Anailís Fhíteiceimiceach, Frith-iomadú In-vitro, Frith-oxidant Cuid 2

Déan teagmháil le do thoiloscar.xiao@wecistanche.comle haghaidh tuilleadh eolais

measúnacht coisctheach a-Glucosidase

Rinneadh sraith caolaithe de chodáin, chun tiúchain de 100,200,300,400, agus 500mg/ml a tháirgeadh. Bhí tuaslagán 0.1 ml 1U/ml -glúcosidase measctha le 0.2ml de chaolú eastósctha agus 0.5 ml maolán fosfáite 100mM, pH6.8, sna meascáin imoibriúcháin. Goradh na meascáin ag 37 céim ar feadh 15 nóiméad. Ansin, 0.2ml 5mM p-nitrophenyl-D-galactopyranosideCuireadh PNPG leis an meascán imoibrithe, agus leathnaíodh an gor ar feadh 20 nóiméad eile ag 37 céim . Cuireadh deireadh leis an imoibriú trí 0.1 M NazCO3 a chur leis. Taifeadadh an t-ionsúcht ag tonnfhad 405 nm do gach sampla. Baineadh úsáid as acarbose mar rialú dearfach ag na tiúchain chéanna leis na sleachta plandaí. Léiríodh na torthaí mar chosc ar chéatadán de réir na cothromóide seo a leanas:

áit a bhfuil Ag an absorbance gan inhibitor einsím, agus As é an absorbance i láthair an inhibitor einsím [26].

Línte cille agus measúnacht MTS

Fuarthas línte cille ailse HeLa agus MCF7 ó ATCC, saothraíodh na cealla i meáin RPMI-1640 arna fhorlíonadh le séiream bó féatais 10 faoin gcéad, antaibheathaigh peinicillin/streiptimícin 1 faoin gcéad, agus 1 faoin gcéad L-glutamine. Fásadh cealla in atmaisféar tais le 5 faoin gcéad CO2 ag 37 céim. Síolaíodh cealla ag 2.6×10* cealla/tobar i 96-phláta tobair. Tar éis 48h, bhí confluent cealla, athraíodh na meáin. Goradh cealla ansin le tiúchain codáin duille éagsúla ó 0.25-10 mg/ml de R. rothschildianus ar feadh 24h. Rinneadh measúnú ar inmharthanacht na gceall

leis an Measúnú CellTilter 96 céim Iomadú Cealla Réitigh Uisciúla a hAon (MTS) de réir threoracha an mhonaróra (Promega Corporation, Madison, WI). Go hachomair, ag deireadh na cóireála, cuireadh réiteach 20 ul MTS in aghaidh an mheáin 100ul le gach tobar agus gor é ag 37 céim ar feadh 2h. Tomhaiseadh ionsúcháin ag 490 nm [27,28].

Cliceáil anseo le do thoil chun tuilleadh eolais a fháil

Anailís staitistiúil

Gach ceann de na torthaí a fuarthas ó na ceithre chodán plandaí staidéar (frithocsaídeach, frith-lipáis,frith-amaláis, frith-glycosidase, aguscíteatocsaineachtSloinneadh gníomhaíochtaí) mar mheán±SD diall caighdeánach; measadh go raibh an toradh suntasach nuair a bhí an p-luach<0.05. data="" were="" compared="" using="" unpaired="">

Torthaí

Scagadh fíteiceimiceach

Léirigh torthaí na réamhthástálacha fíteiceimiceacha ar chodáin uiscí R. rothschildianus láithreacht saponin, feanóil, próitéin, stáirse, agus flavonoids. Léirigh an sliocht meatánóil láithreacht polaisiúicrídí casta, feanóil, próitéin, agus flavonoids, agus breathnaíodh feanóil, tannins, agus flavonoids sa chodán aicéatón, agus i feanóil codán heacsán, tannins, agus flavonoids, gliocóisídí, terpenoids, agus aithníodh stéaróidigh. mar a thaispeántar i dTábla 1 . Mar sin féin , don phróiseas eastósctha , léirigh meatánól an céatadán is airde toradh ag 29.4 faoin gcéad , agus ina dhiaidh sin an codán aicéatón ag 16.5 faoin gcéad . Tháinig an t-eastóscadh uiscí 10.6 faoin gcéad , agus bhí an toradh ab ísle (7.3 faoin gcéad ) sa chodán heacsán ( Tábla 2 ).

