Nochtann Trascriptómaíocht Aonchealla Idirghníomhaíochtaí Cille-Cealla Scagaire Duán Curtha Isteach Tar éis Gortú Podocyte Luath agus Roghnach Ⅱ

Torthaí

Single-Cell Profiling of >29,000 Cealla Duán Saibhrithe Glomerular

Prótacail reatha aonchealla le haghaidhaithint duáin iomlán<2.5% glomerular cells,9 and although a purifiedullmhú glomerularag baint úsáide as coirníní maighnéadacha saibhrithe don daonra seo,22 theipeann air cineálacha cille eile den duán a d'fhéadfadh a bheith suimiúil a ghabháil. Baineadh úsáid as modh sieving chun glomeruli a shaibhriú agus a ghabháil ag an am céannacineálacha breise cealla duáinna torthaí seo a leathnú agus tuiscint mhionsonraithe a fhorbairt ar idirghníomhaíochtaí cille-chealla laistigh den glomerulus i gcomhthéacs thírdhreach cheallacha iomlán na duán, roimh agus tar éisdíobháil podocyte.

Chun na héifeachtaí trascríobh luath a bhaineann le ablation podocyte i gcill a aithintmodh cineál-shonrach, rinneadh scRNAseq le fíochán duáin ó WT agus iCTCFpod / lucha a bailíodh trí chriathar sraitheach tar éis 1 seachtaine de chóireáil doxycycline (Fíor 1A). Thug fíochán duáin ó cheithre ainmhí WT (ceithre mhacasamhlú bitheolaíocha) agus ceithre iCTCFpod / ainmhí iomlán de 14,783 WT agus 14,727 iCTCFpod / cealla próifílithe tar éis scagtha (Fíor Forlíontach S1, A agus B; Táblaí Forlíontacha S1 agus S2). Normalaíodh sonraí chun éifeachtaí a bhaint de bharr líon na UMIanna agus céatadán na léitear miteachondrial. Tar éis comhtháthú WT agus iCTCFpod / samplaí, baineadh úsáid as réiteach íseal cnuasaithe chun naoi mbraisle a bhrath (Fíor 1B). Dáileadh macasamhla bitheolaíocha de WT agus iCTCFpod / samplaí i measc na gcnuasach uile (Fíor Forlíontach S2, AC). Aithníodh gach cineál cille den glomerulus, chomh maith le cineálacha breise cille duáin, ag baint úsáide as marcóirí seanbhunaithe agus sonraí-díorthaithe (Fíor 1C; Tábla Forlíontach S3; Fíor Forlíontach S3A). Rinneadh cealla glomerular, arb ionann iad agus 82.1% de na cealla go léir a aisghabháil [36.9% podocytes, 42.1% cealla endothelial glomerular (GECs), 2.7% cealla mesangial, agus 0.36% PECs] a leithlisiú agus a athluthú (Fíor 1D) . Ceithre bhraisle de phodicítí, cúig bhraisle de GECanna, agus braisle amháin an ceann de chealla meangial agus PECanna, ag cur in iúl canónachamarcóirí cineál cille, a shainaithint (Fíor 1E; Fíor Forlíontach S3B). Dáileadh macasamhla bitheolaíocha de WT agus iCTCFpod / samplaí ar fud na gcnuasach go léir (Fíor Forlíontach S2, DF; Tábla Forlíontach S4). Mar a bhíothas ag súil leis, ag cur san áireamh go gcailltear podocyte inbhraite go hineolaíoch ag 2 sheachtain de bharr scriosadh CTCF podocyte-shonrach, bhí céatadán níos ísle de phodicítí i 13 iCTCFpod / samplaí ná samplaí WT (Fíor 1F; Tábla Forlíontach S5). iCTCFpod / samplaí bhí 13.1% níos lú cítea podo, 11.9% níos mó GECs, agus 1.5% níos mó cealla mesangial ná samplaí WT (Tábla Forlíontach S5). PECs rannchuidithe<1% to either of the iCTCFpod / or WT samples. This finding suggests that disruption of transcriptional programs critical for podocyte survival precedes histologically detectable podocyte injury and loss and highlights the power of scRNAseq in discerning subtle changes that can be missed by histologic analysis.

nach gcuirtear in iúl go suntasach difreálach iad. Tá Theaxis teoranta do 100. Léiríonn líne dhaite na paraiméadair réamhshocraithe: scoiteP Z 0.25. C: Amharcléiriú na hanailíse ró-léirithe ar ghéinte a chuirtear in iúl go uathúil go difreálach i podocyte 1 a chuirtear i láthair mar ghréasán nó mar léarscáil saibhrithe. Leagann géin fhorluiteacha braisle le chéile.

