Tionchar Coisctheach Díorthaigh Curcumin J147 ar Iompar Melanogenesis Agus Meileanómach Trí Dhíghrádú MITF ERK-Idirghabhálaithe a Éascú Cuid 1

Aithníodh úsáid theiripeach curcumin agus curcumin modhnaithe go ceimiceach (CMC) chun gníomhaíocht melanogenesis agus tyrosinase a shochtadh. Is leagan modhnaithe de curcumin é J147 le bith-infhaighteacht agus cobhsaíocht níos fearr. Mar sin féin, níl aon tuairisc faoi éifeachtaí J147 ar lí in vitro agus in vivo. Inár gcuid staidéir, rinneamar imscrúdú ar na héifeachtaí hypo-lí atá ag cóireáil J147 ar mhelanocytes agus rinneamar iniúchadh ar an mbunmheicníocht. Mhol na staidéir reatha gur chuir J147 melanogenesis basal agus -MSH-spreagtha araon faoi chois, chomh maith le síneadh dendrite melanocyte agus iompar melanosóim a laghdú. D'imir J147 na róil seo go príomha trí chonair kinase próitéine kinase (ERK) a rialaítear le comhartha extracellular a ghníomhachtú. Nuair a cuireadh i ngníomh é, bhí díghrádú MITF mar thoradh air agus laghdaigh sé an abairt tyrosinase, TRP-1, TRP-2, Myosin Va, Rab27a, agus Cdc42, rud a chuir bac ar shintéis melanin agus iompar meileanosome. Ina theannta sin, léiríodh éifeachtaí hip-líochacha J147 in vivo i múnla iasc séabra agus samhail hipearpigmentation UVB-spreagtha i muca guine donna. Thug ár dtorthaí le tuiscint freisin nár léirigh J147 aon cíteatocsaineacht in vitro agus in vivo. Le chéile, dheimhnigh na sonraí seo go bhféadfadh J147 a bheith úsáideach go leor mar oibreán bánú craicinn nádúrtha níos sábháilte.

CistancheTá feidhm aige freisintáirgeadh collagen a chur chun cinn, a fhéadfaidh leaisteachas agus luster an chraiceann a mhéadú agus cabhrú le cealla craiceann damáiste a dheisiú. CistancheGlicóisídí feinileatánóltionchar suntasach síos-rialaithe artyrosinasegníomhaíocht, agus taispeántar gurb é an éifeacht ar tyrosinase ná cosc ​​iomaíoch agus inchúlaithe, ar féidir leis bunús eolaíoch a sholáthar chun an t-ábhar a fhorbairt agus a úsáid.comhábhair whiteningsa gCistinche. Dá bhrí sin, tá ról lárnach ag cistanche i whitening craiceann. Is féidir leisbac a chur ar tháirgeadh melanindídhathú agus dullness a laghdú; agus táirgeadh collaigine a chur chun cinn gofeabhas a chur ar leaisteachas craiceannagus radiance. Mar gheall ar an aitheantas forleathan ar na héifeachtaí seo cistanche, go leorwhitening craiceanntá táirgí tar éis tosú ag insileadh comhábhair luibhe ar nós Cistanche chun freastal ar éileamh na dtomhaltóirí, rud a mhéadaíonn luach tráchtála Cistanche i dtáirgí whitening craiceann. Go hachomair, tá ról an chistín i ngéibheann craicinn ríthábhachtach. Féadann a éifeacht frithocsaídeach agus a éifeacht a tháirgeann collagen dídhathú agus dullness a laghdú, leaisteachas craiceann agus luster a fheabhsú, agus mar sin éifeacht whitening a bhaint amach. Chomh maith leis sin, léiríonn feidhmiú leathan Cistanche i dtáirgí whitening craicinn nach féidir a ról i luach tráchtála a mheas faoina luach.

