Ionduchtú Mear na Díolúine Chosanta i gCoinne Pláta Le Yersinia Pestis Polymeric F1 Agus Antaiginí LcrV

Coimriú:

I staidéar a rinneadh le déanaí, léirigh muid gur tharla vacsaíniú leis an antaigin polaiméire capsule F1 den phataigin plague Yersinia pestis go ionduchtaíodh freagairt imdhíonachta humoral cosanta go tapa trí ghníomhachtú ríthábhachtach cealla B1b dúchasacha. Os a choinne sin, theip ar an leagan monaiméireach de F1 ainmhithe vacsaínithe a chosaint go pras sa mhúnla seo den phlá bubonic. Sa staidéar seo, scrúdaíomar cumas F1 chun imdhíonacht chosanta a thabhairt go tapa sa tsamhail luiche is dúshlánaí den phlá niúmóine. Mar thoradh ar vacsaíniú le dáileog amháin de F1 arna asú ar hiodrocsaíd alúmanaim fuarthas cosaint éifeachtach i gcoinne nochtadh marfach intranasal ina dhiaidh sin do phéine Y. pestis iomlán borb laistigh de sheachtain. Díol spéise é gur ghiorraigh an t-antaigin LcrV an t-am a bhí riachtanach chun imdhíonacht chosanta thapa a bhaint amach go 4-5 lá tar éis an vacsaínithe. Mar a fuarthas roimhe seo, bhí struchtúr polaiméire F1 riachtanach chun an fhreagairt chosanta luathaithe a breathnaíodh trí vacsaíniú le LcrV a thabhairt. Mar fhocal scoir, i staidéar fad saoil, d'eascair freagairt ghreannmhar níos airde agus níos comhionann ná vacsaíniú comhchosúil le monaiméir F1 mar thoradh ar vacsaíniú aonair le F1 polaiméire. Sa suíomh seo, áfach, athdhearbhaíodh an méid a chuireann LcrV le himdhíonacht fhadtéarmach in aghaidh dúshlán marfach scamhógach.

Tá gaol dlúth idir freagairtí imdhíonachta humoral cosanta agus díolúine. Is é an freagra imdhíonachta humoral cosanta ná freagra cosanta an chomhlachta i gcoinne pataiginí eachtracha, a bhfuil antasubstaintí rannpháirteach go príomha. Tagraíonn díolúine do chumas an chomhlachta seasamh in aghaidh ionradh pataiginí eachtracha. Is féidir leis an bhfreagra imdhíonachta humoral cosanta éifeacht marú na gcealla imdhíonachta a chur chun cinn, friotaíocht an chomhlachta a fheabhsú, agus mar sin díolúine a fheabhsú. Ina theannta sin, is féidir leis an bhfreagra imdhíonachta humoral cosanta freisin cothromaíocht an chórais imdhíonachta a rialáil, gníomhaíocht an chórais imdhíonachta a rialú, agus ró-imoibriú agus galair uath-imdhíonachta a sheachaint. Dá bhrí sin, tá freagairt imdhíonachta humoral cosanta riachtanach chun sláinte an chomhlachta a chothabháil agus díolúine a fheabhsú. Ina theannta sin, tá díolúine daonna an-tábhachtach freisin, rud a d'fhéadfadh cosc ​​​​a chur orainn ó víris a ionsaí. Is féidir le Cistanche díolúine a fheabhsú. Tá Cistanche saibhir i substaintí frithocsaídeacha éagsúla, mar shampla vitimín C, vitimín C, carotenoidí, etc. Is féidir leis na comhábhair seo fréamhacha saor in aisce a scavenge, Strus ocsaídiúcháin a laghdú agus friotaíocht an chórais imdhíonachta a fheabhsú.

Cliceáil sochair cistanche tubulosa

Eochairfhocail:

vacsaíniú ; plá niúmóine; cosaint tapa; polaiméireach F1; monaiméireach F1; LcrV; samhail luch.

1. Réamhrá

Is é an baictéar Gram-diúltach Yersinia pestis an gníomhaire etiologic de phlá bubonic agus neomónach. Tá na céadta milliún tar éis géilleadh mar gheall ar nádúr marfach na n-ionfhabhtuithe a rinne an pataigin thubaisteach seo i dtrí mhórphaindéim agus i roinnt ráigeanna áitiúla a taifeadadh le dhá mhílaois anuas [1,2]. Mar gheall ar a ionfhabhtaíocht ard agus a mharfacht, tá Y. pestis aicmithe mar oibreán féideartha bioterrorism (https://www.cdc.gov/plague/ bioterrorism/index.html, ar rochtain an 9 Iúil 2021). Ó aimsíodh antaibheathaigh agus go n-úsáidtear go forleathan iad, tá laghdú mór tagtha ar leitheadúlacht agus ar bhásmhaireacht na bplá [3,4].

Mar sin féin, tá teorainneacha ag baint le teiripe antaibheathach in aghaidh na plá; Chun a bheith éifeachtach, ní mór an chóireáil a thabhairt go gairid tar éis tosú na hairíonna atá, ar dtús, cosúil leis na cinn a bhaineann le hionfhabhtú riospráide uachtarach coiteann agus dá bhrí sin is minic a dhéantar mídhiagnóisiú orthu. D’fhéadfadh aon mhoill ar riaradh antaibheathach a bhaineann go sonrach le teiripe plánaí dochar a dhéanamh dá n-éifeachtacht agus d’fhéadfadh básmhaireacht shuntasach i measc daoine aonair cóireáilte a bheith mar thoradh air [5]. Tá gá le forbairt frithbhearta breise mar gheall ar leithlisiú tréithchineálacha Y. pestis borrtha le déanaí atá frithsheasmhach in aghaidh il-antaibheathaigh, lena n-áirítear iad siúd a mholtar le haghaidh teiripe, agus an imní go bhféadfaí feinitíopaí athraithe den sórt sin a thabhairt isteach go mailíseach i tréithchineálacha borrtha le haghaidh cogaíochta bitheolaíocha nó bithsceimhlitheoireachta [6–8]. . Go deimhin, léiríonn cur i bhfeidhm antaibheathach dara líne le déanaí, módúlachtaí teiripeacha breise, agus an teaglaim de theiripe antaibheathach agus phage torthaí gealltanais i múnla luiche an phlá niúmóine [9,10].

