Sliocht Duille Olive (OLE) Lagaithe Aquaporin-2 de bharr Vasopressin-2 ag Gáinneáil Trí Ghníomhachtú an Ghabhdóra Braite Cailciam

Le haghaidh tuilleadh eolais. déan teagmháil le:tina.xiang@wecistanche.com

Méadaíonn Vasopressin(AVP) tréscaoilteacht uisce saduánachducht a bhailiú trí gháinneáil uisceporin-2 (AQP2) a rialú. Tá baint ag roinnt neamhoird, lena n-áirítear Hipirtheannas agus secretion hormóin antaibheathaigh míchuí (SIADH), le neamhghnáchaíochtaí in hoiméastáis uisce. Tá sé léirithe go bhfuil fítea-chomhábhair áirithe tairbheach do shláinte an duine. Anseo, rinneadh meastóireacht ar éifeachtaí Sliocht Olive Leaf (OLE) ag baint úsáide as samhlacha in vitro agus in vivo. Léirigh staidéir chomhfhócasacha go gcuireann OLE cosc ​​ar thrasuíomh AQP2 vasopressin-spreagtha chuig an scannán plasma i gcealla MCD4 agus francach.duáin. Laghdaíonn goir le OLE an méadú AVP-spleách ar an chomhéifeacht tréscaoilteachta uisce osmotic (Pf). Chun éifeachtóirí féideartha OLE a shoiléiriú, rinneadh measúnú ar chailciam intracellular. Méadaíonn OLE an cailciam infhéitheach trí ghníomhachtú an Ghabhdóra Braite Cailciam (CaSR). NPS2143 , inhibitor CaSR roghnach, deireadh le héifeacht coisctheach OLE ar thréscaoilteacht uisce AVP-spleách. Léirigh turgnaimh in vivo go méadaíonn cóireáil le OLE slonn an CaSR mRNA agus laghdaíonn sé AQP2 mRNA comhthreomhar le méadú ar an AQP2-dírithe ar miRNA-137. Le chéile, tugann na torthaí seo le fios go ndéanann OLE antagonizes gníomh vasopressin trí spreagadh an CaSR a thugann le fios go bhféadfadh an sliocht seo a bheith tairbheach chun neamhoird a mhaolú arb iad is sainairíonna comharthaí CaSR neamhghnácha agus a dhéanann difear d'ath-ionsú uisce duánach.

Baineadh úsáid go forleathan as duilleoga crann olóige mar leigheasanna traidisiúnta chun roinnt galair a leigheas, go háirithe i dtíortha na Meánmhara. Déantar duilleoga a ithe go coitianta i réim bia an duine mar sliocht nó mar phúdar chun insiltí nó tae luibhe a ullmhú. Léirigh anailís ar thréithriú ceimiceach go bhfuil roinnt comhdhúile bithghníomhacha i nduilleoga crann olóige a d'fhéadfadh éifeachtaí tairbhiúla a bheith acu i ngalarachtaí áirithe cosúil le siondróm meitibileach, dyslipidemia, agus Hipirtheannas. Fuarthas go bhfuil go leor polyphenols mar oleuropein, hydroxytyrosol, agus tyrosol saibhrithe i sliocht duille olóige glas (OLE)5, agus is eol go bhfuil baint acu le galair áirithe a chosc arb iad is sainairíonna iad strus ocsaídiúcháin. Mar sin, le blianta beaga anuas, tá méadú ag teacht ar an spéis in imscrúdú a dhéanamh ar na héifeachtaí tairbhiúla féideartha a bhaineann le sliocht duille olóige i measc eolaithe i réimsí éagsúla taighde. cineál Ca2 móide cainéil. Rud suimiúil, fuarthas amach go raibh éifeachtaí frith-hipirtheannas ag OLE ar Hipirtheannas géiniteach i bhfrancaigh hipirtheannas spontáineach (SHR), a bhaineann le feabhas a chur ar fheidhm soithíoch*. Tá ról tábhachtach ag ath-ionsú uisce iomarcach maidir le pataigineas brú fola méadaithe. In othair hypertensive, arna chóireáil le sliocht duille olóige, fuarthas laghdú suntasach ar roinnt fachtóirí athlastacha a bhaineann le laghdú ar bhrú fola. Ina theannta sin, is sainairíonna é coinneáil uisce iomarcach roinnt neamhoird cosúil le cioróis ae, cliseadh croí, agus secretion hormone antiduretic míchuí (SIADH). Tá hoiméastáis uisce an choirp rialaithe go docht ag an vasopressin hormone antidiuretic (AVP) a scaoiltear faoin riocht díhiodráitithe. Ceanglaíonn AVP a ghabhdóir gaolmhar V2R logánaithe ag an membrane basolateral deduánachpríomhchealla a ghníomhaíonn mar sin an conair comhartha cAMP as a dtagann trasshuíomh an uisceadáin-2(AQP2) ar a bhfuil feistéil ó linn incheallach go dtí an scannán plasma apical áit a dtarlaíonn ath-ionsú uisce. Ag leibhéal móilíneach, d'fhéadfadh roinnt fachtóirí cothromaíocht duánach uisce a mhodhnú, Laghdaigh leibhéal ardaithe de chailciam lonrúil an gháinneáil gearrthéarmach AOP2 atá ag brath ar vasopressin trí ghníomhachtú an ghabhdóra braite cailciam (CaSR)1,12. Ar an láimh eile, d'fhág gníomhachtú CaSR i gcealla epithelial tubular tubular duánach díbhásaithe go coinníollach, scoite amach ón bhfual daonna, méadú suntasach ar chailciam cítosólach agus laghdaigh sé go suntasach an méadú ar cAMP a d'eascair forskolin (FK), gníomhaí díreach adenylate cvclase3 Thairis sin. , i mbailiú duánach cealla MCD4, ag cur an cainéal uisce AOP2 in iúl go cobhsaí, mhaolaigh spreagadh an CaSR an t-ardú cAMP-spleách i bhfosfarylation AQP2 ag serine 256 atá ina imeacht ríthábhachtach sa easghluaiseacht comhartha aistrithe a ghníomhaigh vasopressin agus a mhéadaigh tréscaoilteacht uisce sa deireadh4 ,15 Ina theannta sin, iduánslisní ón duán luiche medulla istigh, ba chúis le gníomhachtú an CaSR leis an NPS-R568 cailciméadach méadú suntasach ar an AQP2-dírithe ar miRNA-137, rud a dhearbhaigh idirghníomhú daingean idir cosán comhartha CaSR agus AQP{ {4}}tréscaoilteacht uisce spleáchl.17.Sa staidéar reatha, rinneadh measúnú ar éifeachtaí sliocht na duille olóige, a fuarthas ó shaothrachán áitiúil Coratina, ar fheidhm AQP2 vasopressin-spreagtha i gcealla duánach MCD4 a bhailiú go seasta ag léiriú AOP2 agus i dDAVP francaigh cóireáilte instealladh leis an sliocht. Soláthraímid fianaise go gcuireann cóireáil OLE i gcoinne freagairt vasopressin i gcealla duánach, rud a d'fhéadfadh a éifeacht fualrach a mhíniú go páirteach. Is díol spéise é go bhfuil baint ag an éifeacht seo le gníomhachtú CaSR arna spreagadh ag OLE, receptor ar a dtugtar go bhfuil idirghníomhú diúltach aige leis an receptor vasopressin2.

