Taighde ar Pholaisiúicrídí Cistanche ag Scagadh Fréamhacha Saor in Aisce

Tuilleadh eolais:ali.ma@wecistanche.com

Wang Guowei Zhao Fang

(Scoil na Ceimice agus na hInnealtóireachta Ceimiceach, Ollscoil Shihezi, Bóthar Beisi, Cathair Shihezi, Xinjiang 832000)

Keywords: Cistanche; polaisiúicríd Cistanche,polaisiúicrídón gcistinche; radacach saor in aisce

Táirgeann an comhlacht fréamhacha ocsaigin imoibríocha éagsúla (ROS) go leanúnach i bpróiseas meitibileacht ocsaídiúcháin de ghníomhaíochtaí saoil, ar táirgí idirmheánacha iad a tháirgtear trí imoibriú redox de mheitibileacht aeróbach an chorp daonna. Fuair ​​​​staidéir an farasbarr sinfréamhacha saor in aisceionsaí beatha substaintí macramóilíní agus organelles éagsúla, is cúis le damáistí éagsúla don chomhlacht ag an móilíneach, cheallacha, agus leibhéil orgán fíocháin, dlús a chur le próiseas aosaithe an chomhlachta agus aslú téachtáin fola, diaibéiteas, agus Atherosclerosis. , Tumors agus galair eile [1]. Toisc go bhfuil frithocsaídeoirí sintéiseithe go ceimiceach tocsaineach don chorp daonna, tá an cuardach le haghaidh frithocsaídeoirí nádúrtha le héifeachtacht ard agus tocsaineacht íseal a fhéadfaidh fréamhacha saor in aisce ocsaigine a scaveneáil tar éis éirí ina láthair te i réimsí na míochaine, an bhia agus na hinnealtóireachta ceimiceacha le blianta beaga anuas.

Cistanche [Cistanche deserticola (YC Ma.)]parasitizes den chuid is mó ar na fréamhacha na Tamarisk, Nitraria, agus Haloxylon ammodendron. Is leigheas Síneach annamh é i mo thír agus tugtar"Desert ginseng"[2]. Tá polaisiúicríd cistanche cistanche ar cheann de na príomh-chomhpháirteanna feidhmiúla bitheolaíocha decistéir, ach níor tuairiscíodh cé acu anpolaisiúicríd cistanche Tá éifeacht aige fréamhacha saor in aisce a scavening. Sa pháipéar seo, baineadh úsáid as an modh anailíse speictreach chun a chinneadhéifeacht scavening polaisiúicríd Cistanche ar fréamhacha saor in aisce anion superoxide, fréamhacha saor in aisce hiodrocsaile, Fréamhacha D PPH, agus fréamhacha saor ó ocsaigin singlet, ionaschun meastóireacht a dhéanamh ar a ghníomhaíocht frithocsaídeach. Bain úsáid iomlán as an acmhainn nádúrtha seo chun bonn eolaíoch a sholáthar.

Cliceáil go dtí an gas Cistanche le haghaidh radacach saor in aisce

Déanann an taighde seo staidéarCistánach polaisiúicrídin vitrofrithocsaídeachghníomhaíocht. Ag glacadh le haigéad ascorbic mar rialú, táirgeann imoibriú cosúil le Fenton fréamhacha saor in aisce hiodrocsaile, táirgeann uathocsaídiú dopamine anion superoxidefréamhacha saor in aisce, imoibriú fochlóirít sóidiam agus sárocsaíd hidrigine chun ocsaigin singlet, fréamhacha hiodraisín searbh défheinile a tháirgeadh mar mhúnla turgnamhach, ag baint úsáide as speictrófótiméadracht ultraivialait 2 Infheicthe agus modh anailíse chemiluminescence, den chéad uair chun éifeacht scavenging a chinneadh.Cistanche polaisiúicríde ar radacacha saor in aisce anion superoxide, fréamhacha saor in aisce hiodrocsaile, D PPH ·fréamhacha saor in aisce(fréamhacha défheinile hydrazino) agus ocsaigin singlet.Léirigh na torthaí go raibh éifeachtaí scavening soiléire ag polaisiúicrídí Cistanche ar na fréamhacha saor in aisce thuasluaite, agus bhí na héifeachtaí scavening comhghaolaithe go dearfach le tiúchan na polaisiúicrídí.

