Tá Tionchar Frith-Aosú Polaipeiptíde Beanna Veilbhit Ag brath ar Mhodhnú an Mhiocribiota Inní agus ar Rialú an Chonair PPAR/APOE4 CUID 1

Rinneamar imscrúdú ar éifeachtaí frith-aosaithe polaipeiptíde beanna veilbhit ar lucha aosaithe de bharr D-galactós (D-gal). Bunaíodh lucha aosaithe spreagtha D-gal agus roinneadh iad go randamach i gcúig ghrúpa, is iad na grúpaí rialaithe, múnla, vitimín E (VE), íseal-dáileog polaipeiptíde beanna veilbhit, agus grúpaí ard-dáileog polaipeiptíde beanna veilbhit. Baineadh úsáid as tástáil lúbra uisce Morris chun cumas foghlama agus cuimhne lucha atá ag dul in aois a mheas. Breathnaíodh néaróin hippocampal trí staining hematoxylin-eosin agus micreascópacht leictreoin tarchurtha. Baineadh úsáid as modhanna bithcheimiceacha chun gníomhaíochtaí superoxide dismutase, malonaldehyde, agus einsímí eile a bhrath agus meastóireacht a dhéanamh ar thionchar polaipeiptíde beanna veilbhit ar chumas frithocsaídeach lucha ag dul in aois. Ag baint úsáide as seicheamhú géine 16S rRNA agus teicneolaíocht míristéama, rinneamar measúnú ar éifeacht pholaiptíde beinne veilbhit ar fhlóra intestinal lucha atá ag dul in aois agus ar mheitibileacht aigéid shailligh. Léirigh na torthaí turgnamhacha go bhféadfadh polypeptide beanna veilbhit feabhas suntasach a chur ar chumas foghlama agus cognaíocha lucha ag dul in aois, agus gníomhaíochtaí superoxide dismutase, glutathione peroxidase, agus catalase sa serum a mhéadú chun an t-ábhar malonaldehyde a laghdú. Léirigh anailís mhicréiceolaíoch stéigeach go bhféadfadh polypeptide beanna veilbhit méadú suntasach a dhéanamh ar raidhse lactobacillus ghéineas baictéarach tairbheach. Léirigh anailís blot an Iarthair freisin go bhféadfadh polaipeiptíde beanna veilbhit meitibileacht aigéid shailligh a chur chun cinn trí receptor peroxisome proliferator-activated (PPAR ) a ghníomhachtú agus slonn na n-einsímí iartheachtacha carnitine-palmitoyl transferase -1 A agus acyl-CoA oxidase 1 a rialáil agus iad ag dírialáil. apaipoprotein E4 (APOE4), rud a laghdaíonn carnadh aigéid shailligh agus méadú ar tháirgeadh adenosine-trífhosfáit (ATP). Dá bhrí sin, feabhsaíonn polaipeiptíde beanna veilbhit an micri-éiceolaíocht intestinal agus gníomhaíonn sé an cosán PPAR / APOE4 chun meitibileacht aigéid shailligh a rialáil.

Is féidir le glycoside cistanche méadú freisin ar ghníomhaíocht SOD i bhfíocháin chroí agus ae, agus laghdaítear go mór an t-ábhar lipofuscin agus MDA i ngach fíocháin, ag scavening go héifeachtach fréamhacha ocsaigine imoibríocha éagsúla (OH-, H₂O₂, etc.) agus a chosaint i gcoinne damáiste DNA a dhéantar. ag OH-radacach. Tá cumas láidir scavenging fréamhacha saor in aisce ag gliocóisídí cistanche feinileatánóideach, cumas laghdaithe níos airde ná vitimín C, feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD i bhfionraí sperm, laghdaigh ábhar MDA, agus tá éifeacht chosanta áirithe acu ar fheidhm membrane sperm. Is féidir le polaisiúicrídí cistanche feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD agus GSH-Px in erythrocytes agus fíocháin scamhóg lucha senescent turgnamhacha de bharr D-galactós, chomh maith le hábhar MDA agus collagen sa scamhóg agus plasma a laghdú, agus ábhar elastin a mhéadú. éifeacht scavenging maith ar DPPH, fadú am hypoxia i lucha senescent, feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD i serum, agus moill a chur ar dhíghiniúint fiseolaíoch na scamhóg i lucha senescent turgnamhach Le díghiniúint moirfeolaíoch cheallacha, tá sé léirithe ag turgnaimh go bhfuil an cumas frithocsaídeach maith ag Cistanche. agus tá an cumas aige a bheith ina dhruga chun galair aosaithe craicinn a chosc agus a chóireáil. Ag an am céanna, tá cumas suntasach ag echinacoside i Cistanche fréamhacha saor in aisce DPPH a scavening agus tá an cumas aige speicis ocsaigine imoibríocha a scaveneáil agus cosc ​​a chur ar dhíghrádú collagen saor ó radacach saor in aisce, agus tá éifeacht mhaith deisiúcháin aige freisin ar damáiste anion radacach saor ó thymine.

