Staidéar ar Scaradh agus Neamhinniúlacht Uisce Sliocht Polasiúicríde Ó Cistanche Tubulosa

le haghaidh tuilleadh eolais:ali.ma@wecistanche.com

Ailadan·Maimitiaili1,LI Yang1,YAO Meitheamh1,YUAN Jie2

（1. Scoil na Cógaisíochta, Ollscoil Leighis Xinjiang, Urumqi 830011, an tSín;2. Colláis Houbo, Ollscoil Leighis Xinjiang, Xinjiang Klamayi 834000, an tSín）

CUSPÓIR teibí:Chun an sliocht uisce a leithlisiú depolaisiúicrídí ó Cistanche tubulosa,agus imscrúdú a dhéanamh ar a n-inniúlacht imdhíonachta in vitro. MODHANNA: Baineadh úsáid as roisín asaithe macraporous AB{{{{30}}} chun polaisiúicríd C. tubulosa a dhídhathú. Rinneadh an próiseas dídhathaithe a bharrfheabhsú trí thástáil orthogonal le ráta coinneála agus ráta dídhathaithe polaisiúicríde mar scór cuimsitheach, agus úsáid á baint as ráta asaithe, am dídhathaithe, tiúchan samplach mar fhachtóirí. Rinneadh na tástálacha fíoraithe. DEAE-650Úsáideadh colún malartaithe ian M chun sliocht uisce polaisiúicríd C. tubulosa dídhaite a scaradh. Baineadh úsáid as measúnacht CCK-8 chun éifeachtaí na dtiúchan éagsúil de pholaisiúicríd (6.{4}} ug/mL) a bhrath roimh agus tar éis leithlisiú ar ráta iomadú macrafáis lucha RAW264.7. Glacadh le modh Griess agus measúnacht ELISA chun éifeachtaí tiúchan íseal, meánach agus ard polaisiúicríde (12.5,25,50 ug/mL) a bhrath ar scaoileadh NO,IL-6 agus TNF- i gcealla RAW264.7 spreagtha ag LPS. TORTHAÍ: Sa phróiseas dídhathaithe is fearr de roisín asaithe macraporous AB-8, ba é an ráta sreafa asaithe ná 1.2 BV/h, ba é an t-am dídhathaithe ná 9 h, agus ba é an tiúchan samplach ná 25 mg/mL. Ba iad na scóir chuimsitheacha 3 huaire de thástálacha fíoraithe ná 63.43 ％ ,63.29 ％ agus 63.34％ , faoi seach, le meán de 63.35％ (RSD＝0.11％ ,n＝3）. Rinneadh polaisiúicríd neodrach amháin (CTZ) agus polaisiúicrídí 5 aigéid (CT1, CT2, CT3, CT4, CT5) a leithlisiú ó pholaisiúicríd C. cistanche, ba é an t-ábhar ná 299.2,168.0,123.2,121.6,54. 11.2 mg/g. I gcomparáid leis an ngrúpa rialaithe, 6.25-100 ug/mL CTZ (seachas 6.25 μ g/mL) ）, CT2, CT4, CT5 agus 6.25 μ g/mL CTC (an polaisiúicríd roimh scaradh) d'fhéadfadh méadú suntasach a dhéanamh ar an ráta iomadaithe de chealla RAW264.7 (P＜{{80}.05), cé go bhféadfadh 6.25-100 ug/mL CT1,CT3 agus 50 ug/mL CTC ráta iomadú RAW264 a laghdú. 7 gceall (P＜0.05）. I gcomparáid leis an ngrúpa LPS, tháinig laghdú suntasach ar scaoileadh NÍL i ngrúpaí tiúchana íseal, meánach agus ard de CTC, CT2, CT3 agus CT5, CTZ grúpa tiúchan íseal (P ＜0.05）), cé go méadaíodh go suntasach i ngrúpaí tiúchana ard CT1 agus CT4 （P＜0.05）. Tháinig laghdú suntasach ar scaoileadh IL-6 (seachas an grúpa tiúchan ard CT1 agus an grúpa tiúchan íseal CT5) agus TNF- (ach amháin an grúpa tiúchan mheán CT1) go suntasach i ngrúpaí tiúchana íseal, meánacha agus ard (P＜0.05). ）. CONCLÚIDÍ: Tá an teicneolaíocht dídhathaithe optamaithe de roisín asaithe macroporous cobhsaí agus indéanta sa staidéar. Is féidir polaisiúicríd neodrach amháin agus 5 polaisiúicrídí aigéadacha a leithlisiú ó eastóscadh uisce polaisiúicrídí C. tubulosa, agus ina measc tá an cumas frith-athlastach níos láidre ag polaisiúicríd CT2.

