Éifeachtaí Cosanta Aigéad Alfa-Lipoic i gCoinne 5-Mucositis Gastraistéigeach arna Spreagadh ag Fluorouracil i bhFrancaigh Cuid 1

Teibí: Úsáidtear aigéad alfa-lipoic (ALA) go forleathan i bhfoirmlí multivitamin agus i dtáirgí frith-aosaithe. Ba é cuspóir an staidéir seo imscrúdú a dhéanamh ar na tairbhí cosanta a d’fhéadfadh a bheith ag ALA ar 5-mucositis gastrointestinal de bharr fluorouracil (5-FU) i bhfrancaigh Wistar albino. Gearradh fíocháin ón mbolg, ón stéig bheag agus ón stéig mhór, agus fuarthas séiream fola chun innéacsanna bithcheimiceacha a aithint amhail TNF- , IL-1 , MDA, GPx, SOD, MMP-1, {{{} 8}}, -8, agus TIMP-1. Rinneadh staidéar histeapaiteolaíoch freisin. Léirigh na torthaí leibhéil mucositis-ardaithe TNF-, IL-1, MDA, MMP-1, -2, -8, agus TIMP-1 i bhfíocháin agus i séiream. agus thit na luachanna seo go mór i ndiaidh cóireála ALA. Rinneadh gníomhaíochtaí laghdaithe SOD agus GPx i ngrúpaí mucositis a aisiompú i ngrúpaí cóireáilte ALA. An damáiste a tháirgtear ag mucositis sa boilg agus stéig bheag aischéimnithí sa ghrúpa cóireáilte ALA, de réir meastóireachta histeapaiteolaíochta. Mar thoradh air sin, d’fhéadfadh forlíonadh ALA a chur i bhfeidhm i 5-teiripe FU gníomhú mar idirghabháil chosanta d’othair ailse a bhfuil mucositis gastraistéigeach orthu. I bhfianaise na dtorthaí, d'fhéadfadh ALA, frithocsaídeoir a dhíorthaítear ó bhia a bhfuil airíonna pleiotrópacha aige, a bheith ina chóireáil éifeachtach do 5-mucositis gastrointestinal spreagtha ag FU, agus cosc ​​a chur ar strus ocsaídiúcháin, athlasadh agus damáiste fíocháin in othair ailse a fhaigheann {{{{{). 24}}teiripe FU.

Is féidir le glycosíde cistanche méadú freisin ar ghníomhaíocht SOD i bhfíocháin chroí agus ae, agus laghdaítear go suntasach an t-ábhar lipofuscin agus MDA i ngach fíocháin, ag scavening go héifeachtach fréamhacha ocsaigine imoibríocha éagsúla (OH-, H₂O₂, etc.) agus a chosaint i gcoinne damáiste DNA a dhéantar. ag OH-radacach. Tá cumas láidir scavening fréamhacha saor in aisce ag gliocóisídí cistanche feinileatánóideach, cumas laghdaithe níos airde ná vitimín C, feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD i bhfionraí sperm, laghdú ar ábhar MDA, agus tá éifeacht chosanta áirithe acu ar fheidhm membrane sperm. Is féidir le polaisiúicrídí cistanche feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD agus GSH-Px in erythrocytes agus fíocháin scamhóg lucha senescent turgnamhacha de bharr D-galactós, chomh maith le hábhar MDA agus collagen sa scamhóg agus plasma a laghdú, agus ábhar elastin a mhéadú. éifeacht scavenging maith ar DPPH, fadú am hypoxia i lucha senescent, feabhas a chur ar ghníomhaíocht SOD i serum, agus moill a chur ar dhíghiniúint fiseolaíoch scamhóg i lucha senescent turgnamhach Le díghiniúint moirfeolaíoch cheallacha, léirigh turgnaimh go bhfuil an cumas frithocsaídeach maith ag Cistanche. agus tá an cumas aige a bheith ina dhruga chun galair aosaithe craicinn a chosc agus a chóireáil. Ag an am céanna, tá cumas suntasach ag echinacoside i Cistanche fréamhacha saor in aisce DPPH a scaveneáil agus féadann sé speicis ocsaigine imoibríocha a scavening, cosc ​​a chur ar dhíghrádú collagen saor ó radacach, agus tá éifeacht mhaith deisiúcháin aige freisin ar damáiste anion radacach saor ó thymine.