Léirigh muid le déanaí ag baint úsáide as múnla luiche an phlá bubonic go n-eascraíonn riarachán an antigen capsular F1 de Y. pestis díolúine cosanta laistigh de laethanta agus, dá bhrí sin, is féidir leis feidhmiú mar idirghabháil theiripeach chun an galar a chosc [11,12]. Bhí gníomhachtú tapa na gcealla B1b dúchasacha a bhfuil cónaí orthu sna cuais peritoneal agus pleural i gceist leis an tosú tapa cosanta seo, rud a d'eascair táirgeadh antasubstaintí frith-F1 IgM agus IgG [11,12]. Bhí struchtúr polaiméire F1 riachtanach le haghaidh ionduchtú tapa díolúine frith-phlá, mar a léiríodh sa bhreathnóireacht, contrártha le polaiméire F1, gur theip ar phróitéin F1 iomalartaithe ciorclach monaiméirí monaiméireach (monoF1) a chomhcheangal le cealla peritoneal B1b díreach tar éis an imdhíonta, agus dá réir sin, cuireadh moill ar tháirgeadh antasubstaintí frith-F1 [12]. Sa staidéar seo, ag baint úsáide as múnla luch d'ionfhabhtú intranasal Y. pestis, rinneamar scrúdú ar chumas an antigen F1 díolúine cosanta tapa a sholáthar i gcoinne plá niúmóine, rud a léiríonn an léiriú is déine den ghalar.

Deimhníonn an staidéar seo, mar atá i gcás imdhíonacht bubonic ó phlá, go raibh nádúr polaiméire F1 riachtanach le haghaidh imdhíonacht thapa agus fhadmharthanach tar éis vacsaínithe le dáileog amháin den antigen. Ós rud é gurb ionann antaiginí F1 agus LcrV agus na vacsaíní fo-aonaid frith-phlá is dóichí agus gur léiríodh go n-eascraíonn siad imdhíonacht chosanta tapa i múnla luiche den phlá niúmóine [13], leathnaíomar an staidéar seo trí aghaidh a thabhairt ar an bhféidearthacht go bhféadfaí an chosaint in aghaidh a bhrostú a thuilleadh. plá niúmónach ag F1 comhcheangailte le foirmiú LcrV.

2. Ábhair agus Modhanna

2.1. Ráiteas Eitice

Rinneadh an staidéar seo i gcomhréir dhlúth leis na moltaí maidir le Cúram agus Úsáid Ainmhithe Saotharlainne na hInstitiúide Náisiúnta Sláinte. Rinne dlí Iosrael na turgnaimh ainmhithe go léir agus cheadaigh an Coiste Eitice do thurgnaimh ainmhithe iad ag an Institiúid Iosrael um Thaighde Bitheolaíochta (Uimhreacha Ceada: IACUC-IIBR M-50-18, IACUC-IIBR M-36-19, IACUCC. -IIBR M-64-19, IACUC-IIBR M-73-20). Tar éis an dúshlán intranasal, rinneadh monatóireacht laethúil ar na lucha. Baineadh úsáid as críochphointí daonna inár staidéir marthanais. Rinneadh lucha a léirigh cailleadh an athfhillteach ceartaithe a eotanú trí dhíshuíomh an cheirbheacs.

2.2. Ainmhithe

Ceannaíodh lucha baineanna inbred C67BL/6 ó sé go hocht seachtaine d'aois ó Envigo (Iarúsailéim, Iosrael). Ceannaíodh CDanna fireanna agus baineanna den aois chéanna ó Charles River (RA).

2.3. Imdhíonadh Ainmhithe le Antaiginí Íonaithe

PolyF1: Rinneadh an próitéin polaiméire F1 a íonú ó shárchultúr na gcealla E. coli ag cur in iúl cai1 operon an Y. pestis Kimberley53 brú, mar a thuairiscítear roimhe seo i [14]. Cinneadh go raibh meáchan móilíneach F1 íonaithe níos airde ná 1000 kDa de réir crómatagrafaíocht eisiata méide ag baint úsáide as colún Superdex 200 (Cytiva, MA, SAM).

MonoF1: ​​Fuarthas an códú plasmid pAH34L don mhonaiméir F1 (cpCaf1) go cineálta ón Dr Daniel Peters agus an tOllamh Jeremy H. Lakey, Ollscoil Newcastle, an RA [15]. Tugadh pAH34L isteach i Lemo21 (DE3) E. coli a ceannaíodh ó New England Biolabs (Ipswich, MA, SAM). Fásadh claochladáin a roghnaíodh go randamach ag 37 ◦C agus 220 rpm i brat iontach agus forlíonta le ampicillin (200 µg/mL). Spreagadh an léiriú i lár an loga trí isopropil -thiogalactopyranoside (IPTG; 1 mM), agus goradh na cultúir ina dhiaidh sin ag 18 ◦C agus 220 rpm ar feadh 19 h breise. Rinneadh millíní baictéaracha (meáchan fliuch) a mheá agus iad a thuaslagadh le himoibrí lysis cille CelLytic™ B de réir threoracha an déantóra (Merck-Sigma, Rehovot, Iosrael).

Rinneadh an próitéin chomhleá athchuingreach Tol3-cpCaf1 a íonú trí chrómatagrafaíocht leacht brú éascaithe (PFLC) ar cholún HisTrap™ HP de réir threoirlínte an déantóra (Cytiva, MA, SAM). Scaradh an chuid Tol3 ó cpCaf1 trí scoilteacht le trombin (Merck-Sigma, Rehovot, Iosrael) agus ath-ionsú an chéad cheann ar cholún HisTrap™ HP athghinte. Bailíodh an moiety cpCaf1 (monoF1) ón gcodán sreabhadh tríd agus dialyzed go forleathan i gcoinne 1 × PBS. Baineadh endotoxins trí mhodh deighilte chéim Triton X-114, mar a thuairiscítear roimhe seo in [16]. Rinneadh cainníocht próitéine a thomhas ag baint úsáide as an modh aigéad bicinchoninic (Pierce™ BCA Protein Assay Kit, Thermo). Fíoraíodh íonacht an monaiméireach F1 ag SDS-PAGE agus ina dhiaidh sin staining gorm Coomassie agus trí anailís blot an Iarthair ag baint úsáide as antasubstaintí frith-F1 coinín, mar a thuairiscítear roimhe seo i [11].

LcrV: Clónáladh an seicheamh códaithe LcrV lán-fhad ón bpéine borrtha Y. pestis Kimberley53 isteach sa veicteoir slonn pGEX (GE Healthcare, Chicago, IL, USA) agus tugadh isteach é i gcealla E. coli. Fuarthas amach go raibh an seicheamh códaithe LcrV comhionann le LcrV an phéine Y. pestis CO92. Rinneadh LcrV athchuingreach a tháirgeadh agus a íonú mar a thuairisc Leary et al. [17]. Baineadh endotoxins de LcrV íonaithe mar a thuairiscítear thuas.

