Cuid 1: Éifeachtaí Isorhamnetin ar Dhiaibéiteas agus na Seachghalair Ghaolmhara: Léirmheas ar Staidéir In Vitro Agus In Vivo Agus Anailís Trascríofa Post Hoc ar Chonair Mhóilíneach Rannpháirteach

Le haghaidh tuilleadh eolais. teagmháiltina.xiang@wecistanche.com

Teibí: DiaibéiteasIs fadhb mhór sláinte poiblí é mellitus, go háirithe type2 (T2DM). Tá leibhéil arda glycemia agus insulinemia tréithrithe ag DM mar gheall ar secretion insulin lagaithe agus íogaireacht insulin na gceall, ar a dtugtar friotaíocht inslin. Déanann T2DM aimhréití iolracha agus tromchúiseacha mar nephropathy, neuropathy, agus reitineapaite a dhéanann damáiste ocsaídiúcháin cille i bhfíocháin inmheánacha éagsúla, go háirithe an briseán, an croí, an fíochán adipose, an ae agus na duáin. Tá sleachta plandaí agus a bhfíteiceimiceach bithghníomhacha ag méadú spéise mar roghanna teiripeacha agus coisctheacha nua do T2DM agus na haimhréití a bhaineann leis. I dtaca leis seo, isorhamnetin, plandaflavonoid, Tá staidéar fada déanta ar a éifeachtaí frith-diaibéitis féideartha. Déanann an t-athbhreithniú seo cur síos ar a thionchar ar neamhoird a bhaineann le diaibéiteas a laghdú trí leibhéil glúcóis a laghdú, an stádas ocsaídiúcháin a fheabhsú, athlasadh a mhaolú, agus meitibileacht lipid agus difreáil adipocyte a mhodhnú trí bhealaí comharthaíochta bainteacha a thuairiscítear sna staidéir in vitro agus in vivo a rialáil. Ina theannta sin, cuirimid san áireamh anailís tras- hoc genome uile-ghéine ar ghníomhaíochtaí bitheolaíocha isorhamnetin ag baint úsáide as uirlis atá bunaithe ar ghaschealla.

Eochairfhocail: isorhamnetin; quercetin; gníomhaíochtaí bitheolaíocha; diaibéiteas; cosáin mhóilíneacha; micrea-eagar

Cliceáil anseo chun tuilleadh teagmhálaithe a fhoghlaim

1. Réamhrá

Baineadh úsáid as plandaí mar leigheasanna traidisiúnta i mbeagnach gach mór-roinn den domhan ó am ársa. Tá iniúchadh déanta ar mhóilíní bithghníomhacha mar thoradh ar thaighde eolaíoch ar na cúiseanna atá lena n-úsáidí míochaine. Meastar gur foinse fhéideartha mhaith de mhóilíní spéise bithghníomhacha iad plandaí foircneacha a fhásann faoi dhálaí foircneacha comhshaoil. Go deimhin, tá na srianta comhshaoil ​​seo de bharr meitibileacht mhífheidhmiúil ocsaigine, as a dtagann strus ocsaídiúcháin trí speicis ocsaigine imoibríocha a mhéadú (ROS)[1,2]. Tá roinnt plandaí, mar shampla halophytes, cumhachtachfrithocsaídeachcóras chun deireadh a chur leis na comhdhúile díobhálacha. I measc na móilíní bithghníomhacha leasa, tá comhdhúile feanólacha. Tá meas ag go leor staidéar ar phlandaí atá saibhir i bpolaphenóil le coinníollacha sriantacha sa tsaotharlann nó gan coinníollacha sriantacha [3-10]. Cuirtear roinnt éifeachtaí bitheolaíocha i leith sleachta atá saibhir i polyphenols, mar shampla gníomhaíochtaí frith-athlastacha agus frith-ailse [11-13]. Léirigh staidéir eile an frithocsaídeach, an frithmhiocróbach [8,14-16] chomh maith le héifeachtaí frith-otracht, frith-diaibéitis agus frith-hepatic [17-19] isorhamnetin. I measc na polyphenols,flavonoidsa idirdhealú. Áirítear sa ghrúpa seo roinnt foghrúpaí, mar shampla flavonols. Tá Isorhamnetin ar cheann de na comhdhúile móra flavonols. Is flavóin monomethoxy nó flavonol O-methylated ón aicme flavonoids é Isorhamnetin. Is équercetinina dtagann grúpa meatocsa in ionad an ghrúpa hiodrocsa ag suíomh 3'. Tá roinnt díorthach isorhamnetin i láthair sa nádúr, mar isorhamnetin 3-O- -d-glucopyranoside, isorhamnetin 3-O-neohesperidoside, agus isorhamnetin 3-O-rutinoside ó Calendula officinalis L. .[20]. Cuireann Isorhamnetin airíonna bitheolaíocha suntasacha i láthair mar antioxidant [21], anticancer [22], antimicrobial [23], antiviral [24], anti-inflammatory and anti-diaibéitis éifeachtaí [21,25-33].

