CUID 1 Sleachta Uisciúla As Cisteastán Herba Soghluaisteacht Stéig a Spreagtar i bhFrancaigh Stéig a tharchuirtear le Loperamide Trí Chealla Interstitial Cajal a Fheabhsú

Shuai Yan, 1,2 Yin-zi Yue, 1 Xiao-peng Wang, 1 Hong-li Dong, 1 Shu-guang Zhen, 1 Ben-sheng Wu,1 agus Hai-hua Qian3

1 Ospidéal Suzhou deLeigheas Sínis Traidisiúnta,Suzhou, Jiangsu 215009, an tSín

2 Ollscoil NanjingLeigheas Sínis Traidisiúnta, Nanjing, Jiangsu 210023, an tSín

3An Roinn Máinliachta Anorectal, Ospidéal Cúige Jiangsu deLeigheas Sínis Traidisiúnta, Nanjing, Jiangsu 210029, an tSín

Correspondence should be addressed to Hai-Hua Qian; haihuaqian@126.com

Arna fháil 24 Bealtaine 2017; Athbhreithnithe 5 Deireadh Fómhair 2017; Glactha 25 Deireadh Fómhair 2017; Foilsithe 28 Nollaig 2017

Eagarthóir Acadúil: Samra Bashir

Cóipcheart © 2017 Shuai Yan et al. Is alt rochtana oscailte é seo a dháiltear faoin Creative Commons Attribution License, a cheadaíonn úsáid neamhshrianta, dáileadh agus atáirgeadh in aon mheán, ar choinníoll go luaitear an saothar bunaidh i gceart.

Leigheas Sínis traidisiúntaTuairiscíodh go raibh éifeachtaí maithe aige maidir le constipation feidhme a chóireáil. Rinneadh iarracht leis an obair seo éifeachtaí eastóscáin uiscí Herba Cistanche (AEHC) ar chóireáil STC a chruthú agus na meicníochtaí féideartha a chinneadh trí shamhail de constipation mall idirthurais de bharr loperamide (STC). Rinneadh HPLC chun na comhpháirteanna bithghníomhacha san AEHC a shainaithint agus a dhearbhú. Fuarthas amach gur mhaolaigh AEHC freagraí STC bunaithe ar chainníocht mhéadaithe fecal, cion taise, agus ráta idirthurais intestinal, chomh maith le leibhéil serum GAS, MTL, SS, agus CGRP. Tháinig méadú freisin ar na leibhéil próitéine agus mRNA de c-kit, lipéadú cealla interstitial Cajal (ICC). Idir an dá linn, níor mhéadaigh ach leibhéal próitéine SCF, ligand ofc-kit. Mhol an anailís ar ár sonraí gur léir go bhféadfadh AEHC feidhm ICC a fheabhsú trí chonair chomharthaíochta a bhaineann le PI3K, SCF, agus c-kit agus feabhas a chur ar innéacsanna gluaiseachta coilíneacha amhail GAS, MTL, SS, agus CGRP. Tá sé suimiúil a thabhairt faoi deara gur chosúil go raibh AEHC éifeachtach maidir le constipation, agus mar sin tá gá le tuilleadh turgnaimh chun na meicníochtaí cruinne atá i gceist a shoiléiriú.

Le haghaidh tuilleadh eolais déan teagmháil le:Joanna.jia@wecistanche.com

Tá go leor éifeachtaí ag Cistanche deserticola, cliceáil anseo chun tuilleadh eolais a fháil

1. Réamhrá

Is galar coitianta feidhmiúil gastrointestinal agus fadhb sláinte an phobail é constipation, arb é is sainairíonna é defecation deacair, neamhchoitianta nó neamhiomlán [1]. Athraíonn leitheadúlacht an constipation ó 0.7 faoin gcéad go 81 faoin gcéad ar fud an domhain, go háirithe i daoine scothaosta [2, 3]. constipation malliompair (STC) Is gearán gastrointestinal coitianta i measc 13-37 faoin gcéad de na hothair a bhfuil cóireáil ainsealach-resistant constipation [4, 5]. Léiríonn sonraí eipidéimeolaíocha minicíocht níos airde deSTCi measc baineannaigh óga ná fireannaigh [6].STCis cúis le constipation intractable, a léiríonn freagra beag ar chóireáil choimeádach agus claonadh neamhord néar-mheathlúcháin. Níl sé chomh simplí le galar feidhmiúil, éilíonn sé cóireáil ionrach agus ionsaitheach [7].

