Ról Cortex Prelimbic PKC Agus PKMζ in Athdhlúthú Cuimhne Eagla agus Marthanacht Tar éis Athghníomhaithe

Le haghaidh tuilleadh eolais:ali.ma@wecistanche.com

Tacaíonn gníomhaíocht PKMC, isoform aitíopúil de phróitéin kinase C(PKC) le marthanacht na gcuimhní nua-fhaighte. Ní fios fós cé acu an gcuireann gníomhaíocht na n-isfhoirmeacha PKC traidisiúnta agus aitíopúla le cuimhní athghníomhaithe fós. Mar an gcéanna, cibé acucuimhneis réamhriachtanas é athghníomhachtú le go mbeifear in ann dianseasmhacht cuimhne a athrú, is ar éigean a imscrúdaítear. Bunaithe ar an méid thuas, rinneamar scrúdú ar ról na n-isfhoirmeacha PKC traidisiúnta agus aitíopúla in athdhlúthú cortex réamhlimiceach agus marthanacht eagla comhthéacsúil athghníomhaithe.cuimhnei bhfrancaigh fireann Wistar. Léirítear gur chuir bac ar ghníomhaíocht PKC le chelerythrine nó ar ghníomhaíocht PKMK le ZIP bac ar marthanacht ár ngníomhaithecuimhnear feadh 21 lá ar a laghad;(i) ZIP tugtha díreach ina dhiaidh sincuimhneníor chuir an t-athghníomhachtú isteach ar an bpróiseas athchomhdhlúthaithe ná ar an bpróiseas marthanachta. I gcodarsnacht leis sin, nuair a thugtar 1h níos déanaí, lagaithe ancuimhnedianseasmhacht ; (ii) rinne ceilitrín a tugadh díreach tar éis athghníomhú cuimhne lagú ar an athchomhdhlúthú; (v) fhágáil ar lárcuimhnechuir an t-athghníomhachtú cosc ​​ar na héifeachtaí ceilitrin-agus ZIP-spreagtha:(v)tá an gníomh ZIP neamhspleách ar an am a chuaigh thart idir a riar agus an ceann tosaighcuimhnescrúdú. Léiríonn na torthaí go bhfuil baint ag cortex prelimbic PKCand PKMcuimhneathdhlúthú agus marthanacht.

Thiago Rodrigues da Silva1, Ana Maria Raymundi1, Leandro José Bertoglio2,

RobertoAndreatini1 & CristinaA. Stern 1*

Áirítear i dteaghlach an phróitéin kinase C (PKC) isoforms traidisiúnta ( , , agus ), úrscéal (δ, ɛ, η, agus θ), agus aitíopúla (ζ, ι, agus λ)1,2. Tá ról gach ceann de na isfhoirmeacha PKC seo á imscrúdú faoi láthair. Tugann fianaise carntha le fios go bhfuil gníomhachtú leanúnach ar isoform kinase C próitéine aitíopúla (PKMζ) ag an gcéim dheireanach dencuimhnetá comhdhlúthú freagrach as potentiation fadtéarmach agus fadtéarmach a chothabháilcuimhne 3–5. Tuairiscíodh freisin go bhfuil gá le PKMζ chun cuimhne nós imeachta, spásúlachta, stuama (luach saothair) nua-fhaighte, agus cuimhní cinniúnacha4,6-8, a bhuanú. Tá sé léirithe go neartaíonn ró-eisbhrú PKMζ sa cortex réamhlimbach (PL) buanseasmhacht na cuimhne corraitheach9. Ar an láimh eile, tá baint ag a mheitiliú DNA sa choirtéis PL, nó a chomhiomlánú le tangles neurofibrillary sa hippocampus lecuimhnemeath nó lagú i múnlaí ainmhithe de ghalair a bhaineann le haosú10,11.

Cliceáil go dtí an Cistanche orgánach le haghaidh cuimhne

Tá sé molta go n-eascródh athghníomhú cuimhne gairid céim dhéanach (thar an fhuinneog ama athdhlúthaithe) de shintéis próitéin a d'fhéadfadh a bheith mar bhonn le marthanacht na gcuimhní corraitheacha athghníomhaithe12. Dá réir sin, tuairiscítear go lagaíonn coscaire sintéise próitéine a tugadh 9.5 uair tar éis athghníomhaithe marthanacht cuimhne eagla athghníomhaithe13. Mar an gcéanna, tá cosc ​​ar chosc PKC 6 nó 9h tar éis imoibríocht chuimhne eagla a bheith tar éis a bhuanseasmhacht a lagú gan cur isteach ar an bpróiseas athdhlúthaithe14. Tá cosúlachtaí áirithe idir comhdhlúthú cuimhne eagla agus athdhlúthú, mar a n-am-fhuinneog tarluithe15–17. Déantar na meicníochtaí a thacaíonn le buanseasmhacht cuimhne le linn agus tar éis comhdhlúthú cuimhne a imscrúdú i bhfad níos mó18,19. Tá an t-imscrúdú ar mheicníochtaí cothabhála cuimhne le linn agus tar éis na fuinneoige ama ath-chomhdhlúthaithe fós tosaigh. Bheadh ​​sé ábhartha go heolaíoch agus go teiripeach ár n-eolas faoin dara ceist a chur chun cinn. cortex PKC agus PKM( agus cuimhne eagla comhthéacsúil fós i bhfrancaigh. Ar dtús, dhíríomar ar phointí ama sonracha tar éis dheireadh na fuinneoige ama athdhlúthaithe cuimhne (ó 6 go 18h tar éis athghníomhú cuimhne)Ar aghaidh, trí athghníomhú cuimhne a fhágáil ar lár, rinneamar measúnú riachtanas an phróisis seo meicníochtaí buanseasmhacht cuimhne a aslú. Ar deireadh, thugamar faoi cé acu an bhfuil PKC agus/nó PKMC tábhachtach freisin do chomhdhlúthú cuimhne agus/nó do bhuanseasmhacht laistigh den fhuinneog ama athchomhdhlúthaithe (0 agus/nó 1 h tar éis athghníomhú cuimhne ).