Cliceáil ar Cong Rong Cistanche

【Le haghaidh tuilleadh eolais:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Eochairfhocail

Polaipeiptíde beanna veilbhit; D-galachtós; Ag dul in aois; Micréiceolaíocht intestinal; Foghlaim; Lagú cognaíocha; cosán PPAR/APOE4; Micribhithe

1. Réamhrá

Is ionann polapeiptíde beinne veilbhit (VAP) agus 50-60 faoin gcéad de mheáchan fliuch beinne veilbhit agus tá sé ar cheann dá phríomh-chomhábhair ghníomhacha [1]. Tá VAP saibhir i bpróitéiní, aimínaigéid, fosfailipidí, colaistéaról, agus iain chailciam agus cuireann sé éifeachtaí éagsúla chun cinn sláinte, le frithocsaídeoirí [2], friotaíocht oistéapóróis [3], agus éifeachtaí rialáil imdhíonachta [4] tar éis a thuairisciú. Chun ról VAP a thuiscint níos fearr maidir le galair neurodegenerative a chosc agus a chóireáil, dheimhnigh taighde roimhe seo ag ár ngrúpa taighde freisin go bhféadfadh VAP leibhéil an receptor glucocorticoid, an receptor mineralocorticoid, agus an hormóin a scaoileann corticotrópn a laghdú. Breathnaíodh freisin éifeachtaí VAP ar an ais thalamus-pituitary-adrenal agus a chumas bac a chur ar apoptosis neuronal [5].

Is próiseas fiseolaíoch nádúrtha é aosú inchinn arb iad is sainairíonna strus ocsaídiúcháin (OS), carnadh móilíní damáiste ocsaídiúcháin, agus athruithe ar struchtúr agus ar fheidhm na néaróin, rud a fhágann meath cognaíocha agus caillteanas cuimhne ar deireadh thiar [6]. I measc na bhfachtóirí seo, meastar gurb é OS an phríomhchúis le galair neurodegenerative a bhaineann le dul in aois [7]. Nuair a bhíonn an comhlacht faoi spreagthaí díobhálacha, tá éagothroime idir giniúint agus baint fréamhacha saor in aisce, rud a fhágann go dtiocfaidh méadú ar fhréamhacha saor in aisce go leibhéal a sháraíonn an cumas frithocsaídeach sa chorp. Go háirithe, tá fréamhacha saor in aisce iomarcacha citotocsaineach, rud a dhéanann damáiste díreach don lárchóras néaróg [8, 9]. Ní dhéanann inchinn an duine ach 2-3 faoin gcéad de mheáchan coirp an duine. Mar sin féin, is ionann an lárchóras néaróg (CNS) agus 20 faoin gcéad de sholáthar iomlán ocsaigine an chorp daonna. Mar sin, tá ábhar na bhfréamhacha saor in aisce neuronal sa CNS suntasach, rud a chuireann ard-riosca OS [10] i láthair.