Gaireas agus imoibrithe: speictreafótaiméadar ultraivialait-infheicthe UV 22401 (Shimadzu Corporation, an tSeapáin); Lum ag luminometer feadán ultra-íogair LB9507 (Berthold Technologies, an Ghearmáin); R E252CS evaporator rothlacha (Shanghai Yarong Bithcheimiceach Co, Ltd) Monarcha Ionstraim); POT folctha uisce teocht tairiseach leictreonach HW 2SY (Jintan Xinhang Instrument Factory); méadar aigéadacht pH S23C (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.); D oigheann a thriomú i bhfolús ZF26020 (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.).

Sliocht Cistanchea cheannaítear ó Kuitun Medicinal Materials Corporation. Luminol (Luminol, Sigma, SAM), Dopamine (Institiúid Náisiúnta na Síne um Rialú Táirgí Cógaisíochta agus Bitheolaíochta), FeSO 4, ED TA, Vitimín C, H 2O 2, NaClO, Na2CO 3, NaHCO 3, etc. imoibrí anailíseach baile. Is é an t-uisce turgnamhach uisce driogtha ian-mhalartaithe.

Tá anemodh aistarraingthe dePolaisiúicrídí Cistanche: Tóg 30g depúdar cisteancheagus é a chur i bhfleascán 5{60-90mL Erlenmeyer, agus soak in éitear peitriliam (60-90 céim ), éitear agus codán toirte de thuaslagán eatánóil 80 faoin gcéad (30 céim ) ar feadh 6h, agus an t-iarmhar a ghalú go triomacht. . Bhí an t-iarmhar scagaire sáithithe in uisce ag cóimheas soladach-leachtach de 1:10 ar feadh 24 uair an chloig, agus téite ag 30 céim chun 100 min a bhaint as. Tar éis an t-eastóscadh a bheith críochnaithe, fuarthas an sásar trí lártheifneoiriú. Díríodh an snámhán faoi bhrú laghdaithe agus ansin deascadh trí 3 huaire toirte eatánóil 95 faoin gcéad a chur leis, seasamh ar feadh 24 uair an chloig ag 4 céim , an deascán a bhailiú tar éis lártheifneoraithe, agus a thriomú i bhfolús chun an polaisiúicríd cistanche Cistanche amh a fháil. Meáigh 1. 00g de pholaisiúicríd amh, é a thuaslagadh in uisce agus caolaigh go fleascán toirtmhéadrach 50ml, agus cuir ar leataobh le haghaidh tástála.

An tástáil ar polaisiúicríd cistanche ar superoxide radacach saor in aisce (O) cumas scavenging: an úsáid a bhaint as dopamine auto-ocsaídiúcháin a tháirgeadh superoxide radacach saor in aisce tástála anpolaisiúicríd cistanche ar scavenging radacach saor in aisce superoxidecumas [3]. Cuir 0.1mm olöL pH=10.12 leis an bpromhadán tirim agus céimnithe in ord, 3.0ml de mhaolán carbónáit, 3.0ml uisce, agus 0.5ml de thuaslagán samplach polaisiúicríde de thiúchan éagsúla, agus cuir i ndabhach uisce 30 é le haghaidh réamhthéamh ar feadh 5 nóiméad. Cuir 1.0mL de 2.{{0mm olöL dopamine leis réamhthéite i ndabhach uisce ag 3{{{1} céim , meascadh láithreach é, coinnigh an t-imoibriú ag 30 céim ar feadh 5 nóiméad, agus láithreach stop an t-imoibriú le 2 titeann de 10molöL HCl. Bain úsáid as maolán mar thagairt, tomhas an ionsúiteacht ag 221nm (Sampla A), cuireann an grúpa bán 0.5 mL uisce (A bán) in ionad an tsampla, agus cuireann an grúpa rialaithe 0.5 mL d'aigéad ascorbic in ionad an sampla. Déantar gach sampla a thástáil go comhthreomhar 3 huaire agus tógann sé a mheánluach. O ráta scavening radacach superoxide ( faoin gcéad )=(Sampla bán-A) öA bán × 100 faoin gcéad .