Torthaí

Éifeachtaí coiscthe cortex PL PKC ag chelerythrine ar marthanacht cuimhne eagla comhthéacsúla athghníomhaithe.

Rinneamar tástáil ar an idirghabháil cógaseolaíochta seo 6, 9, 12, agus 18h tar éis athghníomhú cuimhne (Fíor 1A). Ag an gcéad phointe ama a roghnaíodh, léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(2,44)=33.7; p<0.0001], the="" treatment="" [f(1,22)="8.77;" p="0.007]," and="" the="" interaction="" between="" these="" factors="" [f(2,44)="22.0;" p="0.00001]," for="" freezing="" time.="" as="" shown="" in="" fig.="" 1b,="" the="" tukey="" post-hoc="" test="" showed="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="13" and="" 11,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0001;" hedges'="" g="" efect="" size="2.65)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.90;" g="0.40)" or="" test="" a1="" (p="0.95;" g="">

Ag an dara pointe ama a roghnaíodh (9 h), léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(2,36)=25.1; p<0.0001], the="" treatment="" [f(1,18)="8.95;" p="0.0078]," and="" their="" interaction="" [f(2,36)="7.06;" p="0.0026]." as="" shown="" in="" fig.="" 1c,="" there="" was="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="12" and="" 8,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.001;" g="1.92)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.81;" g="0.63)" or="" test="" a1="" (p="0.53;" g="">

Ag an tríú pointe ama a roghnaíodh (12h), léirigh ANOVA measctha éifeacht shuntasach de na seisiúin [F(2,28)=20.9; p<0.0001], the="" treatment="" [f(1,14)="11.3;" p="0.0047]," and="" their="" interaction="" [f(2,28)="18.0;"><0.0001]. as="" shown="" in="" fig.="" 1d,="" there="" was="" a="" signifcant="" diference="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="7" and="" 9,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0002;" g="3.15)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.31;" g="0.75)" or="" test="" a1="" (p="0.96;" g="">

Ag an gceathrú pointe ama a roghnaíodh (18h), léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha de na seisiúin [F(2,24)=9.43; p<0.0001], and="" an="" interaction="" between="" sessions="" and="" treatment="" [f(2,24)="5.00;" p="0.02]," but="" not="" the="" treatment="" [f(1,12)="0.66;" p="0.43]." as="" shown="" in="" fig.="" 1e,="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" test="" a2="" and="" the="" reactivation="" session="" in="" animals="" treated="" with="" vehicles="" (p="0.03;" g="1.12;" n="7)," but="" not="" chelerythrine="" (p="0.57;" g="0.76;" n="7)." there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" groups="" during="" any="" session="" performed.="" altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkc="" activity="" 6,="" 9,="" or="" 12h="" after="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

Teastaíonn athghníomhachtú cuimhne roimh ré má dhéantar cuimhne lagaithe mar gheall ar chosc ar PKC sa choirtéis PL.

Bhí athruithe ar mharthanacht chuimhne a tharlódh de bharr chelerythrine cosúil leis nuair a tugadh an druga seo 6, 9, nó 12h tar éis an tseisiúin athghníomhaithe. Bunaithe ar seo, roghnaíodh an chéad phointe ama chun an chéad turgnamh eile a dhéanamh inar fágadh an seisiún athghníomhachtaithe cuimhne ar lár (Fíor 2A) chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil sé ina réamhriachtanas chun an toradh thuasluaite a bhreathnú. Chun na críche sin, nochtadh ainmhithe eagla comhthéacsúla do Chomhthéacs B neodrach agus neamhphéireáilte (an seisiún gan athghníomhú) agus 6h níos déanaí cóireáilte le feithicil nó le ceilitrín (n=6 in aghaidh an ghrúpa). Léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha ag na seisiúin [F(2,20)=167,48; P=0.000001], ach ní an chóireáil [F(1,10)=0.75; P=0.40] nó a n-idirghníomhaíocht [F(2.20)=0.34; P=0.71]. Mar a léirítear i bhFíor 2B, léirigh an dá ghrúpa luachanna reo níos airde le linn Tástála A1 agus A2 ná mar a bhí sa seisiún gan athghníomhú (P<0.0001), confirming="" that="" this="" conditioned="" behavior="" is="" observed="" predominantly="" when="" the="" animals="" are="" re-exposed="" to="" the="" conditioning="" context.="" further,="" no="" treatment="" effect="" was="" observed,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" essential="" for="" chelerythrine-induced="" impairments="" in="" its="">

