Maireann Freagraí Imdhíonachta Cosanta Humóra agus Ceallacha ar SARS-CoV-2 Suas go dtí Bliain Tar éis Aisghabhála

Seoladh an vacsaíniú SARS-CoV-2 ar fud an domhain chun imdhíonacht éifeachtach ar leibhéal an daonra a thógáil chun srian a chur le scaipeadh an víris seo. Is fachtóirí ríthábhachtacha do shláinte an phobail iad éifeachtacht agus fad na himdhíonachta cosanta. Anseo, tuairiscímid cinéitic na sainfhreagra imdhíonachta SARS-CoV i 204 duine suas go dtí 1-bliain tar éis téarnamh ó COVID-19. Laghdaíonn tiúchan RBD-IgG agus spike-IgG lánfhad agus cumas neodraithe serum le linn na chéad 6 mhí, ach coinnítear iad go cobhsaí suas le bliain amháin tar éis scaoileadh ón ospidéal. Bhí leibhéil IgG a tháinig laghdú go leibhéal comhchosúil bliain ina dhiaidh sin ag fiú daoine aonair a chruthaigh leibhéil arda IgG le linn na gcéimeanna téarnaimh luatha.

Tagraíonn imdhíonacht tréada do chosaint éifeachtach daoine gan vacsaíniú nó daoine gan ionfhabhtuithe i sochaí nuair a bhíonn díolúine ó ghalar áirithe faighte ag níos mó agus níos mó daoine i sochaí trí vacsaíniú nó ionfhabhtú nádúrtha. Mar sin laghdaítear an fhéidearthacht go dtarlóidh scaipeadh agus go dtarlódh an eipidéim. Go ginearálta, nuair a bhíonn díolúine ó ghalar faighte ag 70 faoin gcéad go níos mó ná 90 faoin gcéad den daonra i sochaí, is féidir le díolúine daonra na sochaí leibhéal leordhóthanach a bhaint amach chun na daoine gan vacsaínithe nó neamhionfhabhtaithe a chosaint. Tá daoine ionfhabhtaithe imdhíonachta don ghalar.

Ag an am céanna, ní mór dúinn freisin ár n-imdhíonacht a fheabhsú, rud a éilíonn nósanna maireachtála maithe mar aiste bia sláintiúil agus cleachtadh leordhóthanach. Ina theannta sin, fuair muid amach gur féidir le Cistanche díolúine a fheabhsú freisin. Tá Cistanche saibhir i substaintí frithocsaídeacha, ar féidir leo fréamhacha saor in aisce a laghdú i gcorp an duine. an ról, rud a chuireann le díolúine.

Cliceáil sochair cistanche tubulosa

Go háirithe, tá comhghaol dearfach idir an leibhéal RBD-IgG agus cumas neodraithe serum, rud a thugann le tuiscint ról ionadaíoch RBD-IgG maidir le cosaint serum a thuar. Ina theannta sin, mhair cosaint imdhíonachta cheallacha a bhaineann go sonrach le víreas, lena n-áirítear spike agus nucleoprotein ar leith, idir 6 mhí agus 12 mhí. San iomlán, tacaíonn ár staidéar le marthanacht na díolúine cosanta víreasach-shonrach thar 1 bhliain.

Tá freagraí imdhíonachta sonracha víreasacha coróinvíreas géar-ghéar-siondróm riospráide 2 (SARS-CoV-2) ríthábhachtach chun macasamhlú víreas a shochtadh, chun déine an ghalair a fheabhsú, agus chun ath-ionfhabhtú1-4 a chosc. D’fhéadfadh daoine aonair a thángthas orthu ó ionfhabhtú fiáin de chineál SARS-CoV-2 traschosaint ó ath-ionfhabhtú ag mutant D614G1. Deng et al. léirigh go bhforbraíonn príomhaigh neamhdhaonna atá faoi lé SARS-CoV-2 freagraí láidre antashubstainte i múnla ionfhabhtaithe rhesus macaque agus go bhfuil siad díolmhaithe ó ath-ionfhabhtú2 den chuid is mó.

In a clinical trial testing the protective effect of neutralizing antibodies, outpatients who received neutralizing antibody therapy were less likely to have a COVID-19–related hospitalization or visit to an emergency department and were less likely to develop severe symptoms3. A two-dose regimen of BNT162b2 elicited robust immune protection against COVID-19 in persons aged >16 bliana4. De ghnáth gineann othair téarnaimh agus faighteoirí vacsaíne SARS-CoV-2 freagairtí imdhíonachta láidre. Tá dhá phríomhchuid i gceist le freagairtí imdhíonachta cosanta in aghaidh ionfhabhtú SARSCoV-2, imdhíonghlóibin greannach (IgA agus IgG) agus freagraí T-chealla.

Is é an aidhm idéalach ionfhabhtú steiriúil a bhaint amach; mar sin, díríonn formhór na staidéar ar anailís IgG serum cosanta dá infhaighteacht réidh1,2,4,5. Díreoidh cosaint imdhíonachta láidir cille T ar chealla a bhfuil víreas iontu, cuirfear srian le scaipeadh víreasach in vivo, luasóidh sí imréiteach víreasach, agus laghdóidh sé ualach galair. Féadfaidh freagairtí greanna agus T-chealla víreas-shonracha maireachtáil, le laghdú beag, suas le 6 go 8 mí i ndaoine aonair SARS-CoV-2 téarnaimh5,6. Ní mór imscrúdú breise a dhéanamh ar cé acu an féidir cuimhne imdhíonachta cosanta a choinneáil go fadtéarmach agus an féidir le antasubstaintí nó cealla T cosaint fhadtéarmach a thabhairt, agus rachaidh tuiscint ar an réimse seo chun tairbhe d'fhorbairt vacsaíní freisin.