Tá thart ar 10-níos mó baictéar in aghaidh na gcealla daonna i micribiota putóige an duine, a chuimsíonn níos mó ná 100 speiceas [11]. Is iad Firmicutes na speicis is flúirseach laistigh den mhiocróbóit gut daonna, arb ionann iad agus 60 faoin gcéad den bhaictéar iomlán, agus Baicteroidetes (15 faoin gcéad) ina dhiaidh sin agus comhpháirteanna eile arb ionann iad agus céatadán beag. Tá an microbiota gut i stát cothromaíochta dinimiciúil leis an gcorp an duine, agus tá ról tábhachtach ag miocróib intestinal i meitibileacht an duine, feidhm endocrine, agus rialáil imdhíonachta. Dá bhrí sin, nuair a bhíonn struchtúr microbiota gut suaite, d'fhéadfadh galair neurodegenerative, galair cardashoithíoch, agus otracht a bheith ann [12]. Féadfaidh athruithe ar chainníocht agus éagsúlacht na miocrorgánaigh intestinal difear a dhéanamh freisin ar an néarchóras eintreach agus lárnach. Tugtar an ais microbiota-gut-inchinn ar na hidirghníomhaíochtaí seo, rud atá tábhachtach d'fheidhm an chomhlachta [13, 14]. Cé nach gá go ndéanfadh athruithe ar phróifílí micribiota gut difear do shláinte, tá baint ag caillteanas na héagsúlachta sa mhicrobiota lárnach le feidhm chognaíoch agus cuimhne laghdaithe [15]. Go deimhin, le haois ag dul i méid, is iad na hathruithe ar flóra baictéarach tréithrithe go príomha ag laghduithe ar éagsúlacht, probiotics, anaeróbaí dáimhe, agus aigéid sailleacha gearr-slabhra iomlán [16].

Cé gur dheimhnigh go leor staidéir go maolaíonn éifeachtaí frithocsaídeacha agus frith-aosaithe a bhaineann le VAP dul in aois, níl an mheicníocht chruinn atá mar bhunús leis an ngníomhaíocht seo soiléir fós. Mar sin, san obair seo, rinneadh éifeacht frith-aosaithe VAP a mheas in vivo i lucha trí thástáil an gcathair ghríobháin uisce Morris (MWM), anailís bithcheimiceach, staining hematoxylin-eosin (H&E), agus micreascópacht leictreoin tarchurtha (TEM). Ina theannta sin, rinneamar measúnú ar na hathruithe ar an micri-éiceolaíocht intestinal i múnlaí luiche atá ag dul in aois a chóireáiltear le VAP ag baint úsáide as teicneolaíocht seicheamhaithe géine RNA ribosomal 16S (rRNA). Ba é an sprioc a bhí againn meicníocht na gníomhaíochta VAP a shoiléiriú i gcomhthéacs an aosaithe agus bonn teoiriciúil a sholáthar chun cur chuige nua teiripeacha frith-aosaithe a fhorbairt.

2. Ábhair agus modhanna

2.1 Ábhair thurgnamhacha

VAP was provided by the Molecular Pharmacology Laboratory, Changchun University of Chinese Medicine. Dgalactose (D-gal) and VE (purity >Ceannaíodh 90 faoin gcéad ) ó Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd (Shanghai, an tSín). Ceannaíodh feisteáin superoxide dismutase tráchtála (SOD), malonaldehyde (MDA), catalase (CAT), agus glutathione peroxidase (GSH-Px) ó Nanjing Jiancheng Technology Co., Ltd (Nanjing, an tSín). Bhí gach ceimiceán agus imoibrí de ghrád anailíseach.

Ceannaíodh córas rianaithe físeán agus anailíse lúbra uisce Morris (MWM) ó Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd. (Chengdu, an tSín). Ceannaíodh micreascóp leictreoin tarchuir ó Tecnai Corporation (Hillsboro, OR, USA). Chuir Illumina (San Diego, CA, USA) an t-ardán seicheamhaithe ard-tréchuir (MiSeq PE300) ar fáil.