Éifeachtaí coiscthe cortex PL PKMζ ag ZIP ar marthanacht cuimhne eagla comhthéacsúla athghníomhaithe. Tá sé léirithe go gcuireann ró-eisiúint PKMζ sa choirtéis PL le buanseasmhacht na cuimhne corraitheach9. Bunaithe ar seo agus torthaí chelerythrine roimhe seo, rinneamar imscrúdú cibé an bhfuil gníomhaíocht PKMζ sa cortex PL 6h tar éis cuimhne eagla comhthéacsúla a athghníomhachtú i gceist lena marthanacht ( Fíor. 3 A ). Léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(3,36)=31.4; p<0.0001], the="" treatment="" [f(1,12)="25.9;" p="0.0003]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="15.1;" p="0.0001]." as="" shown="" in="" fig.="" 3b,="" there="" were="" significant="" differences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" test="" a2="" (p="0.0001;" g="2.53)," and="" test="" a3="" (p="0.0001;" g="4.11)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.99;" g="0.13)" or="" test="" a1="" (p="0.54;" g="1.35)." altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" 6h="" after="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil athghníomhachtú cuimhne ina réamhriachtanas do ZIP chun dul i bhfeidhm ar an bpróiseas marthanachta, sa chéad turgnamh eile nochtadh ainmhithe do Chomhthéacs B neodrach agus neamhphéireáilte (an seisiún gan athghníomhú) agus 6h níos déanaí cóireáilte le feithicil (n=6 ) nó ZIP (n=9) (Fíor 3C). Léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(3,39)=202; P=0.00001], ach ní an chóireáil [F(1,13)=0.33; P=0.57] nó a n-idirghníomhaíocht [F(3,39)=0.17; P=0.91]. Mar a léirítear i bhFíor 3D, léirigh an dá ghrúpa amanna reo níos airde le linn Tástálacha A1, A2, agus A3 ná mar a bhí sa seisiún gan athghníomhú (P<0.0001), confirming="" that="" fear="" expression="" is="" more="" selective="" to="" the="" conditioning="" context.="" moreover,="" no="" treatment="" effect="" was="" observed,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" necessary="" for="" the="" zip-induced="" changes="" in-memory="">

Fíor3. Cuirtear cuimhne eagla comhthéacsúil i ngníomh ar na héifeachtaí a bhaineann le cosc ​​​​PKM cortex prelimbic (PL) ag ZIP ar marthanacht. (A) Sa dearadh turgnamhach ginearálta a úsáideadh, cuireadh Ainmhithe ar an eolas faoin gcomhthéacs ar dtús. Lá arna mhárach, cuireadh an comhthéacs le chéile le trí shuaite (SAM). An lá dár gcionn,6h tar éis athghníomhachtú cuimhne (athnochtadh Comhthéacs A), fuair na hainmhithe insileadh déthaobhach de ZIP nó Scr-ZIP (10nmol) Intra-PLcortex. Lá amháin, seacht, agus 21 lá ina dhiaidh sin, bhí na hainmhithe ath-nochtadh do chomhthéacs péireála (TástálachaA, A, agus A,) chun measúnú a dhéanamh ar na héifeachtaí ZIP ar chuimhne,(B) Éifeachtaí ZIP ar marthanachta cuimhne nuair a thugtar 6h tar éis athghníomhaithe. ZIP. léirigh ainmhithe cóireáilte níos lú ama reo ná mar a bhí rialuithe le linn Thástáil A, agus A, rud a thugann le tuiscint go raibh lagú marthanachta cuimhne. (C) Baineadh úsáid as an dearadh turgnamhach ginearálta. Cuireadh ainmhithe ar an eolas i dtosach ar Chomhthéacs A. Lá arna mhárach, rinneadh an comhthéacs a phéireáil le trí shuaite (US). cortex laistigh den PL ZIP nó Scr-ZIP. Lá amháin, seacht, agus 21 lá ina dhiaidh sin, bhí na hainmhithe ath-nochtadh don chomhthéacs péireáilte (Tástálacha A. A2 agus A3) chun measúnú a dhéanamh ar éifeachtaí ZIP ar chuimhne. (D) Éifeachtaí ZIP ar mharthanacht chuimhne nuair a thugtar 6h tar éis athghníomhachtú cuimhne a fhágáil ar lár. Chuir ainmhithe cóireáilte ZIP am reo i láthair cosúil leis na rialuithe le linn aon tástála a thug le tuiscint nach raibh aon athruithe ar mharthanacht an chuimhne. (E)An dearadh turgnamhach ginearálta a úsáideadh. Cuireadh ainmhithe ar an eolas i dtosach ar Chomhthéacs A. Lá arna mhárach, cuireadh an comhthéacs le chéile le trí shuaitheadh ​​(SAM). An lá dár gcionn, 6h tar éis athghníomhú cuimhne (athnochtadh Comhthéacs A), fuair na hainmhithe insileadh déthaobhach de cortex intra-PL ZIP nó Scr-ZIP, Deich lá ina dhiaidh sin, bhí na hainmhithe ath-nochtadh don chomhthéacs péireáilte (Tástáil A) chun éifeachtaí ZIP ar chuimhne a mheas. (F) Éifeachtaí ZIP ar mharthanacht chuimhne nuair a thugtar 6h tar éis athghníomhaithe, chuir ainmhithe cóireáilte le ZIP níos lú ama reo i láthair ná mar a bhí rialuithe le linn Thástáil A, rud a thugann le tuiscint go raibh lagú marthanachta sa chuimhne. Sloinntear luachanna mar mheán± SEM (líon ainmhithe in aghaidh an ghrúpa: B=7/grúpa; D=6-9; F=7-9).In "B" agus "F", seasann an réiltín difríocht shuntasach staitistiúil (P< 0.05)="" from="" the="" respective="" control="" group="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="" test).in"d,="" the="" fence="" (hashtag)="" denotes="" a="" statistically="" significant="" difference="">< 0.05)from="" tests="" a,="" a,="" and,="" relative="" to="" the="" no="" reactivation="" session="" in="" both="" groups="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