Anseo, déanaimid anailís ar na hathruithe dinimiciúla ar fhreagraí imdhíonachta greannacha agus ceallacha a bhaineann go sonrach le víreas suas le bliain amháin i gcohórt leantach fadaimseartha de chuid COVID-19. Sa chohórt ionadaíoch othar seo, tháinig laghdú suntasach ar leibhéil shonracha IgM agus IgA SARS-CoV go leibhéil chúlra laistigh de bhliain amháin. Thit cumas cosanta IgG agus serum spike-shonrach go suntasach laistigh den chéad 6 mhí ach coinníodh é ar feadh suas le bliain amháin. SARS-CoV-2 D’fhan freagairtí imdhíonachta cille T ar leith cobhsaí suas le bliain amháin tar éis scaoileadh amach ón ospidéal. Tugann na torthaí seo le tuiscint gur féidir le freagairtí imdhíonachta cosanta in aghaidh SARS-CoV-2 maireachtáil ar feadh 1 bhliain ar a laghad.

Torthaí

Tréithe an chohóirt COVID{0}}.

Ghlac cohórt ionadaíoch de 204 duine a gnóthaíodh (68.2 faoin gcéad) as na 299 othar thar an tréimhse chéanna a ligeadh isteach in Ospidéal Ochtú Daoine Guangzhou, Guangzhou, an tSín, ón 20 Eanáir go dtí an 29 Feabhra, 2020, páirt sa staidéar leantach seo. As na rannpháirtithe seo, diagnóisíodh go raibh airíonna tromchúiseacha ag 29, 162 mar mheasartha, 12 chomh éadrom, agus ceann amháin mar asymptomatic (Tábla 1). Bhí a n-aoiseanna agus a n-inscne ionadaíoch ar dhaonra iomlán na n-othar (Supp. Fíor 1). Seachas an t-aon othar asymptomatic, bhronn gach duine samplaí fola ag pointí ama iolracha; ar an dea-uair, bhain 50 duine aonair (24.5 faoin gcéad de 204) an babhta iomlán d’imeachtaí leantacha amach agus chuir siad samplaí fola ar fáil ag na ceithre phointe ama leantacha. Mar sin, b'fhéidir measúnú cinéiteach ar chuimhne imdhíonachta. Go hachomair, seasann an cohórt leantach don daonra iomlán d’othair COVID-19 i Guangzhou ag tús 2020.

Athruithe fadaimseartha ar antasubstaintí greanna i gcoinne SARSCoV-2.

Tá ról fíor-riachtanach ag an bhfearann ​​​​ceangailteach gabhdóirí (RBD) de spíc SARS-CoV-2 i gceangal víreasach ar a receptor, einsím tiontúcháin angiotensin 2 (ACE2), comhghaolaíonn leibhéil antasubstainte a bhaineann go sonrach le RBD lena receptor agus léiríonn siad é. acmhainn neodraithe7. Rinneamar anailís ar chinéitic na n-antasubstaintí IgM, IgA, agus IgG a bhaineann go sonrach le RBD a scaiptear thar thréimhse ama le feisteáin imdhíon-mheasúnaithe leictreamaiméineascnaimh indíreacha dhá chéim8.

First, all patients were positively seroconverted (at least one IgM >1 COI, IgA >1 COI, or IgG >1 COI) le pointe aonuaire ar a laghad, ag dearbhú gur tharla ionfhabhtú SARS-CoV-2 iarbhír do na hothair roghnaithe go léir. Ghin othair thromchúiseacha i bhfad níos airde RBD-IgA, RBD-IgG, agus spike-IgG, ach ní RBD-IgM, ná na hothair mheasartha laistigh den chéim ospidéil (Fíor 1a-d agus Supp. Fíor. 2). Thacaigh ár dtoradh le gur chuir nochtadh níos faide an chórais imdhíonachta do víris le giniúint antashubstainte víreasach-shonrach.

Ansin, fuaireamar amach gur tháinig laghdú suntasach ar an leibhéal IgM a bhaineann go sonrach le RBD ó 4.669 (meán COI, anseo feasta) go 0.785 (diúltach) (thart ar sé huaire, p < 0.0 001, t-thástáil gan péire agus ceartúchán Welch) laistigh de 3 mhí tar éis scaoileadh amach (Fíor 1a). Tháinig laghdú suntasach freisin ar IgA a bhaineann go sonrach le RBD ó 9.283 go 3.234 (ach 2.86-huaire, p < 0.0001, t-tástáil neamhphéireáilte le ceartúchán Welch) laistigh de 3 mhí, ach coinníodh suas le 6 mhí é (3.491, p { {24}}.073, t-thástáil gan péire le ceartúchán Welch). Ar deireadh, d'éirigh RBD-IgA diúltach ag an 12-pointe mí (0.57) (p < 0.0001, t-tástáil neamhphéireáilte le ceartúchán Welch) (Fíor 1b). Ós rud é go ndéanann IgA feidhm neodraithe sa mhúcóis, bhíothas ag súil go mbeadh a leibhéil serum níos ísle fiú ag an mbuaic ná mar a bhí i bhfíocháin an mhúcóis. Tá gá le himscrúdú breise an bhféadfadh fíocháin mhúcóis IgA cobhsaí a choinneáil.