2.2 Turgnaimh ar ainmhithe

Ceannaíodh seasca lucha sláintiúil ICR (grád SPF, leath fireann agus leath baineann, meáchan 22-26 g) ó Changchun Yisi Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (teastas Uimh. SCXK(Ji) -2018-0007). Ardaíodh na lucha i cages ar leith faoi 12 h timthriallta éadrom / dorcha agus teocht caighdeánach (22 ± 2 ◦C), le bia agus uisce ar fáil ad libitum. Cuireadh na lucha go léir in oiriúint do na coinníollacha seo ar feadh seachtaine ar a laghad sular cuireadh tús leis na turgnaimh. Roinneadh na lucha go léir i gcúig ghrúpa, na grúpaí rialaithe, múnla, vitimín E (VE), VAP íseal-dáileog (VAP1), agus VAP ard-dáileog (VAP2). Riaradh na grúpaí VE, VAP1, agus VAP2 VE (100 mg/kg), VAP (200 mg/kg), agus VAP (400 mg/kg), faoi seach, ar feadh 10 lá, agus fuair na grúpaí rialaithe agus múnla uisce driogtha. (an toirt chéanna agus tríd an mbealach intragastrach céanna). Ag tosú ar an 11ú lá, cuireadh an grúpa rialaithe instealladh go subcutaneously le gnáth-seile. Rinneadh D-gal (1000 mg/kg) a instealladh go subcutaneously isteach i gcúl mhuineál na lucha sna grúpaí eile, agus leanadh leis an riarachán múnla ar feadh 60 lá.

2.3 lúbra uisce Morris

Rinneadh an tástáil MWM 1 h tar éis riarachán D-gal ar lá 57. Go hachomair, cuireadh ardán i lár an gcathair ghríobháin uisce. Cuireadh uisce leis an ardán go dtí gur sháraigh sé 1 cm agus coinníodh ag thart ar 25 ◦C. Cuireadh oiliúint leanúnach ar na lucha ar feadh seachtaine 1, agus rinneadh an tástáil MWM go foirmiúil de réir nós imeachta oibríochta caighdeánach an gcathair ghríobháin uisce. Roimh thús oifigiúil an turgnaimh, cuireadh dé-ocsaíd tíotáiniam leis an uisce ionas nach bhféadfadh na lucha suíomh sonrach an ardáin a bhrath. Dathaíodh cinn na lucha buí chun sonraí a rianú agus a bhailiú. Thaifead bogearraí anailíse físe-rianaithe lúbra uisce Morris cosán snámha na lucha, céatadán an ama cónaithe sa lárfháinne, agus céatadán an achair ghluaiseachta fáinne lár.

2.4 staining H&E

Socraíodh brains iomlán na lucha i dtuaslagán paraformaildéad 4 faoin gcéad agus leabaithe i pairifín. Tar éis 24 h, rinneadh na fíocháin inchinne a altrú, a dhíphairifíniú, a athhiodráitiú, agus a dhaite le H&E. Breathnaíodh na hailt ansin faoi mhicreascóp optúil chun na hathruithe paiteolaíocha a thaifeadadh.

2.5 MÍR

Tar éis perfusion, scoilteadh na fíocháin hippocampal, socraithe le 2 faoin gcéad paraformaldehyde agus 2.5 faoin gcéad tuaslagán maolánach fosfáit glutaraldehyde, díhiodráitíodh iad ag baint úsáide as grádán alcóil, glanadh le própán ethocsa, leabaithe, slisnithe, agus dhaite le aicéatáit úráinile agus chiotráite luaidhe. Breathnaíodh ultrastruchtúr na néaróin hippocampal faoi mhicreascóp leictreoin tarchurtha.

2.6 Anailísí bithcheimiceacha

Bailíodh samplaí fola luchóg agus lártheifneoiríodh iad ag 3000 rpm ar feadh 15 nóiméad ag 4 ◦C, agus ina dhiaidh sin bailíodh an súthaire. Rinneadh an t-ábhar serum MDA agus cinneadh gníomhaíochta SOD, GSH-Px, agus CAT go léir leis na treoracha feiste.