Foghlaim níos mó éifeachtaí cistanche ar na duáin

Torthaí

Éifeachtaí OLE ar fheidhm AQP2 vasopressin-spreagtha i gcealla MCD4. Imscrúdú a dhéanamh ar an mbaint a d’fhéadfadh a bheith ag OLE ar fheidhm AQP2 atá ag brath ar vasopressin,duánachBaineadh úsáid as cealla MCD4 duchta a bhailiú, ag cur an receptor vasopressin 2(V2R) agus AQP2 daonna in iúl go seasta, mar mhúnla turgnamhach18. Léirigh staidéir chomhfhócais (Fíor 1A), i gcomparáid le cealla cóireáilte dDAVP, ina raibh staining AQP2 logánaithe don membrane plasma apical, gur chuir cóireáil le OLE cosc ​​​​ar logánú membrane AOP2 de bharr spreagadh le dDAVP. Ag teacht leis na breathnuithe seo, lagaigh cóireáil OLE an méadú de bharr dDAVP-spreagtha ar an bhfreagra ama osmotic (léirithe mar 1/t i bhFíor.1B)(OLE/dDAVP=88.70±1.86 faoin gcéad , n=292 cealla vs dDAVP=206.8±5.49 faoin gcéad ,n=186 cealla;p<0.001).altogether these="" findings="" suggested="" that="" treatment="" with="" ole="" reduced="" principal="" cell="" permeability="" by="" preventing="" aqp2="" translocation="" from="" an="" intracellular="" vesicle="" pool="" to="" the="" apical="" plasma="" membrane.="" vasopressin-induced="" aop2="" trafficking="" is="" controlled="" by="" intracellular="" camp="" which="" stimulated="" the="" camp-dependent="" kinase="" (pka)1.="" further,="" to="" evaluate="" the="" functionality="" of="" the="" v2r="" in="" the="" presence="" of="" ole="" in="" terms="" of="" camp="" production,="" permeable="" 8-br-camp="" was="" used="" as="" an="" external="" source="" of="" camp.="" treatment="" with="" 8-br-camp="" abolished="" the="" inhibitory="" effect="" elicited="" by="" ole="" on="" osmotic="" water="" permeability(ole/8-br-camp="188.7±3.56%,n=293" cells="" vs="" ole="85.93±2.27%," n="238"><0.001).therefore, to="" evaluate="" whether="" treatment="" with="" ole="" regulates="" aqp2="" trafficking="" by="" fine-tuning="" intracellular="" camp="" level,="" fluorescence="" resonance="" energy="" transfer(fret)technology="" was="" applied.="" compared="" to="" untreated="" cells="" (ctr),="" normalized="" netfret="" signals="" are="" reduced="" with="" ddavp="" stimulation(ddavp="77.86±3.13%," n="173" cells="" vs="" ctr="100.00±3.56%,n=276" cells;=""><0.00l; fig.2a),consistent="" with="" a="" significant="" increase="" of="" intracellular="" camp.="" conversely,="" treatment="" with="" ole="" prevented="" the="" ddavp="" dependent="" decrease="" of="" netfront="" signals="" consistent="" with="" a="" decrease="" of="" the="" vasopressin="" dependent="" camp="" release="" (ole/ddavp="92.97±3.46%," n="211" cells="" vs="" ddavp="77.86±3.13%," n="173" cells;=""><0.05; fig.2a).treatment="" with="" ole="" alone="" did="" not="" affect="" the="" intracellular="" cgmp="" level="" compared="" with="" cells="" left="" under="" basal="" conditions(ole="96.15±3.80%," n="184" cells="" vs="" ctr="100.00±3.56%,n=276" cells;=""><0.05).besides, western="" blotting="" studies(fig.2b)revealed="" that="" treatment="" with="" ole="" significantly="" reduced="" the="" ddavp="" induced="" increase="" of="" aqp2="" phosphorylation="" at="" serine="" 256(aqp2-ps256),="" indicating="" that="" aqp2="" phosphorylation="" and="" trafficking,="" in="" response="" to="" ole,="" are="" dependent="" on="" camp-pka="" function.="" the="" phosphorylation="" level="" of="" aqp2-ps256="" in="" response="" to="" ole="" was="" not="" statistically="" different="" from="" the="" control="" even="" though="" it="" tended="" to="" be="" reduced.="" to="" gain="" insight="" into="" the="" molecular="" signals="" underlying="" the="" action="" of="" ole,="" intracellular="" calcium="" dynamics="" were="" evaluated.="" mcd4="" cells="" endogenously="" express="" a="" functional="" calcium-sensing-receptor(casr)20,="" which="" plays="" an="" important="" role="" in="" controlling="" aqp2="" expression="" and="" trafficking'4.long="" term="" incubation="" with="" ole(0.1="" mg/ml)slightly="" increased="" the="" intracellular="" calcium="" level="" compared="" with="" untreated="" cells(fig.3;="" ole="209.0±13.45" nm,n="128" cells="" ys="" ctr="163.3±8.957" nm,n="97cells:"><0.05).co-incubation with="" ole(0.1="" mg/ml)="" and="" the="" selective="" nps2143(1um)antagonist="" of="" the="" casr="" abolished="" the="" ole="" induced="" intracellular="" calcium="" mobilization(ole/nps2143="168.8±11.43" nm,n="144" cells="" ys="" ole="209.0+13.45" nm.="" n="128"><0.05).to dissect="" further="" intracellular="" calcium="" signals="" in="" response="" to="" ole,="" functional="" experiments="" were="" also="" performed="" under="" acute="" stimulation="" with="" ole="" and="" nps2143.="" short-term="" treatment="" with="" ole="" (1="" mg/ml)="" evoked="" specific="" calcium="" oscillations(fig.4a)="" that="" were="" prevented="" when="" cells="" were="" pretreated="" with="" the="" selective="" casr="" inhibitor="" nps2143（10="" μm）.="" statistical="" analysis="" of="" the="" fluorescence="" responses（fig.="" 4b）revealed="" that="" incubation="" with="" ole="" increased="" cytosolic="" calcium="" by="" 97.06±6.93%(vs="" atp="" 100.00±2.28%).pretreatment="" with="" nps2143="" reduced="" the="" ole="" induced="" intracellular="" calcium="" increase(ole/nps2143="18.87±2.17%,n=59" cells="" vs="" ole="97.06±6.93%," n="50" cell;=""><0.001).to deeper="" investigate="" whether="" the="" effect="" of="" ole="" on="" avp-dependent="" water="" reabsorption="" occurred="" through="" the="" activation="" of="" the="" casr="" signaling,="" functional="" studies="" were="" performed="" as="" previously="" shown="" (fig.1b).="" interestingly,="" treatment="" with="" nps2143="" abolished="" the="" inhibitory="" effect="" of="" ole="" on="" avp-regulated="" osmotic="" water="" permeability="" (fig.5;="" ole/ddavp/nps2143="190.4±7.15%," n="191 cells" vs="" ole/ddavp="88.70±1.86%,n=292"><0.001), suggesting="" that="" treatment="" with="" ole="" attenuated="" the="" avp-dependent="" water="" reabsorption="" through="" the="" activation="" of="" the="" casr="" signaling.="" compared="" to="" untreated="" cells,="" treatment="" with="" only="" nps2143="" did="" not="" affect="" the="" osmotic="" water="" permeability="" (fig.="">