EOCHAIRFHOCAL:Cistanche tubulosa polaisiúicríd; Dídhathú; Scaradh; Inniúlacht imdhíonachta

Cistanche tubulosais gas tirim, méithe le duilleoga scála deCistanche tubulosa (Schenk) Wightden teaghlach Lidanaceae. Léirigh staidéir nua-aimseartha go bhfuil gliocóisídí alcóil feinitile, gliocóisídí iridoid, lignans, polaisiúicrídí, alcalóidigh, agus substaintí gníomhacha bitheolaíocha eile ag Cistanche Tubula, a bhfuil airíonna aphrodisiac, purgóideacha, cosanta ae agus frith-aosaithe. , Is féidir díolúine feabhsaithe frith-tuirse, agus éifeachtaí nootrópacha [1-4], a úsáid le haghaidh cóireáil chliniciúil ar easnamh duáin yang, easnamh bunúsach agus fola, impotence agus infertility, laige na waist agus na glúine, laige na matáin agus cnámha, intestines tirim, agus constipation [5].

Cliceáil chun táirgí luibhe Cistanche

sliocht uisce anCistanche tubulosa polaisiúicrídis donn-buí. An turgnamh roimhe seo ar ár ngrúpa taighde fuarthas amach go chomh maith leis anCistanche tubulosa polaisiúicríd, tá comhpháirteanna neamh-sprioc ar nós líocha agus próitéiní intuaslagtha in uisce sa sliocht uisce freisin. Cuireann sé seo le scaradh agus íonú polaisiúicrídí. Tá deacrachtaí móra mar thoradh ar thaighde ar ghníomhaíocht bhitheolaíoch. Scriosfaidh an chóireáil decolorization tuaslagóir orgánach traidisiúnta struchtúr ceimiceach an chomhpháirte sprice sa sliocht amh, agus laghdóidh sé gníomhaíocht cógaseolaíochta an duine, agus tabhairt isteach comhábhair díobhálach don chorp daonna [6]. Is ábhar coitianta é roisín asaithe macraporous chun polaisiúicrídí a dhí-dhathú i sleachta leighis na Síne. Is ábhar asaithe polaiméire éifeachtach ó thaobh costais é a bhfuil airíonna fisiceacha agus ceimiceacha cobhsaí. Is féidir é a dhíriú ar a fheidhmíocht asaithe roghnach agus criathar do chomhpháirteanna lí. Chun na líocha a bhaint as sleachta leigheas traidisiúnta na Síne, ina theannta sin, is féidir é a athghiniúint trí mhiotail agus níocháin alcaile, agus mar sin úsáidtear go forleathan é [7]. Tá sé beartaithe ag an staidéar seo roisín asaithe macraporous a úsáid chun sliocht uisce polaisiúicríd Cistanche Tubula a dhídhathú, agus turgnamh orthogonal a úsáid chun na coinníollacha dídhathaithe a bharrfheabhsú; tar éis an sliocht a dhídhathú, de réir nádúr difriúil an ghrúpa a iompraíonn an polaisiúicríd, tá sé beartaithe úsáid a bhaint as an modh crómatagrafaíocht colún ian-mhalartaithe a scarann ​​​​na comhpháirteanna polaisiúicríd neodrach agus aigéadach sa pholaisiúicríd a thuilleadh.Cistanche tubulosa.