2.7 Próifíliú micribhithóta ar shamplaí fecal

Baineadh DNA iomlán as samplaí fecal agus úsáideadh é mar theimpléad chun PCR a mhéadú ar an réigiún V3-V4 den ghéine rRNA 16S baictéarach. Tá an tacar sonraí amh i dtaisce in NCBI BioProject PRJNA731623 faoi na huimhreacha aontachais BioSample SAMN19291644 go SAMN19291668. Rinneadh anailís chainníochtúil ar na táirgí PCR, agus rinneadh seicheamhú géine 16S rRNA ag baint úsáide as ardán Illumina MiSeq (Illumina, San Diego, SAM). Tá na sonraí amh bunaithe ar an íosfhad forluí de 10 bp, agus is é 0.2 (réamhshocraithe) an cóimheas neamhréire uasta incheadaithe sa limistéar forluí. Rinneadh léamha gach sampla a spliceáil, agus scagadh clibeanna le faid níos lú ná 75 faoin gcéad d'fhad na gclibeanna tar éis rialú cáilíochta. Baineadh na chimeras (is é sin, má tá seicheamh ag an dá thuismitheoir atá níos mó ná 80 faoin gcéad cosúil le seicheamh na gceisteanna, ansin meastar gur chimera é an cheist) chun seichimh chlib ardchaighdeáin a fháil. Baineadh úsáid as bogearraí taighde (Sonoma, USA) [17] chun clibeanna a bhraisliú ag leibhéal cosúlachta 97 faoin gcéad, aicmiú aonaid tacsanomacha oibriúcháin (OTUanna), aicmiú speiceas a fháil bunaithe ar chomhdhéanamh seicheamh OTU, agus caolú sampla plota [18] agus cuair innéacs na Sionainne. . Baineadh úsáid as PICRust (Halifax, CAN) [19] chun comhdhéanamh géine feidhme gach sampla a chinneadh trí chomparáid a dhéanamh ar fhaisnéis faoi chomhdhéanamh speiceas de réir thorthaí seicheamhaithe géine 16S rRNA. Ar an mbealach seo, d’fhéadfaí difríochtaí feidhmiúla idir samplaí nó grúpaí éagsúla a chinneadh. Fuarthas na flúirsí, na cosáin, an fhaisnéis CE, agus na flúirsí OTU i gcomhthéacs gach catagóir feidhme ag baint úsáide as bunachar sonraí Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes [20].

2.8 Blotting an Iarthair

Baineadh próitéin iomlán as fíochán inchinn, agus baineadh úsáid as modh gorm iontach Coomassie chun an tiúchan próitéine a mheas. Ansin, tar éis leictreafóiréis SDS-PAGE, aistríodh na próitéiní go dtí an membrane, a goradh ansin le antasubstaintí príomhúla i gcoinne spriocphróitéiní apolipoprotein E (APOE4), acyl-CoA oxidase 1 (ACOX1), receptor peroxisome proliferator-activated (PPAR), carnitine-palmitoyl transferase-1 A (CPT1A), agus glyceraldehyde-3-fosfáit díhydrogenase(GAPDH) thar oíche ag 4 ◦C. Ina dhiaidh sin, nite an membrane agus ansin gortha le antasubstaint thánaisteach ag teocht an tseomra ar feadh 1 h. Tar éis an scannán a ní le saline maolánach Tris agus Tween 20 (TBST), cuireadh tuaslagán feabhsaithe chemiluminescent (ECL). Úsáidtear córas íomháithe glóthacha atá go hiomlán uathoibríoch (Aplegen, Pleasanton, SAM) chun grianghrafadóireacht a scanadh.

2.9 Leibhéil saoraigéad shailligh (FFA) i bhfíochán inchinne a bhrath

Bailíodh fíocháin inchinn lucha, agus cuireadh méid cuí de ghnáth-seile leis. Ansin, lártheifneoiríodh na samplaí ag 4 ◦C ag 3000 rpm ar feadh 10 nóiméad, agus bailíodh na supernatants. Socraíodh na leibhéil FFA i bhfíocháin inchinne leis na treoracha feiste.

2.10 Ábhar ATP i bhfíochán inchinne a bhrath

Bailíodh fíocháin inchinne lucha agus lísíodh iad ag cóimheas maolánach fíocháin inchinne: lysis de 1:5. Ansin, lártheifneoiríodh na samplaí ag 12,000× g ag 4 ◦C ar feadh 5 nóiméad, agus bailíodh na supernatants. Cinneadh an t-ábhar ATP i bhfíocháin inchinne leis na treoracha trealamh.