Anailís chainníochtúil ar TPC, TFC, agus TTC Chun meastóireacht a dhéanamh ar TPC, TFC, agus TTC, fuarthas na luachanna ionsúcháin (Abs) de roinnt tiúchan de na caighdeáin aigéid gallic, aigéad rutin, agus catechin (STDs), agus maidir leis na pointí seo. , fuarthas trí chothromóid do gach STD i gcoinne a tiúchain chun inneachar iomlán feanól, flavonoid, agus tannin na codáin heacsán, aicéatón, meatánóil agus uiscí R. Rothschild-diagnose a ríomh i dTábla 3.

Is féidir le Cistanche díolúine a fheabhsú

Gníomhaíocht frithocsaídeach

Léiríodh torthaí measúnaithe ar ghníomhaíocht scavenging radacach saor in aisce de cheithre chodán ó duilleoga R. rothschildianus, ag baint úsáide as Trolox mar thagairt chaighdeánach frithocsaídeach potent, mar chéatadán cosc ​​DPPH (Fíor 1 agus Tábla 4). Mar sin, d'fhéadfaí duilleoga R. rothschildianus a mheas mar fhoinse luibhe le haghaidh frithocsaídeoirí, agus don chodán aicéatón, a léirigh luach ICso de 6.3±0.4 ug/ml. Fuarthas torthaí comhchosúla freisin don chodán heics-ane, a raibh luach ICso de 7.9 ± 1.3ug/ml (Tábla 4). Cuireadh na torthaí i gcomparáid le Trolox, comhdhúil frithocsaídeach cumhachtach, le comhdhúil comhionann le 3.1±0.9 ug/ml freisin. I gcodarsnacht leis sin, níor léirigh an codán uiscí ach gníomhaíocht measartha frithocsaídeach, le luach ICso níos airde de 19.9 ±0.7ug/ml, fad is a bhí an t-eastóscán meatánóil neamhghníomhach sa mheasúnacht seo.

Gníomhaíocht choiscthe lipáis

Sa mheasúnacht seo, rinneadh comparáid idir gníomhaíocht frith-otracht na gcodán ó sliocht duilleoga R. rothschildianus le gníomhaíocht de

orlistat, oibreán coisctheach láidir lipáis (Fíor 2 agus Tábla 4).R. Foinse nádúrtha den scoth d'oibreáin choisctheacha lipáis a bhí sna duilleoga rothschildianus. Thaispeáin an codán aicéatón luach ICso de 26.3±0.6ug/ml, a bhí an-ghar do luach an chomhphunt tagartha orlistat (12.3±0.3ug/ml）). Níor thaifead codáin heacsán agus meatánóil ach luachanna measartha ICso, cothrom le 39.8±0.3ug/ml agus 60.3±0.4ug/ml, faoi seach; agus an codán uiscí neamhghníomhach.

gníomhaíocht choiscthe a-Amylase

Sa mheasúnacht seo, cuireadh gníomhaíocht frith-amaláis codáin ó sliocht duilleoga R. rothschildianus i gcomparáid le gníomhaíocht acarbose, gníomhaire coisctheach a-amaláis potent (Fíor 3). Ba é an codán aicéatón an t-inhibitor is cumhachtaí de -amaláis, le ICso de 19.0±0.7ug/ml, i gcomparáid le 28.8±1.2 ug/ml le haghaidh acarbose, an comhdhúil tagartha. Thug sé seo le tuiscint go bhféadfadh R. rothschildianus a bheith ina leigheas luibhe cumhachtach le haghaidh diaibéiteas. Níor léirigh an codán uiscí ach gníomhaíocht mheasartha sa mheasúnacht seo le luach ICso de 45.7±0.3 ug/ml, agus bhí luach ICso de 354.8±1.2ug/ml ag heacsán. Bhí an codán meatánóil neamhghníomhach in aghaidh na heinsíme -amaláis. freisin, ríomhadh luachanna do na ceithre chodán (Tábla 4).