Eochairfhocail: J147, éifeachtaí hypo-lí, iompar meileanosome, cosán ERK, díghrádú MITF

Cliceáil ar Cistanche Tubulosa le haghaidh Bánú

Tuilleadh eolais: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

RÉAMHRÁ

Braitheann pigmentation craiceann ar shintéis melanin araon agus ar dháileadh i gciseal an eipideirm. Déantar melanin a tháirgeadh go príomha thart ar núicléas melanocytes agus a stóráil i melanosóim (Tian et al., 2021). Tar éis aibithe, chuaigh meileanosomes ar imirce feadh microtubules agus filiméid actin go leideanna dendrite na gcealla agus ar deireadh chuig na keratinocytes comharsanacha chun an próiseas dáileacháin a chríochnú (Beaumont et al., 2011; Ohbayashi agus Fukuda, 2012). Faoi ghnáthstádas fiseolaíoch, cosnaíonn melanin craiceann an duine ó dhamáiste ultraivialait (UV), ceimiceáin tocsaineacha, agus fachtóirí comhshaoil ​​eile (Slominski et al., 2004; Yousaf et al., 2020). Mar sin féin, cothaíonn táirgeadh agus carnadh iomarcach hipearpigmentation agus tá baint acu le neamhoird chraiceann cosúil le melanoderma iar-athlastach, melasma, agus leitiginí gréine, as a dtagann ualach síceasóisialta suntasach (Pillaiyar et al., 2017). Dá bhrí sin, is gá gníomhairí whitening craiceann éifeachtach agus sábháilte a fhorbairt.

Le blianta beaga anuas, tá bitheolaíocht ceall melanin tagtha chun bheith ina réimse taighde níos leithne agus tá soiléiriú déanta ar roinnt próitéiní tábhachtacha a chuireann le melanógenesis agus iompar meileanosome, rud a d'fhág an bealach chun coscairí sintéise melanin a aithint. Tá Tyrosinase riachtanach go heisiach le haghaidh melanogenesis agus is é cosc ​​ar ghníomh catalaíoch tyrosinase an modh is coitianta chun táirgeadh melanin a laghdú (D'Mello et al., 2016). Forbraíodh roinnt coscairí tyrosinase aitheanta, lena n-áirítear arbutin agus aigéad kojic, mar bhreiseáin chosmaideacha (Ding et al., 2020). Cuireann coimpléasc KIF5b agus Rab27A-Melanophilin-Myosin Va leis an iompar meileanosome amach (Ohbayashi agus Fukuda, 2012; Noguchi et al., 2014). Rialaíonn Cdc42 fadú dendrite, rud atá riachtanach le haghaidh aistriú meileanosome (Luo, 2000). D'fhéadfadh cosc ​​​​na próitéiní thuas iompar meileanosome a shochtadh go suntasach, rud atá ina mheicníocht thábhachtach chun oibreáin ghealúcháin craicinn a fhorbairt. Is máistir-fhachtóir trascríobh i melanóigineas é fachtóir trascríobh a bhaineann le micreictreamia (MITF). Thairis sin, rialaíonn MITF iompar melanosóim freisin trí léiriú Rab27a agus Cdc42 a astú (Noguchi et al., 2016). Glacann ilbhealaí comharthaíochta páirt i lí trí leibhéal slonn MITF a rialú. Spreagann gníomhachtú próitéin cAMP kinase A (PKA) lí trí phróitéin ceangailteach eilimint freagartha cAMP (CREB) ag brath ar léiriú MITF (Rodríguez agus Setaluri, 2014). Os a choinne sin, cuireann gníomhachtú kinase próitéine extracellular comhartha-rialaithe (ERK) bac ar melanogenesis trí dhíghrádú MITF a luathú (Lv et al., 2020a). Forbraíodh go leor gníomhairí frith-melanóigineacha a dhíríonn ar ghníomhaíocht tyrosinase, ar aistriú meileanosome, nó ar bhealaí comharthaíochta a bhaineann le melanóigineach. Mar sin féin, is beag coscairí a rinne staidéir in vivo agus léirigh siad torthaí maithe (Pillaiyar et al., 2017).