Turgnamh ar Chumas Scavening Pholaisiúicríd Cistanche ar ·OH Saor Radacach

Baineadh úsáid as an gcóras EDTA 2Fe (Ê) 2 meitiléine gorm 2H 2O 2 chun cumas naCistánach polaisiúicrídchun fréamhacha saor in aisce hiodrocsaile a shábháil. Is é an prionsabal ná go dtáirgeann imoibriú cosúil le Feton idir ED TA 2Fe(Ê) agus sárocsaíd hidrigine fréamhacha ·OH, rud a laghdaíonn buaic ionsúcháin sainiúil tuaslagán gorm meitiléine ag 660nm. I sraith feadáin tástála 12mL le stopalláin, cuir tuaslagán 5mm oLöL FeSO 4 1.{{20}}mL, tuaslagán 5mm oLöL EDTA 1.2mL, 0.{ {29}}3mol N aH 2 PO 4 2N a2H PO 4 (pH=7.4) tuaslagán maolánach 2 .0mL, tuaslagán sárocsaíd hidrigine 20mm olöL 1.3mL, tar éis croitheadh, cuir 0.2mm olöL meitiléine tuaslagán gorm 0.7mL, agus ansin cuir tiúchain éagsúla den tuaslagán tástála, vitimín C 1.0mL, agus caolaigh sé le huisce go 10. 00ml, tar éis meascadh, gor ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad, tomhas ionsúchán gach tuaslagáin ag 660nm, agus cuir uisce sa ghrúpa bán in ionad an réiteach samplach. Rinneadh tástáil ar gach sampla 3 huaire ag an am céanna, agus tógadh an meánluach. Ráta scavening radacach OH OH an tsampla ( faoin gcéad )=[(A 2-A 1) ö(A 0-A 1) × 100 faoin gcéad . San fhoirmle: A 0 - luach ionsúcháin an fheadáin gan damáiste; Luach ionsúite 1 - den fheadán damáiste; Luach ionsúite 2 - tar éis an sampla a chur leis.

Turgnamh ar chumas scavenging polaisiúicríd Cistanche ar D PPH Saor Radacach

Glac {{0}}.1 ml de thuaslagán polaisiúicríde Cistanche deserticola agus cuir leis é 5.0 mL de thuaslagán D PPH ·, measc go tapa, agus tar éis seasamh ar feadh 10 nóiméad ag teocht an tseomra, déan an déantar athrú ionsúcháin ag tonnfhad 517 nm a thomhas [4]. Rinneadh tástáil ar gach sampla 3 huaire ag an am céanna, agus tógadh an meánluach. Ráta imréitigh an tsampla de D PPH · ( ​​faoin gcéad )=1- [(AB) öA 0] × 100 faoin gcéad .

San fhoirmle: A 0 - luach ionsúcháin D PPH gan suimiú sampla (1.9mL D PPH móide 0.1 mL 50 faoin gcéad eatánól); A - luach ionsúcháin tar éis an imoibrithe idir sampla agus D PPH; b - bán Luach ionsúcháin an tsampla (sampla 0.1mL móide 1. 9mL 50 faoin gcéad eatánól).