Breathnaíodh ar RBD-IgG mar tháscaire ríthábhachtach maidir le cosaint imdhíonachta in aghaidh ionfhabhtú víreas. Léirigh ár n-anailís go raibh laghdú 2.87-huaire ag RBDIgG ó 825 go 287 AU/ml laistigh den chéad 3 mhí (p < 0.0001, t-tástáil neamhphéireáilte le ceartúchán Welch), agus sa bhreis ar 153 AU/ml ag 6-bpointí ama na míosa (p=0.0033) (Fíor 1c, t-tástáil neamhphéireáilte le ceartúchán Welch), a bhí ag teacht leis na tuarascálacha roimhe seo5,6 .

Go sonrach, chothaigh na leibhéil RBD-IgG go seasta suas go dtí 1 bhliain (170 AU/ml ar an meán, Fíor 1c). Léirigh an leibhéal spike-IgG lán-fhad, arna thomhas go neamhspleách, patrún cosúil leis an gceann a bhí ag RBD-IgG (Fíor 1d), ag tacú tuilleadh leis an tuairim thuas go gcoimeádfadh antashubstaint cobhsaí ó 6 mhí go 1 bhliain tar éis meath tapa.

Léirigh RBD-IgG agus leibhéil spike-IgG lán-fhad comhghaol láidir dearfach (r=7411, p < 0.0001,n=474, comhghaol Pearson, Fíor 1e). Breathnaíodh comhghaol láidir dearfach idir RBD-IgG agus spike-IgG lán-fhad i bpointí ama iolracha (Fig.1e agus Supp. Fíor. 3).

Thus, RBD-IgG was used in the following analysis. To investigate what kind of patients tends to maintain long-term RBD-IgG-producing capacity, we test the influence of initial antibody titers on antibody persistence. We divided the follow-up individuals with at least the first three follow-up visits into high RBD-IgG (maximal titer >1000 AU/ml) agus íseal (100 < titer uasta<1000 AU/ml) groups. We observed that the high group had significantly higher RBD-IgG levels at the in-hospital stage (p = 0.0004, an unpaired t-test with Welch's correction), 1-month (p = 0.0026, an unpaired t-test with Welch's correction), and 3-month (p = 0.0363, an unpaired t-test with Welch's correction) visits. But the difference diminished at the 6-month visit (p = 0.2212, an unpaired t-test with Welch's correction) and the 12-month visit (p = 0.7074) (Fig. 1f). Next, we demonstrated that disease severity does not necessarily contribute to higher RBD-IgG maintenance with individuals with at least three continuous follow-up serum samples (Fig. 1g). Therefore, our results showed that neither the antibody levels nor the disease severity would affect the RBD-specific IgG antibody persistence.

Fig. 1 Kinetics of SARS-CoV-2 viral-specific antibodies up to 1 year. SARS-CoV-2-infected individuals who attended the follow-up program were included in this analysis. a–c RBD-IgM, IgA, and IgG changes since symptom onset. x-axis, follow-up time (day). y-axis, antibody titer (COI cut-off index; or arbitrary unit, AU/ml). The shaded regions represent the in-patient stage. The average values in the 1-month, 3-month, 6-month, and 12-month stages were labeled. P values (two-tailed) were shown. Mild (black dots), moderate (blue dots), and severe (red dots) symptoms. d Full-length spike-IgG changes since symptom on-set. x-axis, follow-up time (day). y-axis, antibody titer (AU/ml). e Correlation of RBD-IgG and Spike-IgG. In-hospital stage (black), 1-month follow-up (red), 3-month follow-up (blue), 6-month follow-up (purple), and 12-month follow-up (green). Pearson r number and p-value (two-tailed) were shown. f Longitudinal analysis of RBD-specific IgG between patients with high titer (RBD-IgG >1000 AU/ml, ciorcal oráiste) agus othair le titer íseal (RBD-IgG<1000 AU/ml, empty circle). g Longitudinal analysis of RBD-specific IgG between severe patients (red circle) and moderate patients (pink circle). Lines in the x-axis and y-axis in a–e indicate the cut-off values. a–d, Mean values were labeled for each column. f, g, Data were presented as median with interquartile range. An unpaired t-test with Welch's correction analysis was applied, and p-values (two-tailed) were labeled. Source data are provided as a Source Data file.

Cinéitic na cosanta serum i gcoinne SARS-CoV-2.

Rinneamar measúnacht ar mhicrea- neodrú serum ag baint úsáide as an gcóras ionfhabhtaithe SARSCoV beo, an caighdeán óir chun cosaint serum i gcoinne ionfhabhtú víreas a mheas, chun féachaint an bhfuil séiream fós ina chosaint ar ionfhabhtú SARS-CoV-2. Fuaireamar amach gur laghdaigh na titers neodraithe serum ó 1 mhí go 3 mhí (p=0.0024, tástáil t-neamhphéireáilte le ceartú Welch) agus 6 mhí (p=0.0168, t-triail neamhphéireáilte le ceartú Welch). tástáil le ceartúchán Welch), ar bhealach cosúil le RBD-IgG agus Spike-IgG (Fíor 2a). Ina dhiaidh sin, d'fhan siad cobhsaí go dtí 12-mí (p=0.591, t-tástáil neamhphéireáilte le ceartúchán Welch), rud a thugann le tuiscint go bhféadfadh cosaint ghreannmhar shainiúil SARSCoV-2 leanúint ar aghaidh go fadtéarmach.