Is cumaisc dialylheptanoid é Curcumin atá scoite ó rhizome Curcuma longa (Zingiberaceae) agus a úsáidtear mar bhlas buí nó lí i mbianna (Zheng J. et al., 2018). Léirigh staidéir a fheidhmeanna fiseolaíocha éagsúla, lena n-áirítear gníomhaíochtaí frith-athlastacha, frith-ocsaídiúcháin, frith-amyloid, agus frith-meall (Liu et al., 2016; Zheng Y. et al., 2018). Seachas iad seo, cuireann curcumin bac ar ghníomhaíocht tyrosinase agus cuireann sé melanogenesis i melanocytes faoi chois (Lee et al., 2010; Tu et al., 2012). Ach cuireann droch-bhith-infhaighteacht curcumin teorainn lena chur i bhfeidhm (Karthikeyan et al., 2020). Chun an fhadhb seo a réiteach, déantar J147 a fhorbairt mar chomhdhúil láidir de dhíorthach curcumin le níos mó cobhsaíochta agus bith-infhaighteachta (Li et al., 2020). Tá éifeacht neuroprotective ag J147 agus tá sé i dtrialacha cliniciúla céim I le haghaidh galar Alzheimer faoi láthair. Mar sin féin, níl aon tuairisc fós faoi éifeachtaí J147 ar lí in vitro agus in vivo.

ABHAIR AGUS MODHANNA

Imoibrithe

Fuarthas J147 (J302241), -MSH (M118985), agus tyrosinase ó muisiriún (T128536) ó Aladdin (Shanghai, an tSín). Fuaireamar antashubstaintí in aghaidh Myosin Va (sc-365986), KIF5b (sc-133184), GP100 (sc-393094), Cdc42 (sc-8401), Rab27a (sc{{{). 13}}), p-JNK (sc-6254), JNK (sc-7345), p-p38 MAPK (sc-166182) agus p38 MAPK (sc-398546) ó Santa Cruz (CA, SAM). Fuarthas na antasubstaintí i gcoinne MITF (97800), p-MEK (2338), MEK (4694), p-ERK (4370), agus ERK (4695) ó Cell Signaling Technology (MA, USA). Fuarthas na antasubstaintí i gcoinne tyrosinase (ab180753), TRP-1 (ab235447), TRP-2 (ab221144), cytokeratin (ab7753), agus S100 (ab133519) ó Abcam (Cambridge, UK). Fuarthas coscaire p38 SB203580 (S1863), inhibitor ERK PD98059 (S1805), trealamh measúnaithe próitéin BCA (P0012), maolán lysis cille (P0013), agus -actin (AF5001) ó Beyotime (Shanghai, an tSín). Ceannaíodh feisteáin RT-qPCR (RR036A) ó Takara Biomedical Technology (Beijing, an tSín).

Cultúr na Cille

Measúnacht MTT

Scrúdaíodh inmharthanacht na gceall le measúnacht MTT (Yun et al., 2020). Go hachomair, cuireadh na cealla i 96-plátaí tobair agus cóireáilte le J147 (1–8 μM) ar feadh 48 u. Ansin, nitear na cealla le PBS agus cuireadh réiteach MTT (20 μL) ina ionad. Tar éis gortha ar feadh 4 h sa bhreis, baineadh an tuaslagán supernatant agus cuireadh DMSO (200 μL) le gach tobar. Ar deireadh, socraíodh an t-ionsúchtadh optúil ag 570 nm.

Ábhar Meileanin a Thomhas

Síolaíodh cealla le dlús 2 × 105/mL i 6-phlátaí saothraithe tobair. Tar éis gor 24 h, saothraíodh cealla le dáileoga éagsúla de J147 (1, 2, 4 μM) agus le nó gan spreagadh -MSH (60 nM). Tar éis cóireála 48 h, baineadh cealla agus díscaoileadh an melanin iomlán sa millíní cille i 100 μL de thuaslagán oibre NaOH (1 mol / L, 10 faoin gcéad DMSO) ag 80 céim C ar feadh 1 h, agus tomhaiseadh an t-ionsúchtúchán ag 405 nm (Lv et al., 2015; Lv et al., 2019).