Úsáidtear go huilíoch roinnt drugaí ceimiceacha reatha, mar laxatives osmotic nó rúnacha agus oibreáin toirtithe

constipation a chóireáil [8], cé go bhfuil a n-iarratas teoranta mar gheall ar chaiteachas ard agus fo-iarsmaí bhoilg cosúil le pian, cramps, agus bloating [9]. Faoi láthair, is é rialáil an chonair gastrointestinal príomhfhócas na dteiripí constipation. Gineadh Cisapride ar dtús mar ghníomhaire promotility chun cóireáil a dhéanamh ar ghalar gastrach ach tarraingíodh siar é níos déanaí mar gheall ar an mbaol a bhaineann le arrhythmias cairdiach [10].

Is antagonist gabhdóra hidroxytryptamine 5-roghnaíoch é Tegaserod atá in ann peristalsis intestinal agus secretion a spreagadh [11, 12]. Is díorthach carboxamide dihydro benzofuran úrscéal é Prucalopride agus 5- agonist receptor HT le roghnaíocht agus sainiúlacht ard, ar féidir leis an motility gastric, stéig bheag agus colon a fheabhsú agus a oibríonn níos tapúla i ndinimic [13-15]. Mar dhíorthach prostaglandin E1, is féidir le lubiprostone an cainéal CIC a ghníomhachtú go roghnach chun secretion gastrointestinal a chur chun cinn agus éifeachtaí tarchurtha intestinal a mhéadú [16].

Cistanchetá an éifeacht tonifying anduánagus is féidir leigheas freisinconstipation

Is fadhb forleathan é motility i constipation, ach níl a etiology soiléir fós. Mar sin féin, léirigh fianaise dhiongbháilte rannchuidiú cealla interstitial Cajal (ICC) le pataigineas an constipation [17]. Faightear ICC idir na foircinn nerve agus cealla matán míne sa chonair gastrointestinal. Aithnítear an ICC go ginearálta mar chealla pacemaker do ghníomhaíocht gastrointestinal agus mar idirghabhálaithe tarchurtha néar-mhatánach [18]. Tá sé léirithe ag staidéir go bhfuil dlús ICC i n-idirstad na n-othar a bhfuil constipation mall idirthurais thar a bheith níos ísle i gcomparáid leo siúd in othair gnáth [19]. Dá réir sin, d’fhéadfadh ganntanas gníomhaíochta malltonnta a bheith mar thoradh ar líon laghdaithe ICC, rud a chuirfeadh isteach ar an bhfreagra conarthach agus as a d’fhéadfadh moill a chur ar idirthuras in othair le constipation mall-iompartha. Ar an bpointe seo, d'fhéadfadh go mbeadh feabhas ar ICC ag baint úsáide as cógaisíocht ríthábhachtach chun constipation mall idirthurais a leigheas.

Tá aird tarraingthe le déanaí ar chógais luibhe éagsúla agus ar fhóraim traidisiúnta Síneach- Mula mar theiripí nua-fhangled chun constipation ainsealach a chóireáil mar thoradh ar tháirgeadh stól feabhsaithe [20, 21]. Is leigheas luibhe traidisiúnta é Herba Cistanche a úsáidtear i gcóireáil galar duánach ainsealach, neamhthorthúlacht baineann, menorrhagia profuse, agus impotence [22, 23]. Coscann Herba Cistanche apoptosis néaróin inchinn trí fhachtóirí a bhaineann le apoptosis agus fachtóirí neurotrófacha a chur in iúl i gcealla MES23.5 [24]. Tá cumas cógaisíochta léirithe ag Herba Cistanche freisin i gcóireáil Siondróm Easnaimh Duán-Yang Yang-Qi. Léirigh staidéar le déanaí go n-ardaíonn Herba Cistanche an riospráid mitochondrial agus stádas frithocsaídeach glutathione i cardiomyocytes H9c2 [25].

Creideann TCM go bhfuil caidreamh dlúth ag constipation leis na duáin. Oscailt ag baill ghiniúna sheachtracha agus anas, rialaíonn an duáin urination agus defecation. Braitheann iompar na dramhaíola ar chur chun cinn na duáin Qi agus ar chothú ceann na nduán. Má tá duáin yang easnamhach nó má éagann geata tine na beatha, beidh marbhántacht na dramhaíola mar thoradh ar phlódú fuar sa stéig mhór. Tá gluaiseacht bputóg tirim mar thoradh ar constipation freisin ós rud é go dteipeann ar easnamh bunúsach duáin dóthain sreabhach a ghiniúint [26].

LuibhCistancheis luibh chomhaontaithe coitianta é, atá milis agus saillte i mblas agus te sa nádúr. Mar gheall ar an stéig mhór agus fadlínte na duáin, is féidir é a tonify duáin yang agus moisten an stéig constipation a mhaolú. An luibh aonair seo agus aSíneachúsáideadh ullmhóidí cógaisíochta go forleathan chun constipation a chóireáil le héifeachtúlacht iontach [27].