Tá sé léirithe ag staidéir go bhfuilplanda cistanchetá éifeachtaí inmunomodulatory ag polaisiúicrídí agus is inmunomodulators nádúrtha iad ar féidir leo an córas comhlántach agus cealla imdhíonachta cosúil le limficítí T/B, macrophages, cealla marfach nádúrtha (NK) a ghníomhachtú, agus is féidir leo scaoileadh éagsúla cytokines a chur chun cinn freisin, agus táirgeadh antasubstaintí a chur chun cinn. , srl. [8-11]. Is féidir le lipopolysaccharide (LPS) cosán comhartha athlastach na macrophages a ghníomhachtú, ocsaíd nítreach (NO), agus cítocíní pro-athlastacha a spreagadh mar interleukin 6 (IL-6) agus fachtóir-alfa neacróis meall (TNF-). Sintéis agus scaoileadh, rud a chuireann tús le sraith imoibrithe athlastacha sa chorp [12]. Tá sé beartaithe ag an staidéar seo múnla athlasadh macrophage luch LPS-spreagtha RAW264.7 a bhunú, ag tosú ó éifeachtaí polaisiúicríd Cistanche Tubula ar iomadú macrophage, secretion fachtóir athlastach, agus táirgeadh NÍL, agus réamh-mheastóireacht ar a éifeacht ar ghníomhaíocht imdhíonachta an chomhlachta. Tá sé mar aidhm aige bonn teoiriciúil a sholáthar le haghaidh grinnstaidéar ar bhunús na substainte gníomhaí frith-athlastachaCistanche tubulosapolaisiúicríd agus forbairt a acmhainní polaisiúicríde.

Fuair ​​​​réamhstaidéir, nuair a bhaintear na polaisiúicrídí i cistanche Cistanche le huisce, go ndéanfar níos mó substaintí intuaslagtha in uisce a thuaslagadh le chéile, rud a chuireann isteach ar íonacht ancistéir polaisiúicrídí cistanche. Dá bhrí sin, is féidir iad a scaradh agus a íonú tuilleadh an bunús le haghaidh staidéar a dhéanamh ar bhonn ábhar polaisiúicríde agus ar ghníomhaíocht bhitheolaíoch. Is modh dídhathaithe a úsáidtear go coitianta é an modh roisín asaithe macroporous [17-19]. Ós rud é nach bhfuil sé soiléir fós faoi chomhdhéanamh lí iCistanche tubulosa, mar sin d'úsáid an grúpa taighde turgnaimh asaithe statacha chun an roisín asaithe macraporous AB-8 is oiriúnaí a scagadh ó roisíní asaithe macraporous de pholarachtaí éagsúla. Tá cumas coinneála maith ag polaisiúicríd Cistanche deserticola. D'fhonn éifeacht decolorization níos fearr a bhaint amach, tá an taighde seo bunaithe ar an taighde roimhe seo agus úsáid turgnaimh orthogonal chun a chinneadh an próiseas decolorization (níocháin Tá an ráta sreafa dí-asú, am decolorization, agus tiúchan mais sampla) optamaithe. Mar thoradh air sin, ba é an modh dídhathaithe is fearr le haghaidh polaisiúicríd Cistanche tubulosa ná ráta sreafa elution de 1.2 BV/h, am dídhathaithe de 9 h, agus tiúchan mais sampla de 25 mg/mL. Léiríonn torthaí an turgnaimh fíoraithe go bhfuil an modh dídhathaithe indéanta.