Measúnacht Gníomhaíochta Tyrosinase

Scrúdaíodh gníomhaíocht tyrosinase cheallacha mar a thuairiscítear roimhe seo (Liao et al., 2017; Lv et al., 2020a). Go hachomair, rinneadh cealla a lí trí mhaolán lysis cille tar éis níocháin trí huaire, agus ansin fuarthas an comhshamhail do mheasúnacht gníomhaíochta tyrosinase trí na lysáití a lártheifneoiriú. 100 μL PBS (0.1M, pH 6.5) sásta 10 ug próitéiní measctha le 100 μL 0.1 faoin gcéad L-DOPA. Goradh an pláta ag 37 céim ar feadh 1 h, agus ansin rinneadh monatóireacht ar ionsú optúil ag 475 nm.

Tástáladh éifeacht dhíreach J147 ar ghníomhaíocht tyrosinase ag córas saor ó chealla mar a cuireadh síos air roimhe seo (Lv et al., 2020a). Go hachomair, rinneadh an t-imoibriú chun gníomhaíocht tyrosinase muisiriún a chinneadh i 96-phláta tobair agus bhí tyrosinase muisiriún (10 aonad), L-tyrosine (0.03 faoin gcéad , 50 μL), agus 100 μL PBS sa mheascán imoibrithe. (0.1 M, pH 6.5) suimiú le tiúchain éagsúla J147. Tar éis goir ag 37 céim ar feadh 10 nóiméad, tomhaiseadh ionsúiteacht ag 475 nm ag baint úsáide as speictreafótaiméadar micreaphláta.

Staining Airgid Amóiniacach Masson-Fontana

Chun lí melanin a bhrath, socraíodh píosaí craiceann, agus melanocytes i formalin agus daite de réir an phrótacail chaighdeánaigh (Gu et al., 2018; Lv et al., 2020b). Go hachomair, nite na sleamhnáin 3 huaire le huisce dí-ianaithe agus ansin iad a ghoradh i dtuaslagán airgid amóinia ag teocht an tseomra ar feadh 12 h. Tar éis sruthlú go maith in uisce dí-ianaithe, goraíodh na sleamhnáin i dtuaslagán hypo ar feadh 5 nóiméad. Ansin, rinsíodh na sleamhnáin arís agus coinníodh iad le stain dearg neodrach ar feadh 5 nóiméad eile. Ar deireadh, tar éis sruthlú críochnúil, breathnaíodh sleamhnáin faoi mhicreascóp Nikon-Eclipse-Ti.

Imdhíonfluaraiseacht le haghaidh Aistriú Melanosome

Bunaíodh an córas coculture de chealla B16F10 agus HaCaT ar an mhias comhfhócasach, mar a thuairiscítear roimhe seo (Lee et al., 2015; Lv et al., 2020c). Tar éis an chóireáil J147, bhí na cealla imdhíonta le frith-GP100 agus frith-Cytokeratin de réir an phrótacail chaighdeánaigh. Tógadh íomhánna ón micreascóp Nikon-Eclipse-Ti.

Immunohistochemistry do S-100

Rinneadh immunohistochemistry do S-100 mar a thuairiscítear roimhe seo (Lee et al., 2013; Lv et al., 2020b). Seo a leanas cur síos gairid: cuireadh bac ar shleamhnáin le 5 faoin gcéad BSA ag 25 céim C ar feadh 1 uair agus ansin goraíodh iad le hantashubstaint phríomhúil frith-S-100 ag 4 céim C thar oíche. An lá dár gcionn, nite na sleamhnáin 3 huaire le tuaslagán TBST agus goraíodh iad leis an antasubstaint thánaisteach. Ansin, déileáladh le sleamhnáin le carbazole aminoethyl chun na hailt a fhorbairt agus breathnaíodh iad faoi mhicreascóp.

