Ról an Ghlacadóra Androgen Duánach i Difríochtaí Gnéis i Meitibileacht Amóinia

Teagmháil: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Ríomhphost:audrey.hu@wecistanche.com

Fómhar N. Harris et al

Teibí

Tá difríochtaí gnéis i meitibileacht agus struchtúr amóinia duánach, agus déantar idirghabháil ar go leor acutestosterone. Ba é sprioc an staidéir seo ná ról léiriú duánach a chinneadhtástosteróinreceptor canonical, receptor androgen (AR), sna dimorphisms gnéis seo. Rinneamar staidéar ar lucha leduán-scriosadh sonrach AR [KS-AR-knockout (KO)] a ghintear trí úsáid a bhaint as teicnící Cre/loxP; ba lucht bruscair Cre-diúltach iad lucha rialaithe (cineál fiáin). I lucha fireann ach ní baineann, mhéadaigh KS-AR-KO eisfhearadh amóinia, rud a chuir deireadh le difríochtaí gnéis. Cé go bhfuil méid struchtúrach duánach comhthreomhar le heisfhearadh amóinia de ghnáth, tháinig laghdú ar KS-AR-KOduánméid, dlús toirte tubule cortical cóngarach, agus airde cille tubule cortical cóngarach i bhfireannaigh - níor athraíodh ceachtar acu i mná agus níor athraíodh bailiú dlús toirte duchta sa dá inscne. Léirigh anailís ar phríomhphróitéin a bhaineann le láimhseáil amóinia i lucha fireanna gur mhéadaigh KS-AR-KO idir phosphoenolpyruvate carboxykinase (PEPCK) agus Na þ -K þ -2Cl cotransporter (NKCC2) slonn agus laghdaigh sé Na þ/H þ malartóir isoform 3 (NHE3) agus comh-transporter leictreoineach Na þ -bicarbonate 1 (NBCe1)-A. I lucha baineanna, níor athraigh KS-AR-KO na paraiméadair seo. Tharla na héifeachtaí seo cé nár athraigh KS-AR-KO an plasmatestosterone, iontógáil bia, nó serum Na þ, K þ, nó HCO3 go suntasach i gceachtar den dá ghnéas. Mar fhocal scoir, conairí comharthaíochta AR-spleách i bhfireannaigh, ach ní baineannaigh,duáinrialú a dhéanamh ar léiriú PEPCK agus NKCC2 agus mar thoradh ar na difríochtaí gnéis in eisfhearadh amóinia. Éifeachtaí codarsnacha ar NHE3 agus NBCe1-Is dócha go gcuirfidh slonn teorainn le méid na n-athruithe eisfheartha amóinia. Toisc nach bhfuil AR i láthair sa ghéag ardaitheach tiubh, tá éifeacht KS-AR-KO ar abairt NKCC2 indíreach. Ar deireadh, is mó a dhéanann AR idirghabháilduánméid agus dlús toirte tubule cóngarach i bhfir i gcomparáid le lucha baineanna.

NUA & NÓTABaineann démorphisms gnéis i meitibileacht amóinia le cosáin chomharthaíochta atá ag brath ar receptor androgen (AR) i bhfear, ach ní baineann siad,duáinas a dtagann athrú tubule proximal (PT), carboxykinase fosphoenolpyruvate, agus géag tiubh ardaithe Na þ -K þ -2Cl slonn cotransporter. Freagraí oiriúnaitheacha i malartóir Na þ/H þ 3 agus comh-iompróir leictreoineach Na þ -bi- carbónáit 1-Cuireann slonn teorainn le méid na héifeachta ar eisfhearadh amóinia. Ar deireadh, tá an méid duáin níos mó agus dlús toirte PT i lucha fireann mar thoradh ar PT androgen comharthaíochta trí AR.

eochairfhocail: aigéad-bun; amóinia ; receptor androgen; difríochtaí gnéis;testosterone

boosts cistanche testosterone

RÉAMHRÁ

The presence of sex differences in many aspects of mammalian biology has been well established with sexual dimorphisms in structure and/or function have been identified in nearly every organ, including the kidney (1–3). Sex affects many aspects of kidney function and disease. Sex differences in blood pressure are widely recognized and thought to be related to sex-specific variations in nitric oxide, the renin-angiotensin-aldosterone system, and inflammation (4, 5). There are also differences in the expression of many renal epithelial cells Naþ transporters (6, 7). Understanding these differences can identify new disease mechanisms and/or new and improved therapeutic opportunities. The kidney regulates acid-base homeostasis, which is critical for normal health (8, 9). Renal ammonia Fn1 1 metabolism has a major role in acid-base homeostasis; ammonia excretion is the predominant component of basal net acid excretion, and changes in ammonia metabolism account for >80 faoin gcéad den fhreagra ar spreagthaigh exogenous (10-16). Bíonn tionchar díreach ag dírialáil hoiméastáis aigéad-bun go bunúsach ar gach mórchóras orgán, luathaíonn sé dul chun cinn galar duáin ainsealach, agus comhghaolann sé le mortlaíocht mhéadaithe (17-19).

Tá sé léirithe ag ár gcuid staidéir go bhfuil éifeachtaí gnéis tábhachtacha ar mheitibileacht amóinia agus ar struchtúr duánach araon. Eisfhearann ​​an duán fireann níos lú amóinia ná an duán baineann agus déanann sé amhlaidh in ainneoin go bhfuil an duán fireann níos mó agus go bhfuil toirt cortical níos mó aige ná an duán baineann (20). Tá an difríocht seo in eisfhearadh amóinia comhghaolmhar le héagsúlachtaí i ngnéithe duánacha iolracha, lena n-áirítear roinnt einsímí a bhaineann le giniúint agus athchúrsáil amóinia, i méid feadáin cóngarach, i ngéag tiubh ardaitheach lúb Henle (TAL) Naþ -Kþ ​​- 2Cl - cotransporter (NKCC2) abairt, agus a bhailiú méid cille duct intercalated agus Rhesus (Rh) glycoprotein abairt (20). Ar deireadh, tá difríochtaí gnéis sa fhreagra ar luchtú aigéad (21). Déantar go leor de na difríochtaí gnéis seo a aisiompú trí orchiectomy trí mheicníocht a aisghairtear le fiseolaíochtestosteroneathsholáthair, rud a thugann le tuiscint go bhfuil baint acu leistestosterone- cosáin spleácha comharthaíochta (22).

An cosán canónach trínatestosteronemediates éifeachtaí bitheolaíocha i gceist ceangailteach leis an receptor androgen (AR) (23, 24). Tá próitéin AR agus abairt mRNA tugtha faoi deara sna duáin fireann agus baineann le blianta fada (25-28). Léirigh muid le déanaí go gcuirtear próitéin AR in iúl go sonrach sa tubule proximal agus nach raibh an abairt sin inbhraite sa TAL nó sa duct bailithe (22), áit a bhfuil difríochtaí gnéis ar eolas i bpróitéiní a bhaineann le láimhseáil amóinia. Léirigh ár gcuid staidéir freisin go raibh léiriú proximal tubule AR i láthair sna duáin fireann agus baineann, le léiriú thart ar dhá oiread níos mó sa duán fireann ná sa duán baineann (22). Tugann na barúlacha seo le tuiscint go bhféadfadh AR idirghabháil a dhéanamh ar chuid d’iarmhairtí gnéis ar struchtúr duánach agus ar ghiniúint agus iompar amóinia, ach ní go léir. Ardaíonn siad freisin an cheist maidir le ról AR sa duán baineann.

