Tá Strus Ocsaídeach ar cheann de na réamhtheachtaithe suntasacha ar ghalair meitibileach éagsúla Cuid 2

Déan teagmháil le do thoiloscar.xiao@wecistanche.comle haghaidh tuilleadh eolais

3. Plé

D’fhéadfadh fréamhacha saor in aisce ionsaí a dhéanamh ar phróitéiní, lipidí, nó DNA chun leictreon a fháil, rud a d’fhágfadh fadhbanna sláinte éagsúla. Ar an ábhar seo, tá sé riachtanach córas frithocsaídeach an chomhlachta agus na fréamhacha saor in aisce a fhoirmítear trí ocsaídiú a chothromú. I gcás meath ar an iarmhéid seo, eascraíonn strus ocsaídiúcháin [29]. Tá strus ocsaídiúcháin ar cheann de na príomhfhachtóirí a eascraíonn le neamhoird ainsealacha éagsúla cosúil le hailse, diaibéiteas, galair cardashoithíoch, galar Alzheimer, etc. Cé go bhfuil córais féin-fhrithocsaídeach i gcorp an duine chun damáiste ocsaídiúcháin d'fhíocháin agus d'orgáin a chomhrac, tá na cosaintí seo. féadfaidh córais a n-éifeachtúlacht a chailleadh de bharr coinníollacha éagsúla amhail ró-ídiú alcóil, caitheamh tobac, strus, úsáid ainsealach drugaí, agus radaíocht, etc. [30]. Tá sé léirithe ag tuarascálacha eolaíocha éagsúla go bhfuil ról suntasach ag meitibilítí plandaí tánaisteacha chun strus ocsaídiúcháin agus a éifeachtaí díobhálacha a chosc [13,14,31] Cé gur paraiméadar tábhachtach é bith-infhaighteacht a dhéanann difear do bhithghníomhaíocht na gcomhdhúile seo, níor cuireadh san áireamh é. staidéir is mó. Mar sin féin, tá a fhios go maith go bhfuil na meitibilítí tánaisteacha faoi réir claochluithe struchtúracha de bharr coinníollacha pH éagsúla, gníomhaíocht einsímeach, agus teocht an chomhlachta sa chóras gastrointestinal. Ina theannta sin, tá tréithe ceimiceacha na meitibilítí tánaisteacha cosúil le meáchan móilíneach, polaraíocht, agus an méid ceangailteach do mhacramóilíní sa mhaitrís plandaí ina bhfachtóirí suntasacha freisin a dhéanann difear dá mbith-infhaighteacht [13]. Dá réir sin, tá sé ríthábhachtach na comhdhúile nó a meitibilítí a ionsú isteach sa tsruth fola a luaithe a ionghabháil iad chun a n-éifeachtaí fiseolaíocha sistéamach a fheidhmiú. Féadfaidh samhlacha ionsamhlúcháin díleá in vitro fianaise a sholáthar chun measúnú a dhéanamh ar shaintréithe bith-infhaighteachta substaintí. Cé go bhfuil gá le deimhniú i dtrialacha daonna chun aon mhaoin fheidhmiúil a éileamh, úsáidtear samhlacha ionsamhlúcháin in vitro go forleathan mar roghanna eile ar staidéir in vivo nó trialacha daonna, ar minic iad indíospóireachta go heiticiúil, atá dian ar acmhainní, costasach agus am-íditheach [32].