Trascríobh Droim ar Ais – PCR

Bhain imoibrí TRIzol amach RNA iomlán ceallacha agus rinneadh é a chainníochtú go speictrophotometrically. Ansin, baineadh úsáid as SuperScript II Reverse Transcriptase chun aon-shnáithe a shintéisiúcDNA de réir na dtreoracha déantúsaíochta.Ceannaíodh primers oligonucleotide ó GenScript(Nanjing, an tSín). Na seichimh deMITFTá primers géine 5′- AGAGCAGGGCAGAGAGTGAGTG -3′, 5′-AACTTGATTCCAGGCTGATGATGTC -3′. Na seichimh deGAPDHgéineTá primers 5′- AGGTCGGTGAACGGATTTG-3′, 5′- TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA -3′. Bhí táirgí PCRscartha le leictreafóiréis ar glóthacha agarose 1 faoin gcéad agus braitheadhfaoi ​​sholas ultraivialait (Lee et al., 2013).

Blotting an Iarthair

Bhí próitéiní (40 ug) scartha le glóthacha SDS-PAGE agus aistríodh iad chuig seicní scagaire nitrocellulose (NC) ag córas aistrithe electrophoretic (Bith-Rad). Cuireadh bac ar sheicní NC le 3 faoin gcéad BSA i dtuaslagán TBST ag teocht an tseomra ar feadh 1.5 h. Ansin goradh na seicní le hantasubstaintí príomhúla ag 4 chéim thar oíche. An lá dár gcionn, nite na blots 3 huaire le tuaslagán TBST agus ansin gortha iad le antasubstaintí tánaisteacha comhchuingeacha peroxidase ag 25 céim ar feadh 1 h, agus léiríodh iad trí úsáid a bhaint as cemiluminescence feabhsaithe (Lv et al., 2020d).

Cinneadh Ábhar Meilanin i Múnla Seabrafish

Go hachomair, bailíodh suthanna sioncronaithe agus eagraíodh iad le pípéad (trí go ceithre shuthanna in aghaidh an tobair le meán 200 μL suth i 96-plátaí tobair). Ansin, díscaoileadh J147 agus PTU i 0.1 faoin gcéad DMSO agus cuireadh leis an meán embry ó 35 go ​​60 h (nochtadh 25 h). Breathnaíodh tionchar J147 ar melanogenesis zebrafish faoin stereomicroscope (Zheng J. et al., 2018).

Meastóireacht ar Fhéinitíopa-Bhunaithe agus Múnla Muc Ghuine Hipirthírigh de bharr UVB

Ceannaíodh 8 muc ghuine donna (6 seachtaine, thart ar 250–300 g) ón Institiúid Eolaíochta Ainmhithe Saotharlainne (Beijing, an tSín). Coinníodh na muca guine seo leo féin i seomra tairiseach teochta agus taise faoi 12-h timthriall éadrom/dorcha. Nochtadh na limistéir ar leith (ciorcal diametrical 1 cm) de chúl gach ainmhí do 500 mJ/cm2 UVB (Sigma SH-4, Shanghai, An tSín) uair amháin sa lá ar feadh 1 seachtaine chun an tsamhail hyperpigmentation a bhunú. Ansin tugadh an fheithicil (PEG400/EtOH=7:3) agus J147 (1 faoin gcéad ) do na limistéir hipearpige (tuaslagán 20 μL in aghaidh an chiorcail) dhá uair sa lá ar feadh 3 seachtaine. Rinneadh measúnú ar an méid pigmentation tríd an luach ΔL a ríomh de réir an luach L arna thomhas ag an speictreafótaiméadar (YS3010, 3nh, Shenzhen, an tSín), mar a leanas: ΔL=L (ag gach lá tomhaiste) -L (ag an lá 0) (Lee et al., 2013; Lv et al., 2020b). D'fhormheas coiste cúraim agus úsáide ainmhithe Ollscoil Changzhou gach nós imeachta ainmhithe sa staidéar seo.