Luibheanna NUA DO SLÁINTE Duán

Mar thoradh ar Scriosadh CTCF Inducite Podocyte-Sainiúil Athruithe Léirithe Géine i Gach Cineál Cille Glomerular

Rinneadh anailís difreálach ar léiriú i ngach ceann de 11 braislí i gcomparáid iCTCFpod / agus cealla WT (Tábla Forlíontach S6). Measadh go raibh géinte curtha in iúl go difriúil má fuarthas iad i 10% ar a laghad de chealla i mbraisle ar leith, le híosmhéid athraithe fillte loga absalóideach de 0.1 agus P < 0 coigeartaithe .05. Léiríodh Ctcf go difreálach i ngach ceann de na ceithre bhraisle podocyte, agus ba iad 0.390, 0.189, 0.331, agus 0.303, faoi seach, meánathruithe loghfhillteacha. Rinneadh líon na gceall i ngach braisle a shampláil agus rinneadh an anailís ar an slonn difreálach arís agus arís eile chun comparáid a dhéanamh idir líon na ngéinte a léiríodh go difreálach i measc na 11 bhraisle. Bhí na géinte ba dhifreálacha léirithe ag na braislí podocyte, agus ina dhiaidh sin GEC-1 agus GEC-2 (Fíor 1G). Bhí i bhfad níos lú géinte léirithe go difreálach ag na trí bhraisle GECanna eile, mar aon leis na cealla meangial agus PECanna, (Fíor 1G), rud a thugann le tuiscint gurb iad GEC-1 agus GEC-2, i measc na mbraislí glomerular go léir, is mó a chuaigh i gcion orthu. ag sequelae de ghortú podocyte scriosta CTCF.

Cláir Ghéin a Bhaineann le Galair Aitheanta i gCnuasaigh Shonracha Podocyte agus Ceall Indeitile