Cliceáil anseo le do thoil chun tuilleadh eolais a fháil

D'imscrúdaigh roinnt taighdeoirí freisin an poitéinseal frithocsaídeach a bhaineann le eastóscáin a ullmhaítear ó orgáin éagsúla de speicis Cistus. De réir an tsuirbhé litríochta, is é seo an chéad staidéar ar speicis Cistus maidir le bith-infhaighteacht substaintí feanólacha agus a dtionchar ar ghníomhaíocht frithocsaídeach trí mhúnla insamhalta díleá in vitro a úsáid. Karas et al. [33] le fios go bhfuil 10 faoin gcéad de na comhpháirteanna polyphenolic fós undigested sa mhaitrís plandaí agus 90 faoin gcéad díobh faoi réir díleá sa chéim gastric nó intestinal (thart ar 48 faoin gcéad agus 52 faoin gcéad, faoi seach). Mar a luadh níos luaithe, bhí tionchar diúltach ag an nós imeachta insamhalta díleá daonna in vitro ar na méideanna feanólacha go léir i sleachta uiscí. Mar sin, braitheadh ​​caillteanais shuntasacha in inneachar feanólach na samplaí bith-infhaighte de gach eastóscán. Ina theannta sin, bhí na tiúchana proanthocyanidin iomlán de shamplaí IN faoi bhun na teorann braite i ngach eastóscán uiscí. Spreag staidéir éagsúla freisin tionchar diúltach an nós imeachta díleá ar chomhdhúile feanólacha sna heastóscáin phlanda agus mar sin bithghníomhaíochtaí gaolmhara. Mar shampla, thuairiscigh muid an t-ábhar feanólach iomlán de Salvia virgata Jacq. Bhí drochthionchar aige freisin ar an nós imeachta díleá inár staidéar roimhe seo Ina theannta sin, tháinig laghdú ar mhéideanna na mór-mheitibilítí den sliocht, ie, rutin agus aigéad rosmarinic [13]. I gcodarsnacht leis sin, thuairiscigh roinnt staidéar torthaí contrártha. Sa staidéar le Celeb et al. [34], thug siad faoi deara méadú ar an aigéad feanólach iomlán, flavonoid, agus méideanna feanólacha sna samplaí bith-infhaighte de sliocht meatánólach ó Hypericum perfoliatum L. Go deimhin, bhí cóimheasa bith-inrochtaineachta ag na príomh-mheitibilítí, quercitrin, chlorogenic agus gallic, os cionn 100. faoin gcéad . Léirigh na staidéir seo go bhféadfadh éifeachtaí an nós imeachta díleá a bheith éagsúil de réir ábhair phlandaí. Chun na difríochtaí seo a shoiléiriú, tá sé riachtanach meicníocht gníomhaíochta an chórais díleá ar shubstaintí feanólacha a mheas. (sochair bioflavonoids) Serra et al.[35] Moltar go bhfaightear comhdhúile feanólacha go príomha i gliocóisídí, polaiméirí, agus foirmeacha eistir sa mhaitrís plandaí agus go ndéantar iad a hidrolyzed sa chóras díleácha roimh ionsú. Féadfaidh fachtóirí éagsúla tionchar a imirt ar chlaochlú struchtúrach na gcomhdhúile feanólacha sa chonair gastrointestinal. Mar shampla, ní mór comhdhúile a bhfuil meáchain mhóilíneacha níos airde acu, mar shampla proanthocyanidins nó procyanidins, a hidrealú sula n-ionsúitear sa phutóg iad. Is fachtóir suntasach é struchtúr na maitrís plandaí freisin i mbith-infhaighteacht na feanólachta; (ceannaigh cistean) is féidir le comhdhúile feanólacha ceangal le macramóilíní sa mhaitrís plandaí, mar shnáithíní, próitéiní, agus móilíní lipid. Mar sin, ní fhéadfaidh ach na comhpháirteanna feanólacha saortha ón maitrís a bheith in-ionsúite ón gconair gastrointestinal. Thairis sin, tá luachanna pH éagsúla agus gníomhartha einsímeacha an mhicribhiota intestinal i measc na bhfachtóirí ríthábhachtacha eile a dhéanann difear don chlaochlú ar struchtúr ceimiceach comhdhúile feanólacha [36]. I bhfianaise na sonraí seo, is féidir linn hipitéis a thabhairt go bhféadfadh torthaí éagsúla a fhaightear ó chineálacha comhchosúla staidéir thurgnamhach a bheith mar gheall ar chastacht an chórais díleá agus comhdhéanamh na maitrís plandaí. Mar a chuirtear i láthair i dTábla 3, léirigh na samplaí bith-infhaighte de shleachta Cistus gníomhaíocht frithocsaídeach níos laige ná na comhghleacaithe neamh-díleádaithe agus iar-ghastraí mar gheall ar a n-ábhar feanólach níos ísle.

Cistancheféidirdíolúine a fheabhsú

Ina theannta sin, léirigh an dá eastóscadh C.saluifolius gníomhaíocht frithocsaídeach níos fearr i dtástálacha DPPH, CUPRAC, FRAP, agus TOAC i gcomparáid le speicis eile. Thairis sin, léirigh an dá sliocht C.paroifforus gníomhaíocht scavenging radacach DMPD níos airde ná sleachta speiceas eile. Mar a léirítear i dTábla 1, na feanólachtaí iomlána, flavonoids,bienfaits cisteancheagus bhí cion aigéad feanólach C. salviifolius níos airde ná sna samplaí eile. Mar sin, d'fhéadfadh go mbeadh baint ag poitéinseal frithocsaídeach níos airde na n-sleachta C. salviifolius lena inneachar feanólach.

Ina theannta sin, d’fhéadfadh go mbeadh baint ag an laghdú ar fhéidearthachtaí frithocsaídeacha, gníomhaíochtaí coisctheacha ar einsímí a bhaineann le carbaihiodráití, agus AGEanna de na samplaí bith-infhaighte leis an laghdú ar gliocóisídí flavonoid marcála. Mar sin féin, bhí substaintí feanólacha eile i sleachta Cistus freisin, mar a léirítear i bhFíor 1. Dá bhrí sin, tá gá le hanailís chromatagrafaíochta mionsonraithe ar na sleachta chun monatóireacht a dhéanamh ar thionchar an díleá ar ghníomhaíocht bhitheolaíoch.