Ós rud é gur ghin othair thromchúiseacha leibhéil arda antasubstaintí ná othair mheasartha, ní fios fós an bhféadfadh na leibhéil arda cosaint níos láidre a thabhairt. Fuaireamar amach nach raibh de thoradh ar na hairíonna tromchúiseacha ach go raibh cumas neodraithe neamhbhuan níos airde ag an gcéim téarnaimh níos luaithe (p=0.020, t-tástáil gan péire le ceartúchán Welch), a laghdaigh ón 3-mhí go 3- {4}}cuairt bliana (Supp. Fíor 4).

Ansin, rinneamar anailís ar chomhghaolú RBD-IgG le microneutralization serum. Fuaireamar amach go raibh comhghaol suntasach dearfach ann idir RBD-IgG agus neodrú (r=0.4070, p < 0.0001, n {{6} }, comhghaol Pearson) (Fíor 2b). Ní nach ionadh, bhí comhghaol dearfach ag leibhéil Spike-IgG le cumas neodraithe serum (Supp. Fíor 4). Díol suntais, níor éirigh leis an gcomhghaol idir RBD-IgG agus neodrú serum tábhacht staitistiúil a bhaint amach le linn na céime ospidéalaithe (r=0.2101, p=0.0905, comhghaol Pearson, Supp. Fíor. 5a) agus coinnithe go dearfach ag 1-mí (r=0.3952, p < 0.0001, comhghaol Pearson), 3-mí (r=0.2769, p=0. 0135, comhghaol Pearson), 6-mí (r=3846, p=0.0005, comhghaol Pearson), agus 12-mí (r 4070.5216, p < 0.0001, comhghaol Pearson) cuairteanna (Supp. Fíor 5b–e).

Cinéitic freagra imdhíonachta sainiúil T cille SARS-CoV-2.

Is féidir le cealla T cuimhne víreasach-shonracha déine an ghalair a laghdú faoi dheireadh trí dheireadh a chur le cealla atá ionfhabhtaithe le víreas9, rud a chruthaíonn brainse ríthábhachtach eile chun ionfhabhtú víreas a chomhrac nuair a tharlaíonn sé. Chun imscrúdú a dhéanamh an bhféadfadh freagairt imdhíonachta cheallacha T cosanta leanúint, ghineamar linn peptide Nucleoprotein (N) mar gheall ar a próitéiní víreasach is flúirsí10 agus linnte peiptíde Spike mar gheall ar a thábhachtaí atá siad maidir le hionfhabhtú víreasach agus feidhmiú leathan6. Baineadh úsáid as peptídí spike chun linnte peptide S1 agus S2 a ghiniúint le haghaidh láimhseáil áisiúil. D’úsáideamar na trí linn peiptíde le haghaidh anailíse ar an láthair imdhíon-ionsorbánach gáma-interferon (IFN- ) nasctha le heinsímí (ELISPOT) ar chealla T a bhain go sonrach le víreasach ag baint úsáide as PBMCanna scoite úra ón 6-mí agus 12- chuairteanna mí. Léiríodh torthaí braite ELISPOT ó dhuine ionadaíoch amháin (Fíor 3a).

I gcomparáid leis na hothair téarnaimh san ospidéal, laghdaigh iomlán na gcealla folaithe IFN víreasach-shonracha ag 6-cuairteanna mí agus choinnigh siad cobhsaí go 12-cuairteanna mí (Fíor 3b). Breathnaíodh athruithe den chineál céanna le haghaidh próitéiní N, S1, agus S2 ( Fíor. 3c). Is cosúil go ngineann othair thromchúiseacha imdhíonacht cheallacha T láidir leanúnach i gcoinne próitéin Spike (Supp. Fíor. 7). Léirigh anailís chomhdhéanaimh ar fhreagairt cheallacha SARSCoV-2 T go bhfuil na céatadáin N, S1, agus S2, coinnithe go maith agus gan ach laghdú beag (Fíor 3d), rud a thugann le fios go bhféadfadh cuimhne fhadtéarmach a bheith ann T díreach. mar ionfhabhtú SARS in 200311.

Plé

I ngné amháin, léirigh ár staidéar gur féidir freagairtí imdhíonachta humoral sonracha SARS-CoV-2 a choinneáil ar feadh suas le bliain amháin. Thugamar faoi deara gur tháinig laghdú tapa ar acmhainn neodraithe serum-RBD-IgG, Spike-IgG, agus serum-shonrach go sonrach laistigh de 6 mhí, cosúil leis na tuarascálacha roimhe seo5,6,12,13. Go fortunately, coinníonn na trí pharaiméadair cobhsaí tar éis sin ar feadh 1 bhliain. Dealraíonn sé go bhféadfadh an IgG víreasach-shonrach na leibhéil reatha a choinneáil ar feadh tamaill.