Mar sin, ba é cuspóir an staidéir seo ná ról an AR duánach a chinneadh maidir le hidirghabháil a dhéanamh ar na dimorphisms gnéasacha sainaitheanta seo i meitibileacht amóinia duánach agus struchtúr duánach. Toisc go bhfuil go leor éifeachtaí bitheolaíocha ag gníomhachtú AR, a d’fhéadfadh homeostasis bun-aigéad a athrú go hindíreach agus láimhseáil amóinia dá réir, tá sé casta staidéir a léirmhíniú a úsáideann cosc ​​AR cógaseolaíochta agus/nó scriosadh AR domhanda. Mar sin, bhain an staidéar reatha úsáid as lucha le scriosadh AR a bhaineann go sonrach le duáin [KS-AR-knockout (KO)] a ghintear ag baint úsáide as teicnící Cre-loxP. Rinneamar comparáid idir lucha Cre-dearfach agus a gcuid bruscair Cre-diúltach chun éifeacht KS-AR-KO a chinneadh. Rinneadh meastóireacht ar lucha fireann agus baineann araon chun tuiscint a fháil ar ról AR sa dá ghnéas.

fréamhacha cistanche tubulosa

MODHANNA

Ainmhithe

Úsáideamar lucha le suíomhanna loxP taobh le exon 2 den ghéine AR (ARflfl / flfl ), a bhfuil cur síos orthu roimhe seo (29-31). Spreagamar scriosadh AR duáin iomlán trí lucha pórúcháin a léirigh Cre-recombinase faoi smacht an tionscnóra Pax-8 (Pax8Cre; 32). Bhí ARflfl/flfl, Pax8-Cre þ i lucha KS-AR-KO; bhí ARflfl/flfl, Pax8-Cre. Bhí na lucha ar fad ar an mbrú cúlra C57/Bl6. Rinneamar géinitíopáil ar lucha go léir ag baint úsáide as DNA a bhaintear as samplaí gearrthóg eireaball. Ba lucha fireanna agus baineanna fásta -4 mo aois a bhí i lucha a úsáideadh sna turgnaimh seo. Coinníodh lucha ar aiste bia caighdeánach creimire (próitéin 18 faoin gcéad, Harlan Teklad, Madison, WI) le rochtain saor in aisce ar uisce. D'fhormheas Ollscoil Florida agus Coistí um Chúram agus Úsáid Ainmhithe Ainmhithe na hInstitiúide i dTuaisceart Florida/Seoirsia Theas gach prótacal ainmhithe. Rinne pearsanra oilte pórú ainmhithe in Áis Chroílár Ainmhithe Thrasghineach Ailse agus Géineolaíocht Choláiste an Leighis Ollscoil Florida.

Turgnaimh Cage Meitibileach

Cuireadh lucha i cages meitibileach ar feadh 3 lá agus chothaigh siad gnáth-aiste bia púdraithe (próitéin 18 faoin gcéad, Harlan Teklad) measctha 1:1 le huisce. Tomhaiseadh tomhaltas laethúil bia, agus bailíodh samplaí fuail 24-h laethúil. Bailíodh samplaí fuail i bhfeadáin ina raibh ola mhianra cothromaithe uisce chun galú agus caillteanas móilíní gáis a chosc. Taifeadadh toirt laethúil fual agus pH. Stóráladh samplaí fuail ag - 20 céim go dtí go ndéanfaí anailís bhreise orthu.

Anailís Fola

Fuarthas fuil trí an aorta bhoilg a channú i lucha a ainéistíodh le isoflurane, tarraingthe isteach i steallaire heparinized, agus anailís láithreach le haghaidh Naþ, K þ, agus tiúchan décharbónáit ag baint úsáide as Anailíseoir Gáis Fola Micrea-anailíseach Siemens (RAPIDLab 348 Anailíseoir, Siemens, München, an Ghearmáin, München, an Ghearmáin). ). Tomhaiseadh serum testosterone in Ionad Taighde Scoil an Leighis Ollscoil Achadh an Iúir ar Atáirgeadh Ligand Assay and Analysis Core (IBL America luch testosterone ELISA, Minneapolis, MN)

Anailís Urinary

Tomhaiseadh amóinia fuail ag baint úsáide as modhnú ar threalamh atá ar fáil ar bhonn tráchtála (A7553, Pointe Scientific, Canton, MI), mar a thuairiscítear roimhe seo (20, 33). Rinneadh pH fual a thomhas ag baint úsáide as leictreoid micrea-pH (pH leath-mhicreafón ROS, Orion 8103BN, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA). Socraíodh eisfhearadh aigéad titratable ag baint úsáide as teicnící caighdeánacha a thuairiscítear roimhe seo (20, 33).

Antasubstaintí

Léiríonn Tábla 1 na hantasubstaintí a úsáideadh sa staidéar seo, a soláthróirí, agus a n-uimhreacha catalóige/shainaitheantais.

Treisíonn sliocht cistanche tubulosa testosterone agus méadaíonn sé cumas gnéasach

Ullmhú Próitéin

Rinneadh ainmhithe a ainéistéisiú le isaflurane ionanálaithe, agus rinsíodh na duáin le perfusion cairdiach in vivo le PBS (pH 7.4) ina raibh 6,000 U/L de Na-heparin agus 120 mg/L de lidocaine. Baineadh an duán ceart go tapa, agus leithlisíodh an cortex, an medulla seachtrach, agus an medulla istigh ar chéim fuar faoi mhicreascóp díscartha. Rinneadh snap-reoite samplaí i nítrigin leachtach agus stóráiltear iad reoite ag - 80 céim go dtí go n-úsáidfí iad. Rinneadh fíocháin a homogenized san imoibrí eastóscadh próitéin fíocháin T-PER (Pierce Biotechnology, Rockford, IL) ag baint úsáide as pestles microtube (USA Scientific, Ocala, FL), agus baineadh próitéin de réir mholtaí an mhonaróra. Baineadh úsáid as slánchuid le haghaidh cainníochtú iomlán próitéine trí úsáid a bhaint as measúnacht d'aigéad bicinchoninic (BCA), agus rinneadh an chuid eile a stóráil reoite ag 80 céim go dtí go n-úsáidfí é.

Nósanna Imeachta Immunoblot Rinneadh leictreafóiréis ar dheich micrigram de phróitéin duánach ar LEATHANACH ReadyGel 10 faoin gcéad (Bio-Rad, Hercules, CA). Aistríodh glóthacha go electrophoretically chuig seicní nítreacheallalóis, bacáilte le bainne tirim neamhshaille 5 g/dl caolaithe i maolán Blotto (50 mM Tris, 150 mM NaCl, 5 mM Na2EDTA, agus 0.05 faoin gcéad Tween 20, pH 7.6), agus gor ag 4 C thar oíche. leis an antashubstaint bunscoile i bainne tirim nonfat. Rinneadh coibhéis lódála agus aistrithe a mheas le staining Ponceau S agus trí léiriú an b-actin próitéine coimeádta a mheas. Tar éis a bheith nite, nochtaíodh na seicní d’antasubstaint thánaisteach (IgG frith-choine gabhair, Teicneolaíocht Chomharthaíochta Cille, Beverly, MA) comhchuingeach go sárocsaídeas raidis capaill ag caolú 1:5,000. Rinneadh láithreáin d’imoibriú antashubstainte-antaigin a léirshamhlú ag baint úsáide as cemiluminescence feabhsaithe (SuperSignal West Pico Substrate, Pierce) agus córas íomháithe digiteacha Kodak Image Station 440CF. I dturgnaimh roghnaithe, baineadh blotaí. normalaíodh dlús banna den sórt sin go raibh an meándlús i réigiún (cortex nó medulla seachtrach) i bhfíochán cineál fiáin fireann (WT) 100. Bhí an dá inscne (fireann agus baineann) agus an dá ghéinitíopa (WT agus KO) luchtaithe ar an gcéanna. glóthach do na turgnaimh seo. Deimhníodh easpa sáithiúcháin trí scrúdú a dhéanamh ar dháileadh déine picteilín i ngach imdhíonadh.