Le déanaí tharraing aird níos mó ar acmhainneacht coisctheach sleachta plandaí ar einsímí díleácha mar gheall ar imní sábháilteachta coscairí sintéiseacha. Dá bhrí sin, socraíodh éifeacht coisctheach sleachta plandaí i roinnt staidéar, agus bhain an éifeacht seo go ginearálta le substaintí feanólacha mar flavonoids, aigéid feanólacha, proanthocyanidins, etc. Sun et al. Mhol [37] go dtaispeánfadh comhdhúile polyphenolic a n-éifeachtaí coisctheacha trí cheangal a dhéanamh leis na heinsímí a luaitear thuas le cabhair ó fhórsaí hidreafóbach agus bannaí neamhchomhfhiúsacha. Mar sin, tá baint ag polyphenols ar chosc ar ghníomhaíocht einsím o-amaláis agus a-glucosidase lena struchtúir mhóilíneacha. Cé go ndearnadh staidéar ar an meicníocht idirghníomhaíochta seo ag baint úsáide as teicnící éagsúla cosúil le cinéitic choiscthe, dugáil mhóilíneach, múchadh fluaraiseachta, etc., níl aon chonclúid áirithe faighte fós [38]. Mar sin féin, thuairiscigh staidéir iomadúla go bhfuil baint dhíreach ag coiscthe einsímí díleácha ar na heastóscáin phlanda lena n-ábhar feanólach. Tuairiscíodh roimhe seo staidéir chomhchosúla ar ghníomhaíochtaí coisctheacha einsímeacha speiceas Cistus. Sayah et al. [39] rinne sé imscrúdú ar ghníomhaíochtaí coisctheacha -amaláis agus -glucosidase de na sleachta meatánólacha agus uiscí 8{{10}} ó C. monspeliensis agus C. saluifolius. Bhí a dtorthaí i gcomhréir leis an staidéar reatha, rud a léirigh gur léirigh sliocht uiscí C. salvifolius o-glúcósidáis níos airde (ICso ug/mL:0.95±0.14)agus -amaláis(IC5{{). {55}} ug/mL:217.1±0.15)gníomhaíocht choisceach ná an sliocht uiscí C. monspeliensis （IC50 ug/mL∶ 14.58±1.26） agus (IC50 4g/mL:886.10), faoi seach. Bhí rátaí coisctheacha an dá eastóscán uiscí ar na heinsímí seo níos airde ná an acarbose comhdhúil tagartha (ICso ug/mL:18.01±2.00)Cosúil lenár staidéar, fuair siad comhghaol idir na rátaí coisctheacha einsíme agus an t-iomlán. méideanna feanólacha agus flavonoid. Bhí an dá ábhar feanólach iomlán agus iomlán flavonoid den sliocht uiscí C. saloijfolius (408.43 ± 1.09mg GAE agus 140.00±1.15 RE, faoi seach) níos airde ná an sliocht uiscí C.monspeliensis (261.76 ± 1.9mg GAE agus 78.00±1.15 RE faoi seach). Orhan et al. [40] rinne sé imscrúdú freisin ar na féidearthachtaí coisctheacha einsím díleácha de 80 faoin gcéad sleachta uiscí agus eatánólacha ó dhuilleoga C.laurifolius. De réir a gcuid torthaí, léirigh sliocht eatánólach 80 faoin gcéad (71.7 faoin gcéad ±0.6) gníomhaíocht láidir coisctheach -amaláis i gcomparáid le sliocht uiscí (39.3 faoin gcéad ±2.2) ag tiúchan 1mg / mL. Mhol siad go gcuirfeadh comhdhúile feanólacha, go háirithe flavonoids, isteach go díreach ar secretion insulin trí chosc a chur ar apoptosis béite-chealla agus tacú le gníomhaíocht frith-diaibéitis. Léiríonn an hipitéis seo, a chomhghaolú lenár dtorthaí, gur bhain an sampla ND de shleachta uiscí de C. salviifolius an t-ábhar iomlán flavonoid agus feanólach is airde agus na gníomhaíochtaí coisctheacha -amaláis agus o-glucosidase is mó. Mar a thugtar i dTábla 4, léirigh eastóscán uiscí C. salviifolius gníomhaíochtaí coisctheacha níos fearr ar einsímí díleácha ná na heastóscáin eile. Chomh maith,colaistéaról cisteI samplaí de na heastóscáin uiscí bhí méideanna níos ísle feanólacha agus flavonoid ná samplaí ND agus mar sin léirigh siad gníomhaíochtaí coisctheacha einsíme níos ísle san obair reatha. Cé go raibh tionchar diúltach ag an nós imeachta díleá ar ábhar feanólach na n-sleachta, léirigh siad fós gníomhaíocht choisctheach einsím díleáite suntasach. I roinnt staidéar, tuairiscíodh go raibh gliocóisídí flavonoid mar na mór-mheitibilítí de shleachta plandaí a bhfuil cumas coisctheach láidir -amaláis agus -glucosidase acu[41-43]Cé nach bhfuil meicníocht coisctheach na gcomhdhúile feanólacha ar na heinsímí díleácha nochta go fóill, tá struchtúr- rinneadh staidéir chaidrimh ghníomhaíochta ar roinnt comhpháirteanna feanólacha mar flavonoids, aigéid feanólacha, proanthocyanidins, agus tannins. Léirigh staidéir chaidrimh struchtúr-gníomhaíochta ar flavonoids go gcuireann nasc dúbailte C2=C3 an fháinne C le cumas coiscthe einsímí díleácha na gcomhdhúile sin. Ós rud é go n-ardaíonn an banna seo an dlús leictreon, méadaítear neart an idirghníomhaíochta idir an flavonoid agus an einsím [44]. Ina theannta sin, éascaíonn grúpaí hiodrocsaile ar C-5 agus C{-7 poitéinseal coisctheach -amaláis flavonoids. Moladh freisin go mbíonn tionchar dearfach ag hiodrocsailiú cnámharlach flavonoids ar a gcumas einsímí a-amaláis agus -glucosidase[45]. Mar a léiríodh níos luaithe, ba gliocóisídí flavonol na flavonoids marcála go léir sa staidéar seo a bhfuil na ceanglais struchtúracha seo a bhfuil cur síos orthu thuas orthu. Mar sin féin, tar éis nós imeachta díleá in vitro, tháinig laghdú suntasach ar a ngníomhaíochtaí gaolmhara i samplaí bith-infhaighte de na heastóscáin uiscí.

Go ginearálta, baineann acmhainneacht coisctheach na n-sleachta plandaí ar AGEanna le roinnt fachtóirí, ie, a n-ábhar feanólach, féidearthachtaí frithocsaídeacha, cumais chelating miotail, idirghníomhaíochtaí próitéine, agus gníomhaíochtaí blocála gabhdóirí AGE [13]. Mar a léirítear i dTábla 4, léirigh samplaí bith-infhaighte de na heastóscáin uiscí gníomhaíochtaí coisctheacha AGE níos ísle i gcomparáid le samplaí ND ós rud é go raibh drochthionchar ag nós imeachta díleá in vitro ar ábhar feanólachta na n-eastóscán. De réir thorthaí an staidéir reatha, tá an sampla ND de eastóscán uiscí de C. (cistanche agus tongkat ali reddit) bhí an ghníomhaíocht coisctheach AOIS is airde ag saluifolius chomh maith le hábhar iomlán feanólach agus flavonoid. I gcomparáid leis sin, léirigh I sampla de eastóscán uiscí de C. monspeliensis an poitéinseal coiscthe AOIS is laige, ar féidir a chur i leith a inneachair flavonoid agus feanólacha iomlán is ísle. Ós rud é go bhfuil dáileadh forleathan ag flavonoids i sleachta plandaí, torthaí, glasraí agus deochanna, tá dlús curtha le roinnt staidéar ar chumas coiscthe flavonoids ar fhoirmíochtaí AGE. Tuairiscíodh na flavonoids chéanna a sannadh mar na feanólachtaí marcála sa staidéar seo freisin mar chomhdhúile marcála i staidéir eile[46-48].