Cliceáil ar Cistanche Tubulosa

【Le haghaidh tuilleadh eolais:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

1. Réamhrá

Tá aigéad alfa-lipoic (ALA) i láthair i raon leathan bianna, lena n-áirítear glasraí (spionáiste, brocailí, trátaí) agus meats (go háirithe viscera), chomh maith le roinnt forlíontaí cothaitheacha [1,2]. Tá éifeachtaí frithocsaídeacha iomadúla ag ALA, lena n-áirítear meicníochtaí frithocsaídeacha ingenous a ghníomhachtú agus iain miotail a chealú mar iarann, since, agus copar [3,4]. Mar mhóilín orgánosulfair, is féidir le ALA speiceas ocsaigin imoibríoch (ROS) a scaveneáil agus gníomhaíocht na n-einsímí frithocsaídeacha fíocháin cosúil le glutathione peroxidase (GPx) agus superoxide dismutase (SOD) [5-7] a threisiú. Mar gheall ar a n-airíonna frithocsaídeacha, fuarthas go laghdaigh ALA bás cille atá ag brath ar ALA in ailse scamhóg [8], ailse chíche [9], agus ailse drólainne [10]. Ina theannta sin, léirigh taighde níos luaithe go bhfuil airíonna frith-athlastacha ag ALA [11-16]. Oibríonn ALA chun athlasadh a laghdú trí léiriú cítocíní athlastacha a mhodhnú ar nós fachtóir necrosis meall-alfa (TNF- ) agus interleukin -1 (IL-1 ) [17,18]. Tá buntáistí cógaseolaíochta ALA cruthaithe i raon leathan de réimsí a bhaineann le cógais, lena n-áirítear samhlacha cardashoithíoch, neuroprotective, cognaíocha agus frith-aging [19].

Is í ailse an phríomhchúis le básmhaireacht i ngach tír agus bac mór ar fad saoil [20]. Tá fo-iarsmaí na gcógas ceimiteiripeach ar cheann de na fachtóirí díblithe is tábhachtaí sa chomhrac in aghaidh ailse, agus tá mucositis ar cheann de na galair is forleithne a bhíonn in othair ailse [21]. Is coinníoll athlastach paiteolaíoch é mucositis arb é is sainairíonna é ulceration agus athlasadh mhúcóis an chórais gastrointestinal [22]. Méadaíonn mucositis úsáid anailgéisigh opioid mar gheall ar phian agus tapaíonn sé an t-aistriú go cothú parenteral iomlán de bharr saincheisteanna cothaitheacha [23]. Laghdaíonn mucositis agus deacrachtaí a bhaineann le mucositis cáilíocht beatha an othair, agus is cúis imní iad forbairt coinníollacha bagrach don bheatha agus freagraí diúltacha ar theiripe mar gheall ar dhrochchóireáil loit [24].

Is é an druga ceimiteiripeach is minice a úsáidtear i hurchóideacht gastrointestinal ná an analóg pyrimidine 5-fluorouracil (5-FU). 5-Cuireann FU a éifeachtaí frith-ailse i bhfeidhm trí shintéis thymidylate (TS) a chosc agus a mheitibilítí a chomhtháthú isteach i RNA agus DNA [25]. Mar sin féin, spreagann an gníomhaire seo mucositis gastrointestinal, fo-iarmhairt dhochrach tromchúiseach [26]. Go háirithe, tá ról mór ag díghrádú an iarmhéid ocsaídeach-frithocsaídeach, méadú ar leibhéil cítocín pro-athlastach, agus gníomhaíocht einsím próitéalaíoch i bhforbairt na n-éifeachtaí díobhálacha seo. Cé gur úsáideadh leigheasanna frithocsaídeacha agus frith-athlastacha mar iarracht chun aghaidh a thabhairt ar an tsaincheist seo, tá modh teiripeach láidir go háirithe le haithint fós [27,28].