Tástáil singil scavening ocsaigine 1O 2 polaisiúicríd Cistanche

Déantar ocsaigin Singlet (1O 2) a tháirgeadh ag an imoibriú ceimiceach idir NaClO agus H 2O 2 ag 37 céim [5]. Is é an réiteach a úsáidtear chun 1O 2 a chinneadh ná 100L 2. 8mm olöL NaClO réiteach, 400L 5mm olöL réiteach NaOH, 300L 10mm olöL H 2O 2 réitigh, 50L 1mm olöL réiteach Luminol. Le linn an imoibrithe, cuirtear an réiteach imoibrithe leis an réiteach samplach, agus déanann an anailísí chemiluminescence an próiseas imoibrithe a thaifeadadh go huathoibríoch ag an am céanna. Glac NaClO 2H 2O 2 2N NaOH 2 Luminol mar rialú bán. Tosaigh an t-imoibriú, agus cuir an réiteach imoibrithe ó thaiscumar na hionstraime chemiluminescence chuig an bhfeadán samplach de réir an méid atá leagtha síos ag an gclár. Ina dhiaidh sin, taifeadadh déine chemiluminescence an mheascáin imoibrithe ar an bpáipéar taifeadta gach 5s, agus tomhaiseadh gach sampla comhthreomhar 3 huaire, agus tógadh an meánluach. Ríomhtar an ráta imréitigh de réir na foirmle seo a leanas: ráta imréitigh ( faoin gcéad )=(déine lonrúil-sampla déine lonrúil a rialú) ö déine lonrúil × 100 faoin gcéad 3 a rialú.

Éifeacht scavening na polaisiúicrídí cistanche ar fréamhacha saor in aisce superoxide

Tá nádúr ceimiceach na bhfréamhacha saor in aisce superoxide gníomhach, rud a d'fhéadfadh sárocsaídí a tháirgeadh ag aigéid shailleacha ar an mbithscannán, rud a scriosann cealla [6]. Sa pháipéar seo, baineadh úsáid as an modh dopamine chun cumas scavenging fréamhacha saor in aisce superoxide a chinneadh. Féach Fíor 1 le haghaidhcumas scavenging Cistanche ar fréamhacha saor in aisce superoxide.Léirigh na torthaí go:Is féidir le polaisiúicrídí cistanche bac a chur ar na fréamhacha saor ó shárocsaíd a tháirgteartrí uath-ocsaídiú dopamine, agus laistigh den raon tiúchana tomhaiste (0-8m gömL), méadaíonn sé le méadú ar an tiúchan, ach tá an cumas scavenging níos ísle ná sin an aigéad ascorbic.

Éifeacht scavening na polaisiúicríde cistanche OH superoxide radacach saor in aisce

Tá radacach superoxide OH ar cheann de na fréamhacha saor ó ocsaigine is gníomhaí in ocsaigin gníomhach. Is féidir leis freagairt le beagnach aon mhacramóilín bitheolaíoch i gcealla beo, rud a d'fhéadfadh sárocsaídiú lipid fíocháin chomhlachta, polaiméiriú próitéine, agus depolymerization, ilroinnt aigéid núicléacha, etc. Spreagann an próiseas bithcheimiceach paiteolaíocht cille fíocháin, rud a fhágann go dtarlóidh galair éagsúla agus dlús a chur le dul in aois an chomhlachta [7]. Léiríonn Fíor 2 cumas scavenging na polaisiúicrídí cistanche ar fréamhacha saor in aisce superoxide OH. Léiríonn na torthaí turgnamhacha gotá éifeacht mhaith ag polaisiúicríd Cistanche ar ·OHfréamhacha saor in aisce,agus méadaíonn sé le méadú ar an tiúchan.

Cumas scavenging polaisiúicríd cistanche Cistanche ar radacach saor in aisce D PPH

Is radacach cobhsaí saor in aisce é D PPH radacach (radacach hydrazino diphenyl-searbh), atá corcra i dtuaslagóirí orgánacha agus tá ionsú láidir aige in aice le 517nm. Tar éis frithocsaídeoirí a chur leis, déanfar cuid de na fréamhacha saor in aisce a dhíchur agus déanfar an ionsú a lagú, ar féidir é a úsáid chun gníomhaíocht frithocsaídeach na substainte a mheas [8]. Léirítear cumas scavenging polaisiúicrídí Cistanche ar Fréamhacha saor in aisce D PPH i bhFíor 3. Léiríonn na torthaí turgnamhacha go bhfuil cumas scavenging polaisiúicríd Cistanche deserticola ar fréamhacha saor in aisce D PPH comhghaolú go dearfach lena tiúchan, agus tá an cumas scavenging níos mó ná sin de aigéad ascorbic.