Cosúil le cosc ​​einsímí díleácha, spreag nasc dúbailte C2=C3 agus hiodrocsailiú fáinní A agus C gníomhaíochtaí coisctheacha flavonoids AGE. Mar sin féin, tá laghdú ar ghníomhaíocht choisctheach mar thoradh ar astú siúcra leis an gcnámharlach flavonoid [49]. Ar an láimh eile, tá Cervantes-Lauren et al.[50] le fios go raibh poitéinseal coiscthe AGE níos mó ag flavon-3-de gliocóisídí ná na gliocóisídí flavonoid eile. Féadfaidh an hipitéis seo a bheith ina míniú ar an laghdú ar chosc ar AOIS i samplaí bith-infhaighte. Mar shampla, níor aimsíodh quercitrin agus hipearóisíd i samplaí bith-infhaighte den sliocht uiscí C.monspeliensis, agus is é sin an chúis le gníomhaíocht níos ísle samplaí IN de C. monspeliensis i gcomparáid leis na sleachta ó speicis eile. Cé nár aimsíodh quercitrin i sliocht uiscí C. saloifolius, d'fhéadfadh méideanna i bhfad níos airde hipearóisíd agus salidroside a bheith mar chúis lena ghníomhaíocht ardchoiscthe AOIS. Go ginearálta, breathnaíodh comhghaol dearfach idir inneachar flavonoid marcála na samplaí agus a n-acmhainneacht coisctheach ar AGEanna.

4. Ábhar agus Modhanna

4.1.Ceimiceáin

Ceannaíodh na tagairtí, na heinsímí agus na ceimiceáin go léir a úsáideadh sna turgnaimh ó Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, SAM). Baineadh úsáid as ábhair ghrád anailíse sna turgnaimh.

Samplaí 4.2.Plant

Bailíodh páirteanna ón aer de C.creticus agus C.saloifolius ó champas Ollscoil Yeditepe (Kayisdagi, Iostanbúl) le linn na seachtaine deiridh d’Aibreán 2018. Bailíodh codanna ón aer de C.mon-speliensis agus C. paroiflorus ó gar do Alacant Kutlu Aktas Balaji, Cesme, Izmir sa dara seachtain de Bhealtaine 2018. Bailíodh codanna ón aer de C. laurifolius ó bhóthar Kemer-Doganhisar, Konya, sa chéad seachtain de mhí an Mheithimh 2018. D'fhíordheimhnigh an tOllamh Dr Erdem Yesilada ábhair phlandaí. Stóráladh eiseamail dearbháin le haghaidh C. creticus (YEF18013), C. Lauri folium (YEF18017), C.monspeliensis (YEF18015), C.paroiflorus (YEF18016) agus C.salvifolius (YEF18014) ag Herbarium na Roinne Pharmacoygnosy na Cógaisíochta, Ollscoil Yeditepe, Iostanbúl, an Tuirc. 4.3.Nós Imeachta Astarraingthe

Roghnaíodh eastóscadh uiscí ós rud é go n-úsáidtear go coitianta é mar theicníc ullmhúcháin i míochaine traidisiúnta. Baineadh na codanna aer-triomaithe agus púdraithe garbh de speiceas Cistus (100 g) le huisce driogtha te (80 céim , 1,5 L) trí úsáid a bhaint as gléas croith ar feadh 15 min. Ansin, rinneadh sleachta uiscí a scagadh trí pháipéar scagtha agus galú go triomacht faoi bhrú laghdaithe. Tar éis an nós imeachta lyophilisation a bheith críochnaithe, tuaslagadh eastóscáin in uisce driogtha le haghaidh tuilleadh próiseála (sampla neamh-díleá: ND) (toradh eastóscáin: 13.04 faoin gcéad do C.creticus, 15.7 faoin gcéad do C.laurifolus, 12.8 faoin gcéad do C.monspeliensis ,14.94 faoin gcéad do C.parviflorus,14.74 faoin gcéad do C.salvifolius). 4.4.In Vitro Modh Insamhladh Díleá Daonna