Fíor 2 Anailís fadaimseartha ar chosaint séiream in aghaidh ionfhabhtú SARS-CoV-2. Tástáladh séirim a bailíodh ó phointí ama iolracha i gcoinne ionfhabhtú víreas SARS-CoV-2 beo. rinneadh measúnú micri- neodraithe ag baint úsáide as córas saothraithe cille ionfhabhtaithe SARS-CoV-2 beo. y-ais, folds caolú serum. Cuireadh sonraí i láthair mar mheánluach ± ​​SEM. Léiríonn poncanna daite déine an ghalair. Comharthaí éadrom (poncanna bána), measartha (poncanna gorma), agus comharthaí tromchúiseacha (poncanna dearga). Cuireadh t-tástáil neamhphéireáilte le hanailís ceartúcháin Welch i bhfeidhm, agus lipéadaíodh p-luachanna (dhá eireaball). b Comhghaol idir micrea- neodrú (fillte caolaithe) agus RBD-IgG (aonad treallach, AU/ml). Rinneadh anailís ar 475 péire san iomlán, agus taispeánadh luachanna r agus p Pearson (dhá eireaball). Léiríonn línte san x-ais agus y-ais in a agus b na luachanna scoite. Cuirtear sonraí foinseacha ar fáil mar chomhad Sonraí Foinse.

Fíor 3 freagairt cealla T ar leith SARS-CoV-2 in othair COVID-19 aisghafa. Ionadaí ELISpot íomhánna tobair a thaispeánann cealla rúnda IFN. N, S1, agus S2, Comhthiomsú peptide forluiteach sintéiseach de nucleocapsid (N), fo-aonad Spike 1 (S1), agus 2 (S2). Con A, Concanavalin A rialú dearfach. b Uimhreacha spota de chealla rúnda IFN rud a léiríonn laghdú ar fhreagra imdhíonachta sonrach SARS-CoV-2 le himeacht ama. Is ionann na huimhreacha agus suim N, S1, agus S2-toibreacha spreagtha. Cuireadh sonraí i láthair mar airmheán le raon idircheathairíle. c Léiríonn ceapacha Raincloud leibhéil éagsúla freagartha cheallacha T i measc na dtrí linn peiptíde ag pointí ama éagsúla leantacha. d Breac poncanna waffle a thaispeánann céatadán comhdhéanamh na freagairte SARS-CoV-2 le linn 1-bliana leantach. Staitisticí de réir Mann-Whitney U-tástáil. Taispeánadh luach P (dhá eireaball). b, c Léiríodh sonraí mar cheapacha bosca agus guairneáin (airmheán le teorainn idircheathairíl, teorainn uachtarach, agus teorainn níos ísle). Cuirtear sonraí foinseacha ar fáil mar chomhad Sonraí Foinse.

Sa ghné eile, léirigh ár staidéar go bhféadfadh freagra cille T ar leith SARS-CoV-2 a bheith sách cobhsaí san fhadtéarma freisin (Fíor 3). Tá an tuairim seo ríthábhachtach go leor sa chás reatha. Ilchineálacha barúla14–18, mar shampla B.1.1.7 (freisin 501Y.V1, brú na RA), B.1.351 (freisin 501Y.V2, brú na hAfraice Theas), B.1.617.1 agus B.1.617.2 (An India brú), B.1.525 (freisin 20 A, brú na Nigéire), agus B.1.1.28.1 (freisin 501Y.V3, brú na Brasaíle) tagtha chun cinn le ceachtar níos mó tógálach nó pathogenesis nó an dá. D’fhéadfadh na mutants núíosacha, a fhaightear go príomha san fhearann ​​RBD, éalú ón gcosaint neodraithe a fuarthas trí ionfhabhtú nádúrtha nó trí vacsaíniú SARS-CoV15,17,18.

Murab ionann agus antasubstaintí a neodrú, níorbh fhéidir leis na cealla T víreasacha-shonracha bac a chur ar iontráil víreas isteach sna cealla ach fós d'fhéadfadh siad an víreas intracellular a mharú trí na cealla ionfhabhtaithe le víreas a chuireann peiptídí víreasacha i láthair2,11 a scriosadh go díreach. Toisc gur féidir na heipitíopaí víreasacha iomadúla19 a tháirgeadh ó aon phróitéiní víreasacha seachas próitéin Spike le haghaidh cur i láthair mór casta histocompatibility, ní fhéadfadh sócháin núíosacha an faireachas imdhíonachta T cille a bhriseadh go héasca. Sa pheirspictíocht seo, beidh geallúintí ag vacsaíní a d’fhéadfadh freagairtí imdhíonacha víreas T-shonracha marthanacha a chothú go gcothófar imdhíonacht éifeachtach daonra i gcoinne SARS-CoV-2.

Modhanna

Faisnéis othar.

Fuair ​​agus chuir Ospidéal Ochtú Daoine Guangzhou, an t-ospidéal oifigiúil arna cheapadh ag rialtas Guangzhou, cóireáil ar othair COVID le linn na chéad tonn de leathadh endemic SARS-CoV ó Eanáir 2020 go Márta 2020. Glacadh 299 othar isteach ann. Cláraíodh Ospidéal Ochtú Daoine Guangzhou sa staidéar siarghabhálach seo. Ghlac dhá chéad agus ceithre othar páirt sa staidéar leantach trí sholáthar uair amháin ar a laghad. Bailíodh faisnéis ghinearálta othar, lena n-áirítear aois, gnéas, agus diagnóis chliniciúil, ó chóras faisnéise an ospidéil. Rinneadh gach othar a dhiagnóisiú de réir na gcritéar sa phlean nua diagnóis agus cóireála niúmóine Coronavirus (leagan trialach 7) arna eisiúint ag an gCoimisiún Náisiúnta Sláinte agus Sláinte. De réir na gcritéar seo a leanas a rinneadh an diagnóis thromchúiseach ar shiomptóim:

1. Anacair riospráide, ráta riospráide (RR) Níos mó ná nó cothrom le 30 uair/nóiméad sa staid scíthe.

2. Sáithiú ocsaigine Níos lú ná nó cothrom le 93 faoin gcéad sa stát scíthe.

3. Páirtbhrú ocsaigine fola artaireach (PaO2)/tiúchan ocsaigine (FiO2) Níos lú ná nó cothrom le 300 mmHg).

4. Íomháú raideolaíochta cófra meathlaithe (X-gha agus íomháú CT ardtaifigh) mar chabhair.