San athbhreithniú seo, dírítear an chéad fhócas ar bhunús, ar struchtúr ceimiceach, ar aonrú, agus ar mhodhanna eastósctha, chomh maith leis an ngné fíteiceimiceach de isorhamnetin. Ansin, sa dara cuid, dírímid ar chur síos a dhéanamh ar na héifeachtaí frith-diaibéitis a d'fhéadfadh a bheith ag an flavonol seo trí neamhoird a bhaineann le diaibéiteas a laghdú trí leibhéil glúcóis a laghdú, an stádas ocsaídiúcháin a mhaolú, athlasadh a mhaolú, agus meitibileacht lipid agus difreáil adipocyte a mhodhnú. Mar fhocal scoir, rinneamar anailís thánaisteach ar ár sonraí micrea-eagar uile-genome a foilsíodh roimhe seo chun bithghníomhaíochtaí isorhamnetin a bhaineann le diaibéiteas a iniúchadh in uirlis atá bunaithe ar ghaschealla. Tá sé mar aidhm againn freisin aird a tharraingt ar éifeacht an mhóilín seo ar rialáil na gconairí comharthaíochta atá i gceist trí na staidéir in vitro agus in vivo a úsáidtear sa réimse taighde seo a thuairisciú. San athbhreithniú seo, nochtamar saintréithe ghníomhaíocht frith-diaibéitis isorhamnetin i gcomparáid lequercetina mheastar a bheith ina mheitibilít isorhamnetin agus tagairt thábhachtach i gcóireáil nádúrtha diaibéiteas.