Rinne an staidéar seo iarracht ar dtús scrúdú a dhéanamh ar an gcaoi a bhfreagraíonn na braislí podocyte aonair do ghortú. Léirigh léaráid Venn de na géinte a cuireadh in iúl go difreálach i ngach ceann de na ceithre bhraisle podocyte go raibh na géinte is uathúla a léiríodh go difreálach ag podocyte 1 de na ceithre bhraisle podocyte (Fíor 2A; Tábla Forlíontach S7). Tá an bhreathnóireacht go raibh tionchar níos suntasaí ar cheann de na ceithre bhraisle podocyte ag teacht le sonraí histeolaíocha roimhe seo a thugann le fios nach bhfuil tionchar ag gach podocytes ar chomh-dhéine i bhfianaise díobhála agus leagann sé béim ar chumhacht scRNAseq chun ilchineálacht na gceallstáit a thréithriú go móilíneach laistigh den. cineál cille céanna.23 Rinneadh anailís ró-léirithe chun cláir ghéinte saibhrithe mar thoradh ar chaillteanas CTCF i mbraisle podocyte 1 a shainaithint (Tábla Forlíontach S8). Rinneadh na téarmaí is fearr saibhrithe a léirshamhlú le léarscáil saibhrithe chun tacair ghéinte a bhí forluiteach go frithpháirteach a bhraisliú (Fíor 2B). Grúpa feiceálach de théarmaí saibhrithe ab ea feidhmeanna miteachondrial, lena n-áirítear sintéis ATP, eagraíocht mitochondrial, slabhra iompair leictreon, agus caidreamh fosfarach ocsaídiúcháin (Fíor 2B). Leathnaíonn na sonraí seo obair le déanaí ag díriú ar mhífheidhm mitochondrial mar chomhartha de ghortú podocyte.24 Ina theannta sin, chuir géineolaíocht dhaonna in iúl an tábhacht a bhaineann le feidhmeanna miteachondrial i podocytes, lena n-áirítear roinnt sócháin i gcosán bithshintéise CoQ (PDSS1, PDSS2, COQ2, COQ6, agus ADCK4) is cúis le siondróm nephrotic, go príomha i leanaí.25,26 Tá sé curtha in iúl mar sin go bhféadfadh mífheidhm mitochondrial podocyte léiriú ar staid feiceálach cille a bhaineann le gach galar a eascraíonn as caillteanas podocyte.24 Tugann na sonraí tacaíocht don nóisean seo ag aonarach - réiteach cille, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh mífheidhmiú mito chondrial ionadaíocht a dhéanamh ar an stát díobhála is luaithe i ndaonra sonrach podocytes, rud a fhágann caillteanas podocyte. Ar cheann de na príomhghrúpaí de théarmaí saibhrithe ón anailís ró-léirithe (Fíor 2B) bhí eagrúchán cítea-chnámharlaigh chomh maith le téarma saibhrithe aonair gaolmhar le haghaidh greamaitheacht maitrís cille. Tá ról fíor-riachtanach ag an cíteascóp actin maidir le struchtúr uathúil agus casta na podocytes a chothabháil, agus tá greamaitheacht leis an GBM riachtanach d'fheidhm podocyte.27 Tá na céadta próitéiní ag greamaitheachtaí fócasacha aibí a nascann an cíteascóp actin, ath-cheangal maitrís ceptor, aistriú comhartha intracellular. , agus polaiméiriú actin. Ba é ceann de na géinte is ísle-rialaithe i podocyte 1 ná Rhpn1 (Figiúr Forlíontach S4A), comhpháirt riachtanach chun dinimic cítea-chnámharlaigh podocyte a bhunú agus ailtireacht próisis chos podocyte a chothabháil.28 Comhpháirt casta Arp2/3 Arpc3, tiománaí polaiméirithe actin, Rinneadh uasrialáil i mbraisle podocyte 1 (Fíor 2C; Fíor Forlíontach S4B). Rinneadh géine le haghaidh comhpháirt bhreise den choimpléasc, Actr2, a uasrialáil freisin i podocyte 1 agus i podocyte 4. Ina theannta sin, gníomhaíonn Wasl, a bhfuil a tháirge próitéine, N-WASP, an coimpléasc Arp2/3 agus tá sé ag teastáil le haghaidh cothabhála. de chos pro podocyte pro cesses in vivo29, a uasghrádú freisin i podocyte 1, podocyte 3, agus podocyte 4. An rialtóir cítea-chnámharlaigh Arhgdia, a bhfuil baint ag a scriosadh le Siondróm nephrotic i lucha, 30 a íosrialáil i podocyte 1 (Figiúr 2C). Athraíodh na leibhéil slonn de dhá GTPases Rho atá ina rialtóirí seanbhunaithe ar an actin cytoskel eton agus dinimic greamaitheachta cille31 freisin: rinneadh RhoA suas-rialaithe agus bhí RhoC síos-rialaithe, mar a bhí éifeachtóir lárnach iartheachtach de Rac1, Pak1, ag teacht le réamhstaidéar.23 Ina theannta sin, rinneadh Cd2ap, comhpháirt chriticiúil podocyte actin citoskeleton,27,32 a uasrialáil i podocyte 1. Le chéile, tugann na hathruithe seo le tuiscint gurb é ceann de na freagraí podocyte is luaithe ar ghortú scriosta CTCF ná comhpháirteanna ríthábhachtacha an CTCF a athrú. creatlach actin cyto i streachailt chun ceangal a choinneáil leis an GBM agus mar sin maireachtáil ar an díobháil. Ina theannta sin, d'aithin scRNAseq idirghabhálaithe sonracha den fhreagra seo a mheaitseáil le daonra sonrach podocytes, ag tagairt do thara tuartha le haghaidh idirghabháil theiripeach luath.