Rinneadh an symptom measartha a diagnóisíodh nuair a bhí niúmóine sofheicthe, fiabhras, agus/nó comharthaí riospráide eile ag othair. diagnóisíodh an symptom Éadrom nuair a bhí sé beagán míchompordach ach gan comharthaí niúmóine. diagnóisíodh cásanna asymptomatic nuair nach raibh aon chomhartha ar chomharthaí cliniciúla ag na hothair ach deimhníodh go raibh siad SARS-CoV-2 víreasach RNA dearfach le linn na céime leanúnaí tar éis nochtadh víreasach nó dlúth-theagmháil le cásanna deimhnithe.

Sainmhínithe.

Roinneadh gach duine a ghlac páirt sa chlár leantach seo ina dhá chéim: na céimeanna othar cónaitheach agus leantach. Rinneadh an dara ceann a ghrúpáil tuilleadh mar 1-mhí (laistigh de 60 lá tar éis scaoilte), 3-mí (70 go 135 lá), 6-mí (150 go 220 lá), agus {{11 }}mí (280 go 360 lá).

Tomhas ar antasubstaintí víreasacha-shonracha IgA, IgG, agus IgM.

Díghníomhaíodh samplaí plasma nó serum ag 56 céim ar feadh 30 nóiméad agus stóráiltear iad ag −80 céim roimh thástáil. Tástáladh antasubstaintí IgA, IgG, agus IgM i gcoinne próitéin spíc RBD SARS-CoV i samplaí plasma le feisteáin imdhíon-mheasúnaithe indíreach dhá chéim leictrichemiluminescence (Kangrun Biotech Co., Ltd.), de réir threoracha an mhonaróra. Go hachomair, goraíodh na samplaí séiream ar dtús le micreacháithníní modhnaithe. Bhí na micrea-cháithníní brataithe le RBD na próitéine spíc SARS-CoV-2 agus le antasubstaintí lipéadaithe eistear aicridín i gcoinne fearann ​​Fc antasubstaintí daonna. Tar éis roinnt babhtaí de shubstaintí neamhcheangailte a ní, rinneadh comhartha a bhrath ar anailísí imdhíonachta uathoibríoch chemiluminescence (KAESER1000, Chongqing Cosmax Biotech Co., Ltd.).

Ar an gcaoi chéanna, rinneadh tástáil ar antasubstaintí IgG i gcoinne próitéin Spike lán-fhad SARS-CoV i samplaí plasma le feisteáin imdhíon-mheasúnaithe imdhíon-mheasúnaithe indíreach dhá chéim (Mairui Biotech Co., Ltd.), de réir threoracha an mhonaróra. Rinneadh na tástálacha go léir faoi dhianchoinníollacha bithshábháilteachta. Rinneadh tástáil ar an titer antashubstainte uair amháin in aghaidh an tséiream sampla. Cuirtear leibhéil antasubstainte i láthair mar na luachanna tomhaiste ceimiceacha a roinntear ar an scoite (innéacs scoite, COI). COI<1 was regarded as negative, and COI >measadh go raibh 1 dearfach.

Measúnacht micri- neodraithe.

Caolaíodh séiream teas-dhíghníomhaithe go sraitheach faoi cheathair (ó 1:4 go 1:1024) agus ansin measctha le toirt comhionann (125 ul) de thuaslagán víreasach ina raibh 100 TCID50 de SARS-CoV-2. Ansin, goraíodh meascáin de shéiream-víreas den chéad uair ar feadh 2 h ag 37 céim agus ansin cuireadh iad i ndúblach ar mhonaiméadair VERO E6 leathsheolta. Tar éis 4-lá goir, rinneadh measúnú ar thoibreacha ionfhabhtaithe le víreas. Sainmhíníodh toibreacha a bhfuil éifeacht cíteapatóigineach infheicthe acu mar ionfhabhtú víreas dearfach.

Measúnachtaí Daonna IFN- ELISPOT

Rinneadh measúnachtaí IFN- ELISPO mar a thuairiscítear roimhe seo (1) Go hachomair, brataíodh plátaí scagaire tobair MultiScreen (Merck Millipore, Darmstadt, an Ghearmáin) le hantasubstaint IFN-monaclónach frithdhaonna (U-Cytech, an Ísiltír, Uimh. CT{) {5}}) thar oíche ag 4 céim C. Níodh na toibreacha le PBS agus blocáladh iad le meán R10 (RPMI-1640, 0.05 mM, 2-mercaptoethanol, 1 mM pyruvate sóidiam, L-glutamáit 2mM, 10 mM 4-(2-hiodrocsaitil)-1-aigéad píobaireatán-atáinesulfónach [HEPES], séiream bó-ainmhithe féatais 10 faoin gcéad [FBS], agus peinicillin/streiptimícin (1×)) le haghaidh 2 h ag 37 céim C. Plátáladh agus spreagadh PBMCanna úrscoite i láthair linnte peiptíde SARSCOV-2 S1 nó S2 nó N (GenScript, an tSín) ar feadh 24 h ag 37 céim C. SARS-COV{{29 }} Tá peptides 20 aimínaigéad ar fad, le deich aimínaigéad forluí idir peptides seicheamhach. Niteadh na plátaí le PBS-Tween 20 (PBST), agus ina dhiaidh sin gor iad le hantasubstaint braite IFN-bhith-dhaonna frithdhaonna (U-Cytech, an Ísiltír, Uimh. CT640-10) agus streiptínín comhchuingeach phosphatase alcaileach (AKP) (BD). , SAM, Uimh. 554065). Forbraíodh spotaí trí ghoradh in NBT/BCIP (Pierce, SAM) ar feadh 10 nóiméad. Áiríodh spotaí ag baint úsáide as léitheoir ELISPOT (Bioreader 4000, BIOSYS, an Ghearmáin). Tuairiscítear líon na gceall spotfhoirmithe (SFC) mar líon na gceall urrúsaithe IFN a bhaineann go sonrach le hantaigin in aghaidh gach milliún PBMC.