Go dtí seo, thuairiscigh roinnt staidéar go n-úsáidtear 5-FU agus ALA le chéile in ailsí éagsúla; áirítear orthu seo tumaí ceirbheacsacha agus colorectal [29,30]. Ina theannta sin, bheadh ​​buntáiste ag baint le cógais chúnta a d'fhéadfaí a ionchorprú i nósanna imeachta cóireála chun othair ailse a chosc ó éifeachtaí díobhálacha mucositis gastraistéigeach a tharlódh 5-FU. Mar sin, ba é cuspóir an staidéir seo na héifeachtaí bitheolaíocha a bhaineann le húsáid ALA i bhfrancaigh le múnla mucositis cruthaithe ag 5-FU a chinneadh, chomh maith le scrúdú a dhéanamh ar a úsáid fhéideartha mar ghníomhaire iarrthóra i bprótacail chóireála.

2. Ábhair agus Modhanna

2.1. Ainmhithe

Tógadh na hainmhithe ó Aonaid Turgnaimh Ainmhithe na hOllscoile Neasoirthear. Coinníodh na francaigh (Wistar albino, an dá inscne) faoi thimthriall dorcha/éadrom 12:12 h ón tús ag teocht an tseomra de 22 ± 2 ◦C i saoráid taise-rialaithe (50 ± 5 faoin gcéad ). Bhí an bheathú ad libitum gan srian ar bith ar a ngnáth-chow francach agus uisce óil. Bhí francaigh lonnaithe i gcliabhán plexiglass (4 francach in aghaidh an chliabháin le toisí 60 × 40 × 40 cm). D’údaraigh Coiste Eitice um Thurgnaimh Ainmhithe Áitiúla Ollscoil an Neasoirthear an prótacal staidéir (Faomhadh Uimh. 2019/01 an 17 Eanáir 2019 agus 2020/11 an 27 Samhain 2020), agus treoirlínte eiticiúla a luaitear i nDearbhú Helsinki 1964 agus a leasuithe níos déanaí. ina dhiaidh sin.

Leithdháileadh tríocha dó francach Wistar Albino den dá ghnéas a mheá 200-250 g i gceithre ghrúpa d'ocht bhfrancach an ceann (n=8): Rialú, ALA, Mucositis, agus Mucositis móide grúpaí ALA. Ní bhfuair an Grúpa Rialaithe ach saline intraperitoneal (ip) (SF) uair amháin sa lá ar feadh seachtaine. Ní bhfuair an grúpa ALA ach ALA ag dáileog de 100 mg/kg ip uair amháin sa lá ar feadh seachtaine ó lá 1 [31,32]. Cóireáladh an grúpa Mucositis le SF (ip) ar lá 1 agus 400 mg/kg 5-FU ip ó lá 2 go deireadh an turgnaimh [33]. Fuair ​​an grúpa Mucositis móide ALA 100 mg/kg ip ALA ar lá 1 agus 400 mg/kg ip 5-FU ar lá 2. Ansin, leanadh le riarachán ALA 100 mg/kg/lá ip go dtí deireadh an turgnaimh. . Rinneadh monatóireacht ar na hainmhithe ar feadh seachtaine agus níor tharla aon bhásanna le linn an ama sin. Rinneadh na hainmhithe i ngach grúpa a eotánú ag deireadh na tréimhse taighde trí mheascán de ródháileog cetimín/xylazine a thabhairt. Rinneadh measúnachtaí saotharlainne sa tSaotharlann Diagnóiseach agus Saotharlann Histeapaiteolaíochta an Ospidéil Ainmhithe, Ollscoil Neasoirthear.