Sa tSín, éifeachtaí HerbaCistanchetá fréamhacha ar constipation taifeadta [28, 29] agus dá dtagraítear i Sínis Materia Medica de Shen Nong mar an "gas succulent triomaithe de na speicis Cistanche" [30]; áfach, níl cruthúnas eolaíoch ar éifeacht fréamhacha Herba Cistanche ar constipation ann go dtí seo, is é an dáileog éifeachtach cliniciúil 20 g in aghaidh an lae iPharmacopoeia na Síne, agus ní mhéadaíonn an éifeacht chliniciúil a thuilleadh leis an dáileog.

Ós rud é go bhfuil Herba Cistanche chomh gann [31], ag caighdeánú a dáileog chliniciúil le haghaidh cóireáilSTCTrí staidéar turgnamhach ní hamháin go seachnaíonn sé cóireáil theip mar gheall ar dáileogacht neamhleor ach coinníonn sé othair freisin ó chaillteanas eacnamaíoch agus fiú mí-eachtraí cógas trí ró-úsáid. Tá súil againn

d'fhéadfadh na torthaí bonn eolaíoch a leagan síos do dhrugaí nua le haghaidh consipeadh. Mar sin, tá sé tábhachtach imscrúdú a dhéanamh ar fheidhm uiscí Herba Cistanche maidir le cur chun cinn intestinal agus a ghníomhaíocht ar ICC sa staidéar seo.

Cistancheis féidir leigheasconstipation

2. Ábhair agus Modhanna

2.1. Sliocht Uisciúil de Herba Cistanche a Ullmhú.

Ceannaíodh Herba Cistanche ar fad ó Nanjing Haichang Chinese Medicine Group Co., Ltd. (Nanjing, an tSín), a baineadh, a bailíodh, agus a próiseáladh de réir cleachtais chaighdeánacha eitnobotanical ó na plandálacha i limistéar Sinkiang na Síne. Rinne an tOllamh Tu Lin Lu ó Ollscoil Nanjing um Leigheas na Síne, Nanjing, an tSín, aitheantas an phlanda a fhionnadh go moirfeolaíoch. Taisceadh eiseamal dearbhán (NUCMCHS-2015628) ag Coláiste na nEolaíochtaí Sláinte, Ollscoil Leighis na Síne Nanjing, Nanjing, an tSín.

Slisní de Herba Cistanche, meá 500 g, a smidiríní ag baint úsáide as cumascóir leictreach agus eastósctar in 5000 ml uisce driogtha, agus ina dhiaidh sin íonaithe an eastóscán uiscí ag 100 C ar feadh 2 h ag baint úsáide as trealamh eastósctha a scaiptear.

pore membrane (Millipore, Billerica, MA, SAM), agus tuaslagadh an t-iarmhar a fuarthas ó na sleachta in uisce 4000 ml. Tar éis eastóscadh aife, bailíodh na sleachta agus galaithe chun an táirge samplach deiridh a fháil. Díríodh eastóscáin uiscí chun millíní a thriomú (1 g/ml) ag baint úsáide as a

lena n-úsáid ina dhiaidh sin. Athdhéantar samplaí soladacha in uisce driogtha chun na dáileoga riachtanacha de 10, 20, agus 40 mg/kg de mheáchan coirp a thabhairt don turgnamh.

2.2. Ainmhithe.

Rinneadh athbhreithniú agus faomhadh ar an bprótacal turgnamhach a úsáideadh sa staidéar seo bunaithe ar nósanna imeachta eiticiúla agus cúram eolaíoch ag Ospidéal Suzhou deLeigheas Sínis Traidisiúnta-An Coiste Institiúideach um Chúram agus Úsáid Ainmhithe, Suzhou, an tSín (SHTCM-IACUC; uimhir cheadaithe: PNU- 2016-0003). Ceannaíodh gach francach fireann (Sprague Dawley strain) le ag ó Ionad Taighde Ainmhithe Saotharlainne Shanghai de réir threoirlínte na nInstitiúidí Náisiúnta Sláinte. Bhí rochtain saor in aisce ag na hainmhithe ar ghnáth-aiste bia (AIN-93 M) agus ar uisce sconna ad libitum agus coinníodh ina n-aonar iad faoi chruach dhosmálta faoin gcéad de thaise choibhneasta, agus faoi lé solas nádúrtha 12 h agus 12 h dorcha in aghaidh an lae.