<0.001 vs="" ctr;=""><0.05 vs="" ddavp).="" (b)="" lysates="" from="" mcd4="" cells="" were="" subjected="" to="" immunoblotting="" using="" abs="" against="" aqp2-ps256="" and="" totalaqp2.="" densitometric="" analysis="" of="" aqp2-ps256="" bands="" normalized="" to="" total="" aqp2="" bands="" (total="" aqp2)="" is="" reported="" in="" the="" histogram.="" data="" are="" expressed="" as="" means±s.e.m=""><0.05 or=""><0.001 vs="" ctr;=""><0.001 vs="" ddavp)."="" alt="Figure 2. Efects of OLE on AQP2 phosphorylation and cAMP production in MCD4 cells. (A) Evaluation of cAMP production by FRET experiments in MCD4 cells transiently transfected with H96 as described in the " materials="" and="" methods"="" section.="" histogram="" reports="" netfret="" measured="" in="" cells="" under="" basal="" conditions,="" treated="" with="" ddavp="" (100 nm="" for="" 30 min),="" ole="" (0.1 mg/ml="" o/n),="" or="" co-treated="" with="" ole="" and="" ddavp.="" te="" treatment="" with="" ddavp="" displayed="" a="" signifcantly="" higher="" camp="" production="" depicted="" as="" a="" reduced="" netfret="" signal.="" data="" are="" shown="" as="" single="" values="" in="" a="" scatter="" plot="" reporting="" means±s.e.m=""><0.001 vs="" ctr;=""><0.05 vs="" ddavp).="" (b)="" lysates="" from="" mcd4="" cells="" were="" subjected="" to="" immunoblotting="" using="" abs="" against="" aqp2-ps256="" and="" totalaqp2.="" densitometric="" analysis="" of="" aqp2-ps256="" bands="" normalized="" to="" total="" aqp2="" bands="" (total="" aqp2)="" is="" reported="" in="" the="" histogram.="" data="" are="" expressed="" as="" means±s.e.m=""><0.05 or=""><0.001 vs="" ctr;=""><0.001 vs="" ddavp)."="" width="480" height="320" border="0" vspace="0" style="width: 480px; height: 320px;">

Éifeachtaí OLE ar duáin na bhfrancach a ionstealladh le OLE.

Chun imscrúdú breise a dhéanamh ar ghníomhartha OLE, rinneadh staidéir in vivo. Go sonrach, cuireadh OLE (250 mg/kg/lá) ar fhrancaigh uair amháin sa lá ar feadh trí lá. De rogha air sin, rinneadh comhchóireáil ar fhrancaigh le OLE, ar feadh 3 lá, agus dDAVP, ar feadh 30 nóim. Léirigh meastóireacht ar mRNA CaSR a bhí scoite ó dhucht bailithe duánach na bhfrancach agus a próiseáladh le haghaidh PCR fíor-ama (Fíor.6) méadú suntasach ar mRNA CaSR in OLE(OLE=1.87±0.29, n{{{{{{}} 10}} francaigh vs CTR=1.02±0.17, n=5 francaigh; lch<0.05) and="" ole/ddavp(ole/ddavp="2.77±0.25," n="5" rats="" vs="" ctr="1.02±0.17,n=5" rats="" and="" ddavp="1.08±0.11," n="5" rats;=""><0.001)injected rats="" compared="" with="" control="" and="" ddavp="" animals,="" casr="" signaling="" can="" regulate="" the="" expression="" level="" of="" selective="" mirnas,="" which="" downregulated="" the="" expression="" level="" of="" aqp216.based="" on="" these="" findings,="" and="" considering="" that="" treatment="" with="" ole="" attenuated="" aqp2="" function,="" the="" level="" of="" mir-137,="" a="" known="" aqp2-targeting="" mir="" in="" the="" renal="" collecting="" duct,="" was="" evaluated.="" compared="" to="" control="" rats="" (fig.7),="" the="" level="" of="" mir-137="" in="" the="" renal="" collecting="" ducts="" of="" ole(ole="4.18.10-8±1.07.10-8ng,n=5" rats="" vs="" ctr="1.35.10-8±2.89.10-ng," n="5" rats;=""><0.05)and ole/ddavp="" rats="" was="" increased="" indicating="" that="" treatment="" with="" ole="" upregulates="" the="" casr="" signaling="" and="" the="" expression="" level="" of="" the="" mir-137(ole/ddavp="4.38.10-8±47.01·10-9ng," n="5" rats="" vs="" ctr="1.35.10-8±2.89.10-ng," n="5" rats;=""><0.01 and="" vs="" ddavp="2.1610-8±3.52.10-°ng," n="5"><0.05). to="" verify="" whether="" the="" increase="" of="" mir-137="" affected="" the="" expression="" level="" of="" aqp2,="" renal="" samples="" were="" processed="" for="" real-time="" pcr.="" data(fig.8a)revealed="" that="" the="" expression="" levels="" of="" aqp2="" mrna="" were="" lower="" in="" ole(ole="0.36±0.06,n=5" rats="" vs="" ctr="1.00±0.08," n="5"><0.01)and ole/ddavp(ole/ddavp="0.65±0.12," n="5" rats="" vs="" ctr="1.00±0.08," n="5" rats="" and="" ddavp="1.03±0.16,n=5" rats;=""><0.05)renal samples="" compared="" with="" specimens="" obtained="" from="" control="" animals.="" besides,="" western="" blotting="" analysis(fig.="" 8b)showed="" that="" treatment="" with="" ole="" reduced="" the="" abundance="" of="" aop2="" regardless="" of="" ddavp="" stimulation(ole/ddavp="0.62±0.13,n=5" rats="" vs="" ddavp="1.04±0.16,n=5"><0.05)indicating that="" the="" ole-induced="" reduction="" of="" aqp2="" mrna="" expression="" level="" coincided="" with="" a="" decrease="" of="" aqp2="" protein="" content.="" to="" evaluate="" the="" effect="" of="" ole="" on="" aqp2="" phosphorylation="" and="" trafficking="" in="">duán, rinneadh anailís ar shúchán an iarthair, agus staidéir chomhfhócasach (Fíor.9).I bhfrancaigh instealladh OLE/dDAVP, laghdaíodh fosfarylation AQP2 ag serine 256 go suntasach i gcomparáid le fíocháin duánach ainmhithe cóireáilte dDAVP(OLE/dDAVP=0. 77±0.16, n=5 francaigh vs dDAVP=2.16±0.25,n=5 francaigh; lch<0.001,fig.9a),thereby confirming="" the="" in="" vitro="" findings(fig.2b).="" besides,="" confocal="" studies="" (fig.9b)="" of="" kidney="" sections="" revealed="" that="" exposure="" to="" ole="" prevented="" the="" aop2="" mem-brane="" localization="" that="" instead="" was="" observed="" in="" ddavp="" treated="">