Asaithe iomlán de 20 go 160 µg de polyF1 agus LcrV nó 80 µg de monoF1 ar 2 faoin gcéad glóthach alúmanam-hiodrocsaíd (AlOH) (Brennentag Bithearnáil, an Danmhairg) go tiúchan deiridh de 0.36 faoin gcéad . Rinneadh imdhíonadh ar lucha aonair go subcutaneously ag baint úsáide as toirt tairiseach de 200 µL a tugadh ar an ais íochtair.

2.4. Tréithriú na Freagra Séareolaíochta

Bhí lucha eireaball-bled, agus chinn ELISA titers aonair IgG a ghintear i gcoinne F1 agus LcrV sa serum, mar a tuairiscíodh roimhe seo i [11]. Tomhaiseadh titers IgG1 agus IgG3 ag baint úsáide as antasubstaintí frith-luch gabhar alcaileach fosfatase-chomhchuingeach alcaileach sainiúil (Jackson Laboratories, Farmington, CT, SAM).

Soitheach bronchoalveolar (BAL): Rinneadh lucha a ainéistéisiú le tuaslagán cetamine/xylazine, agus nochtaíodh an traicé, ag déanamh thar a bheith cúramach gan aon fhuil a chur faoi deara. Rinneadh incis bheag, agus cuireadh {{{0}}cannula sholúbtha tomhsaire (BD Neoflon™) isteach agus daingnigh uaim máinliachta é. Niteadh na scamhóga le 1 × PBS ag baint úsáide as steallaire luer-glas 1 ml a bhí ceangailte leis an cannula daingnithe. Caitheadh ​​amach leacht lavage a bhí éillithe le haon chomhartha fola. Glanadh an leacht níocháin trí lártheifneoiriú (400 × g, 4 ◦C), agus rinneadh an comhshnaidhm a scagadh go steiriúil roimh ELISA. Cinneadh tiúchain antasubstainte frith-F1 agus frith-LcrV i sreabhán BAL (BALF) d'ainmhithe vacsaínithe trí úsáid a bhaint as Mab 57 (F1) caolaithe agus Mab 59 (LcrV) a tuairiscíodh roimhe seo i [18] mar chuair chaighdeánacha san áireamh i ngach {{14} }pláta tástála tobair. Socraíodh gurb iad na teorainneacha braite (LODs) le haghaidh antasubstaintí frith-F1 IgG agus frith-LcrV sa BALF ná 0.8 ng/mL agus 0.15 ng/mL, faoi seach.

2.5. Ionfhabhtú Luiche

Rinneadh ionfhabhtuithe intranasal (in) mar a thuairiscítear roimhe seo i [19]. Go hachomair, baineadh agus caolaíodh lúb iomlán de choilíneachtaí baictéaracha tipiciúil Y. pestis Kim53 i brat insileadh croí (HIB, Difco) arna fhorlíonadh le 0.2 faoin gcéad xylose agus 2.5 mM CaCl2 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) chuig OD660 de 0.01 agus fásadh é ar feadh 22 uair ag 28 ◦C agus 100 rpm. Ag deireadh na tréimhse goir (OD660 ≈ 4), nite agus caolaíodh an cultúr i saline (0.9 faoin gcéad NaCl) go dtí an dáileog ionfhabhtaíoch inmhianaithe a fíoraíodh trí aonaid fhoirmithe coilíneachta a chomhaireamh tar éis plating agus gor ar phlátaí BHIA (48 h). ag 28 ◦C). Rinneadh ainéistéitic ar lucha le meascán de 0.5 faoin gcéad ketamine HCl agus 0.1 faoin gcéad xylazine agus ansin ionfhabhtaíodh go hinmheánach le 35 µL/luch den fhionraí baictéarach. Is é LD50 intranasal an strain Kim53 i dtreo C57BL/6 lucha ná 1100 cfu agus 2100 cfu i dtreo lucha CD-1. Ríomhadh na luachanna LD50 de réir an mhodha a thuairiscítear ag Reed agus Muench [20]. Rinneadh monatóireacht laethúil ar ghalracht agus ar bhásmhaireacht luiche ar feadh 21 lá. Ag deireadh na tréimhse seo, fíoraíodh imréiteach na pataigin trí aonchineálacha spleen a bhreacadh ó ainmhithe marthanacha ar phlátaí BHIA arna fhorlíonadh le 200 µg/ml streptomycin (48 h ag 28 ◦C).

2.6. Tréithriú Múnla Luiche an Phlá Pneumónach

Rinneadh ainéistéitic ar lucha a bhí ionfhabhtaithe laistigh den nasal ag an bpointe ama a tugadh le fios tar éis an nochta le tuaslagán cetimín/xylazine, agus tarraingíodh fuil heparinized le piontú croí. Ina dhiaidh sin, rinneadh an nód limfe mediastinal (mdLN), na scamhóga, agus an spleen a dhíbirt agus a bhrú chuig fionraí aonchealla ar mhogalra níolón 70 µm (sreangán cille, Falcon, Corning, NY, SAM) i 1 × PBS . Cinneadh an líon Y. pestis Kim53 sna horgáin agus san fhuil éagsúla trí fhionraí cille caolaithe go srathach a phlátáil ar phlátaí BHIA arna bhforlíonadh le streiptimícin 200 µg/ml. Le haghaidh anailíse histeolaíochta, rinneadh ainéistéiseach ar lucha, agus rinneadh a gcuid traicé a chanáil mar a léirítear thuas. Bhí colún (0.7 × 30 cm, KONTES, St. Louis, MO, SAM) líonta le tuaslagán formaildéad maolánach (10 faoin gcéad conc deiridh) ceangailte leis an cannula, agus ní raibh na scamhóga "teannta" ach amháin trí dhomhantarraingt. Coinníodh na scamhóga a bhí líonta le fostóirí sa mhaolán céanna ar feadh 14 lá agus ansin próiseáladh iad chun bloic leabaithe pairifín a dhéanamh. Bhí ranna aon- go trí mhicriméadar daite le smál caighdeánach eóisin/hematocsailín (H&E) agus le trealamh staining Masson-Goldner (Merck, Rehovot, Iosrael) chun fiobróis a bhrath. Ina theannta sin, rinneadh na hailt scamhóg a dhathú le haghaidh Y. pestis ag baint úsáide as antasubstaintí frith-F1 IgG coinín (1:10,000) agus an trealamh Histostain®-SP (ZYMED®, Invitrogen, Waltham, MA, SAM). ). Rinneadh íomhánna daite a íomháú ag baint úsáide as ceamara ICC3 i dteannta le micreascóp Axioscope A1 (Zeiss, an Ghearmáin).