gníomhaíocht choiscthe a-Glucosidase

Rinneadh comparáid idir na torthaí le haghaidh a glucosidase leo siúd le haghaidh acarbose, gníomhaire coisctheach einsím láidir, agus ríomhadh luachanna freisin do na ceithre chodán (Tábla 4 agus Fíor. 4). Rinne an codán aicéatón an gníomh coisctheach is mó ar -glucosidase le ICso de 54.9±0.3 ug/ml, i gcomparáid leis an acarbose, an comhdhúil tagartha, ag 37.1±{{10} }.3 ug/ml. I gcodarsnacht leis sin, níor léirigh an codán eastósctha meatánóil ach cosc ​​measartha ar -glucosidase, le ICso de 251.2 ± 0.4ug/ml, cé go raibh na codáin heacsán agus uiscí neamhghníomhach sa mheasúnacht seo.

Gníomhaíocht frith-iomadaithe

Léirigh torthaí cóireála cealla ailse HeLa agus MCF7 le cúig thiúchan éagsúla i mg/ml le haghaidh sleachta éagsúla go raibh an ghníomhaíocht i gcoinne líne cille ailse HeLa níos fearr ná i gcoinne líne cille ailse MCF7. Mar sin féin, bhí sliocht heacsán an ceann is cumhachtaí

sliocht ag tiúchan 4mg/ml le céatadáin chosc de 98.9 agus 97.4 faoin gcéad i gcoinne línte cille ailse HeLa agus MCF7, faoi seach, agus léirigh sliocht meatánóil ag an tiúchan céanna gníomhaíocht láidir i gcoinne línte cille ailse HeLa agus MCF7 le 97.2 agus 95.6 faoin gcéad céatadán cosc. Rinneadh doiciméadú ar chosc ar chéatadán cille HeLa ar nochtadh do chodáin ó duilleoga R. rothschildianus, i gcomparáid leis an doxorubicin rialaithe dearfach (Fíor 5a). Socraíodh ar chosc ar chéatadán cealla MCF7 mar an gcéanna do na ceithre chodán ó duilleoga R. rothschildianus, i gcomparáid leis an rialú (Fíor 5b).