Plé

Is teachtaire tábhachtach intracellular é cailciam a mhodhnaíonn raidhse feidhmeanna ceallacha2. D’fhéadfadh roinnt galair a bheith mar thoradh ar chomharthaíocht neamhghnácha cailciam lena n-áirítear cliseadh croí, ailse agus Hipirtheannas23. Tá sé cruthaithe go n-éiríonn le rialú sonrach ar léiriú agus ar ghníomhaíocht próitéiní a rialaíonn comharthaí cailciam intracellular iomadúla aghaidh a thabhairt ar neamhoird iomadúla agus dá bhrí sin tá sé tarraingteach d’fhorbairt drugaí. Soláthraíonn an staidéar seo léargais nua ar mheicníocht gníomhaíochta OLE trína chumas a thaispeáint chun comharthaíocht chailciam intracellular a mhodhnú trí spreagadh a thabhairt don CaSR a bhfuil baint aige le mionchoigeartú a dhéanamh ar gháinneáil agus ar léiriú AQP2 de bharr vasopressin. Faoi choinníollacha fiseolaíocha, tá ról tábhachtach ag AQP2 maidir le hoiméastáis uisce coirp a rialú25. Mar thoradh ar spreagadh an innealra intracellular, as a dtagann logánú AQP2 ag an membrane plasma apical, tá coinneáil uisce neamhghnácha agus hyponatremia iarmhartach mar atá i siondróm rúndachta hormóin antidiuretic míchuí (SIADH), cirrhosis ae, agus cliseadh croí plódaithe -. samhail de SIADH, a bhaineann le galar duáin polycystic 1 haploinsufficiency, laghdaíodh an leibhéal cailciam intracellular basal go suntasach i gcomparáid leis an leibhéal a thomhas i dhuchtanna bhailiú lucha cineál fiáin. Rinne cailciam intracellular íseal gníomhaíocht einsímí áirithe a íosrialáil lena n-áirítear an phosphatase próitéin PP2A a d'eascair upregulation AOP2 phosphorylation ag serine 2561. I gcodarsnacht leis sin. Mhéadaigh gníomhachtú an CaSR leis an NPS-R568 cailciméadach an tiúchan cailciam intracellular agus laghdaigh sé an leibhéal cAMP i gcealla easnamhacha PKD1. Rud atá tábhachtach, is féidir le cailciam cíteabólach an cioclase3 adenylated cailciam-dochorraithe a íosrialú, rud a dhéanann mionchoigeartú ar an leibhéal infhéitheach de cAMP.I gcealla MCD4, go deimhin, laghdaigh spreagadh an CaSR le NPS-R568 AQP{2-pS256 trí chosc ar an adenylate. cyclase4.Sa staidéar seo, chuir cóireáil le OLE cosc ​​ar mhéadú vasopressin-spleách ar an cAMP agus AOP2-pS256, b'fhéidir tánaisteach le méadú ar an tiúchan cailciam intracellular. Is díol suntais é gur chuir nochtadh d’fhoinse sheachtrach cAMP úsáid as 8-Br-cAMP tréscaoilteach i ngleic go mór le héifeacht coisctheach OLE ar an gcosán V2R.

D'fhéadfadh bás cille agus apoptosis a bheith mar thoradh ar leibhéal ardaithe de chailciam citosólach. Mar sin féin, chothaigh méadú leanúnach ar chailciam incheallach ó 250 nM go dtí níos mó ná 600 nM maireachtáil néarónach4.I gcealla MCD4, ní léirítear cóireáil le OLE ag 0.1 mg/ml éifeacht cíteatocsaineach. Ag an tiúchan seo, mhéadaigh OLE (0.1 mg/ml) an leibhéal cailciam intracellular beagán. Nocht íomháú cailciam go raibh spreagadh géarmhíochaine le OLE ina chúis le méadú neamhbhuan de chailciam intracellular trí ghníomhachtú an CaSR a chuirtear deireadh leis nuair a bhí cealla preincubated leis an antagonist roghnach CaSR NPS2143, I gcealla tubule proximal duánach, gníomhachtú allosteric an CaSR le I-ornithine. laghdaigh an táirgeadh ROS, rud a laghdaigh an strus ocsaídiúcháin mitochondrial ba chúis leis apoptosis cille356. Thairis sin, léirigh ár staidéar roimhe seo gur laghdaigh léiriú na n-athraithe gnóthachan-feidhme den CaSR scaoileadh ROS agus S-glutathionylation de AQP237. Laghdaigh gor le OLE giniúint ROS i gcealla MCD435 rud a léirigh a chumas frithocsaídeach. Mar sin féin, níl sé soiléir faoi láthair an gcuireann OLE isteach ar AOP2-S-glutathionylation. Léirigh staidéir iomadúla go bhféadfadh róil chosanta a bheith ag OLE nó oleuropein, arb é príomh-chomhábhar OLE é, trí chosc a chur ar bhásanna cille,39 Mar sin féin, tá cur síos ar éifeachtaí dáileog-spleách i bhfrancaigh a fhaigheann OLE. Fuarthas freagraí tairbhiúla ag dáileoga 250 agus 500 mg/kg. I gcodarsnacht leis sin, ag tiúchan níos airde, d'fhéadfadh éifeachtaí díobhálacha a bheith ag cóireáil le OLE, b'fhéidir mar gheall ar ghníomhartha pro-oxidant roinnt fíteas-chomhábhair. Sa staidéar seo, instealladh francaigh le OLE ag dáileog de 250 mg / kg ar feadh trí lá a léiríonn upregulation CaSR. Méadaítear leibhéal léirithe an CaSR ag comhdhúile áirithe a fheidhmíonn mar ghníomhaithe allosteric an receptor ,. Laghdaigh Calcimimetics, go deimhin, na calcifications soithíoch trí mhéadú a dhéanamh ar bhithshintéis an CaSR i gcealla matán mín soithíoch daonna0. Sa chomórtas seo, ní féidir an fhéidearthacht go bhféadfadh comhdhúile áirithe in OLE feidhmiú mar mhodhnóirí allosteric an CaSR a eisiamh. Ar an láimh eile, d'fhéadfadh scaoileadh IL-6 a bheith mar thoradh ar spreagadh le vasopressin a d'fhéadfadh cur le leibhéal léirithe an CaSR42 a mhéadú.