Cuireadh an tsamhail ionsamhlúcháin díleá daonna i bhfeidhm ar shamplaí Cistus in vitro, de réir an mhodha a sonraíodh níos luaithe ag Celeb et al.[34]. Ar an gcéad dul síos, tuaslagadh 1g NaCl agus 1.6g pepsin i 500 ml d'uisce driogtha chun tuaslagán sreabhán gastrach insamhladh (SGF) a fháil Níos déanaí, socraíodh pH an tuaslagáin SGF go 2 le HCl(5 M); 17.5 mL den tuaslagán seo measctha le 2.5 ml de shamplaí plandaí, agus bhí an meascán suite isteach sa dabhach uisce chroitheadh ​​​​ag 37 céim ar feadh 2 h chun aithris a dhéanamh ar ghluaiseachtaí peristaltic an chórais díleá. Tar éis 2 h, cuireadh na samplaí isteach i ndabhach oighir chun na frithghníomhartha einsímeacha a dhíghníomhachtú; cuireadh 2 ml de na samplaí ar leataobh mar shampla "iar-ghastraí" (PG) le haghaidh turgnamh breise. Bhí membrane scagdhealaithe ceallalóis luchtaithe le méid ceart NaHCO3 (1 M, pH7) suite sna réitigh sampla fuar; dá bhrí sin, rinneadh aithris ar ionsú gastrointestinal. Ansin, cuireadh 4.5 ml d'aigéid bhile / tuaslagán pancreatin le chéile leis na tuaslagáin, agus gor an meascán ar feadh 2 u eile ag 37 céim . Ar deireadh, fuarthas an sreabhach taobh istigh den membrane scagdhealaithe mar an sampla "in-infhaighte" (IN). Tar éis don ghnáthamh a bheith críochnaithe, caomhnaíodh na samplaí go léir ag -20 céim le haghaidh turgnamh breise. 4.5.Meastachán In Vitro ar Phróifíl Feanólach 4.5.1. Measúnacht ar Ábhar Feanólach Iomlán Rinneadh cinneadh speictrophotiméadrach ar ábhar feanólach iomlán na samplaí i 96-teimpléad pláta tobair de réir an mhodha a sonraíodh níos luaithe ag Barak et al. ） cuireadh le 20 μL de réitigh shamplacha agus tagartha úrullmhaithe. Ansin, cuireadh 100 μL d'imoibrí Folin-Ciocalteu le chéile leis an meascán. Tar éis tréimhse goir 30 nóiméad ag teocht an tseomra sa dorchadas, tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 690 nm. Baineadh úsáid as aigéad galach mar thuaslagán tagartha ag tiúchana éagsúla chun cuar calabraithe a bhunú agus cuireadh an t-ábhar feanólach iomlán in iúl mar choibhéis d'aigéad galach (GAE). 4.5.2. Measúnacht ar Ábhar Iomlán Flavonoid Bainistíodh cinneadh speictrophotiméadrach ar ábhar flavonoid iomlán na samplaí i 96-theimpléad pláta toibreacha de réir an mhodha a mhínigh Bardakci et al. 【51】; Cuireadh 150 μL de 75 faoin gcéad eatánól, 10 μL de chlóiríd alúmanaim agus 10 ul de thríhiodráit aicéatáit sóidiam 1M le chéile le 50 ul de réitigh samplacha agus tagartha, ar leithligh. Ansin, goradh na meascáin seo ag teocht an tseomra dorcha ar feadh 30 nóiméad. Tar éis na tréimhse goir, ríomhadh ionsúchán ag 405 nm. Úsáideadh Quercetin mar réiteach tagartha ag tiúchana éagsúla chun cuar calabraithe a bhunú agus léiríodh an t-ábhar iomlán flavonoid mar choibhéisí quercetin (QE).

4.5.3.Measúnú Iomlán ar Ábhair Aigéad Feanólach

Tomhaiseadh cion aigéid feanólach iomlán na samplaí go speictrophotiméadrach tar éis an nós imeachta a thuairiscigh Barak et al roimhe seo. [52]. Ar an gcéad dul síos, tuaslagadh méideanna cearta nítrít sóidiam agus molybdate sóidiam in uisce driogtha chun an t-imoibrí Arnow a fháil. Ansin, cuireadh 1 ml de na samplaí le chéile le 1 mL d'imoibrí Arnow, 1 mL de 0.1 M HCl, agus 1 mL de 1 M NaOH, ar leithligh. Tar éis sin, coigeartaíodh toirt an mheascáin go 10 ml le huisce driogtha, agus léigh an t-ionsúcht láithreach ag 490 nm. Fostaíodh aigéad caiféin mar thuaslagán tagartha ag tiúchana éagsúla chun cuar calabrúcháin a fháil, agus tugadh an t-ábhar iomlán d'aigéad feanólach mar choibhéis aigéid chaiféin (CAE).

4.5.4.Measúnú Ábhar Proanthocyanidin Iomlán

Rinneadh cinneadh speictreafótaiméadrach ar ábhar proanthocyanidin iomlán na samplaí i 96-theimpléad pláta toibreacha trí mhodh Barak et al. [11]. Go hachomair, meascadh 25 ul de na réitigh shamplacha le 150 ul de 4 faoin gcéad fanailin agus 75 ul de réitigh HCl (32 faoin gcéad), faoi seach. Tar éis am goir 15 nóiméad ag teocht an tseomra dorcha, coigeartaíodh an t-ionsúcht go 492 nm. Baineadh úsáid as catechin hydrate mar thuaslagán tagartha ag tiúchain éagsúla chun cuar calabraithe a fháil. Baineadh úsáid as meatánól mar réiteach rialaithe. Luadh ábhar proanthocyanidin iomlán na samplaí mar choibhéisí catechin (CE).

4.6.Measúnachtaí ar Ghníomhaíocht Snámha Radacach Saor in Aisce 4.6.1.DPH

Cinneadh gníomhaíocht scabhála radacach DPPH na samplaí i 96-theimpléad pláta tobair de réir an mhodha arna mhodhnú ag Celeb et al.[53]. Ar dtús, ullmhaíodh 150 uM de thuaslagán DPPH as an nua. Ansin, rinneadh 200 μL de thuaslagán DPPH a mheascadh le 25 uL de réitigh samplacha. Ansin, gor an meascán seo ag teocht an tseomra dorcha ar feadh 50 min. Ríomhadh an ionsúchán ag 540 nm. Baineadh úsáid as hiodrocsaitolúéin bhúitileach (BHT) mar thuaslagán tagartha ag tiúchana éagsúla. Baineadh úsáid as meatánól mar réiteach rialaithe. Cuireadh gníomhaíocht na samplaí i láthair mar EC50, a fhreagraíonn don tiúchan a léirigh gníomhaíocht 50 faoin gcéad.