Nósanna Imeachta Immunoblot

Leictreafraíodh deich micreagram de phróitéin duánach ar LEATHANACH ReadyGel 10 faoin gcéad (BioRad, Hercules, CA). Aistríodh glóthacha go leictreafóiréis go seicní nitrocellulose, blocáilte le bainne tirim neamhshaille 5 g/dl caolaithe i maolán Blotto (50 mM Tris, 150 mM NaCl, 5 mM Na2EDTA, agus 0.05 faoin gcéad Tween 20, pH 7.6), agus gor ag 4C thar oíche leis an antashubstaint príomhúil i bainne tirim nonfat. Rinneadh coibhéis lódála agus aistrithe a mheas le staining Ponceau S agus trí léiriú an b-actin próitéine coimeádta a mheas. Tar éis a bheith nite, nochtaíodh na seicní d’antasubstaint thánaisteach (IgG frith-choine gabhair, Teicneolaíocht Comharthaíochta Cille, Beverly, MA) comhchuingeach le sárocsaídeas horseradish ag caolú 1:5,000. Rinneadh láithreáin d’imoibriú antashubstainte-antaigin a léirshamhlú ag baint úsáide as cemiluminescence feabhsaithe (SuperSignal West Pico Substrate, Pierce) agus córas íomháithe digiteacha Kodak Image Station 440CF. I dturgnaimh roghnaithe, baineadh blotaí. normalaíodh dlús banna den sórt sin go raibh an meándlús i réigiún (cortex nó medulla seachtrach) i bhfíochán cineál fiáin fireann (WT) 100. Bhí an dá inscne (fireann agus baineann) agus an dá ghéinitíopa (WT agus KO) luchtaithe ar an gcéanna. glóthach do na turgnaimh seo. Deimhníodh easpa sáithiúcháin trí scrúdú a dhéanamh ar dháileadh déine picteilín i ngach imdhíonadh.

Ullmhúchán Fíocháin don Imdhíonohistochemistry

Rinneadh ainéistéisiú ar lucha le isaflurane ionanálaithe. Caomhnaíodh na duáin le perfusion cairdiach in vivo le PBS (pH 7.4) ina raibh 6,000 U/L de Na-heparin agus 120 mg/L de lidocaine agus lísín peiriadach-2 faoin gcéad paraformaildéad ina dhiaidh sin, gearrtha trasna go trasna i roinnt slisní 2- go 3-mm-tiubh, agus ansin tumtha ar feadh 24-30 h ag 4 céim sa fostóir céanna. Rinneadh samplaí duán ó gach ainmhí a neadú i gcéir poileistear a rinneadh le distearate poileitiléin glycol 400 (Polysciences, Warrington, PA) le 10 faoin gcéad de 1-heicseádanól agus 2- codanna mm-tiubh a ghearradh agus a fheistiú ar gheilitín-brataithe sleamhnáin.

sochar cistanche tubulosa: cumas gnéasach a mhéadú

Imdhíon-cheimic

Baineadh imdhíonadh le haghaidh glycoprotein B teaghlach B (Rhbg), glycoprotein teaghlaigh Rh (Rhcg), malartóir isoform 3 Naþ / Hþ (NHE3), synthetase glutamine (GS), NKCC2, agus AR ag baint úsáide as nósanna imeachta inmunoperoxidase a thuairiscítear roimhe seo (20, 22, 34–37). Go hachomair, díothaíodh na hailt in eatánól, rinneadh iad a athhiodráitiú, a théamh i Triológ (Cell Marque, Rocklin, CA) go 88 C ar feadh 30 nóiméad agus ansin go 96 céim ar feadh 30 nóiméad, fuaraithe ar feadh 30 nóiméad, agus rinsed i PBS. Cuireadh bac ar ghníomhaíocht peroxidase ingenous trí chodanna a chothú i 3 faoin gcéad H2O2 in uisce driogtha ar feadh 45 nóiméad. Cuireadh bac ar chodanna ar feadh 15 nóiméad le bloc próitéin gan serum (Dako Cytomation) agus ansin goraíodh iad thar oíche ag 4 C leis an bpríomh-antasubstaint. Niteadh na codanna i PBS, goraíodh iad ar feadh 30 nóiméad le IgG frith-choine capall peroxidase-nasctha le polaiméir-nasctha (ImmPRESS, Vector Laboratories, Burlingame, CA), nite arís le PBS, agus ansin nochtadh do diaminobenzidine ar feadh 5 nóiméad. Nitear na codanna le huisce driogtha, díhiodráitíodh iad le xiléin, gléasadh iad, agus breathnaíodh le micreascópacht éadrom. Rinneadh comparáid idir an lipéadú idir rannóga ón turgnamh imdhíonhistochemistry céanna. Scrúdaíodh míreanna ar mhicreascóp Zeiss Axio Imager A2 a bhí feistithe le optaic DIC agus grianghrafadh iad ag baint úsáide as ceamara digiteach daite Axiocam 305 agus bogearraí Zen 2.3 (Zeiss).

Baineadh imdhíonadh le haghaidh carboxykinase fosphoenolpyruvate (PEPCK) trí úsáid a bhaint as nósanna imeachta modhnaithe inmunoperoxidase mar a thuairiscítear roimhe seo (20, 22, 38-40). Go hachomair, díchéiríodh na hailt in eatánól, rinneadh iad a athhiodráitiú, a théamh i dTríológ (Cell Marque, Rocklin, CA) go 96 C ar feadh 60 nóim, fuaraithe ar feadh 30 nóim, agus rinsed i PBS. Cuireadh bac ar ghníomhaíocht peroxidase endogenous trí gor na hailt i 3 faoin gcéad H2O2 i meatánól ar feadh 45 nóiméad. Cóireáladh ranna le 0.5 faoin gcéad Triton X-100 i PBS ar feadh 15 nóiméad. Ansin rinneadh roinnt niteálacha i PBS ina raibh 1 faoin gcéad BSA, 0.05 faoin gcéad saponin, agus 0.2 faoin gcéad geilitín, agus ina dhiaidh sin blocáil ar feadh 15 nóiméad le bloc próitéin gan serum (DAKO Cytomation) agus ansin gor thar oíche ag 4 C. le hantashubstaint phríomhúil. Nitear codanna i PBS ina raibh 0.1 faoin gcéad BSA, 0.05 faoin gcéad saponin, agus 0.2 faoin gcéad geilitín agus PBS ina dhiaidh sin agus goraíodh iad ar feadh 60 nóiméad le IgG frith-choinín gabhar comhchuingeach polaiméir-nasctha (MACH2, Biocare Medical, Concord, CA), nite arís i PBS, agus ansin faoi lé diamino-beinsidín ar feadh 5 nóiméad.

Rialú Diúltach

Áiríodh le gach turgnamh imdhíon-histochemistry alt a nochtaíodh do na nósanna imeachta imdhíon-lipéadaithe gan antasubstaintí príomhúla lena chinntiú go raibh an lipéad mar gheall ar cheangal antashubstainte príomhúil amháin.

Anailís mhoirfiméadrach

Cinneadh dlús toirte an fheadáin chóngaraigh sa choirtéis agus stríoc sheachtrach an mhedulla sheachtraigh chomh maith leis an ducht bailithe sa choirtéis agus i stríoc istigh an mheidula sheachtraigh trí úsáid a bhaint as teicnící caighdeánacha comhairimh pointe mar a thuairiscítear roimhe seo (20–22, 41). ).