Is obair mhogalra é an GBM de phróitéiní maitrís eischeallacha atá suite idir podocytes agus GECanna a sholáthraíonn tacaíocht struchtúrach do na ribeadáin glomerular, a chothaíonn ligands do ghabhdóirí ar dhromchla na GECanna, na podocytes agus na gceall mesangial in aice láimhe, agus cuireann sé le roghnaíocht scagaire glomerular. de na comhpháirteanna ríthábhachtacha den GBM is collaigine cineál IV ɑ5 (Col4a5); sócháin sa ghéin seo is cúis le siondróm Alport agus FSGS i ndaoine.33,34 Athróga in Col4a3, comhpháirt struchtúrach eile den GBM, a sainaithníodh le déanaí trí staidéar cuimsitheach ar chomhlachas géanóm-uile in DKD.35 Mar sin, rinneadh athruithe ar chomhpháirteanna GBM mar a Tá gortú podocyte den chuid is mó ábhartha do go leor galar duáin. Ceistíodh cibé acu ar cuireadh isteach sa tsamhail ar léiriú géinte a ionchódaíonn comhpháirteanna struchtúracha an GBM. Rinneadh Col4a5 a uasghrádú in iCTCFpod / podocytes (le hathrú ar fhilleadh loga de 0.130) (Fíor Forlíontach S4C; Tábla Forlíontach S6). Mhol anailís ar ghabhdóirí Ligand go n-eascraíonn idirghníomhaíochtaí méadaithe le cealla de na cúig bhraisle GEC agus cealla mesangial trí roinnt integrins (Fíor 3A). Méadaíodh go suntasach an slonn Col4a5 i Nphs{2-a léiríonn podocytes (P < 0.0001; T-tástáil dhá eireaball Welch-cheartaithe) (Fíor 3B). Dheimhnigh HCR an t-uas-rialachán breathnaithe Col4a5, le taifeach spásúil, ag HCR, modh a ghineann fluaraiseacht aon-mhóilín trí ization hibrideach in situ36 (Fíor 3C; Fíor Forlíontach S5). Dheimhnigh an toradh seo go bhféadfaí sonraí géine aonair a dhíorthaítear ón turgnamh tras-aistritheach aonchealla a bhailíochtú go neamhspleách, le taifeach spásúil, rud a chuirfeadh le bailíocht na gconclúidí a baineadh amach le hanailísí ríomhaireachtúla. Ina theannta sin, aibhsíonn na sonraí seo gurb é an príomhfhreagairt ar ghortú ó dhaonra sonrach podocytes ná táirgeadh collaigine a uasrialáil, rud a d’fhéadfadh cuntas a thabhairt ar an GBM feiceálach nó tiubh a breathnaíodh i ngalar forásacha, amhail DKD.35

GEC-1 and GEC-2 had nearly as many differentially expressed genes as podocyte clusters 2 to 4, whereas the remaining GEC clusters, mesangial cells, and PECs had fewer differentially expressed genes. Therefore, these two endothelial clusters were most affected by podocyte injury. GEC-1 expressed >600 géinte sainithe go difreálach (Fíor Forlíontach S6A; Tábla Forlíontach S9). Léirigh anailís ró-ionadaíochta gur saibhríodh na géinte uathúla a léiríodh go difriúil i GEC-1 i gcláir ghéinte le haghaidh imirce cille agus greamaitheacht (Fíor Forlíontach S6, B agus C; Tábla Forlíontach S10). Nocht na hanailísí seo na hathruithe trascríobh is luaithe a tharlaíonn i GECanna mar fhreagra ar ghortú podocyte.

Samhaltú Cumarsáid Idircheallach Nochtann

Príomh-Idirghníomhaíochtaí idir Cineálacha Cille mar Fhreagra ar Luathghortú Podocyte

Tar éis cláir ghéine suaite a aithint i roinnt cnuasach cille ar leith, d'fhéach an chéad staidéar eile le tuiscint a fháil ar an tionchar a bhí ag gortú podocyte ar chrostalk cille glomerular. Scrúdaigh an staidéar ar dtús liosta na ngéinte difriúla a léiríodh i gcnuasaigh podocyte, GEC, agus cille meangial. Cuireadh isteach ar léiriú dhá phríomh-ligands prosurvival autocrine, Vegfa agus Pdgfb, chomh maith le léiriú an receptor PDGFB, Pdgfrb (Tábla Forlíontach S6). Laghdaíodh slonn Vegfa i ngach braisle podocyte (athrú meánfhillte loga idir 0.034 agus 0.149). I gcodarsnacht leis sin, méadaíodh slonn Pdgfb i ngach braisle GEC (meánathrú ar fhilleadh loga idir 0.031 agus 0.140), agus uasrialaíodh an receptor Pdgfrb i gcealla mesangial (meánathrú fillte loga de 0. 155). Thug an anailís seo le fios go dtagann laghdú ar léiriú an ligand prosurvival Vegfa mar thoradh ar ghortú podocyte, rud a chuireann isteach go diúltach ar GECanna. Mar chúiteamh, féadfaidh GECanna an ligand prosurvival Pdgfb a uas-rialáil, rud a spreagann cealla mesangial chun an receptor Pdgfrb a rialáil.