Anailís staitistiúil.

Úsáideadh an t-tástáil neamhphéireáilte le ceartúchán Welch, tástáil Chi-cearnóg, agus tástáil chomhghaolaithe Pearson chun anailís a dhéanamh ar na sonraí i mbogearraí GraphPad PRISM (Leagan 5.01). Rinneadh comparáid idir na difríochtaí idir grúpaí agus úsáid á baint as an U-tástáil Mann-Whitney agus an tástáil suime Kruskal-Wallis le haghaidh comparáidí iolracha le stiúideo R (leagan 4.0.2).

Faomhadh eiticiúil.

D'fhormheas coiste eitice leighis Ospidéal Ochtú Daoine Guangzhou (Uimh. 202001134 agus 202020153) an staidéar. Fuarthas toiliú scríofa ó dhaoine deonacha.

Achoimre tuairiscithe.

Tá tuilleadh faisnéise ar dhearadh taighde ar fáil san Achoimre ar Thuairisciú Taighde Dúlra atá nasctha leis an alt seo.

Infhaighteacht sonraí

Dearbhaíonn na húdair go bhfuil na sonraí go léir a thacaíonn le torthaí an staidéir seo ar fáil laistigh den pháipéar agus ina chomhaid faisnéise forlíontacha. Áirítear sonraí foinse mar chomhad Foinse Sonraí. Cuirtear sonraí foinseacha ar fáil sa pháipéar seo.

Tagairtí

1. Garcia-Beltran, WF et al. Déanann antasubstaintí neodraithe COVID-19-a thuar déine galair agus marthanacht. Cill 184, 476–488 (2020).

2. Deng, W. et al. Cosnaíonn nochtadh príomhúil do SARS-CoV-2 ar ath-ionfhabhtú i macaques rhesus. Eolaíocht 369, 818–823 (2020).

3. Chen, P. et al. SARS-CoV-2 antashubstaint LY-CoV555 a neodrú in othair sheachtracha a bhfuil Covid-19 orthu. N. Béarla. J. Med 384, 229–237 (2020).

4. Polack, FP et al. Sábháilteacht agus éifeachtúlacht na vacsaíne BNT162b2 mRNA Covid-19. N. Béarla. J. Med. 383, 2603–2615 (2020).

5. Huang, C. et al. 6-iarmhairtí mí de COVID-19 in othair a scaoiltear amach as an ospidéal: staidéar cohórt. Lancet 397, 220–232 (2021).

6. Dan, JM et al. Cuimhne imdhíoneolaíoch ar SARS-CoV-2 measúnaithe ar feadh suas le 8 mí tar éis an ionfhabhtaithe. Eolaíocht 371, eabf4063 (2021).

7. Tan, CW et al. Tástáil neodrúcháin víreas ionaid SARS-CoV-2 bunaithe ar bhac ar idirghníomhaíocht próitéine-próitéin ACE-idirghabhálaithe. Nat. Biteicneolaíocht. 38, 1073–1078 (2020).

8. Hu, F. et al. Baineann freagra imdhíonachta greannach sainiúil i gcontúirt i gcoinne an fhearainn cheangailteach gabhdóirí SARS-CoV-2 le marthanacht víreasach agus scaoileadh tréimhsiúil sa chonair gastrointestinal. Cill Mol. Imdhíonól. 17, 1119–1125 (2020).

9. Lukacs, NW & Malinczak, CA Díolúine cheallacha a shaothrú le haghaidh vacsaínithe i gcoinne víris riospráide. Vacsaíní 8, 783 (2020).

10. Kim, D. et al. An ailtireacht SARS-CoV-2 trascríobh. Cill 181, 914–921 (2020).

11. Le Bert, N. et al. Díolúine cille T ar leith SARS-CoV i gcásanna COVID-19 agus SARS, agus rialuithe neamh-ionfhabhtaithe. Nádúr 584, 457–462 (2020).

12. Sé, Z. et al. Séar-leithleadúlacht agus marthanacht imdhíonachta humoral na n-antasubstaintí frith-SARSCoV-2 i Wuhan, an tSín: staidéar trasghearrtha, fadaimseartha, ag leibhéal an daonra. Lancet 397, 1075–1084 (2021).

13. Figueiredo-Campos, P. et al. Séar-leitheadúlacht antasubstaintí frith-SARS-CoV-2 in othair COVID-19 agus oibrithe deonacha sláintiúla suas le 6 mhí tar éis don ghalar tosú. Eur. J. Imdhíon. 50, 2025–2040 (2020).