2.7. Anailís staitistiúil

Chinn Kruskal-Wallis neamhparaiméadrach an tsuntas a taifeadadh i lucha a bhain le níos mó ná dhá ghrúpa le tástáil post hoc Dunn. Baineadh úsáid as an tástáil log-rang (Mantel-Cox) chun comparáid a dhéanamh idir na cuair mharthanais a fuarthas sna grúpaí vacsaínithe éagsúla. Measadh go raibh difríochtaí suntasacha má tá p Níos lú ná nó cothrom le 0.05. Rinneadh ríomhanna ag baint úsáide as bogearraí GraphPad Prism.

3. Torthaí

I staidéar roimhe seo, léirigh muid go raibh sé mar thoradh ar vacsaíniú lucha leis an bhfoirm pholaiméireach dhúchasach den antigen capsular F1 de Yersinia pestis go bhfuarthas cosaint tapa ar an bplá bubonic. Dá réir sin, moladh go bhféadfaí riarachán F1 a mheas ní hamháin mar bheart próifiolacsach ach freisin mar idirghabháil theiripeach i gcásanna éigeandála amhail ráigeanna a bhaineann le tréithchineálacha atá frithsheasmhach in aghaidh antaibheathach a tharlaíonn go nádúrtha nó a ndearnadh innealtóireacht mhailíseach orthu [12]. Sa tuarascáil seo, rinneadh ceistiú ar dhíspreagadh cosanta tapa i gcás plá niúmóine ag baint úsáide as an tsamhail murine seanbhunaithe arb éard atá ann lucha a nochtadh don phataigin trí ionaclú ionaclaithe. Taispeánadh go gcaomhnaíonn an tsamhail seo an pataigineacht arb iad is sainairíonna é léirithe riospráide de phlá niúmóine príomhúil (Fíor Forlíontach S1) [10,19,21-24].

3.1. Imdhíonacht Mhearchosanta arna Soláthar ag F1 agus LcrV i Múnla Luiche an Phlá Neomónach

Tástáladh cumas antaigin F1 chun cosaint thapa a fháil trí thurgnaimh inar vacsaíníodh lucha C57BL/6 trí riar amháin de polyF1 (20, 80, agus 160 µg/luch) arna ionsú ag AlOH, agus níor cuireadh instealladh ach amháin d’ainmhithe rialaithe le an aidiúvach. Rinneadh measúnú ar chumas na lucha vacsaínithe chun maireachtáil ar ionfhabhtú marfach infhéitheach leis an brú borrtha Y. pestis Kim53 (10LD50=11,000 cfu) trí agus seacht lá tar éis an vacsaínithe i gcomparáid le hainmhithe rialaithe (Fíor 1 ). Tar éis trí lá, níor breathnaíodh ach síneadh measartha ar an am chun báis agus marthanais (a raibh tábhacht mhíshásúil leis ó thaobh staitistice) (Fíor 1A). Tríd an am idir vacsaíniú agus dúshlán a shíneadh faoi 4 lá eile (7 lá san iomlán) bhíothas in ann gach lucha a vacsaíníodh leis na dáileoga arda de polyF1 (80 agus 160 µg/luch) a tharrtháil chomh maith le 87 faoin gcéad de na lucha a vacsaíníodh leis an. dáileog íseal de polyF1 (Fíor 1B).

Spreag cumas antaigin F1 freagairt imdhíonachta tapa cosanta a spreagadh i gcoinne an phlá niúmóine dúinn scrúdú a dhéanamh an gcuirfeadh imdhíonadh le hantaigin chosanta breise, LcrV, feabhas breise ar staid imdhíonachta na n-ainmhithe trí thús na himdhíonachta cosanta a bhrostú. Go deimhin, nuair a rinneadh an dúshlán marfach Y. pestis 3 lá tar éis an vacsaínithe comhcheangailte, bhí riaradh foirmiú measctha LcrV agus polyF1 (80 µg nó 160 µg de gach ceann de na hantaiginí) in ann 30-50 faoin gcéad de na hantaiginí a tharrtháil. lucha (Fíor 1C). Go háirithe, thug síneadh na tréimhse idir vacsaíniú agus dúshlán go seacht lá cosaint iomlán do gach ainmhí vacsaínithe ag gach dáileog de na hantaiginí (Fíor 1D). Níor cuireadh isteach ar chumas polyF1 ina n-aonar nó i gcomhcheangal le LcrV díolúine tapa cosanta a bhronnadh i gcoinne an phlá niúmóine laistigh de sheachtain trí mhéadú ar an dáileog dúshlánach de nochtadh intranasal faoi dheichniúr (Fíor 1E), rud a dhearbhaíonn stóinseacht an stáit chosanta.

3.2. Cinéitic na Freagra Humoral Tar éis Vacsaínithe le F1 agus LcrV

Thug an tuairim gur spreag an vacsaín LcrV agus F1 le chéile imdhíonacht chosanta thapa le fios go bhfuarthas freagra greannach go gairid ina dhiaidh sin. Chun aghaidh a thabhairt ar an bhféidearthacht seo agus chun a chinneadh cé chomh mór agus a chuireann an freagra humoral i gcoinne gach ceann de na antaiginí le cosaint i gcoinne Y. pestis, rinneadh anailís ar chinéitic na n-antasubstaintí sonracha IgG a ghintear i gcoinne an dá antaigin aonair 5-9 lá tar éis vacsaíniú aon-dáileog. de lucha C57BL/6 le foirmliú measctha de polyF1 agus LcrV (Fíor 2A). De réir mar a bheifí ag súil leis, bunaithe ar bhreathnuithe roimhe seo, bhí titers antashubstainte frith-F1 IgG (GMT=1.35 × 103 ) inbhraite cheana féin i sera na n-ainmhithe vacsaínithe go léir ar iar-vacsaíniú Lá 5 (Fíor 2B).

Breathnaíodh méadú de réir a chéile ar na titers antashubstainte frith-F1 IgG sna laethanta ina dhiaidh sin, ag baint amach ~60-leibhéil níos airde ar iar-vacsaíniú Lá 9 (GMT=8.26 × 104, Fíor 2B). D’fhéadfaí antasubstaintí frith-F1 IgG a bhrath freisin sa sreabhán scamhóg ag tosú ó iar-vacsaíniú Lá 7, ag baint amach tiúchan chomh hard le ~1 µg/mL ar Lá 9 (Fíor 2C). Is díol spéise é, cé go raibh an freagra humoral frith-LcrV lagaithe i gcomparáid leis an bhfód a fuarthas ó polyF1 (Lá 7 GMT=613, Fíor 2D), tomhaiseadh méadú níos airde ar leibhéil antashubstainte frith-LcrV IgG sna laethanta ina dhiaidh sin, rud a léirigh an méadú foriomlán ~160-huaire (GMT=1 × 105, Fíor 2D). D’fhéadfaí antasubstaintí frith-LcrV IgG a bhrath freisin i sreabhán scamhóg lucha vacsaínithe ag tosú ó Lá 8, cé gur tiúchan níos ísle iad i gcomparáid leis na leibhéil frith-F1 (Fíor 2E).