Imdhíon-aisticeimic chainníochtúil

Rinneadh imdhíon-histochemistry cainníochtúil mar a rinneamar cur síos agus bailíochtú roimhe seo (20, 22, 33, 37, 42). Rinneadh staidéar ar dheighleoga feadáin chóngaracha i gcodanna a bhí lipéadaithe faoi choinníollacha comhionanna sa turgnamh imdhíon-lipéadaithe céanna ag breathnóir a dalladh ar an ngrúpa cóireála. Ba iad na codanna feadánacha cóngaracha sonracha a tomhaiseadh ná an fheadán convolute proximal tosaigh (PCT), a shainmhínítear mar mhíreanna PCT leanúnach le capsúl Bowman, an feadán díreach cóngarach (PST) sa gha medullary, agus an PST sa stríoc seachtrach den medulla seachtrach. D’úsáideamar micreagraif dhigiteacha ardtaifigh a tógadh as réimsí roghnaithe go randamach den choirtéis duánach agus stríoc seachtrach an mheithealla sheachtraigh ag baint úsáide as micreascóp Zeiss Axio Imager A2 atá feistithe le ceamara digiteach dath Axiocam 305 agus bogearraí Zen 2.3 (Zeiss) ag baint úsáide as aon teicnící feabhsaithe íomháithe. . Ag baint úsáide as bogearraí ImageJ (v, 1.34j, Institiúidí Náisiúnta Sláinte, Bethesda, MD), thomhaiseamar déine picteilín thar líne dhíreach a tarraingíodh ón lumen tubule trí chill aonair. Rinneadh anailís ar na sonraí seo ansin ag baint úsáide as bogearraí saincheaptha-scríofa a forghníomhaíodh i Microsoft Excel 2016. Cinneadh ansin déine glan ag gach picteilín ar an líne mar an difríocht idir déine iomlán agus meándéine picteilín cúlra tomhaiste lasmuigh den chill. Socraíodh léiriú iomlán ceallacha trí ghlandéine picteilín a chomhtháthú ar fud na cille ar fad. Socraíodh airde cille mar an fad i bpicteilíní idir imill apical agus basolateral na gcealla agus aistríodh go fad iomlán é ag baint úsáide as cinneadh calabraithe ar mhéid picteilín aonair. Rinneadh anailís ar íosmhéid de 15 chill aonair ó cheithre fhótamicrograph ar a laghad ó gach duán. Meánaíodh sonraí ó na cealla go léir a scrúdaíodh de chineál teascán tubule cóngarach ar leith chun aon phointe sonraí amháin a sholáthar in aghaidh an ainmhí le haghaidh anailís staitistiúil.

Chinneamar cineál A intercalated méid cille agus cille-sain abairt próitéine mar a thuairiscítear roimhe seo (20, 22). Go hachomair, fuaireamar micreagraif dhigiteacha ardchumhachta de stríoc inmheánach an mheidealla sheachtraigh de chodanna fíocháin a ndearnadh imdhíon-histochemistry don mharcóir idirghaolaithe cille-shonrach Rhbg nó Rhcg. Cuireadh timpeall ar chealla aonair idirghaolaithe ag baint úsáide as bogearraí ImageJ (v. 1.34j, Institiúidí Náisiúnta Sláinte). Socraíodh méid na gceall mar líon na bpicteilín laistigh de na réigiúin a imlínítear agus aistríodh go dtí an limistéar é trí úsáid a bhaint as tomhas calabraithe picteilín in aghaidh an mhicriméadar. Cinneadh déine imdhíonlipéid ag gach picteilín mar an difríocht idir déine picteilín absalóideach agus meán-déine cúlra, agus socraíodh déine imdhíonlipéid aonchealla trí ghlandéine picteilín a chomhtháthú laistigh den chill ag baint úsáide as bogearraí saincheaptha-scríofa a fhorghníomhaíodh i Microsoft Excel 2016.

cistanche chóireáil galar duáin sin a mhéadú cumas gnéasach

TORTHAÍ

Fíorú ar Scriosadh AR a bhaineann go Sonrach le Duán

Spreagann bac cógaseolaíochta AR nó scriosadh domhanda raon leathan athruithe feinitíopacha (43), a d'fhéadfadh freagairtí struchtúracha agus amóinia duánacha a athrú go hindíreach. Chun na saincheisteanna seo a sheachaint, ghineamar lucha KS-AR-KO ag baint úsáide as teicnící Cre loxP. Dhearbhaigh muid éifeachtacht scriosadh AR duánach ag baint úsáide as immunohistochemistry (Fig. 1). I lucha WT, léirigh imdhíonhistochemistry imdhíonlipéad núicléach AR teoranta don tubule cóngarach; bhí sé seo cosúil lenár dtorthaí sa ghnáth-duán luiche (22). Sa duán KO, ní raibh aon imdhíonlipéad AR inbhraite i láthair i gceachtar den dá ghnéas (Fíor 1). Léiríonn na torthaí seo giniúint lucha le scriosadh AR duánach.

anailís staitistiúil ag baint úsáide as bogearraí SPSS (26.2) agus Microsoft Excel 2016.

Toisc go bhfuil go leor éifeachtaí extrarenal ag testosterone, a d'fhéadfadh meicníochtaí bun-aigéad duánach a athrú go hindíreach, mheasamar an fhéidearthacht go bhféadfadh KS-AR-KO leibhéil plasma testosterone nó estradiol a athrú. Mar sin féin, ní raibh difríocht mhór idir tiúchan plasma testosterone agus estradiol idir lucha WT agus KO i gceachtar den dá ghnéas (Tábla 2).

Tréithriú Fiseolaíoch ar Scriosadh AR Duán-Shonrach Bhí meáchan coirp níos mó i lucha fireann WT ná i lucha baineann WT in ainneoin nach raibh aon difríocht inscne ar iontógáil bia, mar a tuairiscíodh roimhe seo (22), comhsheasmhach le héifeachtaí extrarenal aitheanta gnéis ar mheáchan coirp. Mar sin féin, níor athraigh KS-AR-KO iontógáil laethúil bia nó meáchan coirp i gceachtar den dá ghnéas (Tábla 2).

Bhí meáchan duán i bhfad níos mó i lucha WT fireann ná i lucha WT baineann (Fíor 2), cosúil leis an méid a thuairiscigh againn roimhe seo i lucha gnáth (22). Tháinig laghdú suntasach ar mheáchan duáin KS-AR-KO i lucha fireann KS-AR-KO, sa mhéid nach raibh difríocht shuntasach idir meáchan duáin fireann KS-AR-KO agus meáchan duáin baineann WT nó KS-AR-KO (Fíor 2) . I lucha baineann, níor athraigh KS-AR-KO meáchan duáin go suntasach. Mar sin, éilíonn éifeacht gnéis ar mheáchan duáin léiriú AR sa duán fireann.

Ní raibh difríocht mhór idir na tiúchana plasma Naþ, K þ, ná décharbónáite idir lucha WT agus KS-AR-KO do cheachtar den dá ghnéas (Tábla 2). Ní raibh difríocht shuntasach idir imréiteach úiré, a úsáidtear mar mharcóir ar ráta scagacháin glomerular, idir lucha WT agus KS-AR-KO i gceachtar den dá ghnéas (Tábla 2).

Eisfhearadh Glan Aigéad

Tá dhá phróiseas i gceist le heisfhearadh glanaigéid: eisfhearadh amóiniam (NH4þ ) agus eisfhearadh aigéid toirtithe-thráttábla. I lucha fireann, mhéadaigh KS-AR-KO eisfhearadh amóinia go suntasach, rud a chuir deireadh leis an difríocht gnéis in eisfhearadh amóinia (Fíor 2). Níor athraíodh eisfhearadh amóinia go mór i lucha baineanna ag KS-AR-KO. Níor athraíodh eisfhearadh aigéad titratable go suntasach ag KS-AR-KO i gceachtar den dá ghnéas (Tábla 2). Tháinig laghdú suntasach ar pH fual KS-AR-KO i lucha fireann ach ní i lucha baineann (Tábla 2); áfach, lean éifeacht KS-AR-KO ar eisfhearadh amóinia tar éis breithniú staitistiúil a dhéanamh ar pH fual (P < 0.001="" ag="" anova).="" mar="" sin,="" meánaíonn="" ar="" tubule="" proximal="" difríochtaí="" gnéis="" in="" eisfhearadh="" amóinia="" i="" lucha="" fireann,="" ach="" ní="" raibh="" aon="" éifeacht="" shuntasach="" ag="" a="" scriosadh="" ar="" eisfhearadh="" amóinia="" i="" lucha="">