Sna duáin, tá baint ag spreagadh na comharthaíochta CaSR le laghdú ar léiriú AQP2 b'fhéidir tríd an miR-137 generation.miRNAs modhnóirí posttrascríobhtha ríthábhachtacha. Tá cur síos déanta freisin ar roinnt miRNAs vasopressin-spleách atá dírithe ar shloinneadh AQP243. Laghdaigh aistriú le miR-32 agus miR-137 go mór an leibhéal slonn AOP2 i gcealla mpkCCDc14. Suimiúil go leor, is féidir le OLE comharthaí athlastacha a mhaolú agus éifeachtaí cosanta a imirt trí leibhéal slonn roinnt miRNAs a mhodhnú." Go háirithe, i gcealla glioblastoma multiforme, chuir OLE léiriú miRNA éagsúla chun cinn lena n-áirítear miR-13745 a bhfuil baint aige le dírialáil na an cosán comharthaíochta Akt/mTOR 46. Díol suntais, cuireann cóireáil le oleuropein cosc ​​ar chomharthaíocht Akt/mTOR trí ghníomhachtú CAMK agus AMPK spreagtha le cailciam. Ag teacht leis na torthaí seo, méadaíonn goir le OLE cailciam cítosólach, laghdaítear gníomhaíocht PKA, agus laghdaítear méid na gcistin i múnla cultúir 3D48. Tugann na torthaí seo le chéile le fios go bhféadfadh OLE a bheith úsáideach chun neamhoird a chóireáil arb iad is sainairíonna iad dírialú dinimic chailciam intracellular a bhaineann le íosrialáil comharthaíochta CaSR.

Is éard atá i sliocht duille olóige roinnt comhpháirteanna bithghníomhacha, lena n-áirítear polyphenols, snáithíní, agus mianraí49. I láthair na huaire, níl sé soiléir an bhféadfadh cumaisc amháin nó teaglaim sineirgí de fítea-chomhábhair in OLE a bheith tairbheach chun freagraí intracellular a mhodhnú. Cuireadh an sliocht a úsáideadh sa staidéar seo i bhfeidhm mar bhreiseán bia féideartha agus mar sin tá sé tábhachtach tionchar fiseolaíoch an tsleachta féin a shainiú ag cur san áireamh go bhféadfadh roinnt feanóil, lena n-áirítear hiodrocsaityrosol, a bheith scagtha ag an duán agus a aisghabháil sa fual50. Soláthróidh staidéir bhreise éifeachtúlacht na gcomhpháirteanna sonracha a d'fhéadfadh comharthaíocht cailciam intracellular a rialáil go gníomhach tríd an CaSR. Mar fhocal scoir, cuireann an staidéar seo fianaise ar fáil go bhféadfaí OLE a mheas mar aidiúntóir ionchasach nua a bheadh ​​úsáideach chun neamhoird a mhaolú arb iad is sainairíonna iad laghdú ar léiriú CaSR chomh maith le comharthaíocht agus a dhéanann difear do thréscaoilteacht uisce duánach.

abhair agus modhanna

Ceimiceáin agus antasubstaintí.Ceannaíodh gach ceimiceán agus antaibheathach ó Merck (Merck KGaA, Darmstadt, an Ghearmáin). Ceannaíodh Calcein-AM, Fura-2-AM, meáin shaothrúcháin na gceall, séiream bó féatais (FBS), agus Foshraitheanna Ceimiceánacha Super Signal West Pico ó Thermo Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM). Aquaporin{ {2}}Aimsíodh (AQP2) ag baint úsáide as antasubstaintí sonracha (C-eireaball Ab) a ardaíodh i gcoinne peptide sintéiseach a fhreagraíonn do na 15 aimínaigéad C-críochfort deiridh de AQP2 daonna!. Thug an tOllamh Peter Deen antasubstaintí AQP2-pS256 go cineálta. Fuarthas antasubstaintí tánaisteacha gabhar frith-choine horseradish sárocsaidáis-chúpláilte ó Merck (Merck KGaA, Darmstadt, an Ghearmáin). Ceannaíodh antashubstaint thánaisteach gabhar-fhrith-choine in éineacht le Alexa-488 ó Thermo Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM).

Táirgeadh sleachta saibhir feanóil agus tréithriú ceimiceach.Rinneadh táirgeadh sliocht feanólach-saibhir ó duilleoga olóige mar a tuairiscíodh i Ranieri et al.35. Tar éis muilleoireachta le cumascóir (Waring-Commercial, Torrington, CT, SAM), cuireadh uisce ddH2O leis (cóimheas 1/20, w/y) agus ansin cuireadh faoi ultrafhuaime é (CEIA, Viciomaggio, an Iodáil) trí huaire. , ar feadh 30 nóiméad ag 35±5 céim gach uair. Ar deireadh, rinneadh na sleachta a scagadh trí pháipéar scagtha, a lyophilized, agus a stóráil ag -20 céim C. Rinneadh na sleachta a fuarthas a scagadh le scagairí níolón de 0.45 μm (Merck KGaA, Darmstadt, an Ghearmáin) agus úsáidtear iad le haghaidh tréithriú ceimiceach. Rinneadh an t-ábhar feanól iomlán, an ghníomhaíocht frithocsaídeach, agus an t-aitheantas aonair comhdhúile feanólacha de réir Difonzo et al.. Léirigh an OLE ábhar polyphenols, arna chinneadh ag Folin-Ciocalteu, comhionann le 195 mg. coibhéisí aigéid gháiligh (GAE) agus gníomhaíocht frithocsaídeach, arna chinneadh ag ABTS (2,2'-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-salann diamóiniam aigéad sulfónach), arb ionann é agus 750 μmol TE (coibhéisí Trolox) .