2.2. Bailiú Samplaí Fola agus Fíocháin

Fuarthas samplaí fola agus cuireadh faoi bhráid na saotharlainne iad i bhfeadáin deighilteoirí séiream. Scaradh na samplaí serum ag 2000 × g ar feadh 10 nóiméad agus coinníodh iad ag −80 ◦C go dtí go ndéanfar anailís bhreise orthu. Chun deireadh a chur le fuil bhreise, bailíodh fíocháin boilg, stéig bheag, agus intestine mór agus rinsíodh iad le tuaslagán maolánach fosfáit (pH=7.4). Ansin, tar éis iad a sheachadadh chuig an tsaotharlann, chuaigh siad faoi nós imeachta homogenization. Rinneadh homogenization fíocháin de réir phrótacal an mhonaróra ag baint úsáide as maolán RIPA (mír uimh. 10010263, Baisc Uimh. 0490889-1, Cayman Chemicals, Ann Arbor, MI, SAM) agus sraith grinder fíocháin Dounce (D8938, Lot. 3110, Sigma -Aldrich, St. Louis, MO, USA) ar oighear. Tar éis homogenization, lártheifneoiríodh samplaí ag 1600 × g ar feadh 10 nóiméad ag móide 4 ◦C. Baineadh úsáid as an teicníc um chinneadh próitéin Bradford chun leibhéil próitéine i samplaí fíocháin a chainníochtú, agus reoitear súdairí ansin ag −80 ◦C lena imscrúdú ina dhiaidh sin.

2.3. Innéacsanna Bithcheimiceacha a Thomhais

Gníomhaíochtaí alanine transaminase (ALT), aspartate transaminase (AST), phosphatase alcaileach (ALP), lactate dehydrogenase (LDH), lipase (LIP), amaláis (AMY), creatinín, nítrigin úiré fola (BUN), próitéin iomlán (TP) , agus rinneadh leibhéil albaimin a thomhas mar innéacsanna bithcheimiceacha i samplaí séiream ag baint úsáide as Anailíseoir Ceimice Cliniciúil BS-240 Uathoibrithe VET (Mindray, Shenzhen, an tSín).

2.4. Tomhas na gCítocíní i Séirea agus i bhFíocháin

Tomhaiseadh tiúchain TNF- agus IL-1 i samplaí séirea agus fíocháin trí úsáid a bhaint as feisteáin mheasúnachta imdhíon-ionsorbaigh atá nasctha le heinsímí a bhaineann go sonrach le francach (ELISA) (ELR-TNF- agus ELR-IL1 -) atá ar fáil go tráchtála, RayBiotech Life Inc., Norcross, GA, SAM) tar éis treoracha an mhonaróra.

2.5. Tomhas Miotalóipiáisí Maitrís (MMPanna) agus Coscairí Fíocháin Metalloproteinase-1 (TIMP-1) i Sera agus i bhFíocháin

Rinneadh MMPanna agus TIMP-1, a bhfuil baint acu le próisis éagsúla bhitheolaíocha, amhail ailse agus athlasadh, a thomhas in aonchineálach fíocháin agus i séiream ag baint úsáide as treoracha agus moltaí an déantóra ó thástálacha ELISA a bhaineann go sonrach le francaigh (MMP{). {2}} E-EL-R0617; Elabscience, Wuhan, an tSín; MMP-2 ELR-MMP2; MMP-8 ELR-MMP8; TIMP-1 ELR-TIMP-1 RayBiotech Life Inc., Norcross, GA, SAM). Léiríodh comhchruinnithe serum de na MMPanna agus TIMP-1 mar pg/mL, agus cuireadh leibhéil fíocháin in iúl mar phróitéin pg/mg.

2.6. Tomhas Malondialdehyde (MDA), GPx, agus SOD i bhFíocháin

Rinneadh measúnú ar leibhéil MDA i bhfíocháin ag baint úsáide as feisteáin mheasúnachta atá ar fáil ar bhonn tráchtála chun staid sárocsaídiúcháin lipid a chinneadh (TBARS Assay Kit, ítim uimh. 10009055, Cayman Chemicals, Ann Arbor, MI, USA). Tá an prionsabal tomhais bunaithe ar an imoibriú le haigéad thiobarbituric (TBA) in uisce fiuchphointe ar feadh 60 nóiméad i meán aigéadach agus tomhas ionsúchán an mheascáin imoibriúcháin ag 532 nm (Ohkawa et al., 1979). Baineadh úsáid as Léitheoir Micrphláta Tunable VersaMax chun an ionsúiteacht a thomhas (Feistí Móilíneacha, San Jose, CA, SAM). Cuireadh tiúchan MDA i bhfíocháin in iúl mar phróitéin nmol MDA/mg.