Ní raibh an chuma ar an scéal go raibh gníomhachtú cealla B1b cosúil le dúchasach i gceist leis an méadú géar ar líon na titers IgG frith-LcrV, a breathnaíodh ar iar-vacsaíniú Laethanta 8-9, mar a mhol an bhreathnóireacht go raibh an codán IgG3 de na antasubstaintí seo faoi bhun braite i gcomparáid le an codán frith-F1 IgG3 antashubstainte ([12] agus Fíor Forlíontach S2). Dá bhrí sin, léiríonn na sonraí go bhféadfadh LcrV freagairt ghreannmhar tapa a ghiniúint freisin, ag soláthar, i gcomhar le F1, cosaint éifeachtach ar an bplá niúmóine chomh luath agus is seachtain amháin tar éis an vacsaínithe. Ina theannta sin, tugann an bhreathnóireacht go bhfuil antasubstaintí frith-F1 agus frith-LcrV IgG carntha i scamhóga ainmhithe vacsaínithe le tuiscint go bhféadfadh an fhreagairt áitiúil sna scamhóga a bheith tábhachtach chun imdhíonacht frith-niúmóine ó phlá a bhaint amach.

3.3. An Tábhacht a bhaineann leis an Struchtúr Polaiméireach F1 do Thús Mear na Díolúine Cosanta

Tá torthaí foilsithe againn roimhe seo a thacaíonn go láidir leis an nóisean go bhfuil ailtireacht pholaiméireach cheathartha F1 riachtanach dá chumas freagairt thapa cosanta a spreagadh i gcoinne plá bubonic [12]. Dá bhrí sin, sa staidéar seo, tugadh aghaidh ar an tsaincheist seo freisin i gcás cosanta ar phlá niúmóine. Rinneadh vacsaíniú ar lucha le F1 monaiméireach nó polaiméire, sa dá chás a bhain le comhriarachán LcrV (80 µg de gach antaigin/luch). Trí, ceithre, agus cúig lá ina dhiaidh sin, tugadh dúshlán do lucha go hinmheánach le dáileog mharfach de Y. pestis Kim53. Léirigh na sonraí marthanais a léirítear i bhFíor 3 gur chosain vacsaíniú le meascán de polyF1 agus LcrV 25 faoin gcéad , 62.5 faoin gcéad , agus 87.5 faoin gcéad de na lucha, faoi seach (Fíor 3A), ó dhúshlán marfach.

I gcodarsnacht leis sin, ghéill gach lucha a vacsaíníodh leis an meascán monoF1 agus LcrV don ionfhabhtú ach amháin don ghrúpa a vacsaíníodh 5 lá roimh an dúshlán, a léirigh leibhéal íseal cosanta 25 faoin gcéad (Fíor 3B). Ní dhearna vacsaíniú le foirmlí neamh-mheasctha comhdhéanta de polyF1, monoF1, nó LcrV (80 µg/luch) 4 lá roimh an dúshlán ainmhithe a chosaint. Mar sin féin, chuir vacsaíniú le polyF1 moill shuntasach ar bhásmhaireacht i gcomparáid le gach grúpa turgnamhach eile (p < 0.001; Fíor 3C). Nuair a chuirtear le chéile iad, léiríonn na torthaí seo go soiléir go bhfuil an fhoirm pholaiméireach de F1 riachtanach chun freagra tapa cosanta a fháil i gcomhar le LcrV.

3.4. Tréithriú na Díolúine Chosanta Fadtéarmaigh arna Spreagadh ag Vacsaíniú Aonair le F1 agus LcrV

Mar fhocal scoir, scrúdaíomar an bhfuil difríocht idir an díolúine chosanta fhadtéarmach chlasaiceach i gcoinne plá niúmóine i lucha atá vacsaínithe ag monoF1 nó polyF1. Dá réir sin, vacsaíníodh lucha CD1 uair amháin le monoF1 nó polyF1 amháin, chomh maith le foirmlithe a riaradh a chuimsigh teaglaim le LcrV. Rinneadh leibhéal na n-antasubstaintí sonracha i serum na n-ainmhithe vacsaínithe a thomhas sé mhí ina dhiaidh sin. Léiríonn na sonraí a léirítear i bhFíor 4A go raibh na titers frith-F1 IgG níos airde i ngach grúpa a vacsaíníodh le polyF1 ná sna grúpaí a vacsaíníodh le monoF1. Rinneadh titers IgG frith-LcrV ard agus comhsheasmhach a thomhas i ngach lucha a vacsaíníodh le LcrV.

Tréimhse iar-imdhíonta 6 mhí (3 lá tar éis tarraingt siar fola le haghaidh cinneadh titer), tugadh dúshlán do lucha go hinmheánach le dáileog mharfach comhdhéanta de 100LD50 de Y. pestis Kim53, agus rinneadh monatóireacht ar mharthanas ar feadh 21 lá (Fíor 5). Ní raibh ach cosaint pháirteach ar lucha a vacsaíníodh le polyF1 mar antaigin amháin, ach ghéill gach lucha a vacsaíníodh le monoF1 don ionfhabhtú, cosúil le lucha naive rialaithe (Fíor 5A). Go háirithe, níor léirigh na titers frith-F1 IgG a tomhaiseadh i sera na n-ainmhithe vacsaínithe polyF comhghaol láidir le maireachtáil in aghaidh dúshlán scamhógach (Fíor 5B). Trí LcrV a chur leis bhí cosaint iomlán ar fáil do lucha a vacsaíníodh le monoF1 chomh maith leo siúd a vacsaíníodh le polyF1 (Fíor 5A), rud a thugann le fios gur chumasaigh an fhreagairt antiLcrV léiriú iomlán ar luach cosanta na freagartha frith-F1. Fuarthas torthaí comhchosúla maidir le freagraí greannacha agus maireachtáil ar dhúshlán scamhógach i lucha CD-1 fireann vacsaínithe (Fíor Forlíontach S3), rud a thugann le fios nach bhfuil an staidéar claonta de réir gnéis ainmhithe (tabhair faoi deara go ndearnadh na turgnaimh tosaigh le hainmhithe baineanna) .

