (n¼3–5). Difríocht shuntasach idir cóireáil simvastatin amháin agus grúpaí rialaithe a úsáideann t-tástáil an Mhic Léinn: ###po0.001. Difríocht shuntasach i measc na ngrúpaí ar fad atá cóireáilte le simvastatin a bhfuil nó nach bhfuil HCE nó comhchóireáil verbascoside ag baint úsáide as ANOVA aontreo: *po0.05, **p o0.01, ***po0.001.
3.5. Éifeacht HCE ar laghdú de bharr simvastatin i dtáirgeadh ATP i gcealla matán cnámharlaigh L6
Laghdaigh Simvastatin (10 mM) táirgeadh ATP go suntasach i gcealla L6 thart ar 60 faoin gcéad i gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe (Fíor 4A). Laghdaigh dáileog-chóireáil HCE go brath ar an laghdú ar tháirgeadh ATP i gcealla atá cóireáilte le simvastatin, agus níor bhain ach na tiúchain ag 500, 1000, agus 2000 mg/ml suntas staitistiúil amach. Ar an láimh eile, cé gur ghníomhaigh verbascoside treocht chun táirgeadh ATP a athbhunú ag 50 mg/ml, níor bhain sé tábhacht staitistiúil amach (Fíor 4 B).
Fíor 4. Éifeacht chosanta (a) HCE agus (b) verbascoside ar laghdú de bharr simvastatin i dtáirgeadh ATP i gcealla L6. Is ionann luachanna agus acmhainn 7SD (n¼3–5). Difríocht shuntasach idir cóireáil simvastatin amháin agus grúpaí rialaithe a úsáideann t-tástáil an Mhic Léinn: ###po0.001. Difríocht shuntasach i measc na ngrúpaí ar fad atá cóireáilte le simvastatin a bhfuil nó nach bhfuil HCE nó comhchóireáil verbascoside ag baint úsáide as ANOVA aontreo: *po0.05, **po0.01.
4. Plé
Le leitheadúlacht mhéadaithe galar cardashoithíoch (CVD) agus othair a diagnóisíodh le hypercholesterolemia ar fud an domhain, tá úsáid statins tar éis éirí níos coitianta. Cé go gcuirtear suas go han-mhaith le statins i gcoitinne, is minic a thuairiscítear gortú matán a bhaineann le húsáid statins a d’fhéadfadh tarlú go géar i seachtainí nó míonna tar éis don druga a bheith tionscanta (Fine, 2003). Féadfaidh comharthaí matán a bheith éagsúil ó fhadhbanna éadroma, mar shampla, pian, tenderness, nó laige le nó gan ingearchló creatine kinase (CK), go dtí an riocht is déine de rhabdomyolysis (Armitage, 2007; Hu et al., 2012). Toisc na fo-iarmhairtí seo a bheith ag tarlú, agus nach bhfuil aon chóireáil éifeachtach ann do thocsaineacht mhatán arna spreagadh le statins, ní bhaintear dóthain úsáide as statins fós. I suirbhé leathan ar 10,409 ábhar Francach a rinneadh trí agallamh teileafóin, thuairiscigh 10 faoin gcéad de na hothair a fuair cóireáil statín comharthaí matáin, as ar tháinig deireadh le cóireáil mar thoradh ar 30 faoin gcéad de na hothair shiomptómacha seo (Rosenbaum et al., 2013).
Tá sé léirithe againn don chéad uair go bhfuil sliocht uisce deLuibhcistéir, luibh Síneach traidisiúnta a úsáidtear go coitianta, d’fhéadfadh sé éifeacht chosanta a bheith aige i gcoinne tocsaineachta de bharr simvastatin in vitro i gcealla matán cnámharlaigh L6, rud a thugann le tuiscint go bhféadfaíLuibhcistéireastóscán uiscí (HCE) dá ról cosanta Tocsaineacht matán spreagtha statins, atá ina fo-iarmhairt choitianta aitheanta in othair a thógann statins. D’fhéadfadh cumas láidir HCE cosaint a thabhairt i gcoinne tocsaineachta matán spreagtha ag statin mar sin d’acmhainneacht mhór.