2. Forbhreathnú Ginearálta ar Mhóilíní Bithghníomhacha i Polyphenols agus Flavonoids Áirithe

2.1. Strus Ocsaídeach mar Bhunús de Mhóilíní Bithghníomhacha i bPlandaí

Is féidir le roinnt plandaí a bheith faoi réir coinníollacha comhshaoil ​​éagsúla (salandacht, triomach, ghathanna UV, miotail throma, teochtaí foircneacha, easnamh cothaitheach, truailliú aeir, agus ionsaithe paitigin). Tá na srianta seo mar bhunús le mífheidhmiú meitibileachta ocsaigine, a ghineann strus ocsaídiúcháin trí speicis ocsaigin imoibríocha (ROS) a mhéadú. Tá ról tábhachtach ag an móilín ocsaigine (O2) in orgánaigh fhótaisintéiseach. Ar dtús, i bplandaí níos airde agus algaí, tarlaíonn malartú gáis ina bhfuil leictreoin i gclóraplastaí trí dhé-ocsaíd charbóin a ghabháil i rith an lae agus ocsaigin a tháirgeadh. Tá leictreoin i gceist leis an malartú gáis seo. Go deimhin, i gcás srianta comhshaoil ​​​​dian, ní laghdaítear cuid mhór ocsaigine agus mar sin féadann sé ROS a ghiniúint i roinnt organelles ó chealla plandaí [1,2] mar gheall ar éagothroime i bhfeidhmiú ceart clóraplastaí agus aistriú leictreoin [ 1]. Thairis sin, faoi na srianta comhshaoil ​​a luaitear thuas, táirgtear go leor ROSanna, mar shampla radacach hiodrocsaile (OH), radacach anion superoxide (O,-), radacach alcosaile agus sárocsaile (RO: agus RO2, faoi seach), sárocsaíd hidrigine (H2O2, ), radacach fochlóiríte (-OCl), ocsaigin singil (O2), radacach ocsaíd nítreach (NO) agus sárocsaídí lipid eile (cosúil le malondaildéad agus 4-hiodrocsaionenal)[2,34,35]. Uaireanta, d'fhéadfadh go mbeadh ról ag ROS i gcomharthaí cille in iompar fiseolaíoch plandaí, mar shampla i bpróiseas fás agus forbairt síolta, forbairt fíocháin, agus an t-aistriú ó iomadú cealla go fadú cille le linn na gcéimeanna níos luaithe den difreáil [36] . Ar leibhéal ard, déanann na móilíní seo damáiste móilíneach cosúil le sárocsaídiú lipid seicní, athrú ar phróitéiní agus DNA, agus bás cille [1,35,37]. Tá sé de chumas ag roinnt plandaí, mar shampla halafítí, oiriúnú go maith do na coinníollacha seo trí chóras cumhachtach frithocsaídeach. Is eol gur foinse meitibilítí tánaisteacha iad halafítí ar nós polyphenols [3-10]. Léiríonn na húdair seo, faoi choinníollacha tromchúiseacha, go ndéantar polyphenols a shintéisiú chun ról tábhachtach a imirt i gcosaint i gcoinne damáiste ocsaídiúcháin de bharr strus. Feidhm ag roinnt paraiméadair eistreacha (solas, teocht, salandacht agus triomacht) agus intreacha (géinitíopa, orgán, agus céim forbartha) na gcomhdhúile feanólacha seo, bithshintéis, agus gníomhaíochtaí na gcomhdhúile feanólacha seo a mbíonn tionchar acu ar a n-ábhar agus ar a ndáileadh i bplandaí [ 8,38,39]. Mar shampla, i coccinea Pyracantha, tá roinnt flavonoids cosúil le flavanones, flavones, agus flavonols i láthair sna shoots le linn na céime fásúla agus sna fréamhacha go heisiach le linn an atáirgthe 40]. Ar an láimh eile, léirigh roinnt údair go bhfuil airíonna bitheolaíocha eile ag na comhdhúile feanólacha seo, mar shampla gníomhaíochtaí frith-athlastacha agus frith-ailse [11-13]. Léirigh staidéir eile éifeachtaí frithocsaídeacha, frithmhiocróbach [8,14-16] chomh maith le frith-diaibéitis [18,41,42] sleachta feanólacha.

2.2. Aicmiú Frithocsaídeoirí Nádúrtha

Is féidir an córas frithocsaídeach a rangú de réir nádúr na gcomhpháirteanna seo i gcomhdhúile einsímeacha nó neamh-einsímeacha. Áirítear ar an gcéad cheann superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), ascorbate peroxidase, agus glutathione reductase [1,3542-44]. Léirigh na géinte a bhaineann leis na heinsímí seo a dtábhacht le linn meath fiseolaíoch postharvest ar fhréamh stórála agus mar fhreagra ar strus osmotic agus aigéad abscisic chomh maith le ionfhabhtú Xanthomonas axonopodis [44]. Tá comhdhúile feanólacha, carotenoidí, vitimíní agus osmolytes den chuid is mó sa dara grúpa [1]. Is sainairíonna iad comhdhúile feanólacha ná fáinne beinséine amháin nó níos mó agus tá siad difriúil i gcastacht an mhóilín bonn, líon agus suíomh an hiodrocsaile, agus an méid polaiméirithe. Is meitibilítí tánaisteacha iad na comhdhúile seo a thagann i dtrí ghrúpa leathana: aigéid feanólacha (díorthaigh aigéid bheansócha agus cinnamacha), flavonoids (flavonols, flavonols, flavanones, flavones, anthocyanins), agus tannins (tanainní hidrolyzable agus proanthocyanidins). Chomh maith leis na móilíní seo, déantar idirdhealú freisin ar stilbenes, lignans, agus coumarins [45].