Nuair a chuirtear le chéile iad, léiríonn na torthaí seo gur féidir le F1 ann féin tús tapa a chur le cosaint in aghaidh plá niúmóine, rud a bhraitheann ar a struchtúr nádúrtha polaiméire. Ní hamháin gur ghiorraigh cur LcrV le polyF1 an t-am a theastaíonn chun cosaint thapa den sórt sin a bhaint amach ach chuir sé imdhíonacht chosanta fada agus éifeachtach ar fáil i gcoinne léiriú scamhógach de phlá, mar a thuairiscítear roimhe seo.

4. Plé

Tá leithlisiú le déanaí tréithchineálacha borrtha Y. pestis atá frithsheasmhach in aghaidh roinnt antaibheathaigh lena n-áirítear iad siúd atá molta le haghaidh teiripe [8,25,26], curtha i leith an chuardaigh le haghaidh frithbhearta breise i gcoinne an phlá niúmóine, amhail vacsaíní a chothaíonn imdhíonacht ard. sláinte phoiblí, agus ábharthacht chliniciúil. Breathnaítear ar vacsaíní, go ginearálta, mar fhrithbhearta coisctheacha i gcoinne galair thógálacha agus mar sin seachadtar iad do dhaoine sláintiúla bliain roimh ré. Dá réir sin, bhain formhór na staidéar réamhchliniciúil a scrúdaigh forbairt vacsaíne in aghaidh na plá le réimis vacsaínithe fada roimh dhúshlán marfach [13,27–29]. Thuairiscigh muid roimhe seo go spreagann vacsaíniú leis an bhfoirm pholaiméireach nádúrtha den antigen capsular F1 freagairt imdhíonachta an-tapa agus cumhachtach B-ceall-spleách a chosnaíonn na hainmhithe fiú roinnt uaireanta an chloig tar éis dúshlán marfach subcutaneous Y. pestis [11,12].

Sna staidéir seo, tá sé léirithe againn go gcothaíonn vacsaíniú amháin le F1 carnadh antasubstaintí frith-F1 (IgM agus IgG) sa serum laistigh de roinnt laethanta trí ghníomhachtú cealla B1b dúchasacha. Tá an fodhaonra seo de chealla B ina chónaí i gcuas peritoneal na lucha agus de ghnáth gineann sé freagraí séireolaíocha i gcoinne antaiginí polaiméire neamhphróitéineacha, mar LPS agus polaisiúicrídí a chomhdhéanann capsule go leor pataiginí (niúmacocci, meningococci, etc.) [30]. Tá neamhspleáchas cealla T agus giniúint an tseiritíopa antashubstaint murine IgG3 mar thréith ag na freagairtí imdhíonachta tapa seo. Léiríomar go mbaineann na gnéithe thuasluaite go léir leis an bhfreagra cosanta tapa a ghineann F1. Ina theannta sin, léirigh muid go bhfuil nádúr polaiméire F1 riachtanach don fhreagairt imdhíonachta tapa seo, toisc gur theip ar an monaiméir F1 (a ghintear trí iomalartú ciorclach na géine caf1) cealla B1b a ghníomhachtú, lagaithe tar éis an F1 polymeric i cinéitic titer IgG, rinne. gan an séiritíopa IgG3 a ghiniúint, agus níor éirigh leis cosaint a sholáthar go tapa. Tá gnáthfhreagairt oiriúnaitheach T-chill-spleách i gcoinne F1 ag gabháil leis an mearfhreagairt seo. Mar sin, déanaimid hipitéis go ngineann F1 polymeric dhá fhreagra séireolaíocha ag gníomhú go comhthreomhar: ceann atá neamhspleách ar T-chealla trí chealla B1b agus an dara ceann a bhaineann le cealla B follicular ar bhealach T-cill-spleách [12].

Sa tuarascáil seo, leathnaíodh an staidéar roimhe seo trí aghaidh a thabhairt ar chumas an antigen F1 freagairt chosanta tapa a thabhairt don mhúnla luiche níos dúshlánaí de phlá niúmóine. Léirímid gur féidir le riaradh amháin de pholaiméireach F1 atá asaithe ag AlOH, seacht lá roimh dhúshlán infhéitheach marfach le brú pestis Y. borb, freagairt chosanta éifeachtach a chothú (Fíor 1). Níl beagnach aon fasach ag an mbreathnóireacht iontasach seo, ní hamháin maidir le luas an imoibrithe ach freisin maidir leis an bhfíric gur annamh a tugadh aghaidh ar chumas an antigen F1 cosaint a thabhairt i múnla luiche den phlá niúmóine [31]. Tá an bhreathnóireacht a thuairiscítear anseo ag teacht leis an méid atá doiciméadaithe ag Derbise agus a comhghleacaithe [32] maidir le hantasubstaintí frith-F1 a bhrath go luath iar-vacsaínithe. Anseo, léirímid go raibh an Chomh maith le LcrV le polyF1 ní hamháin buntáiste san fhadtréimhse, mar a tuairiscíodh roimhe seo [33,34], ach freisin luathaithe an freagra imdhíonachta cosanta i gcoinne Y. pestis dúshlán intranasal go dtí ach cúpla lá (Figiúirí 2). agus 5).

Neartaíonn an cumas cosaint tapa a ghiniúint i gcoinne plá niúmóine trí vacsaíniú le F1 agus LcrV torthaí comhchosúla a thuairiscigh Williamson agus comhghleacaithe roimhe seo [13], inar thug vacsaíniú le F1 agus LcrV cosaint tapa i gcoinne dúshlán aerasóil le Y. pestis. Léiríonn an méadú géar ar na titers IgG frith-LcrV a breathnaíodh ar Laethanta 8 agus 9 go raibh meicníochtaí imdhíonachta an-chumhachtacha i ngníomh ag LcrV go luath tar éis an imdhíonta. Tugann easpa antasubstaintí frith-LcrV IgG3 sa serum, a gcinéiticí éagsúla, agus na leibhéil níos ísle antasubstaintí frith-LcrV IgG a fuarthas sa sreabhán scamhóg le fios go láidir go raibh meicníochtaí imdhíonachta scoite i ngníomh ag antaiginí F1 agus LcrV, an dá cheann acu is mó. is dócha gur chuir sé seo le múscailt tapa na freagartha cosanta (Fíor 3C).