I bhfíocháin, rinneadh meastóireacht ar ghníomhaíocht GPx agus SOD ag baint úsáide as feisteáin mheasúnachta réidh le húsáid. (RANSEL RS505, RANSOD SD125, Randox Laboratories Ltd., Cromghlinn, an RA) trí úsáid a bhaint as Anailíseoir Ceimic Chliniciúil BS-240 Uathoibrithe VET (Mindray, Shenzhen, an tSín). Cuireadh na cainníochtaí GPx agus SOD sna samplaí fíocháin (boilg, stéig bheag, agus stéig mhór) in iúl mar phróitéin U/mg.

2.7. Meastóireacht Histeapaiteolaíochta

Socraíodh fíocháin an bholg, an stéig bheag, agus an stéig mhór a fuarthas díreach tar éis na tréimhse turgnamhaí i 10 faoin gcéad (v/v) formalin neodrach ar feadh 24 h ag teocht an tseomra. Tar éis an tsocraithe, cuireadh na fíocháin ar fheiste rianaithe fíocháin, Leica TP1020 (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, an Ghearmáin). Ansin leabaíodh fíocháin a tógadh ón bhfeiste rianaithe fíocháin i pairifín. Gearradh codanna de 5-µm de thiús ó na fíocháin le cabhair ó mhicreatóim Leica RM2255 (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, an Ghearmáin), agus rinneadh gnáth-staining hematoxylin & eosin (HE). Scrúdaíodh rannóga histomorphological le micreascóp solais Leica DM500 mar aon le córas anailíse íomháithe digiteach comhtháite Leica Microsystem Framework (Leica Application Suite leagan 3.0 Sraith 38132019, Leica ICC50 HD, Leica Biosystems Nussloch GmbH, Nußloch, an Ghearmáin).

2.8. Anailísí Staidrimh

Baineadh úsáid as bogearraí GraphPad Prism le haghaidh anailís staitistiúil (leagan 7.04, GraphPad Software, San Diego, CA, SAM). Cuireadh na sonraí go léir in iúl mar mheán ± diall caighdeánach (X ± SD). Baineadh úsáid as tástáil anailíse athraithis (ANOVA) chun grúpaí sonraí a chur i gcomparáid, agus ina dhiaidh sin tástáil iolrach comparáide Tukey. Ina theannta sin, baineadh úsáid as tástáil Kruskal-Wallis chun scóir histeamoirfeolaíocha i measc grúpaí a chur i gcomparáid lena chéile. Measadh difríocht p < 0.05 a bheith suntasach go staitistiúil.

3. Torthaí

3.1. Cuireann ALA Tionchar Dearfach ar Innéacsanna Bithcheimiceacha

Taispeánann Tábla 1 gníomhaíocht einsíme serum agus tiúchan meitibilít. I gcomparáid leis an ngrúpa Rialaithe, bhí leibhéil i bhfad níos airde d'albaimin, ALT, AST, ALP, LDH, amaláis, lipáis, BUN, creatinín, agus TP (p <0.05 ag an ngrúpa Mucositis. –0.0001). Mar sin féin, bhí difríocht shuntasach i leibhéil albaimin, AST, ALT, ALP, LDH, BUN, creatinine, amaláis, BUN, agus creatinín idir an grúpa ALA móide Mucositis agus an grúpa Mucositis (p <0.05–0.001). Bhí leibhéil ALP, ALT, AST, LDH, agus amaláis an-difriúil freisin idir na grúpaí Mucositis agus ALA (p <0.05-0.0001). Dá réir sin, breathnaíodh leibhéil na n-einsímí ae, na n-einsímí pancreatacha, agus na meitibilítí a laghdú go suntasach sa ghrúpa Mucositis nuair a cuireadh ALA leis an gcóireáil.