Áitíodh go bhféadfadh bac a chur ar PKMζ léiriú na cuimhne seachas cur isteach go buan ar a marthanacht23. Chun imscrúdú a dhéanamh an mbraitheann éifeachtaí drugaí-spreagtha ar mharthanacht cuimhne athghníomhaithe ar an am a chuaigh thart idir an chóireáil agus Tástáil A1 (Fíor 3E), sa chéad turgnamh eile fuair na hainmhithe cóireáil insileadh isteach sa cortex PL 6 h tar éis athghníomhú cuimhne, agus Rinneadh tástáil A1 tar éis 10 lá (in ionad 1 lá ina dhiaidh sin). Léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(1,14)=5.68; p<0.03], the="" treatment="" [f(1,14)="7.40;" p="0.01]," and="" their="" interaction="" [f(1,14)="19.41;" p="0.0006]." as="" shown="" in="" fig.="" 3f,="" there="" was="" a="" significant="" difference="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7–9" animals/group)="" during="" test="" a1="" (p="0.01;" g="2.37)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.78;" g="0.50)." these="" results="" corroborate="" that="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" 6h="" after="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" involved="" in="" its="" persistence,="" and="" indicate="" the="" zip="" action="" is="" independent="" of="" the="" time="" elapsed="" between="" its="" administration="" and="" test="">

Fíor4. Éifeachtaí coiscthe cortex prelimbic (PL) PKC ag chelerythrine (Che) ar athdhlúthú cuimhne eagla comhthéacsúla athghníomhaithe (A) An dearadh turgnamhach ginearálta a úsáideadh. Cuireadh ainmhithe ar an eolas i dtosach ar Chomhthéacs A. Lá arna mhárach, rinneadh an comhthéacs a péireáil le trí shuaite (US).An lá dár gcionn, díreach tar éis athghníomhú cuimhne (athnochtadh Comhthéacs A), fuair na hainmhithe insileadh déthaobhach feithicle (Veh). )nó Che(3.0 nmol) laistigh den PLcortex. Lá amháin, seacht, agus 21 lá ina dhiaidh sin, rinneadh na hainmhithe a nochtadh arís don chomhthéacs péireáilte (Tástálacha A, A, agus A,) chun éifeachtaí Che ar chuimhne a mheas, (B) Éifeachtaí Che ar athdhlúthú cuimhne nuair a thugtar é díreach ina dhiaidh sin. athghníomhachtú. Chuir ainmhithe ce-chóireáilte níos lú ama reo i láthair ná mar a bhí rialuithe i rith na dTástálacha A, A, agus Az ag tabhairt le tuiscint go raibh lagú ar chomhdhlúthú cuimhne. (C) Baineadh úsáid as an dearadh turgnamhach ginearálta. Cuireadh ainmhithe ar an eolas faoin gcomhthéacs ar dtús. Lá arna mhárach, péireáladh an comhthéacs le trí shuaite (SAM).An lá dár gcionn, díreach tar éis athghníomhú cuimhne a fhágáil ar lár (nochtadh neodrach agus neamhphéireáilte i gComhthéacs B), fuair na hainmhithe insileadh déthaobhach de Veh nó Che intra-PLcortex.One agus seacht lá ina dhiaidh sin, bhí na hainmhithe ath-nochtadh don chomhthéacs péireáilte (Tástálacha A, agus,) chun measúnú a dhéanamh ar éifeachtaí Che ar chuimhne. (D) Éifeachtaí seiceála ar athdhlúthú cuimhne nuair a thugtar é díreach tar éis athghníomhachtú cuimhne a fhágáil ar lár. Chuir ainmhithe ce-chóireáilte am reo i láthair cosúil leis na rialuithe le linn Thástáil A, rud a thug le tuiscint nach raibh aon athruithe ar chomhdhlúthú cuimhne. Cuirtear luachanna in iúl mar mheán 土 SEM （líon ainmhithe in aghaidh an ghrúpa∶B=7/grúpa; D=6/grúpa). I “B”, seasann an réiltín difríocht atá suntasach go staitistiúil (*P<0.05)from the="" respective="" control="" group="" (mixed-anova="" followed="" by="" the="" tukey="" test).in="" "d"="" the="" fence(hashtag)="" denotes="" a="" statistically="" significant="" difference=""><0.05)from tests="" a,="" and="" a,="" relative="" to="" the="" no="" reactivation="" session="" in="" both="" groups(mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

cóireáil [F(1,14)=7.40; P=0.01], agus a n-idirghníomhaíocht [F(1,14)=19.41; P=0.0006]. Mar a léirítear i bhFíor 3F, bhí difríocht shuntasach idir grúpaí rialaithe agus grúpaí ZIP (n=7–9 ainmhí/grúpa) le linn Tástála A1 (P=0.01; g=2). 37), ach ní an seisiún athghníomhaithe (P=0.78; g=0.50). Comhdhearbhaíonn na torthaí seo go bhfuil gníomhaíocht PL cortex PKMζ 6h tar éis cuimhne eagla comhthéacsúil a athghníomhachtú páirteach ina marthanacht, agus léiríonn siad go bhfuil gníomh ZIP neamhspleách ar an am a chuaigh thart idir a riarachán agus Tástáil A1.

Éifeachtaí coiscthe cortex PL PKC ag chelerythrine ar athdhlúthú cuimhne eagla comhthéacsúla athghníomhaithe.