Baineadh úsáid as NicheNet, algartam nua a thugann le tuiscint conas a d'fhéadfadh idirghníomhaíochtaí gabhdóirí ligand a dhíorthaítear ó shonraí slonn dul i bhfeidhm ar spriocanna sonracha trí eolas a bhí ann cheana ar líonraí comharthaíochta agus rialála a chomhtháthú, chun imscrúdú níos doimhne a dhéanamh ar idirghníomhaíochtaí ligand-receptor agus a spriocghéinte toimhdeacha.20 Cuireadh NicheNet i bhfeidhm ar samhail i dteagmhálacha idir podocytes agus GECanna chomh maith le cealla mesan gial agus GECanna a d'fhéadfadh géinte sainráite difreálach (spriocghéinte) a aslú i GECanna agus díobháil podocyte á shocrú (Fíor 4A). Don anailís seo, cuireadh gach braisle de gach cineál cille le chéile in aon bhraisle amháin. Ba iad na ligands tuartha barr a léirigh cealla mesangial agus / nó podocytes ná pleiotrophin (Ptn), angiopoietin 2 (Angpt2), Col4a1, móilín greamaitheachta cille soithíoch 1, próitéin morphogenetic cnámh 4 (Bmp4), Ephrin B1, fachtóir fáis fíocháin nascach, agus semaphoring. 3e (Sema3e) (Fíor 4B). Rinneadh patrún slonn na ngabhdóirí GEC trína n-aithnítear go ngníomhaíonn na ligands seo a mhapáil in aice leis an anailís ar ghníomhaíocht ligand. Ina theannta sin, mapáladh na sprice géinte tuartha a cuireadh in iúl go difreálach in iCTCFpod / GECs i gcomparáid le rialuithe WT freisin. Déantar achoimre ar na torthaí i bhFíor 4B mar cheapacha ciorclach i bhFíor 4, C agus D.

Bhí roinnt ligands, gabhdóirí, agus géinte sprice suntasach ón anailís seo. Is fachtóir fáis rúnda é pleiotrophin, ligand atá léirithe go mór i gcealla mesangial (Fíor 4B), a fhéadfaidh ceangal agus bac a chur ar receptor tyrosine fosfatase cineál B, a spreagann imirce cille endothelial trí Tek méadaithe (Tie2) / Angpt137 agus Kdr (Vegfr2) / Vegfa38 comharthaíochta. Dá réir sin, rinneadh uasghrádú suntasach ar Tek sna GECanna (Fíor 4B). Is ligand antagonistic de Tek é Angpt2, a chuirtear in iúl go mór i gcealla mesangial, a chuireann cosc ​​ar cheangal Angpt1.39 Toisc go bhfuil sé ar eolas go gcuireann comharthaíocht Angpt1 maireachtáil podocyte chun cinn agus cuireann cur isteach ar an gcóimheas Angpt1/Angpt2 le forbairt DKD,40 an ligand seo. ba chosúil gur léirigh anailís gabhdóirí comharthaíocht maladaptive Tek i GECanna mar cheann de na hiarmhairtí is luaithe a bhaineann le gortú podocyte.

Fuarthas amach sa staidéar seo freisin go raibh athruithe suntasacha ar shloinneadh collaigine cineál IV i gcealla glomerular éagsúla (Fíor 4B). De ghnáth tháirgtear trí podocytes sláintiúla, aistríonn collagen IV het erotrimers ó ɑ1ɑ1ɑ2 go ɑ3ɑ4ɑ5 le linn forbairt glomerular, atá riachtanach le haghaidh foirmiú agus feidhm cheart GBM.33 ,34 Is minic a breathnaítear uas-rialáil Col4a1, mar aon le leathnú na maitrís mesangial, i DKD.41,42 San anailís reatha, léirigh cealla mesangial agus GECanna Col4a1 (meánléiriú léarscáil teasa ligand) (Fíor 4B) agus rinneadh é a uasghrádú go sonrach in iCTCFpod / GECs i gcomparáid le rialuithe WT. Tugann na sonraí seo le tuiscint go rialaíonn GECanna Col4a1 maidir le gortú podocyte a shocrú, rud a d’fhéadfadh GBM snáithíneach níos déine a bheith mar thoradh air a chuidíonn le forbairt scléaróis dheighilteach.33