Cultúir agus cóireálacha cille.Ducht bailithe cortical lucha Baineadh úsáid as cealla MCD4, a léirigh AQP2 daonna ar bhealach cobhsaí agus an V2R-Rluc chimeric mar mhúnla turgnamhach18. Fásadh cealla i meascán 1:1 de mheán Eagle de réir modhnaithe Dalbec-cos agus F-12 arna fhorlíonadh le séiream bó féatais 5 faoin gcéad (y/y). 1 faoin gcéad (y/y) L-glutamine agus 1 faoin gcéad peinicillin / streptomycin, 5 μM dexamethasone, 4 {{ 24}} 0 ug/ml G418 (le haghaidh friotaíochta AQP2) agus 1 ug/ml puromycin (le haghaidh friotaíochta V2R-Rluc) , in atmaisféar humidified de 5 faoin gcéad CO, ag 37 céim . Fágadh cealla MCD4 faoi riocht basal (CTR) nó cóireáilte go fadtéarmach le OLE ag 0.1 mg/ml O/N, dDAVP ag 100 nM ar feadh 30 nóiméad, nó comhchóireáladh iad le OLE agus dDAVP nó NPS2143 ag l μM O/N . Mar mhalairt air sin, nochtaíodh cealla do 8-Br-cAMP ag 500 μM ar feadh 45 nóiméad, rinneadh turgnaimh ghearrthéarmacha le OLE ag 1 mg/ml ar feadh 5 nóiméad agus NPS2143 ag 10 μM ar feadh 15 nóiméad. Rinneadh turgnaimh 3-5 amanna neamhspleácha ag baint úsáide as cealla ó sleachta éagsúla.

Samhail agus cóireálacha ainmhithe.Baineadh na nósanna imeachta go léir i gcrích i gcomhaontú le Treoirlínte Náisiúnta na Danmhairge maidir le cúram agus láimhseáil ainmhithe turgnamhacha agus le treoirlínte foilsithe na nInstitiúidí Náisiúnta Sláinte, D'fhaomh an Institiúid um Leigheas Cliniciúil na prótacail. Ollscoil Aarhus, de réir na gceadúnas maidir le húsáid ainmhithe turgnamhacha arna n-eisiúint ag Aireacht Dlí agus Cirt na Danmhairge (Uimhir cheadú 2015-15-0201-00658). Rinneadh staidéir ar fhrancaigh Wistar fireann fásta a raibh meáchan tosaigh de 200-225 g acu. Coinníodh ainmhithe ar ghnáth-aiste bia creimire (Altromin, Lage, an Ghearmáin) agus bhí rochtain saor in aisce acu ar uisce sconna. Le linn na dturgnaimh, bhí francaigh lonnaithe i ngrúpaí de dhá in aghaidh an cage, le timthriall éadrom-dorcha 12:12 h, teocht 21 ± 2 céim C, agus taise 55 ± 2 faoin gcéad . Cóireáladh cúig fhrancach le hinstealladh subcutaneous de 1 ng dDAVP (Sigma-Aldrich, Glostrup, an Danmhairg) i 200 ul salanda/ainmhí, agus d'fheidhmigh cúig francach cóireáilte le feithiclí mar rialuithe. Tar éis 30 min, maraíodh na francaigh, agus próiseáladh na duáin mar a thuairiscítear thíos.

Cealla agus lísáití IMCD.Fásadh cealla ar {{0}} miasa mm agus cuireadh ar fionraí arís iad i maolán ina raibh mannitol 220 mM, 70 siúcrós mM, {{1{0}}. 5 M EGTA pH 8.0,0.5 M EDTA pH 8.0,1 M Tris-HCl pH 7.4 i láthair próitéisí (1 mM PMSF, 2 mg/ml leupeptin, agus 2 mg/ml pepstatin A) agus fosfáití (10 mM NaF agus Coscairí ortavanadáit sóidiam 1 mM. Mar mhalairt air sin, ullmhaíodh agus cothromaíodh rannóga duán de thart ar 0.5 mm ar feadh 10 nóiméad i maolán ina raibh 1i8 mM NaCl, 16 mM Hepes, 17 mM Na-Hepes, glúcóis 14 mM, 3.2 mM KCl, 2.5 mM CaCl2,1.8 mM MgSO4, agus 1.8 mM KH2PO4 (pH7.4).Mionadh papilla duánach le siosúr sa mhaolán céanna i láthair próitéas (1 mM PMSF, 2 mg/mlleupeptin, agus 2mg/mlpepstatin A) agus fosfáití (10 mM NaF agus 1 mM sóidiam Ortavanadáit) coscairí.Tar éis sonica-tion (60 kHz ar feadh 5 s), lártheifneoiríodh lysates ag 12,000×g ar feadh 10 nóim. Bailíodh agus úsáideadh na sútháin le haghaidh staidéir imdhíonbhloit'8.

Micreascópacht chomhfhócasach.Rinneadh staidéir chomhfhócasacha mar a thuairiscítear roimhe seo1. Go hachomair, fásadh cealla ar Ionsáigh PET cultúr cille agus cóireáilte mar a thuairiscítear thuas. De rogha air sin, rinneadh na hailt duáin a fuarthas ó rialú, OLE, dDAVP, agus OLE le francaigh cóireáilte dDAVP faoi thurgnaimh imdhíonfhluaraiseachta mar a thuairiscítear roimhe seo. Fuarthas íomhánna le micreascóp fluaraiseachta scanadh léasair comhfhócasach Leica TCS SP2 (Leica Microsystems, Heerbrugg, an Eilvéis). Leictreafóiréis glóthach agus imdhíonadh. Rinneadh próitéiní a dheighilt ar 12 faoin gcéad glóthacha polyacrylamide saor ó stain (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, U.S.A.) faoi choinníollacha laghdaithe mar a cuireadh síos orthu roimhe seo=5,52. Go hachomair, aistríodh bannaí próitéine go seicní Immobilon-P (Merck KGaA, Darmstadt, an Ghearmáin) agus rinneadh imdhíonadh orthu ag baint úsáide as antasubstaintí frith-AQP2 (Pre-C-tail Ab) agus frith-AQP{2-pS256. Fuarthas comharthaí imdhíonghníomhacha ag baint úsáide as Foshraitheanna Chemiluminescent Super Signal West Pico le Córas Chemidoc (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA). Hercules, CA, SAM).Rinneadh anailís dhensitometry ag baint úsáide as ImageLab (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, SAM) agus rinneadh anailís air ag baint úsáide as GraphPad Prism (GraphPad Software, San Diego, CA, SAM).