2.3. Bunús agus Struchtúr Bithcheimiceach Flavonoids, go háirithe, Isorhamnetin

Is meitibilítí tánaisteacha iad comhdhúile feanólacha atá forleithne i bplandaí. Tá na comhdhúile seo le fáinne aramatach le grúpa hiodrocsaile amháin nó níos mó (OH) agus tá móilíní iontu ó aigéid feanólacha simplí go comhdhúile polaiméirithe cosúil le tannins. Is próiseas casta é sintéis na gcomhdhúile feanólacha a théann trí roinnt céimeanna. Is móilíní bithghníomhacha iad comhdhúile feanólacha a bhfuil dhá chonair bhunaidh acu: ar thaobh amháin an t-aigéad shikimic agus ar an taobh eile, na móilíní feanilpropanoid. Tá biosintéis flavonoids mar isorhamnetin bunaithe ar na cosáin seo. Go deimhin, ar thaobh amháin, tugann shikimate cnámharlach bunúsach polyphenols a bhfuil fáinní beinséine amháin nó níos mó (C6) ag iompar feidhm hiodrocsaile amháin nó níos mó. Ar an láimh eile, tá sintéis an bhoinn C6-C3 déanta trí chomhdhlúthú feiniolalainín go haigéad cinnamic (Fíor 1)[46].

Níos cruinne, tá aigéad shikimic ag bun roinnt imoibrithe, rud a léiríonn cnámharlach aimínaigéid aramatacha, ar thionscnóirí comhdhúile feanólacha iad. Is éard atá sa chéad chéim ná teaglaim de dhá mhóilín: fosphoenolpyruvate agus erythrose 4-fosfáit, as a dtagann tar éis ceithre imoibriú, a fhoirmiú an chéad creatlach feanólacha: an shikimate nó aigéad shikimic (CHOOs). Cuireann sé seo i láthair níos déanaí an chéad fháinne, arb iad is sainairíonna é feanólacht le dhá ghrúpa hiodrocsaile. Téann an shikimate faoi shé imoibriú a chríochnaíonn sa chéad aimínaigéad: feiniolalainín. A bhuí le dhá phríomh-einsím, feiniolalainín amóinia-lyase (PAL) agus cinnamate-4-hydroxylase(C4H), cruthaíonn feiniolalainín cinnamate agus p-coumarate i ndiaidh a chéile. comhdhúile feanólacha. Tá an móilín p-coumarate de bhunadh na ndíorthach coumarin. Is sainairíonna é an chonair do shintéis na móilíní feanilpropanoid ná láithreacht eochair-einsím ar a dtugtar 4-coumate CoA ligase (4CL), a chatalaíonn i láthair fheidhm thiol an choeinsím A(CoA) an p-coumeric. aigéad isteach i 4-coumaroyl CoA(C30Ha2N-O18P, S). Soláthraíonn an A-fáinne aramatach flavonoids ó chomhdhlúthú trí mhóilín malonyl-CoA (-C6).