Thástáil muid an idirghabháil cógaseolaíochta seo díreach tar éis an tseisiúin athghníomhaithe cuimhne (Fíor 4A). Léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(3,36)=22.5; p<0.0001], the="" treatment="" [f(1,12)="40.8;" p="0.0001]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="5.68;" p="0.0027]." as="" shown="" in="" fig.="" 4b,="" there="" were="" significant="" differences="" between="" control="" and="" chelerythrine="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" test="" a1="" (p="0.0003;" g="2.95)," test="" a2="" (p="0.0001;" g="4.30)," and="" test="" a3="" (p="0.003;" g="1.26)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.60;" g="0.79)." these="" results="" indicate="" that="" pl="" cortex="" pkc="" activity="" immediately="" after="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" involved="" in="" its="" reconsolidation,="" and="" the="" drug-induced="" reconsolidation="" impairment="" was="" still="" present="" 21="" days="">

Chun imscrúdú a dhéanamh an bhfuil athghníomhachtú cuimhne ina réamhriachtanas le go gcuirfeadh an cheilitrin isteach ar an bpróiseas athdhlúthaithe, fágadh an seisiún athghníomhaithe ar lár sa chéad turgnamh eile toisc go raibh na hainmhithe faoi lé comhthéacs B agus cóireáilte ansin le feithicil nó le ceilitrin (Fíor 4C; n{{1} }/grúpa). Léirigh ANOVA measctha éifeachtaí suntasacha na seisiún [F(2,26)=379.7; P=0.0001], ach ní an chóireáil [F(1,13)=5.71; P=0.06], nó a n-idirghníomhaíocht [F(2, 26)=2.76; P=0.09]. Mar a léirítear i bhFíor 4D, léirigh an dá ghrúpa amanna reo níos airde le linn Tástálacha A1 agus A2 ná mar a bhí sa seisiún gan athghníomhú (P<0.0001), confirming="" that="" fear="" expression="" is="" more="" selective="" to="" the="" conditioning="" context.="" moreover,="" there="" was="" no="" treatment="" effect,="" indicating="" that="" memory="" reactivation="" is="" also="" necessary="" for="" drug-induced="" efects="" in="" memory="">

Fíor 5. Éifeachtaí coiscthe cortex prelimbic (PL) PKM ag ZlP ar athdhlúthú cuimhne eagla comhthéacsúla athghníomhaithe. (A) Baineadh úsáid as an dearadh turgnamhach ginearálta. Cuireadh ainmhithe ar an eolas i dtosach ar Chomhthéacs A. Lá arna mhárach, rinneadh an comhthéacs a phéireáil le trí shuaite (US), An lá dár gcionn, díreach tar éis athghníomhú cuimhne (athnochtadh Comhthéacs A), fuair na hainmhithe insileadh déthaobhach ZIP nó Scr. -ZIP (10 nmol) laistigh den PLcortex. Lá amháin, seacht, agus 21 lá ina dhiaidh sin, bhí na hainmhithe ath-nochtadh don chomhthéacs péireáilte (TástálachaA, A, agus A) chun measúnú a dhéanamh ar éifeachtaí ZIP ar chuimhne. (B) Éifeachtaí ZIP ar athdhlúthú cuimhne nuair a thugtar díreach tar éis athghníomhachtú cuimhne. Chuir ainmhithe cóireáilte ZIP am reo i láthair cosúil le rialuithe le linn Tástálacha A, A, agus, rud a thug le tuiscint nach raibh aon athruithe ar athdhlúthú cuimhne. (C) Baineadh úsáid as an dearadh turgnamhach ginearálta. Cuireadh Ainmhithe ar an eolas ar dtús le Comhthéacs A. Lá ina dhiaidh sin, péireáladh an comhthéacs le trí turraingí (US). cortex intra-PL Scr-ZIP. Lá amháin, seacht, agus 21 lá ina dhiaidh sin, nochtaíodh na hainmhithe don chomhthéacs péireáilte (Tástálacha A, A, agus A,) chun éifeachtaí IP ar chuimhne a mheas. (D) Éifeachtaí ZIP ar mharthanacht chuimhne nuair a thugtar 1 h tar éis athghníomhachtú. Chuir ainmhithe cóireáilte ZIP níos lú ama reo i láthair ná mar a bhí le rialuithe i rith na dTástálacha A2 agus A, rud a thugann le tuiscint go bhfuil lagú cuimhne acu. Sloinntear luachanna mar mheán ± SEM (líon ainmhithe in aghaidh an ghrúpa: B=7/grúpa; D=7-8).In"B" níor léirigh an ANOVA measctha agus an triail Tukey ina dhiaidh sin aon difríocht shuntasach le linn comhthéacs péireáilte risíochtaí (comhthéacs A).In "D", seasann an réiltín difríocht atá suntasach go staitistiúil (P<0.05)from the="" respective="" control="" group="" (mixed="" anova="" followed="" by="" the="" tukey="">

Éifeachtaí coiscthe cortex PL PKMζ ag ZIP ar athdhlúthú cuimhne eagla comhthéacsúla athghníomhaithe.