Éifeacht Scriosta AR ar Dhuán ar Leith ar Struchtúr Feadáin Chóngarach

Is ionann tubules cóngarach agus céatadán níos mó den toirt cortical sa duán fireann ná sa duán baineann, agus tá sé seo ag brath ar testosterone (20, 22). Mar sin, chinneamar na héifeachtaí a bheadh ​​ag scriosadh KS-AR i lucha fireanna agus baineanna ar struchtúr tubule cóngarach. Ag baint úsáide as immunolabel PEPCK mar marcóir proximal tubule-sonrach, léirigh immunohistochemistry go cáilíochtúil gur laghdaigh KS-AR-KO an cion den cortex a bhí proximal tubule (Fíor 3 A). Léirigh anailís chainníochtúil, ag baint úsáide as teicnící foirmiúla comhairimh pointe (41), gur laghdaigh KS-AR-KO go suntasach dlús toirte tubule proximal i cortex na bhfear, atá comhthreomhar leis an athrú ar mheáchan duáin (Fíor 3 B). I gcodarsnacht leis sin, i stripe seachtrach an medulla seachtrach, níor athraigh KS-AR-KO dlús toirte tubule proximal i lucha fireann go suntasach ( Fíor. 3 B ). I lucha baineann, ní raibh KS-AR-KO athrú cáilíochtúil ar an cion den cortex a bhí proximal tubule (Fíor 3 A) agus go cainníochtúil ní raibh a athrú dlús toirt tubule proximal i gceachtar an cortex nó medulla seachtrach ( Fíor. 3 B ). Ní raibh an difríocht gnéis i ndlús toirte tubule cortical proximal i lucha WT i láthair i lucha KS-AR-KO. Mar sin, sa duáin fireann, déanann AR na difríochtaí gnéis i ndlús toirte tubule proximal sa cortex a idirghabháil. Sa medulla seachtrach, ní cosúil go bhfuil tionchar ag léiriú AR ar dhlús toirte tubule proximal i gceachtar den dá ghnéas.

Dealraíonn sé go bhfuil athruithe i méid cille i gceist leis na hathruithe seo ar struchtúr tubule cóngarach i lucha fireann KS AR-KO. I lucha fireann, laghdaigh KS-AR-KO airde cille tubule proximal go suntasach sa PCT agus cortical PST, ie, ar fud an cortex ( Fíor. 3 C). Ní raibh athrú suntasach ar airde cille sa PST sa medulla seachtrach (Fíor 3 C). Tá na torthaí seo comhthreomhar leis na torthaí ar dhlús toirte. Níor athraigh scriosadh AR a bhaineann go sonrach le duán i lucha baineanna airde cille tubule cóngarach sa PCT, PST cortical, nó PST sa medulla seachtrach, rud atá comhthreomhar leis an easpa éifeacht ar dhlús toirte agus méid iomlán na duáin sa duán baineann (Fíor. 2B).

Bhí meáchan duáin, dlús toirte tubule cortical proximal, agus airde cille sa PCT agus PST cortical ar fad níos mó sa duáin fireann WT ná sa duáin baineann WT, atá comhthreomhar lenár dtuairimí roimhe seo (20, 22). I lucha fireann KS-AR-KO, ní raibh an difríocht gnéis seo ann a thuilleadh, agus ní raibh difríocht shuntasach idir gach ceann de na paraiméadair seo agus an ceann a breathnaíodh i lucha baineann WT nó KS-AR-KO. Mar sin, tá difríochtaí gnéis i meáchan duáin, dlús toirte tubule cortical proximal, agus airde cille sa PCT agus PST cortical ag brath ar léiriú AR.

Éifeacht Scriosta AR a Bhaineann go Sonrach le Duán ar Struchtúr Duchtanna a Bhailiú

Tá difríochtaí gnéis tábhachtacha sa ducht bhailithe, agus bhí dlús toirte na duchtanna níos airde i gcoibhneas an cortex nó an medulla seachtrach a bhí ag bailiú duchta i lucha fireann nó baineann (Fig. 4A). Léirigh anailís chainníochtúil morphometric nach raibh KS-AR-KO athrú suntasach ar bhailiú dlús toirte ducht sa cortex nó medulla seachtrach i gceachtar den dá ghnéas ( Fíor. 4 B ). Mar sin, ní dhéanann AR duánach idirghabháil ar an démorphism gnéasach agus dlús toirte duchtanna á bhailiú.

Slonn Einsíme Amóiniaigineach Léiríonn na torthaí i nGlan-eisfhearadh Aigéad go méadaíonn scriosadh AR a bhaineann go sonrach leis na duáin eisfhearadh amóinia i lucha fireanna cé go laghdaíonn sé dlús toirte tubule cóngarach agus airde cille sa cortex. Tugann sé seo le fios nach féidir na héifeachtaí ar eisfhearadh amóinia a chur i leith go simplí hipertróf feadán cóngarach as a dtiocfaidh méadú ar ghéineas amóinia agus ina ionad sin go bhfuil siad mar thoradh ar éifeachtaí ar leith agus sonracha ar ghéineas amóinia agus/nó ar iompar amóinia. Mar sin, rinneamar scrúdú ar na príomhphróitéiní a bhaineann le géineas amóinia agus in iompar amóinia.

Is eochair-einsím tubule proximal é PEPCK atá ag teastáil le haghaidh géineas amóinia agus tá sé le fáil go heisiach sa tubule proximal sa duán (16, 44). I lucha fireann, mhéadaigh KS-AR-KO léiriú cortical PEPCK go suntasach; ní raibh aon éifeacht KS-AR-KO i lucha baineann (Fíor 5A). Chuir an méadú ar léiriú PEPCK i lucha fireann KS-AR-KO deireadh leis an difríocht gnéis i lucha WT (Fíor 5A). Léirigh scrúdú ar léiriú imdhíon-lipéid PEPCK go raibh níos mó déine imdhíon-lipéad PEPCK ag lucha fireann KS-AR-KO sa PCT agus PST cortical ná mar a rinne lucha WT (Fíor 5 B). I stripe seachtrach an medulla seachtrach, ní raibh aon difríocht inbhraite i déine imdhíon-lipéad PEPCK (Fíor 5 B). Léirigh imdhíon-histochemistry cainníochtúil lucha fireann gur mhéadaigh KS-AR-KO déine imdhíon-lipéad PEPCK go suntasach sa PCT agus PST cortical araon ach ní i stríoc seachtrach an medulla seachtrach (Fíor 5 C). Mar sin, i lucha fireann, ach ní i lucha baineann, laghdaítear léiriú PEPCK tubule proximal AR i ndeighleoga tubule cortical proximal, ach ní sa PST sa medulla seachtrach.

Tá cumas athchúrsála amóinia ag an tubule cóngarach lena mbaineann GS (37, 42, 45, 46). I lucha fireann ná baineann, níor athraigh KS-AR-KO go suntasach slonn GS (Fig. 5D). Mar sin, ní cosúil go ndéanann AR duánach slonn GS a mhodhnú.

Éifeacht Scriosta AR Sonrach Duán ar Shloinn NBCe1

Is próitéin membrane lárnach tubule proximal é NBCe1 a bhfuil ról mór aige in ath-ionsú décharbónáite scagtha a rialaíonn meitibileacht amóinia freisin (47-49). Tá dhá leagan splice de NBCe1, NBCe1-A, agus NBCe1-B, i nduán na luiche (50, 51). Ag baint úsáide as antashubstaint uile-NBCe1, a aithníonn an dá leagan NBCe1, fuaireamar amach gur laghdaigh KS-AR-KO abairt cortical NCBe1 go suntasach sa duán fireann, ach ní baineann (Fíor 6A).

Éifeacht Scriosta AR a bhaineann go Sonrach Duán ar Iompar Amóinia Baineann eisfhearadh amóinia duánach le hiompar comhordaithe NH3 / NH4þ ag próitéiní membrane ar leith (10, 16, 52). Baineann sé seo le hiompróirí sa tubule proximal (NHE3), TAL an lúb de Henle (NKCC2), agus ní raibh a bhailiú inmunolabel duct inbhraite i gcodanna seachtrach medullary proximal tubule (Fig. 6 C), mar a tuairiscíodh roimhe seo (48). Ansin d’úsáideamar anailís imdhíon-histochemistry cainníochtúil chun athruithe deighleog-shonracha i NBCe1-A slonn a chainníochtú. Léirigh sé seo gur laghdaigh KS-AR KO i lucha fireann NBCe1-Sloinn sa PCT agus PST cortical, ie, ar fud an cortex (Fíor 6D). Mar sin, rialaíonn abairt AR tubule cortical proximal NBCe1-Sloinneadh sa duán fireann ach ní sa duán baineann.