2.3 Dearadh Turgnamhach.

Baineadh úsáid as an loperamide chun constipation a spreagadh i bhfrancaigh de réir staidéir roimhe seo [32, 33]. Roinneadh 60 francach go randamach i 5 ghrúpa (in aghaidh an ghrúpa): A: gnáthghrúpa (NG), B: grúpa múnla (Lop móide grúpa cóireáilte le feithiclí), C: grúpa francaigh constipation cóireáilte le sliocht íseal uiscí de Herba Cistanche (Lop móide grúpa cóireáilte LAEHC), D: grúpa de francaigh constipation cóireáilte le sliocht uiscí meánach de Herba Cistanche (Lop móide grúpa cóireáilte MAEHC), agus E: grúpa de francaigh constipation cóireáilte le sliocht ard uiscí de Herba Cistanche (Lop móide grúpa cóireáilte HAEHC). Cóireáladh grúpa A le gnáth-seile (10 ml/kg); Cuireadh cóireáil ar ghrúpa B le loperamide

(4 mg/kg); Cóireáladh Grúpa C le loperamide (4 mg/kg) agus eastóscán íseal uiscí de Herba Cistanche (1 g/kg); Cóireáladh Grúpa D le loperamide (4 mg/kg) agus eastóscán meánach uiscí de Herba Cistanche (2 g/kg), agus déileáladh le Grúpa E le loperamide (4 mg/kg) agus sliocht ard uiscí de Herba Cistanche (4 g/). KG). Instealladh 0.9 faoin gcéad de chlóiríd sóidiam ar gach francach ón ngnáthghrúpa, agus instealladh loperamide do na cinn eile i 0.9 faoin gcéad clóiríd sóidiam dhá uair sa lá ar feadh 3 lá as a chéile chun constipation a spreagadh. Cuireadh an sliocht uiscí de Herba Cistanche ar crochadh in uisce agus tugadh ó bhéal é uair amháin sa lá ó lá 4 go lá 18 i nGrúpa C, Grúpa D, agus Grúpa E, ach fuair Grúpaí A agus B toirt comhsheasmhach uisce trí ghalbhán.

2.4. Coinníoll Crómatagrafach.

Rinneadh próifíliú HPLC i gCóras Crómatagrafach Leachtach Shimadzu (Tóiceo, an tSeapáin), ina bhfuil caidéal LC-20AT agus a

Rinneadh monatóireacht ar 330 nm ag 30 C. Bhí an chéim isocratic soghluaiste comhdhéanta de meatánól 0.1 faoin gcéad aigéad formach (80 : 20, v/v) agus rith sé ag ráta sreafa de 1.0 ml/nóiméad . Scaradh crómatagrafach a bhí

méid na gcáithníní 5 m, Beijing Dikma Science and Technology Co., Ltd, Beijing, China).

2.5. Anailís ar Aclaíocht, Iontógáil Bia, Iontógáil Uisce, Coirp

Riaradh guma curaíochta (fionraí uiscí de 20 faoin gcéad gualaigh agus 10 faoin gcéad arúil guma) ó bhéal ag toirt 25 ml/kg de gach ainmhí. Tar éis 30 nóiméad, rinneadh na hainmhithe a íobairt go daonnachtúil trí dhíláithriú ceirbheacsach agus díbríodh iad. Trasnaíodh an intestine beag ón pylorus go dtí an cecum agus tomhaiseadh an fad a bhí clúdaithe ag an mbéile gualaigh agus fad iomlán an stéig bheag. Maidir le francach aonair, ríomhadh an céatadán den idirthuras intestinal mar chéatadán an achair a thaistil an béile gualaigh i gcoibhneas le fad iomlán an stéig bheag. Ríomhann an chothromóid seo a leanas an ráta idirthurais intestinal ( faoin gcéad ) : an fad a thaistil an gualaigh/an t-achar ó pylorus go cecum 100 faoin gcéad .

2.6. Sampla Fola agus Bailiúchán Fíocháin. Ag deireadh na tréimhse turgnamhacha, bhí francaigh faoi réir troscadh 12 h ach ceadaíodh rochtain saor in aisce ar uisce dóibh. Ansin rinneadh ainéistéitic ar na francaigh go léir 30 nóiméad níos déanaí trí instealladh ionperitoneal de pheinteabarbít sóidiam (50 mg/kg) agus cuireadh ar tábla rialaithe teochta iad. Bailíodh samplaí fola agus lártheifneoiríodh iad ag 3500 rpm ar feadh 15 nóiméad chun serum a fháil. Scoilt an idirstad láithreach agus sruthlaithe le gnáth-seile ag 4 C agus ansin roinnte ina dhá phíosa. Socraíodh blúire amháin i 10 faoin gcéad formalin agus a phróiseáil i pairifín scoilte le haghaidh anailís imdhíon-histochemical (IHC) ina dhiaidh sin, agus an ceann eile Meáchan, agus Gruaige. Athruithe ar aclaíocht, iontógáil bia, uisce