14. Marot, S. et al. Ilchineálacht neodraithe na n-athraitheacha SARS-CoV sa Ríocht Aontaithe agus san Afraic Theas in oibrithe cúram sláinte BNT162b atá vacsaínithe nó téarnaimh-19. Clin. Infect. Dis. ciab492 https://doi.org/ 10.1093/cid/ciab492 (2021). [Ar líne roimh phriontáil].

15. Sabino, EC et al. Athchéimniú COVID-19 i Manaus na Brasaíle, in ainneoin séireathrithiúlacht ard. Lancet 397, 452–455 (2021).

16. Tá éagsúlachtaí imní Singh, J., Rahman, SA, Ehtesham, NZ, Hira, S. & Hasnain, SE SARS-CoV-2 ag teacht chun cinn san India. Nat. Med. 27, 1131–1133 (2021).

17. Planas, D. et al. Íogaireacht na n-athróg tógálach SARS-CoV-2 B.1.1.7 agus B.1.351 maidir le hantasubstaintí a neodrú. Nat. Med. 27, 917–924 (2021).

18. Hacisuleyman, E. et al. Ionfhabhtuithe ceannródaíocha vacsaíne le leaganacha SARS-CoV-2. N. Béarla. J. Med. 384, 2212–2218 (2021).

19. Kiyotani, K., Toyoshima, Y., Nemoto, K. & Nakamura, Y. Réamh-mheastachán bithfhaisnéiseach ar eipitéipí féideartha T cille do SARS-Cov-2. J. Hum. Géinte. 65, 569–575 (2020).

Buíochas

Gabhaimid buíochas le baill uile an ghrúpa leantach COVID-19 as a rannchuidiú indíreach leis an staidéar seo. Gabhaimid buíochas leis na lianna agus na haltraí go léir a thug aire do na hothair seo agus a bhailigh na samplaí sa bharda leithlisithe. Gabhaimid buíochas freisin leis na teicneoirí saotharlainne go léir a láimhseáil na samplaí agus a rinne na tomhais ag Ospidéal Ochtú Daoine Guangzhou. Thacaigh Fondúireacht Náisiúnta Eolaíochta Nádúrtha na Síne leis an obair seo (Uimhreacha 81670536, 81770593, agus 82061138006), Clár Mór Náisiúnta um Rialú Príomh-Galar Tógálacha (2017ZX10202203-004-002 agus 2018ZX10301404-003-002), Roinn Cúige Guangdong ón gCiste Eolaíochta agus Teicneolaíochta (Uimh. 2020B1111330002), Clár Eolaíochta agus Teicneolaíochta Sláinte Guangzhou (20211A010029), Glao Maoinithe Mearfhreagartha ón Lárionad Sino-Ghearmáine um Chur Chun Cinn Taighde (SGC) ar Thograí Comhoibríocha Déthaobhacha idir an tSín agus an Ghearmáin i COVID{14 }} Taighde Gaolmhar (Uimh. C-0032), agus Príomhchlár Éigeandála Saotharlann Guangzhou (EKPG21-29).

Ranníocaíochtaí údair

Bhí XD, FH, CL, XT, agus FL freagrach as dearadh an staidéir, maoirseacht staidéir, agus anailís sonraí. Scríobh FH agus FL an páipéar. Bhí CF, YW, HH, FC, GT, YL, JL, JC, agus MJ freagrach as earcú othar agus bailiú sonraí samplacha agus cliniciúla. Rinne JS, PL, LF, agus LC na hanailísí seicheamhaithe agus bithfhaisnéisíochta. Rinne QF, LG, agus SC na tástálacha braite víreasacha RNA agus antasubstaintí. Rinne CK an measúnú ar mhicrneutralization.

Leasanna iomaíocha

Ní dhearbhaíonn na húdair aon leasanna iomaíocha.

Eolas breise

Ba cheart comhfhreagras agus iarratais ar ábhar a sheoladh chuig XD, FH, XT, nó FL

Faisnéis athbhreithnithe piaraí Gabhann Nature Communications buíochas le Bin Cao agus leis an athbhreithneoir/na hathbhreithneoirí eile, gan ainm, as an méid a chuir siad leis an athbhreithniú piaraí ar an obair seo. Tá tuairiscí athbhreithneora piaraí ar fáil.

Nóta ón bhfoilsitheoir Tá Springer Nature fós neodrach maidir le héilimh dhlínsiúla i léarscáileanna foilsithe agus i gcleamhnachtaí institiúideacha.

Rochtain Oscailte

Tá an t-alt seo ceadúnaithe faoi Creative Commons Attribution 4.0 Cheadúnas Idirnáisiúnta, a cheadaíonn úsáid, comhroinnt, oiriúnú, dáileadh agus atáirgeadh in aon mheán nó formáid, chomh fada agus a thugann tú creidmheas cuí don bhunúdar(na húdair ) agus an fhoinse, nasc a sholáthar leis an gceadúnas Creative Commons, agus cuir in iúl an ndearnadh athruithe. Tá na híomhánna nó ábhar tríú páirtí eile san alt seo san áireamh i gceadúnas Creative Commons an ailt mura gcuirtear a mhalairt in iúl i líne creidmheasa an ábhair. Mura bhfuil ábhar san áireamh i gceadúnas Creative Commons an ailt agus mura bhfuil d’úsáid bheartaithe ceadaithe ag rialachán reachtúil nó má sháraíonn tú an úsáid cheadaithe, beidh ort cead a fháil go díreach ó shealbhóir an chóipchirt.

For more information:1950477648nn@gmail.com