Plé

Aithnítear go maith an measúnú scavenging radacach DPPH mar mhodh simplí chun cumas frithocsaídeach i gcomhphuinteanna a bhrath. Is radacach saor in aisce é DPPH a thugann dath corcra i dtuaslagáin alcóil, agus ar laghdú ar láithreacht frithocsaídeoirí deonaithe hidrigine, déanann sé an réiteach gan dath [29]. Mar sin, d'fhéadfaí duilleoga R. rothschildianus a mheas mar fhoinse nádúrtha frithocsaídeoirí, go háirithe don chodán aicéatón, a léirigh luach ICso de 6.3±0.4ug/ml. Fuarthas torthaí cosúla freisin don chodán heacsán, a raibh luach ICso de 7.9 ± 1.3 ug/ml (Tábla 4). Cuireadh na torthaí i gcomparáid le Trolox, comhdhúil frithocsaídeach cumhachtach, le comhdhúil comhionann le 3.1±0.9 ug/ml freisin. I gcodarsnacht leis sin, níor léirigh an codán uiscí ach gníomhaíocht measartha frithocsaídeach, le luach ICso níos airde de 19.9 ±0.7 ug/ml, fad is a bhí an t-eastóscán meatánóil neamhghníomhach sa mheasúnacht seo. Bhí na torthaí seo comhsheasmhach le láithreacht feanóil agus flavonoids sa phlanda, foinse cumhachtach scavenger le haghaidh fréamhacha saor in aisce mar a thaispeántar le DPPH sa staidéar seo. Bhí na torthaí seo ag teacht le héagsúlacht na gcomhdhúile feanólacha i bplandaí, feanóil shimplí cosúil le haigéad gallach, agus aigéid feanólacha níos sofaisticiúla mar anthocyanins, díorthaigh aigéad hiodrocsaile cinnamic, agus flavonoids. Tá aird fhorleathan tugtha ar na haicmí comhdhúile seo go léir mar gheall ar a bhfeidhmeanna fiseolaíocha iolracha, go háirithe gníomhaíochtaí scavening radacach saor in aisce, frith-só-ghineach, frith-athlastach agus frith-charcanaigineach [30]. Mar atá liostaithe i dTábla 3, thaifead an sliocht aicéatón an t-ábhar is airde de chomhdhúile feanólacha agus flavonoids araon, 28.2 ± 0.8mg de GAE/g agus 107.3 ± 4.6mg de RU/g, faoi seach. Fuair ​​​​tuarascáil roimhe seo ar roinnt speiceas Rumex comhdhúile feanólacha i sliocht eatánóil ó dhuilleoga Rumex ionadach L., a raibh baint acu, b'fhéidir, le frithghníomhartha radacacha saor in aisce, ag laghdú an radacach DPPH cobhsaí a úsáidtear go dtí díorthach défheinile picrylhydra-zine daite buí óna Violet bunaidh. dath [31].

R. rothschildianus leaves were an excellent alternative natural source of lipase inhibitory agents. The acetone fraction showed an ICso value of 26.3±0.6μg/ml, which was very close to that of the reference compound orlistat （12.3±0.3μg/ml）. Hexane and methanol fractions only re-corded moderate ICso values, equal to 39.8±0.3 μg/ml and 60.3±0.4μg/ml, respectively; while the aqueous fraction was inactive. Pancreatic lipase is a major enzyme involved in enterocyte triglyceride absorption. Therefore, its inhibition represents an important strategy in the management of obesity [32]. Plants rich in phenolic compounds have been screened in several reports for anti-lipase activity. Lipase inhibitory activity ranging from 40 to >Fuarthas 70 faoin gcéad ag tástálacha in vitro i go leor teaghlaigh éagsúla, lena n-áirítear Solanaceae (Solanum tuberosum), Brassicaceae (Brassica nigra agus Raphanus sativus), Rosaceae (Malus Domestica Borkh. agus Filipendula ulmaria (L.) Maxim.),

(Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng. agus Ericaceae Vaccinium myrtillus L.), agus Fabaceae (Pisum sativum L. agus Phaseolus vulgaris L.)[33].

Ba é an codán aicéatón an t-inhibitor is cumhachtaí de -amaláis, le ICso de 19.0±0.7ug/ml, i gcomparáid le 28.8±1.2 ug/ml le haghaidh acarbose, an comhdhúil tagartha. Thug sé seo le tuiscint go bhféadfadh R. rothschildianus a bheith ina leigheas luibhe cumhachtach le haghaidh diaibéiteas. Níor léirigh an codán uiscí ach gníomhaíocht mheasartha sa mheasúnacht seo le luach ICso de 45.7±0.3 ug/ml, agus bhí luach ICso de 354.8±1.2 ug/ml ag heacsán. Bhí an codán meatánóil neamhghníomhach in aghaidh -amaláis. Míniú féideartha ar an gcodán uiscí a bheith ina choscóir maith einsíme ab ea láithreacht saponins. Fuair ​​​​imscrúduithe eolaíocha níos luaithe go raibh saponins bithghníomhach i gcoinne diaibéiteas [34]. D'fhéadfadh go mbeadh éifeacht láidir an chodáin sliocht aicéatóin i gcoinne amaláis mar gheall ar ard-ábhar na gcomhdhúile feanólacha agus na flavonoids araon. Saineolaithe Corchorus olitorius -amylase agus -glucosidase éifeachtaí coisctheacha de bharr comhábhair, go háirithe comhdhúile feanólacha cosúil le aigéad caf-feic [35].