De réir na teoirice traidisiúnta i TCM, tá baint ag Yang le meitibileacht fuinnimh mitochondrial sa chorp, agus fuarthas amach go bhfeabhsaíonn oideas luibheanna bríomhar Yang chun giniúint ATP mitochondrial a fheabhsú (Ko agus Leung, 2007). Rud suimiúil, thugamar faoi deara laghdú ar tháirgeadh ATP i gcealla matán cnámharlaigh L6 atá cóireáilte le simvastatin, agus feabhsaíodh an laghdú seo ar tháirgeadh ATP go suntasach le comhchóireáil HCE. In ár staidéar, ag baint úsáide as cealla muscle cnámharlaigh L6 francach, léirigh muid laghdú ar inmharthanacht cille de bharr simvastatin. Cuireadh feabhas suntasach ar an laghdú seo ar inmharthanacht na gceall le comhchóireáilLuibhcistéirar bhealach dáileog-spleách. Cé nach bhfuil an mheicníocht bheacht maidir le tocsaineacht matán arna spreagadh ag statín soiléirithe go hiomlán, moladh go raibh apoptosis de bharr statin de mhiocítítí cnámhacha sláintiúla ina fhachtóir a chuireann le mióiteiripe, an fo-iarmhairt is coitianta a bhíonn ag úsáideoirí statín (Dirks agus Jones, 2006) . Inár staidéar, thugamar faoi deara méadú suntasach ar chealla apoptotic de bharr simvastatin, a bhain le gníomhaíocht caspase 3 ardaithe go suntasach. Tá na sonraí seo comhsheasmhach freisin le staidéir roimhe seo, a léirigh go bhféadfadh statins éagsúla apoptosis a aslú i mioblasts cnámharlaigh, miotasibí, agus i gcealla matán cnámharlaigh daonna príomhúla trí ghníomhaíochtaí caspase-9 agus caspase-3 a ghníomhachtú (Dirks agus Jones, 2006). Bhí ár HCE in ann an méadú seo de bharr simvastatin in apoptosis gníomhachtaithe caspase-3 a chosc ar bhealach a bhí ag brath ar dháileog.
Luibhcistéir
Thairis sin, mhol litríocht roimhe seo go bhfuil verbascoside ar cheann de na comhábhair ghníomhacha is mó laistighLuibhcistéir. Baineann Verbascoside, ar a dtugtar acteoside freisin, leis an mball de na gliocóisídí feinileatánóideach, grúpa a tharlaíonn go nádúrtha de chomhdhúile polyphenolic atá intuaslagtha in uisce (Liao et al., 1999). Léiríodh roimhe seo gur frithocsaídeoir cumhachtach é verbascoside a d'fhéadfadh gníomhaíochtaí láidre ROS-scavening agus frithocsaídeacha a thaispeáint (Liao et al., 1999). Inár staidéar, chun a fháil amach an é verbascoside an príomh-chomhpháirt laistigh dár HCE a chuireann leis na héifeachtaí tairbhiúla a breathnaíodh, rinneamar tástáil ar éifeachtaí verbascoside ag tiúchain 0–160 mM. Ós rud é gur léirigh muid go bhfuil ár HCE gníomhach ag an raon tiúchana de 250–2000 mg/ml, bunaithe ar ár dtorthaí HPLC a thug le tuiscint go raibh verbascoside inár HCE ag an tiúchan de 0.085 faoin gcéad wt /wt, ba cheart go mbeadh an tiúchan gníomhach de verbascoside idir 0.2125–1.7 mg/ml (.i. 0.34–2.72 mM), ar cheart gurb é verbascoside an comhábhar gníomhach? Mar sin féin, theip orainn éifeacht thairbheach suntasach verbascoside a thabhairt faoi deara leis an raon tiúchana a tástáladh, cé gur thugamar faoi deara treocht dáileog-spleách le haghaidh éifeacht tairbhiúil verbascoside ar chealla matán cnámharlaigh L6. Thug na sonraí seo le tuiscint nach dócha go gcuirfí éifeacht tairbhiúil ár HCE a breathnaíodh i gcealla cnámharlaigh L6 i leith éifeacht verbascoside amháin, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh comhpháirteanna seachas verbascoside a bheith freagrach as na héifeachtaí tairbhiúla a breathnaíodh. Is féidir freisin go bhféadfadh verbascoside idirghníomhú le comhdhúile bithghníomhacha eile laistigh den sliocht chun cur leis na héifeachtaí tairbhiúla. Beidh turgnaimh bhreise ag baint úsáide as codánúchán treoraithe le bithmheasúnú úsáideach chun tuilleadh léargais a sholáthar ar na comhpháirteanna bithghníomhacha atá freagrach as cur le héifeachtaí cosanta breathnaithe HCE ar thocsaineacht matán arna spreagadh ag simvastatin a fháil.
Mar fhocal scoir, léiríonn an staidéar reatha go bhféadfadh HCE éifeachtaí cosantacha láidre a imirt ar laghdú de bharr simvastatin in inmharthanacht cille matán in vitro. Soláthraíonn na torthaí seo an réamhfhianaise a thugann le tuiscint go bhféadfadh luach teiripeach a bheith ag ár n-eastóscán uiscí HC mar bhia feidhmiúil nó nútraiceodach d’othair hipearlipidéime a bhfuil orthu tarraingt siar ó chóireáil statín mar gheall ar mhiotocsaineacht statins-spreagtha.
Admháil Fuair an staidéar seo tacaíocht airgeadais ón mBiúró Bia agus Sláinte HKSAR, Ciste Taighde Sláinte agus Leighis uimh. 11120831.
Tagairtí
Armitage, J., 2007. Sábháilteacht statins i gcleachtas cliniciúil. Lancet 370, 1781–1790.
Beltowski, J., Wojcicka, G., Jamroz-Wisniewska, A., 2009. Éifeachtaí díobhálacha statins – meicníochtaí agus iarmhairtí. Curr. Drugaí Saf. 4, 209–228.