Ina dhiaidh sin, tháirg 4-coumaroyl CoA an chalcone naringenin, ag míniú an nasc idir an B-fáinne aramatach agus an fáinne 3C de chalcone(C6-C3-). Gné lárnach den ábhar seo is ea an chailcín toisc go bhfuil sé ina réamhtheachtaí ar na flavonoids go léir atá bunaithe ar chnámharlach déag carbóin atá comhdhéanta de dhá fháinne beinséine. Ina dhiaidh sin, déantar cailcón a thiontú go naringenin (ar a dtugtar flavanone nó trihydroxy flavone freisin) trí ghníomhaíocht chalcone isomerase (CHI). Ar thaobh amháin, déantar flavones mar apigenin, acacetin, chrysin, nó luteolin a shintéisiú ó naringenin i láthair flavóin synthase(FNS).Ar an láimh eile, déantar flavonols éagsúla agus comhdhúile aigéad succinic a tháirgeadh ó naringenin i láthair dhá einsím; flavanone 3-dé-ocsaigináis (F3D) agus flavonol synthase (FS). Seachas díorthaigh flavonol, déantar comhdhúile eile, mar shampla kaempferol, myricetin, agus quercetin a tháirgeadh freisin. Trí ghrúpa meitile a aistriú ón S-adenosyl-L-methionine, déantar an t-isorhamnetin a tháirgeadh i láthair an flavóin 3'-O-methyltransferase (FMT)[47,48]. Ansin, is flavóin monomethoxy nó flavonol O-methylated ón aicme flavonoids é isorhamnetin. Is é quercetin (réamhtheachtaí) ina gcuirtear grúpa meatocsa in ionad an ghrúpa hiodrocsa ag suíomh 3'. Tá roinnt díorthach isorhamnetin i láthair sa nádúr, mar isorhamnetin 3-O- -d-glucopyranoside, isorhamnetin 3-O-neohesperidoside, agus isorhamnetin 3-O-rutinoside ó Calendula officinalis L. .[20].

Go deimhin, meastar go bhfuil flavonoids ar cheann de na grúpaí is tábhachtaí den teaghlach polyphenol. Tá struchtúr acu bunaithe ar chineál própán défheinile le dhá fháinne beinséine (fáinne A agus B, féach Fíor 2) atá nasctha le slabhra trí charbóin a fhoirmíonn fáinne dúnta pyran (fáinne C). Mar sin, tagraítear dá struchtúr mar C6-C3-C6. Tá suímh O-glycosylation C7 i flavones, isoflavones, flavanones, agus flavonols, agus C3 i flavonols agus anthocyanidins. Tá suímh C-glycosylation C6 agus C8 i flavones [49]. Ina theannta sin, tá baint ag an tábhacht a bhaineann le ról frithocsaídeach na gcomhdhúile feanólacha le méid hiodrocsailiú an mhóilín. Áirítear ar flavonoids na isoflavóin, flavones, flavanones, agus a gliocóisídí agus flavonols mar isorhamnetin, a dtugtar freisin 3'-methoxy quercetin agus 3-methyl quercetin [50]. I bplandaí, tá einsím, na glycosyltransferases atá ag brath ar an UDP, freagrach as an bhfoirm glycosíde isorhamnetin (isorhamnetin 3-O-glucoside). Úsáideann an einsím seo siúcraí défhosfáit núicléitíde, de ghnáth dífhosfáit urdine (UDP)-siúcra, chun an grúpa meitile a aistriú chuig an timthriall agus an fheidhm glycosíde a nascadh le isorhamnetin [51].