Measúnacht tréscaoilteachta uisce.Tomhaiseadh tréscaoilteacht uisce osmotic mar a thuairiscítear roimhe seo43. Go hachomair, fásadh cealla MCD4 ar dhuillíní gloine 40-mm. Tar éis cóireálacha, lódaíodh cealla le 10 μM Calcein-AM tréscaoilteach membrane ar feadh 45 nóiméad ag 37 céim ,5 faoin gcéad CO, i DMEM/F-12. Suiteáladh duillí clúdaigh i gcuasán perfusion (FCS2 Closed Chamber System, BIOPTECHS, Butler, USA). Rinneadh tomhais ag baint úsáide as micreascóp inbhéartaithe TE2000-S (micreascóp Nikon Eclipse, Tóiceo, an tSeapáin) atá feistithe le haghaidh tomhais fhluaraiseachta aonchealla agus anailís íomháithe. Bhí sceitimíní ar na samplaí luchtaithe Calcein-AM ag 490 nm. Tomhais fhluaraiseachta, ag leanúint isosmotic (140 mM NaCl.5 mM KCl, 1 mM MgCl..1 mM CaCl., 10 mM aigéad sulfonic Hepes, 5 mM Glúcóis,pH7.4) nó hipearosmotic (tuaslagán isosmotic curtha leis le 135 mM Mannitol) tuaslagáin . Baineadh úsáid as bogearraí Metafluor (Feistí Móilíneach, MDS Analytical Technologies, Toronto, Ceanada). Taifeadadh sonraí fluaraiseachta cúrsa ama tar éis cealla perfusing le réitigh iso-agus hyperosmotic. Tomhaiseadh cúrsa ama an chrapadh cille mar an tairiseach ama (Ki, arna shloinneadh mar 1/r, soic), paraiméadar a chomhghaolú leis an tréscaoilteacht uisce, a fhaightear trí shonraí a fheistiú le feidhm easpónantúil arna anailísiú ag baint úsáide as GraphPad Prism (GraphPad Software, San Diego). , CA, SAM).

Tomhais aistrithe fuinnimh athshondais fhluaraiseachta.Chun athruithe cAMP intracellular a mheas, cuireadh teicneolaíocht aistrithe fuinnimh athshondais fhluaraiseachta (FRET) i bhfeidhm. I gcás turgnaimh FRET, aistríodh cealla le plasmid ag ionchódú an braiteoir H96 ina raibh an móitíf comhaontaithe cAMP-ceangailteach de EPAC1 leabaithe idir an próitéin fluaraiseacha cian (CFP) agus cp173Venus-Venus mar a léiríodh roimhe seo32.33.54. Bronntanas ón Dr.K. Jalink. Rinneadh léirshamhlú ar chealla ECFP-agus/nó EYFP-léirithe agus braite FRET trí úsáid a bhaint as micreascóp TE2000-S inbhéartaithe (micreascóp Nikon Eclipse, Tóiceo, an tSeapáin). Ceartaíodh agus rinneadh anailís ar gach íomhá mar a léiríodh roimhe seo55.

Tomhais cailciam intracellular. Rinneadh tomhais chailciam intracellular mar a léiríodh roimhe seo56. Go hachomair, lódaíodh cealla MCD4 le 4 μM Fura-2 AM ar feadh 15 nóiméad ag 37 céim i DMEM/F-12. Baineadh úsáid as tuaslagán Ringer chun cealla a shruthlú le linn an turgnaimh ina raibh 140 mM NaCl, 5 mM KCl 1 mM MgCl, 10 mM HEPES, 5 mM Glúcóis, 1.8 mM CaCl, pH 7.4. I dtomhais fhluaraiseachta, cuireadh na clúdaigh chlúdaigh le cealla ró-ualaithe i seomra perfusion (Córas Seomra Dúnta FCS2. BIOPTECHS. Butler, SAM). Rinneadh na tomhais trí úsáid a bhaint as micreascóp inbhéartaithe TE{2000-S (micreascóp Nikon Eclipse, Tóiceo. an tSeapáin), Breacáladh agus ríomhadh an cóimheas idir na déineanna fluaraiseachta ag 340 agus 380 nm mar an t-athrú ar fhluaraiseacht. Go háirithe, rinneadh comparáid idir spreagadh le OLE (1 mg/ml) nó NPS2143 (10 μM) sa chineál cille céanna leo siúd a fuarthas tar éis spreagtha le dáileog uasta den agónóir cailciam-idirghabhála ATP （100 μM） a úsáideadh mar rialú inmheánach ( 100 faoin gcéad ) .

Tomhaiseadh leibhéal cailciam intracellular ag staid sheasta agus calabraithe mar a thuairiscigh Grynkiewicz57. Úsáideadh OLE agus NPS2143 go fadtéarmach ag 0.1 mg/ml agus l uM, faoi seach, agus calabraíodh gach sampla trí ionomycin 5 μM a chur leis i láthair 1 mM EGTA (Rm.) agus 5 ina dhiaidh sin Ionomycin μM i CaCl 5 mM, (RMA).