4.6.2.Measúnú ar Ghníomhaíocht Scálaithe Radacach DMPD

Rinneadh gníomhaíocht scabhála radacach DMPD* (N, N-dimethyl-p-phenylenediamine) de na samplaí i 96-theimpléad pláta tobair de réir an mhodha ar chuir Inan et al. [13]. Ar an gcéad dul síos, 10{{10}} mM DMPD móide réiteach,0.05 M FeCl; Ullmhaíodh réiteach 6H2O agus maolán aicéatáit 0.01 M go húr. Ansin, meascadh 1 ml de thuaslagán DMPD, 100 mL de mhaolán aicéatáite, agus 0.2mL de thuaslagán FeCl3-6H2O, agus níos déanaí cuireadh 15 tuaslagán samplach uLof le chéile le 210 μL den mheascán seo. Tar éis na tréimhse goir ag teocht an tseomra dorcha ar feadh 50 nóiméad, tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 492 nm. Baineadh úsáid as Trolox mar thuaslagán tagartha ag tiúchain éagsúla chun cuar calabraithe a fháil. Ba é comhchruinnithe na dtuaslagán samplach ná 1 mg/mL. Luadh gníomhaíochtaí scavenála radacacha DMPD na samplaí mar choibhéisí Trolox (TE). 4.7.Miotail a Laghdú ar Mheasúnachtaí Gníomhaíochta

4.7.1.Measúnú Cumhachta Frithocsaídeach a Laghdaíonn Ferric (FRAP)

Baineadh amach gníomhaíocht FRAP na samplaí i dteimpléad 96 pláta tobair tar éis an nós imeachta a thuairiscigh Bardakci et al níos luaithe[54]. Ag tús an turgnaimh, foirmíodh an t-imoibrí FRAP trí réitigh aicéatáite, ferric-tripyridyltriazine, agus FeCl; 6H2O a mheascadh. Ina dhiaidh sin, cuireadh an t-imoibrí FRAP taobh istigh den oigheann 37 céim ar feadh 30 nóiméad. Ansin, cuireadh 10 uL de na réitigh samplacha le chéile le 30 μL d'uisce driogtha agus 260 uL d'imoibrí FRAP, faoi seach. Tar éis an t-am goir ag 37 céim ar feadh 30 nóiméad, coigeartaíodh an t-ionsúcht go 593 nm. Tógadh cuar caighdeánach trí mhólarachtaí éagsúla de thuaslagán sulfáit neamhfheiriúil (0.25-2 mM) a úsáid chun na torthaí a mheas. Baineadh úsáid as BHT mar réiteach tagartha ag tiúchana éagsúla. Cuireadh gníomhaíochtaí FRAP na samplaí i láthair mar mM FeSO4 in 1 g eastóscán tirim.

4.7.2.Measúnú ar Acmhainn Frithocsaídeach a Laghdaíonn Cúpraic (CUPRAC)

Cinneadh gníomhaíocht CUPRAC na samplaí i dteimpléad 96-pláta tobair de réir an mhodha arna mhodhnú ag Celeb et al. 【31】; Cuireadh 85 μL de CuSO4 (10 mM), neocupraine, agus tuaslagáin aicéatáit amóiniam agus 51 ul d'uisce driogtha le 43 ul de thuaslagán samplach, ar leithligh. Tar éis tréimhse goir (20 nóiméad) ag 50 céim i ndabhach uisce, tomhaiseadh an t-ionsúcht ag 450 nm. Baineadh úsáid as aigéad ascorbic mar thuaslagán tagartha ag tiúchana éagsúla chun cuar calabraithe a fháil. Cuireadh gníomhaíochtaí CUPRAC na samplaí i láthair mar choibhéis aigéid ascorbic (AAE). 4.8.Measúnú ar Ghníomhaíocht Frithocsaídeach Iomlán (TOAC)

Rinneadh cinneadh gníomhaíochta frithocsaídeach iomlán na samplaí i dteimpléad pláta toibreacha 96- tar éis an nós imeachta ag Celeb et al. [55]. Ar dtús, meascadh méid áirithe de fosfáit sóidiam monobasic, amóiniam molybdate tetrahydrate, agus aigéad sulfarach chun an réiteach TOAC a fháil. Ansin, cuireadh 300 μL de thuaslagán TOAC le 30 uL de réitigh samplacha. Tar éis na tréimhse goir ag 95 céim i ndabhach uisce ar feadh 90 nóiméad, socraíodh an t-ionsúcht ag 690 nm. Baineadh úsáid as aigéad ascorbic mar thuaslagán tagartha ag tiúchana éagsúla chun cuar calabraithe a fháil. Léiríodh gníomhaíochtaí TOAC na samplaí mar choibhéisí aigéid ascorbic (AAE). 4.9.Meastachán ar Innéacs Bith-infhaighteachta

Ríomhadh an t-innéacs bith-infhaighteachta (BAvI) de réir na cothromóide teoiriciúil a ndearna Inan et al cur síos uirthi[13]:

BAVI=CIN/CND Rinneadh cur síos ar an “innéacs bith-infhaighteachta” (BAvi) mar an cóimheas idir líon na bhfeanólachta sa sampla bith-infhaighte (IN) agus an líon sa sampla neamh-díleá (ND). 4.10. Cainníochtú Marcóir Flavonoids ag HPTLC