Thástáil muid an idirghabháil chógaseolaíoch seo láithreach tar éis an tseisiúin athghníomhaithe cuimhne agus 1 uair níos déanaí. Ag an gcéad phointe ama a roghnaíodh (Fíor 5A), níor léirigh ANOVA measctha aon éifeachtaí suntasacha de na seisiúin [F(3,36)=4.33; p<0.303], the="" treatment="" [f(1,12)="0.109;" p="0.7472]," and="" their="" interaction="" [f(3,36)="1.62;" p="0.19]." as="" shown="" in="" fig.="" 5b,="" there="" were="" no="" signifcant="" diferences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="7" in="" both="" cases)="" during="" any="" session="" performed,="" suggesting="" that="" pkmζ="" activity="" in="" the="" pl="" cortex="" immediately="" afer="" reactivating="" a="" contextual="" fear="" memory="" is="" not="" involved="" in="" its="" reconsolidation="" (and="" persistence).="" at="" the="" second="" time="" point="" selected="" (fig.="" 5c),="" a="" mixed="" anova="" showed="" signifcant="" efects="" of="" the="" sessions="" [f(3,39)="42.2;"><0.0001], the="" treatment="" [f(1,13)="20.2;" p="0.0006]," and="" their="" interaction="" [f(3,39)="7.82;" p="0.0003]." as="" shown="" in="" fig.="" 5d,="" there="" were="" signifcant="" diferences="" between="" control="" and="" zip="" groups="" (n="8" and="" 7,="" respectively)="" during="" test="" a2="" (p="0.0005;" g="2.25)," and="" test="" a3="" (p="0.0002;" g="2.19)," but="" not="" the="" reactivation="" session="" (p="0.99;" g="0.48)" or="" test="" a1="" (p="0.35;" g="1.48)." altogether,="" the="" results="" associate="" the="" pl="" cortex="" pkmζ="" activity="" as="" early="" as="" 1h="" afer="" reactivating="" an="" aversive="" memory="" with="" its="">

Plé

Rinneadh iarracht sa staidéar seo imscrúdú a dhéanamh ar ról cortex PL PKC agus PKMζ in athdhlúthú agus marthanacht cuimhne eagla comhthéacsúil athghníomhachtaithe i bhfrancaigh. Léiríodh: 1) go bhfuil gníomhaíocht PKC agus PKMζ riachtanach chun cuimhne athghníomhaithe a bheith fós ann; 2) éilíonn éifeachtaí coisc PKC nó PKMζ athghníomhú cuimhne roimh ré; 3) go bhfuil éifeachtaí cosc ​​​​PKMζ neamhspleách ar an tástáil tosaigh 1 lá tar éis insileadh ZIP; 4) tá baint ag gníomhaíocht PKC, ach ní PKMζ, le cuimhne athghníomhaithe a chomhdhlúthú; 5) tá gníomhaíocht PKMζ le linn an fhuinneog ama athdhlúthaithe tábhachtach le haghaidh marthanacht cuimhne. Léiríonn torthaí Tese go bhfuil baint dhifreálach ag cortex PL PKC agus PKMζ leis na próisis a scrúdaíodh.

Ní raibh aon éifeacht ag an gcosc PKC de bharr chelerythrine 6h tar éis athghníomhú cuimhne ar an am reo nuair a rinneadh tástáil ar na hainmhithe lá amháin ina dhiaidh sin (Tástáil A1). Comhthacaíonn an toradh seo le réamhfhianaise a thaispeánann nach bhfuil idirghabhálacha turgnamhacha éagsúla a sheachadtar ag an bpointe ama seo in ann cur isteach a thuilleadh ar athdhlúthú díspreagthach cuimhne15,16,24. Mar sin féin, tar éis seacht lá (Tástáil A2) bhí difríocht idir grúpaí, rud a thugann le tuiscint go bhfuil gníomhaíocht PKC sa cortex PL ag teastáil le go leanfadh an chuimhne chorraíoch athghníomhachtaithe. Tá an patrún torthaí seo (laghdú ar an am reo 7 lá ach ní 24h tar éis cóireála drugaí) ar aon dul leo siúd a thuairiscítear tar éis cosc ​​​​a chur ar choscóir sintéise próitéine isteach san amygdala basolateral13, coscaire cosáin ERK isteach sa hippocampus droma25, agus riarachán sistéamach de neamhshubstaintí. - coscaire PKC roghnach14.

Tuairiscíodh go coitianta go dtarlaíonn na próisis a bhaineann le buanseasmhacht cuimhne corraitheach, mar shampla an dara tonn de léiriú próitéine Arc san amygdala basolateral, suas le 12h tar éis é a athghníomhú. Chun imscrúdú breise a dhéanamh an bhfuil gníomhaíocht PKC sa cortex PL tábhachtach le haghaidh marthanachta cuimhne rinneadh measúnú ar na héifeachtaí cheleryth-rinereth i ngrúpaí neamhspleácha ainmhithe 9,12 nó 18h athghníomhachtú iar-chuimhne. Bhí laghdú de bharr drugaí-spreagtha ar an am reo i gcomparáid le rialuithe le linn Tástála A nuair a tugadh é 9 nó 12h tar éis athghníomhachtú cuimhne, ach ní 18h níos déanaí a thugann le fios go bhfuil an tréimhse lena linn a bhfuil an PLcortex PKCisinyolyedin marthanachta na n-imní gníomhachtaithe raonta cuimhne aversive ó 6 go. 12h. Is fiú a lua gur léirigh ainmhithe a ndearnadh cóireáil orthu le feithicil 18h tar éis athghníomhú cuimhne níos lú ama reo le linn Thástáil A, i gcomparáid lena seisiún athghníomhaithe, rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh foghlaim éagtha tarlú sa ghrúpa rialaithe. Is díol spéise é nár breathnaíodh an difríocht seo in ainmhithe cóireáilte le chelythrine. Tá ráthaítear staidéir sa todhchaí a sheiceáil cibé an mbíonn tionchar ag cosc ​​PL cortex PKC ar an bpróiseas díothaithe