Anailís PCR fíor-ama ar AQP2 agus CaSR mRNA i bhfrancaigh rialaithe agus cóireáilte.Rinneadh turgnaimh PCR fíor-ama chun léiriú coibhneasta mRNA a thomhas sa ducht bailithe medulla istigh (IMCD) scoite amach ó smacht agus papillae duáin francach cóireáilte. Rinneadh slisní duán de thart ar 0.5 mm agus rinneadh iad a chothromú ar feadh 10 nóiméad i maolán ina raibh 118 mM NaCl, 16 mM HEPES, 17 mM Na-Hepes, glúcóis 14 mM, 3.2 mM KCl, 2.5 mM CaCl2,1.8 mM MgSO4, agus 1.8 mM KH2PO4 (pH 7.4). Rinneadh an papilla duánach a leithlisiú faoi steiréamaicreascóp. Mionfheistíodh eiseamail ó fhrancaigh rialaithe agus cóireáilte ansin le siosúr díreach i Trizol (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM). Rinneadh tras-scríobh droim ar ais ar 2.5 ugs den RNA iomlán ag baint úsáide as SuperScriptVilo Master Mix (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, Stáit Aontaithe Mheiriceá), i gcomhréir le moltaí an mhonaróra (25C ar feadh 10 nóiméad; 42C ar feadh 60 nóiméad; 85C ar feadh 5 nóiméad). Rinneadh aimpliú PCR fíor-ama trí úsáid a bhaint as TagMan Fast Advanced Master Mix le CaSR, AOP2, agus measúnachtaí GAPDH (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM) i gCóras PCR Fíor-Ama StepOne (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). ), ag socrú na gcoinníollacha rothaíochta teirmeacha mar atá sonraithe ag an monaróir (95 céim C ar feadh 20 s; 40 timthriall faoi seach ag 95·C ar feadh 1 s agus 60 céim C ar feadh 20 s). Léiríodh na torthaí mar 2- luachanna (cainníochtú coibhneasta) le △ACt=(Ct target-Ct GAPDH) cóireáilte-(Ct target-Ct GAPDH)Sham1.

meastóireacht miRNA-137 i bhfrancaigh rialaithe agus cóireáilte.Rinneadh measúnú ar inneachar miRNA{{0}} atá i gceannas agus ducht bailithe medulla istigh francach cóireáilte ag baint úsáide as TagMan Advanced miRNA Assays (has-miR-137; Assay ID; 477904 mir; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA .US.A), rud a chuir ar chumas fógra an-íogair agus sonrach maidir le miRNA aibí trí úsáid a bhaint as PCR cainníochtúil. Rinneadh slisní duán de thart ar 0.5 mm agus rinneadh iad a chothromú ar feadh 10 nóiméad i maolán ina raibh 118 mM NaCl, 16 mM HEPES, 17 mM Na-Hepes, glúcóis 14 mM, 3.2 mM KCl, 2.5 mM CaCl2,1.8 mM MgSO4, agus 1.8 mM KH2PO4(pH7.4).Scrúdaíodh an papilla duánach faoi steiréascóp. Mionfheoilíodh eiseamail ó fhrancaigh rialaithe agus cóireáilte ansin le siosúr go díreach i Trizol (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, SAM) chun RNA iomlán a bhaint. TaqMan Advanced miRNA cDNA Sintéise Kit （Catalog n²∶A25576; Baineadh úsáid as Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA） chun sintéis cDNA a fháil, de réir an phrótacail a chuir an monaróir (Poly(A) imoibriú fuílligh; imoibriú ligation; imoibriú trascríobh droim ar ais; imoibriú miR-Amp). Rinne Thermo Fisher Scientific an RNA sintéiseach(UUAUUGCUUAAGAAUACGCGUAG) le 59-fosfar a shintéisiú agus úsáideadh é chun cuar calabraithe a dhéanamh chun luachanna samplacha miRNA a idirshuíomh agus chun meastóireacht bheacht (i naneagraim) a fháil ar ábhar miR-137 i samplaí16, trí úsáid a bhaint as GraphPad Prism (GraphPad Software, San Diego, CA, USA).

Anailís staitistiúil.Tuairiscítear na luachanna go léir mar acmhainn ±SEM Rinneadh anailís staitistiúil ag ANOVA aontreo agus ansin tástáil ilchomparáide Newman-Keuls le *p<0.05 considered="" statistically="" different="">

Ráitis, formheas eiticiúil, agus toiliú chun páirt a ghlacadh.Rinneadh staidéir ar ainmhithe i gcomhaontú le Treoirlínte Náisiúnta na Danmhairge maidir le cúram agus láimhseáil ainmhithe turgnamhacha agus le treoirlínte foilsithe na nInstitiúidí Náisiúnta Sláinte. D'fhormheas coiste eitice cúraim ainmhithe Institiúid an Leighis Chliniciúil, Ollscoil Aarhus na prótacail staidéir, de réir na gceadúnas maidir le húsáid ainmhithe turgnamhacha arna n-eisiúint ag Aireacht Dlí agus Cirt na Danmhairge (Uimhir cheadaithe 2015-15-0201-00658). Deimhníonn na húdair go ndearnadh na modhanna go léir de réir treoirlínte agus rialacháin ábhartha. Ina theannta sin, deimhníonn na húdair go ndearnadh an staidéar i gcomhréir leis na treoirlínte ARRIVE.

Tagairtí

1. El, SN & Karakaya, S. Fágann crann olóige (Olea europaea) éifeachtaí tairbhiúla féideartha ar shláinte an duine. Nutr. Ath. 67, 632–638.

2. Javadi, H., Yaghoobzadeh, H., Esfahani, Z., Reza Memarzadeh, M. & Mehdi Mirhashemi, S. Éifeachtaí sliocht duille olóige ar fhreagairt meitibileach, feidhmeanna ae agus duáin agus bithmharcóirí athlastacha in othair hipirtheannas. PJBS 22, 342–348.

3. Saibandith, B., Spencer, JPE, Rowland, IR & Commane, polyphenols DM Olive, agus an siondróm meitibileach. Móilíní

4. Cherif, S. et al. Triail chliniciúil ar sliocht Olea toirtmheasctha i gcóireáil Hipirtheannas Artaireach riachtanach. J. Pharm. Bheilg. 51, 69–71 (1996).

5. Difonzo, GRA et al. Fágann sleachta glasa as cultivar olóige cortina tréithriú frithocsaídeach agus gníomhaíocht bhitheolaíoch. J. Feidhm. Bianna 31, 8.

6. Herrero, M. et al. Féidearthachtaí nua chun seachtháirgí ola olóige a luacháil. J. Chromatogr. 1218, 7511–7520.

7. Marchetti, C. et al. Cuireann sliocht duille olóige atá saibhrithe ag Oleuropein isteach ar dhinimic cailciam agus cuireann sé isteach ar inmharthanacht cealla mesothelioma malignant. eCAM 2015, 908493.

8. Romero, M. et al. Éifeachtaí frithhypertensive de sliocht duille olóige saibhrithe oleuropein i francaigh hipirtheannas spontáineach. Feidhm Bia 7, 584–593.

9. Halla, JE Mífheidhmiú duánach, seachas mífheidhmiú soithíoch neamhréine. Idirghabháil Hipirtheannas salann-spreagtha. Ciorcal 133, 894–906.

10. Wilson, JL, Miranda, CA & Knepper, MA Vasopressin agus rialáil uisce-porin-2. Clin. Cait. Nephrol. 17, 751–764.