stóráilte ag 80 C go dtí go ndearnadh measúnú orthu. breathnaíodh iontógáil, meáchan coirp, agus gruaig agus rinneadh iad a thaifeadadh go laethúil le linn na tréimhse turgnamhacha. Thugamar faoi deara "athruithe ar fheidhmiú" tar éis na céimeanna sonracha: úsáidtear an bosca féin-déanta (60 cm ar airde, 50 cm ar fad, agus 80 cm ar leithead le balla forimeallach dorcha) le haghaidh tástála páirce oscailte; roinneadh an talamh bán ina diamaint (12 cm) ag an líne dhubh i seomra dorcha ciúin; crochadh bolgán 100 W 1 m os cionn lár an bhosca; cuireadh na francaigh go lár an bhosca ar an 4ú, 6ú, 12ú, agus 18ú lá den shamhaltú. Baineadh úsáid as líon na gcearnóg a ndeachaigh na francaigh tríd laistigh de 5 nóiméad mar scór gluaiseachta cothrománach agus úsáideadh am díreach na bhfrancach laistigh de 5 nóiméad mar scór gluaiseachta ingearach. Léiríonn scóir chothrománach agus gluaiseachta chomh maith le scóir gluaiseachta ingearacha méid aclaíochta na bhfrancach. Tomhaiseadh gach francach uair amháin [34, 35].

Cistancheféidir faoiseamhconstipation

2.7. Fecal Parameter Tomhas.

Ar lá deiridh an riaracháin ó bhéal, bailíodh millíní stóil úra ó gach francach SD isteach i bhfeadáin stopalláin bhabhta-bun ar feadh 6 h, agus taifeadadh na meáchain iomlána ó gach grúpa. Chun an cion taise fecal a chinneadh, d'úsáideamar cothromaíocht leictreach chun na millíní stól a thriomú go dtí go mbaintear meáchan leanúnach amach agus go ndearnadh an meáchan tirim a thomhas. An cion taise

2.8. Measúnú ar GAS, MTL, SS, agus CGRP.

Mheas ELISA na tiúchana gastrin (GAS), motilin (MTL), somatostatin (SS), agus peptide a bhaineann le géine calcitonin (CGRP) sa serum ag baint úsáide as feisteáin atá ar fáil go tráchtála.

2.9. Anailís Histeolaíochta.

Socraíodh idirstadanna trasnacha a bailíodh ó francaigh SD le 10 faoin gcéad formalin ar feadh 12 h, leabaithe

m slisní tiubh a dhaite le hematoxylin agus eosin (H&E, Sigma- Aldrich, MO, SAM). Breathnaíodh gnéithe moirfeolaíocha de na hailt seo faoi mhicreascópacht éadrom, agus ina dhiaidh sin tomhaiseadh an fad villus, tiús an chromáin, agus tiús na matán ag baint úsáide as Leica Application Suite (Leica Microsystems, Switzer- land).

2. 10. Anailís Immunohistochemical.

Leanamar na modhanna Zhu et al. (2016) [36]; bhí ailt 5 m neamhdhaite

dhaite le coinín frith-c-kit (1: 100) ag 4 C thar oíche. Baineadh úsáid as an modh casta antasubstainte tánaisteach agus avidin-biotin-peroxidase de réir threoracha an mhonaróra. Baineadh úsáid as rialú immunoglobulin-diúltach chun deireadh a chur le ceangailteach nonspecific. Leibhéil slonn c-kit

2. 11. Anailís ar an Ráta Idirthurais Stéig.

Rinneadh cóimheas idirthurais intestinal de réir prótacail a tuairiscíodh roimhe seo [36]; go hachomair, tar éis 14 lá de chóireáil, bhí gach francach SD faoi réir troscadh 12 h ach ceadaíodh rochtain saor in aisce ar uisce dóibh.

Imoibriú Slabhra Polymerase Fíor-Ama. Cinneadh leibhéil slonn géine de c-kit, SCF, agus PI3K mRNAs sa colon ag baint úsáide as trealamh eastósctha RNA iomlán (TIANGEN Biotech,

Beijing, an tSín) de réir phrótacail an mhonaróra. Rinneadh PCR fíor-ama le ABI StepOnePlus Real-Time PCR System (ABI). Baineadh úsáid as SYBR Green I Real Time PCR Master Mix (QPK201, Toyobo, an tSeapáin) chun táirgí PCR a bhrath. Rinneadh frithghníomhartha i ritheanna faoi thrí. Ina dhiaidh sin, rinneadh homalóg ar fhíochán drólainne francach úr ar mheá 0.5 g.

l) a bhaintear de réir threoracha an mhonaróra ag baint úsáide as an Imoibrí TRIzol (Invitrogen, SAM). Baineadh úsáid as trealamh trascríobh droim ar ais-PCR (Takara Biotechnology Co., Inc.) chun an chéad shraith de cDNA a shintéisiú de réir phrótacal an mhonaróra. Taispeántar na paraiméadair spriocdhírithe go léir i dTábla 1. Bhí an prótacal rothaíochta faoi na coinníollacha seo a leanas: 95 C ar feadh 5 nóiméad (dínádúrú DNA), agus 40 timthriall ina dhiaidh sin de 95 C ar feadh 15 s, 60 C ar feadh 20 s, agus 72 C le haghaidh 40 s. Rinneadh anailís cuar leá ag deireadh na dtimthriallta aimpliúcháin.