Má bhíonn marthanacht cuimhneacháin PKCinvolvement ag brath ar athghníomhú cuimhne roimh ré (ie nochtadh gairid ar an gcomhthéacs riochtú), ansin bheadh ​​duine ag súil le haon athruithe ar mharthanacht cuimhne in ainmhithe a insíothlaítear cortex laistigh den PL le chelerythrine 6 h tar éis dóibh a bheith nochta do chomhthéacs neamhchoinníollach. . Go deimhin, níor tugadh faoi deara aon éifeachtaí coiscthe PKC nuair a fágadh athghníomhú cuimhne ar lár, léirigh toradh a d’aontaigh leo sin go spreagtar ionduchtú meicníochtaí a bhaineann le buanseasmhacht trí athghníomhachtú cuimhnei4.25:

Tá ról na n-isfhoirmeacha PKC traidisiúnta á fhiosrú le fada i bparaidímí díogrúla foghlama7-29. Le déanaí, díríodh ar an mbaint a d’fhéadfadh a bheith ag is-fhoirmeacha aitíopúla PKC áirithe, go háirithe PKMC, le marthanacht na gcuimhní cascacha nuafhaighte agus athghníomhaithe-33, Ag cur san áireamh go bhfuil cleamhnas ag an cheilitrin le haghaidh PKCisoforms aitíopúla agus traidisiúnta?.3435 , rinneadh turgnamh breise inar insileadh an roghnaíoch PKMCinhibitor ZIP cortex6 h laistigh den PL tar éis athghníomhachtú cuimhne. Bhí laghdú de bharr drugaí ar an am reo i gcomparáid le rialuithe le linn Thástáil A, agus Aa. araon a léiríonn riachtanas PKMC maidir le marthanacht cuimhne athghníomhaithe. Aontaíonn an toradh seo leo siúd a léiríonn go gcuireann insileadh ZIP isteach i réigiúin scoite inchinn eile isteach ar marthanacht cineálacha éagsúla cuimhní cinn nua-fhaighte. Rud atá tábhachtach, ós rud é go raibh éifeachtaí chelerythrine agus ZIP ar mharthanacht chuimhne comhchosúil, is dócha go ndearnadh idirghabháil ar ghníomhaíocht chelerythrine, go páirteach ar a laghad, trí chosc ar ghníomhaíocht PKMC, Cibé an cás, mar a thaispeántar le chelerythrine. Bhí athghníomhú cuimhne ag teastáil le haghaidh éifeachtaí ZIP. Tá an toradh seo an-ábhartha ós rud é gur tuairiscíodh go lagaíonn coiscthe PKMG in éagmais athghníomhaithe cuimhne a marthanacht-3439. Dúshlánaíodh sainiúlacht ZIP freisin, toisc go raibh sé in ann dochar a dhéanamh don chothabháil LTP i lucha cnagála PKM"9, agus bac a chur ar ghníomhaíocht isoform aitíopúla PKC ar a dtugtar PKC/λ³, nach bhfuil baint aige faoi láthair ach le céimeanna luatha cuimhne. Mar sin, d'fhéadfaí a mhaíomh go bhfuil baint ag éifeachtaí ZIP go páirteach le cosc ​​PKMC.Go deimhin, mar mheicníocht chúitimh, mhéadaigh lucha knockout do PKM léiriú PKC, rud a rinne idirghabháil ar an bpróiseas marthanachta cuimhne. , Inár staidéar níl na hainmhithe trasgenic, rud a fhágann gur lú an seans go mbeidh éifeachtaí spreagtha ZIP ag brath ar mheicníochtaí seachas iad siúd a ndéanann PKMC idirghabháil orthu.

Thuairiscigh staidéar go raibh éifeachtaí ZIP-spreagtha ag brath ar an tástáil tosaigh a tharla I lá tar éis a insileadh isteach san amygdala basolateral nuair a úsáideadh an t-imeall eagla2. Anseo, laghdaigh an infusion in-PILinfusion ofZIP6h tar éis athghníomhú cuimhne an slonn reo nuair a rinneadh na hainmhithe a atriail I nó 10 lá ina dhiaidh sin, rud a léiríonn nach bhfuil an t-am a chuaigh thart idir riarachán drugaí agus tástáil tosaigh ina fhachtóir lárnach a mbíonn tionchar aige ar ghníomh ZIP. Ina theannta sin, tugadh le fios go ndearna ZIP insileadh isteach sa choirtéis insile lagú ar dhiongbháilteacht chuimhne an tsóiteáin bhlais 1 mhí tar éis a insileadh24. Rinneamar imscrúdú ar an PL. éifeachtaí cortex ZIP ar bhuanseasmhacht cuimhne trí úsáid a bhaint as prótacal um riochtú eagla comhthéacsúil le seisiún taithíochta, ina bhfuil an méid a chuireann an cortex réamhéadanach medial le cuimhne fadtéarmach níos mó ná mar a dhéantar i bprótacail gan réamh-nochtadh don chomhthéacs atá le riocht4 , mar a úsáidtear sna hoibreacha sin3.Mar sin, d'fhéadfadh difríochtaí i bprótacail agus i réimsí na hinchinne inar insileadh ZIP cuntas a thabhairt ar na torthaí measctha a breathnaíodh.