Ba ligand mesangial ard-léirithe é Bmp4 a aithníodh trí anailís NicheNet (Fíor 4, BD). Imríonn BMPanna príomhróil i bhforbairt agus i ngalar na nduán.43 Déantar Bmp4 a uasrialú maidir le neifropathy diaibéitis a shocrú i bhfrancaigh,42 aguscóireáil lucha le diaibéiteasle antashubstaint frith-BMP4 cosc ​​ar uasghrádú Col4a1 agus leathnú maitrís mesangial.44 Ábhar spéise ar leith, fuarthas amach go spreag mesangial Bmp4 léiriú GEC Smad6 (Fíor 4B). Tá léiriú Smad6 spreagtha ag BMPanna agus i lúb aiseolais diúltach, cuireann Smad6 cosc ​​​​ar BMPanna go sonrach, lena n-áirítear BMP4.45 Rinneadh Smad6 a íosrialáil in iCTCFpod / GECs i gcomparáid le rialuithe WT, ag moladh comharthaíocht BMP méadaithe i gcealla endothelial maidir le díobháil podocyte a shocrú. .

Ar cheann de na ligands tosaíochta a aithníodh i podocytes bhí Sema3e (Fíor 4, BD). Is próitéiní secreted iad semaphorins Aicme 3 a fheidhmíonn i bpróisis bhitheolaíocha éagsúla, lena n-áirítear angiogenesis, lymphangiogenesis, agus galair.46 Tá Sema3a uasrialaithe i DKD daonna,47 agus aithníodh le déanaí Sema3g mar ghéin podocyte-shonrach a chosnaíonn podocytes ó athlasadh. in vivo. 48 Tá ról Sema3e sa podocyte fós doiléir. Nocht an anailís reatha péire gabhdóirí-ligand nár aithníodh roimhe seo trína n-idirghníomhaíonn podocyte Sema3e le plexinD1 ar GECanna chun roinnt spriocanna géine iartheachtacha a spreagadh sadíobháil podocyte a shocrú(Fíor 4, C agus D).

I measc roinnt spriocghéinte GEC nua-aitheanta, fuarthas Hes1 agus Cx3cl1 freisin sna cláir ghéinte greamaitheachta saibhrithe i GEC-1 (Fíor 4, BD; Fíor Forlíontach S6). Is sprioc é Hes1 de chomharthaíocht Notch, a bhfuil ról tábhachtach aige sa duáin atá ag forbairt, ach is féidir fiobróis a bheith mar thoradh ar athghníomhú.49 Is chemokine é Cx3cl1 a tháirgtear go príomha ag endothelium glomerular a fheidhmíonn mar chemoattractant agus móilín greamaitheachta dá receptor, Cx3cr1, a curtha in iúl go uileláithreach ar leukocytes limfeacha mononuclear agus imshruthaithe.50 Tá Cx3cl1 gafa le galair éagsúla duáin, lena n-áirítear DKD, nephropathy IgA, agus glomerulonephritis.50 Rinneadh Hes1 agus Cx3cl1 araon a uasghrádú in iCTCFpod / GECs i gcomparáid le rialuithe WT, go bhfreagraíonn GECanna do ghortú podocyte trí chláir pro-athlastacha agus próibróis a uas-rialáil.

Ar deireadh, toisc go bhfuil go leor de na ligands agus de na spriocanna a aithníodh san anailís NicheNet bainteach le DKD, sa dá mhúnla creimirí agus i ndaoine, rinneadh comparáid idir an tacar sonraí agus tacar sonraí tras-traipeolaíoch núicléas amháin de DKD daonna luath.10 Sainiúil rinneadh comparáid idir ghéinte a cuireadh in iúl go difreálach idir braislí cille daonna agus luchóg. As na 138 géinte a cuireadh in iúl go difreálach i GECanna DKD daonna, aithníodh 25 ghéinte freisin i gcealla iCTCFpod / endothelial luch, lena n-áirítear Col4a1 (Fíor Forlíontach S7; Tábla Forlíontach S11). I dteannta a chéile, tugann na torthaí seo le tuiscint gur féidir cláir chealla endothelial a gcuirtear isteach orthu go minic i DKD daonna a athchaipitliú go páirteach i múnla luiche de ghortú glomerular luath trí eisláithriú podocyte roghnach. Ina theannta sin, tugann na torthaí seo le tuiscint, chomh maith le podocytes, go bhféadfadh spriocanna sonracha inotelial agus straitéisí teiripeacha a bheith ann chun stop a chur le dul chun cinn galair duáin chasta agus an-leithleacha, mar DKD, nó chun iad a mhoilliú.