Anailís staitistiúil

TORTHAÍ

J147 Laghdú Melanogenesis agus Líon na Dendrites Laistigh de Chealla B16F10

Léirítear struchtúr J147 i bhFíor 1A. Ar an gcéad dul síos, rinneadh turgnamh inmharthanachta cille chun fiosrú an raibh J147 cítotocsaineach do chealla B16F10. Mar a léirítear i bhFíor 1B, níor breathnaíodh aon éifeachtaí cíteatocsaineacha de J147 ag raon dosing 1–8 μM tar éis 48 h. Ansin, scrúdaíomar an tionchar a bhí ag J147 ar shintéis melanin. Mar a léirítear i bhFíor 1C, chuir J147 bac ar shintéis melanin basal. -MSH chun cinn go suntasach melanogenesis i melanocytes. Aisiompaíodh an méadú ar melanogenesis de bharr -MSH tar éis cóireála J147. Go comhsheasmhach, léirigh staining airgid amóinia Masson-Fontana gur laghdaigh J147 go mór an t-ábhar melanin i gcealla B16F10 le nó gan -MSH (Fíor 1D). Ina theannta sin, laghdaíodh líon agus fad na dendrites agus an tiúchan melanin i dendrites i gcomparáid le cealla neamhchóireáilte (Fíor 1D). Mhol na torthaí gur laghdaigh J147 melanogenesis agus foirmiú dendrite gan éifeachtaí citotocsaineacha.

Chuir J147 cosc ​​ar Ghníomhaíocht Ceallach Tyrosinase agus Léiriú Tyrosinase, TRP-1, TRP-2

Ghlac an teaghlach tyrosinase próitéiní (tyrosinase, TRP-1, agus TRP-2) páirt i meileanogenesis. Ina measc seo, is príomh-einsímí iad tyrosinases a rialaíonn cosán bithsintéiseach melanin (D'Mello et al., 2016). Chun a chinneadh an bhfuil tionchar ag J147 ar ghníomhaíocht tyrosinase, d'úsáideamar an modh ocsaídiúcháin L-DOPA ar dtús chun éifeachtaí J147 ar ghníomhaíocht tyrosinase ceallacha a chinneadh. Taispeánadh go n-imríonn J147 (1-4 μM) éifeachtaí coisctheacha domhain ar ghníomhaíocht tyrosinase ceallacha ar bhealach dáileog-spleách i gcealla B16F10 (Fíor 2A). Ansin, rinneadh measúnú gníomhaíochta tyrosinase muisiriún chun éifeachtaí díreacha J147 ar ghníomhaíocht tyrosinase a chinneadh. Mar a léirítear i bhFíor 2B, níor breathnaíodh aon éifeachtaí coisctheacha, rud a léiríonn nach raibh tionchar ag J147 ar ghníomhaíochtaí einsímeacha tyrosinase muisiriún (Fíor 2B). Mar is eol dúinn, tá melanogenesis á rialú ag gníomhaíocht agus méideanna na tyrosinases sin. Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil comhghaolú idir éifeachtaí frith-melanogenic J147 le léiriú tyrosinase, rinneadh anailís blot an iarthair. Mar a léirítear i bhFíor 2C, laghdaíodh na leibhéil slonn tyrosinase go suntasach tar éis cóireála J147 le -MSH nó gan é, agus breathnaíodh na torthaí céanna sa slonn TRP-1 agus TRP-2. Thug na breathnuithe seo le fios gur chuir J147 bac ar ghníomhaíocht tyrosinase ceallach agus meileanogenesis trí leibhéil slonn tyrosinase, TRP-1, agus TRP-2 a laghdú.

Chuir J147 Iompar Melanosome Cosc trí Shloinneadh Myosin Va, Rab27a agus Cdc42 a Rialáil

Déantar pigmentation craiceann daonna a chinneadh trí shintéis melanin chomh maith le dáileadh melanin. I melanocytes mamaigh, déantar melanin den chuid is mó sa chorp cille agusimirceann feadh filiméid actinagus microtubules go dendrites, agus ar deireadhchuig na keratinocytes comharsanacha a chríochnúan dáileadhpróiseas (Ohbayashi agus Fukuda, 2012). Mar a léirítear iFíor 1D, J147 laghdú suntasach ar an foirmiú dendrite.Ina theannta sin, bhí an tiúchan melanin i dendrites freisinlaghdaithe mar a bhí an lí melanin comhiomlán sa perinuclearréigiúin. Ansin, rinneamar comhshaothrú ar chealla B16F10 agus HaCaT chunfiosrú an bhfuil tionchar ag J147aistriú melanosóim gokeratinocytes trí mhicreascópacht chomhfhócasach. Tá dáileadh nachonacthas melanin sna cealla HaCaT sa chomhchultúrMionsamhail (Fíor 3A). I gcodarsnacht leis sin, cé go raibh an tsamhail comhchultúrcóireáilte le J147 ar feadh 48 h, comharthaí gráinneach meileanosome iBhí cealla HaCaT suntasachlaghdaithe (Fíor 3A).