Ní fios faoi láthair an bhfuil forluí ar mheicníochtaí athdhlúthaithe agus marthanachta sa cortex PL. Chun tús a chur le dul i ngleic leis an gceist seo, tugadh chelerythrine díreach tar éis athghníomhú cuimhne. Bhí laghdú de bharr drugaí ar an am reo i gcomparáid le rialuithe le linn Thástáil A, rud a thugann le tuiscint go mbíonn tionchar ag gníomhaíocht PKC freisin ar athdhlúthú cuimhne eagla comhthéacsúil. Aontaíonn an toradh seo leo siúd a léiríonn an tábhacht a bhaineann le gníomhaíocht PKC le linn athdhlúthú cuimhne i réigiúin inchinne eile43, agus an ranníocaíocht cortex PL chun cuimhní aversive a chomhdhlúthú .., Is fiú a lua go bhfuil an grúpa chelerythrine in éag freisin sed leibhéil reo níos ísle ná rialuithe faoi seach nuair tástáilte 7 agus 21 lá ina dhiaidh sin (Tástálacha A, agus A), toradh atá ar aon dul le staidéir a thaispeánann nach bhfuil baint ag idirghabhálacha atá dírithe ar an athchomhdhlúthú le gnéithe a bhaineann le díothú, amhail athshuíomh agus aisghabháil spontáineach na bunchuimhne eagla4. Ina theannta sin, léiríodh go dteastaíonn athghníomhú cuimhne roimh ré le héifeachtaí chelerythrine ar athdhlúthú.

Rinneadh imscrúdú freisin ar na héifeachtaí féideartha ar athdhlúthú cuimhne. Ní raibh aon athruithe de bharr drugaí ar an am reo i gcomparáid le rialuithe le linn Tástálacha A.A, agus Aa nuair a tugadh é díreach tar éis athghníomhachtú cuimhne, rud a thugann le tuiscint nach mbíonn tionchar ag cosc ​​ar an PKMC ag an bpointe ama seo sa cortex PL ar an

athdhlúthú ná marthanacht cuimhne athghníomhaithe. Tá sé molta go bhféadfadh ZIP bac a chur ar mheicníochtaí aisghabhála cuimhne agus athghníomhaithe go páirteach. Mar shampla, tá gáinneáil fo-aonad GluR2A gabhdóra AMPA isteach i synapses de bharr aisghabháil cuimhne agus tá sé riachtanach chun cuimhne a chomhdhlúthú --17. Ós rud é go bhfuil comhghaolú idir gníomh ZIP agus cosc ​​ar gháinneáil GluR2A, d'fhéadfadh go mbeadh lagú déanta ag an druga seo ar an athghníomhú cuimhne agus, dá bhrí sin, níor spreagtha go leor an próiseas athdhlúthaithe, rud a chuir cosc ​​​​ar ghníomhaíocht ZIP ó tharla, tá sé léirithe go bhfuil cosc ​​​​PKMC isteach CAI lagaithe athdhlúthú na cuimhne spásúlachta, Thairis sin. bhain feabhsú de bharr athdhlúthú ar ghníomhaíocht PKMC san amygdala le cuimhne eagla olfactory i bhfrancaigh óga a choinneáil. Tá sé sochreidte go bhféadfadh difríochtaí sna paraidím a úsáidtear (uirlis naprún de chuimhne spásúil vs. cuimhne eagla) cuntas a thabhairt ar na torthaí measctha a tuairiscíodh, Go deimhin. tá sé molta go gcoimeádann PKM( cuimhne eagla san amygdala basolateral3] agus an PL, cortex, ach nach bhfuil sa hipocampus droma3, cé go bhfuil an cheist seo fós faoi chaibidil. níos lú coinneála cuimhne i láthair ná cinn daoine fásta Anseo, chun aghaidh a thabhairt ar ról PKMC in athdhlúthú cuimhne, fuair grúpa eile francaigh insileadh ZIP isteach sa cortex PL 1h tar éis teacht ar an gcuimhne. breathnaíodh difríochtaí in iompar reo in ainmhithe cóireáilte go léir i gcomparáid le rialuithe, rud a thugann le tuiscint nach bhfuil aon éifeachtaí ag PKMinhibition ar athdhlúthú cuimhne ag an bpointe seo. Mar sin féin, bhí laghdú ar leibhéil reo i gcomparáid le rialuithe le linn tástálacha A, agus Ay , ag tabhairt le tuiscint go ndéanann PL cortex PKM( gníomhaíocht idirghabháil ar ghnéithe a bhaineann go sonrach le buanseasmhacht cuimhne chomh luath agus 1 h tar éis athghníomhú cuimhne, Tá an toradh seo comhsheasmhach leo siúd ón staidéar le Krawczyket al (2016P nuair a choinnigh an cosc ​​ar ERK1/2 sa hippocampus droma 3 h tar éis athghníomhú cuimhne an chuimhne eagla slán lá amháin ina dhiaidh sin ach go raibh lagú air nuair a attástáil na hainmhithe 7 lá ina dhiaidh sin, Go hiontach, léiríodh le déanaí go spreagann athghníomhú cuimhne meicníochtaí. a bhaineann le hathdhlúthú cuimhne agus marthanacht araoni725.

Le chéile, tugann na héifeachtaí chelerythrine-spreagtha ar athdhlúthú cuimhne agus an easpa éifeachtaí ZIP ar an gcéim chuimhne seo le fios go gcuireann PKC traidisiúnta le hathdhlúthú cuimhne agus PKC aitíopúla, mar PKMC, le haghaidh buanseasmhacht cuimhne tar éis athghníomhaithe, d'fhéadfadh staidéir amach anseo dul i ngleic leis na PKC tá baint ag isoforms i ngach próiseas cuimhne sa cortex PL. San iomlán, léiríonn torthaí láithreacha go bhfuil PL. Tá baint ag cortex PKCand PKMC le hathdhlúthú agus le buanseasmhacht cuimhne eagla comhthéacsúil athghníomhachtaithe. Ina theannta sin, léirigh torthaí láithreacha go bhfuil deis leathnaithe ann chun cuimhne eagla a mhaolú tar éis dheireadh na fuinneoige ama athdhlúthaithe.