Rinneadh an cinneadh cainníochtúil ar thiúchan salidroside, hyperoside, agus quercitrin i ngach sampla insamhalta (ND, PG, IN) de na sleachta uiscí ó speiceas Cistus le crómatagrafaíocht ardfheidhmíochta tanaí-chiseal (HPILC)(CAMAG, Muttenz, An Eilvéis). ag leanúint leis an modh arna bhailíochtú ag Guzelmeric et al. [16]. Ullmhaíodh hipearóisíd, salidroside, agus quercitrin i dtiúchan 25,5{0 agus 10{{30}} ug/mL, agus rinneadh tiúchain na dtuaslagán samplach úrullmhaithe a choigeartú do 10 mg/mL. Cuireadh na réitigh seo i bhfeidhm ar phlátaí glóthacha shilice le tacaíocht ghloine gnáthchéim (20 cm × 10 cm, Merck, Darmstadt, an Ghearmáin) le méideanna áirithe (1-5 réitigh chaighdeánacha μL agus réitigh samplacha 5 μL) trí úsáid a bhaint as steallairí 100 μL (1-5) μL caighdeánach. Hamilton, Bonaduz, An Eilvéis） Rinneadh an nós imeachta iarratais le feidhmchlár samplach Linomat 5. Rinneadh an próiseas forbartha i Seomra Forbartha Uathoibrithe (ADC 2) agus aicéatáit eitile: déchlóraimeatán, aigéad aicéiteach, aigéad formach: uisce (10:25:10). Roghnaíodh :10:10:10me) mar chéim shoghluaiste Ansin, díorthaíodh na plátaí le himoibrí Táirge Nádúrtha (NPR) (1g aigéad défheinilboric 2-eistear aminoethyl in aicéatáit eitile 200mLof) sa ghléas tumoideachais (CAMAG) Cé go ndearnadh anailís ar hyperoside agus quercitrin go speictrophotiméadrach ag 260 nm, tomhaiseadh an méid salidroside ag 330 nm ag scanóir UV.Cinníodh luachanna RF na gcaighdeán mar hyperoside （≈0.35）, quercitrin (c0.45) (taobh c0.45) (taobh tiliro) 0.65）.Fuarthas na comhéifeachtaí comhghaoil ​​（r²） a bheith ×0.98 chun flavonoids marcála a chainníochtú.

4.11.Gníomhaíocht Chosc ar Einsímí a Bhaineann le Diaibéiteas 4.11.1. -Glúcosidase Gníomhaíocht Cosc

-scrúdaíodh gníomhaíochtaí coisctheacha glucosidase de na samplaí neamh-díleá agus bith-infhaighte a fuarthas ó eastóscáin uiscí de speiceas Cistus de réir an mhodha a mhínigh Balan et al. [56]. Ar an gcéad dul síos, rinneadh méideanna cearta fosfáite monosodium agus fosfáit dé-óidiam a mheascadh le maolán fosfáite 100 mM (pH7) a fháil. díscaoileadh einsím ac glucosidase i maolán fosfáit chun an tuaslagán -glucosidase (0.2U/mL) a fháil. Ansin cuireadh 170 uL de mhaolán fosfáite, 20 μL den tuaslagán -glucosidase, agus 20 μL de thuaslagán samplach le chéile agus gor in oigheann 37 céim ar feadh 15 nóiméad. Ina dhiaidh sin, cuireadh 20 uL de thuaslagán D-glucopyranoside 2.5 mM p-nitrophenyl i maolán fosfáit photaisiam 100 mM (pH7.0) leis an meascán, agus cuireadh tréimhse goir eile i gcrích ag 37 céim ar feadh 15 nóiméad. Ansin, cuireadh 80 μL de thuaslagán carbónáit sóidiam 0.2 M i gceangal leis an meascán chun an t-imoibriú a fhoirceannadh. Tomhaiseadh ionsú ag 405 nm. Baineadh úsáid as tuaslagán quercetin ag tiúchana éagsúla mar thagairt. Measadh na torthaí mar chéatadán de ghníomhaíocht choisctheach i dtiúchan 1 mg/mL agus 0.5 mg/mL de shamplaí ND agus IN de na heastóscáin uiscí de speicis Cistus.

4.11.2. -Gníomhaíocht Chosc Amaláis

- rinneadh gníomhaíocht coisctheach amaláis samplaí neamh-díleá agus bith-infhaighte a fuarthas ó eastóscáin uiscí de speiceas Cistus a chinneadh trí leanúint leis an nós imeachta a sonraíodh roimhe seo ag Balan et al.[56]. Rinneadh cinneadh speictreafótaiméadrach ar ghníomhaíochtaí coisctheacha a-amaláis de na samplaí trí imoibrí DNS (3,5-aigéad dinitrosalicileach) a úsáid. Mar a dúradh sa mhodh, déantar maltós ó thiontú an stáirse, agus déantar dath buí DNS alcaileach a iompú isteach sa dath oráiste-dearg mar gheall ar mhaltós a tháirgtear ó stáirse. Mar sin, ullmhaíodh tuaslagán DNS 96 mM ón meascán de thuaslagán tartrate potaisiam sóidiam (tuaslagtha i 2 M NaOH) agus méid áirithe DNS (tuaslagtha in uisce driogtha). Ansin, ullmhaíodh maolán fosfáit sóidiam 20mM le 6.7 mM NaCl (comhfhachtóir d’einsím a-amaláis) ag 20 céim (pH:6.9). tuaslagadh an einsím a-amaláis (1U/mL) agus stáirse (10 mg/ml) sa mhaolán seo. Tar éis sin, meascadh 50 μL de mhaolán fosfáit sóidiam agus 10 μL de thuaslagán einsíme a-amaláis le 20 μL de na réitigh samplacha. Goradh an meascán seo ag 37 céim ar feadh 45 nóiméad. Tar éis na tréimhse goir, cuireadh 20 μL den tuaslagán stáirse leis an meascán. Cuireadh tús le tréimhse goir eile ag 37 céim ar feadh 45 nóiméad. Cuireadh an nós imeachta céanna i bhfeidhm ar na samplaí gan tuaslagán einsím o-amaláis ar a dtugtar "cúlra samplach" a chur leis. Rinneadh staidéar ar an ngrúpa rialaithe leis an nós imeachta céanna in éagmais réitigh shamplacha. Tomhaiseadh ionsú ag 540 nm. Baineadh úsáid as acarbóis mar thuaslagán tagartha ag tiúchain éagsúla Cuireadh torthaí i láthair mar chéatadán de ghníomhaíocht choisctheach i dtiúchan 1mg/mL agus 0.5 mg/mL de shamplaí ND agus IN ó eastóscáin uiscí de speicis Cistus. 4.11.3.AGE Gníomhaíocht Chosc