Chun an mheicníocht bhunúsach a bhaineann le héifeachtaí coiscthe an aistrithe meileanómach faoi J147 a shoiléiriú tuilleadh, rinneamar scrúdú ar roinnt fachtóirí ríthábhachtacha a bhaineann le hiompar meileanómach. Déanann KIF5b iompar melanosóim amach a idirghabháil feadh na micritiúbules, agus cuireann coimpléasc Rab27a Melanophilin-Myosin Va le hiompar meileanosome feadh filiméid actin i melanocytes (Reiner et al., 2020). Ina theannta sin, spreagann Cdc42 foirmiú dendrites i melanocytes, a bhfuil ról riachtanach aige freisin in iompar melanosóim. Mar a thaispeántar i bhFíor 3B, tháinig laghdú suntasach ar léiriú Cdc42, Myosin Va, agus Rab27a, ach ní KIF5b tar éis cóireála J147 i riocht le nó gan -MSH. Léirigh ár dtorthaí gur chuir J147 bac ar iompar meileanosome trí léiriú Myosin Va, Rab27a, agus Cdc42 a laghdú.

J147 Díghrádú MITF Luathaithe

Tá MITF ar cheann de na príomhrialtóirí le haghaidh melanogenesis agus rialaíonn sé trascríobh géine tyrosinase, TRP{0}}, TRP-2, Cdc42, agus Rab27a (Noguchi et al., 2016; Kim et al., 2019 ). Rinneamar scrúdú ar dtús ar thionchar J147 ar thrascríbhinní MITF. Mar a léirítear i bhFíor 4A, -MSH méadú thar cuimse ar thrascríobh MITF, áfach, níor breathnaíodh aon athrú tar éis cóireála J147, rud a léiríonn nach ndéanann J147 íosrialáil léiriú MITF. Ansin, scrúdaíomar an bhfuil tionchar ag J147 ar aistriúchán MITF. Mar a thaispeántar i bhFíor 4B, tar éis cóireála -MSH, mhéadaigh leibhéil próitéin MITF, buaicphointe ag 4 h, agus thosaigh sé ag meath ag 8 h (Fíor 4B). Go héagsúil, níor tháinig laghdú ar leibhéil próitéine MITF ag 4 h tar éis cóireála J147, ach ag 8 h tháinig laghdú tapa ar leibhéil próitéin MITF go leibhéil nach bhféadfaí a bhrath, rud a léiríonn nach bhfuil tionchar ag J147 ar aistriúchán MITF ach go luasghéaraíonn sé díghrádú próitéin MITF go suntasach.

J147 Melanogenesis faoi Shocht Trí Chosán Comharthaíochta MEK/ERK

Imríonn cosán comharthaíochta kinases próitéine mitogen-gníomhaithe (MAPK), lena n-áirítear kinase próitéine extracellular comhartha-rialaithe (ERK), p38, agus c-jun N-críochfort kinase (JNK), róil ríthábhachtacha i lí (Lee et al., 2013). Is eol go n-éascaíonn fosfarylation ERK díghrádú MITF agus go scaipeann sé na spreagthaigh melanogenic ar deireadh, rud a léiríonn meicníocht aiseolais dhiúltach ollmhór (Kwon et al., 2017). Mar sin féin, tá feidhm an p38 agus an chonair JNK fós conspóideach. Mar sin, scrúdaíomar éifeacht J147 ar na cosáin chomharthaíochta MAPK. Mar a léirítear i bhFíor 5A, chuir J147 MEK/ERK agus p38 i ngníomh, ach níor aimsíodh aon tionchar ar fosfarlú chonair chomharthaíochta JNK.

Tuilleadh eolais: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501