(Rhbg agus Rhcg). Tá comhghaol idir difríochtaí gnéis in eisfhearadh amóinia agus difríochtaí i léiriú gach ceann díobh seo (6, 20), agus rialaíonn testosterone léiriú an dá NHE3 agus NKCC2 (22). Déanann NKCC2 idirghabháil ar ath-ionsú amóinia TAL (10, 16, 52). I lucha fireann, mhéadaigh KS-AR-KO léiriú próitéine NKCC2 ag baint úsáide as anailís inmunoblot go suntasach; i lucha baineann, ní raibh aon athrú suntasach (Fíor 8). Is dócha go gcuireann an t-athrú cainte seo i lucha fireanna le suaitheadh ​​​​amóinia medullary athraithe agus mar sin éascaíonn sé éifeacht KS-AR-KO chun eisfhearadh amóinia i lucha fireanna a mhéadú.

Gliocoproteiní Rh Rhbg agus Rhcg na próitéiní príomhúla a idirghabháil a bhailiú secretion amóinia duchta, agus a léiriú comhthreomhar go ginearálta athruithe i eisfhearadh amóinia (10, 16, 52). Mar sin féin, ní raibh KS-AR-KO athrú suntasach ar abairt próitéin Rhbg i gceachtar fireann nó baineann KS-AR-KO lucha i gceachtar den cortex nó stripe istigh den medulla seachtrach (Fig. 9). Bhí na héifeachtaí ar léiriú Rhcg cosúil. Níor léirigh imdhíon-histochemistry Rhcg, a mheas go cáilíochtúil agus ag baint úsáide as imdhíon-histochemistry cainníochtúil, aon athruithe suntasacha ar dhéine imdhíonlipéad Rhcg i gcealla idirghaolaithe stríoc seachtrach an mhedulla sheachtraigh i gceachtar den dá ghnéas (Fíor 10). Mar sin, ní cosúil go modhnaíonn AR duánach slonn Rhbg nó Rhcg.

PLÉ

Soláthraíonn an staidéar reatha faisnéis thábhachtach nua maidir leis an meicníocht maidir le conas a mhodhnaíonn AR démorphisms gnéasacha sa duán. Toisc go bhfuil róil sheach-duánach iomadúla ag AR, rud a d'fhéadfadh a bheith casta ar a ról sa duán a thuiscint, chruthaigh muid an chéad luch KS-AR-KO. Mhéadaigh KS-AR-KO i lucha fireann eisfhearadh amóinia, ach laghdaigh méid iomlán na duáin, dlús toirte tubule cóngarach, agus airde cille tubule cóngarach, rud a chuir deireadh le difríochtaí gnéis a aithníodh roimhe seo. Mhéadaigh KS-AR-KO léiriú na bpríomhphróitéiní iolracha (PEPCK agus NKCC2) a bhaineann le láimhseáil amóinia, rud is dócha a chuir leis an eisfhearadh amóinia méadaithe. Ag an am céanna, laghdaíodh slonn próitéiní eile (NHE3 agus NBCe1-A), rud a fhágann go dtiocfaidh athruithe maol ar eisfhearadh amóinia. Ní raibh aon éifeacht inbhraite ag KS-AR-KO ar lucha baineanna ná ar dhucht bailithe ceachtar inscne. Léiríonn Tábla 3 na héifeachtaí seo. Tugann na torthaí seo le fios go bhfuil bealaí comharthaíochta duánach AR-spleách i gcortex na duán fireann i gceist le láimhseáil amóinia duánach agus struchtúr tubule cóngarach, ach nach bhfuil sa duán baineann agus ní i medulla seachtrach ceachtar den dá ghnéas.

Is é an chéad mhórthoradh sa staidéar seo ná go n-idirghabháil in abairt AR difríochtaí gnéis i méid duánach. Léirigh staidéir roimhe seo i ndaoine, francaigh, agus lucha go bhfuil an duán fireann níos mó ná an duán baineann (3, 56, 57). Ba í an chéad fhianaise go raibh cosán comharthaíochta ag brath ar testosterone i gceist ná an bhreathnóireacht gur mhéadaigh ró-riarachán androgen go cáilíochtúil méid tubule francach proximal (57). Tugann fianaise bhreise i bhfireannaigh fásta le fios go bhfuil méadú dáileog-spleách ar an toirt duán, le méadú measta 4.{7}}cm3 in aghaidh 100 mg de fhorlíonadh testosterone seachtainiúil (58). Léirigh muid le déanaí go bhfuil níos mó duáin agus méid tubule proximal ag lucha fireann ná mar a bhíonn ag lucha baineann (20, 22) agus go raibh na difríochtaí seo ag brath ar testosterone (22). Ag teacht leis na torthaí roimhe seo, léiríonn an staidéar seo go rialaíonn abairt AR duánach i lucha fireanna ar fad na duáin agus an tubule cóngarach. Ina theannta sin, mar thoradh ar KS-AR-KO tá méid duán fireann mar an gcéanna le baineannaigh le léiriú AR slán. Mar sin, i lucha fireanna, is féidir le testosterone ag gníomhú trí bhealaí comharthaíochta duánach AR-spleách cuntas iomlán a thabhairt ar an démorphism gnéasach sa duán agus méid tubule cóngarach.

Is é an dara príomhthoradh ná go ndéantar difríochtaí gnéas-bhunaithe in eisfhearadh amóinia a idirghabháil trí bhealaí spleácha AR i lucha fireanna. Léirigh ár staidéir roimhe seo go n-eisfhearann ​​lucha baineann thart ar dhá oiread amóinia fuail agus a dhéanann lucha fireanna (20-22), go n-úsáideann siad cosáin freagartha éagsúla chun freagairt do luchtú aigéad (21) agus go mbaineann an difríocht in eisfhearadh amóinia basal le pendant testosterone. meicníocht (22). Leathnaíonn an staidéar reatha na torthaí seo trína léiriú go gcuireann KS-AR-KO deireadh leis an démorphism gnéasach in eisfhearadh amóinia. Is féidir le hathruithe ar ualaí aigéid sheasta chothaithe eisfhearadh amóinia a athrú, ach ní féidir athruithe ar eisfhearadh amóinia i lucha le scriosadh AR a chur i leith an mheicníocht seo toisc nár athraigh KS-AR-KO iontógáil bia. Mar thoradh ar fhormhór na n-athruithe a tharlaíonn ar mheitibileacht amóinia, mar a tharlaíonn le acidosis meitibileach nó hypokalemia, déantar athruithe ar mhéid tubule na nduán agus cóngarach a dhéanann eisfhearadh amóinia comhthreomhar (59-61). Mar sin féin, mhéadaigh lucha fireann le scriosadh AR duánach eisfhearadh amóinia ach laghdaigh méid iomlán na tubule duáin agus cóngarach, rud a léiríonn nach freagra neamh-shonrach é an éifeacht ar eisfhearadh amóinia ar athruithe ar mhais duánach. Tá an méid duánach mí-oiriúnach seo agus an fhreagairt amóinia mar fhreagra ar scriosadh AR duánach comhthreomhar le torthaí inár staidéir roimhe seo ag baint úsáide as samhail gonadectomy a rinne meastóireacht ar éifeacht testosterone (22). Mar sin, i lucha fireann, rialaíonn testosterone ag gníomhú trí AR duánach i bhfireann eisfhearadh amóinia trí bhealaí nach mbaineann le héifeachtaí ar mhéid duánach, méid tubule cóngarach, agus ualaí aigéad ingenous a bhaineann le iontógáil bia.