Cinneadh gníomhaíocht choisctheach AGE de shamplaí neamh-díleádaithe agus bith-infhaighte ó eastóscáin uiscí de speiceas Cistus de réir an mhodha a ndearna Starow-icz et al cur síos air. [57]. Roimh aon phróiseas, ullmhaíodh 1 mg/mL agus 0.5 mg/mL tiúchain samplaí ND agus IN go húr. Ansin, cuireadh 1 mL de thiúchan 10 mg/mL de thuaslagán albaimine de shéiream buaibheach (BSA) le 1 mL de thuaslagáin samplacha ND agus IN. Ullmhaíodh samplaí rialaithe gan réitigh samplacha ND agus IN a chur leis, agus ullmhaíodh na samplaí bána gan glúcóis 0.5 M a chur leis. Ansin , goradh na samplaí ullmhaithe go léir ar feadh 40 u i ndabhach uisce chroitheadh ​​​​ag 55 céim . Nuair a tháinig deireadh leis an tréimhse goir, baineadh úsáid as léitheoir micreaphláta Thermo ScientificTM VarioskanTMLUXmultimode sa raon astaíochta 370 nm excitation/440 nm chun déine an fhluaraiseachta a ríomh. Baineadh úsáid as Quercetin mar réiteach tagartha ag tiúchana éagsúla.

5. Conclúidí

Sa staidéar reatha, rinneadh iniúchadh ar eastóscáin uiscí de gach speiceas Cistus a taifeadadh i bhflóra na Tuirce maidir lena bpróifílí feanólacha agus a gcumas frithocsaídeach agus frithdhibéitis in vitro. Ós rud é gurb é decoction nó insileadh an fhoirm choitianta i gcógas traidisiúnta, tá sé thar a bheith tábhachtach úsáid a bhaint as sleachta uiscí le haghaidh measúnú gníomhaíochta i staidéir thurgnamhacha. Ar an láimh eile, tá comhábhair hydrophilic sa sliocht uiscí faoi réir sraith de chlaochlú meitibileach sa chóras gastrointestinal uair amháin a ionghabháil. Dá bhrí sin, le haghaidh meastóireachta gníomhaíochta ceart ar fhoirmlithe traidisiúnta, ba cheart gníomhaíochtaí na meitibilítí bith-infhaighte a imscrúdú freisin.

Is é seo an chéad staidéar chun scrúdú a dhéanamh ar na hiarmhairtí a bhaineann leis an modh insamhalta díleá daonna in vitro ar speicis Cistus Tuircis. Ina theannta sin, rinneadh staidéar den chéad uair sa staidéar seo ar chumas coiscthe speiceas Cistus Tuircis ar AGEanna. Ina theannta sin, sannadh flavonoids marcála salidroside, hipearóisíd agus quercitrin, agus rinneadh monatóireacht ar athruithe ar a dtiúchan sa nós imeachta díleá in vitro. Cé go raibh tionchar diúltach ag nósanna imeachta díleácha gastrointestinal ar ábhar feanólach agus ar ghníomhaíochtaí frithdhiaibéiteacha agus frithocsaídeacha na n-sleachta, léirigh siad fós bithghníomhaíocht shuntasach. De réir na dtorthaí, braitheadh ​​sliocht C. salviifolius mar an gléasra is cumhachtaí i dtéarmaí ábhar feanólach agus gníomhaíochtaí frithocsaídeacha agus frith-diaibéitis. Mar fhocal scoir, tá ábhair shaibhir feanólacha ag páirteanna aeir ó speicis Cistus Tuircis agus gníomhaíochtaí frithocsaídeacha agus frith-diaibéitis. Cé gur úsáideadh an modh ionsamhlúcháin díleá in vitro chun bith-infhaighteacht a mheas, b’fhéidir nach ndéanfadh sé aithris iomlán ar na cosáin meitibileach atá ag tarlú san orgánach. Dá bhrí sin, tá gá le tuilleadh staidéir in vivo agus cliniciúla chun bith-infhaighteacht na gcomhdhúile feanólacha agus an méid a chuireann siad leis na héifeachtaí cógaseolaíochta tuairiscithe a mheas go mion.

Ranníocaíochtaí Údair:Coincheapú, YI, EC, EY; modheolaíocht, YI, SA, IK, CE anailís fhoirmiúil, YI, IK.-C., SA; imscrúdú, YI, IK.-C, SA; acmhainní, YI, IK.SA, EC agus EY; coimeád sonraí, YI, IK-C., SA; scríobh --YI, scríobh - athbhreithniú agus eagarthóireacht, YI, EC, EY; léirshamhlú, YI; maoirseacht, EC agus EY Tá an leagan foilsithe den lámhscríbhinn léite agus aontaithe ag gach údar.

Maoiniú:Ní bhfuair an taighde seo aon mhaoiniú seachtrach. Ráiteas an Bhoird Athbhreithnithe Institiúideach: Neamhbhainteach. Ráiteas um Toiliú Feasach: Neamhbhainteach.

Ráiteas Infhaighteachta Sonraí:Tá na sonraí a chuirtear i láthair sa staidéar seo ar fáil ach iad a iarraidh ón údar comhfhreagrach.

Coinbhleachtaí Leasa:Ní dhearbhaíonn na húdair aon choinbhleacht leasa.

Infhaighteacht Samplach:Níl samplaí de na comhdhúile ar fáil ó na húdair.

Baintear an t-alt seo as Molecules 2021, 26, 5322. https://doi.org/10.3390/molecules26175322 https://www.mdpi.com/journal/molecules