Is é an codán aicéatón a rinne an gníomh coisctheach is mó ar a-glúcosidase le ICso de 54.9 ±0.3ug/ml, i gcomparáid leis an acarbose, an comhdhúil tagartha, ag 37.1±0.3ug/ml . I gcodarsnacht leis sin, níor léirigh an codán eis-chonair meatánóil ach coiscthe measartha ar a-glucosidase, le ICso de 251.2±0.4ug/ml, cé go raibh na codáin heacsán agus uiscí neamhghníomhach sa mheasúnacht seo. Áirítear leis an tríú catagóir de ghníomhairí hypoglycemic ó bhéal coscairí -glucosidase. Tá éagsúlacht de choscóirí -glucosidase, mar acarbose agus voglibose, a fhaightear de ghnáth i bhfoinsí plandaí. Léiríonn siad cobhsú luachmhar ar leibhéil glúcóis fola tar éis béile agus baineadh úsáid astu go cliniciúil i mbainistíocht diaibéiteas mellitus [36, 37].

Léirigh torthaí cóireála an dá chealla ailse (HeLa agus MCF7) le tiúchain éagsúla i mg/ml le haghaidh sleachta éagsúla go raibh an ghníomhaíocht ghinearálta i gcoinne líne cille ailse HeLa níos fearr ná an líne cille ailse MCF7. Léirigh sliocht heacsán gníomhaíocht frith-ailse potent ag tiúchan 4mg/ml le céatadáin choisc de 98.9 agus 97.4 faoin gcéad i gcoinne línte cille ailse HeLa agus MCF7, faoi seach, agus léirigh sliocht meatánóil ag an tiúchan céanna gníomhaíocht chumhachtach i gcoinne línte cille ailse HeLa agus MCF7 le 97.2 agus céatadán coiscthe 95.6 faoin gcéad. Ó na torthaí roimhe seo, d'fheidhmigh an codán heacsán éifeacht cíteatocsaineach suntasach ar chealla HeLa agus MCF7 araon, agus shroich céatadáin choiscthe 99 agus 92.4 faoin gcéad ag 4mg/ml de thiúchan codáin heacsán, faoi seach. Bhí sé seo comhsheasmhach le héifeachtaí citotocsaineacha an dá terpenoids agus stéaróidigh, a fuarthas sa chodán heacsán. Tá sé léirithe go gcuireann Diosgenin, steroid agus triterpenoid a tharlaíonn go nádúrtha a fhaightear i roinnt plandaí, bac ar ailse chíche [38, 39].

Conclúid

Léirigh torthaí an staidéir seo ar duilleoga R. rothschildianus go raibh acmhainneacht shuntasach ag an gcodán sliocht aicéatón chun fíteiteiripe a sholáthar do diaibéiteas agus raimhre, bunaithe ar a chosc láidir ar lipáis, a-amaláis, agus a-glucosidase. Ina theannta sin, léirigh an codán aicéatón gníomhaíocht shuntasach scavenging radacach saor in aisce. Ar an láimh eile, léirigh an codán heacsán cosc ​​suntasach ar línte cille HeLa agus MCF7 araon, a d'fhéadfadh a bheith bainteach lena ard-ábhar terpenes agus stéaróidigh. D’fhéadfadh go n-eascródh tuilleadh staidéir in vivo as na breathnuithe seo sa staidéar seo chun foirmlithe nádúrtha cógaisíochta nua a fhorbairt a bheidh éifeachtach i gcóireáil otracht, diaibéiteas mellitus, agus roinnt ailsí.

Baintear an t-alt seo as Jaradat et al. BMC Leigheas Comhlántach agus Teiripí (2021) 21:107