Cosúil lenár dtuairimí roimhe seo sa mhúnla luiche bubonic plague, bhí an cumas chun freagairt imdhíonachta tapa cosanta a spreagadh i gcoinne an phlá niúmóine ag brath ar struchtúr polaiméire an antigen F1 (Fíor 3). Tugann an breathnóireacht seo le fios nach bhfuiltear ag súil go gcuirfidh an vacsaín fo-aonad frith-phlác iarrthóra forleithne, atá comhdhéanta de mhonaiméireach F1 agus LcrV mar phróitéin chomhleá [35,36], díolúine tapa ar fáil i gcoinne an phlá niúmóine; áfach, ní mór an toimhde seo a scrúdú go turgnamhach. Mar gheall ar an bhfreagra séireolaíoch a ghin LcrV, cé go raibh sé níos moille ná mar a bhí ag polyF1 (Fíor 2), bhí an freagra oiriúnaitheach cosanta tapa a chuir cosc ​​​​ar éifeacht mharfach an phlá niúmóine fós. Is dócha gur eascair an freagra séireolaíoch sách tapa seo as cumas an antigen LcrV dimers nó tetramers a fhoirmiú sa réiteach, mar a fuarthas i staidéir roimhe seo [37,38] agus ár sonraí neamhfhoilsithe. I bhfianaise ár dtorthaí ar éifeacht struchtúr iliméireach F1 maidir le giniúint freagra imdhíonachta humoral a bhrostú, d'fhéadfadh innealtóireacht athchuingreach an phróitéin LcrV a chumasaíonn iliméiriú níos mó an freagra a luathú tuilleadh. Ag teacht leis an toimhde seo, is fiú a thabhairt faoi deara sa tuarascáil le déanaí a dhoiciméadú go raibh micreacriostail ina bhfuil F1 agus LcrV níos cosanta ná vacsaín den chineál céanna comhdhéanta de na antaiginí seo i bhfoirm intuaslagtha [39]. Tugann an breathnóireacht seo le fios go bhféadfadh méadú ar dhlús na n-antaiginí, a tharlaíonn go bunúsach sa pholaiméir F1, freagraí greannachta cosanta a fheabhsú agus b'fhéidir a luathú.

Chomh maith lena chumas chun ionduchtú tapa imdhíonachta a aslú, i dturgnaimh a thugann aghaidh ar fhad saoil an stáit chosanta, ghin imdhíonadh aonair le polaiméirí F1 titers IgG níos cobhsaí agus aonfhoirmeach ná é sin le monaiméir F1 (Fíor 4). Mar sin féin, níor sholáthair vacsaíniú le polyF1 amháin ach cosaint pháirteach ar ghalair niúmóine. Is díol suntais é nach raibh comhghaol idir na titers sonracha frith-F1 IgG arna dtomhas i lucha aonair agus a gcumas maireachtáil sa dúshlán (Fíor 5B). Ghin vacsaíniú na lucha le meascán de gach foirm F1 mar aon le LcrV leibhéil níos airde cosanta (Fíor 5). Tá na torthaí seo ag teacht le staidéir roimhe seo a léirigh nach raibh vacsaíniú leis an vacsaín cille maraíodh iomlán (KWC), a chothaíonn titers frith-F1 IgG ach nach bhfuil frith-LcrV IgG, neamhéifeachtach chun díolúine a sholáthar i gcoinne plá niúmóine [13,40] .

Cé, sa staidéar fad saoil, nach ndearna polyF1 ach díolúine páirteach déanach a sholáthar, léirigh an próitéin seo an cumas na lucha a chosaint go hiomlán go gairid tar éis an vacsaínithe, rud a thugann le tuiscint go raibh baint ag meicníochtaí imdhíonachta gearrshaolacha breise a chuir le himréiteach na pataigin go tapa. turgnaimh díolúine. Léiríomar le déanaí gur spreag vacsaíniú leis an brú maolaithe Y. pestis EV76 meicníocht chosanta cothaitheach a d'aisghair meicníochtaí borrtha taobh-idirghabhála na pataigin a bhí in iomaíocht le haghaidh iain iarainn atá ar fáil san óstach, rud a chuir le tosú tapa na himdhíonachta frithphlá [ 41]. D’fhéadfadh soiléiriú a dhéanamh ar na meicníochtaí tacaíochta gearrshaolacha a théann i sineirgíocht leis an bhfreagra imdhíonachta humoral frith-F1 cuidiú le forbairt vacsaíní feabhsaithe i gcoinne plá niúmóine agus i gcoinne galair ionfhabhtaíocha marfacha eile.

Ábhair Forlíontacha:

Is féidir an fhaisnéis tacaíochta seo a leanas a íoslódáil ag https://www.mdpi.com/article/10.3390/vaccines11030581/s1, Fíor S1: Tréithriú plá niúmóine tar éis ionaclú infhéitheach Y. pestis Kim53. Fíor S2: Tréithriú isitíopa antasubstaintí frith-F1 agus frith-LcrV i sera lucha vacsaínithe. Fíor S3: Fad saoil na freagartha séireolaíochta agus marthanacht lucha fireanna tar éis vacsaíniú amháin le monaiméireach F1 agus polaiméire F1 ina n-aonar nó le LcrV.

Ranníocaíochtaí Údair:

Coincheapú, EM, agus YL; Coimeád sonraí, YL; Anailís fhoirmiúil, YL; Imscrúdú, MA, AT, DG, YV, AZ, agus YL; Modheolaíocht, YL; Acmhainní, TH, agus AM; Maoirseacht, EM; Scríbhneoireacht - Bundréacht, EM, agus IL; Scríbhneoireacht - Athbhreithniú agus eagarthóireacht, TC, EM, agus YL Tá an leagan foilsithe den lámhscríbhinn léite agus aontaithe ag na húdair go léir.

Maoiniú:

Ba í Institiúid Iosrael um Thaighde Bitheolaíochta a mhaoinigh an taighde seo, uimhir deontais SB/07.

Ráiteas an Bhoird Athbhreithnithe Institiúideach:

Neamhbhainteach.

Ráiteas Toilithe Feasach:

Neamhbhainteach.

Ráiteas Infhaighteachta Sonraí:

Tá na sonraí a chuirtear i láthair sa staidéar seo ar fáil ach iad a iarraidh ó na húdair chomhfhreagracha.

Coinbhleachtaí Leasa:

Ní dhearbhaíonn na húdair aon choinbhleacht leasa.

Tagairtí

1. Butler, T. Plague, agus Ionfhabhtuithe Eile Yersinia; Greenough, W., Merigan, TC, Eds.; Cuideachta Leabhar Leighis Plenum: Nua Eabhrac, NY, Stáit Aontaithe Mheiriceá, 1983.