2.4.Aonrú agus Anailísí Ilsorhamnetin a Thionscnamh ó Ghléasraí Íocshláinte

Tá dáileadh isorhamnetin i bplandaí míochaineacha an-leathan agus tá na modhanna eastósctha agus anailíse éagsúil. Tá díorthaigh Isorhamnetin ag teastáil go háirithe. Cuidíonn na grúpaí hiodrocsaile agus meitile lena dtréithriú. Úsáidtear roinnt modhanna chun isorhamnetin a bhaint as, ina measc bunaithe ar chodánú, ag baint úsáide as cur chuige ceimiceach, einsím, agus eastóscadh sreabhach supercritical (SFE-CO2). Ar an gcéad dul síos, is féidir codánúchán a úsáid chun an t-eastóscadh a shimpliú trí gach lí ola agus lí lipophilic a bhaint as samplaí a bhfuil lipid iontu. Déantar an sampla díshaillte a sonicated freisin roimh maothú i meascán de meatánól agus uisce. Is féidir crómatagrafaíocht a úsáid ansin le haghaidh anailísí ar chomhdhúile feanólacha, go háirithe flavonoids [49]. Maidir leis na comhdhúile deireanacha seo, úsáidtear LC-MS agus cuirtear ianú electrospray (ESI) agus ianú ceimiceach brú atmaisféarach i bhfeidhm go minic, agus déantar an íogaireacht is fearr le haghaidh flavonoids a bhaint amach go ginearálta sa mhodh diúltach-ian [49]. Mar shampla, rinneadh measúnú ar fíteiceimic codáin phlandaí Calligonum Azel Maire, a bailíodh ó fhásach na Túinéise, agus baineadh úsáid as crómatagrafaíocht leacht ultra-ardfheidhmíochta i dteannta le ham ceithre huaire de mais-speictriméadracht eitilte UHPLC-ESI-QTOF chun feanólachtaí a aithint ina measc blaisín. agus flavanols, arbh iad na comhdhúile feanólacha is flúirseach a aithníodh [52]. Go sonrach, deimhníodh láithreacht isorhamnetin glucoside agus isorhamnetin glucosyl-rhamnoside mar na comhdhúile móra i nduilleoga an halophyte Mesembryanthemum edule inite ag baint úsáide as teicneolaíocht LC/ESI-MS/MS [3]. Lean daoine eile an obair seo a bhain úsáid as LC-ESI-TOF-MS chun go leor polyphenols a thréithriú; ina measc, aithníodh flavonoids ó chodanna ón aer de chéim iomlán bláthanna na halafítí mar Arthrocnemum indicum [5], Tamarix gallica [16], Glaucium flavum[13], agus Salsola kali[8]. Cosúil leis na saothair dheireanacha, rinneadh próifíliú LC-ESI-TOF-MS agus GC-MS ar Artemisia luibhe chun feanólachtaí a shainaithint, amhail flavóin, flavonols, agus alcalóidigh flavonoid[7]. Rinneadh obair eile ar Pancratium maritimum agus léirigh anailís HPLC-DAD-ESI/MS láithreacht flavonoids lena n-áirítear flavonol mar isorhamnetin lena gcomhchuingeacha pentoxide agus heicsóisíd mar isorhamnetin di-hexoside [53].

Mar chomhdhúil neamh-sailleacha, d'fhéadfaí flavonols a aonrú le heacsán. Ansin, is féidir tuaslagóir polar mar eatánól a úsáid. Léirigh staidéar ar Limoniastrum guyonianum ag baint úsáide as HPLC láithreacht go leor feanólachta, ina measc isorhamnetin-3-O-rutinoside [54].