Is fachtóirí tábhachtacha iad íonacht agus cineál na polaisiúicrídí nádúrtha a théann i bhfeidhm ar a ghníomhaíocht. Dá bhrí sin, tá an taighde ábhartha ar mhodhanna leithlisithe agus íonú polaisiúicrídí fós mar fhócas na hoibre taighde ar pholaisiúicrídí gníomhacha nádúrtha. I measc na modhanna a úsáidtear go coitianta chun polaisiúicrídí a scaradh tá deascadh, crómatagrafaíocht glóthach, crómatagrafaíocht malairte anion, crómatagrafaíocht colún roisín macroporous, agus ultrafiltration [20]. Mar gheall ar chomhdhéanamh éagsúla monaisiúicrídí, tá airíonna muirir éagsúla ag polaisiúicrídí. Is féidir iad a roinnt ina polaisiúicrídí neodrach agus polaisiúicrídí aigéad. Is polaiméirí iad polaisiúicrídí neodracha atá comhdhéanta de dhá mhonaiméir éagsúla bunaithe ar shiúcra nó níos mó nach bhfuil aigéid orgánacha iontu. Tá polaisiúicrídí aigéadacha níos casta ná polaisiúicrídí neodracha i dtéarmaí comhdhéanamh agus struchtúir, ach amháin go bhfuil níos mó ná dhá mhonaiméir siúcra-bhunaithe iontu. , Chomh maith leis sin tá aigéad uronic Mona Comhlacht [21]. Úsáideann crómatagrafaíocht colún malairte anion an difríocht i gceannas polaisiúicrídí chun polaisiúicrídí neodracha a scaradh ó pholaisiúicrídí aigéadacha [22]. Ar an gcúis seo, d'úsáid an staidéar seo colún crómatagrafaíochta colún malairte ian DEAE-650M chun polaisiúicrídí Cistanche Tubula a scaradh, agus scaradh 1 polaisiúicrídí neodrach agus 5 polaisiúicrídí aigéad. Is cealla imdhíonachta-inniúlachta iad macrophages ar féidir leo díolúine a rialáil trí mhiocrorgánaigh phataigineacha a shlogadh agus a mharú. Tá sé léirithe ag staidéir, nuair a bhíonn damáiste paiteolaíoch nó meicniúil á spreagadh ag an gcorp daonna, is féidir le hidirghabháil drugaí macrophages a ghníomhachtú chun cumas phagocytic macrophages a tharlódh LPS a fheabhsú, rud a chuireann bac ar tháirgeadh NO agus sraith de chealla athlastacha mar IL{{ 9}} agus TNF- secretion fachtóir, Mar sin a chosaint ar an ósta ó pataiginí [23]. Chuige sin, rinne an staidéar seo tástáil ar éifeachtaí polaisiúicrídí Cistanche tubulosa éagsúla ar ráta iomadú cealla RAW264.7, chomh maith leis na héifeachtaí ar mhacrophages spreagtha ag LPS chun NO, IL-6, agus TNF- a scaoileadh. Mar thoradh air sin, laistigh den raon mais tiúchan de 12.5, 25, agus 50 ug/mL, ní hamháin gur chuir sé iomadú cealla RAW264.7 chun cinn ach chuir sé bac suntasach freisin ar iomadú cealla RAW264.7.

Tá anpolaisiúicríd de Cistanche tubulosai gcealla RAW264.7 a tharlódh LPS chun NO, IL-6 agus TNF- is CT2 iad. Tá sé léirithe ag staidéir ábhartha go ndéanfaidh comhdhéanamh monaisiúicríde agus meáchan móilíneach polaisiúicrídí difear dáinmunomodulatoryghníomhaíocht. Déantar monashiúicrídí cosúil le galactós, arabinose, mannose, agus glúcóis a chomhghaolú go dearfach le gníomhaíocht imdhíonachta polaisiúicrídí [24]. D’fhéadfadh go mbeadh Struchtúr Iolrach-snaidhmeanna an-athchleachtach níos airde ag polaisiúicrídí le meáchain mhóilíneacha níos mó, is féidir leo gabhdóirí dromchla membrane plasma a thrasnasc go iltreoch, agus go sonrachfeabhas a chur ar an immunomodulatoryéifeacht [25]. Dá bhrí sin, d'fhéadfadh go mbeadh monaisiúicrídí speisialta nó monaisiúicrídí iolracha a bhaineann go dearfach le gníomhaíocht imdhíonachta i gcomhdhéanamh monosaccharide an polaisiúicrídí aigéadach CT2 sa staidéar seo, agus d'fhéadfadh go mbeadh an meáchan móilíneach níos mó ná polaisiúicrídí neodrach agus polaisiúicrídí aigéadacha eile, ach tá gá le tuilleadh taighde a dhearbhú. . Go hachomair, tá an próiseas dídhathaithe roisín asaithe macroporous optamaithe sa taighde seo cobhsaí agus indéanta; Is féidir 1 polaisiúicríd neodrach agus 5 polaisiúicrídí aigéad a scaradh ó sliocht uisce Cistanche cistanche cistanche, ina measc tá gníomhaíocht imdhíoneolaíoch an pholaisiúicríd aigéad CT2 Níos láidre. Is féidir leis an staidéar seo an bonn turgnamhach a leagan síos d’fhorbairt agus d’úsáid polaisiúicrídí Cistanche Tubula.