Cai, RL, Yang, MH, Shi, Y., Chen, J., Li, YC, Qi, Y., 2010. An ghníomhaíocht antifatigue de phenylethanoid-saibhir sliocht ó Cistanche deserticola. Phytother. Res. 24, 313–315.
Dirks, AJ, Jones, KM, 2006. Apoptosis de bharr statine agus miopaitíteas cnámharlaigh. Táim. J. Fisiol. Cill Fhisiol. 291, C1208–C1212.
Fine, DM, 2003. Tocsaineacht matán a bhaineann le statín. Clin. Cógaslann. 3, 554.
Golomb, BA, Evans, MA, 2008. Éifeachtaí díobhálacha Statin: athbhreithniú ar an litríocht agus ar fhianaise do mheicníocht mitochondrial. Táim. J. Cardiovasc. Drugaí 8, 373–418.
Hu, M., Cheung, BM, Tomlinson, B., 2012. Sábháilteacht statins: nuashonrú. Ther. Adv. Drugaí Saf. 3, 133–144.
Kaufmann, P., Torok, M., Zahno, A., Waldhauser, KM, Brecht, K., Krahenbuhl, S., 2006. Tocsaineacht statins ar mitochondria matán cnámharlaigh francach. cill. Mol. Sci Saol. 63, 2415–2425.
Ko, KM, Leung, HY, 2007. Feabhas a chur ar chumas giniúna ATP, gníomhaíocht frithocsaídeach, agus gníomhaíochtaí inmunomodulatory ag luibheanna tonifying Síne Yang agus Yin. smig. Med. 2, 3.
Kobayashi, M., Kagawa, T., Narumi, K., Itagaki, S., Hirano, T., Iseki, K., 2008. Forlíonadh décharbónáit mar bhealach coisctheach i damáiste muscle a tharlódh le statins. J. Pharm. Pharm. Sci. 11, -8.
Kromer, A., Moosmann, B., 2009. Baineann an díobháil ae spreagtha le statín le traschaint idir cosáin bithsintéiseach colaistéaról agus seileanopróitéin. Mol. Pharm. 75, 1421–1429.
Leung, HY, Ko, KM, 2008. Feabhsaíonn sliocht Herba Cistanche giniúint ATP mitochondrial i gcroí francach agus cealla H9C2. Pharm. Biol. 46, 418.
Liao, F., Zheng, RL, Gao, JJ, Jia, ZJ, 1999. Moilliú tuirse matáin chnámharlaigh ag an dá glycosídí feinilpropanoid: verbascoside agus martensite ó Pedicularis plicata Maxim. Phytother. Res. 13, 621–623.
Lu, KG, Liu, HB, Gu, QQ, 1995. Staidéar ar Chomhábhair Cheimiceacha de Cistanche deserticola Ma. agus Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. smig. Traidisiún. Luibh. Drugaí 26, 143 .
An Coimisiún Pharmacopoeia, 2010. Pharmacopoeia Daon-Phoblacht na Síne. Chemical Industry Press, Beijing.
Rosenbaum, D., Dallongeville, J., Sabouret, P., Bruckert, E., 2013. Scor teiripe statín mar gheall ar fo-iarsmaí matáin: suirbhé ar an saol fíor. Nutr. Metab. cardashoithíoch. Dis. 23, 871-875.
Siu, AH, Ko, KM, 2010. Feabhsaíonn sliocht Herba Cistanche stádas glutathione mitochondrial agus riospráid i gcroí francach, le ionduchtú féideartha próitéiní díchúplála. Pharm. Biol. 48, 512–517.
Sui, ZF, Gua, TM, Liu, B., Peng, SW, Zhao, ZL, Li, L., Shi, DF, Yang, RY, 2011. Comhdhúil carbaihiodráit intuaslagtha in uisce ó chomhlachtaí naLuibhcistéir: leithlisiú agus a éifeacht scavenging ar radacach saor in aisce ar an gcraiceann. Carbaihiodráit. polaim. 85, 75.
Thompson, PD, Clarkson, P., Karas, RH, 2003. Mioapaite a bhaineann le Statin. JAMA 289, 1681–1690.
Vaklavas, C., Chatzizisis, YS, Ziakas, A., Zamboulis, C., Giannoglou, GD, 2009. Bunús móilíneach miópachta a bhaineann le statín. Atherosclerosis 202, 18–28.
Velho, JA, Okanobo, H., Degasperi, GR, Matsumoto, MY, Alberici, LC, Cosso, RG, Oliveira, HC, Vercesi, AE, 2006. Spreagann statins trasdul tréscaoilteachta mitochondrial atá ag brath ar chailciam. Tocsaineolaíocht 219, 124–132.
Xiong, Q., Hase, K., Tezuka, Y., Tani, T., Namba, T., Kadota, S., 1998. Gníomhaíocht hepatoprotective feinileatánóid ó Cistanche deserticola. Planta Med. 64, 120–125.