2.12. Anailís Blot an Iarthair.

Rinne blot an Iarthair measúnú ar inneachar próitéine c-kit agus SCF i samplaí colon aonchineálacha. Go hachomair, rinneadh próitéiní iomlána aonchineálacha a chinneadh trí úsáid a bhaint as measúnacht aigéad bicinchoninic (Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA). Baineadh úsáid as glóthach dodeicile sulfáit-polyacrylamide-polyacrylamide (SDS-PAGE) chun próitéiní a scaradh i gcóras leictreafóiréis BioRad (Saotharlanna BioRad, Hercules, CA, SAM). Aistríodh próitéiní ansin chuig seicní défhluairíd pholaivinilideine (PVDF). Tar éis cóireála 2 h le maolán blocála i TBS ina raibh 5 faoin gcéad bainne neamh-saille ag teocht an tseomra, goradh seicní PVDF thar oíche le trealamh frith-c caolaithe 1 : 1000 (Santa Cruz, CA, SAM), 1 : 500 caolaithe frith- SCF (Sigma, MO,

Na Stáit Aontaithe Mheiriceá), agus 1: 8000 antasubstaintí caolaithe frith-actin (Kangchen, Shanghai, an tSín), faoi seach. Braitheadh ​​ceangal na príomh-antasubstainte ag baint úsáide as an antashubstaint thánaisteach comhchuingeach HRP-chomhchuingeach (Beyotime, Jiangsu, an tSín). Baineadh úsáid as trealamh feabhsaithe ceimiceán (Pierce Biotechnology Inc., Rockford, IL, USA) agus Córas Íomháithe Infridhearg Odyssey (Gene Company Ltd., Hong Cong) le haghaidh cemiluminescence a bhrath. Baineadh úsáid as prolactin tí mar rialú luchtaithe. Cuirtear an méid léiriú próitéine i láthair i gcoibhneas leis na leibhéil actin.

2.13. Anailís staitistiúil.

Tuairiscíodh sonraí tomhais mar mheán earráid chaighdeánach an mheáin (SEM) agus rinne SPSS anailís orthu

16.0 bogearraí (SPSS, Chicago, IL, SAM). Baineadh úsáid as anailís aontreo ar athraitheas (ANOVA) agus tástálacha ilraoin Duncan ina dhiaidh sin chun difríochtaí suntasacha sna paraiméadair go léir a chinneadh. Measadh go raibh tábhacht ag baint le luachanna ag

CistancheIs leigheas maith é decoction le haghaidh cóireálaconstipation

3. Torthaí

3.1. Comhdhéanamh agus Comhpháirteanna Feidhmiúla Herba Cistanche.

Mar a léirítear i bhFíor 1, tá tiúchan ard de roinnt comhpháirteanna bithghníomhacha a bhaineann le héifeachtaí purgóideacha i bhfréamhacha Herba Cistanche. Ba iad na tiúchain d'eicseacóisíd iomlán agus verbascoside iomlán ná 0.64 mg/g agus 0.16 mg/g, faoi seach. Braitheadh ​​dhá bhuaic a léirigh leibhéil arda echinacoside agus verbascoside sa LP ag am coinneála cuí ag crómatagrafaíocht leacht ardfheidhmíochta (HPLC).

3.2. Breathnú Ginearálta.

Ní bhfuair francaigh SP bás le linn an turgnaimh, rud a thugann le fios go bhfuil slándáil níos fearr agus cumas oibriúcháin an mhúnla ainmhithe. I gcomparáid le Grúpa A, léirigh francaigh sa ghrúpa samhail fionnaidh clúmhach, lassitude, stól tirim, agus

dul in olcas le síneadh ama samhaltaithe.

3.3. Éifeacht AEHC ar Uimhir Stóil agus Ábhar Taise i bhFrancaigh Constipation de bharr Loperamide.

I gcomparáid le feces gnáth, bhí na feces i nGrúpaí B, C, D, agus E tirim, beag, agus crua agus ní raibh siad dóite roimh chóireáil.

tar éis an tsaoil, cuireadh loperamide instealladh i bhfrancaigh (tá airíonna maolaithe mar chorp agus 3(b) tar éis cóireáil leighis).

ní raibh difríocht mhór idir an meáchan i measc na ngrúpaí turgnamhacha go léir, cé gur léirigh Grúpa E meáchan coirp beagán níos ísle ná na grúpaí eile (Fíor 2(a)). Ina theannta sin, d'ith francaigh SD le constipation bia i bhfad níos lú ná Grúpa A ( ), cé nach raibh na difríochtaí idir Grúpaí B, C, D, agus E (Fíor 2(b)) suntasach. Níor tháinig aon athrú ar thomhaltas uisce freisin idir Grúpa A agus Grúpa B. Thairis sin, níor aimsíodh aon mhéadú suntasach ar thomhaltas uisce i

níor spreag cóireáil leis an AEHC aon athrú. Cé go raibh an ráta idirthurais intestinal i nGrúpaí C, D, agus freisin i bhfad níos airdeBhí cóimheasa i bhfad níos ísle ag Grúpaí C, D, agus E ná Grúpa A.