2.11 Anailís staidrimh

Úsáideadh SPSS 19.0 (Chicago, IL, SAM) le haghaidh anailíse sonraí. Cuirtear na torthaí in iúl mar an meán ± diall caighdeánach (x ± s). Baineadh úsáid as t-thástáil an dalta chun grúpaí a chur i gcomparáid, agus measadh go raibh difríochtaí suntasacha ag P < 0.05 nó P < 0.01.

3. Torthaí

3.1 Cognaíocht, foghlaim agus cuimhne a fheabhsú i lucha aosaithe a chóireáiltear le VAP

Braitheann an tástáil MWM ar instinct marthanais ainmhithe chun an t-ardán éalaithe a aimsiú agus baineann sé le cuardach a dhéanamh ar shuíomh spásúlachta a bhaineann le cuimhne. Léiríonn Fíor 1 rianta ionadaíocha de lucha a riar an tástáil MWM ar an lá deiridh. Bhí an léaráid trajectory iompair luch den ghrúpa múnla níos casta agus neamhrialta, agus níor aimsigh na lucha an t-ardán. Is fiú a thabhairt faoi deara, bhí an léaráid trajectory iompair de na lucha sna grúpaí VAP1 agus VAP2 simplí, agus fuarthas ardán. I gcomparáid leis an ngrúpa Rialaithe, laghdaíodh céatadán na n-am coinneála sa lárfháinne agus céatadán an achair a d'aistrigh an lárfháinne sa ghrúpa Múnla go suntasach (P < 0.01). I gcomparáid leis an ngrúpa Múnla, tháinig méadú suntasach ar an gcéatadán ama coinneála sa lárfháinne agus ar chéatadán an achair a d’aistrigh an lárfháinne sna grúpaí VE, VAP1, agus VAP2 (P < 0.05, P < 0.01). Léiríonn na torthaí seo gur chuir riar VAP feabhas ar chumas cognaíocha lucha aosaithe de bharr D-gal-spreagtha.

3.2 Éifeacht cosanta VAP ar néaróin hippocampal i lucha aosaithe

Baineadh úsáid as staining H&E chun deilbhíocht phaiteolaíoch fíocháin inchinne i lucha aosaithe a bhreathnú chun iniúchadh a dhéanamh an bhféadfadh VAP feabhas a chur ar dhamáiste paiteolaíoch néarónach de bharr D-gal-spreagtha (Fíor 2 A). Bhí na cealla CA1 sa hippocampi ón ngrúpa rialaithe flúirseach, le gnáthstruchtúr cille, moirfeolaíocht iomlán, agus núicléis soiléir. I gcodarsnacht leis sin, tháinig laghdú ar líon na gcealla CA1 i hippocampi ón ngrúpa múnla agus léirigh sé moirfeolaíocht neamhrialta, gan aon nucleoli soiléir a breathnaíodh faoin micreascóp. Bhí na néaróin i limistéar CA1 an hippocampi sách gnáth, agus laghdaíodh crapadh núicléach sa ghrúpa VE i gcomparáid leis an ngrúpa múnla. Is díol suntais é go raibh an limistéar CA1 i hippocampi ó na grúpaí VAP1 agus VAP2 difriúil go suntasach leis an gceann a breathnaíodh sa mhúnlaghrúpa agus cosúil le limistéar an ghrúpa rialaithe. Bhí an struchtúr sách gnáth, bhí na cealla socraithe go dlúth agus go rialta, agus bhí an mhoirfeolaíocht iomlán.