I bhfad ó sleachta feanólacha, tá comhdhúile feanólacha le fáil freisin in olaí cosúil le ola olóige [55]. Tá an cumas ag na comhdhúile seo olaí a chosaint i gcoinne ocsaídiúcháin agus luach cothaithe an ola a fheabhsú. Braitheadh ​​Isorhamnetin, mar chomhdhúil feanólach, freisin i sliocht ola ó shíolta cumin dubh Túinéiseach (Nigella sativa L.) a fhaightear le tuaslagóir glas mar 2-meitile tetrahydrofuran (MeTHF) mar mhalairt ar pheitriliam nó heacsán. tuaslagóir -bhunaithe a bhaint as comhdhúile feanólacha ola-saibhrithe [10]. D'fhaomh anailís HPLC láithreacht isorhamnetin. Léirigh anailísí ag baint úsáide as Crómatagrafaíocht Leachtach le Brathadóir Eagraithe Dé-óid (LC-DAD) méid ard isorhamnetin idir 6.3 agus 6.6 （ug/g ola） tar éis eastóscadh ola ó chumin dubh ag MeTHF agus heacsán, faoi seach. Ina theannta sin, ag baint úsáide as H athshondas maighnéadach núicléach (HNMR) agus C athshondas maighnéadach núicléach (CNMR), roinnt gliocóisídí flavonol ar nós kaempferol-3-O-rutinoside (nicotiflorin) agus isorhamnetin-3-O-rutinoside (tarbháis) tréithrithe ó na codanna ón aer de Peucedanum aucheri Boiss a bailíodh i gcathair Marivan, cúige Kurdistan, an Iaráin [56]. Aimsíonn an modh NMR an t-airí a idirghníomhaíonn núicléis adamhach áirithe den chomhdhúil le réimse maighnéadach. Soláthraíonn an mhaoin seo, is é sin athshondas maighnéadach a tháirgeadh ag minicíocht áirithe, faisnéis ar struchtúr an mhóilín. Ar an dara dul síos, roghnaítear samhlacha matamaitice chun éifeachtúlacht eastóscadh flavonol a mheas, go háirithe chun tuiscint a fháil ar an mbealach is fearr chun isorhamnetin-3-O-rutinoside [20] a fháil. Rinneadh anailís ilathraitheach fachtóireach ag baint úsáide as bláthanna Calendula officinalis. Rinneadh anailís ar mhúnlaí líneacha, cearnacha, ciúbach iomlána agus ciúbach speisialta. Ba é an ciúbach iomlán deiridh an ceann is oiriúnaí, rud a cheadaigh éifeachtúlacht níos fearr in eastóscadh isorhamnetin-3-O-rutinoside 60 faoin gcéad . Don staidéar seo, úsáideadh na heinsímí, Rapides Maxi Fruit agus Viscozyme faoi roinnt fachtóirí tábhachtacha a dhéanann difear don ghníomhaíocht einsím faoi choinníollacha supercritical CO2 mar bhrú, teocht, pH, am, agus tuaslagán eatánóil uiscí. Ar deireadh, baineadh úsáid as an modh eastóscadh sreabhach supercritical chun comhdhúile feanólacha cosúil le flavonols a bhaint as. Blianta fada ó shin, baineadh úsáid as an nós imeachta eastóscadh sreabhach supercritical ar choirt globulus Eucalyptus den chéad uair, ag baint úsáide as CO2 íon agus modhnaithe le huisce, aicéatáit eitile, agus eatánól [57]. Léirigh údair go bhféadfadh an CO2 supercritical in éineacht le eatánól méideanna suntasacha comhdhúile feanólacha a bhaint as, lena n-áirítear isorhamnetin. Chinn cainníochtú HPLC-MS roinnt flavóin, mar isorhamnetin-hexoside (0.26 gg-I de ex-chonair) agus isorhamnetin simplí (14.29 mg: gI de shleachta). Baineadh úsáid as eatánól mar chomh-tuaslagóir. Rinneadh an cainníochtú le crómatagrafaíocht leachta ardbhrú a bhí feistithe le brathadóir eagair fóta-óid. Isorhamnetin 3-O-glucosyl-rhamnosyl-rhamnoside, isorhamnetin 3-O-glucosyl-rhamnosyl-pentoxide, isorhamnetin 3-O-glucosyl-rhamnoside, agus isorhamnetin 3-O-glucosil -pentoxide na flavonols is flúirseach a bhaintear as sleachta sárchriticiúla O. ficus-indica. Mar a luadh cheana, is modh a úsáidtear go coitianta é crómatagrafaíocht leacht ardbhrú nó HPLC chun comhdhúile feanólacha a anailísiú. I sú úll agus sú piorra, braitheadh ​​isorhamnetin 3-O-glucoside. Go deimhin, léirigh scaradh na gliocóisídí flavonol i sliocht úll "Brettacher" ag HPLC agus mais-speictriméadracht láithreacht dhá fhoirm glycosídí cosúil le isorhamnetin 3-O-glúcós agus isorhamnetin 3-O-galactosid [ 58].