2. Randremanana, R .; Andrianaivoarimanana, V.; Nikolay, B. ; Ramasindrazana, B.; Paireau, J. ; Deich Bosch, QA; Rakotondramanga, JM; Rahajandraibe, S.; Rahelinirina, S.; Rakotomanana, F.; et al. Saintréithe eipidéimeolaíocha eipidéim phlá uirbeach i Madagascar, Lúnasa-Samhain, 2017: Tuarascáil ráig. Lancet infect. Dis. 2019, 19, 537–545. [CrossRef]

3. Kugeler, KJ; Stáplaí, JE; Hinckley, AF; Gage, KL; Mead, PS Eipidéimeolaíocht na plá daonna sna Stáit Aontaithe, 1900–2012. Teacht chun cinn. Infect. Dis. 2015, 21, 16–22. [CrossRef]

4. Kugeler, KJ; Meá, PS; Caimbeul, SB; Nelson, CA Patrúin Cóireála Frithmhiocróbacha agus Toradh Tinnis i measc Othair na Stát Aontaithe a bhfuil Plag orthu, 1942-2018. Clin. Infect. Dis. 2020, 70, S20–S26. [CrossRef]

5. Godfred-Cato, S.; Cuaille, KM; Fleck-Dderderian, S.; Becksted, HA; Russell, Z.; Meaney-Delman, D.; Meá, PS; Nelson, CA Cóireáil Pla Dhaonna: Athbhreithniú Córasach ar Shonraí Comhiomlána Foilsithe ar Éifeachtúlacht Frithmhiocróbach, 1939–2019. Clin. Infect. Dis. 2020, 70, S11–S19. [CrossRef]

6. Galimand, M. ; Guiyoule, A.; Gerbaud, G. ; Rasoamanana, B. ; Chanteau, S.; Carniel, E.; Courvalin, P. Friotaíocht ildrugaí i Yersinia pestis idirghabháil ag plasmid inaistrithe. N. Béarla. J. Med. 1997, 337, 677–680. [CrossRef]

7. Welch, TJ; Frike, WF; McDermott, PF; Bán, DG; Rosso, ML; Rasco, DA; Mammel, MK; Eppinger, M.; Rosovitz, MJ; Wagner, D.; et al. Ilfhriotaíocht fhrithmhiocróbach i bplá: Riosca sláinte poiblí atá ag teacht chun cinn. PLoS ONE 2007, 2, e309. [CrossRef]

8. Lei, C. ; Kumar, S. Yersinia frithsheasmhacht in aghaidh antaibheathach pestis: Athbhreithniú córasach. Osong Sláinte Poiblí Res. Dearcadh. 2022, 13, 24–36. [CrossRef]

9. Zauberman, A.; Gur, D.; Tobhach, Y. ; Aftalion, M. ; Vagima, Y.; Tidhar, A. ; Chitlaru, T. ; Mamroud, E. Post Nochtadh ar Vacsaín Beo Yersinia pestis chun Cóireáil Antaibheathach Dara Líne i gCoinne Plá niúmónach a Dhéanamh. J. Infect. Dis. 2019, 220, 1147–1151. [CrossRef]

10. Vagima, Y. ; Gur, D.; Aftalion, M. ; Maois, S.; Tobhach, Y. ; Makovitzki, A.; Holtzman, T.; Orainn, Z. ; Segula, Y. ; Fatelevich, E. ; et al. Potentiates Teiripe Phage Cóireáil Antaibheathach Dara Líne i gcoinne Plá Aeir. Víris 2022, 14, 688. [CrossRef]

11. Tobhach, Y. ; Fleascán, Y. ; Tidhar, A. ; Zauberman, A.; Aftalion, M. ; Lazar, S.; Gur, D.; Shafferman, A.; Tá ról riachtanach ag cealla Mahmoud, E. T i gcosaint tapa idirghabhála frith-F1 i gcoinne plague bubonic. Vacsaín 2011, 29, 6866–6873. [CrossRef]

12. Tobhach, Y. ; Vagima, Y.; Tidhar, A. ; Aftalion, M. ; Gur, D.; Nili, U.; Chitlaru, T. ; Zauberman, A.; Mahmoud, E. Tríd an spriocdhíriú ar antaigin capsúil Yersinia pestis F1 trí chealla B1b dúchasacha, is féidir freagairt thapa cosanta a dhéanamh ar an bplá bubonic. Vacsaíní NPJ 2018, 3, 52. [CrossRef]

13. Williamson, ED; Stagg, AJ; Eley, SM; Taylor, R. ; Glas, M.; Jones, SM; Titball, RW Cinéitic na freagairt imdhíonachta don vacsaín (F1 móide V) i múnlaí de phlá bubonic agus neomónach. Vacsaín 2007, 25, 1142–1148. [CrossRef]

14. Holtzman, T. ; Tobhach, Y. ; Marcus, D.; Fleascán, Y. ; Mamroud, E.; Cohen, S.; Fass, R. Táirgeadh agus íonú oligomers meáchan móilíneach ard de Yersinia pestis F1 antaigin capsular arna scaoileadh ag cultúr ard-dlúis cille cealla athchuingreach Escherichia coli a iompraíonn an caf1 operon. Miocrób. Monarcha Cille 2006, 5, P98. [CrossRef]

15. Chalton, DA; Musson, JA; Flick-Smith, H.; Walker, N.; McGregor, A.; Uaineoil, HK; Williamson, ED; Miller, J.; Robinson, JH; Lakey, JH Imdhíonacht antigen vacsaín Yersinia pestis monaiméirithe ag iomalartú ciorclach. Infect. Imdhíonachta. 2006, 74, 6624–6631. [CrossRef]

16. Petsch, D. ; Anspach, FB Deireadh a chur le endotoxin ó réitigh próitéine. J. Biteicneolaíocht. 2000, 76, 97–119. [CrossRef]

17. Leary, SE; Williamson, ED; Griffin, KF; Russell, P.; Eley, SM; Titball, RW Cosnaíonn imdhíonadh gníomhach le antaigin V athchuingreach ó Yersinia pestis lucha ar phlá. Infect. Imdhíonachta. 1995, 63, 2854–2858. [CrossRef]

18. Mechaly, A. ; Vitner, EB; Tobhach, Y. ; Gur, D.; Barlev-Gross, M.; Sittner, A.; Koren, M.; Tobhach, H. ; Mahmoud, E.; Fisher, M. Epitope Binning Anti Monoclonal Anti F1 agus Anti-LcrV Antibodies and A bhFeidhm I dTástáil Simplí, Ghearr, HTRF le haghaidh Brath Plaigí Cliniciúla. Pataiginí 2021, 10, 285. [CrossRef]

19. Tidhar, A. ; Fleascán, Y. ; Cohen, S.; Léiví, Y. ; Zauberman, A.; Gur, D.; Aftalion, M. ; Elhany, E.; Zvi, A.; Shafferman, A.; et al. Is fachtóir virulence Yersinia pestis úrscéal é an lipoprotein NlpD atá riachtanach chun plá a fhorbairt. PLoS ONE 2009, 4, e7023. [CrossRef]

20. Giolcach, LJ; Muench, H. Modh Simplí chun Críochphointe Caoga Céatadán a Mheas12. Táim. J. Eipidéim. 1938, 27, 493–497. [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com