Baineadh úsáid bhreise as TEM chun ultrastructure na néaróin hippocampal i lucha aosaithe a bhreathnú agus chun a thuiscint an raibh baint ag éifeacht aisiompaithe VAP ar an meath ar fhoghlaim agus cuimhne le micreastruchtúr néaróin san inchinn a rialáil (Fíor 2 B). Léirigh na néaróin hippocampal moirfeolaíocht slán, dáileadh crómatin aonfhoirmeach, agus orgánailíní flúirseach sa chíteaplasma sa ghrúpa rialaithe. Ag ardmhéadú, bhí na mitochondria éilipseacha, le membrane seachtrach dúbailte soiléir agus cristae slán. I gcodarsnacht leis sin, bhí na néaróin i réigiún hippocampal an ghrúpa múnla neamhghnácha; breathnaíodh athruithe luatha apoptotic cosúil le comhdhlúthú crómatin; bhí corpuscles lipofuscin níos minice; ní raibh an struchtúr synaptic soiléir; scaipeadh braoiníní lipid, agus braitheadh ​​leathnú cosúil le feisicle ar choimpléasc Golgi agus reticulum garbh ionplasmach laghdaithe. Go hiontach, i gcomparáid leis an ngrúpa múnla, bhí néaróin hippocampal ag na grúpaí VAP1 agus VAP2 a raibh claonadh acu a bheith gnáth i struchtúr agus i moirfeolaíocht, le seicní núicléacha mín, gnáth-núicléi, agus orgánailíní flúirseach. Go háirithe, breathnaíodh níos mó synapses, ní raibh comhiomlánú neamhghnácha ag na veicíní synaptic sa membrane roimhe seo, bhí moirfeolaíocht an chomhlachta Golgi intracytoplasmic agus mitochondria gnáth, agus bhí lipofuscin annamh.

3.3 Éifeachtaí VAP ar einsímí ocsaídiúcháin a bhaineann le damáiste

Is é éifeacht dhiúltach OS ná táirgeadh fréamhacha saor in aisce sa chorp, ceann de na príomhchúiseanna le dul in aois agus galair (Fíor 3). I gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, tháinig laghdú suntasach ar ghníomhaíochtaí SOD, CAT, agus GSH-Px i serum lucha múnla D-galriartha (P < 0.01, P < {{7 }}.{{10}}5), agus méadaíodh an t-inneachar MDA go suntasach (P < 0.05), rud a léiríonn samhaltú rathúil. I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, méadaíodh go suntasach gníomhaíochtaí SOD, CAT, agus GSH-Px sa ghrúpa VE (P < 0.01, P < 0.05) . I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, méadaíodh go suntasach gníomhaíochtaí SOD agus GSH-Px sa ghrúpa VAP1 (P < 0.05, P < 0.01). I gcodarsnacht leis sin, méadaíodh an CAT beagán ach ní raibh sé difriúil go mór. I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, méadaíodh go suntasach gníomhaíochtaí SOD, CAT, agus GSH-Px sa ghrúpa VAP2 (P < 0.05, P < 0.01). I gcomparáid leis an ngrúpa múnla, laghdaíodh go suntasach inneachar serum MDA na lucha sna grúpaí VAP1 agus VAP2 (P < 0.05). Léiríonn na torthaí thuas go bhfuil baint ag éifeacht frith-aosú VAP le feabhas a chur ar ghníomhaíocht einsímí frithocsaídeacha serum i lucha ag dul in aois agus laghdú sárocsaídiú lipid.

3.4 Éifeachtaí VAP ar chomhdhéanamh agus ar éagsúlacht na micribiota gut i lucha

Thug torthaí seicheamhú géine rRNA 16S 1,999,460 PE Reads, agus tar éis chimeras a scagadh agus a bhaint, fuarthas 1,776,708 clib éifeachtach. Ba é meánfhad seicheamh na samplaí sna grúpaí rialaithe, múnla, VE, VAP1, agus VAP2 ná 417.2, 416.2, 418.2, 421.0, agus 420.4 bp, faoi seach. Bhí cóimheas na léann le scór cáilíochta Phred os cionn 30 (Q30) sa raon ó 94.15 go 95.71 faoin gcéad .