3.4. Éifeacht AEHC ar Ráta Beag Idirthurais Stéig i bhFrancaigh Constipation de bharr Loperamide.

Mar atá le feiceáil i bhFíor 4, níor aimsíodh aon difríochtaí san am idirthurais stéig bheag bhunlíne i measc na gcúig ghrúpa. Tá cóimheas tiomána gualaigh níos ísle go feiceálach ag Grúpa B i gcomparáid le Grúpa A (𝑃 < 0.01).="" cé="" go="" raibh="" an="" ráta="" idirthurais="" intestinal="" i="" ngrúpaí="" c,="" d,="" agus="" e="" i="" bhfad="" níos="" airde="" ná="" an="" ráta="" i="" ngrúpa="" b="" (𝑃="">< 0.05),="" bhí="" cóimheasa="" i="" bhfad="" níos="" ísle="" ag="" grúpaí="" c,="" d,="" agus="" e="" ná="" grúpa="">

3.5. Feabhsaíonn an Idirghabháil le AEHC Feidhm Innéacs Soghluaisteachta Coilíneachta go Páirteach.

Tháinig laghdú suntasach ar leibhéil séiream GAS agus MTL a fuarthas ó fhrancaigh Ghrúpa B i gcomparáid leo siúd ó Ghrúpa A (𝑃 < {{0}}.01,="" resp.).="" ar="" an="" láimh="" eile,="" tá="" leibhéil="" níos="" airde="" gas="" agus="" mtl="" ó="" riar="" sleachta="" herba="" cistanche="" ag="" grúpaí="" c,="" d,="" agus="" e="" (𝑃="">< 0.05,="" resp.)="" ó="" riar="" sleachta="" herba="" cistanche="" i="" gcomparáid="" le="" grúpa="" b="" bhí="" na="" luachanna="" ss="" i="" francaigh="" ghrúpa="" b="" níos="" airde="" i="" gcomparáid="" le="" grúpa="" a="" (𝑃="">< 0.01);="" tá="" leibhéil="" maolaithe="" ss="" (𝑃="">< 0.05)="" (fíor="" 5)="" ag="" grúpaí="" c,="" d,="" agus="" e.="" i="" gcomparáid="" le="" francaigh="" constipation,="" bhí="" na="" leibhéil="" cgrp="" i="" ngnáthfhrancaigh="" ghrúpa="" a="" (𝑃="">< 0.01)="" agus="" i="" ngrúpaí="" c,="" d,="" agus="" e="" arna="" riar="" ag="" herba="" cistanche="" tairiseach="" (𝑃=""> 0.05).

3.6. Athrú Histeolaíochta an Chollaigh.

Chun imscrúdú a dhéanamh an féidir le cóireáil AEHC athrú struchtúrach ar fhíochán an choilín a spreagadh, tomhaiseadh an fad villus, tiús na sraithe cripte, agus tiús na matán i gcoilíní trasnacha na bhfrancach sna cúig ghrúpa tar éis staining H&E. Trí chomparáid a dhéanamh ar phaiteolaíocht colon na francaigh i ngach grúpa, bhí an mhúcóis colonic réidh agus tá artairí beaga agus veins beaga sa submucosa agus líon mór cealla adipose. Ina theannta sin, bhí an ciseal matáin comhdhéanta de chealla muscle réidh agus bhí an subserosa iomlán. Bhí meánfhad an villus i bhfad níos giorra i nGrúpa B ná i nGrúpa A (𝑃 < {{0}}.01).="" mar="" sin="" féin,="" tháinig="" méadú="" mór="" ar="" mheánfhad="" an="" villus="" i="" ngrúpa="" c="" de="" níos="" mó="" ná="" 30="" faoin="" gcéad="" i="" gcomparáid="" le="" grúpa="" b="" (fíoracha="" 6="" agus="" 7)="" (𝑃="">< 0.05).="" idir="" an="" dá="" linn,="" méadaíonn="" meánfhad="" an="" villus="" go="" mór="" i="" ngrúpaí="" d="" agus="" e="" i="" gcomparáid="" le="" grúpa="" b="" (fíoracha="" 6(a)="" agus="" 6(b))="" (𝑃="">< 0.01).="" ina="" theannta="" sin,="" bhí="" athrú="" tiús="" matán="" an-chosúil="" le="" fad="" villus.="" i="" ngrúpa="" b,="" tiús="" na="">

Bhí sé i bhfad níos tanaí i gcomparáid le Grúpa A. Mar sin féin, tháinig méadú 30-35 faoin gcéad ar leibhéil tiús matán i nGrúpaí C, D, agus E i gcomparáid le Grúpa B (Fíoracha 6 agus 7). Tríd is tríd, léiríonn na torthaí seo go bhféadfadh an AEHC an fad villus agus tiús matán i colon na francaigh constipated a mhéadú.