Tarlaíonn an chuid is mó de ghiniúint amóinia sa tubule proximal. D'aithin ár gcuid oibre roimhe seo démorphisms gnéasacha i nginiúint amóinia tubule proximal atá ag brath ar testosterone díorthaithe testis (22). Déanann torthaí an staidéir reatha na torthaí seo a leathnú tuilleadh trína thaispeáint go rialaíonn AR duánach i lucha fireann léiriú na heinsíme a ghineann amóinia PEPCK ach ní an einsím athchúrsála amóinia GS. Níl an éifeacht seo ar léiriú PEPCK ina éifeacht neamhshonrach a bhaineann le hathruithe ar mhéid tubule cóngarach, ós rud é go bhfuil éifeachtaí scriosadh AR duánach ar mhéid tubule cóngarach ar a mhalairt dá éifeachtaí ar léiriú PEPCK. Ina theannta sin, léiríonn an toradh nach n-athraíonn scriosadh AR duánach slonn GS go ndéantar GS a rialú trí mheicníochtaí atá difriúil uathu siúd a úsáidtear le haghaidh PEPCK.

Déantar amóinia a tháirgtear sa tubule proximal a scaoileadh go fabhrach isteach sa sreabhán lonrúil trí mheicníocht spleách NHE apical (54, 55). Léirigh staidéir roimhe seo go laghdaíonn caillteanas testosterone léiriú NHE3 (22, 62). Déanann torthaí an staidéir reatha na torthaí seo a leathnú tuilleadh trína léiriú go laghdaíonn scriosadh AR duánach i lucha fireann an abairt NHE3. Mar sin, is cosúil go n-ardóidh testosterone ag gníomhú di trí ghníomhachtú AR léiriú cortical tubule proximal NHE3. Mar sin féin, tá sé tábhachtach a aithint nach ionann na héifeachtaí seo agus eisfhearadh amóinia agus ina ionad sin bheadh ​​sé tuartha go laghdódh sé na hathruithe a breathnaíodh ar eisfhearadh amóinia. Ina áit sin, toisc go bhfuil NHE3 ríthábhachtach freisin le haghaidh NaCl scagtha agus ath-ionsú uisce, d'fhéadfadh na héifeachtaí seo cur leis an ath-ionsú tubule NaCl níos mó atá i láthair i bhfireannaigh (6, 7).

Bunaítear leis an ath-ionsú amóinia sa TAL an grádán amóinia idir-roinne atá riachtanach chun secretion amóinia duchta a bhailiú (63, 64). Léirigh staidéir roimhe seo ónár ngrúpa go bhfuil léiriú NKCC2 níos mó i lucha baineann ná i lucha fireann (20-22), go bhfuil démorphism gnéasach i bhfreagra NKCC2 ar luchtú aigéad (21), agus go bhfuil an difríocht i léiriú basal NKCC2 baineann meicníocht testosterone-spleách (22). Léiríonn an staidéar reatha gur mhéadaigh caillteanas AR duánach i lucha fireann léiriú NKCC2. Bhí méid na héifeachta seo beagnach comhionann leis an difríocht atá aitheanta againn idir lucha fireann agus baineann (20, 21) agus sa staidéar reatha chuir sé deireadh le démorphism gnéasach léiriú NKCC2. Ina theannta sin, tá an difríocht a aithníodh idir lucha fireann le AR duánach slán agus scriosadh AR comhthreomhar lenár ndifríochtaí a aithníodh roimhe seo idir lucha fireann le orchiectomy i gcomparáid le rialuithe slán agus sham-oibriú (24). Mar sin, is cosúil go ndéanann testosterone ag gníomhú di trí AR idirghabháil a dhéanamh ar an démorphism gnéasach i léiriú NKCC2. Is cosúil go bhfuil an rialachán seo indíreach, áfach, toisc nach raibh aon slonn AR inbhraite san TAL inár dtuarascáil roimhe seo (22) ná sa staidéar reatha. Meicníocht indíreach amháin a d’fhéadfadh a bheith ag míniú an bhreathnaithe seo ná go laghdaítear méid tubule cóngarach i bhfireannaigh a mhéadaíonn, i gcomhar le slonn tubule cóngarach laghdaithe NHE3, seachadadh tuaslagáit méadaithe chuig an TAL, rud a spreagann léiriú NKCC2.

Is é bailiú secretion amóinia duchta an príomhchinntitheach d’eisfhearadh amóinia fuail, agus is iad na glycoproteiní Rh Rhbg agus Rhcg na hiompróirí amóinia duchta a bhailíonn go príomha (16, 65-68). Táimid tar éis a thaispeáint roimhe dimorphisms gnéasach i bhailiú dlús toirte ducht agus léiriú ar an glycoproteins Rh, le lucha baineann a bhfuil níos mó a bhailiú dlús toirte duct, méid cille intercalated, agus Rhbg agus Rhcg abairt (20). Níor aimsíodh sa staidéar reatha aon athruithe inbhraite maidir le dlús toirte duchta nó slonn Rhbg agus Rhcg a bhailiú mar fhreagra ar KS-AR-KO i lucha fireann nó baineann. Tá sé seo comhthreomhar le heaspa éifeacht easnamh testosterone, arna tharlú ag orchiectomy, ar bhailiú dlús toirte duchta, méid cille idirghaolaithe, agus abairt Rhbg agus Rhcg (22). Bainimid de thátal as go dtarlaíonn an démorphism gnéasach sa ducht bailithe trí mheicníochtaí nach mbaineann le cosáin chomharthaíochta testosterone agus AR-spleách.

Is cosúil go bhfreagraíonn an medulla seachtrach go difriúil le gnéas, testosterone, agus AR ná mar a dhéanann an cortex. I gcodarsnacht leis an cortex duánach, sa medulla seachtrach, níl aon démorphism gnéasach i dlús toirte tubule proximal nó airde tubule proximal (20), gan aon éifeacht easnamh testosterone spreagtha orchiectomy ar na paraiméadair seo (22), agus gan aon éifeacht duánach. Scriosadh AR (staidéar láithreach). Níl an easpa éifeacht seo ar ghnéas, testosterone, agus léiriú AR mar gheall ar easpa léiriú AR, mar a léirigh muid léiriú AR ar fud an tubule proximal ar fad, lena n-áirítear sa medulla seachtrach (22). Beidh tuiscint a fháil ar na meicníochtaí is bun leis an difríocht aiseach seo sa fhreagra tubule cóngarach ar ghnéas, testosterone, agus AR ina bhealach tábhachtach le haghaidh imscrúdaithe sa todhchaí.

Breathnaíodh deiridh nach raibh éifeachtaí inbhraite ag scriosadh AR ar an duán baineann. Tá AR i láthair ar fud an tubule proximal ar fad sa dá inscne, agus cé go bhfuil sé léirithe ag leibhéil níos ísle i baineannaigh, bhí an difríocht iomlán i slonn ach - 50 faoin gcéad (22). I bpáirt, d’fhéadfadh easpa éifeacht scriosta AR laghdú ar ghníomhachtú AR a léiriú trí testosterone a chur i gcúrsaíocht, rud atá, mar a léirítear sa staidéar reatha, i bhfad níos lú i mná ná i bhfireannaigh. Mar sin féin, léiríonn imdhíonhistochemistry logánú suntasach núicléach AR sa duán baineann (Tag. 22 agus an staidéar reatha), rud a léiríonn go hiondúil gníomhachtú próisis chomharthaíochta AR-spleách. Tugann na barúlacha seo le fios go bhféadfadh difríochtaí gnéis-chleithiúnach eile dochar a dhéanamh do mheicníochtaí comharthaíochta AR-chleithiúnacha sa tubule proximal baineann.