Ina dhiaidh sin, chinneamar comhdhéanamh microbiota gut ag baint úsáide as na géine rRNA 16S léite. Cnuasaíodh na clibeanna a fhaightear trí sheicheamhú ard-thréchuir ag leibhéal cosúlachta 97 faoin gcéad , agus gineadh léaráid Venn ( Fíor. 4 A ). Bhí 490 OTU ag gach grúpa, agus go bunúsach ní raibh aon OTU ar leith in aghaidh an ghrúpa. Chun a fhíorú cé acu ar chomhlíon an doimhneacht seicheamhaithe riachtanais aitheantais speiceas, rinneamar breacadh ar chuair na Sionainne agus rarefaction do gach sampla (Fíor 4B, C). Bhí an dá chuar i ngach sampla gar don ardchlár sáithiúcháin, rud a léirigh clúdach ard (99 faoin gcéad ). Tugann na sonraí seo le tuiscint gur baineadh formhór mór na faisnéise éagsúlachta miocróbach sna samplaí agus go bhféadfaí struchtúr agus éagsúlacht an phobail baictéarach a chinneadh go cruinn.

Léiríonn éagsúlacht alfa raidhse speiceas (saibhreas) agus éagsúlacht speiceas. Úsáidtear innéacsanna na Sionainne agus Simpson chun éagsúlacht speiceas a thomhas agus bíonn tionchar ag flúirse speiceas sa phobal samplach agus cothromas speiceas (comhionannas pobail) orthu. Dá mó luach innéacs na Sionainne, is lú an luach innéacs Simpson, rud a léiríonn go bhfuil éagsúlacht speiceas an tsampla níos airde [21]. Ní léiríonn na torthaí a chuirtear i láthair i bhFíor 4D aon difríochtaí suntasacha i luachanna innéacs na Sionainne den fhlóra luiche idir na grúpaí.

I gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, níl aon difríocht shuntasach ag luach innéacs Simpson an ghrúpa mhúnla. Níor tugadh faoi deara aon difríocht shuntasach idir an grúpa múnla agus gach grúpa cóireála. Ní léiríonn na torthaí seo aon difríocht shuntasach ar éagsúlacht flóra intestinal na lucha idir na grúpaí.

Rinneadh PCA ar an bhflóra intestinal luch (Fíor 4E), áit a bhfuil PC1 agus PC2 an dá luach tréith is cúis leis an difríocht is mó idir samplaí. Léirigh na torthaí go raibh PC1 agus PC2 freagrach as 32.94 agus 19.74 faoin gcéad den mhéid tionchair, faoi seach. Dá fhaide na pointí, is mó an difríocht. Tá na cúig ghrúpa samplaí cnuasaithe i dtrí chatagóir, agus na samplaí grúpa múnla dáilte sa chúinne uachtarach ar chlé den fhíor, i bhfad ar shiúl ó na grúpaí eile. Léirigh na grúpaí rialaithe, VE, agus VAP2 níos mó forluí, agus bhí na trí ghrúpa samplaí gar dá chéile. Léiríonn lár uachtarach Fíor 4E, tar éis idirghabháil VAP, gur feabhsaíodh cosúlacht flóra intestinal an ghrúpa lucha VAP2 agus na lucha rialaithe.

Rinneadh measúnú ar na difríochtaí i líonmhaireacht na mbaictéar sa mhúnla rialaithe, grúpaí VE, VAP1, agus VAP2 don 20 géine is fearr ( Fíor. 4 F ). Bhí an flúirse de Lachnospireaceae_NK4A{136_ghrúpa agus Lactobacillus difriúil idir na hainmhithe rialaithe agus samhail, áit ar tháinig laghdú suntasach ar raidhse Lactobacillus sa mhúnlaghrúpa. I gcodarsnacht leis sin, tháinig méadú suntasach ar fhlúirse na ngine a bhí fágtha. Go háirithe, tá baill Lactobacillus probiotics le héifeachtaí frith-aging agus frith-athlastach [22, 23]. Dá bhrí sin, ní raibh na torthaí seo iontas. Go suntasach, tháinig méadú suntasach ar raidhse Lactobacillus sna grúpaí VAP1 agus VAP2 i gcomparáid leis an ngrúpa múnla, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh VAP ábhar na mbaictéar tairbheach sa gut a mhéadú, rud a chosc aosú.

【Le haghaidh tuilleadh eolais:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】