3.7. Cóireáil AHEC a Riar Léiriú Próitéine Méadaithe ar c-Kit agus SCF.

Braitheadh ​​a imdhíon-imoibríocht sa idirstad mar go raibh na cealla i ngach grúpa dearfach le haghaidh c-kit. Mar a léirítear i bhFíor 8, bhí leibhéal slonn an c-kit i nGrúpa B níos ísle ná an leibhéal i nGrúpa A (𝑃 < 0.05).="" bhí="" leibhéal="" slonn="" c-kit="" i="" ngrúpa="" c="" níos="" airde="" ná="" é="" i="" ngrúpa="" b="" (𝑃="">< 0.{{2{0}}5),="" agus="" bhí="" níos="" mó="" c-kit="" i="" láthair="" i="" ngrúpaí="" d="" agus="" e="" ná="" i="" ngrúpa="" b="" (𝑃="">< 0.05).="" tar="" éis="" cóireála="" le="" tiúchain="" éagsúla="" de="" sliocht="" uiscí="" de="" herba="" cistanche="" ar="" feadh="" 2="" sheachtain,="" braitheadh="" ​​​​anailís="" blot="" an="" iarthair="" leibhéil="" léirithe="" próitéine="" c-kit="" agus="" scf.="" léirigh="" anailís="" blot="" an="" iarthair="" go="" raibh="" leibhéil="" slonn="" c-kit="" agus="" scf="" thar="" a="" bheith="" níos="" ísle="" tar="" éis="" cóireála="" loperamide="" i="" colons="" na="" francaigh="" (fíor="" 9).="" léiríonn="" fíor="" 8(e)="" gur="" mhéadaigh="" an="" c-kit="" laghdaithe="" i="" bhfrancaigh="" constipation="" go="" suntasach="" 31.2="" faoin="" gcéad="" tar="" éis="" cóireáil="" a="" dhéanamh="" ar="" na="" francaigh="" le="" 500="" 𝜇g/ml="" aehc="" (𝑃="">< 0.05).="" ina="" theannta="" sin,="" le="" cóireáil="" le="" 100="" agus="" 200="" g/ml="" aehc="" leibhéil="" slonn="" próitéine="" c-kit.="" mhéadaigh="" léiriú="" próitéine="" scf="" go="" suntasach="" 20.1,="" 24.7,="" agus="" 8.4="" faoin="" gcéad="" ag="" cóireáil="" le="" 100,="" 200,="" agus="" 500="" 𝜇g/ml="" aehc,="" faoi="" seach="" (fíor="" 9).="" 3.8.="" éifeacht="" aehc="" ar="" mrna="" léiriú="" c-kit,="" scf,="" agus="" pi3k.="" chun="" imscrúdú="" a="" dhéanamh="" an="" bhféadfadh="" tionchar="" a="" bheith="" ag="" cóireáil="" aehc="" ar="" rialáil="" mrna="" a="" bhaineann="" le="" crapadh="" matán,="" breathnaíodh="" athruithe="" ar="" leibhéil="" slonn="" c-kit,="" scf,="" agus="" pi3k="" i="" gcoilíní="" francaigh="" constipation="" ag="" baint="" úsáide="" as="" primers="" ar="" leith.="" léirigh="" na="" torthaí="" go="" raibh="" na="" leibhéil="" mrna="" de="" c-kit="" i="" ngrúpa="" b="" i="" bhfad="" níos="" ísle="" i="" gcomparáid="" le="" grúpa="" a="" (𝑃="">< 0.05),="" agus="" bhí="" na="" leibhéil="" mrna="" i="" ngrúpaí="" c,="" d,="" agus="" e="" níos="" airde="" ná="" i="" ngrúpa="" b="" (𝑃="">< 0.05).="" (fíor="" 10).="" scrúdaíomar="" an="" mrna="">

léiriú SCF, a ligand of kit. Bhí slonn mRNA SCF i bhfrancaigh Ghrúpa B i bhfad níos ísle ná i nGrúpa A, ach mhéadaigh cóireáil le AEHC i nGrúpaí C, D, agus E léiriú mRNA SCF (Fíor 10). Ina theannta sin, rinneamar scrúdú ar éifeacht AEHC ar léiriú géine PI3K. Ar lá 14, bhí leibhéal slonn géine PI3K i bhfad níos airde i nGrúpaí C, D, agus E ná i nGrúpa B (𝑃 <>