Peirspictíochtaí agus Tábhacht

Tá tuiscint níos fearr ar mheicníocht agus ar impleachtaí bitheolaíocha éifeacht gnéis ar struchtúr duánach agus ar mheitibileacht amóinia ríthábhachtach chun ár gcumas aire a thabhairt d'fhir agus do mhná a bhfuil suaitheadh ​​aigéad-bun acu. In ainneoin an dul chun cinn le déanaí inár dtuiscint ar éifeacht gnéis ar mheitibileacht amóinia agus ról AR duánach, tá gá le staidéir bhreise. Is cinnte go bhfuil éifeachtaí testosterone-neamhspleách ar ghnéas, nach dtuigtear a mheicníocht go hiomlán faoi láthair. Cibé an mbaineann sé seo le héifeachtaí díreacha hormóin steroid gnéis eile, mar shampla estrogens nó progesterone, beidh éifeachtaí indíreacha gníomhachtaithe proximal tubule AR nó éifeachtaí crómasóim gnéis atá neamhspleách ar hormóin gonadal ina shaincheisteanna tábhachtacha le haghaidh staidéir sa todhchaí chun aghaidh a thabhairt orthu.

faoiseamh cistanche fadhbanna duáin agus cuireann kfeidhm idney

BUÍOCHAS

Gabhaimid buíochas leis an Dr. Sharon W. Matthews agus Chao Chen (Ollscoil Florida, Coláiste an Leighis Leictreon-Saotharlann Croímhicreascópachta) as próiseáil fíocháin den scoth le haghaidh ár dturgnaimh imdhíon-histochemical. Gabhaimid buíochas le Lárionad Taighde Scoil an Leighis Ollscoil Achadh an Iúir ar Atáirgeadh Ligand Assay and Analysis Core as leibhéil serum testosterone a thomhas. Gabhaimid buíochas leis an Dr. Gail Prins as antasubstaintí frith-AR a sholáthar agus as a saineolas in AR.

NOCHTADH

Ní dhearbhaíonn na húdair aon choinbhleachtaí leasa, airgeadais nó eile.

RANNÍOCAÍOCHTAÍ AN ÚDAR

Rinne ANH agus IDW taighde a cheapadh agus a dhearadh; Rinne ANH, RAC, H.-WL, agus JWV turgnaimh; Rinne ANH, RAC, H.-WL, JWV, agus IDW anailís ar shonraí; Rinne ANH, RAC, JWV, agus IDW torthaí na dturgnamh a léirmhíniú; figiúirí ullmhaithe ag ANH; Dhréachtaigh ANH an lámhscríbhinn; Rinne ANH, RAC, H.-WL, JWV, agus IDW an lámhscríbhinn a chur in eagar agus a athbhreithniú; Cheadaigh ANH, RAC, H.-WL, JWV, agus IDW an leagan deiridh den lámhscríbhinn.

TAGAIRTÍ

1. Coiste Institiúid an Leighis um Thuiscint ar Bhitheolaíocht Ghnéas agus Inscne D; Wizemann TM, Pardue ML (Eagarthóirí). Ag Iniúchadh ar Ranníocaíochtaí Bitheolaíochta le Sláinte an Duine: An bhfuil Tábhacht ag Gnéas? Washington, DC: National Academies Press, 2001. doi:10.17226/ 10028.

2. Karp NA, Mason J, Beaudet AL, Benjamini Y, Bower L, Braun RE, et al. Leitheadúlacht démorphism gnéasach i dtréithe feinitíopacha mamaigh. Nat Commun 8: 15475, 2017. doi:10.1038/ncomms15475.

3. Sabolić I, Asif AR, Budach WE, Wanke C, Bahn A, Burckhardt G. Difríochtaí inscne i bhfeidhm na duáin. Plugers Arch 455: 397–429,b2007. doi:10.1007/s00424-007-0308-1.

4. Ramirez LA, Sullivan JC. Difríochtaí gnéis i Hipirtheannas: cá raibh muid agus cá bhfuil muid ag dul. Am J Hipirtheanna 31: 1247-1254,2018. doi:10.1093/ajh/hpy148.

5. Layton AT, Sullivan JC. Dul chun cinn le déanaí i difríochtaí gnéis i bhfeidhm na duáin. Am J Fisiol Duánach Fisiol 316: F328–F331, 2019. doi:10.1152/ajprenal.00584.2018.

6. Veritas LC, Girardi ACC, Curry J, Pei L, Ralph DL, Tran A, Castelo- Branco RC, Pastor-Soler N, Arranz CT, Yu ASL, McDonough AA. An patrún démorphic gnéasach iompróirí duánach agus hoiméastáis leictrilít. J Am Soc Nephrol 28: 3504–3517, 2017. doi:10.1681/ASN.

7. Li Q, McDonough AA, Layton HE, Layton AT. Impleachtaí feidhmiúla démorphism gnéasach na bpatrún iompróra mar aon leis an tubule proximal francach: samhaltú agus anailís. Am J Fisiol Duánach Fisiol 315: F692–F700, 2018. doi:10.1152/ajprenal.00171.2018.

8. Maidhc WE. Iarmhairtí meitibileach agus cliniciúla de acidosis meitibileach. J Nephrol 19 Soláthar 9: S70–S75, 2006.

9. Hamm LL, Nakhoul N, Hering-Smith KS. hoiméastáis aigéad-bun. Clin J Am Soc Nephrol 10:2232–2242, 2015. doi:10.2215/ CJN.07400715.

10. ID Weiner, Mitch WE, Sands JM. Meitibileacht úiré agus amóinia agus rialú eisfhearadh nítrigine duánach. Clin J Am Soc Nephrol 10:1444–1458, 2015. doi:10.2215/CJN.10311013.

11. Mícheart O, Davies HE. Eisfhearadh aigéid i ngalar duánach. QJ Med 28: 259–313, 1959.

12. Baertl JM, Sancetta SM, Gabuzda GJ. Gaol ídiú géarphotaisiam le meitibileacht amóiniam duánach in othair le cioróis. J Clin Invest 42: 696–706, 1963. doi:10.1172/JCI104761.

13. Maher T, Schambelan M, Kurtz I, Hunter HN, Jones JW, Sebastian A. Feabhsú ar acidosis meitibileach trí shrianadh potaisiam aiste bia in othair hipearcailéime a bhfuil neamhdhóthanacht duánach ainsealach acu. J Lab Clin Med 103:432–445, 1984.

14. Fiar L, Gabuzda GJ. Easnamh potaisiam agus ró-ualú amóiniam inginiúil ón duán. Am J Clin Nutr 23: 614–618, 1970. doi:10.1093/acne/23.5.614. F642 AJP-Renal Physiol doi: 10.1152/ajprenal.00260.2021 www.ajprenal.org

15. Tannen RL, McGill J. Tionchar potaisiam ar tháirgeadh amóinia duánach. Am J Fisiol 231: 1178–1184, 1976. doi:10.1152/ajplegacy. 1976.231.4.1178.

16. ID Weiner, Verlander JW. Iompróirí amóinia agus a ról i gcothromaíocht aigéad-bun. Fisiol Rev 97:465–494, 2017. doi:10.1152/physrev.00011.2016.

17. Kovesdy CP, Anderson JE, Kalantar-Zadeh K. Comhlachas leibhéil décharbónáite serum le mortlaíocht in othair a bhfuil CKD neamh-spleách scagdhealaithe orthu. Trasphlandú Dial Nephrol 24: 1232–1237, 2009. doi:10.1093/ndt/gfn633.

18. Navaneethan SD, Schold JD, Arrigain S, Jolly SE, Wehbe E, Raina R, Simon JF, Srinivas TR, Jain A, Schreiber MJ Jr, Nally JV Jr. Bicarbonate serum agus mortlaíocht i gcéim 3 agus céim 4 galar duáin ainsealach . Clin J Am Soc Nephrol 6: 2395–2402, 2011.

19. Raphael KL, Murphy RA, Shlipak MG, Satterfield S, Huston HK, Sebastian A, Sellmeyer DE, Patel KV, Newman AB, Sarnak MJ, Ix JH, Fried LF; Staidéar ABC Sláinte. Tiúchan décharbónáite, stádas bonn-aigéad, agus básmhaireacht sa staidéar sláinte, aosaithe agus comhdhéanamh coirp. Clin J Am Soc Nephrol 11:308–316, 2016.

20. Harris AN, Lee HW, Osis G, Fang L, Webster KL, Verlander JW, Weiner ID. Difríochtaí i meitibileacht amóinia duánach sna duáin fireann agus baineann. Am J Fisiol Duánach Fisiol 315: F211–F222, 2018. doi:10.1152/ajprenal.00084.2018.