Cumas scavenging na polaisiúicrídí cistanche ar 1O 2 fréamhacha saor in aisce

Is ocsaigin mhóilíneach corraithe é ocsaigin Singlet le hairíonna gníomhacha ceimiceacha. Ós rud é go bhfuil claonadh ag leictreoin neamhphéireáilte péireáil, léiríonn fréamhacha saor in aisce airíonna ceimiceacha níos gníomhaí [9]. Léiríonn Fíor 4 cumas scavenging polaisiúicríd Cistanche deserticola ar 1O 2 fréamhacha saor in aisce. Léiríonn na torthaí turgnamhacha go bhfuil cumas naPolaisiúicrídí Cistanchetá ocsaigin singil níos ísle ná an aigéad ascorbic sa raon {{0}}.0m gömL. Nuair a bhíonn an tiúchan níos mó ná 4.0m gömL, tá cumas a bhaint polaisiúicrídí cistanche Cistanche níos mó ná sin d'aigéad ascorbic.

Mar fhocal scoir: Trí chórais éagsúla radacacha imoibríocha saor ó ocsaigine, rinneadh mionstaidéar ar ghníomhaíocht frithocsaídeach in vitro de pholaisiúicríd Cistanche. Is féidir a fheiceáil ó thorthaí an turgnaimh go bhfuil éifeachtaí scavening ag sliocht polaisiúicríde Cistanche laistigh den raon tiúchana tástála ar fhréamhacha saor in aisce superoxide O, OH fréamhacha saor in aisce superoxide, fréamhacha saor in aisce D PPH, agus 1 O 2 fréamhacha saor in aisce. Níl na héifeachtaí mar an gcéanna. Léirigh na torthaí gur frithocsaídeoir nádúrtha exogenous éifeachtach é polaisiúicríd Cistanche, ar fiú tuilleadh taighde, forbairt agus úsáid chuimsitheach é.

tagairtí

[1] Ling Guanting. Frithocsaídeach bia agus sláinte [M]. Beijing: Chemical Industry Press, 2004. 1-58.

[2] Gao Ming, Tian Ziyu, Cai Hongmei, etc. Eastóscadh alcaileach agus anailís cheimiceach ar pholaisiúicrídí Cistanche deserticola[J]. Talmhaíocht, Eolaíocht agus Teicneolaíocht Bhia, 2008, 2 (3): 32-34.

[3] Shi Shuangqun, Song Xinfang. Uathocsaídiú dopamine[J]. Journal of Hebei Normal University, 1997, 21(4): 387-389.

[4] Zhang Zhiqing, Tian Yingjuan, Zhang Jing. Staidéar ar Ghníomhaíocht Frithocsaídeach de Pholaisiúicrídí Radix[J]. Sínis Materia Medica, 2008, 31(2): 268-271.

[5] Li Haiping, Zhang Shuhai, Zhang Chunsheng. Staidéar ar Ghníomhaíocht Frithocsaídeach Polaisiúicríde ó Pleurotus ostreatus [J]. Taighde agus Forbairt Bia, 2008, 29(4): 56-60.

[6] Mo Jian. Réamhrá ar Bhitheolaíocht na Saorfhréamhacha Leighis [M]. Béising: Teach Foilsitheoireachta Míochaine an Phobail, 1989. 21-25.

[7] F Frederick V L. Saorfhréamhacha [J ]. Ceimic Chliniciúil, 1993, 65 (12): 374—377.

[8] M ag suda M, N agaham a Y, Sato T et a l. Is Géin Fhearainn DM Sonrach é DM Y atá ag Teastáil chun Fireann a Fhorbairt in Iasc Medaka [J ]. Dúlra, 2002, 30: 559—563.

[9] Kanofsky J R. Táirgeadh Ocsaigin Singlet ag L actoperoxidase[J ]. Iris na Ceimice Bitheolaíochta, 1983, 258 (10): 5991-5993.