3.2. Laghdaíonn ALA Táirgeadh Cítocíní Réamh-Athlasta

Is féidir na leibhéil cítocíní pro-athlastacha TNF- agus IL-1 i samplaí serum, boilg, stéig bheag, agus stéig mhór a fheiceáil i bhFíor 1. Na leibhéil TNF- agus IL-1 i séiream agus go léir. bhí fíocháin ainmhithe sa ghrúpa Mucositis i bhfad níos airde i gcomparáid le grúpaí Control, ALA, agus Mucositis móide ALA (p < 0.05–0.0{ {17}}{{20}}1). Mar sin féin, tháinig laghdú suntasach ar leibhéil TNF- agus IL-1 sa séiream agus i ngach fíochán sa ghrúpa Mucositis móide ALA i gcomparáid leis an ngrúpa Mucositis (p < 0.05–0.0001). Idir na grúpaí Rialú agus Mucositis móide ALA, bhí difríocht mhór i leibhéil TNF- sna intestines beag agus mór. (p < 0.01). Bhí difríochtaí suntasacha freisin i leibhéil TNF- sna hinní móra agus beaga idir na grúpaí ALA agus Mucositis móide ALA. (p < 0.01, p < 0.001, faoi seach). Ina theannta sin, bhí difríochtaí suntasacha staitistiúla idir na grúpaí Control agus Mucositis móide ALA i dtéarmaí leibhéil IL-1 sa bholg (p < 0.05). Dá bhrí sin, ba chosúil go raibh ALA faoi chois go mór na leibhéil cítocíní pro-athlastacha i mucositis.

3.3. Laghdaíonn Cóireáil ALA Sárocsaídiú Lipide agus Méadaíonn sé Gníomhaíochtaí Einsímí Frithocsaídeacha i bhFíocháin

Rinneadh leibhéil MDA, GPx, agus gníomhaíochtaí SOD a chainníochtú chun stádas sárocsaídiúcháin agus frithocsaídeach a mheas ag an leibhéal fíocháin (Fíor 2). Bhí leibhéil MDA i mbolg, i stéig bheag agus i stéig mhór an ghrúpa Mucositis i bhfad níos airde ná mar a bhí sna grúpaí Control, ALA, agus Mucositis móide ALA (p < 0.05–0 .0001). Ina theannta sin, bhí leibhéil MDA in intestine mór an ghrúpa Mucositis móide ALA difriúil go mór ó leibhéil na ngrúpaí Rialaithe agus ALA (p < 0.0001).

Bhí leibhéil SOD i bhfad níos airde ag francaigh sna grúpaí Rialúcháin agus ALA i ngach fíochán ná mar a bhí i bhfrancaigh sa ghrúpa Mucositis (p < {{0}}.05–{0.{8 }}{{10}}01). Bhí leibhéil SOD sna samplaí intestine mór difriúil go mór sna grúpaí ALA agus Mucositis móide ALA (p < 0.01). Sna samplaí boilg, bhí na leibhéil SOD i bhfad níos ísle sna grúpaí ALA agus Mucositis móide ALA (p < 0.05). Ina theannta sin, bhí leibhéil SOD sa stéig bheag francaigh ón ngrúpa Mucositis i bhfad níos ísle ná leibhéil SOD sa ghrúpa ALA (p < 0.05). Mar sin féin, bhí leibhéil SOD sa bholg agus sa stéig mhór ainmhithe sna grúpaí Mucositis agus Mucositis móide ALA go suntasach difriúil (p <0.05–0.0001).

3.4. Méadaíonn Cóireáil ALA Leibhéil na MMPanna Fíocháin agus TIMP-1

Bhí gníomhaíochtaí MMP{{0}}, MMP-2, MMP-8, agus TIMP-1 gníomhaíochtaí (Tábla 2) sa séiream, sa bholg, sa stéig bheag agus sa stéig mhór níos airde sa ghrúpa Mucositis i gcomparáid leis na grúpaí Rialaithe agus ALA (p < 0.05–0.0001). Cuireadh an t-ardú ar leibhéil MMP-1, MMP-2, MMP-8, agus TIMP{-1 i sera agus boilg francaigh Mucositis, stéig bheag, agus stéig mhór faoi chois go suntasach i Mucositis móide francaigh ALA (p < 0.05–0.0001), cé nach raibh aon difríocht shuntasach i leibhéil serum MMP-8 idir na grúpaí Mucositis móide ALA agus Mucositis.